Name: Kısmi safra kanalı ligasyonu fare: kontrollü manken yerelleştirilmiş obstrüktif Histiositoz olgusu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-03-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 38 s
Description: Öğrenin farelerde kısmi safra kanalı ligasyonu ile karaciğer hasarı ve rejenerasyon mekanizmalarını incelemeyi. Bu cerrahi model, aynı hayvanda ligasyonlu ve ligasyonsuz loblar arasında karşılaştırma yaparak hepatoloji araştırmalarına güvenilir veri sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dr. Khan hibe desteğinden NIH/NICHD K12HD052892, Alfa-1 Vakfı, Hillman Vakfı ve Pittsburgh karaciğer Araştırma Merkezi kabul eder. Dr. Michalopoulos hibe desteğinden NIH/NIDDK P01DK096990 eder. Anne Orr mükemmel ve cömert teknik yardım için teşekkür ederiz. Biz de Dr David A. Geller için minnettar nakli/kemirgen mikrocerrahi laboratuvar erişim sağlamak için vardır.

Tüm yordamları kurumsal hayvan bakım ve kullanım komitesi Pittsburgh Üniversitesi etik kurallarına uygun olarak yapılmıştır.
1. temel teknikleri ve ortak yordamlar
<ol><li>Otoklav kullanmadan önce tüm mikrocerrahi ekipman.</li>
	<li>Fare anestezi tarafından öldürülmesi önlemek için onun nefes desen dikkatlice kontrol edin.</li>
	<li>Organları ve bağırsak organlara zarar verme ve kanama neden önlemek mümkün olduğu kadar az dokunmak. Islak pamuk temizleme bezi veya gazlı bez sünger ile kanama Puan tuşuna basın.</li>
	<li>Islak pamuk temizleme bezi organları nazik manipülasyon için kullanın. Islak, dokuma olmayan gazlı bez sünger iki farklı boyutta kullanıldığından, 3,5 × 3,5 cm ve 6.0 × 6,0 cm. daha küçük olan bütün karaciğer geri çekmek için kullanın. Büyük bir küçük ve büyük bağırsak sarmak için kullanın.</li>
</ol>2. presurgical hazırlık
<ol><li>Erkek c57/b6 fareler, 8-12 hafta-in yaş (vücut ağırlığı yaklaşık 20-35 g ne zaman) kısmi safra kanalı ligasyonu için kullanın.</li>
	<li>Fareler anestezi indüksiyon kadar su ve yiyecek ücretsiz erişmesine izin vermek.</li>
</ol>3. kısmi safra kanalını ligasyon işlemi
<ol><li>Fareyi bir indüksiyon Odası 1.5-%2.0 isoflurane ve 1 L/dak oksijen karışımı ile hayvan koyarak anestezi. Hayvan solunum oranı gözlemleyerek dikkatle izleyin. Hayvan solunum hızı saniyede bir nefes olduğunda, fare iyi imzalat. Beri açık bacak çekilmesi refleks daha hızlı kaybolur, hind bacak ayak de para çekme refleks olmaması onaylamak için çimdik. Gözleri Korneal ülser önlemek için bir oftalmik yağlama ajan ile yağlanması. Not Bu ilk doz analjezik, pre-operatively ağrı reseptörlerinin uyarımı önlemek için verilebilir.</li>
	<li>Karın duvarının saç makasları ile tıraş ve cerrahi mikroskop altında cerrahi masanın üzerine fareyi getirin. Tablo için tüm uzuvların bant ile düzeltmek. İsoflurane inhalasyon genel anestezi altında fare korumak için kullanın.<ol>
<li>İsoflurane Buharlaştırıcı ayarlamak ve 2.0-%3.0 isoflurane indüksiyon için kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Steril temizleme bezi kullanarak, karın duvarının dezenfekte ilk 0,3-0,5 ile % 70 etanol tarafından takip mL povidone-iyot topikal, uygulanan. Hayvan steril örtü ile örtülmelidir.</li>
	<li>Bir uzun karın Ensizyon xiphoid üzerinden makas ve Adson forseps kullanarak pubis için yapmak. İsoflurane 0.8-1.0 için azaltmak belgili tanımlık karın kesme yaptıktan sonra % bakım için.</li>
	<li>Karın boşluğu bir mikro-Retraktörü kullanarak açarsınız. Xiphoid sivrisinek Forseps ile basılı tutarak fareyi başkanı doğru geri çek. Sivrisinek forseps yumuşak kil kullanarak yerde düzeltmek.</li>
	<li>1-2 mL ılık (37 ° c) aşılamak sterilize edilmiş fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) karın organları zarar önlemek için karın boşluğu içine. Küçük bağırsak ıslak pamuk temizleme bezi ile tutun ve yavaşça fare başkanı doğru onları geri çek. Küçük bağırsak ve küçük bağırsak (şekil 1A) ağır yaralı önlemek için retroperitoneum arasında bağ kesilmiş.</li>
	<li>Bir ıslak, dokuma olmayan gazlı bez sünger ile küçük ve büyük bağırsak sarın. Onları karın boşluğu Kaudal yanına koyun. Bağırsak içinde steril gazlı bez sarılmış kirlenmesini önlemek için steril bol dökümlü sahada yerleştirilebilir.</li>
	<li>Yavaşça xiphoid doğru bütün Karaciğer karaciğer hilus ve hepato-duodenal bağ (şekil 1B) ortaya çıkarmak için bir küçük ıslak dokuma olmayan gazlı bez sünger kullanarak geri çek.</li>
	<li>Karaciğer hilus anatomisi onaylamak için kontrol edin. Ortak safra kanalını portal ven ventral tarafta yer alır. Ana safra kesiştiği yerde, karaciğer hilus içine drenaj sağ ve sol hepatik safra kanalını Mekanlar onaylayın.</li>
	<li>Sol hepatik safra kanalını da boşalmasına neden olur sol lob tanımlamak ve 10-0 naylon Dikiş dikiş iğne (şekil 2A) kör tarafı kullanarak bir çembere. Portal ven, hepatik arter ve karaciğer yüzey yaralanmasına kaçının.</li>
	<li>10-0 naylon ile sol safra kanalını ligate. (Şekil 2B).</li>
	<li>Küçük ve büyük bağırsak operasyon öncesi aynı konumda ıslak pamuk temizleme bezi kullanarak yerleştirebilirsiniz.</li>
	<li>Hiçbir bağırsak burulma ve intra abdominal kanama onaylamak sonra kas ve 4-0 vicryl ile iki kat deride kapatın. Örgülü dikiş (Vicryl) Cilt kapatılması için kullanılan, ancak monofilament enfeksiyon olasılığını azaltmak için tercih edilir. Not: fasya tarafından sürekli xiphoid pubis için dikiş ve deri xiphoid için apış arasından sürekli dikiş tarafından kapatın.</li>
	<li>Anestezi belgili tanımlık kesme kapattıktan sonra kes.</li>
</ol>4. Postoperatif tedavi ve takibi
<ol><li>Sadece ameliyattan sonra fare dorsal cilt pinch ve Buprenex (0.1 mg/kg) ve sülfadiyazin (100 mg/kg) subkutan, Buprenex enjeksiyon her 12 h için 3 gün ve sülfadiyazin her 24 h 3 gün sırasıyla ardından enjekte11,12 ,13. Not Bu ilk doz analjezik, pre-operatively ağrı reseptörlerinin uyarımı önlemek için verilebilir. Sülfadiyazin ve diğer peri-operatif antibiyotikler yalnızca nakli çalışmalarda kullanılanlar gibi bağışıklık bastırılmış hayvanlar için gereklidir. Not: ameliyat başarıyla gerçekleştirilirse, fare genellikle 30 dk. içinde kurtarır etkinlik farelerin Preoperatif koşulu olarak hemen hemen aynı olacak.</li>
	<li>Fareler tehlike belirtisi için her gün kontrol edin.<ol>
<li>Farelerin karaciğer ve diğer doku örneği tanımlanan zaman noktaları (Yani, 7, 14, 21 gün) sonra pBDL temin etmek için genel anestezi altında servikal çıkığı tarafından kurban.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Higgins, G. M., Anderson, R. <a target="_blank" href="https://www.scienceopen.com/document?vid=57858414-5eff-4c8d-a028-ccb3fc1c44a6">Experimental pathology of the liver - Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal.</a> Arch Pathol. 12, 186-202 (1931).</li>
<li>Cameron, G. R., Oakley, C. L. <a target="_blank" href="http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/path.1700350512/abstract">Ligation of the common bile duct.</a> The Journal of Pathology and Bacteriology. 35 (5), 769-798 (1932).</li>
<li>Kountouras, J., Billing, B. H., Scheuer, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+bile+duct+obstruction%3A+a+new+experimental+model+for+cirrhosis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Exp+Pathol%22%5BJournal%5D)">Prolonged bile duct obstruction: a new experimental model for cirrhosis in the rat.</a> Br J Exp Pathol. 65 (3), 305-311 (1984).</li>
<li>Michalopoulos, G. K., Barua, L., Bowen, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transdifferentiation+of+rat+hepatocytes+into+biliary+cells+after+bile+duct+ligation+and+toxic+biliary+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Transdifferentiation of rat hepatocytes into biliary cells after bile duct ligation and toxic biliary injury.</a> Hepatology. 41 (3), 535-544 (2005).</li>
<li>Dipaola, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+intramural+epithelial+networks+linked+to+peribiliary+glands+that+express+progenitor+cell+markers+and+proliferate+after+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Identification of intramural epithelial networks linked to peribiliary glands that express progenitor cell markers and proliferate after injury in mice.</a> Hepatology. 58 (4), 1486-1496 (2013).</li>
<li>Guyot, C., Combe, C., Desmouliere, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+common+bile+duct+ligation+in+rat%3A+A+relevant+in+vivo+model+to+study+the+role+of+mechanical+stress+on+cell+and+matrix+behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22Histochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The common bile duct ligation in rat: A relevant in vivo model to study the role of mechanical stress on cell and matrix behaviour.</a> Histochem Cell Biol. 126 (4), 517-523 (2006).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+bile+duct+ligation+on+bile+acid+composition+in+mouse+serum+and+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Effect of bile duct ligation on bile acid composition in mouse serum and liver.</a> Liver Int. 32 (1), 58-69 (2012).</li>
<li>Tag, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+duct+ligation+in+mice%3A+induction+of+inflammatory+liver+injury+and+fibrosis+by+obstructive+cholestasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Bile duct ligation in mice: induction of inflammatory liver injury and fibrosis by obstructive cholestasis.</a> J Vis Exp. (96), e52438(2015).</li>
<li>Osawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systemic+mediators+induce+fibrogenic+effects+in+normal+liver+after+partial+bile+duct+ligation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Systemic mediators induce fibrogenic effects in normal liver after partial bile duct ligation.</a> Liver Int. 26 (9), 1138-1147 (2006).</li>
<li>Khan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bile+Duct+Ligation+Induces+ATZ+Globule+Clearance+in+a+Mouse+Model+of+alpha-1+Antitrypsin+Deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Gene+Expr%22%5BJournal%5D)">Bile Duct Ligation Induces ATZ Globule Clearance in a Mouse Model of alpha-1 Antitrypsin Deficiency.</a> Gene Expr. 17 (2), 115-127 (2017).</li>
<li>Birkhead, H. A., Briggs, G. B., Saunders, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicology+of+cefazolin+in+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Infect+Dis%22%5BJournal%5D)">Toxicology of cefazolin in animals.</a> J Infect Dis. 128, 378(1973).</li>
<li>Kunst, M. W., Mattie, H., van Furth, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibacterial+efficacy+of+cefazolin+and+cephradine+in+neutropenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection%22%5BJournal%5D)">Antibacterial efficacy of cefazolin and cephradine in neutropenic mice.</a> Infection. 7 (1), 30-34 (1979).</li>
<li>Traul, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+studies+of+post-surgical+buprenorphine+therapy+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">Safety studies of post-surgical buprenorphine therapy for mice.</a> Lab Anim. 49 (2), 100-110 (2015).</li>
<li>Carlson, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accumulation+of+PiZ+alpha+1-antitrypsin+causes+liver+damage+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Accumulation of PiZ alpha 1-antitrypsin causes liver damage in transgenic mice.</a> J Clin Invest. 83 (4), 1183-1190 (1989).</li>
<li>Sifers, R. N., Finegold, M. J., Woo, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alpha-1-antitrypsin+deficiency%3A+accumulation+or+degradation+of+mutant+variants+within+the+hepatic+endoplasmic+reticulum%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Alpha-1-antitrypsin deficiency: accumulation or degradation of mutant variants within the hepatic endoplasmic reticulum.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 1 (5), 341-345 (1989).</li>
<li>Rudnick, D. A., Shikapwashya, O., Blomenkamp, K., Teckman, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indomethacin+increases+liver+damage+in+a+murine+model+of+liver+injury+from+alpha-1-antitrypsin+deficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Indomethacin increases liver damage in a murine model of liver injury from alpha-1-antitrypsin deficiency.</a> Hepatology. 44 (4), 976-982 (2006).</li>
<li>Heinrich, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+bile+duct+ligation+in+mice%3A+a+novel+model+of+acute+cholestasis%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Partial bile duct ligation in mice: a novel model of acute cholestasis.</a> Surgery. 149 (3), 445-451 (2011).</li>
<li>Glaser, S. S., Alpini, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+cholehepatic+shunt+as+a+potential+therapy+for+primary+sclerosing+cholangitis%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Activation of the cholehepatic shunt as a potential therapy for primary sclerosing cholangitis.</a> Hepatology. 49 (6), 1795-1797 (2009).</li>
<li>Gurpinar, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+sulindac+derivative+inhibits+lung+adenocarcinoma+cell+growth+through+suppression+of+Akt%2FmTOR+signaling+and+induction+of+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cancer+Ther%22%5BJournal%5D)">A novel sulindac derivative inhibits lung adenocarcinoma cell growth through suppression of Akt/mTOR signaling and induction of autophagy.</a> Mol Cancer Ther. 12 (5), 663-674 (2013).</li>
<li>Alpini, G. G., Francis, H., Marzioni, M., Venter, J., Phinizy, J., LeSage, G. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK5974/">Madame Curie Bioscience Database</a>. , Landes Bioscience. Austin, TX. (2013).</li>
<li>Kirkland, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+surgical+model+of+biliary+inflammation+and+obstructive+jaundice+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Reversible surgical model of biliary inflammation and obstructive jaundice in mice.</a> J Surg Res. 164 (2), 221-227 (2010).</li>
<li>Delhove, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+in+vivo+bioimaging+of+hepatocyte+transcription+factor+activity+following+cholestatic+liver+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Longitudinal in vivo bioimaging of hepatocyte transcription factor activity following cholestatic liver injury in mice.</a> Sci Rep. 7, 41874(2017).</li>
<li>Li, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homing+of+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+mediated+by+sphingosine+1-phosphate+contributes+to+liver+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Hepatol%22%5BJournal%5D)">Homing of bone marrow mesenchymal stem cells mediated by sphingosine 1-phosphate contributes to liver fibrosis.</a> J Hepatol. 50 (6), 1174-1183 (2009).</li>
<li>Xu, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+released+from+cholestatic+rat+livers+possibly+involved+in+inducing+bone+marrow+hepatic+stem+cell+priming%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Dev%22%5BJournal%5D)">Factors released from cholestatic rat livers possibly involved in inducing bone marrow hepatic stem cell priming.</a> Stem Cells Dev. 17 (1), 143-155 (2008).</li>
<li>Sharma, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propitious+role+of+bone+marrow-derived+mononuclear+cells+in+an+experimental+bile+duct+ligation+model%3A+potential+clinical+implications+in+obstructive+cholangiopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Surg+Int%22%5BJournal%5D)">Propitious role of bone marrow-derived mononuclear cells in an experimental bile duct ligation model: potential clinical implications in obstructive cholangiopathy.</a> Pediatr Surg Int. 29 (6), 623-632 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar hiçbir açıklamalar var.

CBDL obstrüktif Histiositoz için en yaygın deneysel teknik olmakla birlikte, kemirgen birden çok sorunlar mevcut. Bir bitiş noktası elde etmek için gereken ameliyat sonrası gün sayısına bağlı olarak, hayvanların önemli morbidite ve mortalite zaman ilerledikçe yaşayabilirsiniz. Doku hasarı ve safra nekroz derecesini anormal karaciğer parankimi ve fonksiyon için taban çizgisi göstermek bazı karaciğer hastalığı, transgenik fare modelleri ile çalışırken daha da şiddetlenir. CBDL için karşılaştırıldığında, pBDL olarak bildiri...

Akut karaciğer hasarı ve tamir, kısmi hepatectomy veya ortak safra kanalını ligasyonu (cBDL), gibi cerrahi modelleri Rodents yıllardır karaciğer rejenerasyonu ve pathobiology1,2eğitim için kullanılmıştır. CBDL içinde (da boşalmasına neden olur tüm safra karaciğerde üretilen) ortak safra kanalını bakmaksızın siroz3nihai ilerleme ile ameliyatı takiben ilk 2-3 hafta içinde obstrüktif Histiositoz, inflamasyon ve fibrozis ile sonuçlanan. Ayrıca, safra kanalını yayılması, transdifferentiation ve indüksiyon ikamet karaciğer progenitör hücre cBDL4,5özellikleridir. Her ne kadar cBDL iyi vahşi tipi fareler ve bu suşlar normal karaciğerleri6,7,8ile tekrarlanabilir sonuçlar ile karakterize olan belirli obstrüktif cholangiopathy, mekanizmalarının elucidates yordam teknik olarak karaciğer hastalıkları, Yüksek morbidite ve mortalite zaman içinde safra tıkanıklığı nedeniyle beklenenden daha fazla hayvan gerektiren bazı transgenik fare modellerinde rağbet görebilir. Bu teknik aynı zamanda aksi değil tahammül stres uzun süreli saat ders deneyler cBDL takip altında yatan ile transgenik farelerde karaciğer hastalığı, eğitim için faydalıdır.
pBDL bazı bu sorunları sorunu gidermek üzere makul bir alternatif sağlar. Farelerde vahşi-tip çalışmalarda ilk pBDL yerel olarak oyunculuk ve sistemik inflamasyon9arabulucu ayırt etmek amaçlanmıştır. PBDL, sağ ve sol hepatik safra kanalları ortak safra kanalını yukarıda ana safra izdiham dikkatle hilus görüntülenir ve yalnızca sol hepatik safra kanalını yerelleştirilmiş obstrüktif Histiositoz oluşturmak için bakmaksızın. pBDL cBDL için birçok avantaj sunar. PBDL, unligated sağ LOB aynı sistemik etkileri, beslenme durumu veya faktörler dolaşan gibi tabi ve birleştirilmiş sol lob için aynı şekilde eşleşen bir iç kontrol olarak hizmet vermektedir. Sistemik pro-inflamatuar aracılar mevcut olmasına rağmen Osawa vd. daha az fibrozis ve nekroz unligated loblar içinde gözlenen ancak inflamatuar hücreler ve dönüştürme büyüme faktörü β ifade ve birleştirilmiş LOB9arttı.
Daha yakın zamanlarda, pBDL tutulan safra10karaciğer parenkima etkilerini incelemek için yeniden. Aynı hayvan iç kontrol (unligated "sham") ve deneysel grupları için kullanarak, pBDL etkin bir şekilde sırayla daha düşük maliyetli olan deney gerekli hayvan sayısı halves. Böylece ders deneme ideal zaman (≥2 hafta) ve birleştirilmiş lobunda elde edilebilir fareler pBDL çok daha iyi, etkilerini tolere. En önemlisi, pBDL doğrudan intrahepatic etkileri obstrüktif Histiositoz olgusu ayırt edebilir ve safra bileşenleri ve birleştirilmiş LOB unligated denetim LOB karşılaştırıldığında, korunur. Genel olarak, pBDL LOB özel efektler karaciğerde yerelleştirilmiş Histiositoz olgusu çalışmaya çekici bir yöntemdir.

<table><tbody><tr><td>Mikroskop-Leica Vahşi M650, 6&ndash; 40 kez; büyütme</td><td>Leica Microsystems</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Tec 3 izofluran huni doldurma buharlaştırıcı</td><td>Genel Anestezik Hizmetler</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Stevens Tenotomi Makası</td><td>Doğru Cerrahi ve Scientific Instruments Corporation</td><td>ASSI.9193</td><td></td></tr><tr><td>Adson Forseps</td><td>Güzel bilim araçları</td><td>11006-12</td><td></td></tr><tr><td>Sivrisinek klasik hassas hemostatik forseps</td><td>Codman</td><td>30-4472</td><td></td></tr><tr><td>Mikro ekartör</td><td>Murdock; Roboz Cerrahi Alet</td><td>RS-6550</td><td></td></tr><tr><td>Nonwoven gazlı bez süngerler</td><td>Fisherband</td><td>870-PC-DBL</td><td></td></tr><tr><td>Püriten 6 " Ahşap Saplı Küçük Pamuklu Çubuk</td><td>Püriten Tıbbi Ürünler Şirketi</td><td>868-WCS</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS Forseps - Standart Uçlar/Düz/Inox/13.5cm</td><td>Güzel bilim araçları</td><td>11203-23</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS Forseps - Standart Uçlar / Açılı 45 derece / Inox / 13.5cm</td><td>Güzel bilim araçları</td><td>11203-25</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Yaylı Makas - 3mm Kesme Kenarı</td><td>İnce bilim aletleri</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Mikroiğne tutucu</td><td>Aesculap Cerrahi Aletler</td><td>FD231R</td><td></td></tr><tr><td>Mikro AROSuture, steril 10-0 naylon sütür, 70 & m, TAP noktaları</td><td>AROSurgical Instruments Corporation</td><td>T4A10N07</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Vicryl</td><td>Ethicon</td><td>J662H</td><td></td></tr><tr><td>5 ml Şırınga</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>Falcon doku kültürü kabı, 60 > 15 mm</td><td>Corning</td><td>353002</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, Amerika Birleşik Devletleri İnhalasyon için Farmakope (USP) sıvısı, 250 ml</td><td>Piramal Sağlık NDC</td><td>66794-017-25</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex enjekte edilebilir (buprenorfin hidroklorür)</td> <td>Reckitt Benckiser Pharmaceuticals</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>Enjeksiyon için Sefazolin, USP</td><td>APP Pharmaceuticals</td><td>NDC 63323-238-61</td><td></td></tr><tr><td>PVP ovma çözeltisi (povidon ve ndash; İyot %7,5)</td><td>Medline</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td></td></tr><tr><td>%70 Etanol</td><td>Decon Labs</td><td>2716</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum veya Magnezyum İçermeyen Fosfat Tamponlu Salin</td><td>LONZA</td><td>17-516F</td><td></td></tr><tr><td>Sirius Kırmızı</td><td>Sigma</td><td>365548</td><td></td></tr><tr><td>Hematolksilin</td><td>Fisher (Richard-Allan Scientific)</td><td>22-050-111 (7211)</td><td></td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Anatech (Fisher)</td><td>832 (NC9686037)</td><td></td></tr><tr><td>Formalin</td><td>Fisher</td><td>SF100-20</td><td></td></tr></tbody></table>

kısmi safra kanalı ligasyonu fare: kontrollü manken yerelleştirilmiş obstrüktif histiositoz olgusu

Partial Bile Duct Ligation in the Mouse: A Controlled Model of Localized Obstructive Cholestasis

Kemirgen, obstrüktif Histiositoz ve safra kanalını yayılması için kurulan bir cerrahi yüntem tam safra kanalı ligasyonu (cBDL) ortak safra kanalını var. Ancak, uzun süreli deneyler artan morbidite ve mortalite için yol açabilir. Temel alınan karaciğer hastalığı olan seçin fare suşları içinde anlamlı karşılaştırmalar bile tek bir LOB hayvan kayıp ve giderleri azaltabilir karaciğer ligasyonu ile yapılabilir. Burada, biz kısmi safra kanalı ligasyonu (pBDL) içinde sadece sol hepatik safra kanalını bakmaksızın, Mouse sol lob ama kalan loblar safra tıkanıklığı neden açıklar. Unligated LOB ve birleştirilmiş loblar için dahili bir denetim ne zaman aynı hayvan aynı koşullarda tabi görür çünkü dikkatli mikrocerrahi teknik ile pBDL deneyler düşük maliyetli, olabilir. CBDL farklı olarak, bir ayrı sahte işletilen kontrol grubu gerekli değildir. pBDL doğrudan karşı Histiositoz ve diğer muhafaza safra bileşenlerinin sistemik etkileri lokalize karşılaştırmak için son derece yararlıdır. pBDL da ilaçlar ve hücre göç ile ilgili mekanizmalar araştırmak için yeni bir yöntem olarak güvenilemez.

Bu tipik deneme için pBDL (A1AT) Alfa-1 antitripsin eksikliği bulunan insan karaciğer hastalığı özetlemek onaylatılacak PiZ transgenik fareler içinde gerçekleştirildi. PiZ fare mutant insan A1AT gen ve organizatörü, intron ve akış yukarı ve aşağı akım bölgeler14kanat ~ 2 kilobases ile birlikte Kodlayıcı bölgeler içeren birden çok genomik DNA parçaları oluşan bir transgene overexpresses, 15. Normal A1AT karaciğerde üretilen bir sa...

Burada, karaciğer hasarı ve rejenerasyon Rodents cerrahi bir model olarak kısmi safra kanalı ligasyonu mevcut.

Kısmi safra kanalı ligasyonu fare: kontrollü manken yerelleştirilmiş obstrüktif Histiositoz olgusu

In rodents, complete bile duct ligation (cBDL) of the common bile duct is an established surgical technique for studying obstructive cholestasis and bile ...

Bu cerrahi müdahalenin genel amacı, lokalize obstrüktif kolestazın etkilerini gözlemlemektir. Bu yöntem, karaciğer rejenerasyon mekanizmalarının nasıl tanımlanacağı ile ilgili hepatoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, aynı hayvan içinde bağlanmış deney lobu ile bağlanmamış kontrol lobu arasında anlamlı karşılaştırmalar yapılabilmesidir.Bugünkü prosedürü gösteren, nakil cerrahisi laboratuvarından bir doktora sonrası olan Dr.Toshimasa Nakao olacak. Anestezi uygulanmış sekiz ila 12 haftalık bir C57 siyah 6 farede ayak parmağını çimdiklemeye yanıt verilmediğini doğruladıktan sonra, karın bölgesini saç kesme makinesiyle tıraş edin ve hayvanı cerrahi mikroskop altına yerleştirin. Uzuvları masaya sabitleyin ve cerrahi alanı 0,3 ila 0,5 mililitre povidon-iyot ve% 70 etanol ile sırayla dezenfekte etmek için steril bezler kullanın.Ardından, ksifoidden pubise orta hat kesisi yapın ve karın boşluğunu açmak için bir mikro ekartör kullanın. Ksifoidi farenin kafasına doğru geri çekmek için sivrisinek forseps kullanın ve forseps ve ksifoidi bu pozisyonda tutmak için yumuşak kil kullanın. Karın boşluğunu bir ila iki mililitre sterilize edilmiş 37 santigrat derece PBS ile nemlendirin ve ince bağırsağı farenin kafasına doğru nazikçe hareket ettirmek için ıslak pamuklu çubuklar kullanın.Dokuya zarar vermemek için ince bağırsak ile retroperiton arasındaki bağları kesin ve ince ve kalın bağırsakları ıslak, dokunmamış bir gazlı bezle sarın. Bağırsak dokusunu karın boşluğunun kaudal tarafına yerleştirin ve hepatik hilum ve hepatoduodenal ligamenti ortaya çıkarmak için tüm karaciğeri ksifoid'e doğru nazikçe geri çekmek için küçük, ıslak, dokunmamış bir gazlı bez sünger kullanın. Portal venin ventral tarafındaki ortak safra kanalı olan hepatik hilumu ve hepatik hilustaki ana safra birleştiği yere drene olan sol ve sağ hepatik safra kanallarını bulun.10-0 naylon sütür ve bir dikiş iğnesinin künt tarafını kullanarak, sol hepatik safra kanalı lobunu bağlayın. Dikiş yerleştirildiğinde, ince ve kalın bağırsakları anatomik konumlarına geri getirin ve bağırsak torsiyonu veya karın içi kanama olmadığını doğrulayın. Daha sonra sivrisinek forsepslerini çıkarın, kas ve cilt katmanlarını sürekli 4-0 Vicryl sütürlerle ayrı ayrı kapatın ve fareyi tam iyileşme olana kadar izlemeli bir ısı lambasının altına yerleştirin.Çözünmeyen karaciğer protein agregasyonu için parsiyel safra kanalı bağlanmış fareler ve transgenik safra kanalı bağlı fareler arasındaki serum karaciğer biyokimyalarının karşılaştırılması, kısmi safra kanalı bağlı farelerde minimal karaciğer hasarı veya kolestaz ve tam safra kanalı bağlı transgenik hayvanlarda ciddi yaralanma ve enzim birikimini ortaya koymaktadır. Kısmi safra kanalı ligasyonuna maruz kalan fareler zamanla loba özgü obstrüktif kolestaz geliştirdiğinden, bağlanmış lob, normal koyu kırmızımsı kahverengi rengini koruyan bağlanmamış loblara kıyasla ameliyattan 14 gün sonra biraz daha soluk renkte görünür. Bağlanmış lob ayrıca, ligasyona bağlı lokalize kolestaza yanıt olarak bağlanmamış loblara kıyasla safra kanalı proliferasyonunda ve fibrozda bir artış gösterir.Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde uygulanırsa 10 ila 12 dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedürü takiben, soy izleme gibi diğer yöntemler, karaciğer hasarı ve rejenerasyon bölgelerine kök hücre barındırma ile ilgili ek soruları yanıtlamak için kullanılabilir. Bu videoyu izledikten sonra, lokal ve sistemik etkileri belirlemek için kısmi safra kanalı ligasyonu kullanarak nasıl anlamlı karşılaştırmalar yapacağınızı iyi anlamış olmalısınız.

partial-bile-duct-ligation-mouse-controlled-model-localized

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kolestaz hem cerrahlar ve gastroenterolog tarafından yaygın olarak karşılaşılan bir klinik tablodur. Sıçanlarda küçük boyutu ve benzersiz hepatopancreatobiliary anatomi görünümünde bir reversibl kolestatik sıçan modeli oluşturulması zor olabilir. Bu video makale reversibl kolestatik modeli oluşturulması göstermektedir.

Tersinir kolestatik Rat Modeli Yaratılış

Bu videoda, sodyum taurokolatın pankreas infüzyonu yoluyla akut biliyer pankreatitli bir fare modelinin oluşturulması prosedürü açıklanmaktadır. Bu model, pankreasta sodyum taurokolatın neden olduğu patofizyolojik değişikliklerin incelenmesine yardımcı olur.

Akut Biliyer Pankreatit Modeli: Pankreas Kanalı İnfüzyonu Yoluyla Akut Biliyer Pankreatit Fare Modeli Oluşturmak İçin Bir Yöntem

Safra akışının bozulması, karakteristik zamana bağlı morfolojik değişiklikler dizisi ile ciddi inflamatuar kolestatik karaciğer hasarına neden olur. Burada, farelerde ortak safra kanalının cerrahi ligasyonu için 21 ila 28 gün sonra güçlü bir fibrotik yanıt indüklemeye izin veren bir protokol sunuyoruz.

Farelerde Safra Kanalı ligasyonu: Obstrüktif Kolestaz tarafından İnflamatuar Karaciğer Hasarı ve Fibrozis indüksiyonu

İnce bağırsak bağlı safra asidi emiliminden ve hepatik safra asidi sentez inhibisyonu geribildirim sistemik homeostazı ve sağlık için önemli. Bu çalışmada, ileal rezeksiyon ileectomy kaynaklı safra malabsorbsiyonuna, overaccumulation ve toksisite fare bağırsak değerlendirmek için bir fare modeli açıklar.

Fare bağırsak Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation

Fare karaciğerinde safra kanalı yoğunluğunun doğru ölçülmesini yapmak için oldukça basit ve hassas bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, genetik ve çevresel değiştiricilerin etkilerini ve biliyer hastalıklarının fare modellerinde potansiyel tedavilerin etkinliğini belirlemede yardımcı olabilir.

Fare karaciğerinde safra kanalı yoğunluğu belirlenmesi

Kronik pankreatit (CP), genellikle inatçı karın ağrısı ile ilişkili olan pankreasın iltihabı ve fibrozisi ile karakterize bir hastalıktır. Bu makalede, 2,4,6 -trinitrobenzen sülfiyonik asit (TNBS) ile safra kanalı infüzyonu yoluyla CP'nin fare modelini oluşturma tekniğinin iyileştirilmesine odaklanmaktadır.

Safra Kanalı TNBS infüzyonu ile Kronik Pankreatit için Bir Fare Modeli

Murin neonatal safra kanalı bozukluklarının gözlenmesi için sağlam bir safra kanalı ve etkili bir hazırlık gereklidir. Bu nedenle, murin yenidoğanlarda tüm ekstrahepatik safra kanalı sisteminin izole edilmesi için safra kanalının bütünlüğünü korurken başarılı bir şekilde yeni bir yaklaşım geliştirilmiştir.

Dokuz Günlük Fare Yenidoğanlarında Ekstrahepatik Safra Kanalı ve Safra Kesesi Diseksiyonu

Biliyer atrezinin (BA) virüs kaynaklı karaciğer fibrozis mekanik çalışması için uygun bir hayvan modeli ve gelecekteki BA tedavileri için bir platform sağlayan kronik karaciğer fibrozisinin fare modelini oluşturduk.

Biliyer atrezi çalışması için kronik karaciğer fibrozisinin bir fare modeli

Aşamalı Hepatektomi (ALPPS) için Karaciğer Bölünmesi ve Portal Ven Ligasyonunun İlişkilendirilmesinin, birinci aşama ameliyattan birkaç hafta sonra kayda değer karaciğer rejenerasyonu ile sonuçlandığı gösterilmiştir. ALPPS uygulanan hayvan modelleri, potansiyel karaciğer rejenerasyon yeteneğini araştırmak ve olumlu klinik sonuçlar elde etmek için geliştirilmiştir.

Mikroskopi Destekli Aşamalı Hepatektomi Prosedürü için İlişkilendirici Karaciğer Bölünmesi ve Portal Ven Ligasyonunun Bir Fare Modeli

Mikroakışkan Probe: Çalışma ve Yerelleştirilmiş Yüzey İşleme için kullanın

Öğrenin farelerde kısmi safra kanalı ligasyonu ile karaciğer hasarı ve rejenerasyon mekanizmalarını incelemeyi. Bu cerrahi model, aynı hayvanda ligasyonlu ve ligasyonsuz loblar arasında karşılaştırma yaparak hepatoloji araştırmalarına güvenilir veri sağlar.

Kısmi safra kanalı ligasyonu fare: kontrollü manken yerelleştirilmiş obstrüktif Histiositoz olgusu

Daha fazla video keşfet