Demir içeriği tesislerinde ölçme kolorimetrik yöntemi

Sadece tıbbi olarak, biyoloji alanındaki önemli bir soruyu cevaplamaya yardımcı olabilir. Biyoloji çekirdek örneklerinde demiri nasıl kolayca ölçebileceğimiz gibi. Bu tekniğin ana girişimi, üretilmesinin kolay ve çok hassas bir kolorimetrik teknik olmasıdır.

Bu tekniği tercih ederken demir bulaşmasından kaçınmalısınız. Bu yöntemin görsel gösterimi, farklı adımlarını anlamanıza yardımcı olacaktır. Bu işleme başlamak için, beş santimetreye beş santimetrelik kapları standart tencere ortamıyla doldurarak hazırlayın.

Her tencereye bir tütün tohumu ekin. Bitkileri, 23 santigrat derecelik uzun gün koşullarında sabit bir sıcaklıkta olan bir büyüme odasına aktarın. Saksıdan su akana kadar musluk suyu ile sulama yapın ve bitkileri yaklaşık 50 gün boyunca büyütün.

Bu süreden sonra, sulamada deney için uygun konsantrasyonlarda demir işlemlerine başlayın. Bitkileri altı ila sekiz gün boyunca her iki günde bir bu solüsyonla sulayın. Ardından, herhangi bir metal ekipman kullanmamaya dikkat ederek yaprakları gövdeden elinizle ayırın.

Çift damıtılmış suyla doldurulmuş bir sprey şişesi kullanarak her yaprağı temizleyin. Yaprakları bir kağıt havlu üzerinde kurulayın ve ardından bir kağıt torbaya aktarın. Yaprak dolgulu poşetleri iki ila üç gün boyunca 80 santigrat derece sabit bir sıcaklığa ayarlanmış bir fırına koyun.

Harcı ve havaneli %4'lük bir hidroklorik asit çözeltisi ile iki kez temizleyin. Ve kuruması için bir filtre kağıdı kullanın. Havan ve havaneli kullanarak kuru yaprakları toz haline getirin.

Daha sonra tozu steril 15 mililitrelik plastik tüplere aktarın. İlk olarak, kapağı olmayan yeni, kapalı 20 mililitrelik bir parıldama şişesini tartın. Ya ağırlığı not edin ya da tartıya darasını alın.

Sonra ezilmiş yaprakları ekleyin. Numuneyi şişede tartın ve ağırlığı not edin. Şişeyi kapatmak için taş yünü kullanın.

Kontrol olarak kullanmak için numune eklemeden üç ek şişeyi tartın ve her bir ağırlığı not edin. Ardından, numuneyi ve kontrol şişelerini bir fırına aktarın. Yaprakları metin protokolünde belirtildiği gibi yakın.

Bundan sonra, numuneleri yaklaşık 100 santigrat dereceye kadar soğumaya bırakın. Ağır eldivenler ve cımbız kullanarak, şişeyi dışarıda tuttuğunuzdan emin olarak numuneleri fırından çıkarın. Şişeleri düz bir yüzeye yerleştirin.

Taş yününü çıkarın ve şişeleri orijinal kapaklarıyla kapatın. Ardından, üç kontrol şişesini tartın ve ortalama kilo alımlarını hesaplayın. Ağırlık kazancı kül ağırlığının %1'ine eşit veya üzerindeyse, bu değeri ölçüm hatasının tahmini olarak kullanın.

15 mililitrelik bir plastik tüp tartın. Ya ağırlığı kaydedin ya da tartıya darasını alın. Sonra külleri tüpe aktarın.

Kül ağırlığı olan bu değeri kaydedin. Daha sonra, küllere bir molar hidroklorik asit çözeltisinden beş mililitre ekleyin. Külleri 22 mikrometrelik bir filtreden süzün.

Daha sonra, aynı filtreden bir molar hidroklorik asit çözeltisinden beş mililitre daha ekleyin ve bu da 10 mililitrelik bir nihai numune hacmine yol açar. Bundan sonra, atomik spektroskopi ile ölçüm için her numuneden dört mililitre çıkarın. Ve metin protokolünde belirtildiği gibi kül gramı başına demir konsantrasyonunu belirleyin.

Başlamak için, Prusya mavisi çözeltisini hazırlamak için 100 mililitre çift damıtılmış suya dört gram potasyum ferrosiyanür ekleyin. Karıştırmak için girdap yapın ve kullanıma hazır olana kadar 4 santigrat derecede saklayın. Kullanıma hazır olduğunda, boş çözelti olarak işlev görmek için 50 mililitre Prusya mavisi çözeltisini 50 mililitre bir molar hidroklorik asit ile karıştırın.

Ardından, daha önce elde edilmiş bir numunenin 0,5 mililitresini 0,5 mililitre Prusya mavisi çözeltisiyle karıştırmak için bir pipet kullanın. Bu karışımı en az bir dakika, ancak beş dakikadan az bir süre dinlendirin. Bu karışımı bir küvete aktarın ve 715 nanometredeki optik yoğunluğu ölçmek için bir spektrofotometre kullanın.

Ardından, kül gramı başına optik yoğunluğu belirleyin ve metin protokolünde belirtildiği gibi demir konsantrasyonları arasındaki doğrusal regresyonu çizin. 21 tütün yaprağı örneğinden elde edilen temsili sonuçlar, sulama suyundaki demir konsantrasyonunun yapraktaki demir içeriğini büyük ölçüde etkilediğini göstermektedir. 21 temsili numunenin tümünün spektrumları daha sonra Prusya mavisi yöntemiyle test edilir.

Burada görüldüğü gibi, 715 nanometredeki absorbans, farklı konsantrasyonlarda demir iki ve demir üç içeren çözeltileri ölçerken en uygun dalga boyudur. Atomik spektroskopi ile elde edilen demir konsantrasyonu değerlerinin Prusya mavisi yöntemiyle elde edilen absorbans değerlerine karşı çizilmesiyle elde edilen doğrusal bir regresyon eğrisi, aynı bitki türünden yeni numunelerin analiz edilmesini sağlar. HCL ile çalışmanın son derece tehlikeli olabileceğini unutmayın.

Ve bu işlem yapılırken her zaman göz koruması gibi önlemler alınmalıdır. Doğrusal regresyonda, sonuçların gerçekçi bir aralıkta olduğunu doğrulamak önemlidir. Geliştirildikten sonra, bu teknik biyoloji araştırmacısının gıda üretimi veya biyoremediasyon için ek bitkileri keşfetmesine yardımcı olabilir.