Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Bu teknik, solunum araştırması, güvenlik farmakolojisi ve ilaç geliştirme dahil olmak üzere çeşitli alanlardaki kilit soruların ele alınmasına yardımcı olacaktır. Bu tekniğin temel avantajı, bilinçli bir hayvanda hem başlangıçta hem de zorluklar sırasında solunum fonksiyonunu değerlendirmek için güvenilebilecek okumalar sağlamasıdır. Teknik, deney protokolü hayvanların normal fizyolojik durumundan çok az sapma gerektirdiğinde özellikle yararlıdır.

Hayvan kısıtlanır, ancak aksi takdirde normal nefes alır, bu da hava yolu tıkanıklığına ek olarak solunum paterninin değerlendirilmesine izin verir. Deneme gününde, bir deneme oturumu başlatın ve uygun yapılandırma dosyasını yükleyin. Deneyi ve hayvanın bilgilerini girin.

Bittiğinde, pencerenin altındaki çalıştır düğmesine tıklayın. Sistemin kalibrasyonu ile devam edin. Her siteyi ve giriş sinyalini ayrı ayrı kalibre edin.

Bir boru parçası aracılığıyla kafa odasına bağlı önyargı akış jeneratörünü açın ve akış hızını ayarlayın. Baş bölmesinin üst açıklığını bir kapakla kapatın. Göğüs odasının arka panelini ayırın.

Ardından, hermetik bir sızdırmazlık oluşturmak için kalibrasyon aletini kafa ile gövde haznesi arasındaki lastik açıklığın içine sıkıca yerleştirin. Göğüs odasının arka panelini kapatın ve yeniden takın. Yazılım araç çubuğu menüsünden Ayarlama'ya ve ardından Kalibre Et'e gidin.

Torasik akış sinyali için kalibrasyon iletişim kutusunu başlatmak üzere Birinci Giriş'e gidin ve kalibre et'i seçin. Kalibrasyon iletişim kutusu penceresinde listelenen parametrelerin uygun ayarları görüntülediğini doğrulayın. Uygulanan fiziksel gerilme düşük değeri sıfır olmalıdır.

Uygulanan fiziksel stres yüksek değeri saniyede eksi 20 mililitre olmalı ve numuneler entegre olacak şekilde ayarlanmalıdır. Bittiğinde, örnekler penceresinde düşük'e tıklayın. Üretilen sinyalin ekran penceresi boyunca sabit olduğunu doğrulayın ve ardından kapat'a tıklayın.

Bir boru parçasındaki plastik bir konektör kullanarak göğüs odasının yan portundan 20 mililitrelik bir şırınga bağlayın. Numuneler penceresinde yüksek'i seçin ve mümkün olduğunca sabit bir akış hızında iki saniyelik bir süre boyunca hazneye hemen 20 mililitre hava enjekte edin. Oluşturulan sinyalin tamamen ekran penceresinin içinde göründüğünü doğrulayın.

Sinyalin sıfır çizgisi etrafında ortalanmış ve simetrik olup olmadığını doğrulamak için ok simgesini kullanın. Ardından kapat'a tıklayın. Örnekler penceresinde AC ofsetini kaldır'a tıklayarak sıfırdan herhangi bir ofseti kaldırın.

İki numaralı girişi seçerek baş odasını göğüs odasına benzer şekilde kalibre edin. Bu kez, yüksek değeri eksi 20 yerine saniyede artı 20 mililitre olarak ayarlayın. Konut odasından uzakta sessiz bir alanda çalışın.

Deney başlamadan önce hayvanları kısıtlayıcıya ve prosedürlere alıştırın. İnvaziv olmadığı ve anestezi gerektirmediği için, hayvanın rahat, iyi adapte olmuş ve sakin olduğu koşullarda çalışmak, odalar arasındaki saç sızıntılarının eğilimini sınırlayacak ve böylece verilerin kalitesini en üst düzeye çıkaracaktır. Hayvanları tartın.

Hayvan için uygun kısıtlayıcıyı seçin. Hayvanı arka açıklıktan ilerleyerek tutucunun içine yerleştirin. Cihazı dikey olarak tutmak yardımcı olabilir.

Hayvan yerine oturduğunda, arka pistonu yerleştirin ve aşırı kuvvet uygulamadan yavaşça yerine kilitleyin. Hayvanın normal nefes alıp almadığını görsel olarak kontrol edin. Gerekirse, kilitleme mekanizmasını hareket ettirerek konumunu ayarlayın.

Hayvanın burun burunlarının, burnu kısıtlayıcının iç duvarlarına dayanacak şekilde burun konisinin dışına çıkıntı yaptığından emin olun. Göğüs odasının arka panelini ayırın. Hayvanı içeren tutucuyu göğüs odasındaki lastik açıklıktan geçirin ve odayı kapatın.

Baş haznesini takın, önyargılı bir akış sağlayın ve hayvanın en az beş dakika rahatlamasına izin verin. Hayvan sakinleştikten sonra, ilk adımı seçerek komut protokolünü başlatın ve ardından Yürüt'e tıklayın. Bilgisayar ekranında hayvanın solunum sinyallerinin düzenli ve düzgün olup olmadığını kontrol edin.

Yazılım, hesaplanan parametreleri otomatik olarak nefes bazında görüntüler. Hayvanın parametrelerinin stabil olduğunu doğrulayın. Solunum düzenini temel koşullar altında 10 dakikaya kadar kaydedin.

Bir test maddesinin aerosol ile uygulanmasını içeren protokoller için, önce nebulizatörü gerektiği gibi zamanında ve görev döngüsünde ayarlayın. Bir araç meydan okuması gerçekleştirin ve yanıtı kaydedin. Gerekirse, nebülizördeki konsantrasyonu değiştirerek ve adımları yükselterek hayvanı test maddesinin artan konsantrasyonlarına maruz bırakın.

Her uygulamadan sonra yanıtı kaydedin. Bu örnekte, mililitre metakolin başına 15 miligram test edilmiştir. Spesifik hava yolu direncindeki tepe artışı bir an sonra kaydedilir ve daha sonra yavaş yavaş başlangıç değerine döndüğü görülür.

Deney oturumunun sonunda, hayvanı odasına ve barınak kafesine geri koyun. Seanslar arasında pletismograf odalarını temizleyin ve nebulizatörü suyla durulayın. Metin protokolünde açıklandığı gibi veri analizine devam edin.

Burada gösterilen, iki grup BALB/c faresinde art arda üç gün boyunca başlangıçta tekrarlanan solunum fonksiyonu değerlendirmesinin sonucudur. Pulmoner alerjik inflamasyonu olan bir kontrol ve bir kontrol. Çift odacıklı pletismografi ile sağlanan bir dizi parametre için kararlı ve karşılaştırılabilir değerler elde edildi.

Bu değerler solunum hızı, başlık hacmi, dakika ventilasyonu, end-inspiratuar duraklama, orta başlık ekspiratuar hacminde akış ve spesifik hava yolu direnci için çizildi. Solunum fonksiyonundaki değişiklikler ve artan inhale metakolin dozlarına yanıt, kontrol ve alerjik C57BL / 6 farelerinde yanıt derecesini değerlendirmek için ardışık günlerde de gerçekleştirildi. Sonuçlar, ikinci ve üçüncü günde alerjik farelerde abartılı bir yanıt derecesi ile artan metakolin dozları ile spesifik hava yolu direncinde beklenen ilerleyici artışı göstermektedir.

Ertesi gün Newton direnci zorlanmış salınım tekniği ile ölçüldü. Bu parametredeki değişiklikler esas olarak büyük iletken hava yollarının direncindeki değişiklikleri yansıtır. Başlangıçta ve metakoline yanıt olarak ölçülen Newton direnci, aynı hayvanlarda önceki gün elde edilen ölçülen spesifik hava yolu direnci ile iyi

Bu teknik, aynı anda çok sayıda hayvanı değerlendirmek, akut bir yanıtın kinetiğini yakalamak ve birkaç gün süren bir deney sırasında solunum fonksiyonunu tekrarlanan bir şekilde ölçmek için uygundur. İşlemi takiben, hava yolu direnci gibi solunum mekaniğinin doğrudan ölçümleri ile değerlendirmeyi tamamlamak için zorla ilişkilendirme tekniği gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. Çift odacıklı pletismografi, özellikle deney protokolü hayvanların bilinçli olmasını gerektirdiğinde, solunum paternini ve hava yolu tıkanıklığının coğrafyasını değerlendirmek için gerçekten ilginç bir yaklaşım sağlar.