Name: Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-07-10T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 58 s
Description: Öğrenin çift-odası pletismografi ile bilinçli farelerde solunum fonksiyonunu değerlendirme yöntemini. Bu teknik, anestezi gerektirmeden güvenilir solunum verileri sağlar ve ilaç geliştirme çalışmalarında kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

SML bir öğrencilik Kanada Sağlık Araştırma Enstitüleri tarafından desteklenmektedir, MG bir burs FRQS solunum sağlık ağdan tarafından desteklenmektedir (Fonds de recherche du Québec-Santé) ve YB FRQS gelen bir araştırma bilim adamı.
YAZARLARIN KATKI Tüm yazarlar el yazması ve/veya video anlayışına katkıda bulunmuştur. Toplanan verileri SML ve LD. SML, LD, YB, DM, DB ve AR veri analizi, rakamlar ve el yazması yazma nesil katkıda bulunmuştur. YB, AR, KL ve MG video script hazırlanmasında tutulmuştu. Oyun YB, KL ve MG tarafından gerçekleştirildi.

Aşağıdaki yordamlar Quebec kalp ve akciğer Enstitüsü hayvan bakımı Komitesi tarafından Kanada Konseyi hayvan bakım (CCAC) yönergeleri uyarınca kabul edildi.
1. hazırlık
<ol><li>Çalışma
	<ol>
<li>(Kritik) Herhangi bir deneme gerçekleştirmeden önce uygun onayları (Örneğin, IACUC) ve eğitimler (Örneğin, hayvan işleme) elde edilir.</li>
		<li>Ekipman ve işletim yazılım ile kendinizi alıştırın. Kullanıcı kılavuzları okuyun ve gerekirse, sitelerin sayısı tanımlamak, girdi sinyalleri, Analizörleri ve parametreler için bir yapılandırma dosyası oluşturun. Not: Yüksek örnekleme oranı (2 KHz) seçtiğinizden emin olun.</li>
		<li>Faiz parametrelerinin Analizörleri ayarlarını yapılandırın.<ol>
<li>Tuning araç çubuğu ve sonra Analizörleriseçin.</li>
			<li>Akış eşik doğru nefes ayıran bir değere ayarlayın (fare: 0.5 mL/s) ve Solunum oranı hesaplamak t i + Te için tercih.</li>
			<li>Barometrik basınç (760 mm Hg) için bir değer ayarlamak ve inspiratory/ekspiratuar birimin geçerli kabul edilmesi bir nefes için maksimal sapmayı belirtin (fare: %20).</li>
			<li>Kabul sınırlarını ayarlamak için ayar üzerinde hesaplanan parametreleri alanında tıklatın. Not: Aşağıdaki ayarlar açıklanmıştır fare deneyler için kullanıldı: ilham zaman, 50-170 ms; zaman aşımı süresi, 40-180 ms; nefes, 30 kadar 450 bpm sıklığı; Özel hava yolu direnci, 0-15 cmH2O·s; en az 3 ondalık duyarlığını ile midexpiratory akışı.</li>
			<li>Bir kez tam, iletişim penceresi çıkmak için Uygula ve Kapat seçin.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Araç çubuğu menüsünden Tuning tekrar ve depolama sonra istenen veri depolama oranını ayarlamak için gidin. Pencereden çıkmak için Uygula ve Kapat'ı tıklatın. Not: Her 10 ortalama s genellikle kullanılır.</li>
		<li>Bir dizi komut ve her biri için istediğiniz zamanlama tanımlamak için işletim yazılım içinde bir iletişim kuralı oluşturun. Bir örnek Şekil 1' de görüntülenir.</li>
		<li>Deneme bir madde aerosol tarafından yönetim gerektiriyorsa, uygun çözümler ve dilutions test edilecek konsantrasyonları göre hazırlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Hayvan
	<ol>
<li>Konut odasından uzak sakin bir alanda çalışmak. Hayvanlar çevre değişikliğe uyum sağlar.</li>
		<li>Hayvanlar tartmak ve uygun kısıtlama boyutunu seçin.</li>
		<li>(Kritik) Restrainer ve yordamlar deneme başlangıcı önce hayvanlara alışmana. Deneysel tasarım, birden çok calıştıkları oturum süresi artan bağlı olarak (Örneğin, 5-30 dakika) gerekli olabilir. Not: Değil alışmana hayvanlar çalışma kaldırılması gerekir.<ol>
<li>Her calıştıkları oturum belgili tanımlık hayvan içinde geri açmasını devam restrainer Ekle; Cihazın dikey olarak tutan yararlı olabilir.</li>
			<li>Hayvan konumda olduğunda, arka pistonu yerleştirin ve nazikçe aşırı bir güç uygulamadan yerine kilitlemek.</li>
			<li>(Kritik) Görsel olarak hayvan normal nefes kontrol edin. Gerekirse, kilitleme mekanizması taşıyarak konumunu belirleyin. Hayvanın siklikla restrainer iç duvarları karşı istirahat onun burnu ile burun konisi dışında çıkıntılı emin olun.</li>
			<li>Torasik odası arka panelindeki ayırmak, torasik odasında açılış kauçuk ile hayvan içeren restrainer takın ve odası kapatın.</li>
			<li>Baş odası eklemek ve önyargı bir akış sağlar. 0,5 L/min bir akışı için bir fare.</li>
			<li>Hayvan 5 min için dinlenmek izin verir.</li>
			<li>Hayvan sakin olduğunda, burun ve göğüs akışını sinyalleri kaydını Başlat seçimini yapın. Bilgisayar ekranında izleri düzgün ve düzenli nefes desen görüntülemek doğrulayın; Şekil 2' deki örneğe bakın. Not: Protokolün sprey yönetim bir madde içeriyorsa, tuzlu bir meydan okuma calıştıkları yordamda dahil edilebilir.</li>
			<li>Her oturumun sonunda, hayvan torasik odası ve restrainer kaldırmak ve onun konut kafes ve oda geri dönün.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Ekipman
	<ol>
<li>Deneme günü, deneysel bir oturum başlatın ve uygun yapılandırma dosyası yüklenemedi. Not: Deney için istenen protokol içerdiğini doğrulayın.</li>
		<li>Çalıştırmak için araç çubuğu menüsünde git. Deneme ve hayvanın bilgilerini girin. Bir kez bitmiş, pencerenin altındaki Çalıştır düğmesini tıklatın.</li>
		<li>Sistem kalibrasyon ile devam edin. Her site kalibre ve sinyali ayrı ayrı girişi.<ol>
<li>Önyargı akışı jeneratörü açın boru parçası ile baş odası bağlayın ve akış hızını ayarlama.</li>
			<li>Bir kap ile baş odası en iyi açılış kapatın.</li>
			<li>Torasik odası arka panelindeki ayırmak, sıkıca kafa ve hermetik bir mühür oluşturmak için vücut odası arasında açılış kauçuk içinde ayarlama aracı ekleyin. O zaman kapatın ve torasik odası arka panelindeki re-attach.</li>
			<li>Yan bağlantı noktası torasik odasının kaplıdır doğrulayın.</li>
			<li>Yazılım araç çubuğu menüsünden Tuning ve sonra Ayarla'yagidin.</li>
			<li>Giriş 1 (göğüs)'e gidip göğüs akışını sinyal için kalibrasyon iletişim kutusunu başlatmak için Ayarla seçeneğini belirleyin.</li>
			<li>(Kritik) Kalibrasyon iletişim penceresinde listelenen parametrelerden ekran uygun ayarları, Yani, fiziksel stres düşük değer uygulanandoğrulayın: 0; Fiziksel stres uygulanan yüksek değer:-20 mL/s; Örnekler: entegre. Bir kez bitmiş, düşük örnekler penceresinde tıklatın.</li>
			<li>Üretilen sinyal ekran pencere boyunca sabit olduğundan emin olun ve sonra Kapat' ı tıklatın.</li>
			<li>20 mL şırınga bir plastik konnektör ve boru parçası kullanarak göğüs odası yan bağlantı noktası üzerinden bağlanır.</li>
			<li>(Kritik) Yüksek örnekler penceresinde seçin ve hemen hava 20 mL olarak sürekli bir akış hızı, 2 s sürecinde odanın içine enjekte.</li>
			<li>Üretilen sinyal tamamen vitrin içinde göründüğünden emin olun. Sinyal ortalanmış ve sıfır hattı çevresinde simetrik olup olmadığını doğrulamak için ok simgesini kullanın. Sonra Kapat' ı tıklatın. Sıfır yanında tıkırtı üstünde kaldırmak AC uzaklığı örnekleri penceresinde herhangi bir mahsup hesabı kaldırmak Not: Yüksek değer kalibrasyon, gerekirse redone.</li>
			<li>Sonuçta elde edilen Ölçekli giriş aralığı önerilen Aralık içinde olduğundan emin olun (fare: ±280 ±420 mL/s). (Kritik) Değerleri kabul edilebilir aralığın dışında kalibrasyon adımları yineleyin.</li>
			<li>Baş odası benzer bir şekilde göğüs odası (adım 1.3.3.6) kalibre edin. Bu sefer, giriş 2 (nazal)seçin. Not: (Önemli) Fiziksel stres yüksek değer uygulanan değerini ayarlamak + 20 mL/s. Bu arka odası ile ilgili olarak açık odası akışında kutuplar değişecek. Hayvan nefes alıyor, bu nedenle, iki akış sinyalleri neredeyse aşamasında, kenara sRaw hesaplamakta kullanılan gecikme olacaktır.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>2. akciğer işlev ölçümleri
<ol><li>Hayvanlar tartmak ve kendi vücut ağırlıkları unutmayın.</li>
	<li>Hayvan restrainer içinde eklemek ve torasik Pletismograf odası (adım 1.2.3.1-1.2.3.5) yerleştirin.</li>
	<li>Hayvan en az 5 dakika dinlenmek izin verir.</li>
	<li>Komutları Protokolü ilk adımı seçerek başlayın ve ardından yürütmeküzerinde.</li>
	<li>Bilgisayar ekranında hayvanın nefes sinyalleri vardır düzenli ve düzgün (Şekil 2) işaretleyin. Yazılım otomatik olarak bir nefes nefes olarak hesaplanan parametrelerini görüntüler. Hayvanın parametreleri kararlı olduğunu doğrulayın.</li>
	<li>10 dakika kadar için temel koşullar altında nefes desen kaydedin.</li>
	<li>Bir test madde aerosol tarafından yönetimini içeren iletişim kuralları için aşağıdaki gibi yapın:<ol>
<li>Nebulizatör zamanında ve görev döngüsü, gerektiği gibi ayarlayın. Not: Bu makalede gösterdi örneklerde Nebulizatör için %10 5 görev döngüsü, ameliyat s.</li>
		<li>Yanıtı kaydettikten ve bir araç mücadele (Örneğin, serum) gerçekleştirebilirsiniz.</li>
		<li>Gerekirse, adımları (konsantrasyonları iki katınamesela ) tırmanan içinde Nebulizatör konsantrasyon değiştirerek test madde konsantrasyonları artan hayvan ortaya çıkarmak. Yanıtı kaydettikten sonra her yönetim.</li>
		<li>Deneysel oturumun sonunda otomatik olarak bitmiş değil, kaydı durdurmak ve hayvan onun konut kafes ve oda dönün.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Gerekirse, çalıştırmak başka bir deneysel oturum çalıştırmak için araç çubuğu menüsünden seçin.<ol>
<li>Arada oturum, Pletismograf odaları temiz ve Nebulizatör su ile durulayın. Not: Alkol kullanımı Pletismograf için geri dönüşümsüz hasara neden.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Çalışmanın zaman içinde tekrar tekrar değerlendirme içeriyorsa, seçilen her timepoint, tüm ölçüm sıra yineleyin. Not: Bu akıllıca çalışma bazı hassas ölçümler solunum mekaniği ve/veya akciğer birimleri1,15ile tamamlamak için tavsiye edilir.</li>
</ol>3. veri analizi
Not: Yazılımı otomatik olarak deneysel dosyayı kaydeder ve deneysel oturum kapatıldığında kaydedilen parametreler verir.
<ol><li>Faiz her hayvan ve deneysel grubu için parametreler için satır taban çizgisi ortalamasını hesapla. Not: Tablo 1 sağladıkları bilgi türüne göre kategorize tipik parametre sayısını listeler.</li>
	<li>Alakalı olduğunda, belirli bir noktaya (Örneğin, maksimum veya minimum değer), ortalama veya tam zamanlı kurs kullanarak her konsantrasyon faiz parametrelere okudu aerosolize madde etkisini değerlendirmek; bir normalleştirme temel için de kabul edilebilir.</li>
	<li>Grup ve bir tablo veya grafik biçiminde hataları kullanarak sonuçları bildirin. Sonuçlar istatistiksel analiz. Not: Bu da çalışmanın, iki yönlü ANOVAs ile tekrarlanan önlemler etkisini methacholine, alerjen-ev-toz mite (HDM) – ve onların etkileşim farklı DCP dökümanları (sRaw ve EF50) yanı sıra farklı FOT dökümanları değerlendirmek için kullanılmıştır (RN, G ve H), her iki suşlar farelerin içinde. Sidak'ın birden fazla karşılaştırma testleri sonra hangi alerjik fareler denetim fareler farklı methacholine konsantrasyonları belirlemek için kullanılmıştır. Ayni sınav gün, HDM ve onların etkileşim, taban çizgisi (yani, daha önce methacholine) etkisini değerlendirmek için güzel hava yolu obstrüksiyonu (sRaw ve EF50) ve havalandırma desen (BF, TV, MV ve EIP) kullanılmıştır. Pearson korelasyon DCP ve RN FOT ile elde ile elde edilen sRaw arasındaki bağıntıları değerlendirmek için kullanılmıştır. Tüm istatistiksel analizler ve grafikler alternatif standart istatistiksel yazılım (Örneğin, GraphPad prizma) kullanılarak yapıldı. p ≤ 0,05 boş varsayımı reddetmek için yeterli kabul edildi.</li>
</ol>

<ol><li>McGovern, T. K., Robichaud, A., Fereydoonzad, L., Schuessler, T. F., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+respiratory+system+mechanics+in+mice+using+the+forced+oscillation+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Evaluation of respiratory system mechanics in mice using the forced oscillation technique.</a> J Vis Exp. (75), e50172(2013).</li>
<li>Bates, J. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CORP%3A+Measurement+of+lung+function+in+small+animals%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">CORP: Measurement of lung function in small animals.</a> J Appl Physiol (1985). 123 (5), 1039-1046 (2017).</li>
<li>Bates, J. H., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+lung+function+in+mice%3A+the+phenotyping+uncertainty+principle%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Measuring lung function in mice: the phenotyping uncertainty principle.</a> J Appl Physiol. 94 (4), 1297-1306 (2003).</li>
<li>Lim, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+respiratory+function+in+mice+using+unrestrained+whole-body+plethysmography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Measuring respiratory function in mice using unrestrained whole-body plethysmography.</a> J Vis Exp. (90), e51755(2014).</li>
<li>Enhorning, G., van Schaik, S., Lundgren, C., Vargas, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+plethysmography%2C+does+it+measure+tidal+volume+of+small+animals%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Can+J+Physiol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Whole-body plethysmography, does it measure tidal volume of small animals?</a> Can J Physiol Pharmacol. 76 (10-11), 945-951 (1998).</li>
<li>Vijayaraghavan, R., Schaper, M., Thompson, R., Stock, M. F., Alarie, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristic+modifications+of+the+breathing+pattern+of+mice+to+evaluate+the+effects+of+airborne+chemicals+on+the+respiratory+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Characteristic modifications of the breathing pattern of mice to evaluate the effects of airborne chemicals on the respiratory tract.</a> Arch Toxicol. 67 (7), 478-490 (1993).</li>
<li>Willis, D. N., Liu, B., Ha, M. A., Jordt, S. E., Morris, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menthol+attenuates+respiratory+irritation+responses+to+multiple+cigarette+smoke+irritants%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Menthol attenuates respiratory irritation responses to multiple cigarette smoke irritants.</a> FASEB J. 25 (12), 4434-4444 (2011).</li>
<li>Neuhaus-Steinmetz, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sequential+development+of+airway+hyperresponsiveness+and+acute+airway+obstruction+in+a+mouse+model+of+allergic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Arch+Allergy+Immunol%22%5BJournal%5D)">Sequential development of airway hyperresponsiveness and acute airway obstruction in a mouse model of allergic inflammation.</a> Int Arch Allergy Immunol. 121 (1), 57-67 (2000).</li>
<li>Glaab, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tidal+midexpiratory+flow+as+a+measure+of+airway+hyperresponsiveness+in+allergic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tidal midexpiratory flow as a measure of airway hyperresponsiveness in allergic mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 280 (3), L565-L573 (2001).</li>
<li>Glaab, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+measurement+of+midexpiratory+flow+indicates+bronchoconstriction+in+allergic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Noninvasive measurement of midexpiratory flow indicates bronchoconstriction in allergic rats.</a> J Appl Physiol (1985). 93 (4), 1208-1214 (2002).</li>
<li>Pennock, B. E., Cox, C. P., Rogers, R. M., Cain, W. A., Wells, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+noninvasive+technique+for+measurement+of+changes+in+specific+airway+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+Respir+Environ+Exerc+Physiol%22%5BJournal%5D)">A noninvasive technique for measurement of changes in specific airway resistance.</a> J Appl Physiol Respir Environ Exerc Physiol. 46 (2), 399-406 (1979).</li>
<li>DeLorme, M. P., Moss, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+function+assessment+by+whole-body+plethysmography+in+restrained+versus+unrestrained+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Pulmonary function assessment by whole-body plethysmography in restrained versus unrestrained mice.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 47 (1), 1-10 (2002).</li>
<li>Flandre, T. D., Leroy, P. L., Desmecht, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+somatic+growth%2C+strain%2C+and+sex+on+double-chamber+plethysmographic+respiratory+function+values+in+healthy+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Effect of somatic growth, strain, and sex on double-chamber plethysmographic respiratory function values in healthy mice.</a> J Appl Physiol (1985). 94 (3), 1129-1136 (2003).</li>
<li>Criee, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Body+plethysmography--its+principles+and+clinical+use%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Med%22%5BJournal%5D)">Body plethysmography--its principles and clinical use.</a> Respir Med. 105 (7), 959-971 (2011).</li>
<li>Robichaud, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+full-range+pressure-volume+curves+in+mice+and+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Automated full-range pressure-volume curves in mice and rats.</a> J Appl Physiol (1985). 123 (4), 746-756 (2017).</li>
<li>Mizutani, N., Goshima, H., Nabe, T., Yoshino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complement+C3a-induced+IL-17+plays+a+critical+role+in+an+IgE-mediated+late-phase+asthmatic+response+and+airway+hyperresponsiveness+via+neutrophilic+inflammation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol%22%5BJournal%5D)">Complement C3a-induced IL-17 plays a critical role in an IgE-mediated late-phase asthmatic response and airway hyperresponsiveness via neutrophilic inflammation in mice.</a> J Immunol. 188 (11), 5694-5705 (2012).</li>
<li>Nabe, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Roles+of+basophils+and+mast+cells+infiltrating+the+lung+by+multiple+antigen+challenges+in+asthmatic+responses+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Roles of basophils and mast cells infiltrating the lung by multiple antigen challenges in asthmatic responses of mice.</a> Br J Pharmacol. 169 (2), 462-476 (2013).</li>
<li>Morris, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immediate+sensory+nerve-mediated+respiratory+responses+to+irritants+in+healthy+and+allergic+airway-diseased+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Immediate sensory nerve-mediated respiratory responses to irritants in healthy and allergic airway-diseased mice.</a> J Appl Physiol (1985). 94 (4), 1563-1571 (2003).</li>
<li>Merazzi, D., Mortola, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+changes+in+ambient+temperature+on+the+Hering-Breuer+reflex+of+the+conscious+newborn+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of changes in ambient temperature on the Hering-Breuer reflex of the conscious newborn rat.</a> Pediatr Res. 45 (3), 370-376 (1999).</li>
<li>Rao, R., Nagarkatti, P. S., Nagarkatti, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delta%289%29+Tetrahydrocannabinol+attenuates+Staphylococcal+enterotoxin+B-induced+inflammatory+lung+injury+and+prevents+mortality+in+mice+by+modulation+of+miR-17-92+cluster+and+induction+of+T-regulatory+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Delta(9) Tetrahydrocannabinol attenuates Staphylococcal enterotoxin B-induced inflammatory lung injury and prevents mortality in mice by modulation of miR-17-92 cluster and induction of T-regulatory cells.</a> Br J Pharmacol. 172 (7), 1792-1806 (2015).</li>
<li>Agrawal, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+mucin+secretion+with+MARCKS-related+peptide+improves+airway+obstruction+in+a+mouse+model+of+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Inhibition of mucin secretion with MARCKS-related peptide improves airway obstruction in a mouse model of asthma.</a> J Appl Physiol (1985). 102 (1), 399-405 (2007).</li>
<li>Mabalirajan, U., Aich, J., Agrawal, A., Ghosh, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mepacrine+inhibits+subepithelial+fibrosis+by+reducing+the+expression+of+arginase+and+TGF-beta1+in+an+extended+subacute+mouse+model+of+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mepacrine inhibits subepithelial fibrosis by reducing the expression of arginase and TGF-beta1 in an extended subacute mouse model of allergic asthma.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 297 (3), L411-L419 (2009).</li>
<li>Desmet, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+experimental+asthma+by+decoy-mediated+local+inhibition+of+activator+protein-1%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Treatment of experimental asthma by decoy-mediated local inhibition of activator protein-1.</a> Am J Respir Crit Care Med. 172 (6), 671-678 (2005).</li>
<li>Zang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+C+Fibers+Modulate+MMP-12+Production+via+PAR2+and+Are+Involved+in+the+Long-Term+Airway+Inflammation+and+Airway+Hyperresponsiveness+Induced+by+Respiratory+Syncytial+Virus+Infection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Virol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary C Fibers Modulate MMP-12 Production via PAR2 and Are Involved in the Long-Term Airway Inflammation and Airway Hyperresponsiveness Induced by Respiratory Syncytial Virus Infection.</a> J Virol. 90 (5), 2536-2543 (2015).</li>
<li>Shukla, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carryover+of+cigarette+smoke+effects+on+hematopoietic+cytokines+to+F1+mouse+litters%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Immunol%22%5BJournal%5D)">Carryover of cigarette smoke effects on hematopoietic cytokines to F1 mouse litters.</a> Mol Immunol. 48 (15-16), 1809-1817 (2011).</li>
<li>Murphy, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+function+assessment+in+safety+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Respiratory function assessment in safety pharmacology.</a> Curr Protoc Pharmacol. , Chapter 10 Unit10 19 (2003).</li>
<li>Lofgren, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Restrained+whole+body+plethysmography+for+measure+of+strain-specific+and+allergen-induced+airway+responsiveness+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Restrained whole body plethysmography for measure of strain-specific and allergen-induced airway responsiveness in conscious mice.</a> J Appl Physiol (1985). 101 (5), 1495-1505 (2006).</li>
<li>DiMaria, G. U., Wang, C. G., Bates, J. H., Guttmann, R., Martin, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partitioning+of+airway+responses+to+inhaled+methacholine+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Partitioning of airway responses to inhaled methacholine in the rat.</a> J Appl Physiol (1985). 62 (3), 1317-1323 (1987).</li>
<li>Hoymann, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+function+measurements+in+rodents+in+safety+pharmacology+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Lung function measurements in rodents in safety pharmacology studies.</a> Front Pharmacol. 3, 156(2012).</li>
<li>Agrawal, A., Singh, S. K., Singh, V. P., Murphy, E., Parikh, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partitioning+of+nasal+and+pulmonary+resistance+changes+during+noninvasive+plethysmography+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">Partitioning of nasal and pulmonary resistance changes during noninvasive plethysmography in mice.</a> J Appl Physiol (1985). 105 (6), 1975-1979 (2008).</li>
<li>McLeod, R. L., Young, S. S., Erickson, C. H., Parra, L. E., Hey, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+nasal+obstruction+in+the+allergic+guinea+pig+using+the+forced+oscillation+method%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Characterization of nasal obstruction in the allergic guinea pig using the forced oscillation method.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 48 (3), 153-159 (2002).</li>
<li>Miyahara, S., Miyahara, N., Takeda, K., Joetham, A., Gelfand, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+assessment+of+allergic+rhinitis+in+mice%3A+role+of+the+high-affinity+IgE+receptor+%28FcepsilonRI%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Physiologic assessment of allergic rhinitis in mice: role of the high-affinity IgE receptor (FcepsilonRI).</a> J Allergy Clin Immunol. 116 (5), 1020-1027 (2005).</li>
</ol>

DB ve AR SCIREQ bilimsel solunum cihazları Inc, bu yazının içeriği ile ilgili konular dahil bir ticari varlık tarafından istihdam edilmektedir. DB de hisse sahibi. SCIREQ Inc bir Shipyard teknolojileri şirketidir.

Akciğer işlev bilinçli hayvanlarda ölçmek için yeteneği açıkça solunum araştırmada garanti kapsamındadır. Genel olarak, DCP bilinçli ve kendiliğinden hayvanlar26nefes solunum sisteminin havalandırma işlevi değerlendirmek için ilginç bir yaklaşımdır. Daha ayrıntılı olarak, DCP veya onun baş-out değişik kez sağlanan bilgilerin kalitesi ve invasiveness3 (Tablo 2) istenen seviyeye arasında doğru dengeyi sağladığına. Teknik çeşitli türler (Örneğin, fare, sıçan, eskiden şiling şimdi domuz) veya hayvan boyutları için adapte edilebilir ve birçok araştırma uygulamalarda kullanılabilir. Çok sayıda hayvanlarda aynı anda paralel çalışma tasarım, solunum fonksiyon yinelenen şekilde izlemek ve zaman içinde bir yanıt kinetik yakalamak için değerlendirmek özellikle yararlıdır. Buna ek olarak, tekniği basittir ve nispeten zamanında öğrenilebilir. Bu uygulamalı yönleri tanımlamak için bir örnek kritik adımları tartışmak olarak pletismografisi tekniği de ölçülü ve ilgili olarak mevcut yazıda, DCP ölçümleri farelerde istihdam bir protokolün kullanılmış olduğunu sonuçlar.
Bilinçli hayvanlar ile çalışırken, bu tekrarlanabilir sonuçlar üretmek için (Örneğin, sessiz oda sınırlı sayıda kişi veya aktivite ile) çevre çevrenin koşulları kontrol etmek için esastır. Restrainers çeşitli boyutlarda gel beri nefes hareketleri soğukkanlı olması uygun boyutu ile başlamak önemlidir. Yasaklama nefes sıklığı12etkiler de farelerde oluşturulduktan de yararlı ve sık sık deneysel kurulum ve yordamlar, hayvanlara alışmana için gerekli gibi. Deneysel tasarım veya koşullara bağlı olarak, birden çok oturum artımlı süreleri, gerekli olabilir. Son olarak, izin süresi bir denemenin başlangıcında Oda değişikliği ve gerekli işleme için ayarlamak hayvanlar için nefes desen sürekli olarak düzenli ve satır taban çizgisi, rahat olması etkili bir basit unsurlardan biridir. Hayvanların rahat, iyi adapte ve sakin olduğu koşullarda çalışma da sonuç değişkenliği ve kalite açısından yararlı olacaktır. Hava yolu kalibre artırmak ve azaltmak indüklenen bir bronchoconstriction katekoiamin, stres kaynaklı herhangi bir sürümünü de sınırlandırır.
Mümkün olduğu kadar sıkıca burun ve göğüs akışı ayırmak için bir ihtiyaç olduğunu anlamak önemlidir. Sistem veya okudu tür bağlı olarak, sızdırmazlık mekanizması şekli de olduğu gibi etkinliğini değişebilir. Biz burada açıklanan DCP içinde hayvanın burun yasaklama aygıt arasında mühür oluşturulur. Gibi bir düşüş oksijen için hayvan mevcut düzeyi önemli etkileri sonuçlanır DCP solunum işleviyle değerlendirirken, bu da yeterli ve sürekli bir önyargı akışı sağlamak için esastır. Restrainer hayvan refahı dikkate alarak ajitasyon tarafından oluşturulan hava kaçağı için eğilimi sınırlar ve böylece verilerin kalitesini en üst düzeye çıkarır. Contrastingly, en son mühür reddedilen veri kümeleri veya bazı parametreler bir küçümseme neden olur.
Ayrıca burun akışı sinyal ayrı kaydını etkinleştirmek için baş odası genellikle hayvan aerosolize maddeler ortaya çıkarmak için kullanılır. Bu makalede gösterildiği, bu yanıt farklı derecelerde göstermek için bronchoprovocation testi gerçekleştirmek için yararlı olabilir. Bu tür deneyler, test konsantrasyonları Aralık ayarlamak türler, zorlanma veya hayvanların seks bağlı olarak gerekli olabilir okudu. Daha önce gösterdiği8,9,10,27, mevcut sonuçlar sRaw methacholine kaynaklı değişimler de invazif FOT ölçümleri havayolu direnci ile korelasyon gösterir. Sonuçları da DCP teknik FOT solunum fonksiyon bozukluğu algılamak ve akciğer (akciğer doku ve/veya küçük periferik airways) alt bölmeleri içinde lokalize bir değişmiş yanıt tanımlamak için onun yetenek gibi duyarlı değildir göstermektedir . Hayvan airways sağlam olduğundan, hava akımı28toplam solunum direnci en büyük bölümü için hesapları, üst solunum yolları, varlığı ifade ek katkı azaltacak ve aerosol dağıtımı etkileyebilir alt solunum yolları için bir ölçüm. Tablo 3 DCP tekniği ve FOT arasındaki diğer farklar özetlenmektedir. Bu hayvanın toplam havayolu direnci (üst havayolları da dahil olmak üzere) bir ölçüm sRaw tahmin etmek teorik olarak mümkün olsa da, son olarak, genellikle DCP değerlendirme gibi invaziv ölçüm tekniği ile tamamlamak için önerilir Detaylı solunum mekaniğinin doğrudan ölçümler elde FOT-29 . Çalışma hedefleri bağlı olarak, üst solunum yolu direnci ölçümleri30,31,32düşünülebilir.
Sonuç  Sınırlı invasiveness derecesini sayesinde DCP solunum araştırma önemli bir ihtiyaç yerine getirebilecek bir tekniktir. Hava akımı tıkanıklığının tartışmasız bazı dizinleri ile aynı anda bilinçli hayvanlarda havalandırma deseninin doğru sonuçlar verebilmektedir. Elde ettiği bilgileri de gerçekten bu daha invaziv yaklaşımlardan tamamlar.

Küçük hayvan modeli insan solunum hastalıkları için artan kullanımı kantitatif bu hayvanlarda solunum sisteminin işlevleri değerlendirmek için yöntemlerin geliştirilmesi sayesinde çağırdı. Şu anda, zorla salınım tekniği (FOT) küçük hayvan1,2solunum mekaniği değerlendirmek için en doğru yaklaşım kabul edilmektedir. Ancak, fenotipleme belirsizlik ilkesi tarafından belirtildiği gibi ne FOT hassasiyetle ölçüm içinde kazandı kapalı noninvasiveness3kaybına karşı işlem görmektedir. Nitekim, FOT ölçümleri anestezi, boğaz veya sözlü entübasyon yanı sıra mekanik havalandırma gerektiren son derece kontrollü deneysel koşullar altında elde edilir; gerçek hayattan uzak bir senaryo.
Burada deneysel gereksinimleri anestezik ajanların kullanımı yasak veya hayvanın doğal fizyolojik devlet az veya hiç sapma için ara durumlarda, Çift-odası pletismografisi (DCP) kabul edilebilir. Onun adından da anlaşılacağı gibi bir DCP mümkün olduğunca hermetik hayvanın kafası (veya burun),--dan onun göğüs ön odasında yalıtmak için inşa bağlı iki katı odalarının arka odasında oluşur. Belgili tanımlık tertibat içinde hayvan bilinçli ve kendiliğinden ölçülü sırasında nefes. Odaların duvarlarında genişletmek veya geri çekmek için bir sonucu olarak çevreleyen hava sıkıştırma/açma arka odası içinde ters dalga formu ama karşılık gelen hava hayvan girip hareket oluştur. Dalga biçimi nedeniyle açık odası ve arka odasında torasik hareket ile ilgili bir burun akış böylece ayrılmış ve aynı anda ele geçirdi. DCP Kur tasarımına bağlı olarak, bu dalga biçimleri sırasıyla değişiklikleri odası basınç ve hava akımı odaları girip bir fonksiyonu olarak kaydetmek için bir dizi basınç güç çeviriciler veya pneumotachographs kullanarak elde edilebilir. İkinci yaklaşımı günümüzde daha yaygındır.
Hayvanın solunum frekansı doğru pletismografisi teknikleri her türlü tarafından belirlenebilir, durum tidal hacim ve ilgili havalandırma parametreleri (Örneğin, dakika havalandırma, belirlenmesi için aynı değil iken ekspiratuar hacim, vb). Nerede hayvanın deprem ses kutusu sinyal4,5dan tahmin edilmektedir, tüm vücut Pletismograf (WBP) tekniği olarak karşı DCP teknik deprem biriminin doğru değerlendirmeler sağlar. Bu sırasında nefes akciğer hacmi değişimler ile orantılı olan hayvanın göğüs hareketi arka odasında doğrudan edinimi ile ilgilidir.
Bu doğru solunum parametreleri ek olarak (Örneğin, tidal hacim, nefes alma sıklığı ve dakika havalandırma), solunum döngüsü şeklinde bazı karışıklıklar yönetir nöronal yönleri araştırmak için de kullanılabilir solunum sürücü veya solunum refleksleri. Bu uygulamanın belirli bir örnek üst solunum yolu duyusal sinir hücreleri6inhale maddeler irritasyon potansiyelinin değerlendirilmesi olacaktır. Burada, süre sonu başlangıcı adlı bir duraklama süresi sonunda inspiratory Duraklat (EIP),6frenleme süresi olarak da denilen bir parametresi kullanılarak belirlenir. Bu duraklama tahriş edici bir madde tarafından uzaması hayvanın glottis, süre sonu6,7ilk bölümünde frenleme ölçülebilir bir süre kapatılması ile ilişkilidir.
Bir diğer önemli avantajı DCP hava akımı tıkanıklığı için hassas iki doğrulanmış ve tartışmasız parametre sağlamasıdır. Bir akış-gelgit ekspiratuar ses seviyesinde denir ve kısaltılmış EF508,9,10. Bu sona erme sırasında gelgit her nefes midway ses seviyesinde hava akımı var. EF50 göğüs akışını izleme elde edilir ve böylece açık odası (yani, bir baş-out yapılandırmasında) olmadan ölçülebilir. Diğer bir özel havayolu direnci denir ve kısaltılmış sRaw11,12,13. Bu ayrı solunum izler sıfır akışı ilham sonundaki noktasında arasındaki gecikme süresi üzerinden hesaplanan gibi sRaw belirlenmesi hayvanın burun ve göğüs akışı aynı anda kayıt gerektirir. Tarafından bu gecikme ilgili olduğu için sRaw temel açıklar mantığı expatiated daha önce11. Basitçe söylemek gerekirse, basınç gradyan Sürücü hava akımı amacıyla geliştirmek gerekir bu yana akciğer hacmi değişimler hava hareketi koyun. Bir sağlıklı hayvan sessizce nefes, bu gecikme genellikle çok küçüktür. Ancak, belirli bir akış (Örneğin, bir akış yeterli havalandırma sağlamak için yeterli) karşılamak için gerekli basınç gradyan havayolu direnci derecesi tarafından etkilenir. Bronchoconstriction sırasında Örneğin, belirli bir akış karşılamak için gerekli basınç gradyan hangi hayvan daha fazla nefes çalışması gerektiğini ima, büyüktür. Arka odası girip akışı daha büyük bir kısmını dekompresyon/sıkıştırma hava toplam torasik genişleme/olan geri çekme bölümü olan toraks içinde kaynaklanmaktadır hayvanın göğüs basıncı büyük bir degrade de anlaşılacağı burun akışı ile faz dışı. Bronchoconstriction nedeniyle artan direnç böylece arka ve ön chambers arasındaki gecikme artacaktır ve böylece sRaw artırır. Hava akımı akciğerin girip sürücüler basınç gradyan ilk torasik gaz birim (TGV) tarafından da etkilenir. Daha büyük bir TGV adlı Örneğin, genişleme/retraksiyon toraks basınç belirli bir degrade oluşturmak için gerekli ve büyüktür (sadece basınç belirli bir degrade oluşturmak için gereken birim yer değiştirme büyük olduğu için), hangi de anlaşılacağı hayvan daha fazla nefes çalışması gerekiyor. Yine, bu ekstra torasik talebiyle toraks havada decompress/sıkıştırmak için gerekli olanlar ve böylece burun akışı ile faz dışı vardır. Bu yüzden, artan bir TGV de odaları arasında gecikme artacaktır ve böylece sRaw artırır. Görüldüğü gibi bronchoconstriction ve artan TGV hava akciğer girip çizmek için daha önemli bir çaba sonucu. Bu, esas olarak, fizyolojik sRaw anlamı. 5,14solunum için gerekli iş temsil eder.
Böylece iki farklı faktörler sRaw etkiler anlaşılması önemlidir: havayolu direnci ve TGV. Aslında, sRaw havayolu direnci ve TGV11ürün olarak ifade edilebilir. Bilinçli hayvanlar onların TGV diledikleri, onların havalandırma belirli bir ortama adapte olarak değiştirebilirsiniz. Hayvanın doğal fizyolojik devlet değiştirilmemiş nerede, bu koşullar altında böylece bir değişiklik sRaw havayolu direnci bir değişiklik, TGV bir değişiklik veya ikisinin bir karışımı kaynaklanıyor ayırt etmek imkansız. Bu nedenle, bu solunum mekaniği ve/veya FOT1,15tarafından sağlananlar gibi akciğer birimleri daha invaziv ölçümleri ile DCP değerlendirilmesi tamamlayacak tavsiye edilir.
Bugüne kadar DCP çeşitli araştırma uygulamalarında kullanılmıştır. Tekniği ile veya olmadan kafa odasına kantitatif kullanılabilir ve doğru ilaç ajanlar, alerjenler, tahriş edici veya diğer aracılar gibi çeşitli maddelerin etkisi solunum fonksiyon bilinçli küçük hayvanlarda değerlendirmek 16,17,18. Açık odası aerosolize maddeler veya değişen gaz konsantrasyonları (hipoksi, hypercapnia, vb)19göstererek bir odasına olarak da kullanılabilir. Elverişli bir konuma sahip, bir kullanılazlar bu Etkilenmeler akut etkileri ölçmek sağlar. Aslında, DCP yaygın kullanımlarından biri solunum yolu hastalıkları20,21,22,23, farklı modellerde aerosolize methacholine duyarlılık derecesini değerlendirmek etmektir 24 , 25.
DCP teknik görünüşte basit olsa da, bazı pratik zorlukları deneyimsiz kullanıcılar vazgeçirmek veya hassasiyet ve tekrarlanabilirlik sonuçlarından zarar ihtimali. Mevcut kağıt bilinçli, ölçülü, kendiliğinden nefes farelerde DCP tarafından başarılı bir şekilde kayıt solunum fonksiyon için önerilen yordamları ayrıntılı bir açıklamasını sağlar. Açıklama belirtilen aygıta belirli ( Malzemeler tabloiçin bakınız). Yardımcı programı DCP değerini da gösterdi ve pulmoner Alerjik iltihabı temel test fareler iki soyu ve yanıt olarak spreyli methacholine, ortak bir modeli.

<table><tbody><tr><td>Asetil-&beta;-metilkolin klorür&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A-2251</td><td>Metakolin</td></tr><tr><td>Fosfat tamponlu tuzlu su</td><td>Çok hücreli</td><td>311-506-CL</td><td>PBS 10X</td></tr><tr><td>Ev tozu akarı özü</td><td>GREER</td><td>290902</td><td>HDM&nbsp;</td></tr><tr><td>DCP komple sistem</td><td>&nbsp; SCIREQ Inc. /emka TEKNOLOJİLERİ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>iox yazılımı</td><td>&nbsp; SCIREQ Inc. /emka TEKNOLOJİLERİ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aerogen Aeroneb nebulizatör</td><td>&nbsp; SCIREQ Inc. /emka TEKNOLOJİLERİ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>flexiVent FX komple sistem</td><td>&nbsp; SCIREQ Inc. /emka TEKNOLOJİLERİ</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Assessment of Respiratory Function in Conscious Mice by Double-chamber Plethysmography

Hava birimi değişiklikleri kendiliğinden bir vücut kutusu içinde nefes bilinçli bir konuya göre oluşturulan pletismografisi, invaziv olmayan bazı özellikler de Laboratuvar hayvanlarının olduğu gibi insanlarda solunum fonksiyon değerlendirmek için kullanılan bir teknik temeli altındadır. Mevcut makale küçük hayvanlarda çift-odası pletismografisi (DCP) uygulanması üzerinde duruluyor. Arka plan bilgi metodoloji yanı sıra başarılı bir şekilde kendiliğinden hayvanlar non-invaziv bir şekilde nefes bilinçli, solunum fonksiyon değerlendirmek için ayrıntılı adım adım yönerge sağlar. DCP seçtiğiniz zaman sürecinde aerosolize maddeler tarafından indüklenen değişiklikleri tanımlamak için de paralel ve tekrarlanan bir şekilde birden fazla hayvanların solunum fonksiyon izlemek için kullanılabilir. Denetim ve alerjik fareler üzerinde deneyler burada tartışın ilgili avantajları ve eksiklikleri olarak ilişkili sonuç parametreleri açıklamak, belgili tanımlık yarar tekniği göstermek için kullanılır. Genel olarak, DCP temel hem de zorlukları aerosolize maddeler ile sonra bilinçli küçük hayvanların solunum fonksiyon değerlendirmek için güvenilir olabilir geçerli ve teorik olarak ses okumayı sağlar.

Çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde solunum işlevin sonucunu önerilen yordamları ayrıntılı bir açıklama sağlamak için mevcut makale hedefidir.

Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Air volume changes created by a conscious subject breathing spontaneously within a body box are at the basis of plethysmography, a technique used to ...

Bu teknik, solunum araştırması, güvenlik farmakolojisi ve ilaç geliştirme dahil olmak üzere çeşitli alanlardaki kilit soruların ele alınmasına yardımcı olacaktır. Bu tekniğin temel avantajı, bilinçli bir hayvanda hem başlangıçta hem de zorluklar sırasında solunum fonksiyonunu değerlendirmek için güvenilebilecek okumalar sağlamasıdır. Teknik, deney protokolü hayvanların normal fizyolojik durumundan çok az sapma gerektirdiğinde özellikle yararlıdır.Hayvan kısıtlanır, ancak aksi takdirde normal nefes alır, bu da hava yolu tıkanıklığına ek olarak solunum paterninin değerlendirilmesine izin verir. Deneme gününde, bir deneme oturumu başlatın ve uygun yapılandırma dosyasını yükleyin. Deneyi ve hayvanın bilgilerini girin.Bittiğinde, pencerenin altındaki çalıştır düğmesine tıklayın. Sistemin kalibrasyonu ile devam edin. Her siteyi ve giriş sinyalini ayrı ayrı kalibre edin.Bir boru parçası aracılığıyla kafa odasına bağlı önyargı akış jeneratörünü açın ve akış hızını ayarlayın. Baş bölmesinin üst açıklığını bir kapakla kapatın. Göğüs odasının arka panelini ayırın.Ardından, hermetik bir sızdırmazlık oluşturmak için kalibrasyon aletini kafa ile gövde haznesi arasındaki lastik açıklığın içine sıkıca yerleştirin. Göğüs odasının arka panelini kapatın ve yeniden takın. Yazılım araç çubuğu menüsünden Ayarlama'ya ve ardından Kalibre Et'e gidin.Torasik akış sinyali için kalibrasyon iletişim kutusunu başlatmak üzere Birinci Giriş'e gidin ve kalibre et'i seçin. Kalibrasyon iletişim kutusu penceresinde listelenen parametrelerin uygun ayarları görüntülediğini doğrulayın. Uygulanan fiziksel gerilme düşük değeri sıfır olmalıdır.Uygulanan fiziksel stres yüksek değeri saniyede eksi 20 mililitre olmalı ve numuneler entegre olacak şekilde ayarlanmalıdır. Bittiğinde, örnekler penceresinde düşük'e tıklayın. Üretilen sinyalin ekran penceresi boyunca sabit olduğunu doğrulayın ve ardından kapat'a tıklayın.Bir boru parçasındaki plastik bir konektör kullanarak göğüs odasının yan portundan 20 mililitrelik bir şırınga bağlayın. Numuneler penceresinde yüksek'i seçin ve mümkün olduğunca sabit bir akış hızında iki saniyelik bir süre boyunca hazneye hemen 20 mililitre hava enjekte edin. Oluşturulan sinyalin tamamen ekran penceresinin içinde göründüğünü doğrulayın.Sinyalin sıfır çizgisi etrafında ortalanmış ve simetrik olup olmadığını doğrulamak için ok simgesini kullanın. Ardından kapat'a tıklayın. Örnekler penceresinde AC ofsetini kaldır'a tıklayarak sıfırdan herhangi bir ofseti kaldırın.İki numaralı girişi seçerek baş odasını göğüs odasına benzer şekilde kalibre edin. Bu kez, yüksek değeri eksi 20 yerine saniyede artı 20 mililitre olarak ayarlayın. Konut odasından uzakta sessiz bir alanda çalışın.Deney başlamadan önce hayvanları kısıtlayıcıya ve prosedürlere alıştırın. İnvaziv olmadığı ve anestezi gerektirmediği için, hayvanın rahat, iyi adapte olmuş ve sakin olduğu koşullarda çalışmak, odalar arasındaki saç sızıntılarının eğilimini sınırlayacak ve böylece verilerin kalitesini en üst düzeye çıkaracaktır. Hayvanları tartın.Hayvan için uygun kısıtlayıcıyı seçin. Hayvanı arka açıklıktan ilerleyerek tutucunun içine yerleştirin. Cihazı dikey olarak tutmak yardımcı olabilir.Hayvan yerine oturduğunda, arka pistonu yerleştirin ve aşırı kuvvet uygulamadan yavaşça yerine kilitleyin. Hayvanın normal nefes alıp almadığını görsel olarak kontrol edin. Gerekirse, kilitleme mekanizmasını hareket ettirerek konumunu ayarlayın.Hayvanın burun burunlarının, burnu kısıtlayıcının iç duvarlarına dayanacak şekilde burun konisinin dışına çıkıntı yaptığından emin olun. Göğüs odasının arka panelini ayırın. Hayvanı içeren tutucuyu göğüs odasındaki lastik açıklıktan geçirin ve odayı kapatın.Baş haznesini takın, önyargılı bir akış sağlayın ve hayvanın en az beş dakika rahatlamasına izin verin. Hayvan sakinleştikten sonra, ilk adımı seçerek komut protokolünü başlatın ve ardından Yürüt'e tıklayın. Bilgisayar ekranında hayvanın solunum sinyallerinin düzenli ve düzgün olup olmadığını kontrol edin.Yazılım, hesaplanan parametreleri otomatik olarak nefes bazında görüntüler. Hayvanın parametrelerinin stabil olduğunu doğrulayın. Solunum düzenini temel koşullar altında 10 dakikaya kadar kaydedin.Bir test maddesinin aerosol ile uygulanmasını içeren protokoller için, önce nebulizatörü gerektiği gibi zamanında ve görev döngüsünde ayarlayın. Bir araç meydan okuması gerçekleştirin ve yanıtı kaydedin. Gerekirse, nebülizördeki konsantrasyonu değiştirerek ve adımları yükselterek hayvanı test maddesinin artan konsantrasyonlarına maruz bırakın.Her uygulamadan sonra yanıtı kaydedin. Bu örnekte, mililitre metakolin başına 15 miligram test edilmiştir. Spesifik hava yolu direncindeki tepe artışı bir an sonra kaydedilir ve daha sonra yavaş yavaş başlangıç değerine döndüğü görülür.Deney oturumunun sonunda, hayvanı odasına ve barınak kafesine geri koyun. Seanslar arasında pletismograf odalarını temizleyin ve nebulizatörü suyla durulayın. Metin protokolünde açıklandığı gibi veri analizine devam edin.Burada gösterilen, iki grup BALB/c faresinde art arda üç gün boyunca başlangıçta tekrarlanan solunum fonksiyonu değerlendirmesinin sonucudur. Pulmoner alerjik inflamasyonu olan bir kontrol ve bir kontrol. Çift odacıklı pletismografi ile sağlanan bir dizi parametre için kararlı ve karşılaştırılabilir değerler elde edildi.Bu değerler solunum hızı, başlık hacmi, dakika ventilasyonu, end-inspiratuar duraklama, orta başlık ekspiratuar hacminde akış ve spesifik hava yolu direnci için çizildi. Solunum fonksiyonundaki değişiklikler ve artan inhale metakolin dozlarına yanıt, kontrol ve alerjik C57BL / 6 farelerinde yanıt derecesini değerlendirmek için ardışık günlerde de gerçekleştirildi. Sonuçlar, ikinci ve üçüncü günde alerjik farelerde abartılı bir yanıt derecesi ile artan metakolin dozları ile spesifik hava yolu direncinde beklenen ilerleyici artışı göstermektedir.Ertesi gün Newton direnci zorlanmış salınım tekniği ile ölçüldü. Bu parametredeki değişiklikler esas olarak büyük iletken hava yollarının direncindeki değişiklikleri yansıtır. Başlangıçta ve metakoline yanıt olarak ölçülen Newton direnci, aynı hayvanlarda önceki gün elde edilen ölçülen spesifik hava yolu direnci ile iyi bir korelasyon gösterdi.Bu teknik, aynı anda çok sayıda hayvanı değerlendirmek, akut bir yanıtın kinetiğini yakalamak ve birkaç gün süren bir deney sırasında solunum fonksiyonunu tekrarlanan bir şekilde ölçmek için uygundur. İşlemi takiben, hava yolu direnci gibi solunum mekaniğinin doğrudan ölçümleri ile değerlendirmeyi tamamlamak için zorla ilişkilendirme tekniği gibi diğer yöntemler de gerçekleştirilebilir. Çift odacıklı pletismografi, özellikle deney protokolü hayvanların bilinçli olmasını gerektirdiğinde, solunum paternini ve hava yolu tıkanıklığının coğrafyasını değerlendirmek için gerçekten ilginç bir yaklaşım sağlar.

assessment-respiratory-function-conscious-mice-double-chamber

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Alerjik astım Deneysel fare modelleri hastalığı patogenezinde okuyan ve yeni ilaçlar geliştirmek için yeni olanaklar sunar. Bu modeller de alerjik immün yanıt, hava yolu inflamasyonu ve pulmoner patofizyolojisi yöneten ölçüm faktörleri için uygundur.

Alerjen Bağlı Astım murin Modeli

SCIREQ Inc, Montreal, Qc; İşbu Protokol solunum sistemi mekaniği ölçümleri yanı sıra zorla salınım tekniği kullanarak farelerde inhale metakoline hava yolu duyarlılığı değerlendirilmesi (flexiVent yürütmek için gerekli prosedürleri ayrıntılı bir adım adım açıklamasını sağlar , Kanada).

Zorla Salınım Tekniği kullanarak Fare Solunum Sistemi Mekanik Değerlendirilmesi

Solunum fizyolojisinin değerlendirilmesi geleneksel hayvanın kısıtlama veya sedasyon gerektiren teknikleri, dayandığı etti. Yarı tüm vücut pletismografi Ancak, hayvan modellerinde solunum fizyolojisi hassas, non-invaziv, kantitatif analiz sağlar. Ayrıca, tekniği uzunlamasına çalışmalar için izin farelerde solunum değerlendirmesini tekrarlanan sağlar.

Yarı Tüm vücut pletismografisi kullanılarak Farelerde Solunum Fonksiyon Ölçme

Unrestrained barometrik plethysmography uyanık farelerde solunum paterni ölçmek için kullanılır. Standart bir protokol altında 15 s segmentleri sessiz nefes uzun bir süre benzer değerleri görüntülemek olduğunu göstermektedir. Bu metodoloji aynı zamanda apne ve artırılmış nefeslerin haznedeki ilk saat boyunca ölçülmesine olanak sağlar.

Kontrolsüz Barometrik Plethysmography ile Senescent Farelerde Nefes Alma Şekli Elde Etme Yöntemi

Bu protokol, bakteriyel solunum yolu hastalığının ilerlemesini invaziv olmayan bir şekilde izlemek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografi aparatının yapımını ve kullanımını sunar.

Solunum Melioidozu Sırasında Akciğer Fonksiyonunu Karakterize Etmek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografisi

Hiperinsülinemik öglisemik kelepçe, ya da insülin kelepçe, insülin etkisini değerlendirmek için altın...

Bilinçli Mesnetlenmemiş Fare hiperinsülinemik öglisemik Kelepçeleri

Bu yayının amacı, kantitatif vektör tabanlı analizi kullanılarak kronik omurilik yaralanması olan kişilerde solunum kas aktivasyon kalıpları karakterize etmek için bir çok kas yüzeyel EMG yaklaşım bizim orijinal bir çalışma sunmaktır.

Kronik Spinal Kord Yaralanması Bireylerde Solunum Motor Kontrol Değerlendirmesi (RMCA) kullanarak Solunum Kas Aktivasyon Değerlendirilmesi

Sağ ventrikül (RV) işlev bozukluğu, kardiyovasküler hastalığın patojenezine önemli olan, ancak sınırlı yöntemler ile değerlendirilmesi için kullanılabilir. Ultrason görüntülemede son gelişmeler boyuna RV çalışmada non-invaziv bir ve doğru bir seçenek sunar. Bu yazıda, detay RV basıncı aşırı bir fare modeli kullanılarak bir adım-adım ekokardiyografi yöntemi.

Transtorasik Ekokardiyografi ile Pulmoner Arter Konstrüksiyon Fare Modeli sağ ventrikül yapı ve fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Glomerüler filtrasyon hızının (GFR) belirlenmesi, genel böbrek fonksiyonunu değerlendirmek için altın standarttır. Bununla birlikte, bu parametreyi ölçmek için geleneksel prosedürler zahmetlidir ve büyük bir zaman yatırımı gerektirir. Burada, GFR'yi transkutanöz olarak belirlemek için daha hızlı ve minimal invaziv bir yöntem tanımlanmıştır.

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Bu çalışmada art arda fareler için ozon yüksek konsantrasyonda açarak yeni bir kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) hayvan modeli başarılı nesil açıklar.

Kronik obstrüktif akciğer hastalığı manken tekrarlanan ozon maruz farelerde nesil

Öğrenin çift-odası pletismografi ile bilinçli farelerde solunum fonksiyonunu değerlendirme yöntemini. Bu teknik, anestezi gerektirmeden güvenilir solunum verileri sağlar ve ilaç geliştirme çalışmalarında kullanılır.

Solunum fonksiyon çift-odası pletismografisi tarafından bilinçli farelerde değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet