Name: Küçük moleküllere steril koşullarda bitki yanıt-e doğru değerlendirmek için Hydroponic sistemi esnek bir düşük maliyetli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-08-25T13:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 27 s
Description: Keşfedin bitki biyolojisinde düşük maliyetli hidroponik sistem kullanarak steril koşullarda büyük ölçekli deneyler. Arabidopsis thaliana ile kök ve sürgün ayrımı yaparak moleküler ve fizyolojik süreçleri inceleyin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser São Paulo Araştırma Vakfı (FAPESP; tarafından desteklenen 12/19561-0 vermek) ve Max Planck toplum. Elias F. Araújo (FAPEMIG 14/30594), Carolina C. Monte-Bello (FAPESP; Grant 14/10407-3), Valéria Mafra (FAPESP; Grant 14/07918-6), ve Viviane C. H. da Silva (burunları/CNPEM 24/2013) arkadaş grupları için müteşekkiriz. Yazarlar Institut Jean Pierre Bourgin (INRA, Versailles, Fransa) Christian Meyer cömertçe RPS6 karşı antikor verdiğiniz için teşekkür ederiz. Yazarlar RTV UNICAMP teşekkür ve Ed Paulo Aparecido de Souza Manoel ses sırasında teknik destek için kayıt.

1. sıvı ve katı Kültür medya hazırlanması
<ol><li>Yarı güçte Murashige ve Skoog (MS) orta vitaminleri ile [0.0125 mg/L cobalt(II) klorür pentahydrate, 0.0125 mg/L copper(II) sülfat pentahydrate, 18,35 mg/L ethylenediaminetetraacetate ferrik sodyum, 3.10 mg/L kullanarak sıvı bir ortam hazırlamak Borik asit, potasyum iyodür, 8,45 mg/L manganez 0.415 mg/L sülfat monohidrat, 0,125 mg/L sodyum molibdat dihydrate, 4.30 mg/L çinko sülfat heptahydrate, 166.01 mg/L kalsiyum klorür, potasyum dihydrogen fosfat, 950 mg/L 85 mg/L Potasyum nitrat, magnezyum sülfat 90.27 mg/L, 825 mg/L amonyum nitrat, 1 mg/L glisin, 50 mg/L myo-inositol, 0.25 mg/L, Nikotinik asit, 0.25 mg/L piridoksin hidroklorür ve 0,05 mg/L tiamin hidroklorür] 0, 25 g/L ile desteklenmiş MES ve pH 10 M KOH ile 5.8 için ayarlayın.</li>
	<li>10 g/L agar yarı güçte MS-katı orta yapmak için ekleyin. Otoklav kullanmadan 20 dk önce için 121 ° C'de orta.</li>
</ol>2. hydroponic sistemi montajı
Not: Aşağıdaki adımları titizlikle hydroponic sistemi oluşturmak için takip edilmelidir.
<ol><li>
Malzeme sterilizasyon
	<ol>
<li>Otoklav çantada pipet ucu minitanks kullanılacak raflar (olmadan kapakları) paketi. Otoklav 20 dk, 15 psi için 121 ° C'de rafları. Not: Aşağıdaki boyutları biz kullanılan polipropilen pipet ucu raf vardı: 120 mm (uzunluk) x 89 mm (genişlik) x 55 mm (yükseklik). Pipet ucu düz bir yüzeye kültür orta eklenmesi için bir alan olması gerekir. Diğer ipucu raflar kullanılabilir ( Tablo malzemelerigörmek). Not: hydroponic sistemi montaj prosedürü bu temizlenmiş ve dezenfekte kullanmadan ile % 70 etanol önce bir laminar akış başlık kullanmak gereklidir. Deneyci bir laboratuar önlüğü giyiyorsun, ellerini yıkamak ve herhangi maruz deri ve onları % 70 etanol ile dezenfekte. Eldiven ilaç uygulama dışında isteğe bağlı bulunmaktadır.</li>
		<li>(Tek kullanımlık plastik kutular, yapışkan bant, pipetler, makas ve cımbız) % 70 etanol ile laminar akış hood girmeden önce açıklanan tüm aksesuarları temiz. Kukuleta izin veriyorsa, hydroponic sistemi çalışma alanının dekontamine tutmak için montaj öncesinde 10 min için UV ışığı açın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Montaj minitank
	<ol>
<li>Pipet Ucu yapışkan bant (Şekil 1B) ile düz üst yüzeyi kapatın. Mümkünse, UV altında 10 dakikadır açık bırakın.</li>
		<li>Erimiş katı MS kültür orta (hafif sıcak) 180 µL her şey çok kanallı pipet (Şekil 1 c) kullanarak ekleyin. Not: birçok tankları hazırlanırken, bir Pinar güçlendirilerek üzerinden MS orta engellemek için kullanın.</li>
		<li>Orta tamamen (yaklaşık 30 dk için) kuvvetlendirmek için izin. Not: katılaşma süresi boyunca, UV ışığı açılabilir.</li>
		<li>Pipet Ucu raf tamamen sıvı MS kültür orta (Şekil 1 d) ile doldurmak ve yakın temas katı ve sıvı medya arasında olduğundan emin olun.</li>
		<li>Pipet ucu düz üst yüzeyi yapışkan bantlar kaldırmak ve rafa dikkatli bir şekilde uygun. Hydroponic sistemi artık steril tohum almak hazırdır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. tohum sterilizasyon
<ol><li>500 Arabidopsis tohum bir 1.5 mL microtube yerleştirin. Deney için gerekli tesisleri sayısına göre gerektiği gibi çok mikrotüpler kullanın.</li>
	<li>Nazik bir ajitasyon ile 2 min için % 70 etanol ile tohum yıkayın. Tohumlar sakin, sonra etanol dikkatli bir şekilde çıkarın izin.</li>
	<li>1 mL 2 µL polysorbate 20 deterjan içeren bir % 10 sodyum hipoklorit çözeltisi ekleyin. 5 dk. Kaldır için çözüm çözüm dikkatli bir şekilde tahrik.</li>
	<li>Tüm çamaşır suyu kalıntı tamamen (yaklaşık 5 x) kaldırılıncaya kadar tohum steril distile su ile durulayın. Not: yüzey Sterilizasyon sonra tohumlar steril distile su içinde dalmış ve çimlenme eşitlemek 5 d için karanlıkta 4 ° C'de tabakalı. Not: Setaria viridis (katılım A10.1) tohumları konsantre sülfürik asit (fiziksel uyuşukluk kırmak) 15 dakika içinde preincubated, steril distile suda iyice yıkanır ve sonra % 5 sodyum hipoklorit çözümle disinfested % 0.1 polysorbate 20 nazik ajitasyon21ile 5 min için içeren. Kalan sterilizasyon adımları için Arabidopsis tohumlar açıklananlara aynıydı.</li>
</ol>4. tohum uygulama
<ol><li>200 µL bahşiş ekstremite steril neşter yardımıyla hafifçe kesilmiş.</li>
	<li>Pipet ucu düz üst yüzeyi sağlam kültür orta içine Arabidopsis tohum pipette. Orta düz--dan gevşetin değil dikkat çekmek; Aksi takdirde, tohum gölgeli olacak ve fidan düzgün genişleyemez (Şekil 1E). Not: (yukarı doğru konumlandırılmış embriyo ile) Setaria tohumlar için steril bir cımbız kullanın.</li>
	<li>Yüksek nem korumak ve çevrenin mikroorganizmalar (1F rakam) ücretsiz tutmak için tek kullanımlık plastik kutu içinde mümkün olduğunca çok sayıda minitanks saklayın.</li>
	<li>İyice kirlenmesini önlemek için yapışkan bant kullanarak tek kullanımlık plastik kutu mühür.</li>
	<li>Hydroponic sistemleri faiz bitki için uygun büyüme şartları ile bir büyüme odasına koyun. Not: Bu çalışmada, aşağıdaki koşullar kullanılmıştır: nem oranı % 75 ve 150 µmol m-2 s-1 olma ve Arabidopsisequinoctial koşulları 12 h ışık (21 ° C) / 12 h karanlık (19 ° C) veya 300 µmol m-2 s-1 , olma ve 12 h ışık (28 ° C) / 12 h karanlık (25 ° C) Setaria (Şekil 1G ve 1 H) için.</li>
</ol>5. hedef Rapamycin kinaz etkisizleştirmek için bu Hydroponic sistemi doğrulanıyor
Not: Bu hydroponic sistemi başlangıçta bitkiler, genel olarak, çok büyük ölçekli deneyler uygulanması pahalıdır kimyasal yönetimini kolaylaştırmak için geliştirilmiştir. Kavramının bir kanıtı olarak, ATP rekabetçi inhibitörü AZD-8055, özellikle ATP bağlama sitesi TOR protein kinaz22hedef bilinmektedir, A. thaliana Columbia-0 (fidan faaliyete TOR baskı takip etmek istihdam edildi Nottingham Arabidopsis stok Merkezi, NASC ID: N22681). Burada, kullanılan iletişim kuralı kısaca açıklanmıştır.
<ol><li>Sahne 1,04 BBCH göre ölçekli kadar23 (için yaklaşık 11 d) tohumları hydroponically yukarıda açıklanan iklim koşulları altında büyümeye. Besin çözüm, ya da taze orta içeren % 0.05 DMSO (kontrol), 2 µM ile yerine AZD-8055 (TOR inhibitörü) DMSO, veya tedavi (sahte), geceler (tr) sonunda seyreltilmiş.</li>
	<li>Tedavi sonrası bazı fidan farklı zaman noktalarda hasat veya roots ve shoots ayırabilirsiniz. Sıvı azot örnekleri olduğun yerde kal, robot bir değirmeni ince bir toz için eziyet (bkz. Tablo reçetesi) ve toz-80 ° C'de kullanmak kadar saklamak.</li>
	<li>Immunoblot karşı fosforile ve sigara fosforile formlara 40'lı ribozomal protein S6 (RPS6) göre Dobrenel vd. 24.</li>
	<li>Örnek depigmentasyon için sağlam fidan çamaşır suyu, onları distile suda yıkayın, iyot çözümünü 5 dk25için onları bırakın ve bir stereomicroscope (0,63 X amaç, 20 x yaklaşım ve 7,5 x büyüklüğü) fidan için fotoğraf bir Nişasta içeriği nitel değerlendirilmesi.</li>
	<li>Enzimatik bozulması ve yayımlanan glikoz ölçüm spectrophotometrically NADPH26,27NADP+ azaltılması için kaplin tarafından takip nişasta ölçmek.</li>
	<li>Toplam RNA ayıklama, cDNA sentezi ve kantitatif RT-PCR deneyleri Caldana vd tarafından tanımlandığı gibi gerçekleştirmek gerilmeler farklı türde için ilgili genlerin ifade düzeyini değerlendirmek için, 28 .</li>
	<li>İsteğe bağlı olarak, fidan benzer iklim koşulları [% 60 nem, 150 µmol m-2 s-1 olma ve equinoctial koşulları 12 h ışık (21 ° C) / 12 h karanlık (19 ° C altında 0.1 kapasite ile plastik tencere bahçıvanlıkla ilgili bir substrat olarak büyümek )] bunları hydroponically büyüyen fidan ile karşılaştırmak için. Not: ABF3 (At4g34000), ASN1 (At3g47340), gen ifade deneyleri için kullanılan hedef genlerin vardı ve TPS5 (At4g17770) ve ifade seviyelerine kullanarak delta-Ct yöntemi29 istihdam normalleştirilmiş ACT2 (At3g18780) veya PCR güçlendirme verimliliği % 100'ünü tüm örnekler üzerindeki varsayarak PDF2 (At4g04890) iç başvuru genler olarak. Kantitatif PCR için kullanılan oligonükleotid çifti vardı: ABF3 (GTTCTCAACCTGCAACACAGTGC; TCCAGGAGATACTGCTGCAACC), ASN1 (AGGTGCGGACGAGATCTTTG; GTGAAGAGCCTTGATCTTGC), TPS5 (CTGCTCTGATGCTCCTTCTTCC; AAGCTGGTTTCCAACGATGATG), ACT2 (CGTACAACCGGTATTGTGCTGG; CTCTCTCTGTAAGGATCTTCATG) ve PDF2 (TAACGTGGCCAAAATGATGC; GTTCTCCACAACCGCTTGGT).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Bu en iyi duruma getirilmiş hydroponic yapı başarılı vitro kültür bitkilerin sağlar. Tohum çimlenme su kuyusu üstünde pipet ucu düz yüzey sağlam orta, tohum ile besin çözüm batırılmış nerede sistemleri ile karşılaştırıldığında önemli bir kazanç. Bu sistemin büyük bir avantaj fide geliştirme sırasında sıvı orta aktarım, gerek kalmadan doğrudan temas kökleri elde edilmesi. Ayrıca, kimyasal arıtma azaltılmış bir hacim içinde sıvı ortamda kolayca uygulanabilir. Nem oranı yüksek, besin çözüm ve onun stok yenileme buh...

Büyüyen bitkiler hydroponics kullanarak avantajları büyük ve düzgün bitkiler, tekrarlanabilir deneyleri1,2,3etkinleştirme üretiminde yaygın olarak kabul edilmiştir. Bu sistemde besin çözüm bileşimi olabilir düzgün kontrollü ve bitki büyüme ve gelişmesi tüm aşamaları geri dönüştürülmüş. Ayrıca, kökleri için abiyotik stresleri, toprak-yetiştirilen bitkiler, besin açlık ve su eksikliği4gibi olabilir tabi değil. Kök/ateş büyüme ve onların olmadan hasat izlenmesi verdiğinden hydroponically mevcut morfolojik ve fizyolojik özellikleri oldukça benzeyen kültürlü toprakta yetişen bitkiler bu sistem geniş araştırma istihdam edilmiştir yaralanma2,5.
Kompozisyon ve besin çözüm konsantrasyonu değiştirme olasılığı nedeniyle, hydroponic koşullar kullanarak araştırma çoğunu gerçekleştirilen mikro - macronutrients1,ve3 işlevleri tanımlamak için ,6,7,8. Ancak, bu sistem çok geniş bir bitki biyolojisi, hormonlar ve kimyasallar bitkilerde işlevleri aydınlatmak gibi uygulamalarda yararlı olduğunu kanıtlamıştır. Örneğin, strigolactones, hormonlar9 ve brassinosteroid uygulama10 tarafından tetiklenen hızlandırılmış büyüme fenotip yeni bir sınıf olarak keşfi hydroponic koşullar altında gerçekleştirilen. Ayrıca, bu sistem ile etiketlenmiş izotoplar deneyler sağlar (Örneğin, 14N /15N ve 13CO2) protein ve metabolitleri içine onların birleşme değerlendirmek için11,12 Kütle spektrometresi tarafından.
Bu sistemde bitki araştırmaları önemi göz önüne alındığında, hydroponic kültürler yüksek sayıda tasarlanmıştır (i) aktarım hydroponic konteyner3, için plakalar üzerinden fidan kullanan sistemler dahil olmak üzere son birkaç yıl içinde 13; (ii) kök gelişimi2,14,15erken dönemlerinde erişimi sınırlar Taşyünü; (iii) Polietilen granül küçük moleküller/bakımları zor16homojen uygulama yapar kayan gövdesi olarak; veya (iv) azaltılmış bir numarası bitkiler9,17. Bu protokoller çoğunda açıklanan hydroponic tank hacmi genellikle büyük (1-5 L--dan 32 L kadar değişen küçük birimler)18kimyasalların uygulanması son derece pahalı hale getirir,. Her ne kadar birkaç çalışmalar aseptik koşullar8,altında bir hydroponic ekimi tarif19, sistem derleme genellikle oldukça zahmetli, naylon kafesler içine plastik ya da cam mükemmel uyum oluşan Konteyner5,8,17,20.
Bir modeli tesisi olarak Arabidopsis thaliana önemi nedeniyle, bu tür1,2,8,14,için18, hidroponik sistemleri çoğunluğu tasarlanmıştır 19 , 20. Bununla birlikte, birkaç çalışma raporlama onların çimlenme geliştirmek için tohumları Önarıtma ile diğer bitki türlerinin hydroponic büyüme özellikleri vardır ve eşitleme oranları vitro8,16 . A. thaliana ve ot Setaria gibi diğer türler de dahil olmak üzere bitki yetiştirme için steril koşullar sağlayan bir basit ve düşük maliyetli bakım hydroponic sistemi kurma için bir protokol geliştirdiğimiz büyük ölçüde çalışmak için viridis. Fide büyüme ekranı, senkronize ve kolayca takip gibi yöntem tanımlamak burada farklı deneyler için uygundur. Ayrıca, bu sistem olarak pek çok avantajı vardır: (i) onun derleme basittir ve bileşenlerini yeniden kullanılabilir; (ii) Bu sıvı orta içine farklı kimyasal uygulama kolaylığı sağlar; (iii) fidan çimlenme ve doğrudan kültür orta aktarım, gerek kalmadan hidroponik sistem büyümek; (iv çekim ve kök gelişimi/büyüme yakından nezaret etmek ve fidan hasar hasat; ve (v) bu mümkün kılan büyük ölçüde, çalışmak fizyolojik şartlarda sürdürmek.

<table><tbody><tr><td>Etanol</td><td>Merck</td><td>100983</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hipoklorit çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>425044</td><td></td></tr><tr><td>Polisorbat 20&nbsp; &nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P2287</td><td></td></tr><tr><td>Murashige ve Skoog (MS) besiyeri dahil vitaminler&nbsp;</td><td>Duchefa Biyokimya</td><td>M0222</td><td></td></tr><tr><td>2- ( N-morfolino) etansülfonik asit (MES) monohidrat</td><td>Duchefa Biochemie</td><td>M1503</td><td></td></tr><tr><td>Agar&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A7921</td><td></td></tr><tr><td>Potasyum hidroksit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>484016</td><td></td></tr><tr><td>Laminer akış başlığı</td><td>Telstar</td><td>BH-100</td><td></td></tr><tr><td>Ocak gözü</td><td>AREC</td><td>F20510011</td><td></td></tr><tr><td>Büyüme odası</td><td>Weiss Technik</td><td>HGC 1514</td><td></td></tr><tr><td>Cam Petri kabı (150 mm x 25 mm)</td><td>Uniglass</td><td>189.006</td><td></td></tr><tr><td>200 & mu; L pipet ucu rafları&nbsp;</td><td>Kasvi</td><td>K8-200-5 *</td><td></td></tr><tr><td>300 &mu; L çok kanallı pipet</td><td>Eppendorf</td><td>3122000060</td><td></td></tr><tr><td>300 &mu; L pipet uçları</td><td>Eppendorf</td><td>30073088</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; L pipet&nbsp;</td><td>Eppendorf</td><td>3120000054</td><td></td></tr><tr><td>200 &mu; L pipet uçları</td><td>Eppendorf</td><td>30000870</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Tramontina</td><td>25912/108</td><td></td></tr><tr><td>Cımbız</td><td>ABC Instrumentos</td><td>702915</td><td></td></tr><tr><td>Neşter bıçağı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2771</td><td></td></tr><tr><td>Yapışkanlı şeffaf bant (45mm x 50m)</td><td>Scotch 3M</td><td>5803</td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık plastik kutular, dış boyutlar: 353 mm (U) x 178 mm (G) x 121 mm ( H)</td> <td>Maxipac</td><td>32771</td><td></td></tr></tbody></table>

küçük moleküllere steril koşullarda bitki yanıt-e doğru değerlendirmek için hydroponic sistemi esnek bir düşük maliyetli

A Flexible Low Cost Hydroponic System for Assessing Plant Responses to Small Molecules in Sterile Conditions

Çok çeşitli bitki biyoloji çalışmalarda hydroponic kültürler kullanarak gerçekleştirilir. Bu çalışmada, bir vitro hydroponic büyüme sistemi bitki yanıt kimyasallar ve diğer maddelerin ilgi değerlendirmek için tasarlanmış sunulmaktadır. Bu sistem sırasıyla C3 ve C4 modeli tür Arabidopsis thaliana ve Setaria viridis, homojen ve sağlıklı fide elde etmek son derece etkilidir. Steril ekimi yosun ve mikroorganizma kirlenme, normal büyüme ve Kalkınma suda sınırlayan faktörler bilinen önler. Ayrıca, bu sistem bitki materyali ufak mekanik hasar ile büyük bir ölçekte hasat, hem de tek tek parçaları bir bitkinin hasat istenirse etkinleştirme ölçeklenebilir yapıdadır. Bu pipet rafları için büyüyen bitkiler, ana platformu olarak kullanır gibi bu sistemi kolay ve düşük maliyetli bir derleme, sahip olduğunu gösteren ayrıntılı bir protokol sağlanır. Bu sistemin fizibilite uyuşturucu AZD-8055, rapamycin (TOR) kinaz hedefinin kimyasal bir önleyici etkisini değerlendirmek için Arabidopsis fidan kullanılarak doğrulandı. TOR inhibisyon verimli roots ve shoots bir AZD-8055 tedavi sonrası erken 30 dk olarak algılandı. Ayrıca, AZD 8055 tedavi bitkiler beklenen nişasta-aşırı fenotip görüntülenir. Biz metabolik Cereyanlar, genel olarak, pahalı kullanımını gerektirir izotop etiketleme bileşikleri kullanarak değerlendirmek için bitki indükleyicileri veya inhibitörleri, de eylem izlemek için amaçlayan bitki araştırmacılar için ideal bir yöntem olarak bu hydroponic sistemi önerilen reaktifler.

TOR kinaz besin ve enerji hücre çoğalması ve büyüme tüm ökaryotlarda tanıtmak sinyal entegre büyük bir düzenleyicisidir. Çabaları TOR işlevleri tesislerinde aydınlatmak için TOR koşullu baskı RNA müdahale veya yapay mikroRNA28,30,31aracılığıyla içeren Arabidopsis transgenik satırların nesil içerir, embriyo öldürücü fenotip TOR nakavt bitkiler32,<sup cla...

Basit, çok yönlü ve düşük maliyetli vitro hydroponic sistemi başarılı bir şekilde, Steril koşullar altında büyük ölçekli deneyler etkinleştirme optimize edildi. Bu sistem bir çözüm ve moleküler, biyokimyasal ve fizyolojik çalışmalar için kökleri tarafından verimli kendi emilimi kimyasal uygulama kolaylaştırır.

Küçük moleküllere steril koşullarda bitki yanıt-e doğru değerlendirmek için Hydroponic sistemi esnek bir düşük maliyetli

A wide range of studies in plant biology are performed using hydroponic cultures. In this work, an in vitro hydroponic growth system designed for ...

Basit, çok yönlü ve düşük maliyetli bir in vitro hidroponik sistem başarıyla optimize edildi ve steril koşullar altında büyük ölçekli deneylere olanak sağladı. Bu sistem, moleküler, biyokimyasal ve fizyolojik çalışmalar için kimyasalların çözelti içinde uygulanmasını ve kökler tarafından verimli bir şekilde emilmesini kolaylaştırır. Bu sistemin, ilk gelişim boyunca homojen fideler elde etmenin yanı sıra, arabidopsis thaliana tohumlarını kullanarak kökleri ve sürgünleri ayırmada oldukça verimli olduğunu gösterdik.Hidroponik sistemi oluşturmak ve bitkileri steril, kontrollü koşullar altında yetiştirmek için aşağıdaki öğeler gereklidir. % 7 etanol,% 10 ağartma çözeltisi, polisorbat 20, vitaminler dahil MS ortamı. MES monohidrat, agar, potasyum hidroksit.Laminer akış başlığı, sıcak plaka, büyüme odası. Tek kullanımlık plastik kutular, steril cam Petri kapları, yapışkan bant, steril 200 ve 300 mikrolitre pipet uçları, makas, 300 mikrolitre çok kanallı pipet, 200 mikrolitre pipet, neşter bıçağı, cımbız ve 200 mikrolitre pipet ucu rafları. Pipet ucunun düz bir şekilde katı ortamla doldurulacak bir alana sahip olması çok önemlidir.Otoklavda mini tank olarak kullanılacak kapaksız pipet ucu

a-flexible-low-cost-hydroponic-system-for-assessing-plant-responses

Research

JoVE Journal

Environment

Çevre

Küçük doku örneklerinde birden fazla bitki hormonların hızlı çıkarma ve analiz için izin veren basit bir yöntem sağlanır. Bu prosedür, buhar faz ekstraksiyon ağırbaşlı arıtma adımı olarak kullanır. Örnekleri, GC / MS ile ağırlıklı olarak üretir kimyasal iyonizasyon (M 1) + iyonları tarafından analiz edilir.

Stres Cevaplarının sırasında Bitki Hormonları İzlenmesi

Kaynak: Nathoo, N., ve diğerleri. Bitki/Mikrop Moleküler Etkileşimlerinin ve Sinyallemenin Eşzamanlı ve Sistematik Analizi için Hidroponik Birlikte Yetiştirme Sistemi. J. Vis. Uzm. (2017).Bu video, steril koşullar altında bitki-bakteri etkileşimlerini incelemek için hidroponik bir birlikte yetiştirme sistemini göstermektedir. Bitki fideleri steril, asidik bir büyüme ortamına aktarılır, inkübe edilir ve Agrobacterium ile aşılamadan önce kontaminasyon açısından incelenir. Aktive edilmiş...

Bitki konakçılarının ve etkileşen bakterilerin moleküler tepkilerini incelemek için bir birlikte yetiştirme sistemi

Burada, bitki besleme çalışmaları için başarılı bir hidroponik sistem kurmak için takip etmesi kolay bir protokol sunuyoruz. Bu protokol Arabidopsis'te kapsamlı bir şekilde test edilmiştir ve belirli beslenme gereksinimlerini veya esansiyel olmayan elementlerin bitki büyümesi ve gelişimi üzerindeki etkisini incelemek için diğer bitki türlerine kolayca uyarlanabilir.

Topraksız: A yönlü Sistemi Toksik Elements Besin Uygunluk ve Pozlama Besin Tahsis ve Bitki Cevapları Eğitim için

Burada, yüksek numerik diyafram açıklığı hedefleri ve daldırma ortamı olarak perflorodekalin kullanılarak 3 güne kadar kök ve hipokotil gelişiminin yüksek çözünürlüklü konfokal zaman atlamalı görüntülemesi için basit bir teknik sunulmuştur.

Kök ve Hipokotil Gelişimin Uzun Süreli Konfokal Görüntülemesi için Basit Bir Oda

Tarif edilen hidrofobik kokültivasyon sistemi, metal örgülü elekler ile bozulmamış bitkileri destekler ve bunları bakteriler ile birlikte yetiştirir. Bitki dokuları, bakteriler ve salgılanan moleküller daha sonra aşağı akış analizleri için ayrıca hasat edilebilmekte, aynı anda her iki bitki barınağının ve etkileşen mikropların veya mikrobiyolojilerin moleküler tepkileri araştırılabilmektedir.

Bitki / Mikrop Moleküler Etkileşimlerinin ve Sinyalizasyonunun Eşzamanlı ve Sistematik Analizi için Hidroponik Birlikte Yetiştirme Sistemi

Bu makalede, ana kök ve kök tüyleri tek bir optik uçağı için confines bir iki katlı mikrosıvısal platformda Arabidopsis thaliana fidan kültür gösterilmiştir. Bu platform iyi kök morfolojisi de yüksek çözünürlüklü görüntüleme gelince gerçek zamanlı optik görüntüleme için başka araçlar tarafından kullanılabilir.

Kök saç Morfoloji Arabidopsis fidan bir iki katlı mikrosıvısal platformda görüntüleme

Burada bir hidroponik bitki büyüme tahlil türler varlığı ölçmek ve bitki kökleri ilk kolonizasyon ve farklı büyüme ortamları içine transfer edildikten sonra bakterilerin uzamsal dağılımı görselleştirmek için açıklanmaktadır.

Yüzen hidroponik sistemde Arabidopsis thaliana kökleri üzerinde bakteriyel kolonizasyon ve bakım izleme

Bir bileşik kitaplığın büyük ölçekli taraması ile foliar transpirasyon modülatörlerini tanımlamak için bir yöntem salıyoruz.

Helianthus Annuus'ta Büyük Ölçekli Termal Görüntüleme Taraması ile Bitki Transpirasyonunun Yeni Regülatörlerinin Belirlenmesi

Arabidopsis ve Medicago'nun kök sistem mimarisini (RSA) incelemek için basit laboratuvar araçları kullanıyoruz. Fideler ağ üzerinde hidroponik olarak yetiştirilir ve RSA'yı ortaya çıkarmak için bir sanat fırçası kullanılarak yayılır. Görüntüler tarama veya yüksek çözünürlüklü bir kamera kullanılarak alınır, daha sonra özellikleri haritalamak için ImageJ ile analiz edilir.

Bitki kök sistemi mimari özelliklerini haritalamak için basit bir protokol

Mikroplu veya mikropsuz filogenetik olarak farklı çeşitli bitkilerin büyümesini destekleyen cam bazlı, yarı hidroponik bir deney sistemi için bir protokol sunuyoruz. Sistem, farklı büyüme ortamlarıyla uyumludur ve aşağı akış analizi için tahribatsız kök eksüda örneklemesine izin verir.

Yarı Hidroponik Kök Eksüda Profillemesi için Çok Yönlü Cam Kavanoz Sistemi

Keşfedin bitki biyolojisinde düşük maliyetli hidroponik sistem kullanarak steril koşullarda büyük ölçekli deneyler. Arabidopsis thaliana ile kök ve sürgün ayrımı yaparak moleküler ve fizyolojik süreçleri inceleyin.

Küçük moleküllere steril koşullarda bitki yanıt-e doğru değerlendirmek için Hydroponic sistemi esnek bir düşük maliyetli

Daha fazla video keşfet