Name: 22C 3 kullanarak Anti-PD-L1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 43 s
Description: Öğrenin, küçük hücreli dışı akciğer kanserinde 22C3 antikor konsantresiyle PD-L1 testinin güvenilir ve tekrarlanabilir uygulanmasını. Bu yöntem, immünoterapi için hasta seçiminde altın standartla yüksek uyum sağlar ve patolog eğitimiyle doğru yorumlanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada Merck & Co., Inc., Kenilworth, NJ, ABD tarafından sponsor oldu. Fon çalışma tasarım, veri toplama ve analizi, yayımlamaya karar veya el yazması hazırlanması hiçbir rol oynamıştır.

Tüm yordamları Yerel Etik Komitesi tarafından onaylanmış olan (insan Araştırma Etik Komitesi, merkezi Hospitalier Universitaire de Nice/Tumorothèque BB-0033-00025).
Not: Bu protokol özel olarak piyasada bulunan bir otomatik IHC stainer (burada autostainer, Tablo malzemelerigörmek için denir) 22C 3 antikor konsantre kullanımı için tümör biyopsi ve sitoloji örnekler için ayarlanır.
1. tümör doku örneği hazırlanması
<ol><li>Tümör doku % 10 tarafsız tampon formalin (NBF) bir kaset içinde fix. Not: Proksimal akciğer tümörleri tümör doku genellikle bronkoskopi, ılımlı sedasyon altında bir akşam veya akciğer uzmanı tarafından gerçekleştirilen elde edilir. Periferik lezyonlar ve diffüz akciğer hastalığı, transbronchial veya iğne biyopsisi gösterilir. Bu yordamları genellikle bir ameliyat odası veya yoğun bakım yapılır.</li>
	<li>Kaset içinde parafin gömün. Not: Fiksasyon perfüzyon veya hemen sonrasında diseksiyon daldırma tarafından elde edilebilir ve genellikle 8-10 h gerektirir. Sabitleştirici Cilt 15-20 x örnek ses daha yüksek olmalıdır. Overfixation antijen maskeleme neden olabileceğinden daha 10 h için biyopsi doku düzeltmek için önerilmez. Yaklaşık 1 mm/saat oda sıcaklığında fiksasyon hızıdır.</li>
	<li>Sabit doku örneği doku işlemci balmumu ile sızmak ( Tablo malzemelerigörmek). Not: Dehidratasyon artan konsantrasyonları % 70, % 85 ve % 90 ile üç alkol banyosu içinde gerçekleştirilir. Su son olarak üç final mutlak alkol banyoları tarafından kaldırılır. Açıklığın üç Toluen banyoları ve balmumu infiltrasyon sıcak balmumu banyoları (44-60 ° C) içinde gerçekleştirilir.</li>
	<li>Doku erimiş parafin ile dolu bir kalıp içine embed ( Tablo malzemelerigörmek) ve katılaşma için bekleyin.</li>
	<li>Bir microtome üzerinde 3 mikron kalınlığında, parafin gömülü doku bölüm.</li>
	<li>Pozitif yüklü mikroskop cam parafin Şerite slayt ( Tablo malzemelerigörmek) transferi.</li>
	<li>Slayt 37 ° C'de 1 h için Kuru Not: doku bölümler (tercih edilen) 2-8 ° C'de veya oda sıcaklığında saklamak ilâ 25 ° antigenicity korumak ve kesit 15 d içinde leke C.</li>
</ol>2. sitoloji örnekleri hazırlanması
<ol><li>
Koruyucu bir çözümde bronşiyal yıkama toplamak (tablo malzemeleri görmek). Not: bunun için standart bronkoskopi tekniği kullanılır.<ol>
<li>Lavaj tatmak için bronş dağılımı. Yıkama temiz bir kap içinde toplamak. Etiket kapsayıcı hasta ile ilk ve son isim, Doğum tarihinizi ve numune kaynak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bronş yıkama 50 mL konik tüp aktarmak ve DL-Dithiothreitol 2 g ekleyin (bkz. Tablo reçetesi) girdap 30 dk için tüp toz ve sonra 250 x g oda sıcaklığında 5 min için de santrifüj kapasitesi.</li>
	<li>Süpernatant kaldırın ve 10 mL mucolytic çözeltisi ekleyin ( Tablo bilgilerikonusuna bakın).</li>
	<li>Örnek 20 dk için orta hızda (Seviye 9) sallamak ve 250 x g oda sıcaklığında 5 min için de santrifüj kapasitesi.</li>
	<li>Süpernatant kaldırmak ve hücre Pelet % 10 içeren koleksiyon tüplerde mevduat NBF.</li>
	<li>Bir hücre block hazırlık reaktif 4 damla ekleyin ( Tablo malzemelerigörmek) hücre Pelet için.</li>
	<li>Bir kaset için hücre Pelet aktarmak, % 10 tamir NBF ve parafin-hücre block hazırlık ve kesit için (bkz: adımları 1.1-1,7) katıştırmak.</li>
</ol>3. PD-L1 tahlil boyama
<ol><li>Autostainer ve bilgisayar geçiş yapar.</li>
	<li>Autostainer simgesine çift tıklayın ve Kullanıcı seçin.</li>
	<li>'Oluştur label' ve ardından 'Protokol'tıklayın.</li>
	<li>22C 3 protokolü üzerinde çift tıklatın. Not: Protokol ilk ' protokol oluştur 'ı tıklatarak autostainer'ın bilgisayara yüklenir. Tüm iletişim kuralı ek dosya 1sağlanır.</li>
	<li>Hastanın kimliği üzerindeki etiketi yazın ve 'Yazdır' ı tıklatın.</li>
	<li>Etiket slayt üzerinde sopa.</li>
	<li>Slayt çekmece seçildi çekmece butonuna basarak açın.</li>
	<li>Etiketli slayt üzerinde Termal pad up - ve içe dönük etiketi ile yerleştirmek.</li>
	<li>Slayt çekmeceyi kapat.</li>
	<li>Kapaklar dağıtıcılar kaldırmak ve reaktifler rafları reaktifleri yükleyin.</li>
	<li>Stainer Kaputu açın ve uygun ve pozisyonda tutmak emin reaktifler atlıkarınca rafları koyun.</li>
	<li>Kapağı kapatın.</li>
	<li>Yazılım, 'Çalışan'tıklatın ve kullanılacak araç'ı tıklatın.</li>
	<li>IHC yordamın bitiminde, slayt musluk suyu ve bir damla bir temizleme solüsyonu ile birkaç saniye yıkayın.</li>
	<li>Bir banyo etanol % 100 ve % 95 etanol ikinci bir banyo ile slayt birkaç saniye boyunca suyla temasa.</li>
	<li>Coverslipping makine coverslip otomatik bir yükleme slayta yerleştirin.</li>
</ol>4. PD-L1 boyama yorumu
Not: Nitelikli bir patolog PD-L1 IHC test yorumu yapmak gerekir.
<ol><li>Pozitif ve negatif denetimleri hastanın numune incelenmesi önce analiz ederek PD-L1 boyama kalitesini değerlendirmek. Not: hastanın numune üzerinde elde edilen sonuçları kontrol boyama edilemez ise geçersiz kabul edilir.</li>
	<li>En az 100 canlı tümör hücreleri mikroskop altında varlığını doğrulamak. Not: hastanın numune 100 tümör hücreleri olduğunda rapor.</li>
	<li>4 X düşük büyütme oranında tüm iyi korunmuş pozitif ve negatif tümör alanlarda değerlendirin. Not: düşük bir büyütme oranında kısmi membran boyama veya membran zayıf yoğunluğu (1 +) boyama tanımak zor olabilir.</li>
	<li>Kısmi veya tam hücre zarı boyama puan. Not: Sitoplazmik boyama yorumu dışlanmaları gerekir.</li>
	<li>TPS PD-L1 pozitif tümör hücreleri tüm tümör hücreleri iyi korunmuş tümör alanlarında mevcut göre oranının değerlendirilmesi tarafından hesaplayın. Not: Yalnızca uygun tümör hücrelerinin incelenmesi gerekir. Tüm hücresel gibi diğer öğeleri, bağışıklık hücreleri, nekrotik hücreleri, normal hücreleri ve yapıları, sınav hariç olmak zorunda.</li>
</ol>

<ol><li>Garon, E. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pembrolizumab+for+the+treatment+of+non-small-cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pembrolizumab for the treatment of non-small-cell lung cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 372 (21), 2018-2028 (2015).</li>
<li>Herbst, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pembrolizumab+versus+docetaxel+for+previously+treated%2C+PD-L1-positive%2C+advanced+non-small-cell+lung+cancer+%28KEYNOTE-010%29%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Pembrolizumab versus docetaxel for previously treated, PD-L1-positive, advanced non-small-cell lung cancer (KEYNOTE-010): a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 387 (10027), 1540-1550 (2016).</li>
<li>Reck, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pembrolizumab+versus+Chemotherapy+for+PD-L1-Positive+Non-Small-Cell+Lung+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pembrolizumab versus Chemotherapy for PD-L1-Positive Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1823-1833 (2016).</li>
<li>Langer, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carboplatin+and+pemetrexed+with+or+without+pembrolizumab+for+advanced%2C+non-squamous+non-small-cell+lung+cancer%3A+a+randomised%2C+phase+2+cohort+of+the+open-label+KEYNOTE-021+study%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Carboplatin and pemetrexed with or without pembrolizumab for advanced, non-squamous non-small-cell lung cancer: a randomised, phase 2 cohort of the open-label KEYNOTE-021 study.</a> The Lancet Oncology. 17 (11), 1497-1508 (2016).</li>
<li>Buttner, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+Death-Ligand+1+Immunohistochemistry+Testing%3A+A+Review+of+Analytical+Assays+and+Clinical+Implementation+in+Non-Small-Cell+Lung+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Programmed Death-Ligand 1 Immunohistochemistry Testing: A Review of Analytical Assays and Clinical Implementation in Non-Small-Cell Lung Cancer.</a> Journal of Clinical Oncology. 35 (34), 3867-3876 (2017).</li>
<li>Folch, E., Costa, D. B., Wright, J., VanderLaan, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+cancer+diagnosis+and+staging+in+the+minimally+invasive+age+with+increasing+demands+for+tissue+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Lung+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Lung cancer diagnosis and staging in the minimally invasive age with increasing demands for tissue analysis.</a> Translational Lung Cancer Research. 4 (4), 392-403 (2015).</li>
<li>Padmanabhan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Adequacy+of+Small+Biopsy+and+Fine-Needle+Aspiration+Specimens+for+Molecular+Testing+by+Next-Generation+Sequencing+in+Patients+With+Lung+Cancer%3A+A+Quality+Improvement+Study+at+Dartmouth-Hitchcock+Medical+Center%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Pathology+%26+Laboratory+Medicine%22%5BJournal%5D)">Improving Adequacy of Small Biopsy and Fine-Needle Aspiration Specimens for Molecular Testing by Next-Generation Sequencing in Patients With Lung Cancer: A Quality Improvement Study at Dartmouth-Hitchcock Medical Center.</a> Archives of Pathology & Laboratory Medicine. 141 (3), 402-409 (2017).</li>
<li>Tsao, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTsao%2C+MS+%22IASLC+ATLAS+of+PD-L1+Immunohistochemistry+Testing+in+Lung+Cancer%22">IASLC ATLAS of PD-L1 Immunohistochemistry Testing in Lung Cancer</a>. , International Association for the Study of Lung Cancer (IASLC) Press. (2017).</li>
<li>Thunnissen, E., de Langen, A. J., Smit, E. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PD-L1+IHC+in+NSCLC+with+a+global+and+methodological+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Lung+Cancer%22%5BJournal%5D)">PD-L1 IHC in NSCLC with a global and methodological perspective.</a> Lung Cancer. , 102-105 (2017).</li>
<li>Ilie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+22C3+anti-PD-L1+antibody+to+determine+PD-L1+expression+in+multiple+automated+immunohistochemistry+platforms%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Use of the 22C3 anti-PD-L1 antibody to determine PD-L1 expression in multiple automated immunohistochemistry platforms.</a> PLoS One. 12 (8), e0183023(2017).</li>
<li>Ilie, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+22C3+anti-programmed+death+ligand+1+antibody+to+determine+programmed+death+ligand+1+expression+in+cytology+samples+obtained+from+non-small+cell+lung+cancer+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cytopathology%22%5BJournal%5D)">Use of the 22C3 anti-programmed death ligand 1 antibody to determine programmed death ligand 1 expression in cytology samples obtained from non-small cell lung cancer patients.</a> Cancer Cytopathology. 126 (4), 264-274 (2018).</li>
<li>Skov, B. G., Skov, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paired+Comparison+of+PD-L1+Expression+on+Cytologic+and+Histologic+Specimens+From+Malignancies+in+the+Lung+Assessed+With+PD-L1+IHC+28-8pharmDx+and+PD-L1+IHC+22C3pharmDx%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Immunohistochemistry+%26+Molecular+Morphology%22%5BJournal%5D)">Paired Comparison of PD-L1 Expression on Cytologic and Histologic Specimens From Malignancies in the Lung Assessed With PD-L1 IHC 28-8pharmDx and PD-L1 IHC 22C3pharmDx.</a> Applied Immunohistochemistry & Molecular Morphology. 25 (7), 453-459 (2017).</li>
<li>Russell-Goldman, E., Kravets, S., Dahlberg, S. E., Sholl, L. M., Vivero, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytologic-histologic+correlation+of+programmed+death-ligand+1+immunohistochemistry+in+lung+carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cytopathology%22%5BJournal%5D)">Cytologic-histologic correlation of programmed death-ligand 1 immunohistochemistry in lung carcinomas.</a> Cancer Cytopathology. 126 (4), 253-263 (2018).</li>
<li>Heymann, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PD-L1+expression+in+non-small+cell+lung+carcinoma%3A+Comparison+among+cytology%2C+small+biopsy%2C+and+surgical+resection+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cytopathology%22%5BJournal%5D)">PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens.</a> Cancer Cytopathology. 125 (12), 896-907 (2017).</li>
<li>Stoy, S. P., Rosen, L., Mueller, J., Murgu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Programmed+death-ligand+1+testing+of+lung+cancer+cytology+specimens+obtained+with+bronchoscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cytopathology%22%5BJournal%5D)">Programmed death-ligand 1 testing of lung cancer cytology specimens obtained with bronchoscopy.</a> Cancer Cytopathology. 126 (2), 122-128 (2018).</li>
<li>Ilie, M., Hofman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducibility+of+PD-L1+assessment+in+non-small+cell+lung+cancer-know+your+limits+but+never+stop+trying+to+exceed+them%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Lung+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Reproducibility of PD-L1 assessment in non-small cell lung cancer-know your limits but never stop trying to exceed them.</a> Translational Lung Cancer Research. 6 (Suppl 1), S51-S54 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Biz 22C 3 PD-L1 antikor konsantre ol, karşılık gelen klinik olarak doğrulanmış ticari test10,11ile karşılaştırarak kullanarak en iyi duruma getirilmiş bir LDT doğrulanmış var. 22C 3 antikor tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve PD-L1 IHC 22C 3 tahlil ≥1% TPS ve ≥50% kesme noktaları TPS olarak kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında sitoloji (~ %95) örnekler arasında yüksek bir uyumluluk oranı gösterdi yoğunlaşmıştır. Son zamanlarda tavsiye edilen olarak...

Son klinik deneyler pembrolizumab, programlanmış hücre ölümü 1 arasındaki etkileşimi (PD-1) engelleyen bir insanlaşmış monoklonal Igg4 kappa izotip antikor ve hastalarının tedavisinde PD-L1 ve PD-L2, onun ligandlar etkinliğini göstermiştir Gelişmiş NSCLC1,2,3,4.
Şu anda, pembrolizumab PD-L1-ifade NSCLC ≥50% ve hiçbir epidermal büyüme faktörü reseptörü (EGFR) veya Anaplastik Lenfoma kinaz (ALK) genomik tümör anomalileri3 bir PD-L1 ifade TPS her iki tedavi-naif hastalarda tedavisi için onaylanmıştır ve için daha önce bir PD-L1 TPS ≥1%1' in tedavi.
PD-L1 protein ifade IHC tarafından tespit anti-PD-1/PD-L1 tedaviler için yaygın bir akıllı biyomarker tahlil olarak kullanılmıştır. Pembrolizumab klinik çalışmalarda, PD-L1 formalin sabit parafin gömülü (FFPE) doku örnekleri ile elde edilen TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil5kullanarak tespit edilmiştir. Bu tahlil ABD Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) tarafından onaylanmıştır ve CE-Avrupa'da işaretlenmiş tümör PD-L1 TPS5belirlenmesi için olmuştur.
Ek genel seçenekleri PD-L1 TPS 22C 3 antikor konsantre kullanan UMTH ile güvenilir ve yüksek kaliteli değerlendirmeler için kurumlar arasında klinik hasta pembrolizumab uygunluk ile ilgili kararlar desteklemek için gerekli olan tedavi. Patoloji Laboratuvarı, çok sayıda arkadaşı tanılama PD-L1 IHC 22C 3 tahlil için erişemez. Bu nedenle, güvenilir ve tutarlı UMTH ek, yaygın olarak kullanılan IHC autostainer platformları ile uyumlu geliştirilmesi esastır.
Ayrıca, UMTH NSCLC hastalar sık sık kullanılabilir tek numune türü vardır sitoloji numuneleri kullanılarak kurmaya gerek yoktur. Bronkoskopi 100 tümör hücreleri belirtiyorsa PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil rezeksiyonu, çekirdek iğne biyopsileri ve bronchoscopies için doğrulanır. Her ne kadar yukarıdaki örnek türleri sık sık elde edilen, sitoloji örnekleri daha kolay toplanan ve bazı kurumlar6,7en yaygın olarak bulunan örnek türü vardır. Ancak, orada şu anda doğrulanan hiçbir teşhis tahlil sitoloji örnekleri PD-L1 ifadede değerlendirilmesi için kullanılabilir; güvenilir UMTH sitoloji örnekleri ile uyumlu daha fazla yüksek kaliteli PD-L1 test kolaylaştırmak.
Ayrıca, bir LDT klinik doğrulanmasını kurarken, IHC ilgili klinik olarak doğrulanmış ticari test8için benzer bir şekilde yapılmalıdır. Örneğin, birkaç önemli adımlar antikor titrasyonu, tedavi öncesi gecikmeler, kuluçka süresi ve güçlendirme sistemleri9gibi seri bölümlerde aynı sinyal almak için doğrulanması gerekir.
Son zamanlarda 22C 3 antikor konsantre tümör biyopsi ve sitoloji örnekleri10,11PD-L1 ifade değerlendirmek için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş LDT geliştirdik. Liberal düşünce topluluğu karşı "altın standart" PD-L1 IHC 22C 3 tahlil10,11ile yüksek bir uyum bulduk. Güvenilir, yüksek kaliteli PD-L1 bölgeler arasında genel olarak test bu klinik olarak doğrulanan iletişim kuralını destekler.

<table><tbody><tr><td>NovaPrep HQ1</td><td>Novacyt</td><td>NA</td><td>Sitoloji örnekleri için koruyucu solüsyon</td></tr><tr><td>Novaprep&reg; HQ + B</td><td>Novacyt</td><td>NA</td><td>Mukolitik çözelti</td></tr><tr><td>Tissue-Tek VIP 6</td><td>Sakura</td><td>6042 VIP 6</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek TEC 5 Doku Gömme Konsol Sistemi</td><td>Sakura</td><td>5229 TEC 5</td><td></td></tr><tr><td>mikroskop cam slayt SuperFrost Plus</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4951PLUS4</td><td></td></tr><tr><td>DL-Dithiothreitol tozu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D3801</td><td></td></tr><tr><td>Heidolph Multi Reax Vorteks Çalkalayıcı</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-889-410</td><td></td></tr><tr><td>Shandon Sitoblok</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>7401150</td><td></td></tr><tr><td>22C3 anti-PD-L1 konsantre antikoru</td><td>Agilent Dako</td><td>#M365329</td><td></td></tr><tr><td>PD-L1 IHC 22C3 pharmDx</td><td>Agilent Dako</td><td>SK006</td><td></td></tr><tr><td>Otomatik Boyama Bağlantısı 48</td><td>Agilent Dako</td><td>AS480</td><td></td></tr><tr><td>BenchMark ULTRA otomatik boyama makinesi</td><td>Ventana</td><td>#750-600</td><td></td></tr><tr><td>OptiView HQ Evrensel</td><td>Bağlayıcı Ventana</td><td>#760-700</td><td></td></tr><tr><td>OptiView HRP Multimer</td><td>Ventana</td><td>#760-700</td><td></td></tr><tr><td>OptiView Amplifikasyon H2O2</td><td>Ventana</td><td>#760-099</td><td></td></tr><tr><td>OptiView Amplifier</td><td>Ventana</td><td>#760-099</td><td></td></tr><tr><td>OptiView Amplifikasyon Multimer</td><td>Ventana</td> <td># 760-100</td><td></td></tr><tr><td>OptiView DAB</td><td>Ventana</td> <td># 760-700</td><td></td></tr><tr><td>OptiView Bakır</td><td>Ventana</td> <td># 760-700</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen II</td><td>Ventana</td> <td># 790-2208</td><td></td></tr><tr><td>Mavileştirme Reaktifi</td><td>Ventana</td> <td># 760-2037</td><td></td></tr><tr><td>Hücre Koşullandırma 1 (CC1)</td> <td>Ventana</td> <td># 950-124</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek Film Lamel Terlik</td><td>Sakura</td><td>4742</td><td></td></tr></tbody></table>

22c 3 kullanarak anti-pd-l1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri

Using 22C3 Anti-PD-L1 Antibody Concentrate on Biopsy and Cytology Samples from Non-small Cell Lung Cancer Patients

Pembrolizumab tedavinin küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) PD-L1-gelişmiş ifade ile hastaların birinci ve ikinci basamak tedavisi için onaylanmıştır. PD-L1 mesaj PD-L1 immünhistokimya (IHC) 22C 3 arkadaşı teşhis tahlil ile test, (TPS) sayı hangi bir tümör oranını verir, tümör dokusu üzerinde doğrulandı. Biz 22C 3 antikor (Ab) konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan bir IHC autostainer biyopsi ve sitoloji örnekleri için kullandığı bir en iyi duruma getirilmiş laboratuar geliştirilen test (LDT) geliştirdi. PD-L1 TPS 120 eşleştirilmiş bütün tümör doku bölümleri ve biyopsi örnekleri ile değerlendirildi ve biyopsi ve sitoloji örnekleri 70 ile eşleştirilmiş (bronş yıkama, n = 40; plevral efüzyon, n = 30). Konsantre tabanlı LDT biyopsi (~ %100) ve sitoloji arasındaki yüksek bir uyumluluk oranı her iki TPS PD-L1 IHC 22C 3 arkadaşı tahlil kullanarak kararlı PD-L1 IHC ifade karşılaştırıldığında (~ %95) örnekler gösterdi. 22C 3 Ab noktaları (≥1%, ≥50%) kesti. PD-L1 ifade her iki tümör doku ve sitoloji örnekler, belirlemek için 22C 3 Ab konsantre kullanarak burada anlatılan en iyi duruma getirilmiş LDT NSCLC hastalar ile tedavi için uygunluğu değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişleyecektir pembrolizumab tedavinin güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde.

Burada ve ayrıntılı olarak açıklandığı gibi bu grubun son yayınlar10,11' de sunulan yordamı kullanarak, en iyi duruma getirilmiş LDT klinik olarak cerrahi uygulanan hastalar 120 arşivleme FFPE NSCLC biyopsi örnekleri ile doğrulandı rezeksiyon veya biyopsi Pasteur Üniversitesi Hastanesi, Nice, Mart 2016 arasındaki askeri yürüyüş 2007. Ayrıca, sitoloji örnekleri PD-L1 ifade değerlendirme için 70 eşleştirilmiş doku biyopsisi örnekler...

22C 3 antikor konsantre üzerinde yaygın olarak kullanılan kullanır bir tahlil geliştirdiğimiz uygunluk ile pembrolizumab, tedavi için akciğer kanseri hastalarının güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde değerlendirmek için yetenek laboratuvarları dünya çapında genişletmek için immunohistokimyasal autostainer, biyopsi ve sitoloji örnekleri için.

22C 3 kullanarak Anti-PD-L1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri

Pembrolizumab monotherapy has been approved for the first- and second-line treatment of patients with PD-L1-expressing advanced non-small cell lung cancer ...

Tümör dokusu ve sitoloji örneğinde PD-L1 ekspresyonunu belirlemek için 22C3 antikor konsantresini kullanan bu yöntem, laboratuvarların immünoterapi için küçük hücreli dışı akciğer kanseri olan hastaların seçimini güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde değerlendirme yeteneğini genişletecektir. Bu tekniğin en büyük avantajı, altın standart test ile son derece uyumlu olması ve dünya çapında bölgeler arasında güvenilir, yüksek kaliteli PD-L1 testlerini destekleyecek olmasıdır. Genel olarak bu yönteme yeni gelen patologlar zaman zaman gözlenen tanecikli boyama nedeniyle mücadele edeceklerdir.Ayrıca, insan hücrelerinin boyanma biraz daha altın standart ile gözlenen daha yoğundur. Bu nedenle 22C3 LDT ile PD-L1 boyamadoğru yorumunu elde etmek için patologların eğitimi gereklidir. Prosedürü gösteren Bayan olacaktır.Marame Hamila, laboratuvarımda teknisyen. Başlamak için, tümör dokusunu %10 nötr tamponlu formalin ile bir kasete sabitleyin ve kaseti metin protokolünde belirtildiği gibi parafine gömün. Erimiş parafin le dolu bir kalıba sızmış dokuyu gömün.Parafin katılanına kadar dokunun küfte kalmasına izin verin. Bundan sonra, parafin gömülü doku üç mikrometre kalınlığında bölüm için bir mikrotom kullanın. Parafin şeridini pozitif yüklü cam mikroskop slaytına aktarın.Sonra, 37 santigrat derece bir saat slayt kuru. İlk olarak, koruyucu bir çözelti içinde bronşiyal yıkama toplamak. Yıkamaları 50 mililitrelik konik bir tüpe aktarın.DL-Dithiothreitol iki gram ekleyin ve 30 dakika boyunca tüp girdap, sonra oda sıcaklığında beş dakika boyunca 250 kez g santrifüj. Supernatant çıkarın ve bir mukolitik çözelti 10 mililitre ekleyin. Odayı 20 dakika orta hızda sallayın ve oda sıcaklığında beş dakika boyunca 250 kez g santrifüj.Bundan sonra, supernatant çıkarın ve% 10 nötr-tamponlu formalin içeren bir toplama tüpü içine hücre pelet mevduat. Bir hücre bloğu hazırlama aracısı dört damla ekleyin. Hücre peletini kasete aktarın.Daha önce tümör doku örnekleri hazırlamak için açıklanan süreci kullanarak parafin katıştırma ve kesit için hücre pelet düzeltin. Başlamak için, autostainer ve bilgisayar üzerinde güç. Autostainer simgesine çift tıklayın ve kullanıcıyı seçin.Etiket Oluştur'a ve ardından Protokol'e tıklayın. 22C3 protokolüne çift tıklayın. Hastanın kimliğini doldurun ve Yazdır'ı tıklatın.Bundan sonra etiketi slayta yapıştırın. Açmak için seçilen slayt çekmecesindeki düğmeye basın ve etiketlenmiş slağı yukarı ve içe bakacak şekilde termal pede yerleştirin. Slayt çekmecesini kapatın.Ardından, dağıtıcılardan kapakları çıkarın. Reaktifleri reaktif rafına yükleyin. Boyanın kaputunu açın ve reaktif raflarını reaktiflerin atlıkarıncaya yerleştirin, düzgün bir şekilde sığdığından ve pozisyonda tuttuklarından emin olun, sonra kaputu kapatın.Yazılımda, kullanılacak enstrümana tıklayın ve ardından Çalıştır'ı tıklatın. IHC prosedürünün sonunda, kaydırağı birkaç saniye durulamak için tek bir damla temizleme çözeltisi ile musluk suyu kullanın. Kaydırağı her biri birkaç saniye liğine iki etanol banyosuna sırayla batırarak susuzlaştırın, ardından kapağı otomatik olarak yüklemek için kaydırağı bir kapak makinesine yerleştirin.PD-L1 boyama kalitesini değerlendirmeye başlamak için, hasta örneğini incelemeden önce pozitif ve negatif kontrolleri analiz edin. Bir mikroskop kullanarak, en az 100 canlı tümör hücresinin varlığını doğrulayın. 4 kez düşük büyütme, tüm iyi korunmuş pozitif ve negatif tümör alanları değerlendirmek.Bundan sonra, kısmi veya tam hücre zarı boyama puan ve iyi korunmuş tümör bölgelerinde mevcut tüm tümör hücrelerine göre PD-L1-pozitif tümör hücrelerinin oranını değerlendirerek tümör oranı hesaplamak. Bu çalışmada bronşiyal yıkar veya plevral efüzyondan hazırlanan hücre bloklarında tümör oran skoru veya TPS eşleştirilmiş doku biyopsisi örnekleri için değerlendirildi. 22C3 antikor konsantresini PD-L1 IHC 22C3 eşlik eden analizile karşılaştırmak için biyopsi numuneleri ile temsili boyama desenleri kullanılır.TPS skorunun sürekli bir değişken olarak korelasyonunu ölçmek için kullanılan sınıf içi korelasyon katsayısı LDT ile altın standardı arasında %99'dur. 22C3 antikor konsantresini PD-L1 IHC 22C3 eşlik eden analizle karşılaştırmak için sitoloji örnekleri ile temsili boyama desenleri de kullanılmaktadır. Biyopsi ve sitoloji örneklerinin LDT ile uyum oranı TPS kesme noktalarından herhangi birini kullanırken %95'ten fazladır.TPS sürekli değişken olarak kullanırken sınıf içi korelasyon katsayısı 0.88 ile 0.90 arasındadır. Bir kez hakim, bu teknik hem doku ve sitoloji örnekleri için pozitiflik veya tümör histolojisi için kesme değerlendirmek altın standart ile yüksek bir uyum oranı verir. Bu prosedürü denerken, örneklerin HE slaytı ile birlikte değerlendirilmesi gerektiğini ve bazı zor durumlarda bağışıklık hücrelerini değerlendirmek için tamamlayıcı lekelerin sadece tümör hücrelerinde PD-L1 ekspresyonunun yanlış yorumlanmasını dışlamak için yapılabileceği unutulmamalıdır.Bu işlem den sonra ince iğne biyopsisi, EUS-FNA veya bronşiyal fırça gibi diğer örnekler değerlendirilebilir. Kliniklerde ayarı sonrasında, taht ın sağlamlığının akreditasyon aranarak, standart çalışma prosedürlerini izleyerek ve düzenli olarak dış kalite değerlendirme programlarına katılarak zaman içinde korunması gerekmektedir. Bu videoyu izledikten sonra, küçük hücreli dışı akciğer kanseri olan hastalardan yaygın olarak kullanılabilir IHC otostainer hem biyopsi ve sitoloji örnekleri üzerinde 22C3 anti-PD-L1 antikor konsantresi kullanarak optimize protokolü uygulamak için iyi bir anlayışa sahip olmalıdır.

using-22c3-anti-pd-l1-antibody-concentrate-on-biopsy-cytology-samples

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu videoda, küçük hücreli dışı akciğer kanseri hasta örneklerinde dolaşımdaki tümör hücreleri üzerindeki biyobelirteçleri karakterize etmek için bir teknik olan Dolaşımdaki Tümör Hücreleri (CTC) İmmünofloresan testi açıklanmaktadır. Bu test, kemoterapi, radyasyon ve olası immünoterapi tedavilerine yanıtı yansıtabilen tümör ve bağışıklık tepkisinin dinamik değişikliklerini izlemek için kullanılabilir.

CTC İmmünofloresan Testi: Dolaşımdaki Tümör Hücrelerini Karakterize Etmek İçin Bir Teknik

Bu protokol, küçük hücreli dışı akciğer kanserinden (NSCLC) doku ve sitoloji örneklerini korumak için kullanılan formalinle sabitlenmiş parafine gömülü tümör örneklerinin hazırlanmasını...

Formalinle Sabitlenmiş Parafine Gömülü Tümör Örneklerinin Hazırlanması: Küçük Hücreli Dışı Akciğer Kanserinden (KHDAK) Doku ve Sitoloji Örneklerini Koruma Protokolü

Detaylı bir iletişim kuralı için bir altı-marker multiplex ayirt panel en iyi duruma getirilmiş ve gerçekleştirilen, daha tutarlı sonuçlar ve daha kısa işlem süresi için bir otomatik stainer kullanarak. Bu yaklaşım doğrudan IMMUNO-Onkoloji araştırmalar amaçlı herhangi bir laboratuvar tarafından adapte edilebilir.

IMMUNO-Onkoloji araştırmalar Formalin sabit Karsinomu doku örnekleri Multiplex ayirt Panel otomatik

Dolaşımdaki tümör hücrelerinin (CtCs) karakterizasyonu çeviri araştırmalarında popüler bir konudur. Bu protokol, küçük hücreli dışı akciğer kanseri (NSCLC) hasta örneklerinde PD-L1 karakterizasyonu ve KTK'ların numaralandırılması için yarı otomatik immünoresans (IF) tahtını tanımlar.

İmmünfluoresans Ile Küçük Hücreli Olmayan Akciğer Kanseri Hastalarından Dolaşımdaki Tümör Hücrelerinin Yarı Otomatik PD-L1 Karakterizasyonu ve Numaralandırılması

Bu deneysel protokol, esas olarak tek kanallı antikor inkübasyon koşullarını optimize ederek ve klinik kökenli akciğer kanseri dokularında otofloresan ve kanal karışma problemlerini çözmek için antikorların ve kanalların ayarlarını ayarlayarak bir multipleks immünohistokimya (IHC) boyama yöntemini tanımlar ve optimize eder.

Parafine Gömülü Akciğer Kanseri Dokusu için Multipleks İmmünohistokimya Boyama

Bu makalede, hedefe yönelik transbronşiyal akciğer kriyobiyopsileri elde etmek için floroskopi, radial endobronşiyal ultrason ve konik ışınlı bilgisayarlı tomografi ile birlikte robotik yardımlı bronkoskopi yapmak için aşamalı bir yaklaşım tanımlanmıştır.

Hedefe Yönelik Akciğer Kriyobiyopsileri için Multimodal Görüntüleme ile Birleştirilmiş Robotik Yardımlı Bronkoskopi

Bu makale, biyoinformatik analiz ve deneysel doğrulama yoluyla primer Sjögren sendromu ve akciğer adenokarsinomunu birbirine bağlayan potansiyel yaygın patojenik mekanizmaları araştırmak için operasyonel prosedürleri ve önlemleri açıklamaktadır.

Akciğer Adenokarsinomu ile İlişkili Primer Sjögren Sendromu: Potansiyel Ortak Patojenik Mekanizmaların Araştırılması ve Deneysel Doğrulama

Bu el yazması tümör hücresi birikimi Akciğerlerde tümör metastazı, bir hayvan modeli ölçmek için bir yöntem açıklanır.

Akciğer tümör hücre işe alım tahlil

Burada, BioMILD kabul edilen detaylı Protokolü deneme erken akciğer kanseri teşhis için dolaşımdaki mikroRNA imza Sınıflandırıcısı sınama gerçekleştirmek için eleme mevcut.

MikroRNA tabanlı sıvı biyopsi: Plazma miRNA imza Sınıflandırıcısı (MSC) akciğer kanseri süzmek için bir deneyim

Bir hayvan modeli tümör hücreleri (CTCs) kanseri metastaz sırasında akciğer kolonizasyon teşvik dolaşan rolü deşifre için gereklidir. Burada kurduk ve başarıyla gerçekleştirilen bir vivo içinde tahlil özel olarak test etmek için gereksinimin akciğer kolonizasyon için CTCs polimer fibronektin (polyFN) Meclisi.

Tümör hücre görselleştirme akciğer dokusu içinde dolaşan bir akciğer kolonizasyon tahlil kurulması

Öğrenin, küçük hücreli dışı akciğer kanserinde 22C3 antikor konsantresiyle PD-L1 testinin güvenilir ve tekrarlanabilir uygulanmasını. Bu yöntem, immünoterapi için hasta seçiminde altın standartla yüksek uyum sağlar ve patolog eğitimiyle doğru yorumlanır.

22C 3 kullanarak Anti-PD-L1 antikor konsantre biyopsi ve küçük hücreli dışı akciğer kanserli hastalarda sitoloji örnekleri

Daha fazla video keşfet