Name: Sentez ve karakterizasyonu plasental kondroitin sülfat (plCSA) - Lipid hedefleme - polimer nano tanecikleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-18T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 55 s
Description: Keşfedin plasental kondroitin sülfat bağlayıcı peptit konjuge lipid-polimer nano taneciklerinin sentezini. Bu basit ve tekrarlanabilir yöntem, insan tümörleri ve plasental trofoblastlara hedefli ilaç teslimi için yenilikçi bir araç sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu eser hibe tarafından ulusal anahtar araştırma ve geliştirme programı of China (2016YFC1000402), Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81571445 ve 81771617) ve Guangdong Eyaleti doğal Bilim Vakfı (2016A030313178) için desteklenen X.F. ve X.F. için Shenzhen temel araştırma fonu (JCYJ20170413165233512)

1. stok çözümleri hazırlanması
<ol><li>%4 etanol sulu bir çözüm mutlak etanol 4 mL 100 mL Ultrasaf Su ile sulandrarak hazırlayın. Çözüm 4 ° C'de depolayın Not: Ultrasaf Su kirleticileri bakteri, partiküller, iyonlar veya enzimler gibi susuz olarak tanımlanır. Ultrasaf Su bir su arıtma sisteminden düşük anyonik kirlenme anlamına gelir kadar 18,2 mΩ·cm bir hedef direnci ile elde edildi.</li>
	<li>1 mg/mL Soya lesitin hisse senedi çözüm Soya lesitin 20 mL % 4 etanol sulu çözeltisi içinde 20 mg çözülerek hazırlayın. Soya lesitin hisse senedi çözüm 4 ° C'de depolayın</li>
	<li>Bir 25 mg/mL DSPE-PEG (2000)-COOH hisse senedi çözüm DSPE-PEG-COOH 100 mg 4 ml % 4 etanol sulu çözüm çözülerek hazırlayın. Mağaza-20 ° C'de hisse senedi çözüm</li>
	<li>Bir 10 mg/mL DOX 50 mg 5 ml Ultrasaf Su çözülerek DOX hisse senedi çözüm hazırlamak. Karanlıkta DOX hisse senedi çözüm 4 ° C'de depolayın.</li>
	<li>2 mg/mL PLGA hisse senedi çözüm PLGA 20 mg 10 ml Asetonitril çözülerek hazırlayın. PLGA hisse senedi çözüm 4 ° C'de depolayın Dikkat: Asetonitril yanıcı ve zehirli. Bir duman başlıklı özenle faaliyet ve laboratuvar mont, koruyucu gözlük ve lateks eldiven gibi uygun kişisel donanımları.</li>
	<li>Bir 0.1 M 2-(morpholino) ethanesulfonic asit (MES, pH 6.0) hisse senedi çözüm MES 2.17 g Ultrasaf Su 100 ml çözülerek hazırlayın. Hisse senedi çözüm 4 ° C'de depolayın</li>
</ol>2. DNPs sentezi
Not: DOX fotokimyasal yıkımı önlemek için tüm işlemleri karanlıkta gerçekleştirilmiştir. Nano tanecikleri tarafından daha önce raporlanmış tek adım sonication yöntemi11,13,14sentez.
<ol><li>%4 etanol sulu çözüm 3 mL steril 10 mL santrifüj tüpü ekleyin. Sonra Soya lesitin hisse senedi çözüm 90 µg, 210 µg DSPE-PEG-COOH hisse senedi çözüm ve 750 µg DOX hisse senedi çözümün 3 mL % 4 etanol sulu çözüm ekleyin.</li>
	<li>Santrifüj tüpü bir buz banyosu yerleştirin ve buz banyosu ultrasonik bir işlemci yerleştirin.</li>
	<li>1 mL şırınga ile 2 mg (1 damla/4-6 s) PLGA hisse senedi çözüm dropwise santrifüj tüpüne pipet. Bu arada, DNPs sentezlemek için 20 kHz Frekans ve %30 5 min için bir çıkış genliği ultrasonik bir işlemci kullanarak tüp solüsyon içeren temizleyicide. Not: küçük boyutları ile Tekdüzen parçacıklar sentezlemek için hangi PLGA çözüm tüpün içine damladı hızı yavaş olması gerekir ve kabarcık üretimi kaçınılmalıdır.</li>
	<li>DNPs 0.1 M MES arabellek (pH 6.0) Yukarıdaki çözüm yıkayarak arındırmak 3 kez bir santrifüj filtre (MWCO, 10 kDa) kullanarak. Santrifüj 4 ° C'de ve 1000 × g 3 dk her zaman için. Son olarak, yaklaşık 1 mL nano tanecikleri MES çözüldü kalmalıdır. Not: Bu yordam bir kabul edilebilir durdurma noktasıdır. Yoksa peptidler çekimlerine kullanılan, nano tanecikleri PBS arabellek (pH 7,4) tarafından saf ve saf DNPs-ebilmek var olmak stok içinde belgili tanımlık karanlık 4 ° C'de.</li>
</ol>3. DNPs için peptidler konjugasyon
<ol><li>
Ester etkinleştirme
	<ol>
<li>EDC 0.4 mg eklemek (son konsantrasyonu 2 mM) DNPs 1 ml.</li>
		<li>NHS 0,24 mg için tepki eklemek (son konsantrasyonu 2 mM). Not: reaktifleri çözünmüş ve hemen kullanımı için EDC ve NHS doğru miktarı kolay eklenmesi, hisse senedi bir çözüm hazır.</li>
		<li>Reaksiyon bileşenleri karıştırın ve tepki bir shaker yerleştirin; tepki için 30 dk - 1 saat içinde belgili tanımlık karanlık oda sıcaklığında izin verir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Amin tepki
	<ol>
<li>7.2-7,5 kullanarak arabellek pH artırmak PBS (20 ×, pH 7,4).</li>
		<li>Reaksiyon 0.5 mg plCSA hedefleme peptid (plCSA-BP, EDVKDINFDTKEKFLAGCLIVSFHEGKC) ekleyin. Not: toplamadan önce % 20 Asetonitril peptidler geçiyoruz. Peptidler eriyen değilseniz, bir banyo sonicator sonication yararlı olabilir.</li>
		<li>Çözüm karıştırın ve bir shaker yerleştirin; reaksiyon gecede karanlıkta 4 ° C'de devam etmek izin verir.</li>
		<li>Yer eşlenik çözüm diyaliz torbalar içine (MWCO, 3500 Da) diyaliz ve plCSA-DNPs arındırmak için 24 saat içinde belgili tanımlık karanlık oda sıcaklığında PBS (pH 7,4) arabellek kullanarak. Not: Alternatif olarak, adım olduğu gibi plCSA-DNPs elde etmek için 2.4 arıtma yerine olabilir.</li>
		<li>Hücre kültür uygulamaları için potansiyel precipitates kaldırmak için bir 0,22 µm steril enjektör filtreden Sulandırılan çözüm filtre.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. plCSA hedefli Lipid karakterizasyonu-polimer nano tanecikleri
<ol><li>
Dinamik ışık saçılma (DL) kullanarak hidrodinamik nanopartikül boyut ölçümü
	<ol>
<li>Ultrasaf Su (50-fold seyreltme) ile nano tanecikleri sulandırmak. Örnek 500 µL DLS veya zeta potansiyel enstrümanın talimatlara göre bir küvet içine yükleyin. Not: Zeta potansiyeli ve DLS cuvettes cihazın özelliklerine göre farklı olabilir.</li>
		<li>Ölçüm tamamlandıktan sonra parçacık çapı, polydispersity dizin (PDI) ve zeta potansiyel kaydetmek. Ortalama 4'ten elde edilen sonuçları okuma tekrarlanan ve standart sapmayı hesaplamak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Transmisyon Elektron mikroskobu (TEM) Not: Nano tanecikleri morfolojisi negatif leke yöntemiyle TEM tarafından gözlenmiştir. 24<ol>
<li>Ultrasaf Su (400-fold seyreltme) ile nano tanecikleri sulandırmak. Örnek bir TEM ızgara üzerine 20 µL ekleyin ve 5 min için oturmak sağlar.</li>
		<li>%2 (w/v) phosphotungstic asit 100 µL ekleyin ve damlacık 2 dk. için fitil uzakta oturmak.</li>
		<li>Oda sıcaklığında TEM kılavuz kuru.</li>
		<li>TEM ivme gerilim 80 küme kV ve nano tanecikleri görselleştirmek için 100.000 × görüntüyü büyüt.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Kapsülleme verimliliği (EE) belirlenmesi ve LE
	<ol>
<li>Standart eğri üretimi. Beş farklı konsantrasyonlarda DOX çözümler hazırlamak için DOX ultrasaf su dağıtılması: 1 µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 50 µg/mL ve 100 µg/mL. 480 DOX Solutions'da emilimini ölçmek nm UV-VIS Spektrometre ile. DOX konsantrasyonları dayalı standart bir eğri oluşturur.</li>
		<li>Nano tanecikleri 25 µL 500 µL Ultrasaf Su ile sulandırmak. Emme 480 ölçmek nm UV-VIS Spektrometre ile. İlaç konsantrasyonları tarafından standart eğri hesaplamak.</li>
		<li>LE aşağıdaki eşitliği kullanarak hesaplar: LE = ((nano tanecikleri ilaçların miktarı) / (Toplam ağırlık malzemelerin)) × %100.</li>
		<li>EE aşağıdaki eşitliği kullanarak hesaplar: EE = ((nano tanecikleri ilaçların miktarı) / (miktarı ekledi uyuşturucu)) × %100.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Bicinchoninic asit (BCA) tahlil kullanarak konjugasyon verimlilik ölçümü 25 , 26 , 27<ol>
<li>Standart peptid çözümleri (Tablo 1) veya plCSA-DNPs 25 µL pipet Çoğalt Mikroplaka wells içine. Her şey için çalışma reaktif 200 µL ekleyip karıştırın plaka bir plaka shaker 30 üzerinde de s.</li>
		<li>Plaka kapağı ve 30 dakika için 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
		<li>562 absorbans ölçmek nm bir plaka okuyucu üzerinde. PlCSA-DNPs plCSA konsantrasyonları hesaplamak için oluşturulan standart eğri'yi kullanın.</li>
		<li>Aşağıdaki denklemi kullanarak konjugasyon verimlilik hesaplamak: Konjugasyon verimliliği = ((nano tanecikleri peptid miktarı) / (miktarı ekledi peptid)) × %100.</li>
	</ol>
</li>
</ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>Şişe</td>
			<td>Seyreltici (μL) hacmi</td>
			<td>Birim ve peptid (μL) kaynağı</td>
			<td>Son peptid konsantrasyonu (μg/mL)</td>
		</tr>
<tr>
<td>A</td>
			<td>0</td>
			<td>stokunun 300</td>
			<td>1000</td>
		</tr>
<tr>
<td>B</td>
			<td>250</td>
			<td>şişe bir seyreltme 250</td>
			<td>500</td>
		</tr>
<tr>
<td>C</td>
			<td>250</td>
			<td>şişe B seyreltme 250</td>
			<td>250</td>
		</tr>
<tr>
<td>D</td>
			<td>250</td>
			<td>şişe C seyreltme 250</td>
			<td>125</td>
		</tr>
<tr>
<td>E</td>
			<td>300</td>
			<td>200 tane şişe D seyreltme</td>
			<td>50</td>
		</tr>
<tr>
<td>F</td>
			<td>250</td>
			<td>şişe E seyreltme 250</td>
			<td>25</td>
		</tr>
<tr>
<td>G</td>
			<td>400</td>
			<td>100 şişe F seyreltme</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>H</td>
			<td>500</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr>
</tbody></table>Tablo 1. Standart peptidler hazırlanması
5. floresans mikroskobu değerlendirme Choriocarcinoma (JEG3) hücrelerdeki nanopartikül Alım plCSA hedefli
<ol><li>Tohum hücreleri 1,0 × 10 steril 12-şey plakalar üzerine4 hücreleri/iyi ile tam DMEM/F12 (cDMEM/F12, % 1 penisilin/streptomisin ve % 10 fetal Sığır serum (FBS) içeren). Hücreleri % 60 izdiham 37 ° C ve % 5 CO2 nemli koşul altında büyümeye izin.</li>
	<li>Medyayı çıkarın ve 1 mL soğuk taze medya ile düşük serum içerik ekleyin (%5 FBS) ve DNPs ya da plCSA-DNPs (5 µg DOX eşdeğeri).</li>
	<li>Hücreleri ve 1 h için 4 ° C'de nano tanecikleri karışımı kuluçkaya.</li>
	<li>Sonra kuluçka, medyayı çıkarın ve hücreleri üç kez PBS ile yıkayın. Daha sonra 1 mL taze cDMEM/F12 ekleyin ve 30 dk 37 ° C'de hücreler kuluçkaya.</li>
	<li>CDMEM/F12 kaldırmak ve hücreleri üç kez PBS ile yıkayın.</li>
	<li>2 mL soğuk %4 paraformaldehyde (PFA) ekleyin ve hücreleri düzeltmek 15 dakika oda sıcaklığında kuluçkaya.</li>
	<li>PFA kaldırın. PBS 2 mL hücrelerle bir kez yıkayın. PBS DAPI içeren 1 mL ekleyin (1 µg/mL) için boyama, çekirdek ve 10 dakika oda sıcaklığında kuluçkaya.</li>
	<li>PBS Aspire edin ve hücreleri üç kez PBS ile yıkayın.</li>
	<li>Montaj orta ekleyin ve floresan DOX ve çekirdeği, sırasıyla görselleştirmek için mavi ve yeşil kanallarını kullanarak bir floresans mikroskobu ile görüntü.</li>
</ol>

<ol><li>Davis, M. E., Shin, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticle+therapeutics%3A+an+emerging+treatment+modality+for+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Drug+Discovery%22%5BJournal%5D)">Nanoparticle therapeutics: an emerging treatment modality for cancer.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 7 (9), 771(2008).</li>
<li>Nie, S., Xing, Y., Kim, G. J., Simons, J. W. <a target="_blank" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17439359">Nanotechnology applications in cancer.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 9, 257-288 (2007).</li>
<li>Jabir, N. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+on+the+current+status+of+cancer+nanomedicines%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Medical+Research+and+Opinion%22%5BJournal%5D)">An overview on the current status of cancer nanomedicines.</a> Current Medical Research and Opinion. 34 (5), 911-921 (2018).</li>
<li>Pillai, G. <a target="_blank" href="https://symbiosisonlinepublishing.com/pharmacy-pharmaceuticalsciences/pharmacy-pharmaceuticalsciences09.php">Nanomedicines for Cancer Therapy: An Update of FDA Approved and Those under Various Stages of Development.</a> SOJ Pharmacy & Pharmaceutical Sciences. 1 (2), 1-13 (2014).</li>
<li>Marta, T., Luca, S., Serena, M., Luisa, F., Fabio, C. <a target="_blank" href="https://www.hindawi.com/journals/jnm/2016/5436458/">What is the role of nanotechnology in diagnosis and treatment of metastatic breast cancer? Promising Scenarios for the Near Future.</a> Journal of Nanomaterials. 2016, e5436458(2016).</li>
<li>Dasari, S., Tchounwou, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cisplatin+in+cancer+therapy%3A+molecular+mechanisms+of+action%5BTitle%5D)+AND+%22European+journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Cisplatin in cancer therapy: molecular mechanisms of action.</a> European journal of Pharmacology. 740, 364-378 (2014).</li>
<li>Brigger, I., Dubernet, C., Couvreur, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanoparticles+in+cancer+therapy+and+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Nanoparticles in cancer therapy and diagnosis.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 64, 24-36 (2012).</li>
<li>Steichen, S. D., Caldorera-Moore, M., Peppas, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+current+nanoparticle+and+targeting+moieties+for+the+delivery+of+cancer+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">A review of current nanoparticle and targeting moieties for the delivery of cancer therapeutics.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 48 (3), 416-427 (2013).</li>
<li>Salanti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+human+cancer+by+a+glycosaminoglycan+binding+malaria+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Targeting human cancer by a glycosaminoglycan binding malaria protein.</a> Cancer Cell. 28 (4), 500-514 (2015).</li>
<li>Seiler, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Oncofetal+Glycosaminoglycan+Modification+Provides+Therapeutic+Access+to+Cisplatin-resistant+Bladder+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">An Oncofetal Glycosaminoglycan Modification Provides Therapeutic Access to Cisplatin-resistant Bladder Cancer.</a> European Urology. 72 (1), 142-150 (2017).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+delivery+of+doxorubicin+by+CSA-binding+nanoparticles+for+choriocarcinoma+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Targeted delivery of doxorubicin by CSA-binding nanoparticles for choriocarcinoma treatment.</a> Drug Delivery. 25 (1), 461-471 (2018).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Placenta-specific+drug+delivery+by+trophoblast-targeted+nanoparticles+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Placenta-specific drug delivery by trophoblast-targeted nanoparticles in mice.</a> Theranostics. 26 (2), 130-137 (2018).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-assembled+lipid--polymer+hybrid+nanoparticles%3A+a+robust+drug+delivery+platform%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Self-assembled lipid--polymer hybrid nanoparticles: a robust drug delivery platform.</a> ACS Nano. 2 (8), 1696-1702 (2008).</li>
<li>Zheng, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-step+assembly+of+DOX%2FICG+loaded+lipid-polymer+nanoparticles+for+highly+effective+chemo-photothermal+combination+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22ACS%22%5BJournal%5D)">Single-step assembly of DOX/ICG loaded lipid-polymer nanoparticles for highly effective chemo-photothermal combination therapy.</a> ACS. 7 (3), 2056-2067 (2013).</li>
<li>Fang, R. H., Aryal, S., Hu, C. -M. J., Zhang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick+synthesis+of+lipid%E2%88%92+polymer+hybrid+nanoparticles+with+low+polydispersity+using+a+single-step+sonication+method%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Quick synthesis of lipid− polymer hybrid nanoparticles with low polydispersity using a single-step sonication method.</a> Langmuir. 26 (22), 16958-16962 (2010).</li>
<li>Gu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Folate-modified%2C+indocyanine+green-loaded+lipid-polymer+hybrid+nanoparticles+for+targeted+delivery+of+cisplatin%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomaterials+Science%2C+Polymer+Edition%22%5BJournal%5D)">Folate-modified, indocyanine green-loaded lipid-polymer hybrid nanoparticles for targeted delivery of cisplatin.</a> Journal of Biomaterials Science, Polymer Edition. 28 (7), 690-702 (2017).</li>
<li>Mandal, B., Mittal, N. K., Balabathula, P., Thoma, L. A., Wood, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+in+vitro+evaluation+of+core-shell+type+lipid-polymer+hybrid+nanoparticles+for+the+delivery+of+erlotinib+in+non-small+cell+lung+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Development and in vitro evaluation of core-shell type lipid-polymer hybrid nanoparticles for the delivery of erlotinib in non-small cell lung cancer.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 81, 162-171 (2016).</li>
<li>Shi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+legumain-recognition+and+NIR+controlled+released+of+cisplatin-indocyanine+nanosphere+against+gastric+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Enhanced legumain-recognition and NIR controlled released of cisplatin-indocyanine nanosphere against gastric carcinoma.</a> European Journal of Pharmacology. 794, 184-192 (2017).</li>
<li>Grabarek, Z., Gergely, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zero-length+crosslinking+procedure+with+the+use+of+active+esters%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Zero-length crosslinking procedure with the use of active esters.</a> Analytical Biochemistry. 185 (1), 131-135 (1990).</li>
<li>Hadjipanayis, C. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EGFRvIII+Antibody-Conjugated+Iron+Oxide+Nanoparticles+for+Magnetic+Resonance+Imaging-Guided+Convection-Enhanced+Delivery+and+Targeted+Therapy+of+Glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">EGFRvIII Antibody-Conjugated Iron Oxide Nanoparticles for Magnetic Resonance Imaging-Guided Convection-Enhanced Delivery and Targeted Therapy of Glioblastoma.</a> Cancer Research. 70 (15), 6303-6312 (2010).</li>
<li>Sadhukha, T., Wiedmann, T. S., Panyam, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalable+magnetic+nanoparticles+for+targeted+hyperthermia+in+lung+cancer+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Inhalable magnetic nanoparticles for targeted hyperthermia in lung cancer therapy.</a> Biomaterials. 34 (21), 5163-5171 (2013).</li>
<li>Jennings, M., Nicknish, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+a+site+of+intermolecular+cross-linking+in+human+red+blood+cell+band+3+protein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Localization of a site of intermolecular cross-linking in human red blood cell band 3 protein.</a> Journal of Biological Chemistry. 260 (9), 5472-5479 (1985).</li>
<li>Staros, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-hydroxysulfosuccinimide+active+esters%3A+bis%28N-hydroxysulfosuccinimide%29+esters+of+two+dicarboxylic+acids+are+hydrophilic%2C+membrane-impermeant%2C+protein+cross-linkers%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry%22%5BJournal%5D)">N-hydroxysulfosuccinimide active esters: bis(N-hydroxysulfosuccinimide) esters of two dicarboxylic acids are hydrophilic, membrane-impermeant, protein cross-linkers.</a> Biochemistry. 21 (17), 3950-3955 (1982).</li>
<li>Valencia, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-step+assembly+of+homogenous+lipid%E2%88%92+polymeric+and+lipid%E2%88%92+quantum+dot+nanoparticles+enabled+by+microfluidic+rapid+mixing%5BTitle%5D)+AND+%22ACS%22%5BJournal%5D)">Single-step assembly of homogenous lipid− polymeric and lipid− quantum dot nanoparticles enabled by microfluidic rapid mixing.</a> ACS. 4 (3), 1671-1679 (2010).</li>
<li>Altintas, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanobody-albumin+nanoparticles+%28NANAPs%29+for+the+delivery+of+a+multikinase+inhibitor+17864+to+EGFR+overexpressing+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Controlled+Release%22%5BJournal%5D)">Nanobody-albumin nanoparticles (NANAPs) for the delivery of a multikinase inhibitor 17864 to EGFR overexpressing tumor cells.</a> Journal of Controlled Release. 165 (2), 110-118 (2013).</li>
<li>Maya, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cetuximab+conjugated+O-carboxymethyl+chitosan+nanoparticles+for+targeting+EGFR+overexpressing+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Carbohydrate+Polymers%22%5BJournal%5D)">Cetuximab conjugated O-carboxymethyl chitosan nanoparticles for targeting EGFR overexpressing cancer cells.</a> Carbohydrate Polymers. 93 (2), 661-669 (2013).</li>
<li>Deepagan, V. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+targeted+imaging+and+delivery+of+camptothecin+using+cetuximab-conjugated+multifunctional+PLGA-ZnS+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">In vitro targeted imaging and delivery of camptothecin using cetuximab-conjugated multifunctional PLGA-ZnS nanoparticles.</a> Nanomedicine. 7 (4), 507-519 (2012).</li>
<li>Totaro, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+investigation+of+EDC%2FsNHS-mediated+bioconjugation+reactions+for+carboxylated+peptide+substrates%5BTitle%5D)+AND+%22Bioconjugate+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Systematic investigation of EDC/sNHS-mediated bioconjugation reactions for carboxylated peptide substrates.</a> Bioconjugate Chemistry. 27 (4), 994-1004 (2016).</li>
<li>Sinz, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+cross-linking+and+mass+spectrometry+to+map+three-dimensional+protein+structures+and+protein-protein+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrometry+Reviews%22%5BJournal%5D)">Chemical cross-linking and mass spectrometry to map three-dimensional protein structures and protein-protein interactions.</a> Mass Spectrometry Reviews. 25 (4), 663-682 (2006).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LDLR-mediated+peptide-22-conjugated+nanoparticles+for+dual-targeting+therapy+of+brain+glioma%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">LDLR-mediated peptide-22-conjugated nanoparticles for dual-targeting therapy of brain glioma.</a> Biomaterials. 34 (36), 9171-9182 (2013).</li>
<li>Koren, E., Apte, A., Sawant, R. R., Grunwald, J., Torchilin, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-penetrating+TAT+peptide+in+drug+delivery+systems%3A+proteolytic+stability+requirements%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Cell-penetrating TAT peptide in drug delivery systems: proteolytic stability requirements.</a> Drug Delivery. 18 (5), 377-384 (2011).</li>
<li>Chu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topical+ocular+delivery+to+laser-induced+choroidal+neovascularization+by+dual+internalizing+RGD+and+TAT+peptide-modified+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Topical ocular delivery to laser-induced choroidal neovascularization by dual internalizing RGD and TAT peptide-modified nanoparticles.</a> International Journal of Nanomedicine. 12, 1353-1368 (2017).</li>
</ol>

X.F. ve B.Z. mucitler patent PCT/CN2017/108646 ve bir plCSA hedefli nanoparçacık sentezi yöntemi ve uygulama kapsayan SIAT tarafından gönderilmiş 201710906587.6 vardır. Hiçbir potansiyel çıkar çatışmaları diğer yazarlar tarafından açıklanması.

Bu iletişim kuralı plCSA BP Birleşik lipid-polimer nano tanecikleri sentezleme için verimli ve tekrarlanabilir bir yöntem sağlar. Lipid-polimer nano tanecikleri hazırlamak için tek adım sonication Yöntem hızlı, tekrarlanabilir ve Isıtma, vortexing veya buharlaşma içeren tipik nanoprecipitation yöntemlerden farklı değildir. Bu nedenle, Gelişmiş Yöntem sentez zaman önemli ölçüde azaltır. Buna ek olarak, bu protokol için kullanılan EDC/NHS bioconjugate peptidler ve nano tanecikleri antikorlar çekimlerine bir yaygın olarak k...

Bir etkili kanser tedavi yöntemi azaltır ve tümörleri ile en az sistemik toksisite ortadan kaldırır. Bu nedenle, başarılı tedavi yöntemleri keşfetmek için anahtar Seçici tümör hedefliyor. Nano tanecikleri kanser tedavisi için umut verici bir fırsat sunuyoruz ve moleküler derlemeler farklı fonksiyonel grubu ile ilaç etkinliğini artırmak ve azaltmak ilişkili yan etkileri1,2. Ayrıca, nanopartikül sistemleri esas hedef tümörler3ulaşmak için pasif ve aktif hedefleme yararlanmak.
Pasif hedefleme nano tanecikleri ve gelişmiş geçirgenliği ve tümör hücreleri ulaşmak için saklama (EPR) etkileri doğuştan gelen özellikleri patlatır. Katyonik lipozomlar başarıyla çeşitli antikanser ilaçlar tümör klinik uygulamaları4,5,6' teslim etmek için kullanılmaktadır. Potansiyel etkili kanser tedavi edici etkiye rağmen düşük ilaç konsantrasyonu tümör bölgesi ve tümör hücrelerinin normal dokuların ayırt etmek için bir yetersizlik pasif hedefleme nano tanecikleri7' nin iki önemli sınırlamaları vardır.
Etkin hedefleme stratejileri antijen-antikor, ligand-reseptör ve özellikle uyuşturucu tümörler8' e teslim etmek için diğer moleküler tanıma etkileşimleri yararlanın. Glikozaminoglikan plasental kondroitin sülfat (plCSA) genel olarak çoğu kanser hücreleri ve plasental trophoblasts ifade edilir. Ayrıca, sıtma protein VAR2CSA özellikle plCSA9,10' a bağlayabilirsiniz. Bu nedenle, VAR2CSA insan kanser hücrelerinin hedefleme için bir araç olabilir. Ancak, VAR2CSA için nano tanecikleri Birleşik zaman, tam uzunlukta protein nano tanecikleri penetrasyon tümör hücreleri içine sınırlayabilir. Son zamanlarda, biz Sıtma protein VAR2CSA türetilmiş bir plCSA bağlama peptid (plCSA-BP), keşfetti. plCSA-BP-Birleşik lipid-polimer nano tanecikleri hızla choriocarcinoma hücreleri ve önemli ölçüde artış doksorubisin (DOX) antikanser aktivite vivo içinde11yapıştırılmış; Bu parçacıklar da özellikle plasental trophoblasts gümrüklü ve uyuşturucu hedeflenen teslimat plasenta12için bir araç olarak hizmet verebilir.
Lipid-polimer nano tanecikleri lipid monolayer kabuk ve hidrofobik bir polimer çekirdek oluşur ve ilaç dağıtım için yeni bir taşıyıcı temsil eder. Bu nano tanecikleri lipozomlar ve kontrol edilebilir nanopartikül boyutu, yüksek biyouyumluluk, sürekli uyuşturucu serbest, yüksek ilaç yükleme verimliliği (LE) ve mükemmel istikrar13gibi polimer nanocarriers avantajlarını birleştirir. Bu çalışmada, biz bir tek adım sonication lipid-polimer nano tanecikleri sentezlemek için kullanılan yöntem. Bu yöntem hızlı, pratik ve ölçek-up için uygundur ve yaygın lipid-polimer nano tanecikleri hazırlamak için bizim grup11,14 ve diğerleri tarafından kullanılmıştır15,16,17,18 .
1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hidroklorid (EDC) crosslinking Aracısı içeren aminler ve carboxylates19biomolecules conjugating için kullanılan popüler bir carbodiimide var. EDC ek olarak, en yaygın konjugasyon reaktif yüzey ve nanoparçacık konjugasyon reaksiyonları20,21N-hydroxysulfosuccinimide (NHS) olduğunu. NHS yan tepkileri azaltmak ve istikrarı geliştirmek ve ester verimini22,23ara ürün.
Burada, plCSA hedefli lipid-polimer nano tanecikleri sentezleme için bir protokol açıklayın. İlk olarak, DOX yüklü lipid-polimer nano tanecikleri (DNPs) tek adım sonication sentezi açıklanmıştır. Sonra plCSA-BP-Birleşik lipid-polimer nano tanecikleri üretmek için EDC/NHS bioconjugate tekniği tanıttı. Bu bioconjugate teknik diğer antikorlar ve peptidler nano tanecikleri için çekimlerine de kullanılabilir. Son olarak, biz plCSA hedefli lipid-polimer nano tanecikleri karakterize etmek için kullanılan Fizikokimyasal özellikleri ve vitro tahlil tanımlamak. Bizce bu plCSA hedefli lipid-polimer nano tanecikleri en insani kanser ve plasental bozuklukları tedavi plasenta payloads hedeflenen teslimini ilaçlara hedeflenen teslimat için etkili bir sistem teşkil edebilir.

<table><tbody><tr><td>peptit sentezi için</td> <td>plCSA peptid</td><td>Shanghai GL Biochem</td><td>573518</td></tr><tr><td>Nanopartikül sentezi için</td>etanol<td>mutlak</td><td>Sinopharm Chemical</td><td>10009218</td></tr><tr><td>Nanopartikül sentezi için</td>soya<td>fasulyesi lesitini</td><td>Avanti Polar Lipids</td><td>441601</td></tr><tr><td></td><td>Nanopartikül sentezi</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>için DSPE-PEG-COOH Avanti Polar Lipids 880125Nanopartikül sentezi için doksorubisin</td><td>JKimetik</td><td>113424</td><td>Nanopartikül</td></tr><tr><td>sentezi için</td><td>asetonitril</td><td>Shanghai Lingfeng</td><td>1008621</td></tr><tr><td>Nanopartikül sentezi için</td><td>PLGA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>719897</td></tr><tr><td>Nanopartikül sentezi için</td><td>ultrasonik işlemci</td><td></td><td>Sonics VCX130</td></tr><tr><td>Santrifüj filtresi (MWCO 10 kDa)</td> <td>Millipore</td><td>nanopartikül</td><td>saflaştırma santrifüjü için</td>UFC801024</tr><tr><td></td><td>nanopartikül saflaştırma için</td><td>Sigma</td><td>3-18KS</td></tr><tr>Peptit konjugasyonu için<td>2- [morfolino] etansülfonik asit (MES)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>M3671</td><td>peptit konjugasyonu için</td></tr><tr><td>1-etil-3- (3-dimetilaminopropil) karbodiimid hidroklorür (EDC)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>3450</td><td>peptit konjugasyonu için</td></tr><tr><td>N-hidroksisüksinimid (NHS)</td><td>Peptit konjugasyonu için</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>56480</td></tr><tr><td>Diyaliz torbaları Nanopartikül</td><td>saflaştırma için</td><td>Spectrum</td><td>132592T</td></tr><tr><td>Hücre kültürü için</td><td>PBS</td><td>Hyclone</td><td>SH30028.01</td></tr><tr><td>10 mL santrifüj tüpleri, nanopartikül</td><td>sentezi için</td>polipropilen <td>Aladdin</td><td>S-025</td></tr><tr><td>15 mL santrifüj tüpleri, polipropilen</td><td>Corning</td><td>430791</td><td>çeşitli uygulamalar için</td></tr><tr><td>0.22 &mu; Nanopartikül saflaştırma için m steril şırınga filtresi</td><td>Millipore SLGV033RB</td><td></td><td></td></tr><tr><td>1 ml şırınga, polipropilen</td><td>Nanopartikül sentezi için</td><td>BD</td><td>328421</td></tr><tr><td>Malvern Zetasizer</td><td>Malvern</td><td>Nano ZS</td><td>partikül boyutu analyer için</td></tr><tr><td>TEM</td>için TEM ızgarası için<td>fosfotungstik asit</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TEM</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>için EMCN BZ10024aTEM İletim için UV-VIS spektrometresi</td><td>Leagene</td><td>DZ0035</td><td></td></tr><tr><td> elektron mikroskobu</td><td>JEOL</td><td>JEM-100CXII</td> partikül <td>boyutu analyeri</td></tr><tr><td>BCA reaktifi</td> için <td>A Thermo Fisher Scientific</td><td>23228</td><td>BCA testi için</td></tr><tr><td>BCA reaktifi B</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>23224</td><td>BCA testi için</td></tr><tr><td>96 Kuyulu Plakalar</td><td>Corning</td><td>3599</td><td> tahlil</td></tr><tr><td>Plaka okuyucu</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>Multiskan & trade; </td><td>BCA tahlili için</td>GO</tr><tr><td>12 oyuklu plakalar</td><td>Hücre kültürü için</td><td>Corning</td><td>3513</td></tr><tr><td>JEG3 hücre</td><td>Çin Bilimler Akademisi Hücre Bankası</td><td>TCHu195</td><td>İnsan plasentası</td></tr><tr><td>DMEM / F12</td><td>Hücre</td> kültürü için <td>SH30272.01</td><td>fenol kırmızı içermeyen</td></tr><tr><td>Fetal sığır serumu (FBS)</td> <td>GIBCO</td><td>10100</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin / streptomisin</td><td>GIBCO</td><td>Hücre kültürü için</td> <td>15070063</td></tr><tr><td>Floresan mikroskobu</td><td>OLYMPUS</td><td>CKK53</td><td></td></tr><tr><td>Hücre alımı için</td><td>paraformaldehit</td><td>Shanghai Lingfeng</td><td>1372021</td></tr><tr><td>Selür alımı için</td><td>DAPI</td><td>Sangon Biotech</td><td>A606584</td></tr><tr><td>Montaj ortamı</td><td>Selür alımı için</td> <td>Life</td><td>P36961</td></tr></tbody></table>

sentez ve karakterizasyonu plasental kondroitin sülfat (plcsa) - lipid hedefleme - polimer nano tanecikleri

Synthesis and Characterization of Placental Chondroitin Sulfate A (plCSA)-Targeting Lipid-Polymer Nanoparticles

Bir etkili kanser tedavi yöntemi azaltır ve tümörleri ile en az sistemik toksisite ortadan kaldırır. Aktif olarak hedefleme nano tanecikleri kanser tedavisi için umut verici bir yaklaşım sunuyoruz. Glikozaminoglikan plasental kondroitin sülfat (plCSA) çok çeşitli kanser hücrelerinin ve plasental trophoblasts ve sıtma protein VAR2CSA özellikle plCSA için bağlayabilirsiniz ifade edilir. Sıtma protein VAR2CSA, türetilmiş bir bildirilen plasental kondroitin sülfat A bağlama peptid (plCSA-BP), de özellikle kanser hücrelerinin ve plasental trophoblasts plCSA bağlayabilirsiniz. Bu nedenle, nano tanecikleri plCSA BP Birleşik bir araç olarak insan kanser ve plasental trophoblasts için hedeflenen ilaç dağıtım için kullanılabilir. Bu protokol için biz (plCSA-DNPs); doksorubisin ile yüklenen plCSA BP Birleşik lipid-polimer nano tanecikleri sentezlemek için bir yöntem tarif Yöntem bir tek sonication adım ve bioconjugate teknikleri oluşur. Buna ek olarak, plCSA-DNPs, Fizikokimyasal özellikleri ve plasental choriocarcinoma (JEG3) hücreler tarafından hücresel alımını belirlemek de dahil olmak üzere karakterize için birkaç yöntem açıklanır.

Bu protokol için PLGA, DSPE-PEG-COOH ve soya lesitin are bir temsilcisi polimer, lipit-PEG-COOH eşlenik ve lipid, anılan sıraya göre. Sonication yöntemi ile tek adım plCSA hedefli lipid-polimer nano tanecikleri ve EDC/NHS tekniği sentezi Şekil 1' de gösterilmiştir. İlk olarak, sonication koşullar altında Soya lesitin, PLGA ve Show DSPE-PEG-COOH formu çekirdek-kabuk için kendi kendine araya DNPs yapılandırılmış. Çekirdek PLGA ve kapsüllenmiş DOX oluşu...

Burada, plasental kondroitin sülfat A bağlama peptid (plCSA-BP) sentezi için bir iletişim kuralı mevcut-Birleşik lipid-polimer nano tanecikleri ile tek adım sonication ve bioconjugate teknikleri. Bu parçacıklar tedavi hedeflenen teslimat en insan tümörleri ve kanserleri ve plasental bozuklukları tedavisinde plasental trophoblasts için bir roman araç oluşturmaktadır.

Sentez ve karakterizasyonu plasental kondroitin sülfat (plCSA) - Lipid hedefleme - polimer nano tanecikleri

An effective cancer therapeutic method reduces and eliminates tumors with minimal systemic toxicity. Actively targeting nanoparticles offer a promising ...

Bu yöntem ilaç dağıtım alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir, insan kanserleri ve plasenta sistoblast için terapötik hedefli teslim gibi. Bu tekniğin en büyük avantajı, diğer parçacıklarda konjuge peptidler sentezlemek için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem olmasıdır. Başlamak için, steril bir 10 mililitresantrifüj tüp için yüzde dört etanol üç milimetre ekleyin.Daha sonra, 90 mikrogram soya lesitin stok çözeltisi, 210 mikrogram DSPE-PEG-karboksilik asit çözeltisi ve 750 mikrogram DOX stok çözeltisi ekleyin. Plga stok çözeltisi iki miligram pipet için bir mililitreşşü kullanın. Bir ultrasonik işlemci ve sonicate iki dakika için bir buz banyosu nda santrifüj tüp yerleştirin.Sonra, santrifüj tüp içine PLGA stok çözeltisi damla-bilge ekleyin. DNP'leri arındırmak için çözeltiyi 0,1 molar MES arabelleğinde yıkamak için bir santrifüj filtresi kullanın. Daha sonra çözeltiyi 1000 G'de dört santigrat derecede üç dakika santrifüj edin.Ester aktivasyonuna başlamak için, bir mililitre DNP'ye 0,4 miligram EDC ekleyin. Sonra, reaksiyona 0.24 miligram NHS ekleyin. Daha sonra, reaksiyonkaranlıkta oda sıcaklığında bir saat kadar gerçekleşmesine izin verin.Bundan sonra reaksiyon bileşenlerini iyice karıştırın ve reaksiyonu bir çalkalayıcının üzerine yerleştirin. Amin reaksiyonu başlatmak için, tampon pH'ı 7,2'den 7,5'e çıkarmak için PBS kullanın. Daha sonra, reaksiyon çözeltisine peptidi hedefleyen 0,5 miligram pICSA ekleyin.Çözeltiyi iyice karıştırın ve bir çalkalayıcıüzerine yerleştirin. Daha sonra, reaksiyonun karanlıkta bir gecede dört derece santigrat derecede devam etmesine izin verin. Ertesi gün, eşleç çözeltisi ile diyaliz torbaları doldurun.PICSA DNP'leri pBS tamponu ile oda sıcaklığında 24 saat karanlıkta arındırın. Metin protokolüne göre hücreleri kültüre aldıktan sonra, ortamı kaldırın ve yüzde beş FBS ve pICSA DNPs veya DNPs ile bir mililitre taze, soğuk ortam ekleyin. Sonra, hücre ve nano-parçacık karışımını dört santigrat derecede bir saat kuluçkaya yatırın.Bundan sonra, ortamı çıkarın ve hücreleri PBS ile üç kez yıkayın. Sonra, taze medya bir mililitre ekleyin ve 37 santigrat derece 30 dakika boyunca hücreleri kuluçka. Bundan sonra, ortamı çıkarın ve hücreleri PBS ile üç kez yıkayın.Daha sonra, soğuk iki mililitre ekleyin, dört yüzde PFA ve 10 dakika oda sıcaklığında karışımı kuluçka. PfA çıkarın ve PBS iki mililitre ile hücreleri yıkayın. Sonra, çekirdek boyama için DAPI ile PBS bir mililitre ekleyin.Karışımın oda sıcaklığında 10 dakika kuluçkaya yatmasını bekleyin. Son olarak, montaj ortamı ekleyin ve floresan mikroskobu ile floresan görüntü. Bu protokol kullanılarak, DNP'ler başarıyla hazırlandı ve pICSA BP'ye konjuge edildi. Konjugasyondan sonra primer DNP'lerin çapı yaklaşık 109 nanometreye yükseldi.DNP'lerin ve pICSA DNP'lerin TEM görüntüleri parçacıkların iyi dağıldığını ve genellikle küresel morfolojiyi gösterdiğini göstermiştir. Nano parçacıkların zeta potansiyeli negatif 20.1 ve 29.9 milivolt, nano-parçacıklar son derece kararlı olduğunu gösteren. JEG3 hücresel alım skalası, 30 dakika içinde JEG3 hücrelerine bağlı pICSA DNP'leri gösterdi.Bu nedenle, pICSA BP verimli yüzeye konjuge edildi. Bu yordamı çalışırken, PLGA eklemeden önce bir ila iki dakika boyunca karışımı sonicate hatırlamak önemlidir. Bu prosedürü takiben, konjugasyon verimliliğini daha doğru belirlemek için HPLC testi gibi yöntemlerimiz gerçekleştirilebilir.Bu teknik, gelişiminden sonra üreme biyolojisi alanında araştırmacıların gebelik komplikasyonlarında plasenta hedeflemesi olasılığını keşfetmelerinin önünü açmıştır.

synthesis-characterization-placental-chondroitin-sulfate-plcsa

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu makale diblock co-polimerler kullanarak polimer bazlı nanopartiküller sentezlemek için nanoprecipitation yöntem açıklanır. Biz diblock sentezi co-polimerler, nanoprecipitation tekniği ve potansiyel uygulamalar ele alınacaktır.

Nanoprecipitation Tekniği Diblock Polimerik Nanopartiküller formülasyonu

Emülgatör olarak E-TPGS vitamini kullanılarak poli(laktik-ko-glikolik asit) oluşan nanopartiküllerin ve mikropartiküllerin üretimini ve karakterizasyonunu açıklıyoruz. Emülgatör konsantrasyonu gibi formülasyon parametrelerini değiştirerek, ortalama çapları 220 nm ila 1.98 μm arasında değişen nanopartiküller üretmek mümkündür.

Vitamin E-TPGS ile Tek veya Çift Emülsiyon ile Oluşturulan PLGA Nanopartikülleri

Bu protokolün amacı, bir kök hücre hedef arama faktörü olan SDF-1α'yı dekstran sülfat-kitosan nanopartiküllerine dahil etmektir.  Elde edilen parçacıklar, boyutları ve zeta potansiyellerinin yanı sıra nanoparçacıklardan SDF-1α'nın içeriği, aktivitesi ve in vitro salım hızı için ölçülür.

SDF-1α-Kitosan-Dekstran Sülfat nano partiküllerin hazırlanması ve Karakterizasyonu

Bu çalışmada, biyouyumlu nanopartiküllerin ultra küçük popülasyonlarını sentezlemek için bir yöntemin yanı sıra, hücresel etkileşimlerini değerlendirmek için birkaç in vitro yöntem tanımlanmıştır.

Katı Lipit nanopartiküller (SLNs) Hücre içi Hedefleme için başvurular

poli (N-izopropil akrilamid) -graft-kondroitin sülfat oluşan enjekte edilebilir doku mühendisliği iskelesi (PNIPAAm-g-CS) içeren aljinat mikro hazırlandı. Özellikleri ve in vitro biyouyumluluk şişme yapışma mukavemeti, bu çalışmada incelenmiştir. Burada geliştirilen karakterizasyon teknikleri diğer thermogelling sistemleri için geçerli olabilir.

Doku Mühendisliği Aljinat mikropartiküllerin ile Thermogelling Poli (N-izopropil) -graft-kondroitin Sülfat Kompozitlerin Sentezi

Bir sıvı kristal nanopartikül (LCNP) nanocarrier canlı hücrelerin plazma zarına bir hidrofobik yük sürekli verilme için uygun bir araç olarak kullanılarak.

Sıvı Kristal Nanopartikül Carrier bir Hidrofobik Kargo Encapsulated, hedeflenen Plazma Zarı Teslimat

Kovalent çapraz nano tanecikleri doğrusal polyester kolye işlevleri içeren üzerinden boyutu ve crosslinking yoğunluğunu ayarlama için bir süreç bu makalede. Sentez parametreleri (polimer molekül ağırlığı, kolye işlevselliği birleşme ve crosslinker eşdeğerleri) uyarlayarak, istenen nanopartikül boyutu ve crosslinking yoğunluğu ilaç teslim uygulamalar için elde edilebilir.

Nanosponge ayar boyutu ve Crosslinking yoğunluğu

Biz emanet ve plasenta hedefli ilaç dağıtım etkinliğini değerlendirmek için üç yöntem kullanır bir sistem tarif: nanopartikül birikimi, plasenta ve fetal gelişim izlemek için yüksek frekanslı ultrason izlemek için Imaging vivo içinde  ve HPLC doku için ilaç dağıtım ölçmek için.

Kapsamlı değerlendirme etkinliği ve güvenliği üç tamamlayıcı yöntemlerle plasenta hedefli ilaç dağıtım

Bu makalede falcarindiol lipid kaplı 74 nm nano tanecikleri encapsulation. Nano tanecikleri lipid damlacıkları içine insan kök hücreleri tarafından hücresel alımını floresan ve confocal görüntüleme tarafından izlenir. Nano tanecikleri değişen solvent hızlı enjeksiyon yöntemiyle cihazlarında ve büyüklükleri dinamik ışık saçılma tekniği ile ölçülür.

Falcarindiol tarafından insan mezenkimal kök hücre içeren yeni Lipid kaplı nano tanecikleri alımını

Bu protokol enjekte edilebilir, supramoleküler polimer-nanopartikül (PNP) hidrojel biyomalzemelerin sentezini ve formülasyonlarını açıklar. Bu malzemelerin ilaç dağıtımı, biyofarmasötik stabilizasyon ve hücre kapsülleme ve teslimi için uygulamaları gösterilmiştir.

Hücre ve İlaç Dağıtım Uygulamaları için Enjekte Edilebilir Supramoleküler Polimer-Nanopartikül Hidrojelleri

Keşfedin plasental kondroitin sülfat bağlayıcı peptit konjuge lipid-polimer nano taneciklerinin sentezini. Bu basit ve tekrarlanabilir yöntem, insan tümörleri ve plasental trofoblastlara hedefli ilaç teslimi için yenilikçi bir araç sunar.

Sentez ve karakterizasyonu plasental kondroitin sülfat (plCSA) - Lipid hedefleme - polimer nano tanecikleri

Daha fazla video keşfet