3-Nitrotyrosine atmosferik ortamlar üzerinden yüksek performanslı sıvı kromatografi elektrokimyasal dedektör sistemi tespiti

Bu yöntem Nitrapyrin ve 3-nitrotirozin hakkında çevresel araştırmalarda anahtar soruya cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, hava numunesi filtrelerinde 3-nitrotirozin tespit etmek için benzersiz ve son derece hassas bir yöntem olmasıdır. Toplam askıda parçacıkları veya yedi mikrondan daha az boyutta partikül madde toplamak için, ilk bir bağlayıcı 3 kuvars filtre tartMak ve yüksek hacimli hava örnekleyici üzerinde sabitlemek. PM7'yi toplamak veya filtreyi toplanan toplam askıda parçacıklar için açık ta bırakmak için filtreyi parçacık boyutu seçiciyle kapatın. Hava örnekleyicisini dakikada 1000 litre hızla yedi gün boyunca sürekli çalıştırın. Ön filtreleri bir boyut sınıflandırma birimine yükleyin ve boyut sınıflandırma ünitesini ve yedek filtreyi düşük hacimli hava örnekleyicisine yükleyin. Yedek filtrede PM2.5 toplamak için hava örnekleyicisini yedi gün boyunca sürekli olarak dakikada 116 çöpte çalıştırın. Örnekleme bittiğinde toplam akış hacmini kaydedin. Filtreyi tartın ve toplanan parçacıkların ağırlığını hesaplayın. Filtreyi plastik bir torbaya kapatın ve 30 santigrat derecede saklayın.Next 500 mikrolitre 6X spesifik olmayan proteaz kokteyli ve asetat tamponu hazırlayın ve 5000 daltonluk moleküler ağırlık kesiği yle dalasis membranına yerleştirin. Asetat tampon 1 L dolu membran batırın ve 24 ila 36 saat boyunca 4 derece santigrat kadar karıştırın, indogenöz 3-Nitrotirozin ve Nitrit kaldırmak için her 12 saatte bir tampon yerine.Sonra bir bicinchoninic asit protein tayini ile diyaliz proteaz çözeltisi protein konsantrasyonunu ölçmek. Bundan sonra dondurucudan bir filtre çıkarın ve hala çanta içinde mühürlü iken oda sıcaklığına ısınmak için izin verin. Daha sonra filtrenin partikül madde kaplı alanından beş 6 milimetre genişliğinde daireler kadar yumruk ve 1,5 mililitre lik mikro santrifüj tüp içinde daireler yerleştirin. 50 içeren 300 mikrolitre asetat tampon hazırlayın