Kızılötesi termometre pasif sistemik anafilaksi ve gıda Anti değerlendirme sırasında kullanarak fare vücut sıcaklık ölçümü
14 Eylül 2018
Burada doğru bir şekilde pasif sistemik anafilaksi (PSA) ve bir kızılötesi termometre kullanarak gıda Anti fare modelleri vücut sıcaklık farklılıkları ölçmek için yeni bir yöntem mevcut. Bu yordamı doğru önceki PSA sonuçlarında yinelenen.
Bu metodoloji alerji ve immünoloji alanında önemli sorulara cevap yardımcı olur, özellikle vücut ısısı değişiklikleri ile ilişkili olabilir fenotipler ile ilgili olanlar. Bu tekniğin başlıca avantajları ucuz, non-invaziv olması ve anestezi gerektirmemesidir. Bu tekniğin etkileri, araştırmacıların sıcaklık ölçümü sırasında farelerin stresini ve ağrılarını azaltmasına ve anestezinin etkilerini ortadan kaldırmasına ve/veya davranışsal fenotipleri görselleştirmesine olanak sağlar.
Anestezi sonrası farenin vücut ısısını ölçmek için, solunum hızı veya hareketsizlik ile sedasyon onaylamak ve bir işaret parmağı ve başparmak ve serçe parmağı ile kuyruk ile boyun ense tarafından fare kavramak. Fareyi laboratuvar tezgahı yüzeyine paralel tutarken, iki üst meme ucu arasında karın yüzeyinden iki ila beş milimetre uzaklıkta termometrenin dış düz yüzeyi ile alt karın altına kızılötesi termometre sensörü yerleştirin. Daha sonra fare ve termometre sabit tutmak için dikkat, hayvanın sıcaklığını ölçmek için termometre tetikleme depress.
Anestezi olmadan fare vücut sıcaklığını ölçmek için, kuyruk ortasından fareyi almak ve karın ortaya çıkarmak. Farenin ön pençeleriyle düz kenar yüzeyine tutunmasını ve sıcaklığı ölçmek için tetiği tutmasına izin verin. Alternatif olarak, farenin termometrenin üst düz kenarına tutunmasını ve farenin sıcaklık ölçümü sırasında kızılötesi sensörün hemen üzerinde karınla birlikte termometrenin dış düz yüzeyinde oturmasını sağlar.
Pasif bir sistemik anafilaksi sensitizasyonu için taze hazırlanmış Anti-Dinitrophenol 200 mikrolitre enjekte etmek için 26 gauge iğne ile donatılmış bir mililitre şırınga kullanın, veya DNP, PBS IgE, her alıcı hayvanPeriton içine sadece en alt ve ikinci en alt meme arasında orta hatta lateral. Enjeksiyondan 24 saat sonra, her alıcı hayvanın vücut ısısını gösterildiği gibi ölçün ve 100 mikrolitre taze hazırlanmış DNP insan serum albumini içeren 30 kalibrelik bir iğneyle donatılmış bir mililitrelik şırınga yükleyin. Pasif sistemik anafilaksiyi indüklemek için, gözün medial tarafına gözün arkasına nişan alan sığ bir açıyla iğneyi yerleştirin ve çözeltinin tüm hacmini intravenöz olarak retro-orbital venöz sinüse enjekte edin.
Daha sonra fareyi tam bir tedavi ye kadar izleyerek bir kurtarma kafesinde tek başına yerleştirin ve vücut ısısını ve aktivitesini her 10 dakikada bir 70 dakika ölçün. IgE duyarlı fareler, pbs kontrol fareleri meydan okuma dan sonra aynı süre içinde 1,1 santigrat derece maksimum düşüş sergilerken, 20 dakika üç santigrat derece maksimum sıcaklık düşüşü gösterir. Gözlenen sıcaklık düşüşleri ile fare aktivitesi arasındaki ilişkiyi değerlendirmek için anestezi olmayan hayvanlarda davranışsal gözlemler de yapılabilir.
Bu temsili fare gıda alerjisi mücadelesinde, PBS kontrol grubu 2CA inhibitörü tedavi grubuna göre meydan okumadan 10 dakika sonra önemli bir sıcaklık düşüşü gösterdi. Bu gıda alerjisi sorunundaki aktivite puanlarının ve sıcaklık düşüşlerinin değerlendirilmesi, iki veri kümesi arasında istatistiksel olarak anlamlı bir korelasyon ortaya koymuştur. Bu yordamı takiben, fare vücut ısısı ölçümleri içeren diğer deneyler vücut ısısı değişimi ile ilişkili davranışsal fenotipler ile ilgili ek soruları cevaplamak için yapılabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu makale, pasif sistemik anafilaksi ve gıda alerjisi fare modellerinde vücut sıcaklığı farklarını kızılötesi termometre kullanarak ölçmek için yeni bir yöntem sunmaktadır. Teknik non-invazivdir ve önceki çalışmalarda başarıyla tekrarlanmıştır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Alerji
- İmmünoloji
Arka Plan
- Vücut ısısındaki değişiklikler, alerjik reaksiyonların göstergesi olabilir.
- Geleneksel sıcaklık ölçüm yöntemleri stres ve anestezi gerektirebilir.
- Etik nedenlerle non-invaziv teknikler tercih edilmektedir.
Çalışmanın Amacı
- Fare vücut sıcaklığını ölçmek için maliyet etkin ve insani bir yöntem sunmak.
- Alerjik reaksiyonlar sırasındaki vücut sıcaklığı değişimleri ile ilişkili fenotipler üzerine yapılan araştırmaları kolaylaştırmak.
Kullanılan Yöntemler
- Sıcaklık ölçümü için kızılötesi bir termometrenin kullanımı.
- Hayvan üzerindeki stresi minimize eden ölçüm tekniği.
- Sedasyonun solunum hızı veya hareketsizlik yoluyla doğrulanması.
- Doğru okumalar için termometrenin spesifik konumlandırılması.
Temel Sonuçlar
- Bu yöntem, anestezi olmadan doğru sıcaklık ölçümlerine olanak tanır.
- Ölçüm süreci boyunca fareler için stresi ve ağrıyı azaltır.
- Sıcaklık değişiklikleriyle ilişkili davranışsal fenotiplerin görselleştirilmesini sağlar.
Sonuçlar
- Bu teknik, alerji ve immünoloji araştırmalarında önemli bir ilerlemedir.
- Geleneksel sıcaklık ölçüm yöntemlerine güvenilir bir alternatif sunar.
- Gelecekteki çalışmalar bu non-invaziv yaklaşımdan faydalanabilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Endüstriyel Uygulama Alanları
Fare alerji modellerinde invaziv olmayan sıcaklık izlemesi, anestezik karıştırıcı faktörler olmaksızın fizyolojik ve davranışsal fenotiplerin eş zamanlı değerlendirilmesine olanak tanır. Bu yaklaşım, ölçüm sırasında hayvanların doğal durumlarını koruyarak anafilaksi ve gıda alerjisinin mekanistik çalışmalarında veri güvenilirliğini artırır. Yöntem, termal yanıtın immün aktivasyonla korelasyon gösterdiği hedef doğrulama ve fenotipik tarama iş akışlarını destekler.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Bilimsel Değer: Pasif sistemik anafilaksi modellerinde immün mediyatörleri sıcaklık dinamiklerine bağlayan terapötik hipotezlerin sorgulanmasına olanak tanır.
- Operasyonel Değer: Anestezi olmadan güvenilir sıcaklık trendleri sağlayarak, sedatif etkilerin immün yanıtlar üzerindeki değişkenliğini azaltır.
- Öngörücü Değer: Alerjik tetiklemeler sırasında yüzey sıcaklığı trendlerinin çekirdek sıcaklık değişimlerini yansıttığını doğrulayarak mekanistik risk azaltımını destekler.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Bilimsel Değer: İmmünomodülatör bileşiklerin yüksek kapasiteli taraması için uygun, kantitatif ve tekrarlanabilir yüzey sıcaklığı okumaları sağlar.
- Operasyonel Değer: Anesteziye bağlı darboğazları ortadan kaldırarak, uyanık hayvanlarda sıcaklık ve aktivitenin boylamsal izlenmesine olanak tanır.
- Analiz Hazırlığı: Minimum teknik değişkenlikle, gıda alerjisi ve anafilaksi modellerinde standardize edilmiş termal fenotipleme yapılmasını sağlar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Translasyonel Süreklilik: Sıcaklık düşüşlerinin davranışsal aktivite skorlarıyla korelasyonunu kolaylaştırarak alerji modellerinde biyobelirteç bağlantılı fenotipik analizi destekler.
- Preklinik Modelleme: Uyaran ve iyileşme aşamaları boyunca tekrarlanan termal ölçümlere olanak tanıyarak hastalıkla ilişkili sistemlerin kullanımını destekler.
- Risk Ayarlı Kararlar: Preklinik alerji terapötik taramalarında "devam/dur" değerlendirmeleri için objektif termal sonlanım noktaları sağlar.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu yöntem, immün challenge deneyleri sırasında gerçek zamanlı termal izleme sağlayarak fenotipik gözlemleri mekanistik içgörülerle ilişkilendirmekte ve böylece keşif biyolojisi iş akışlarına entegre olmaktadır.
- Keşif Biyolojisi: Anestezik girişim olmadan, anafilaksi sırasında sitokin aracılı termoregülasyona yönelik hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Bilinçli fare modellerinde temassız, tekrarlanabilir sıcaklık ölçümleri aracılığıyla assay standardizasyonuna olanak tanır.
- Analitik: Klinik semptom şiddeti ve immün aktivasyon kinetiği ile korelasyon gösteren kantitatif termal trendler oluşturur.
- Translasyonel Araştırma: Sıcaklık dinamiklerini aktivite tabanlı fenotiplerle ilişkilendirerek, alerji modelinin translasyonelliğine dair öngörü güvenini artırır.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: İmmünoloji ve alerji keşif platformları genelinde tekrarlı kullanım için ölçeklenebilir, düşük maliyetli bir yetkinlik sunar.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Sıcaklık değişimi ile immün aracılı fenotipler arasındaki karıştırıcı faktörlerden arındırılmış ilişkileri ortaya çıkararak öngörü güvenilirliğini artırır.
- Operasyonel Değer: Sıcaklık izleme iş akışlarındaki anesteziye bağımlı adımları ortadan kaldırarak tekrarlanabilirliği ve işlem kapasitesini artırır.
- Stratejik Değer: Tek hayvanlı deneylerde çok parametreli fenotiplemeye (sıcaklık + davranış) olanak tanıyarak sermaye verimliliğini geliştirir.
- Portföy Etkisi: Alerji modeli doğrulamadaki objektif termal yanıt metrikleri aracılığıyla riskten arındırılmış hedef önceliklendirmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Doğru yüzey okumaları için kızılötesi termometrenin uygun konumlandırılması ve mesafe korunması konusunda eğitim gerektirir.
- Boylamsal ölçümler sırasında termal sapmayı en aza indirmek için tutarlı çevresel koşullara bağlıdır.
- İmmünoloji ve davranışsal fenotipleme grupları arasında ölçüm protokollerinin ekipler arası standardizasyonunu gerektirir.
- Kızılötesi emisyonu etkileyen farklı fare suşları, tüy renkleri ve vücut yüzeyi özellikleri için adaptasyon değerlendirmeleri içerir.
- Kürk üzerinden sıcaklık ölçümünde veya davranışsal gözlem sırasında anormal postür sergileyen hayvanlarda pratik sınırlamalar içerir.
