Name: Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-01-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 30 s
Description: Öğrenin diş pulpasindan mezenkimal kök hücre izolasyonunu ve prostat kanseri hücreleriyle ortak kültür yöntemlerini. Bu teknik kanser metastazı ve hücre etkileşimleri araştırmaları için değerli bir model sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Bu çalışmada Yeditepe Üniversitesi tarafından desteklenmiştir. Tüm veri ve bu makalede kullanılan rakamlar daha önce yayımlanmış34idi.

Yazılı onam hastaların onayı alındıktan sonra kurumsal etik komiteden elde edildi.
1. DPSC yalıtım ve kültür
<ol><li>Yirmi yaş dişleri tam Dulbecco'nın modifiye kartal Orta (DMEM) içeren 20-15 mL tüpler arasında 17 yaşındaki genç yetişkinler elde edilen aktarım [düşük glikoz DMEM medya, % 10 fetal Sığır serum (FBS) ve % 1 penisilin/streptomisin ile desteklenmiş / amfoterisin (PSA) çözüm], içinde 8 h rezeksiyonundan sonra. Doku malzeme soğuk (4 ° C) aktarımı sırasında potansiyel hücre ölümü önlemek için tutmak.</li>
	<li>Hamuru doku steril ayıklama forseps diş Merkezi tarafından dikkatli bir şekilde çıkarın, 10 cm doku kültürü yemekleri soğuk tam DMEM ortamda hamuru doku yerleştirin ve onları küçük parçalara (2-3 mm) tarafından neşteri kıyma. Not: Tüm deneysel prosedürler laminar akış başlıklı steril koşullarda yapılmalıdır. Enzimatik olmayan bu tekniği daha önce kullanılan21,22,23olmuştur.</li>
	<li>Yer küçük hamuru doku doku kültürü içinde 6-şey plakaları tedavi ve 200 µL her küçük hamuru doku parçaları kapsayacak şekilde tam DMEM medya ekleyin.</li>
	<li> </li><li> </li><li></li><li></li></ol><ol><li><ol><li><li> </li></ol></li><li><ol><li></li><li><li> </li><li></li><li> </li></ol></li><li><ol><li></li><li> </li><li><li><ol><li><li></ol></li></ol></li></ol><ol><li> </li><li> </li><li> </li></ol><ol><li><ol><li></li><li><li></li></ol></li><li><ol><li></li><li><li> </li><li></ol></li><li><ol><li></li><li><li> </li><li></li></ol></li><li><ol><li></li><li></li><li><li> <img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/58825/58825eq1.jpg"> </li></ol></li></ol><ol><li></li><li></li><li><li></ol><ol><li></li><li></li><li></li><li><li></li><li><li><li> </li><li> </li><li></ol>

<ol><li>Camberlain, G., Fox, J., Ashton, B., Middleton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells%3A+their+phenotype%2C+differentiation+capacity%2C+immunological+features%2C+and+potential+for+homing%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells: their phenotype, differentiation capacity, immunological features, and potential for homing.</a> Stem Cells. 25 (11), 2739-2749 (2007).</li>
<li>Demirci, S., Doğan, A., Şahin, F. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDemirci%2C+S+%22Dental+Stem+Cells%22">Dental Stem Cells</a>. , Springer. 109-124 (2016).</li>
<li>Fox, J. M., Chamberlain, G., Ashton, B. A., Middleton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+into+the+understanding+of+mesenchymal+stem+cell+trafficking%5BTitle%5D)+AND+%22British+journal+of+haematology%22%5BJournal%5D)">Recent advances into the understanding of mesenchymal stem cell trafficking.</a> British journal of haematology. 137 (6), 491-502 (2007).</li>
<li>Chang, A. I., Schwertschkow, A. H., Nolta, J. A., Wu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+mesenchymal+stem+cells+in+cancer+progression+and+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Current+cancer+drug+targets%22%5BJournal%5D)">Involvement of mesenchymal stem cells in cancer progression and metastases.</a> Current cancer drug targets. 15 (2), 88-98 (2015).</li>
<li>Dvorak, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumors%3A+wounds+that+do+not+heal%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Tumors: wounds that do not heal.</a> New England Journal of Medicine. 315 (26), 1650-1659 (1986).</li>
<li>Lu, Y. -r, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+growth+inhibitory+effect+of+mesenchymal+stem+cells+on+tumor+cells+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+biology+%26+therapy%22%5BJournal%5D)">The growth inhibitory effect of mesenchymal stem cells on tumor cells in vitro and in vivo.</a> Cancer biology & therapy. 7 (2), 245-251 (2008).</li>
<li>Secchiero, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+bone+marrow+mesenchymal+stem+cells+display+anti-cancer+activity+in+SCID+mice+bearing+disseminated+non-Hodgkin%27s+lymphoma+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Human bone marrow mesenchymal stem cells display anti-cancer activity in SCID mice bearing disseminated non-Hodgkin's lymphoma xenografts.</a> PloS one. 5 (6), e11140(2010).</li>
<li>Hong, I. -S., Lee, H. -Y., Kang, K. -S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+and+cancer%3A+friends+or+enemies%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Mutation+Research%2FFundamental+and+Molecular+Mechanisms+of+Mutagenesis%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells and cancer: friends or enemies?</a> Mutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis. 768, 98-106 (2014).</li>
<li>Brennen, W. N., Chen, S., Denmeade, S. R., Isaacs, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Mesenchymal+Stem+Cells+%28MSCs%29+at+sites+of+human+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Quantification of Mesenchymal Stem Cells (MSCs) at sites of human prostate cancer.</a> Oncotarget. 4 (1), 106(2013).</li>
<li>Klopp, A. H., Gupta, A., Spaeth, E., Andreeff, M., Marini, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concise+review%3A+dissecting+a+discrepancy+in+the+literature%3A+do+mesenchymal+stem+cells+support+or+suppress+tumor+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells%22%5BJournal%5D)">Concise review: dissecting a discrepancy in the literature: do mesenchymal stem cells support or suppress tumor growth.</a> Stem cells. 29 (1), 11-19 (2011).</li>
<li>Albini, A., Sporn, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+tumour+microenvironment+as+a+target+for+chemoprevention%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">The tumour microenvironment as a target for chemoprevention.</a> Nature Reviews Cancer. 7 (2), 139(2007).</li>
<li>Quante, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow-derived+myofibroblasts+contribute+to+the+mesenchymal+stem+cell+niche+and+promote+tumor+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+cell%22%5BJournal%5D)">Bone marrow-derived myofibroblasts contribute to the mesenchymal stem cell niche and promote tumor growth.</a> Cancer cell. 19 (2), 257-272 (2011).</li>
<li>Gronthos, S., Mankani, M., Brahim, J., Robey, P. G., Shi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postnatal+human+dental+pulp+stem+cells+%28DPSCs%29+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in vitro and in vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 97 (25), 13625-13630 (2000).</li>
<li>Mori, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cells%3A+osteogenic+differentiation+and+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+new+York+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cells: osteogenic differentiation and gene expression.</a> Annals of the new York Academy of Sciences. 1237 (1), 47-52 (2011).</li>
<li>Mori, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteogenic+properties+of+human+dental+pulp+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+biological+regulators+and+homeostatic+agents%22%5BJournal%5D)">Osteogenic properties of human dental pulp stem cells.</a> Journal of biological regulators and homeostatic agents. 24 (2), 167-175 (2010).</li>
<li>Kerkis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+a+population+of+immature+dental+pulp+stem+cells+expressing+OCT-4+and+other+embryonic+stem+cell+markers%5BTitle%5D)+AND+%22Cells+Tissues+Organs%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of a population of immature dental pulp stem cells expressing OCT-4 and other embryonic stem cell markers.</a> Cells Tissues Organs. 184 (3-4), 105-116 (2006).</li>
<li>Potdar, P. D., Jethmalani, Y. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+dental+pulp+stem+cells%3A+applications+in+future+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22World+journal+of+stem+cells%22%5BJournal%5D)">Human dental pulp stem cells: applications in future regenerative medicine.</a> World journal of stem cells. 7 (5), 839(2015).</li>
<li>Ahmed, N. E. -M. B., Murakami, M., Hirose, Y., Nakashima, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+dental+pulp+stem+cell+secretome+for+Alzheimer%27s+disease+treatment%3A+an+in+vitro+study%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells+international%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of dental pulp stem cell secretome for Alzheimer's disease treatment: an in vitro study.</a> Stem cells international. 2016, (2016).</li>
<li>Gorin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Priming+dental+pulp+stem+cells+with+fibroblast+growth+factor-2+increases+angiogenesis+of+implanted+tissue-engineered+constructs+through+hepatocyte+growth+factor+and+vascular+endothelial+growth+factor+secretion%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+cells+translational+medicine%22%5BJournal%5D)">Priming dental pulp stem cells with fibroblast growth factor-2 increases angiogenesis of implanted tissue-engineered constructs through hepatocyte growth factor and vascular endothelial growth factor secretion.</a> Stem cells translational medicine. 5 (3), 392-404 (2016).</li>
<li>Wakayama, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+secreted+from+dental+pulp+stem+cells+show+multifaceted+benefits+for+treating+acute+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Factors secreted from dental pulp stem cells show multifaceted benefits for treating acute lung injury in mice.</a> Cytotherapy. 17 (8), 1119-1129 (2015).</li>
<li>Doğan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differentiation+of+human+stem+cells+is+promoted+by+amphiphilic+pluronic+block+copolymers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">Differentiation of human stem cells is promoted by amphiphilic pluronic block copolymers.</a> International Journal of Nanomedicine. 7, 4849(2012).</li>
<li>Taşlı, P. N., Doğan, A., Demirci, S., Şahin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Boron+enhances+odontogenic+and+osteogenic+differentiation+of+human+tooth+germ+stem+cells+%28hTGSCs%29+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+trace+element+research%22%5BJournal%5D)">Boron enhances odontogenic and osteogenic differentiation of human tooth germ stem cells (hTGSCs) in vitro.</a> Biological trace element research. 153 (1-3), 419-427 (2013).</li>
<li>Yalvac, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+and+characterization+of+stem+cells+derived+from+human+third+molar+tooth+germs+of+young+adults%3A+implications+in+neo-vascularization%2C+osteo-%2C+adipo-and+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22The+pharmacogenomics+journal%22%5BJournal%5D)">Isolation and characterization of stem cells derived from human third molar tooth germs of young adults: implications in neo-vascularization, osteo-, adipo-and neurogenesis.</a> The pharmacogenomics journal. 10 (2), 105(2010).</li>
<li>Doğan, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+pentaborate+pentahydrate+and+pluronic+containing+hydrogel+increases+cutaneous+wound+healing+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+trace+element+research%22%5BJournal%5D)">Sodium pentaborate pentahydrate and pluronic containing hydrogel increases cutaneous wound healing in vitro and in vivo.</a> Biological trace element research. 162 (1-3), 72-79 (2014).</li>
<li>Doğan, A., Yalvaç, M. E., Yılmaz, A., Rizvanov, A., Şahin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+F68+on+cryopreservation+of+mesenchymal+stem+cells+derived+from+human+tooth+germ%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+biochemistry+and+biotechnology%22%5BJournal%5D)">Effect of F68 on cryopreservation of mesenchymal stem cells derived from human tooth germ.</a> Applied biochemistry and biotechnology. 171 (7), 1819-1831 (2013).</li>
<li>Rizvanov, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+and+self-organization+of+human+mesenchymal+stem+cells+and+neuro-blastoma+SH-SY5Y+cells+under+co-culture+conditions%3A+A+novel+system+for+modeling+cancer+cell+micro-environment%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Interaction and self-organization of human mesenchymal stem cells and neuro-blastoma SH-SY5Y cells under co-culture conditions: A novel system for modeling cancer cell micro-environment.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 76 (2), 253-259 (2010).</li>
<li>Troiano, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiparametric+analysis+of+cells+with+different+mitochondrial+membrane+potential+during+apoptosis+by+polychromatic+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+protocols%22%5BJournal%5D)">Multiparametric analysis of cells with different mitochondrial membrane potential during apoptosis by polychromatic flow cytometry.</a> Nature protocols. 2 (11), 2719(2007).</li>
<li>Melzer, C., von der Ohe, J., Lehnert, H., Ungefroren, H., Hass, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+stem+cell+niche+models+and+contribution+by+mesenchymal+stroma%2Fstem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+cancer%22%5BJournal%5D)">Cancer stem cell niche models and contribution by mesenchymal stroma/stem cells.</a> Molecular cancer. 16 (1), 28(2017).</li>
<li>Aguirre, A., Planell, J., Engel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+of+bone+marrow-derived+endothelial+progenitor+cell%2Fmesenchymal+stem+cell+interaction+in+co-culture+and+its+implications+in+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+biophysical+research+communications%22%5BJournal%5D)">Dynamics of bone marrow-derived endothelial progenitor cell/mesenchymal stem cell interaction in co-culture and its implications in angiogenesis.</a> Biochemical and biophysical research communications. 400 (2), 284-291 (2010).</li>
<li>Bogdanowicz, D. R., Lu, H. H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBogdanowicz%2C+DR+%22Biomimetics+and+Stem+Cells%22">Biomimetics and Stem Cells</a>. , Springer. 29-36 (2013).</li>
<li>Plotnikov, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-to-cell+cross-talk+between+mesenchymal+stem+cells+and+cardiomyocytes+in+co-culture%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+cellular+and+molecular%22%5BJournal%5D)">Cell-to-cell cross-talk between mesenchymal stem cells and cardiomyocytes in co-culture.</a> Journal of cellular and molecular. 12 (5a), 1622-1631 (2008).</li>
<li>Bogdanowicz, D. R., Lu, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+cell-cell+communication+in+co-culture%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+journal%22%5BJournal%5D)">Studying cell-cell communication in co-culture.</a> Biotechnology journal. 8 (4), 395-396 (2013).</li>
<li>Brunetti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+expression+of+TRAIL+by+osteoblastic+differentiated+dental+pulp+stem+cells+affects+myeloma+cell+viability%5BTitle%5D)+AND+%22Oncology+reports%22%5BJournal%5D)">High expression of TRAIL by osteoblastic differentiated dental pulp stem cells affects myeloma cell viability.</a> Oncology reports. 39 (4), 2031-2039 (2018).</li>
<li>Doğan, A., Demirci, S., Apdik, H., Apdik, E. A., Şahin, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dental+pulp+stem+cells+%28DPSCs%29+increase+prostate+cancer+cell+proliferation+and+migration+under+in+vitro+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+and+Cell%22%5BJournal%5D)">Dental pulp stem cells (DPSCs) increase prostate cancer cell proliferation and migration under in vitro conditions.</a> Tissue and Cell. 49 (6), 711-718 (2017).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

MSCs, tümör çevre katkı hücre füzyon yoluyla melez hücre üretimi, kök hücre ve kanser hücreleri28arasında entosis veya sitokin ve kemokin faaliyetleri de dahil olmak üzere çeşitli etkileşimler tarafından düzenlenmiştir. Yapısal organizasyon, hücre-hücre etkileşimleri ve salgılanan faktörleri kanser hücre davranışı açısından tümör promosyon, ilerleme ve çevresindeki doku metastaz belirlenir. Yerleşik hücre popülasyonlarının etkileşimlerin arkasında mekanizmaları araştırmak için uygun e...

Mezenkimal kök hücre (MKH), farklılaşma ve rejenerasyon ve yağ, kemik, kıkırdak, kas, ligament, tendon gibi mezenkimal dokuların katkısı yeteneklerini ile yetişkin vücut1 hemen hemen tüm dokularda yalıtılmış olmuştur , 2. kronik inflamasyon veya bir yaralanma durumunda ikamet hücreler üreterek doku homeostazı sağlamanın dışında onlar çok önemli sitokinler ve büyüme faktörleri anjiogenezi, bağışıklık sistemi ve3remodeling doku alacak üretmek. MSCs etkileşim kanser dokusu iyi anlaşılmış değil ama MSCs tümör başlatma, ilerleme ve metastaz4teşvik biriken kanıtlar gösteriyor.
MSCs homing yeteneği yaralı veya kronik iltihaplı alanına onları kök hücre tabanlı terapiler için değerli bir aday yapar. Ancak, kanser dokular, "asla yaralar şifa", ayrıca sürümü inflamatuar sitokinlerin, pro-anjiogenik molekülleri ve MSCs cancerogenous alan5' e çekmek önemli büyüme faktörleri. Sınırlı iken MSCs inhibitör etkileri kanser büyüme6üzerinde,7, kanser ilerlemesi ve etkileri teşvik metastaz kapsamlı olmuştur gösteren raporlar8bildirdi. MSCs doğrudan veya dolaylı olarak karsinojenezis bağışıklık hücreleri salgılayan destek kanser hücre çoğalması ve anjiogenik etkinliğini arttırmak ve düzenleyen göç, büyüme faktörleri/sitokinler, gizleme de dahil olmak üzere farklı şekillerde etkiler mezenkimal epitel geçiş (EMT)9,10. Tümör ortam kanser ilişkili fibroblastlar (restorantlar) ve/veya myofibroblasts, endotel hücreleri, adipositler ve bağışıklık hücreleri11de dahil olmak üzere çeşitli hücre türleri oluşur. O, restorantlar en bol hücre kanser büyüme ve metastaz8teşvik çeşitli kemokinler salgılar tümör alanında türüdür. Bu kemik iliği türevi MSCs tümör stroma12' restorantlar ayırabilirsiniz gösterilmiştir.
Diş pulp kök hücreler (DPSCs), ilk diş doku kaynaklı MSCs karakterize tarafından Gronthos vd. 13 2000 yılında yaygın olarak başkaları tarafından14,15araştırdık, hızlı pluripotency işaretleri Oct4, Sox2ve MicroRNAs16 gibi ve çeşitli hücre linages17ayırabilirsiniz. Gen ve protein ifade analizi ispat DPSCs büyüme faktörleri/sitokinler vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF), angiogenin, fibroblast büyüme faktörü 2 (FGF2), interlökin-4 (IL-4), gibi diğer MSCs ile karşılaştırılabilir düzeyde üretmek Il-6, IL-10, ve kök hücre faktörü (SCF) yanı sıra angiogenez teşvik, bağışıklık hücreleri modüle ve kanser hücre çoğalması ve geçiş18,19,20 destek fms benzeri Tirozin kinaz-3 ligand (Flt - 3 L) . Ise MSCs etkileşimleri kanser çevre ile literatürde iyi belgelenmiş olabilirdi, DPSCs ve kanser hücrelerinin ilişkisi henüz değerlendirilmemiştir. Bu da çalışmanın, ortak kültür ve durumu orta tedavi stratejileri çok metastatik prostat kanseri hücre kültürünü, PC-3 ve olası eylem mekanizması kanser ilerlemesi ve metastaz diş MSCs evlenme DPSCs kurduk.

<table><tbody><tr><td>DMEM</td><td>Invitrogen</td><td>11885084</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Invitrogen</td><td>16000044</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>PSA</td><td>Lonza</td><td>17-745E</td><td>Hücre kültürü için</td></tr><tr><td>Tripsin</td><td>Invitrogen</td><td>25200056</td><td>Hücre ayrışması için</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Invitrogen</td><td>10010023</td><td>Yıkamalar için</td></tr><tr><td>Deksametazon</td><td>Sigma</td><td>D4902</td><td>Farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr> <tr><td>ve beta;-Gliserofosfat</td><td>Sigma</td><td>G9422</td><td>Osteojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Askorbik asit</td><td>Sigma</td><td>A4544</td><td>Osteo- ve kondrojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>İnsülin-Transferrin-Selenyum (ITS & eksi; G)</td> <td>İnvitrojen</td><td>41400045</td><td>Kondrojenik farklılaşma ortamı</td></tr><tr><td>TGF -&beta'nın bileşeni;</td><td>Sigma</td><td>SRP3171</td><td>Kondrojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>İnsülin</td><td></td><td>Sigma I6634</td><td>Adipojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>İzobutil-1-metilksantin (IBMX)</td><td>Sigma</td><td>I7018</td><td>Adipojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Indomethacin</td><td>Sigma</td><td>I7378</td><td>Adipojenik farklılaşma ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>MTS Reaktifi</td><td>Promega</td><td>G3582</td><td>Hücre canlılığı analizleri</td></tr><tr><td>TUNEL Testi</td><td>Sigma</td><td>11684795910</td><td>Apoptotik analizler</td></tr><tr><td>24 oyuklu plaka ekleri</td><td>Corning</td><td>3396</td><td>Kuyu ötesi migrasyon deneyi için</td></tr><tr><td>PKH67</td><td>Sigma</td><td>PKH67GL</td><td>Ko-kültür hücre boyama için</td></tr><tr><td>PKH26</td><td>Sigma</td><td>PKH26GL</td><td>Ko-kültür hücre boyama için</td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>Sigma</td><td>P6148</td><td>Hücre fiksasyonu için</td></tr><tr><td>von Kossa Kit</td><td>BioOptica</td><td>04-170801.A</td><td>Hücre boyama için (farklılaşma)</td></tr><tr><td>Alcian blue</td><td>Sigma</td><td>A2899</td><td>Hücre boyama için (farklılaşma)</td></tr></tbody></table>

mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Mesenchymal Stem Cell Isolation from Pulp Tissue and Co-Culture with Cancer Cells to Study Their Interactions

Kanser bir multistep süreç ve karmaşık hastalık olarak sadece tek tek hücre çoğalması ve büyüme tarafından yetkilendirilmekte ama aynı zamanda tümör çevre ve hücre-hücre etkileşimler tarafından kontrol. Kanser ve kök hücre etkileşimleri, hücre dışı ortam, fiziksel etkileşimleri ve salgılanan faktörler, değişiklikler de dahil olmak üzere yeni terapi seçenekleri bulmayı etkinleştirmek. Biz bilinen ortak kültürü teknikleri mezenkimal kök hücre (MSCs) ve kanser için bir model sistemi hücre etkileşimler oluşturmak için birleştirmek. Mevcut çalışmada, diş pulp kök hücreler (DPSCs) ve PC-3 prostat kanseri hücre etkileşimi doğrudan ve dolaylı ortak kültürü teknikleri tarafından incelenmiş. Koşul Orta (CM) DPSCs elde edilen ve 0.4 µm boyutlu gözenek trans-şey membranlar parakrin etkinlik eğitim için kullanılmıştır. Farklı hücre tiplerinin ortak kültür birlikte doğrudan hücre-hücre etkileşim çalışma gerçekleştirildi. Sonuçları CM hücre çoğalması arttı ve prostat kanseri hücre kültürlerinde apoptosis azalma saptandı. CM ve trans-şey sistem PC-3 hücre hücre göç kapasitesini arttırdı. Farklı membran boyalar ile lekeli hücreleri aynı kültür damarlarının tohumlari ve bu doğrudan ortak kültür koşul altında PC-3 hücreleri ile kendi kendine organize bir yapıda DPSCs katıldı. Genel olarak, sonuçlar ortak kültürü teknikleri bir modeli sistem olarak kanser ve MSC etkileşimleri için yararlı olabilir göstermiştir.

Şekil 1 DPSCs genel MSC özelliklerini kültür koşullar altında gösterilmektedir. DPSCs (Şekil 1B) kaplama sonra fibroblast benzeri hücre morfolojisi uygulamayın. MSC yüzey antijenleri (CD29, CD73, CD90, CD105 ve CD166) son derece hematopoetik işaretleri (CD34, CD45 ve CD14) sırasında ifade vardır negatif (Şekil 1 c). Değişiklikleri morfolojik ve moleküler düzeyde osteo-için ilgili kondro- ve adipo gen...

Mezenkimal kök hücre diş hamurundan izole ve prostat kanseri hücre etkileşimi doğrudan ve dolaylı ortak kültür yöntemleri üzerinde temel değerlendirilmesi için iletişim kuralları sağlar. Koşul orta ve trans-şey membranlar dolaylı parakrin etkinliğini çözümlemeye uygundur. Differentially Tohum hücreleri birlikte lekeli doğrudan hücre-hücre etkileşim için uygun bir model olduğunu.

Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Cancer as a multistep process and complicated disease is not only regulated by individual cell proliferation and growth but also controlled by tumor ...

Bu yöntem, kök hücre davranışının düzenlenmesinde yetişkin kök hücrelerinrolü hakkında kök hücre alanında anahtar soruların cevap yardımcı olabilir. Bu tekniğin en büyük avantajı, canlı organizmalar kullanılmadan kanser hücresi ve kök hücre etkileşimlerinin in vitro olarak değerlendirilmesine olanak sağlamasıdır. Bu teknik, kemik gibi sert dokulara kanser metastazında yetişkin kök hücrelerinin teşvik edici rolünü modelleyen kanser metastazı potansiyeline sahiptir.Prosedürün gösterimi, laboratuvarımda doktora sonrası hüseyin Apdik tarafından yapılacaktır. 17-20 yaş arası genç yetişkinlerden elde edilen yirmilik dişlerin merkezinden posa dokusunu çıkarmak için steril ekstraksiyon forsepsleri kullanarak başlayın. 10 santimetrelik doku kültürü yemekleri soğuk tam DMEM doku yerleştirin ve iki ila üç milimetrelik parçalar halinde örnekleri kıyma için bir neşter kullanın.Her çanak tan parçaları bir doku kültürü altı iyi plaka tedavi bireysel kuyulara aktarın ve tam DMEM 200 mikrolitre ile her kuyuda dokuları kapsayacak. Dokuların nemli, 37 derece santigrat ve %5 CO2 hücre kültürü kuluçka makinesinde en az iki saatlik kuluçka ile kuyu diplerine bağlanmasına izin verin. Kuluçka sonunda, taz

mesenchymal-stem-cell-isolation-from-pulp-tissue-co-culture-with

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Yöntemi kullanarak insan dental pulpa kök hücrelerinin (hDPSCs) izolasyonu ve karakterizasyonu...

İnsan Diş Pulp Kök Hücre İzolasyonu, Karakterizasyonu ve Karşılaştırmalı Farklılaşma İki Farklı Yöntemler Kullanılarak Daimi Dişler türetilen

Bu videoda, bir transwell filtresi kullanarak trigeminal nöronların ve birincil diş pulpası hücrelerinin ko-kültürünü oluşturmak için bir teknik gösterilmektedir. Fiziksel olarak ayrılmış bu durumda, diş pulpası dokusundan elde edilen mezenkimal hücreler, gözeneklerden geçen parakrin sinyal molekülleri salgılar ve nöronların mezenkimal hücrelere doğru farklılaşmasını ve göçünü teşvik ederek bir ko-kültür sistemi oluşturur.

Çapraz iletişim için dental pulpa hücreleri ve trigeminal nöronların ortak kültürünün oluşturulması

Bu makale, birincil hücre kültürleri ve nasıl tümör hücrelerinden eritrositler ve fibroblastların kirlilikler çıkarmak için taze olarak elde edilen melanom doku hazırlanmasını tarif etmektedir. Son olarak, biz nasıl tarif...

Hasta Türetilen Hücre Kültürü ve CD133 İzolasyonu<sup&gt; +</supMelanom dan&gt; sağlayan olası Kanser Kök Hücreleri

Pankreas kanseri kök hücreleri (CSC'ler), CSC biyolojisini incelemek için güçlü bir araç olan ve yeni CSC hedefleme tedavileri geliştirmek için ilk adım olarak hizmet edebilen ankrajdan bağımsız küre kültürü tekniği kullanılarak in vitro olarak genişletilebilir. Burada pankreatik CSC'lerin genişletilmesi, analizi ve hedeflenmesi için metodoloji sağlanmaktadır.

Pankreas Kanseri Yeni Tedavi Stratejileri Geliştirme Hücre Özellikleri Kök incelenmesi

İnsan mezenkimal kök hücrelerin (MSC) immünomodülatör özellikleri, klinik uygulama için giderek daha önemli görünmektedir. Floresan boya carboxyfluorescein süksinimidil ester (CFSE) ile ön-lekeli MSC ve periferal kan lökositlerinin bir ko-kültür sistemi kullanılarak, efektör lökosit çoğalmasının ve spesifik alt popülasyonları MSC immünomodülasyon in vitro değerlendirme tarif eder.

İnsan Mezenkimal Kök Hücre İmmünomodüler Properties (MKH) değerlendirilmesi

İnsan kalp dokusu miyokardiyal rejenerasyonu için uygun multipotent perivasküler öncü hücre popülasyonlarının barındırır. Perisitler ve CD34 + CD146 - - adventisya hücreleri, insan miyokard burada tarif edilen teknik, yerli kan damarları, örneğin CD146 + CD34 ile ilgili iki multipotent stromal hücre popülasyonlarının eş zamanlı izolasyonu ve saflaştırılması mümkün kılar.

İnsan Kardiyak Doku perivasküler Multipotent Öncü hücre popülasyonlarının izolasyonu

Tümör mikroçevresini (TME) taklit etmek için geçirgen bir mikro gözenekli membran ekini uyarladık. Model, karışık bir hücre kültüründen oluşur, floresan etiketleme veya hücre sıralama kullanmadan yüksek oranda zenginleştirilmiş bireysel hücre popülasyonlarının basitleştirilmiş üretimine izin verir ve normal veya stres koşulları altında TME içinde hücreler arası iletişimin incelenmesine izin verir.

Tümör mikroçevresinin A Mimik: Hücreler arası İletişim Zenginleştirilmiş hücre popülasyonları oluşturma ve incelenmesi için Basit Bir Yöntem

Burada, prelabelled Mezenkimal hücrelerin sıçan aort kaynaklı endotel ağları ile birlikte kültürlü nerede aort yüzük testin yeni bir uygulama mevcut. Bu roman yöntemi görselleştirme Mezenkimal Stromal hücre (MSCs) posta ve endotel ağları ile entegrasyon, miktar ağ özellikleri ve MSC immunophenotypes ve gen ifade değerlendirme sağlar.

Aort yüzük ortak kültür tahlil: Mezenkimal Stromal hücre Vitro anjiogenik potansiyelini değerlendirmek için uygun bir araç

Bu makale, eksplant kültür yöntemini kullanarak dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürünü oluşturmak ve bu hücrelerin ICSCRT yönergelerine dayalı olarak karakterizasyonunu yapmak için adım adım bir kılavuz sağlar. Bu protokol ile izole edilen hücreler, daha sonraki uygulamalar için mezenkimal kök hücreler olarak kabul edilebilir.

Dental pulpa kök hücrelerinin birincil kültürü

Bu protokol, multipotent kök hücrelerin enzimatik sindirim yoluyla diş pulpasından ekstraksiyonunu, kültürünü ve korunmasını vurgular. Ek olarak, osteoblastlara, adipositlere ve kondrositlere farklılaşma potansiyellerini göstererek süreçte hassasiyet ve tutarlılığın önemini vurgular.

İnsan Süt ve Daimi Dişlerinden Dental Pulpa Kök Hücrelerinin İzolasyonu, Kültürü ve Karakterizasyonu

Öğrenin diş pulpasindan mezenkimal kök hücre izolasyonunu ve prostat kanseri hücreleriyle ortak kültür yöntemlerini. Bu teknik kanser metastazı ve hücre etkileşimleri araştırmaları için değerli bir model sunar.

Mezenkimal kök hücre izolasyon hamuru doku ve kanser hücreleri ile ortak kültür ilişkileri incelemek için

Daha fazla video keşfet