Insan p53 çalışma fonksiyonel Assays geliştirmek için bir şasi olarak Maya

Merhaba, benim adım Bartolomeo Bosco, ve İtalya Trento Üniversitesi Bütünleştirici Biyoloji Merkezi Transkripsiyonel Ağ Laboratuvarı'nda doktora öğrencisiyim. Bildiğiniz gibi transkripsiyon transkripsiyon faktörü ve kofaktör mekansal ve zamansal organizasyonu içeren son derece karmaşık bir süreçtir. Çoğu, insan P53 de dahil olmak üzere, yanıt elementleri olarak adlandırılan belirli cis-acting elemanları tanımak, ve bu DNA-sıralama için bağlayıcı hedef genlerin transkripsiyon modülasyonu için gereklidir.

Bu çalışmada, size, transaktivasyon fonksiyonlarına özgü P53 dizisini, mayayı bir renk muhabiri geninde veya luciferase'de protein olarak model sistemi olarak kullanarak veya bu yaklaşımların ana deneysel adımlarını ve çok yönlülüğünü vurgulamak için hücre büyümesinin niceliklerini vurgulamak için test olarak kullanma protokolünü göstermek istiyoruz. Protokol bir, adenin-2 veya firefly luciferase geninin yukarı doğru belirli bir P53 tepki elemanı içeren muhabir maya suşlarının yapımı. Bir muhabir gerginlik inşa etmek için, ilk adımları izleyin 1.1 ile 1.15 istenilen promotör bölge hedefleyen oligonükleotidler ile maya hücreleri dönüştürmek için.