Name: Skuamöz Hücre Karsinomu Hücre Tümörü bağışıklık profil oluşturma için fareler ve tedaviye yanıt değerlendirme intramucosal aşı (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: Öğrenin baş ve boyun skuamöz hücreli karsinomu için ortotopik fare modeli geliştirme yöntemini. Bu teknik tümör mikroçevresini ve tedavi direnci mekanizmalarını incelemeye olanak tanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Tüm hayvan yordamları bir onaylanmış kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) iletişim kuralı Colorado Üniversitesi, Denver (iletişim kuralı # 00250) uygun olarak gerçekleştirilmiştir.
1. tümör hücre kültürü
Not: B4B8 ve LY2 hücre hatları orthotopic HNSCC tümör oluşturmak için kullanılmıştır: B4B8 tümör hücreleri kanserojen dönüştürülmüş Mukozal keratinositler (BALB/C fareler)'dan11' den elde. LY2 tümör hücreleri bir kendiliğinden dönüştürülmüş BALB/C keratinosit hattı (Pam 212)12,13lenf nodu Metastazlari elde edilmiştir. Her iki hücre hatları tür Dr. Nadarajah Vigneswaran (UTHealth, Houston, TX, ABD) tarafından temin edilmiştir.
<ol><li>Dulbecco'nın değiştirilmiş kartal orta (DMEM) F/12% 10 fetal sığır serum (FBS) ve hücre hat bakım için % 1 antimikrobiyal reaktif ile takıma kullanın. Bu hücre satırları 37 ° C ve % 5 CO2steril bir kuluçka korumak. Hücreleri 15 pasajlar aşan önce aşılama için kullanılmalıdır.</li>
	<li>2 x 106 175 cm2 hücre kültür şişeler 4 x 106 hücrelere plaka. Not: Hücreleri daha az % 90 emin olmak bir stres tepkisi inducing önlemek için birleşmesi.</li>
	<li>Hücreleri % 70 birleşmesi (~ 48 h) olduğunda, şişeye kuluçka makinesi kaldır ve hücreleri 3 yıkama x soğuk fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) ile.</li>
	<li>% 0.25 Tripsin, yeterince plaka yüzeyi kullanacak şişeye hücrelerden bağlantısını kesin.<ol>
<li>Bunu yapmak için 4 mL % 70 Konfluent hücreleri içeren bir 175 cm2 şişe tripsin dağıtmak. 3-4 dk 37 ° C ve % 5 CO2hücre kültür kuluçka tripsin hücrelerle kuluçkaya.</li>
		<li>Hücreleri hücre dekolmanı sağlamak için mikroskop altında görselleştirin.</li>
		<li>Tripsin etkinlik nötralize etmek için FBS içeren DMEM F/12 medya 12 mL ekleyin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Hücre süspansiyon Aspire edin ve 50 mL konik tüp içine yerleştirin.</li>
	<li>3 x-4 ters çevirme tarafından hücreleri içeren tüp sallamak x.</li>
	<li>İsteğe bağlı olarak, hücre süspansiyon 10 µL aliquot Trypan mavi bir microcentrifuge tüp 10 µL karıştırın ve bir hemasitometre kullanarak hücreleri saymak. Trypan mavi pozitif hücreleri hücre toplam sayısı üzerinden çıkararak hücre canlılığı belirlemek ve hücrelerin toplam sayıya bölme.</li>
	<li>300 x g 4 ° C'de 5 min için de hücre süspansiyon santrifüj kapasitesi</li>
	<li>Böylece 1 x 106 hücre mevcut içinde Medya 50 µL serum ve antibiyotik özgür DMEM uygun bir ses seviyesinde hücrelerde resuspend. Not: İçinde vivo hücre satırı saldırganlık (ampirik olarak belirlenir) bağlı olarak, enjeksiyon yeri fare başına başına 1 x 106 hücre kabul B4B8 ve LY2 hücreler için uygun.</li>
	<li>Buz üzerinde hücre süspansiyon içeren flakon yerleştirin.</li>
	<li>Önceden çözdürülen membran matris Buza koyun. Not: Membran matris gecede 4 ° C'de çözdürülen yapıldı.</li>
</ol>2. hücre enjeksiyon fareler içine
<ol><li>Hücreler: Bodrum membran matris (50 µL her) 1:1 karışımı hazırlayın.</li>
	<li>Hücreleri önce ekleyin; sonra yavaş yavaş membran matris pipette. Hava kabarcıkları tanıtan kaçının. Hemen önce hayvan enjeksiyon yapılmış bir karışım olduğunu emin olun. Hücre membran matris ekleme uzun bir süre için karışım titizlikle titremeye zorlaştırır matris karışımı yerleşme hücre neden olabilir. Bu tümör boyutu fareler arasında hatırı sayılır bir değişkenlik neden olur.</li>
	<li>Hafifçe karıştırın. Buz üzerinde gerçekleştirilen tüm adımlar matris içeren emin olun. Membran matris oda sıcaklığında polimerize.</li>
	<li>Şırınga aşılama için hazırlayın.</li>
	<li>0.5 mL insülin şırınga (23 G) hücre/Bodrum membran matris çözüm 100 µL ile yükleyin.</li>
	<li>Şırıngaları membran matris polimerizasyon önlemek için buz üzerinde tutun.</li>
	<li>Fareler isoflurane ve oksijen (% 2.5) ile bir odaya yerleştirerek anestezi.</li>
	<li>Fareler (yanıt-e doğru ayak parmağı çimdik eksikliği sağlayarak) enjeksiyon gerçekleştirmeden önce derin anestezi emin olun.</li>
	<li>İğne sağ veya sol yanak bölgesine ekleyin. Bu ağız her iki tarafında kullanılabilir açık alan aracılığıyla gerçekleştirilir.</li>
	<li>Fare dili engel olmadığından emin olun. Not: Dil tümör neden olur dilin poke kolaydır. Dil diğer tarafa için gerekirse hareket.</li>
	<li>Şırınga süre oral kavite içinde yanak bölgesine paralel tutun.</li>
	<li>Enjekte etmek hazır olduğunuzda şırıngayı geri çekmek ve yavaş yavaş şırınga 10 ° açıyla yerleştirin.</li>
	<li>5 bir süre içinde hücre/Bodrum membran matris süspansiyon 100 µL enjekte s.</li>
	<li>Bir ek 5 için yerinde şırınga tutun tüm malzeme sağlamak için s enjekte edilir. Not: Denetim nontumor taşıyan fareler için tümör hücreleri (yukarıda açıklandığı gibi) serum-Ücretsiz medya ve matris karışımı enjekte et.</li>
	<li>Şırıngayı yavaşça geri alıyorum.</li>
	<li>Kalan fareler ile yukarıdaki yordama devam edin.</li>
	<li>Fena halde görünmesini tümörler başlar 1 hafta için izin (50-200 mm3 B4B8 ve LY2 hücreler için).</li>
</ol>3. fare izleme
<ol><li>Çap pergeli, 1 hafta sonra tümör hücre enjeksiyon kullanarak ilk ölçüm gerçekleştirin. Dış Çap pergeli kullanarak tümör birimi hesaplamak için en büyük boyuna çapı (uzunluk) ve en büyük transvers çapı (genişlik) belirlemek ve değiştirilmiş ellipsoidal formül14,15kullanın. <img alt="Equation" src="/files/ftp_upload/59195/59195eq1.jpg">
</li>
	<li>Tümör birim (1 x-2 x haftada-düzenli aralıklarla) için düzenli Kaliper ölçümleri gerçekleştirmek için devam.</li>
	<li>Tümör büyüme beslenme üzerinde etkilerini değerlendirmek için hayvan ağırlık ölçmek.</li>
</ol>4. hasat Tümörleri
<ol><li>Deneysel bitiş noktası ulaşıldığında, uygun önlemleri (örneğin, CO2 boğulma, işten çıkarma veya servikal çıkığı) kullanarak hayvanlara ötenazi. Not: Fareler can çekişen olursam bu çalışmada, bitiş noktası ulaşılmıştır (kilo kaybı &gt; a-sizlik çekmek-in damat, kaşeksi ilk kendi ağırlığının % 15) ve/veya tümör boyutu 1000 mm3olsa.</li>
	<li>
Boyun bölgesinde orta hat boyunca uzun bir kesi oluşturarak hayvan dissekan başlamak.
	<ol>
<li>Künt forseps cilt kapmak ve deriyi kesme makası keskin için kullanın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Makas yavaşça tümör kapsayan deri altında takıp makas genelinde ve cilt içine iterek hava cepleri oluşturabilirsiniz.</li>
	<li>Cilt tümör yeterince müstakil, drenaj lenf düğümleri (DLNs) tanımlamak ve lenf düğümleri varlığı ile şaşırmış tümör doku sahip önlemek için tüketim. Not: Büyük tümör ulaşmak ve/veya DLN kapak. Gerçekleştirilen tahlil türüne bağlı olarak, yalıtım bozulmadan lenf nodlarının tahlil sonuçları eğriltme sonuçlanır tümör içine bağışıklık hücrelerinin dökülmeyi önlemek için önemlidir.</li>
	<li>Birimin tümü ayrılana kadar tümörün sınırları ile kesti.</li>
</ol>5. tümör aşağı akım için işleme uygulamaları
<ol><li>Aşağı akım histolojik muayene için tümörlerin % 10 formalin oda sıcaklığında yerleştirin. Overfixation önlemek için formalin % 70 etanol ile değiştirin. Akış Sitometresi Analizi için aşağıda açıklandığı gibi tümör işlemek. Not: Overfixation boyama belirli türleri için sorunlu olabilmesi için önce doku 72 h için formalin içinde tutulabilir.</li>
	<li>Tümörün 1-2 mm kesme-steril jilet veya keskin makas kullanarak parçaları boyutlu.</li>
	<li>Collagenase III ile 50 mL konik tüp kesme tümör alin (4,250 adet örnek başına), Dnaz ben (örnek başına 0.1 mg) ve tripsin inhibitörü (örnek başına 1 mg).</li>
	<li>Her 10 min sallayarak ile 30 dk 37 ° C'de kuluçkaya. Not: % 90 etanol ile sterilize ve bir hücre kültür kuluçka makinesine yerleştirilen bir resealable çanta örnekleri yerleştirilebilir.</li>
	<li>30 dakika sonra Hank'in 20 mL dengeli tuz solüsyonu (HBSS) ve 300 x g 5 min için spin ekleyin. Not: HBSS Potasyum klorür, Sodyum Klorür, sodyum bikarbonat, sodyum fosfat dibasic, sodyum fosfat yem mono ve glikoz oluşur.</li>
	<li>Süpernatant atın ve Pelet 2-3 mL kırmızı kan hücresi (RBC) lizis arabellek resuspend. Titizlikle pipet. Not: RBC lizis arabellek amonyum klorür, sodyum bikarbonat ve disodyum oluşur.</li>
	<li>Oda sıcaklığında 2 min için kuluçkaya. Not: Daha uzun kuluçka diğer hücre popülasyonlarının toksik olabilir.</li>
	<li>20 mL HBSS lizis arabellek etkisini nötralize etmek için ekleyin.</li>
	<li>300 x g 5 min için de santrifüj kapasitesi ve süpernatant atın.</li>
	<li>Pelet 10 mL HBSS resuspend.</li>
	<li>Çözüm 70 µm naylon restrainer üzerinden geçmek ve 5 dakika süreyle 300 x g , santrifüj süpernatant atın.</li>
	<li>5.8-5.10 adımları yineleyin ve hücre süspansiyon süspansiyon ek herhangi bir enkaz kaldırılır emin olmak için 40 µm naylon restrainer üzerinden geçmek.</li>
</ol>6. hücre boyama ve veri toplama
<ol><li>Hücre Pelet 1 mL HBSS resuspend.</li>
	<li>1.7. adımda açıklandığı gibi bir hemasitometre veya bir otomatik hücre sayaç kullanarak hücreleri saymak</li>
	<li>
Toplam cep telefonu numarasını ve boyama için uygun konsantrasyonu belirlemek. Not: 1-2 milyon hücre Akış Sitometresi boyama için ideal hücre toplama olduğunu. Örneğin, boyama bir 96-şey tabak içinde gerçekleştirilir ve 10 milyon hücre varsa, 1 mL ve plaka 100 µL iyi başına 1 milyon hücre için de örnek resuspend.</li>
	<li>
FC blok (CD16/CD32) 1: 100 bir konsantrasyon FcγIII ve FcγII reseptörleri nonantigen özel bağlama immünglobulin önlemek için ekleyin. Oda sıcaklığında 5 min için kuluçkaya.
	<ol>
<li>Santrifüj kapasitesi ve hücre Pelet Akış Sitometresi hücre arabellek boyama 100 µL içinde resuspend (%5 FBS, % 2 EDTA ve % 1'i içeren tuzlu çözüm oluşan HEPES).</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Hücre yüzeyine (her antikor uygun seyreltme ekleme) tedarikçi tarafından sağlanan yönergelere göre boyama gerçekleştirmek. Oda sıcaklığında 60 dk için kuluçkaya.
	<ol>
<li>Santrifüj kapasitesi ve hücre Pelet HBSS 100 µL içinde resuspend. 2 x aşırı antikor kurtulmak için yineleyin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Örnekler uygun Akış Sitometresi üzerinde çalıştırın.
	<ol>
<li>Hücre içi işaretleri (örneğin, foxp3) analiz, hücre permeabilization ve üreticinin yönergelerine göre boyama gerçekleştirin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Chaturvedi, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Worldwide+trends+in+incidence+rates+for+oral+cavity+and+oropharyngeal+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Worldwide trends in incidence rates for oral cavity and oropharyngeal cancers.</a> Journal of Clinical Oncology. 31 (36), 4550-4559 (2013).</li>
<li>Ang, K. K., Sturgis, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+papillomavirus+as+a+marker+of+the+natural+history+and+response+to+therapy+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Radiation+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human papillomavirus as a marker of the natural history and response to therapy of head and neck squamous cell carcinoma.</a> Seminars in Radiation Oncology. 22 (2), 128-142 (2012).</li>
<li>Amin, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Eighth+Edition+AJCC+Cancer+Staging+Manual%3A+Continuing+to+build+a+bridge+from+a+population-based+to+a+more+%26%2334%3Bpersonalized%26%2334%3B+approach+to+cancer+staging%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">The Eighth Edition AJCC Cancer Staging Manual: Continuing to build a bridge from a population-based to a more &#34;personalized&#34; approach to cancer staging.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (2), 93-99 (2017).</li>
<li>Salley, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+carcinogenesis+in+the+cheek+pouch+of+the+Syrian+hamster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Experimental carcinogenesis in the cheek pouch of the Syrian hamster.</a> Journal of Dental Research. 33 (2), 253-262 (1954).</li>
<li>Morris, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+influencing+experimental+carcinogensis+in+the+hamster+cheek+pouch%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dental+Research%22%5BJournal%5D)">Factors influencing experimental carcinogensis in the hamster cheek pouch.</a> Journal of Dental Research. 40, 3-15 (1961).</li>
<li>MacDonald, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+epithelial+dysplasia+in+hamster+cheek+pouch+carcinogenesis+and+human+oral+mucosa%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Oral+Pathology+%26+Medicine%22%5BJournal%5D)">Comparison of epithelial dysplasia in hamster cheek pouch carcinogenesis and human oral mucosa.</a> Journal of Oral Pathology & Medicine. 10 (3), 186-191 (1981).</li>
<li>Hawkins, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4NQO+carcinogenesis%3A+a+mouse+model+of+oral+cavity+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Head+%26+Neck%22%5BJournal%5D)">4NQO carcinogenesis: a mouse model of oral cavity squamous cell carcinoma.</a> Head & Neck. 16 (5), 424-432 (1994).</li>
<li>Tang, X. H., Knudsen, B., Bemis, D., Tickoo, S., Gudas, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oral+cavity+and+esophageal+carcinogenesis+modeled+in+carcinogen-treated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Oral cavity and esophageal carcinogenesis modeled in carcinogen-treated mice.</a> Clinical Cancer Research. 10 (1 Pt 1), 301-313 (2004).</li>
<li>Vered, M., Yarom, N., Dayan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((4NQO+oral+carcinogenesis%3A+animal+models%2C+molecular+markers+and+future+expectations%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">4NQO oral carcinogenesis: animal models, molecular markers and future expectations.</a> Oral Oncology. 41 (4), 337-339 (2005).</li>
<li>Bornstein, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Smad4+loss+in+mice+causes+spontaneous+head+and+neck+cancer+with+increased+genomic+instability+and+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Smad4 loss in mice causes spontaneous head and neck cancer with increased genomic instability and inflammation.</a> Journal of Clinical Investigation. 119 (11), 3408-3419 (2009).</li>
<li>Thomas, G. R., Chen, Z., Oechsli, M. N., Hendler, F. J., Van Waes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+expression+of+CD80+is+a+marker+for+increased+tumorigenicity+in+a+new+murine+model+of+oral+squamous-cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Decreased expression of CD80 is a marker for increased tumorigenicity in a new murine model of oral squamous-cell carcinoma.</a> International Journal of Cancer. 82 (3), 377-384 (1999).</li>
<li>Yuspa, S. H., Hawley-Nelson, P., Koehler, B., Stanley, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+survey+of+transformation+markers+in+differentiating+epidermal+cell+lines+in+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A survey of transformation markers in differentiating epidermal cell lines in culture.</a> Cancer Research. 40 (12), 4694-4703 (1980).</li>
<li>Chen, Z., Smith, C. W., Kiel, D., Van Waes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+variants+derived+following+in+vivo+tumor+progression+of+an+in+vitro+transformed+squamous+cell+carcinoma+line+acquire+a+differential+growth+advantage+requiring+tumor-host+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Metastatic variants derived following in vivo tumor progression of an in vitro transformed squamous cell carcinoma line acquire a differential growth advantage requiring tumor-host interaction.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 15 (5), 527-537 (1997).</li>
<li>Euhus, D. M., Hudd, C., LaRegina, M. C., Johnson, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+measurement+in+the+nude+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Tumor measurement in the nude mouse.</a> Journal of Surgical Oncology. 31 (4), 229-234 (1986).</li>
<li>Tomayko, M. M., Reynolds, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+subcutaneous+tumor+size+in+athymic+%28nude%29+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Chemotherapy+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Determination of subcutaneous tumor size in athymic (nude) mice.</a> Cancer Chemotherapy and Pharmacology. 24 (3), 148-154 (1989).</li>
<li>Yushkevich, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((User-guided+3D+active+contour+segmentation+of+anatomical+structures%3A+significantly+improved+efficiency+and+reliability%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">User-guided 3D active contour segmentation of anatomical structures: significantly improved efficiency and reliability.</a> NeuroImage. 31 (3), 1116-1128 (2006).</li>
<li>Dutta, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+tumour+necrosis%2C+tumour+proliferation%2C+local+and+systemic+inflammation%2C+microvessel+density+and+survival+in+patients+undergoing+potentially+curative+resection+of+oesophageal+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Britisch+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">The relationship between tumour necrosis, tumour proliferation, local and systemic inflammation, microvessel density and survival in patients undergoing potentially curative resection of oesophageal adenocarcinoma.</a> Britisch Journal of Cancer. 106 (4), 702-710 (2012).</li>
<li>Li, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genomic+analysis+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma+cell+lines+and+human+tumors%3A+a+rational+approach+to+preclinical+model+selection%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Genomic analysis of head and neck squamous cell carcinoma cell lines and human tumors: a rational approach to preclinical model selection.</a> Molecular Cancer Research. 12 (4), 571-582 (2014).</li>
<li>Walsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Humanized+Mouse+Models+of+Clinical+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Humanized Mouse Models of Clinical Disease.</a> Annual Review of Pathology. 12, 187-215 (2017).</li>
<li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionizing+radiation+sensitizes+tumors+to+PD-L1+immune+checkpoint+blockade+in+orthotopic+murine+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22OncoImmunology%22%5BJournal%5D)">Ionizing radiation sensitizes tumors to PD-L1 immune checkpoint blockade in orthotopic murine head and neck squamous cell carcinoma.</a> OncoImmunology. 6 (10), e1356153(2017).</li>
<li>Ferris, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+evaluations+of+nivolumab+%28nivo%29+versus+investigator%E2%80%99s+choice+%28IC%29+chemotherapy+for+recurrent+or+metastatic+%28R%2FM%29+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+%28SCCHN%29%3A+CheckMate+141%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Further evaluations of nivolumab (nivo) versus investigator’s choice (IC) chemotherapy for recurrent or metastatic (R/M) squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN): CheckMate 141.</a> Journal of Clinical Oncology. 34, (2016).</li>
<li>Ferris, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nivolumab+for+Recurrent+Squamous-Cell+Carcinoma+of+the+Head+and+Neck%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Nivolumab for Recurrent Squamous-Cell Carcinoma of the Head and Neck.</a> The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1856-1867 (2016).</li>
<li>Harrington, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nivolumab+versus+standard%2C+single-agent+therapy+of+investigator%27s+choice+in+recurrent+or+metastatic+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+%28CheckMate+141%29%3A+health-related+quality-of-life+results+from+a+randomised%2C+phase+3+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Nivolumab versus standard, single-agent therapy of investigator's choice in recurrent or metastatic squamous cell carcinoma of the head and neck (CheckMate 141): health-related quality-of-life results from a randomised, phase 3 trial.</a> The Lancet Oncology. 18 (8), 1104-1115 (2017).</li>
<li>Kiyota, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+randomized%2C+open-label%2C+Phase+III+clinical+trial+of+nivolumab+vs.+therapy+of+investigator%27s+choice+in+recurrent+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck%3A+A+subanalysis+of+Asian+patients+versus+the+global+population+in+checkmate+141%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">A randomized, open-label, Phase III clinical trial of nivolumab vs. therapy of investigator's choice in recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck: A subanalysis of Asian patients versus the global population in checkmate 141.</a> Oral Oncology. 73, 138-146 (2017).</li>
<li>Ling, D. C., Bakkenist, C. J., Ferris, R. L., Clump, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+Immunotherapy+in+Head+and+Neck+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Radiation+Oncology%22%5BJournal%5D)">Role of Immunotherapy in Head and Neck Cancer.</a> Seminars in Radiation Oncology. 28 (1), 12-16 (2018).</li>
<li>Perri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radioresistance+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%3A+Biological+bases+and+therapeutic+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Head+%26+Neck%22%5BJournal%5D)">Radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma: Biological bases and therapeutic implications.</a> Head & Neck. 37 (5), 763-770 (2015).</li>
<li>Yamamoto, V. N., Thylur, D. S., Bauschard, M., Schmale, I., Sinha, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overcoming+radioresistance+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oral+Oncology%22%5BJournal%5D)">Overcoming radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma.</a> Oral Oncology. 63, 44-51 (2016).</li>
<li>Bonner, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy+plus+cetuximab+for+locoregionally+advanced+head+and+neck+cancer%3A+5-year+survival+data+from+a+phase+3+randomised+trial%2C+and+relation+between+cetuximab-induced+rash+and+survival%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Oncology%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy plus cetuximab for locoregionally advanced head and neck cancer: 5-year survival data from a phase 3 randomised trial, and relation between cetuximab-induced rash and survival.</a> The Lancet Oncology. 11 (1), 21-28 (2010).</li>
<li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+EphB4-Ephrin-B2+Signaling+Enhances+Response+to+Cetuximab-Radiation+Therapy+in+Head+and+Neck+Cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Inhibition of EphB4-Ephrin-B2 Signaling Enhances Response to Cetuximab-Radiation Therapy in Head and Neck Cancers.</a> Clinical Cancer Research. 24 (18), 4539-4550 (2018).</li>
<li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+radiosensitization+in+EphB4+receptor-expressing+Head+and+Neck+Squamous+Cell+Carcinomas%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Enhancing radiosensitization in EphB4 receptor-expressing Head and Neck Squamous Cell Carcinomas.</a> Scientific Reports. 6, 38792(2016).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+radiation+and+immunotherapy%3A+a+new+systemic+therapy+for+solid+tumors%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Combining radiation and immunotherapy: a new systemic therapy for solid tumors?</a> Cancer Immunology Research. 2 (9), 831-838 (2014).</li>
<li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+radiotherapy+and+PD-L1+blockade+is+mediated+by+TIM-3+upregulation+and+regulatory+T-cell+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Resistance to radiotherapy and PD-L1 blockade is mediated by TIM-3 upregulation and regulatory T-cell infiltration.</a> Clinical Cancer Research. , (2018).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Titiz analizi ve tümör microenvironment karakterizasyonu için anlayış mekanizmaları tümör gelişimi, ilerleme ve metastaz ve etkili tedaviler gelişimi için önemli bir strateji temsil eder. Baş ve boyun kanseri baş ve boyun bölgesi içinde birden çok anatomik site gerçekleşebilir karmaşık bir hastalıktır. Hastalık mekanizmaları anlama ve tedavi geliştirmek için önemli bir engeli insan HNSCCs agresif ve metastatik doğası benzer fare fare hücre hatları eksikliği oldu. Ayrıca, çok sayıda fare modelleri yüksek vasküler yoğunluğ...

HNSCC en sık beşinci malignite dünyanın her yerinde mi, fazla 600.000 hastalarda her yıl1tanısı. Kemoterapi ve radyoterapi (RT) içeren agresif tedavi rağmen insan Papilloma Virus (HPV) enfeksiyonu olmadan HNSCC hastalar için genel sağkalım (OS) oranı % 50'in altında 5 yıl2' den sonra kalır. Tümör mukozasinin, dil, ağız, burun, ağız boşluğu, yutak katında da dahil olmak üzere baş ve boyun bölgesi içinde birkaç farklı anatomik sitelerden gerçekleşebilir gibi bu büyük ölçüde son derece karmaşık tümör microenvironment atfedilir, mastoidi ve hypopharynx. Buna ek olarak, baş ve boyun bölgesinin son derece skarların ve yaklaşık yarım vücut3tüm lenf düğümleri içerir. Baş ve boyun tümörü Biyoloji Araştırma çalışmaları bir çoğunluğu itimat gögüs bölgesinde tümör modellerde. Modelleri gibi tümör iç mekanizmaları içgörü sunabilir, ancak yerel baş ve boyun microenvironment eksikliği gibi bulgular translasyonel potansiyelini önemli ölçüde etkileyebilir. Sözlü tümörler ikna etmek için kullanılan bir yöntem kanserojen 9,10-Dimetil-1,2-benzanthracene (DMBA)4maruz geçer. Ancak, bu yöntem ile ilişkilidir uzun bir süreç, fareler ve hamster ama değil farelerde tümör indükler ve elde edilen tümör farklılaştırılmış SCCs5,6histolojik özellikleri birçok sahip değilsin. Carcinogen4-nitroquinoline 1-oksit (4-NQO), suda çözünen kinolon türevi, sözlü olarak uygulandığında fare sözlü tümörleri içinde sonuçlandı ama aynı zamanda uzun pozlama süreleri (16 hafta) ve sınırlı bir zarar giriş almak oranı içinde ve arasında toplu işlemleri Fareler7,8,9/. Klinik modellerinin geliştirilmesi amacıyla, genetiği modelleri sürücü oncogenes veya Tümör baskılayıcı genler TP53, TGFB, KRAS, HRAS ve SMAD410da dahil olmak üzere, manipülasyon içeren çeşitli grupları kullanılmıştır. Bu modellerin bilinen sürücü genler ile tümör içgörü sağlayabilir ama insan HNSCCs karmaşık heterojen özetlemek değil.
Bu çalışmada, Skuamöz Hücre Karsinomu hücre intramucosal bir aşı farelerde gerçekleştirme fizibilite göstermek. Aşısını hücreleri agresif tümör enjeksiyon 1 hafta içinde geliştirmek. İnsan HNSCCs benzer, tümör bölgesel lenf düğümlerine metastaz. Hastalığın klinik ve histolojik özellikler karakterize ve tümör bağışıklık microenvironment içgörü sağlamak. Önerdiğimiz bu orthotopic model HNSCC, kanser biyoloji, tümör İmmünoloji ve preklinik çalışmaları uygulamaları vardır. Bağışıklık kaçırma, tümör ilerleme, tedavi direnci ve metastaz mekanizmaları alanlar önerilen modelini kullanarak ele alınması klinik önem gösterir.

<table><tbody><tr><td>Kollajenaz III</td><td>Worthington Biyokimya A.Ş.</td><td></td><td></td>LS004183</tr><tr><td>DNase I</td><td>Worthington Biyokimya A.Ş.</td><td></td><td></td>LS006328</tr><tr><td>Fc Blok (CD16/32)</td><td>BD Biosciences</td><td>553141</td><td>&nbsp; Klon 2.4G2&nbsp;</td></tr><tr><td>Akış Sitometrisi Boyama Tamponu</td><td>eBioscience</td><td>00-4222-26</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>14175079</td><td>kalsiyum yok, magnezyum yok, feno kırmızı</td></tr><tr><td>Helois kütle sitometresi</td><td>Fluidigm</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel membran matrisi</td><td>Corning&nbsp;</td><td>CB-40234B</td><td></td></tr><tr><td>MRI Tarayıcı</td><td>Bruker</td><td>NA</td><td>7.4 Tesla</td></tr><tr><td>RBC lizis tamponu</td><td>BioLegend</td><td>420301</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin inhibitörü</td><td>Worthington Biochemical Corp.</td><td></td><td></td>LS002830</tr></tbody></table>

skuamöz hücre karsinomu hücre tümörü bağışıklık profil oluşturma için fareler ve tedaviye yanıt değerlendirme intramucosal aşı

Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

Baş ve boyun Skuamöz Hücre Karsinomu (HNSCC) ile yineleme ve başarısız tedavi yüksek yaygınlık zayıflatıcı ve ölümcül bir hastalıktır. Daha iyi tedavi stratejileri geliştirmek için tedavi direnci katkıda anlayış tümör microenvironmental faktör olması önemlidir. Hastalık mekanizmaları anlama ve tedavi geliştirmek için önemli bir engeli insan HNSCCs agresif ve metastatik doğası benzer fare hücre hatları eksikliği oldu. Ayrıca, fare modelleri çoğunluğu yüksek vasküler yoğunluk, geniş lenfatik damarlara ve ikamet Mukozal flora da dahil olmak üzere baş ve boyun bölgesinin önemli fizyolojik özellikleri eksikliği tümörlerin subkutan takılan istihdam. Bu çalışmanın amacı geliştirmek ve HNSCC bir orthotopic model karakterize olmaktır. Biz iki genetik olarak farklı fare hücre satır ve farelerin yanak mukozasında kurulan tümörler istihdam. Collagenase tabanlı tümör sindirim yöntemleri kurulan tümörler tek hücre en iyi kurtarma için en iyi duruma getirme. Burada sunulan veriler fareler geliştirmek bölgesel lenf düğümlerine metastaz son derece bozukluklarına tümörler göstermektedir. Tek hücreli multiparametric kitle Sitometresi Analizi myeloid hücrelerin tüm bağışıklık hücreleri çoğunluğu temsil eden çeşitli bağışıklık nüfus varlığı gösterir. Bu çalışmada önerilen model kanser biyoloji, tümör İmmünoloji ve roman therapeutics preklinik geliştirme uygulamaları vardır. Orthotopic modeli insan hastalığın klinik özelliklerine benzerlik gelişmiş çeviri ve geliştirilmiş hasta sonuçları için bir araç sağlar.

Her iki hücre hatları benzer katlama kez var LY2 ve B4B8 hücre çoğalması tüp bebek değerlendirilmesi gösterdi (21 h ve 23 h, sırasıyla). İn vivo, her iki hücre hatları bir tek, görünür ve palpabl kitle aşılama (şekil 1A) 1 hafta içinde kurdu. LY2 tümörü taşıyan farelerde tümör yükü (şekil 1A) nedeniyle 3 hafta çene yerlerinden. Tümör hücreleri almadıysanız kontrol fareler tümörler olarak beklenen geliştirmek değil. LY2 tümörler B...

Burada bir orthotopic fare modeli baş ve boyun Skuamöz Hücre Karsinomu geliştirmek için tekrarlanabilir bir yöntem mevcut. Tümör nekroz, zavallı farklılaşma, nodal metastaz ve bağışıklık infiltrasyon gibi hastalığın klinik histopatolojik özellikler göstermektedir. Tümörü taşıyan fareler disfaji, çene deplasman ve kilo kaybı gibi klinik belirtiler geliştirmek.

Skuamöz Hücre Karsinomu Hücre Tümörü bağışıklık profil oluşturma için fareler ve tedaviye yanıt değerlendirme intramucosal aşı

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Baş ve boyun bölgesindeki kanserler giderek yaygınlaşmaktadır. Ancak, tümör mikroçevre ve bu bölgede tedavi direnci mekanizmaları sınırlı bir anlayış var. Bu teknik, baş/boyun tümörlerinin doğal mikro çevresini erişilebilir bir şekilde özetlemek için kullanılabilir ve insanlarda görülenlere benzer klinik bulgular üretir.Tümör hücre kültürü %70 birleştiğinde, hücreleri yıkama başına soğuk PBS ile üç kez yıkayın ve hücreleri kültür şişesinin alt yüzeyini kaplayacak kadar %0,25 tripsin ile takın. Hücre kültürü kuluçka makinesinde 3-4 dakika kaldıktan sonra, hafif bir mikroskop altında müfrezeyi doğrulayın ve fetal sığır serumu ile desteklenen 12 mililitre DMEM F12 ortamı ile tripsini etkisiz hale getirin. Hücre süspansiyonuna 50 mililitrelik konik bir tüp aktarın ve hücreleri ters çevirerek 3-4 kez karıştırın.Daha sonra hücreleri santrifüj ile toplayın ve serum ve antibiyotiksiz DMEM'deki peleti bir kere 10 ila buz üzerinde orta konsantrasyonda 50 mikrolitre başına altıncı tümör hücrelerine yeniden askıya alın. Enjeksiyondan hemen önce, hücreleri bire bir tümör hücrelerinin süspansiyonundaki hücreleri buz üzerinde bazal membran matris oranına karıştırın. Alıcı hayvan başına 100 mikrolitre hücre içeren 23 kalibrelik bir iğneyle donatılmış bir 0,5 mililitrelik şırınga yükleyin.Şırıngaları buza yerleştirin ve anestezili bir farede parmak kıskacına yanıt verme eksikliğini onaylayın. Daha sonra, beş saniye boyunca hücre bodrum membran matris süspansiyon unun tam 100 mikrolitre hacminin enjeksiyonu kolaylaştırmak için ağız boşluğu içinde iken buccal bölgeye paralel şırınga tutarak ağzın her iki tarafında mevcut açık alan üzerinden sağ veya sol buccal bölgeye iğne takın. Şırıngayı nazikçe çekmeden önce tüm malzemenin enjekte edildiğinden emin olmak için şırıngayı beş saniye daha yerinde tutun.Tümörler yaklaşık bir hafta içinde büyük ölçüde görünür hale gelecek. Enjeksiyondan bir hafta sonra, tümör hacmini haftada bir ila iki kez belirlemek için her tümörün uzunluk ve genişliğini ölçmek için kaliper kullanın. Ve beslenme üzerinde tümör büyüme etkilerini değerlendirmek için her hayvanın ağırlığını ölçmek.Uygun deneysel uç noktada, boyun orta hattı ile bir deri kesi yapmak için keskin makas ve künt çakışma kullanın. Ve makası yavaşça tümörü kaplayan derinin altına takın ve makası cilde doğru iterek hava cepleri oluşturun. Deri tümörden yeterince ayrıldıktan sonra, lenf dokusunun varlığı yla tümör dokusunun şaşkına kopmasını önlemek ve tüm hacim kopana kadar tümörün sınırlarından kesilmemek için drenaj lenf düğümlerini boşaltın.Downstream analizi için tümör işlemek için, bir ila iki milimetre büyüklüğünde parçalar halinde tümör kesmek ve kollajenaz üç içeren 50 mililitrelik konik tüp içine parçaları yerleştirin, BOS bir, ve tripsin inhibitörü. 30 dakika boyunca 37 santigrat derece tümör parçaları kuluçka sonra, her 10 dakikada bir sallayarak, tüp için HBSS 20 mililitre ekleyin ve 70 mikrometre pour naylon süzgeç ile tümör parçaları içeren süspansiyon geçmek. Süzgeçteki tümör parçalarını püre haline getirmek ve süzgeç ten 10 mililitre HBSS eklemek için beş mililitrelik şırınga pistonu kullanın.Santrifüj ile hücreleri aşağı çevirin. 2-3 mililitre kırmızı kan hücresi lisis tamponundaki peleti sıkı pipetleme ile yeniden askıya alın, oda sıcaklığında iki dakika sonra 20 mililitre taze HBSS ile lysis nötralize. Sonra başka bir santrifüj için HBSS ek bir 20 mililitre hücreleri yeniden askıya ve tümör hücresi süspansiyon herhangi bir son enkaz kaldırmak için 40 mikrometre dökmefiltresi ile hücreleri zorlanma.LY2 tümörleri B4B8 tümörlerine göre daha yüksek oranda büyür. Ve çene deplasmanı sergileyen fareler de disfaji nedeniyle hızla kilo kaybı gelişir. LY2 farelerinde ortanca sağkalım da B4B8 tümör taşıyan farelerde gözlenenin yarısından daha azdır.Tümör taşıyan farelerin manyetik rezonans görüntülemesi, bukkal mukozanın iç tabakasına kadar uzanan, ancak dil veya diğer yakın organlara kadar uzanan iyi çizilmiş tümörleri gösterir. Histolojik inceleme, tüm LY2 tümör taşıyan farelerde kötü diferansiye skuamöz hücreli karsinom, B4B8 tümörü taşıyan farelerde ise orta derecede diferansiye skuamöz hücreli karsinom geliştiğini göstermektedir. Ly2 tümör taşıyan tüm farelerde histolojik olarak doğrulanmış nekroz vardır ve çoğunluğu orta ve şiddetli nekroz gösterir.Bu temsili deneyde, bukkal bölge tümör hücre enjeksiyonundan üç hafta sonra LY2 tümörü hasat edildi ve işlendi. CD45-pozitif bağışıklık hücreleri toplam tümör hücre nüfusunun %7.3'ünü temsil etti. CD11b-pozitif miyeloid hücreler CD45-pozitif hücrelerin tümünün %37.8'ini temsil eder, bunların çoğu F480-pozitif makrofajlar olarak belirlenmiştir, küçük nötrofil popülasyonları ve miyeloit kaynaklı baskılayıcı hücreler de gözlenmiştir.T hücreleri CD45-pozitif bağışıklık hücre popülasyonunun %15.9'undan, %53.4'ü CD4-pozitif FoxP3-pozitif düzenleyici T hücreleriydi. Doğal öldürücü hücreler tüm CD45-pozitif hücrelerin %2'sinden daha azını oluşturuyor. İğneyi ve alıcı fareyi tutarak ve hayvanın ağzını ortaya çıkarmak için güven ve konfor geliştirmek için enjeksiyon uyguluyorolmak önemlidir.İşlem başarıyla yapıldıktan sonra, tümör tedavisine verilen yanıtın değerlendirilmesi veya tümörün içsel ve mikroçevresel faktörlerin değerlendirilmesini içeren deneyler yapılabilir. Bu teknik, baş ve boyun kanseri hastalarında anti-PL1 tedavisi ile radyoterapi birleştirerek etkilerini değerlendiren, bir araştırmacı tarafından başlatılan klinik çalışma tasarımında yol açmıştır.

intramucosal-inoculation-squamous-cell-carcinoma-cells-mice-for-tumor

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Immünkompetan Fare Seröz Yumurtalık Kanseri bir Ortotopik Model In vivo</emTümör Bağışıklık Yanıtları> Tümör Görüntüleme ve İzleme

Etiketli hücreleri çok foton mikroskobu ile dil içinde ağız kanseri ve tümör invazyonu niceliksel olarak izlenmesi bir fare modeli üreten yer alan tekniklerin kapsamlı bir bakış sunulmaktadır. Bu sistem, anti-invaziv bileşiklerin moleküler değerlendirme ve ilaç etkinliği için faydalı bir platform olarak hizmet verebilir.

Oral Skuamöz Hücre Karsinomu Ortotopik Fare Modeli Tümör Hücre Invasion Multi-foton Görüntüleme

Bu videoda, skuamöz hücreli karsinom hücre hattının intramukozal inokülasyonu ile ortotopik bir baş ve boyun kanseri murin modeli geliştiriyoruz. Tümör taşıyan fare, insan hastalığının klinik olarak ilgili semptomlarına benzerlik gösterir ve bu nedenle kanserin ilerlemesini incelemek ve yeni terapötik stratejiler keşfetmek için kullanılabilir.

Murin Modelinde Kanser Hücrelerinin İntramukozal Aşılanması: Ortotopik Bir Baş ve Boyun Kanserli Fare Modeli Oluşturma Prosedürü

Bu videoda hücre bazlı bir tümör aşılama testi gösterilmektedir. Tümör oluşumu için intradermal olarak B16-F10 melanom hücreleri enjekte edilen bir fare, geliştirilen tümörün yakınında Flt3L sitokin salgılayan B16-F10 hücreleri ile aşılanır. Aşıdan salgılanan Flt3L, daha sonra lenf düğümlerindeki T hücrelerine tümör antijenleri sunan dendritik hücrelerin olgunlaşmasını ve çoğalmasını teşvik ederek hedeflenmiş bir anti-tümör bağışıklık tepkisini tetikler.

Bir fare modelinde tümör implantasyonu ve bir tümör aşısının enjeksiyonu

Bir N-bütil-N-(4-hidroksibutil) nitrozamin bağımlı mesane kanseri modelinde insan müsin 1 (MUC1), test amacıyla MUC1 yönlendirilmiş immünoterapi için transgenik farenin olarak geliştirilmiştir. Bir MUC1 hedefli bir peptid aşının sonra, MUC1 bir sitotoksik T-lenfosit yanıt sitokin seviyeleri ve T-hücresi spesifik aktivitesi ölçülerek teyit edilmiştir.

Bağışıklık Sağlam İnsan MUC1 Transgenik Farelerde İnvaziv Geçici Hücre Mesane Karsinomu indüksiyon: immünoterapi Kalkınma İçin Bir Model

Bu protokol, dişi C57BL / 6J fareler, tümör büyümesi izlenmesinde sıçangil ortotopik mesane tümörlerinin üretimini tarif eder.

Bir Fare Ortotopik Mesane Tümör Modeli ve Tümör Tespit Sistemi

Burada, bir fare tümörü modelinde tümöre özgü ve periferi kaynaklı tümör kaynaklı lenfositlerin karakterizasyonu için bir tümör transplantasyon protokolü sunulmaktadır. Alıcı kaynaklı immün hücrelerin akışının akım sitometrisi ile spesifik olarak izlenmesi, antitümör immün yanıtlar sırasında bu hücrelerin fenotipik ve fonksiyonel değişikliklerinin dinamiklerini ortaya koymaktadır.

Farelerde Tümör Sızan CD8 + T Hücrelerinin Dinamiğini Değerlendirmek için Tümör Transplantasyonu

İntravital mikroskopi bulgularının translasyonu, dokuya sığ derinlik penetrasyonu ile karşı karşıyadır. Burada, intravital mikroskopi bulgularının klinik translasyonunu potansiyel olarak kolaylaştıran, doğrudan uzamsal korelasyon için intravital mikroskopi ve klinik olarak uygulanabilir görüntüleme modalitelerinin (örneğin, BT, MRI) birlikte kaydedilmesini sağlayan bir dorsal pencere odası fare modelini açıklıyoruz.

Translasyonel Kanser Araştırmalarında Kombine İntravital Mikroskopi ve Manyetik Rezonans Görüntüleme için Dorsal Deri Kıvrımlı Pencere Odası Tümör Fare Modeli

Bu çalışma, bir murin modelinde ışıldayan kolorektal kanser hücrelerinin in vivo deri altı indüksiyonuna ve ardından bir görüntüleme sistemi kullanılarak lüminesans ölçümüne odaklanmaktadır. Prosedür, gerçek zamanlı izleme ve terapötik değerlendirme için tekrarlanabilir bir tümör büyüme modeli oluşturmayı amaçlamaktadır.

Antitümör Etkinliğini Değerlendirmek için Atimik Çıplak Farelerde İnsan Kolorektal Kanser Hücrelerinin Deri Altı Enjeksiyonu

Ağız boşluğunda kurulan ağız skuamöz hücreli karsinom tümörlerinin cerrahi olarak rezeksiyon edilmesinin benzersiz bir yöntemi burada gösterilmiştir.

Oral Skuamöz Hücreli Karsinomun Farenin Preklinik Modelleri İçin Translasyonel Olarak İlgili Tümör Rezeksiyon Modeli

Tümör içi immünoterapiye artan ilgi nedeniyle, erişilebilir ve pratik tümör modelleri seçmek çok önemlidir. Deri altı tümörleri oluşturmak kolaydır ancak görselleştirmek ve manipüle etmek zordur. Bu protokolte, daha iyi görünürlük ve erişilebilirlik sağlayan deri içi tümörlerin oluşumu için yöntemleri tanımlıyoruz.

İntradermal Tümör İmperasyonu Olarak Mısır Kanseri İçin Sağlam Bir Model Olarak İntümörlü İmmünoterapi Çalışmaları

Öğrenin baş ve boyun skuamöz hücreli karsinomu için ortotopik fare modeli geliştirme yöntemini. Bu teknik tümör mikroçevresini ve tedavi direnci mekanizmalarını incelemeye olanak tanır.

Skuamöz Hücre Karsinomu Hücre Tümörü bağışıklık profil oluşturma için fareler ve tedaviye yanıt değerlendirme intramucosal aşı

Daha fazla video keşfet