Name: Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-05-12T14:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 28 s
Description: Öğrenin, üromotorial hücre karsinomu ve kolorektal kanser için hasta türevli ortotopik ksenograft modelleri oluşturmayı. Bu yöntemler, tümör büyümesi ve spontan metastazı incelemek için NOD/SCID farelerinde uygulanır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar Brian Reuter, Danielle Bertoni, Peter Miller, ve Shannon McChesney onların mükemmel teknik destek için bu çalışmaları başlatmak için yardımcı teşekkür ederiz. Yazarlar da Heather yeşil Matrana, Margaret Variano, Sunil taşa, ve Maria Latsis yardım için hasta ve tümör numuneleri sağlamak için teşekkür ederiz.

Bu hayvan çalışmalarında açıklanan tüm yöntemler, Ochsner sağlık sistemi kurumsal hayvan bakımı ve kullanım Komitesi onaylı yönergeler altında ve hayvan araştırma kurallarına uygun olarak yapılmıştır. Bu çalışmanın tüm hasta tümörleri, Ochsner Health System araştırma Inceleme kurulu ve ınsan üzerindeki kurumsal komite 'nin etik standartlarına uygun olarak kanser rezeksiyon ameliyatı geçiren hastalarından toplanmıştır. Deneme. Ochsner Health System 'de kurulu sertifikalı patologlar, tümör hücrelerinin mikroskobik özelliklerine, histolojik tipine ve sınıf düzeyine dayalı olarak hasta örneklerinin patolojik tanılarını belirledi.
Not: aşağıdaki protokol iki ayrı xenograft modelleri için adımları açıklar, bir UCC modeli bir CRC modelinde çalışma için UCC hücreleri ve CRC hücrelerinin İntrarektal enjeksiyon aşılamak için mesane duvarının electrocoterization üzerinden. Denemeler için hazırlık ve izleme tüm adımlar her iki model için aynıdır, Bölüm 7 ve 8 özellikle UCC instilasyon ve CRC enjeksiyonu için yordamı tarif ederken, sırasıyla.
1. kültür hücresi hatları
<ol><li>Komple rpmi-1640 orta HK hücreleri Grow 10% fetal sığır serumu ile tamamlayıcı, 2 Nm glutamin, 100 U/ml penisilin G, ve 100 mg/ml streptomisin içinde 37 °c içinde 5% Co2 nemlendirici kuluçk. Not: HK hücreleri normal insan foliküler dendritik hücreler ve yetiştirilen ve ≤ 15 pasajlar in vitro16için genişletilebilir.</li>
	<li>Bir deney hazırlamak için, hücreleri tripsinize.<ol>
<li>Medya kaldırın ve Hank 'in dengeli tuz çözeltisi (HBSS) hücrelere 2 mL 1% tripsin ekleyin. 4 dakika boyunca 37 °C ' de% 5 CO2 nemlendirici kuluçte hücreleri geri yerleştirin.</li>
		<li>10 mL serolojik pipet bağlı bir el pipet yardım kullanarak 15 mL tüp içine çanak hücreleri toplayın. Tam RPMI-1640 orta 8 mL ekleyin.</li>
		<li>40 μL hücre ve 40 μL tripan mavi bir tek iyi bir 96 kuyu plaka birleştirin. Hemokytometreye 10 μL karışım ekleyin ve canlı hücreleri Sayın. 1.000.000 hücre ekleme 25 mL tam RPMI-1640 orta bir 150 mm Steril doku kültürü-tedavi çanak hücreleri büyümeye devam etmek. Not: Bu adımda hazırlanan HK hücre süspansiyon enjeksiyon için tümör hücreleri ile karıştırmak için bir saat içinde kullanılmalıdır.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. hasta numune toplama
<ol><li>Rezeksiyon ameliyatında 15 (BlCaPt15, pT3b N1 M0) ve 37 (BlCaPt37, pT3b pN0 M0) hastadan UCC tümörlerinin toplanması.</li>
	<li>Rezeksiyon ameliyatında (CoCaPt155, T1 N0 M0) ve 302 (CoCaPt302, T1 N0 M0) tarafından onaylı hasta 155 CRC tümörlerinin toplanması.</li>
</ol>3. hasta tümörünün genişlemesi
<ol><li>Penikilin G (500 U/mL) ve streptomisin (500 mg/mL) içeren soğuk steril McCoy 'un ortamında cerrahide tümör toplayın.</li>
	<li>Implant tümörleri 6 − 8 haftalık kadın NOD/SCıD farelerinin sol ve sağ kanadına doğrudan girer.<ol>
<li>Küçük cerrahi makas kullanarak küçük parçalar halinde mekanik olarak kıyma dokular (~ 1 mm3).</li>
		<li>13 G kemik iliği aspirasyon biyopsi iğneleri kullanarak sol ve sağ kanatta subkutan Implant dokusu. Not: 8 mm3 toplam hacmi, kanat her iki tarafına eşit bölünmüştür.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. etiketleme ve Lusiferaz etiketli tümörlerin zenginleştirme
<ol><li>Ölçüm tümör büyüme iki haftalık bir dijital Kaliper kullanarak.</li>
	<li>Çapı 1 cm, tümör transduce. Doğrudan tek doz Luc/kırmızı floresan protein (RFP)-Lentivirus (50 μL/tümör, 1:30 seyreltme konsantre yüksek titresi Lentivirus stokta) ile tümör içine enjekte 1 cc şırınga ile 27 G iğne. Not: hasta tümörü genellikle 1 − 2 ayda 1 cm çapına ulaşır. Ancak, büyüme oranı son derece değişken ve tümör derecesi ve türü dahil olmak üzere bir dizi faktörlere dayanmaktadır.</li>
	<li>Canlı hayvanlarda Bioluminesans görüntüleme (BLı) ile haftalık tümör izleyin.<ol>
<li>Fareleri tartın. 150 mg/kg lusiferin intraperitoneal ile bilinçli fare enjekte ve fare vücudunda dolaşmak için substrat için 5 dakika bekleyin.</li>
		<li>% 100 oksijen, 1 L/min bir indüksiyon odasında 2,5% izofluran ile fareyi anestezize.</li>
		<li>Isoflurane akan ve görüntü ile BLı görüntüleme makinesinde mide üzerine fare yerleştirin. Luc/RFP pozitif tümör bölgelerinin (sahte renk biyo-Işıksaçan görüntü) varlığını onaylamak için sıralı görüntüler alın. Görüntüleme tamamlandıktan sonra kafes geri fare.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. enzimatik sindirim için tümör uygun bölümünü seçin
<ol><li>UCC veya CRC prosedürün gününde, Lusiferaz etiketli tümör ile görüntü faresi 4.3.1 − 4.3.3 adımlarla. Not: subkutan tümör büyümeye zaman uzunluğu tümör büyüme hızına ve deney enjekte edilecek hayvanların planlanan sayısı bağlıdır.</li>
	<li>Fare kanadı ve görüntüden hasat tümörü.<ol>
<li>Görüntüleme sonrası CO2 inhalasyon tarafından euthanize fare. CO2 odasına fare yerleştirin, solunum tutuklamaya kadar 1,4 L/dak gaz açın ve 3 dakika boyunca bırakın. Servikal dislocation Ile bu izleyin.</li>
		<li>70% etanol ile temiz cilt. Doğrudan tümör üzerinde çadır cilt. Cerrahi makas ile cilt küçük bir kesi yapmak. Deri tümörün makası ile ayrı.</li>
		<li>Tümör ve yer steril Petri-çanak çıkarın. Bir görüntüleme makinesinde tüm çanak görüntü.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tümör ve yeniden görüntü Lusiferaz pozitif bölümlerde Lusiferaz-negatif bölümler ayırmak için steril makas veya neşter kullanın.</li>
	<li>Sadece en yüksek pozitif tümör parçaları kalana kadar tekrarlayın.</li>
</ol>6. tümör enzimatik sindirim
<ol><li>Laminar akış kaput altında, kıyma Lusiferaz pozitif tümör parçaları (adım 5,4) Steril Cerrahi makas kullanarak olası en küçük parçalara içine ve steril 50 ml konik tüp içine koydu. Not: en küçük olası parçalara tümör Mincing daha fazla bireysel hücreler verecektir.</li>
	<li>10 ml kolajenaz IV (1,5 mg/ml), 80 μL hyalüronidaz (20 mg/ml) ve 160 μL ile deoksiribonükleaz ı (0,1 mg/ml) için 40 ml HBSS ekleyerek Digest çözümünü hazırlayın. Ters çevirme ile mix çözüm.</li>
	<li>Kıyılmış tümör için 35 − 40 ml Özet çözeltisi ekleyin. 2 saat boyunca sürekli rotasyona sahip 37 °C ' de Inküye. Not: güçlü bir şekilde inkübasyon boyunca periyodik olarak boru sıkışması tümör doku önlemek için.</li>
	<li>Steril 100 μm hücre süzgeci ile tüm sindirimi filtreleyerek enkaz kaldırmak için bir 40 μm hücre süzgeci takip eder. Akışını kaydedin ve enkaz atın.</li>
	<li>5 dk için 329 x g 'de 20 ml HBSS ve Santrifüjü ekleyerek ücretsiz hücreleri yıkayın 30 ml HBSS 'de süpernatant ve pelletini Pelet aspirate.</li>
	<li>10 μL hücre çözümünü ve 96 iyi bir plakanın tek bir kuyunda tripan Mavi 90 μL 'i birleştirin. Bir hemacytometer kullanarak canlı hücreleri saymak.</li>
	<li>Transfer 1 x 104 için 1 x 106 tümör hücreleri her fare Için steril bir 15 ml konik tüp. Ekle 3 x 105 HK hücreleri adım 1.2.3 fare başına, tümör hücreleri ile aynı tüp. Not: toplam hacim 15 mL 'yi aşarsa, steril 50 mL konik tüp kullanın. Her zaman şırınga kullanımı sırasında sıvı kaybı için hesaba çalışma grubu başına ek hayvanlar için daha fazla doz hesaplayın. Örneğin, bir grup 5 fare içeriyorsa, 6 veya 7 fare için yeterli hücre yapın.</li>
	<li>329 x g 'de santrifüjün 5 dakika boyunca santrifüj edilmesi ya da pipetleme ile süpernatant atmak.</li>
	<li>Tam RPMI medyadaki CRC modeli için UCC modeli veya fare başına 10 μL için 50 μL cinsinden hücreleri resuspend. Hücre süspansiyonunu kullanıma hazır olana kadar buzda tutun.</li>
</ol>7. UCC fare modeli
<ol><li>Prosedür için fareler hazırlanması<ol>
<li>Altı-sekiz hafta eski kadın NOD/SCıD fare elde. Saç temizleme kremi kullanarak fareyi alt sırt tıraş. Isoflurane ile bir indüksiyon odasında fare anestezize (% 2,5% 100 oksijen, 1 L/dak).</li>
		<li>Bir kez yatıştırıcı, bir izofluran burun koni ve çıplak arka sıkıca bir Dispersif Elektrot üzerinde topraklı onun burnu ile fitil pozisyonda fare yer. Not: fare tamamen sakinleştirici Eğer ayak çimdik yanıt vermeyen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Adım 6,9, anjeoateter (Şekil 1Aa, AB) kullanarak mesane için hazırlanmış UCC hücreleri.<ol>
<li>Monopolar elektrokoter makine kurmak ve 4 W. bir güç ayarlamak, yağlama jöle ile 24 G steril angiokateter yağlayın ve dişi fare üretra yoluyla yerleştirin. Not: hafif direnç hissedilebilir. Yavaşça ileri itin veya anjokateter kaldırın ve tekrarlayın. Zorlamayın. Kateter giriş üzerinde bükümler, stabilite sağlamak için kateter içine steril bir kılavuz tel (bkz 7.2.2) yerleştirin.</li>
		<li>Tam olarak 0,025 "sabit çekirdek düz kılavuz tel 1 mm angiokateter sonundan geçmiş yerleştirin. Not: Tel, 1 mm durdurma noktasını belirtmek ve tutarlılık sağlamak için prosedürden önce bantla işaretlenir.</li>
		<li>1 s mesane mukoza elektrik tahrişi için izin için kılavuz tel Monopolar pin tutun.</li>
		<li>1 cc Luer-Lok şırıngaya taze steril angiokateter takın ve 6,9 adımda toplanan hücrelerin 200 μL 'yi çizin. Not: en az 100 μL anjeoateter 'dan şırıngaya kaybolur. Gerekli hücre süspansiyonunun hacmini hesaplarken kayıp hacmini telafi etme.</li>
		<li>Kılavuz tel ve anjokateter fare üretradan çıkarın. Üretra bağlı hücrelerin şırınga ile anjeoateter ekleyin. Not: Ilerleme daha önce daha kolay olmalıdır.</li>
		<li>50 μL hücreleri fare mesane için instill. Hücrelerin mesane duvara uymasını sağlamak için angiocatheter çıkarmadan önce birkaç saniye bekleyin. Not: hücreler mesane içinde kalır ve primer bir tümör içine gelişir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Isoflurane burun koni ve topraklama pad fare çıkarın. 1 saat aşağıdaki prosedür için fareyi gözlemleyin. Sıkıntılar, yani, geri hunched, nefes, vb stres belirtileri arayın.</li>
</ol>8. CRC fare modeli
<ol><li>Isoflurane ile altı-sekiz haftalık erkek NOD/SCID fare anestezize (2,5% 100 oksijen, 1 L/dak) indüksiyon odasında. Bir ayak tutam ile sedasyon onaylayın.</li>
	<li>Bir izofluran burun konisi için onların burnu güvenli ve istikrar için teyp ile ön ekstremite güvenliğini sağlamak için emin olmak, bir diseksiyon mikroskop altında sırtüstü pozisyonda anestezize fare yerleştirin. Not: Diseksiyon mikroskobu yerine Loupes kullanılabilir. Küçük bir nesne, kuyruk tabanına yerleştirildiğinde, anüs yükseltmek görünürlük ve açı geliştirmek için kullanılabilir. Tipik olarak, gazlı bez küçük bölümler 1 inç çapı bir silindir şekli içine haddelenmiş.</li>
	<li>Distal anal ve rektal mukoza ortaya çıkarmak için kavisli yağlanmış künt uçlu forseps ile anal kanal dilate. Dışkı çıkarın.</li>
	<li>50 μL cam şırıngada steril 30 G çıkarılabilir iğne kullanarak 10 μL tümör ve HK hücrelerinin (adım 6,9) distal posterior rektal submukoza 1 ile 2 mm arasında anal kanalın üzerine enjekte edilmesi gerekir. İğne eğim mukoza ile kaplanmıştır. Pelvik boşluğa geçmemeye dikkat edin.</li>
	<li>Isoflurane burun koni fare çıkarın. 1 saat aşağıdaki prosedür için fareyi gözlemleyin. Sıkıntılar, yani, geri hunched, nefes, vb stres belirtileri arayın.</li>
</ol>9. Bioluminesans görüntüleme
<ol><li>Lusiferaz aktivitesi için bir Bioluminesans görüntüleme sistemi kullanarak primer tümör, karaciğer ve akciğer metastatik yükünü haftalık olarak izleyin.<ol>
<li>UCC veya CRC deneyinden bir fare alın ve tartın. Enjekte 150 mg/kg lusiferin intraperitoneal ve fare vücudunda dolaşmak için substrat için 5 dakika bekleyin.</li>
		<li>Anestezize fare ile 2,5% Isoflurane içinde 100% oksijen, 1 L/min indüksiyon odasında.</li>
		<li>Nosecone sabit burun ile BLı görüntüleme makinesinde fare yerleştirin. Görüntü için açığa çıktığında, ilgi alanı kamera karşı karşıya olduğundan emin olun. UCC ve CRC enjeksiyon için, ventral tarafı her görüntü için kamera karşı karşıya olmalıdır. Görüntü fareyi sırtüstü pozisyonda.</li>
	</ol>
</li>
</ol>10. organ ve tümör toplama
<ol><li>Primer tümör Luminesans parlaklık ulaştığında 1 x 1011 fotonlar ya da fareler sıkıntı belirtileri Sergi (yani, kilo kaybı, geri hunched, sert/ağır nefes, vb), Co tarafından ötenize fareler2 inhalasyon (olarak adım 5.2.1) sonra lusiferin Enjeksiyon ve tüm vücut görüntüleme.</li>
	<li>Karaciğer ve akciğer çıkarın, bir petri tabak ve görüntü herhangi bir metasatik belirlemek için yer. Tümör, tartım ve görüntü çıkarın. Ortam sıcaklığında 48 h için% 10 nötr tamponlu formalin içinde organ ve tümör düzeltin. Not: doku transferini önlemek için her organ arasında makas ve forseps temizleyin/silin.</li>
</ol>11. histolojik değerlendirme
<ol><li>Parafin içinde formalin sabit dokulara katıştırın ve hematoksinlin ve eozin (H & E) ve immünhistokimyasal (ıHC) boyama için bir mikrotome 5 μm kalınlıkta dokularda dilim. Not: parafin slaytlarının tüm H & E boyama Ochsner sağlık sistemi patoloji laboratuarında yapıldı, ve bu yazıda tüm ıHC boyama, Ki67 kullanarak yüksek sıcaklık antijen alımı sonra Ochsner sağlık sistemi araştırma laboratuarında yapıldı ve Sit, 20 antikorlar, biyotinlenmiş ikincil antikor izledi, ve avidin-biotin-peroksidaz kompleksleri üretici talimatlarına göre13,17.</li>
</ol>

<ol><li>Sundlisaeter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymphangiogenesis+in+colorectal+cancer--prognostic+and+therapeutic+aspects%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cancer.+Journal+international+du+cancer%22%5BJournal%5D)">Lymphangiogenesis in colorectal cancer--prognostic and therapeutic aspects.</a> International Journal of Cancer. Journal international du cancer. 121, 1401-1409 (2007).</li>
<li>Gout, S., Huot, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+cancer+microenvironment+in+metastasis%3A+focus+on+colon+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Microenvironment%22%5BJournal%5D)">Role of cancer microenvironment in metastasis: focus on colon cancer.</a> Cancer Microenvironment. 1, 69-83 (2008).</li>
<li>National Cancer Institute. SEER Stat Fact Sheets: Bladder Cancer. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://seer.cancer.gov/statfacts/html/urinb.html">http://seer.cancer.gov/statfacts/html/urinb.html</a> (2018).</li>
<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+statistics%2C+2018%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+a+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Cancer statistics, 2018.</a> CA: a Cancer Journal for Clinicians. 68, 7-30 (2018).</li>
<li>Hautmann, R. E., de Petriconi, R. C., Pfeiffer, C., Volkmer, B. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radical+cystectomy+for+urothelial+carcinoma+of+the+bladder+without+neoadjuvant+or+adjuvant+therapy%3A+long-term+results+in+1100+patients%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Radical cystectomy for urothelial carcinoma of the bladder without neoadjuvant or adjuvant therapy: long-term results in 1100 patients.</a> European Urology. 61, 1039-1047 (2012).</li>
<li>Stein, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radical+cystectomy+in+the+treatment+of+invasive+bladder+cancer%3A+long-term+results+in+1%2C054+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Radical cystectomy in the treatment of invasive bladder cancer: long-term results in 1,054 patients.</a> Journal of Clinical Oncology. 19, 666-675 (2001).</li>
<li>Lerner, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rationale+for+en+bloc+pelvic+lymph+node+dissection+for+bladder+cancer+patients+with+nodal+metastases%3A+long-term+results%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">The rationale for en bloc pelvic lymph node dissection for bladder cancer patients with nodal metastases: long-term results.</a> The Journal of Urology. 149, discussion 764-755 758-764 (1993).</li>
<li>Poulsen, A. L., Horn, T., Steven, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radical+cystectomy%3A+extending+the+limits+of+pelvic+lymph+node+dissection+improves+survival+for+patients+with+bladder+cancer+confined+to+the+bladder+wall%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Radical cystectomy: extending the limits of pelvic lymph node dissection improves survival for patients with bladder cancer confined to the bladder wall.</a> The Journal of Urology. 160, 2015-2019 (2020).</li>
<li>National Cancer Institute. SEER Stat Fact Sheets: Colon and Rectum Cancer. , Available from:
 <a target="_blank" href="http://seer.cancer.gov/statfacts/html/colorect.html">http://seer.cancer.gov/statfacts/html/colorect.html</a> (2017).</li>
<li>Margolin, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+node+stromal+cells+enhance+drug-resistant+colon+cancer+cell+tumor+formation+through+SDF-1alpha%2FCXCR4+paracrine+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Lymph node stromal cells enhance drug-resistant colon cancer cell tumor formation through SDF-1alpha/CXCR4 paracrine signaling.</a> Neoplasia. 13, 874-886 (2011).</li>
<li>Vermeulen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wnt+activity+defines+colon+cancer+stem+cells+and+is+regulated+by+the+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Wnt activity defines colon cancer stem cells and is regulated by the microenvironment.</a> Nature Cell Biology. 12, 468-476 (2010).</li>
<li>Margolin, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+critical+roles+of+tumor-initiating+cells+and+the+lymph+node+stromal+microenvironment+in+human+colorectal+cancer+extranodal+metastasis+using+a+unique+humanized+orthotopic+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">The critical roles of tumor-initiating cells and the lymph node stromal microenvironment in human colorectal cancer extranodal metastasis using a unique humanized orthotopic mouse model.</a> FASEB Journal. 29, 3571-3581 (2015).</li>
<li>Gills, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+patient-derived+orthotopic+xenograft+model+enabling+human+high-grade+urothelial+cell+carcinoma+of+the+bladder+tumor+implantation%2C+growth%2C+angiogenesis%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">A patient-derived orthotopic xenograft model enabling human high-grade urothelial cell carcinoma of the bladder tumor implantation, growth, angiogenesis, and metastasis.</a> Oncotarget. 9, 32718-32729 (2018).</li>
<li>Hidalgo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+xenograft+models%3A+an+emerging+platform+for+translational+cancer+research%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">Patient-derived xenograft models: an emerging platform for translational cancer research.</a> Cancer Discovery. 4, 998-1013 (2014).</li>
<li>Hiroshima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patient-derived+mouse+models+of+cancer+need+to+be+orthotopic+in+order+to+evaluate+targeted+anti-metastatic+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Patient-derived mouse models of cancer need to be orthotopic in order to evaluate targeted anti-metastatic therapy.</a> Oncotarget. 7, 71696-71702 (2016).</li>
<li>Kim, H. S., Zhang, X., Klyushnenkova, E., Choi, Y. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stimulation+of+germinal+center+B+lymphocyte+proliferation+by+an+FDC-like+cell+line%2C+HK%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Stimulation of germinal center B lymphocyte proliferation by an FDC-like cell line, HK.</a> The Journal of Immunology. 155, 1101-1109 (1995).</li>
<li>Hite, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Optimal+Orthotopic+Mouse+Model+for+Human+Colorectal+Cancer+Primary+Tumor+Growth+and+Spontaneous+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Diseases+of+the+Colon+and+Rectum%22%5BJournal%5D)">An Optimal Orthotopic Mouse Model for Human Colorectal Cancer Primary Tumor Growth and Spontaneous Metastasis.</a> Diseases of the Colon and Rectum. 61, 698-705 (2018).</li>
<li>Jager, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-guided+intramural+inoculation+of+orthotopic+bladder+cancer+xenografts%3A+a+novel+high-precision+approach%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-guided intramural inoculation of orthotopic bladder cancer xenografts: a novel high-precision approach.</a> PloS One. 8, e59536(2013).</li>
<li>Schirner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrin+alpha5beta1%3A+a+potent+inhibitor+of+experimental+lung+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Integrin alpha5beta1: a potent inhibitor of experimental lung metastasis.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 16, 427-435 (1998).</li>
<li>Ricci-Vitiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+expansion+of+human+colon-cancer-initiating+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Identification and expansion of human colon-cancer-initiating cells.</a> Nature. 445, 111-115 (2007).</li>
<li>Todaro, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Colon+cancer+stem+cells+dictate+tumor+growth+and+resist+cell+death+by+production+of+interleukin-4%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Colon cancer stem cells dictate tumor growth and resist cell death by production of interleukin-4.</a> Cell Stem Cell. 1, 389-402 (2007).</li>
<li>Lee, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+establishment+features+of+orthotopic+murine+bladder+cancer+models%5BTitle%5D)+AND+%22Korean+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Tumor establishment features of orthotopic murine bladder cancer models.</a> Korean Journal of Urology. 53, 396-400 (2012).</li>
<li>Hadaschik, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+validated+mouse+model+for+orthotopic+bladder+cancer+using+transurethral+tumour+inoculation+and+bioluminescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">A validated mouse model for orthotopic bladder cancer using transurethral tumour inoculation and bioluminescence imaging.</a> BJU International. 100, 1377-1384 (2007).</li>
<li>Silinsky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD+133%2B+and+CXCR4%2B+colon+cancer+cells+as+a+marker+for+lymph+node+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">CD 133+ and CXCR4+ colon cancer cells as a marker for lymph node metastasis.</a> The Journal of Surgical Research. 185, 113-118 (2013).</li>
</ol>

Bu çalışmada, Ochsner translasyonel Tıp araştırma girişimi Grant 2014 tarafından kısmen desteklenmektedir. Yazarlar hiç bir ilgi çatışması bildirmiyor.

Metastatik hastalık çoğu kanser hastası mortaliteleri için sorumludur. Klinik öncesi terapötik testlerde, insan tümörü büyümesini spontan uzak organ metastazı ile en yakından taklit eden fare modelleri kurmak çok önemlidir. İmplante edilen hasta tümörü ile duvar modellerini kullanarak kanser hücreleri türetilmiştir (xenografts) tümör biyoloji ve öngörü biyolojik daha iyi bir anlayış yanı sıra test ve yeni tedaviler Antineoplastik etkileri tahmin sağlar18. Bir çok model, akciğer hastalığı üretmek i...

Lenf nodu (LN) metastazının, mesane ve kolorektal kanser (CRC)1,2' nin yüksek dereceli ürogariyal Hücre Karsinomu (UCC) dahil olmak üzere birçok katı organ malignitesinde kötü prognostik bir gösterge olduğunu göstermiştir. Kas-invaziv UCC (MıUCC) olan hastaların yarısından fazlası, klinikte lokalize hastalık için küratif tedaviye rağmen, 5 yıl içinde metastanca gelişecek ve ölür. Metastatik CRC ABD 'de kanser ile ilgili ölüm önde gelen nedenidir.
Tahmini 81.190 yeni hastalar ve 17.240 kanser spesifik ölümlerin, ABD 'de, mesane3,4UCC nedeniyle 2018 yılında gerçekleşmesi bekleniyor. Hastalar ağırlıklı olarak (% 70) Kas invazif olmayan hastalık ile mevcut,% 30 MıUCC5olacaktır. Klinikte lokalize hastalık için küratif tedaviye (radikal cystektomi [RC] veya sistemik kemoterapi olmadan) rağmen, mesane MIUCC olan hastaların yarısı hala metasürler geliştirecek ve 5 yıl içinde ölmek3. RC6,7,8' deki hastaların yaklaşık% 20 −% 25 ' inde lenf nodu tutulumu bulunmuştur. LN pozitif hastalarda beş yıllık hayatta kalma oranı, RC 'den sonra bile% 35 ' den az, UCC hastalarında prognoz için önemli bir negatif öngörü olarak LN tutulumu öneriyor.
Kolorektal kanser, Amerika Birleşik Devletleri 'nde hem erkek hem de kadınlarda teşhis edilen üçüncü en yaygın kanserdir. Hastanın sonuçları büyük ölçüde invazyonu, LN tutulumu ve uzak organ metastaz derinliği gibi tümör özelliklerine ve tümör mikroortamına bağlıdır. Tarama ve etkili ameliyatlar nedeniyle son on yılda CRC 'deki mortalite oranı azalsa da, CRC hastalarının yaklaşık% 50 ' si metasrat veya tekrarlayan hastalık9' da gelişecektir.
Küçük hayvan modelleri, tümör progresyonu ve farklı metastatik desenleri incelemek için hızlandırılabilen, tekrarlanabilir ve değiştirilebilir bir platform sağlar. Şu anda, hastalarda görülen CRC ve UCC metasrik olarak taklit edilen xenograft modelleri tanımlanmıştır. Kanser uzak metastaz primer rota lenfatik Spread yoluyla. Yeni araştırma LNs benzersiz bir mikroçevre ile tümörlerin sağlamak ve sadece sadece sabit hedefler nerede kanser hücrelerinin geçmeli geçiş olduğunu göstermektedir, aynı zamanda metastatik süreçte kanser hücreleri ile etkileşim tarafından ayrılmaz bir rol oynar. Gerçekten de, çalışmalarımız, tümör progresyonu ve metastacıları eğitmek ve teşvik etmek yanı sıra, ın stromal mikroçevre da CRC10,11ilaç direnci sorumlu olduğunu keşfetti. Laboratuvarımız son zamanlarda, in stromal hücrelerinin (lnscs) CRC ve uccs üzerinde hasta tarafından türetilen ortootopik xenograft (PDOX) fare modellerini kullanarak tümör etkilerini doğruladı12,13.

PDOX modellerini geliştirmek translasyonel kanser araştırması için önemli bir platform sağlar14,15. PDOX modelleri, donör tümörlerinin temel histolojik ve genetik özelliklerini koruyarak, pasajlar arasında kararlı kalır ve translasyonel kanser araştırması için iyi platformlar yapar12,15. PDOX modelleri preklinik ilaç değerlendirmesi, biyomarker tanımlaması ve klinik sonuçların öngörülerine izin veren kişiselleştirilmiş tıp stratejilerinin preklinik değerlendirilmesi için kullanılmaktadır. Şu anda, LN tutulumunun önemini dikkate alan ve CRC ve UCC 'de primer tümör ve uzak organ metastaz sürekli olarak yeniden üretebilmiyor, açıklanan xenograft modelleri yoktur. Bu çalışmada, ıNSC tutulumu ile metastatik CRC ve UCC hastalıklarının çoğaltılması ile NOD/SCıD farelerinde PDOX modellerinin gelişimini tarif ediyoruz.

<table><tbody><tr><td>Avidin-biotin-peroksidaz</td><td>Vector Labs Inc</td><td>PK-6100</td><td></td></tr><tr><td>Biyotinile ikincil antikor</td><td>Vector Labs Inc</td><td>BA-1000</td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz IV (1.5 mg / mL)</td> <td>Worthington Biochemical Corporation</td><td>LS004189</td><td></td></tr><tr><td>Deoksiribonükleaz I (0.1 mg / mL)</td> <td>Sigma</td><td>D4263</td><td></td></tr><tr><td>D-Luciferin (150 mg / kg)</td> <td>Perkin Elmer</td><td></td><td></td>122796</tr><tr><td>Formalin (%10 nötr tamponlu)</td><td>Leica</td><td>46129</td><td></td></tr><tr><td>glutamin (2 nM)</td><td>Fisher Scientific</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Tüy Dökücü Krem</td><td>Church & Dwight Co., Inc</td><td>1 (800) 248-8820</td><td></td></tr><tr><td>Hanks Dengeli Tuz Çözeltisi (HBSS)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>SH30016.02</td><td></td></tr><tr><td>Hyaluronidaz (20 mg / mL)</td> <td>Sigma</td><td>H3884</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran</td><td>Henry Schein Hayvan Sağlığı</td><td>108333</td><td></td></tr><tr><td>Luc / RFP-lentivirus</td><td>İşbirlikçilerimizden. Referans 13'e bakın: Gills, J. et al. Mesane tümörü implantasyonu, büyümesi, anjiyogenezi ve metastazı olan insan yüksek dereceli ürotelyal hücreli karsinomunu mümkün kılan hasta kaynaklı bir ortotopik ksenogreft modeli. Oncotarget. 9, 32718-32729, doi:10.18632/oncotarget.26024 (2018).</td><td></td><td></td></tr><tr><td>McCoy' s orta</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>110862</td><td></td></tr><tr><td>penisilin / streptomisin 100 mL (100 U / mL)</td> <td>Fisher Scientific</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>RPMI-1640 Orta</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>110636</td><td></td></tr><tr><td>Tripan Mavi</td><td>Sigma</td><td>T6146</td><td></td></tr><tr><td>Tripsin / EDTA</td><td>Yaşam Teknolojileri</td><td>15400-054</td><td></td></tr><tr><td>Adı</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Gas </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>100% Oksijen</td><td>Airgas Inc</td><td>OX USP200</td><td></td></tr><tr><td>%100 CO2</td><td>Airgas Inc</td><td>CD'si USPE</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Mice </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>6-8 haftalık NOD / SCID Fareler (erkek)</td><td>Jackson Lab</td><td>001303</td><td></td></tr><tr><td>6-8 haftalık NOD / SCID Fareler (dişi)</td><td>Jackson Lab</td><td>001303</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Immunohistochemistry</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hematoxylin</td><td>Sigma</td><td>GHS232</td><td></td></tr><tr><td>Ki-67 Tavşan Monoklonal Antikoru</td><td>Thermo Scientific</td><td>RM-9106-S</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Tools</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>40 &mikro; m hücreli süzgeç</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-771-1</td><td></td></tr><tr><td>100 & mikro; m hücreli süzgeç</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-771-19</td><td></td></tr><tr><td>15 mL Konik Tüp</td><td>Sarstedt</td><td>11799</td><td></td></tr><tr><td>50 mL Konik tüp</td><td>Sarstedt</td><td>15762</td><td></td></tr><tr><td>150 mm Doku Kültürü Kabı</td><td>USA Scientific Inc</td><td>CC7682-3614</td><td></td></tr><tr><td>96 Kuyu plakası</td><td>USA Scientific Inc</td><td>CC7682-7596</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Simetri Cerrahi A.Ş</td><td>.06-0011</td><td></td></tr><tr><td>Cerrahi makas</td><td>Simetri Cerrahi A.Ş</td>. <td>02-2011</td><td></td></tr> <tr><td>Name <</td><td>strong>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Equipment< / strong</td>><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>5% CO2 Nemlendirilmiş İnkübatör</td><td>Thermo Scientific</td><td>3110</td><td></td></tr><tr><td>Biyolüminesan (BLI) Görüntüleme Makinesi</td><td>Perkin Elmer</td><td>CLS136334</td><td></td></tr><tr><td>BLI Görüntüleme Makinesi Yazılımı</td><td>Perkin Elmer</td><td>CLS136334</td><td></td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Beckman</td><td>366830</td><td></td></tr><tr><td>Evrişim Çözücü Mikroskop</td><td>Akıllı Görüntüleme Yenilikleri</td><td>Marianas</td><td></td></tr><tr><td>Evrişim Çözme Mikroskobu Görüntüleme Yazılımı</td><td>Akıllı Görüntüleme Yenilikleri</td><td>+1 (303) 607-9429 x1</td><td></td></tr><tr><td>Dijital kumpas</td><td>Fowler Araçları ve Aletleri</td><td>54-115-330</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon mikroskobu</td><td>Hassas Aletler LLC(</td><td>504) 228-0076</td><td></td></tr><tr><td>Elektrocerrahi jeneratörü</td><td>ValleyLab</td><td>FORCE1C20</td><td></td></tr><tr><td>İzofluran İndüksiyon Odası</td><td>Perkin Elmer</td><td>119038</td><td></td></tr><tr><td>Microtome</td><td>American Optical Corporation</td><td>829</td><td></td></tr><tr><td>Pipet Yardımı</td><td>Fisher Healthcare</td><td>13-681-15E</td><td></td></tr><tr><td>Serolojik pipet (10 mL)</td><td>Sarstedt</td><td>86.1254.001</td><td></td></tr></tbody></table>

insan Üromotorial hücre karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan metasrik için hasta türevi ortootopik xenograft modelleri

Patient-derived Orthotopic Xenograft Models for Human Urothelial Cell Carcinoma and Colorectal Cancer Tumor Growth and Spontaneous Metastasis

Kanser hastaları, mesane ve kolorektal kanseri (CRC) hem yüksek dereceli ürosityal Hücre Karsinomu (HG-UCC) içinde lenf nodu (LN) tutulumu olduğunda kötü prognostiklere sahiptir. Kas-invaziv UCC olan hastaların% 50 ' den fazla, klinik lokalize hastalık için küratif tedaviye rağmen, metastaz geliştirmek ve 5 yıl içinde ölmek, ve metastatik CRC ABD 'de kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedenidir. Hastalarında sürekli olarak UCC ve CRC metasrik taklit eden xenograft modelleri gereklidir. Bu çalışmada primer tümör büyümesi için UCC ve CRC 'nin hasta türevi ortootopik xenograft (PDOX) modelleri ve LN stromal hücrelerinin etkisi altında spontan metastaz modeli, insan metastatik hastalıklarının ilaç taraması için ilerlemesini taklit etmeyi amaçlamaktadır. HG-UCC ve kolorektal adenokarsinoma için rezeksiyon yapılarak, sırasıyla taze UCC ve CRC tümörleri elde edildi. LN stromal Cell (LNSC) Analog HK hücreleri ile ortak inoküle, luciferase-etiketli UCC hücreleri intra-vesically vardı (ıB) kadın olmayan obez diyabetik/şiddetli kombine immünyetmezlik (NOD/SCıD) fareler, ve CRC hücreleri intra-rektik edildi (IR) içine enjekte Erkek NOD/SCıD fareler. Tümör büyümesi ve metassel, Bioluminesans görüntüleme (BLı) kullanılarak haftalık olarak izleniyor. Kurban üzerine, primer tümörler ve fare organları hasat edildi, tartıldı, ve formalin-hematoxylin ve eozin ve immünhistokimya boyama için sabit. Benzersiz PDOX modellerinde, xenograft tümörleri hasta ön implantasyon tümörlerine benzerdir. HK hücrelerinin varlığında, her iki model de BLı ve tümör ağırlıkları ile ölçülen yüksek tümör implantasyon oranları, 83,3% UCC ve% 96,9 CRC için, ve yüksek uzak organ metastaz oranları (% 33,3 tespit karaciğer veya akciğer metastaz için UCC ve% 53,1 CRC için). Buna ek olarak, her iki model yordamdan sıfır mortalite vardır. İnsan HG-UCC ve CRC için benzersiz, tekrarlanabilir PDOX modelleri kurduk, bu da tümör oluşumuna, büyümesini ve metasük çalışmalarına izin verir. Bu modellerde, yeni terapötik ilaçların test edilmesi verimli ve klinik olarak mimetic bir şekilde yapılabilir.

UCC PDOX modelinde, UCC hastaları ' BlCaPt15 veya BlCaPt37 hücreleri intra-vesically (ıB), HK hücrelerinin varlığını kadın NOD/SCıD fare mesane (Şekil 1a) içine aşıldı. Yirmi beş dışarı otuz (83,3%) hayvanlar primer tümörlerin oluşturduğu ve haftalık BLI (Şekil 1B, C ve Tablo 1) dayalı zaman bağımlı primer tümör büyümesi gösterilir. Benzer şekilde, CRC PDOX modelinde, 32 ' den 31 ' i (% 96,9) Far...

Bu protokol, yüksek dereceli ürosityal Hücre Karsinomu hücrelerinin intra-vesically instilling veya intra-rektal enjekte kolorektal kanser hücreleri olmayan obez diyabetik/şiddetli kombine tarafından hasta türeyen ortootopik xenograft modellerinin oluşturulması açıklanmaktadır immüneksikliği (NOD/SCıD) primer tümör büyümesi için fareler ve lenf nodu stromal hücrelerin etkisi altında spontan metastaz, hangi insan metastatik hastalıkların ilerlemesini taklit.

Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri

Cancer patients have poor prognoses when lymph node (LN) involvement is present in both high-grade urothelial cell carcinoma (HG-UCC) of the bladder and ...

Modeller sürekli lenf düğümleri ile etkileşim yoluyla kanser metastazı taklit etmek için gerekli olan. Hem kolorektal kanser li hem de mesanenin ürotelyal hücreli kanseri olan hastalarda. Bu yazıda açıklanan ortotopik knenografik modellerimiz bu önemli biyolojik soruların cevapılmasına ve yeni tedavilerin etkin ve klinik olarak uygun bir şekilde test edilebilebilir.Farelerde üretilen ortotopik ksenogreft tümörlerimiz hastaların tümörüne benzer. Lenf nodu stromal hücrelerinin varlığında her iki modelde de daha yüksek tümör implantasyonu ve uzak organ metastazı oranları ve insan metastatik desenleri taklit eden konumlar vardır. Ayrıca, her iki hayvan modelinde de usule bağlı mortalite sıfırdır.Ötenazi li farelerden hasta kaynaklı tümörleri çıkardıktan sonra, laminaakış kaputunun altındaki petri kabında mümkün olduğunca küçük olan pozitif tümör parçalarını kıymak için steril cerrahi makas kullanın. Tümör parçalarını steril 50 mL konik tüpe aktarın. Sindirim çözeltisi hazırlamak için, kollajenaz tip 4 10 mL, hyaluronidaz 80 mikrolitre ve deoksiribonükle azm 1 ila 40 mL HBSS ve ters karıştırarak 160 mikrolitre ekleyin.Kıyılmış tümöre 35-40 mL sindirim çözeltisi ekleyin ve periyodik güçl

patient-derived-orthotopic-xenograft-models-for-human-urothelial-cell

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu videoda, obez olmayan diyabetik/şiddetli kombine immün yetmezlik (NOD/SCID) farelerinde kolorektal kanser hücrelerinin ilerlemesini incelemek için hastadan türetilmiş bir ortotopik ksenogreft kolorektal kanser fare modeli oluşturma protokolü açıklanmaktadır. Bu fare modeli, primer tümör büyümesi ve metastaz paterni anlamada yardımcı olur.

Kolorektal Kanserin PDOX Fare Modelinin Oluşturulması: Bir Murin Modelinde Kolorektal Kanserin İlerlemesinin İncelenmesi

Bu videoda, kolorektal kanser hastadan türetilmiş ksenogreftlerin veya PDX'lerin spontan metastaz fare modelini oluşturmak için kullanılan protokol açıklanmaktadır. Bu ksenogreft modelleri, insan karsinomlarının özelliklerini kısmen taklit eder ve invazyon ve metastaz dahil olmak üzere insan malignitelerinin kritik yönlerini anlar.

Spontan Metastaz Fare Modelleri: Ortototopik Olarak Enjekte Edilen Kolorektal Kanser Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

Bu video, ürotelyal hücreli karsinom ilerlemesini incelemek için kullanılabilecek deneysel bir ksenogreft murin modeli oluşturma prosedürünü açıklar.

Hasta Kaynaklı Tümör Ksenogreftleme: Ürotelyal Hücreli Karsinomun Değerlendirilmesi için Deneysel Fare Modeli Oluşturma Tekniği

Kaynaklı organ içine kanser hücrelerinin implantasyonu yeni tedaviler değerlendirmek için yararlı bir ön-klinik modeli olarak hizmet edebilir. MB49 mesane karsinom hücreleri intravezikal Damla damla akıtma sonrası mesane içinde yetiştirilebilir. Bu protokol, tümör implantasyonu ve adenoviral teslimat amacıyla fare mesane kateterizasyon gösterir.

Gene Teslim Çalışmaları Ortotopik Mesane Kanseri Modeli

Birincil invaziv kadavradan mesane kanseri zenograftlarını aşılamak için kurulan teknik laparotomi ve mesane seferberlik gerektirir. Bu prosedür, fareler üzerinde önemli morbidite uğratan teknik açıdan zor ve zaman alıcıdır. Bu nedenle perkütan yaklaşım ultrason rehberlik kullanarak, yüksek hassasiyet geliştirdi.

Kemirgen Ortotopik Mesane ksenogratflarının Minimal İnvaziv kurulması

Prostat kanseri, Amerika Birleşik Devletleri'nde kansere bağlı ölümlerin en sık ikinci nedenidir. Ortotopik bir kanser modeli, prostat kanserinin biyolojisini anlamak ve terapötik rejimlerin etkinliğini değerlendirmek için yararlı bir yaklaşım sağlar. Bu protokol, ortotopik bir prostat kanseri fare modeli oluşturmak için gerekli ayrıntılı adımları açıklar.

İnsan Prostat Kanseri klinik öncesi Ortotopik murin modeli

Metastatik klonların uzak bölgeleri kolonize etme yeteneği, çoğalma kapasitelerine ve/veya önemli bir çoğalma olmaksızın konakçı mikro ortamda hayatta kalma yeteneklerine bağlıdır. Burada, metastatik klonlar tarafından her iki tip karaciğer kolonizasyonunun kantitatif olarak görselleştirilmesine izin veren bir hayvan modeli sunuyoruz.

İleri Hayvan Karaciğer Kolorektal Metastaz Model: Görüntüleme Teknikleri ve Metastatik Klonların Özellikleri

Biz son derece hassas yayılmasından insan kolorektal kanseri tespiti (CRC) hücre dokuları kolonileşmesi izin vermek için burada PDX kaynaklı CRC organoid hücrelere yeşil flüoresan protein (GFP) lentiviral parçacıkların verimli iletim için bir protokol göster stereo-floresan mikroskobik gözlem ile alıcı fareler içine onların enjeksiyon önce.

Bir hasta kaynaklı kolon tümöründen kültürlü GFP Lentivirus transduced Organoids tarafından oluşturulan Micrometastases yüksek-duyarlı tespiti

Burada, biyolojik ilgili sitelerdeki kanser için güvenilir preklinik modelleri oluşturmak için bir protokol ultrason destekli enjeksiyon Nöroblastom (NB) ve Ewing sarkomu (ES) hücre yararlanmak için (hücre satırları ve hasta kaynaklı tümör hücreleri kurulu) mevcut araştırma.

Ultrason kullanımı doku Yönetmen: hücresel implantasyon biyolojik ilgili metastatik tümör Xenografts kurulması için güdümlü

Ortotopik insan karaciğeri metastatik uveal melanom ksenogreft fare modelleri, hasta kaynaklı tümör öbek ve kültürlü insan uveal melanom hücre hatları ile iğne enjeksiyon teknikleri ile cerrahi ortotopik implantasyon teknikleri kullanılarak oluşturulmuştur.

İmmünficient Farelerde Karaciğer Ortotopik İnsan Uveal Melanom Xenograft Platformu Üretimi

Bu protokol, immün yetmezliği olan farelerin çekum duvarına hasta kaynaklı kanser hücrelerinin ortotopik implantasyonunu açıklar. Model, ilerlemiş kolorektal kanser metastatik hastalığını özetler ve klinik olarak anlamlı bir akciğer ve karaciğer metastazı senaryosunda yeni terapötik ilaçların değerlendirilmesine izin verir.

Farelerde Hasta Kaynaklı Kanser Hücrelerinin Ortotopik İmplantasyonu, İleri Kolorektal Kanseri Özetliyor

Öğrenin, üromotorial hücre karsinomu ve kolorektal kanser için hasta türevli ortotopik ksenograft modelleri oluşturmayı. Bu yöntemler, tümör büyümesi ve spontan metastazı incelemek için NOD/SCID farelerinde uygulanır.

Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri (Video) | JoVE Journal

Insan Üromotorial Hücre Karsinomu ve kolorektal kanser tümörü büyüme ve spontan Metasrik için hasta türevi Ortootopik xenograft modelleri

Daha fazla video keşfet