Name: Doku ve kütle spektrometresi Imaging kullanarak hücreleri arasında küçük molekül iletişim yakalama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 58 s
Description: Öğrenin, görüntüleme kütle spektrometresi kullanarak hücreler arasında küçük molekül iletişimini haritalama yöntemini. Bu etiketsiz teknik, yumurtalık kanseri metastazındaki yeni tedavi hedeflerini ortaya çıkarmaya yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Finansman desteği ile Chicago Biyomedikal Konsorsiyumu tarafından Chicago toplum güven (C-076) (L.M.S.); Searle fonlarından sağlanan University of Illinois Chicago başlangıç (L.M.S.) fonları; Grant 543296 üzerinden yumurtalık kanseri araştırma fonu İttifak (MD); ve UG3 ES029073 (J.E.B.) ve Ulusal Merkezi ilerleyen translasyonel Bilimler, Ulusal Enstitüsü sağlık, hibe UL1TR002003 yoluyla (JEB & LMS) tarafından.

Tüm hayvan yordamlar ulusal sağlık kuralları Enstitüleri bakım ve kullanım laboratuvar hayvanları için uygun olduğunu ve Chicago Illinois Üniversitesi'nde Kurumsal hayvan kullanımı ve Bakımı (IACUC) Komitesi tarafından onaylanmış.
1. hazırlanması reaktifler
<ol><li>Fare oviductal epitel (MOE) %5 CO2 Alfa en az gerekli orta (αMEM) medya % 10 fetal sığır serum ile desteklenmiş bir oksijen kuluçka 37 ° C'de (FBS), 2 mM L-glutamin, 10 mg/mL insülin, transferrin, selenyum (ITS) hücreleri korumak , 1.8 ng/mL epidermal büyüme faktörü (EGF), 100 U/mL penisilin-streptomisin, 1 mg/mL viomisin ve 18,2 ng/mL estradiol-17β. Hücreleri her 3-4 gün geçirmek, aynı gün yetecek sayıda hücre sağlayarak fareler feda.</li>
	<li>% 2 özel düşük erime özel 1 g 50 mL distile su karıştırılarak hazır olun. Otoklav özel izin soğumaya ve özel katılaşır önce sonra aliquot (1 mL) 2 ml ( Tablo malzemelerigörmek) tüpleri. Özel-20 ° C'de süresiz olarak depolanabilir.</li>
	<li>En az 2 mL 1 x Dulbecco'nın modifiye kartal orta (DMEM) ortam hazırlamak.</li>
	<li>1:1 alfa-cyano-4-hyroxycinnamic asit (CHCA) 5 mg/mL 10 mL için matris MALDI-TOF MS için hazırlamak: dihidroksibenzoik asit (DHB) ( Tablo malzemelerigörmek) 90:10 ACN:H2O + %0,1 trifluoroacetic asit (TFA). Matris eriyene kadar çözüm solüsyon içeren temizleyicide.</li>
</ol>2. fare koloni ve yumurtalık kaldırma
<ol><li>Standart konut yordamları kullanarak CD-1 fareler çiftlerini üreme korumak. Doğum gün yakın belgili tanımlık pups yaş bilinen fareler her gün denetleyin.</li>
	<li>Yavruların başına NIH yönergeleri CO2 Solunduğunda yaş 16-18 gün ötenazi. CO2 (% 100) teslim bir akış oranı % 10-%20 dakika başına birim odası ve iki dakika sonra solunum durmuştu devam. Ötenazi tarafından servikal çıkığı onaylayın.</li>
	<li>Tüm cerrahi ekipman % 70 etanol batış tarafından dezenfekte. İyi'nın L-15 medya ile 1 x penisilin-streptomisin 37 ° c sıcak</li>
	<li>Bölgeyi dezenfekte edin ve saç ile kirlenme en aza indirmek için % 70 etanol ile karın yüzey ıslak. Karın duvarının kapsayan deriyi büyük yapmak künt forseps ve kullanım Cerrahi makas kullanarak şekil V cilt ve karın duvarı iç organların açığa kesme kavramak.</li>
	<li>İç organları forseps kullanarak kenara çek. Tek tek iyi Forseps ile rahim her boynuzun kapmak ve biraz kaldırın.</li>
	<li>Hemen altındaki böbrek rahim boynuz sonunda olacak yumurtalık bulun. Cerrahi makas bağ dokusu ücretsiz yumurtalık incelemek için kullanın. O zaman, yumurtalık boynuz yarıya.</li>
	<li>Yumurtalık, ovidukt ve yaklaşık bir hareket Önceden ısıtılmış iyi'nın L-15 medya için rahim her boynuzun yarısı.</li>
	<li>Diseksiyon mikroskop altında her yumurtalık ovidukt, bursa ve herhangi bir yağ dokusu serbest bırakarak çevreleyen bursa dikkatli taşıyın. Her yumurtalık iyi'nın L-15 medya yeni bir tabak için hareket.</li>
	<li>Eksenel her yumurtalık yarıya. Özel kaplama kadar 37 ° C'de muhafaza (şu anda explants olarak) yumurtalık parçaları tutmak.</li>
</ol>3. Kurulum ve Ito tedavi slayt Cocultures için kuluçka
<ol><li>
Bölünmemiş cocultures
	<ol>
<li>70 ° c sıcak tabakta özel Sıvılaştır.</li>
		<li>8-şey bölücü indiyum tinoxide (ITO) üstüne koyun-tedavi slayt (şekil 1A). Bölücü kauçuk altta yapışma slayda davranacak bir parça, ama hiçbir sızıntı veya kuyu arasında karıştırma sağlamak için özel kaplama sırasında sürekli hafif aşağı doğru basınç uygulamak emin olun.</li>
		<li>Hücreleri bir 15 mL konik tüp, santrifüj (800 rpm'de 5 dk) toplamak ve 50 k için 1 x DMEM medya 150 µL başına hücre resuspend. Farklı hücre yoğunluğu en iyi ise, bu adımda 2 x için (örneğin, bir son 300 µL, bu aşamada hücre yoğunluğu 50.000 hücreleri 150 µL 50.000 hücreleri bölgedir) son yoğunluk istenen hücre süspansiyon olduğundan emin olun.</li>
		<li>Hücre kültürü kaplama önce yumurtalık explant eklemek için merkezi iyi (şekil 1B).</li>
		<li>Özel bireysel 2 mL tüpler hemen önce kaplama her hücre kültüründe ekleyin. Her şey için hücre süspansiyon, 200 µL ve sıvılaştırılmış özel 2 mL tüp içinde 200 µL birleştirir. Örneğin, dört kuyular için 800 µL hücre süspansiyon ve 800 µL % 2 özel birleştirir. Bazı karışımı sol olacaktır, ama biraz daha fazla gerekli olduğunun pipetting sırasında hava kabarcıkları önler.<ol>
<li>Özel bireysel hücre kültürleri için hemen o hücre kültürü kaplama önce ekleyin. Özel bir dakika altında serin, çok hızlı bir şekilde plaka için hazır olun.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Hemen her şey (şekil 1 c) 300 µL hücre/özel karışımı ekleyin. Şekil 1 c üç hücre koşulları ve bir medya durumu, her kaplama ile ve bir yumurtalık olmadan gösterir.</li>
		<li>Slayt 37 ° C ve % 5 CO2 oksijen kuluçka kuluçkaya.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Bölünmüş Cocultures.
	<ol>
<li>Bölücüler ince, pürüzsüz plastik (şekil 2A) kesti. Not: düz ve ince oldukları için bu deney bir tek kullanımlık steril ortam lavabo kenarlarında kullanır. Cut onları iyi (~ 13 mm) hipotenüs rahatça uyacak kadar geniş.</li>
		<li>70 ° c sıcak tabakta özel Sıvılaştır.</li>
		<li>8-şey bölücü ITO tedavi slayt (şekil 2B) üstüne yerleştirin. Bölücü kauçuk altta yapışma slayda davranacak bir parça, ama hiçbir sızıntı veya kuyu arasında karıştırma sağlamak için özel kaplama sırasında sürekli hafif aşağı doğru basınç uygulamak emin olun.</li>
		<li>Hücreleri bir 15 mL konik tüp, santrifüj (800 rpm'de 5 dk) toplamak ve 50 k için 1 x DMEM medya 150 µL başına hücre resuspend. Farklı hücre yoğunluğu en iyi ise, bu aşamada hücre süspansiyon 2 x istenen son yoğunluk olduğundan emin olun (örneğin bir son 300 µL 50.000 hücreleri için hücre yoğunluğu bu aşamada 150 µL 50.000 hücreleri bölgedir).</li>
		<li>Plastik bölücüler çapraz wells (şekil 2C) yerleştirin.</li>
		<li>Özel bir zaman hemen önce kaplama her hücre süspansiyon bir ekleyin. Her şey için hücre süspansiyon, 100 µL ve sıvılaştırılmış özel bir 2 mL tüp 100 µL birleştirir. Örneğin, dört kuyular için 400 µL hücre kültür ve 400 µL % 2 özel birleştirir. Bazı hücre/özel karışımı sol olacaktır ama biraz daha fazla gerekli olduğunun pipetting sırasında hava kabarcıkları önler.<ol>
<li>Özel bireysel hücre kültürleri için hemen o hücre kültürü kaplama önce ekleyin. Özel bir dakika altında serin, çok hızlı bir şekilde plaka için hazır olun.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Bölücü, plaka 150 µL hücre/özel karışımı bir tarafında. Serin ve (yaklaşık bir dakika) kuvvetlendirmek ve bölücü (şekil 2B) kaldırmak özel izin.</li>
		<li>Yumurtalık explant iyi boş yarısı ortasına yerleştirin. Yer 150 µL medya/özel karışımı üst yumurtalık ve sadece iyi (şekil 2E) doğru yüzü üzerinde.</li>
		<li>Slayt 37 ° C ve % 5 CO2 oksijen kuluçka kuluçkaya.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. slayt kurutma ve MALDI-TOF MS için hazırlanıyor
<ol><li>Sonra dört gün (ya da herhangi bir tercih edilen zaman noktası), özel Prizler ve slayt (şekil 1 d) odası bölücü çıkarın. Yavaşça düz bir spatula ile özel odası üzerinden tarafını ayırmak ve yavaşça yukarı doğru herhangi bir özel prizler oynatmamaya dikkat odası çekin. Onlar taşırsanız, her birbirlerine dokunuyorlar değil bu yüzden nazikçe onları yeniden konumlandırın.</li>
	<li>Slayt yaklaşık 4 h her h 90 ° döner, 37 ° C fırında yerleştirin. Not: Döndürme slayt boyunca örnek bile ısı dağılımı sağlamak önemlidir.</li>
	<li>Kuru bir kez, slayt (şekil 1E) fırından çıkarın.</li>
	<li>Matris çözüm püskürtme (şekil 1F) kullanarak aşağıdaki parametrelerle geçerlidir: sıcaklığı 30 ° C arasında akış hızı = 0.2 mL/dak, geçişleri sayısı = = 8, yön CC ve meme mesafe = = 40 mm. Not: bir matris püskürtücü yerine sanatsal Pistole sıvı matris uygulamak için kullanılabilir. Aynı matris çözüm sprey için kullanılabilir, ancak yaklaşık iki kat daha fazla çözüm gereklidir. Böylece dikey olarak asılı klempe slayt ile slayt sprey bir açıdan 90° yaklaşık bir ayak üzerinden (Hoffmann15uyarlama) matrix kadar katman görülür.</li>
	<li>Calibrant 1 µL ekleyin (fosfor kırmızı hedefleri için < 500 Da, peptid karışımı ( Tablo malzemelerigörmek) hedefleri için < 5000 Da) için slayt üzerinde net nokta. Fosfor kırmızı yok matris ile karıştırma gerektirir, ancak peptid karışımı iyonlaşma yardım için matris ile 1:1 karışımı gerektirir. Calibrant kurumasını bekleyin.</li>
	<li>Bir X çizmek kalıcı bir kalem kullanarak slayt her köşedeki ve 1200 dpi çözünürlükte bir kamera veya tarayıcı kullanarak bir optik görüntü al.</li>
</ol>5. görüntüleme kütle spektrometresi veri toplama
<ol><li>IMS verileri analiz yazılımı yeni bir sıra açın (bkz. Tablo malzeme). Raster genişliği istediğiniz uzamsal çözünürlük, en az 50 µm ayarlayın.</li>
	<li>Slaydın optik görüntü analiz yazılımı yüklemek ve set üç öğretmek ile kavşak noktaları x her köşede çizilmiş.</li>
	<li>Bölgeler edinme yazılım görüntüleme için ilgi atayın ve bunları uygun şekilde adlandırın.</li>
	<li>Veri toplama yazılımı kullanarak araç kalibre ( Tablo malzemelerigörmek) 5 ppm hata içinde.</li>
	<li>En iyi duruma getirilmiş yöntemi Kaydet ve Çalıştır başlar. Bu deneme aşağıdaki parametreler optimize: polarite pozitif, dedektörü = reflektron, lazer boyutu = = 2, lazer güç % 50, reflektör modu dedektörü kazanç = 3 x =.</li>
</ol>6. işleme IMS verileri
<ol><li>Alma .mis istatistiksel yazılım dosyasına ( Tablo malzemelerigörmek) önemi çözümlenmesi için.</li>
</ol>

<ol><li>Paine, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+Reproductive+System+Non-Negative+Matrix+Factorization+Mass+Spectrometry+Imaging+of+an+Early-Stage+Ovarian+Cancer+Mouse+Model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Whole Reproductive System Non-Negative Matrix Factorization Mass Spectrometry Imaging of an Early-Stage Ovarian Cancer Mouse Model.</a> PLoS One. 11 (5), e0154837(2016).</li>
<li>Yang, Y. L., Xu, Y., Straight, P., Dorrestein, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translating+Metabolic+Exchange+with+Imaging+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Chemical+Biology%22%5BJournal%5D)">Translating Metabolic Exchange with Imaging Mass Spectrometry.</a> Nature Chemical Biology. 5 (12), 885-887 (2009).</li>
<li>Li, H., Hummon, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+Mass+Spectrometry+of+Three-Dimensional+Cell+Culture+Systems%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Imaging Mass Spectrometry of Three-Dimensional Cell Culture Systems.</a> Analytical Chemistry. 83 (22), 8794-8801 (2011).</li>
<li>Yang, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primer+on+Agar-Based+Microbial+Imaging+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Primer on Agar-Based Microbial Imaging Mass Spectrometry.</a> Journal of Bacteriology. 194 (22), 6023-6028 (2012).</li>
<li>Coscia, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrative+Proteomic+Profiling+of+Ovarian+Cancer+Cell+Lines+Reveals+Precursor+Cell+Associated+Proteins+and+Functional+Status%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Integrative Proteomic Profiling of Ovarian Cancer Cell Lines Reveals Precursor Cell Associated Proteins and Functional Status.</a> Nature Communications. 7, 12645(2016).</li>
<li>Labidi-Galy, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+Grade+Serous+Ovarian+Carcinomas+Originate+in+the+Fallopian+Tube%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">High Grade Serous Ovarian Carcinomas Originate in the Fallopian Tube.</a> Nature Communications. 8 (1), (2018).</li>
<li>Klinkebiel, D., Zhang, W., Akers, S. N., Odunsi, K., Karpf, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+Methylome+Analyses+Implicate+Fallopian+Tube+Epithelia+as+the+Origin+for+High-Grade+Serous+Ovarian+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">DNA Methylome Analyses Implicate Fallopian Tube Epithelia as the Origin for High-Grade Serous Ovarian Cancer.</a> Molecular Cancer Research. 14 (9), 787-794 (2016).</li>
<li>Falconer, H., Yin, L., Gronberg, H., Altman, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+Cancer+Risk+After+Salpingectomy%3A+A+Nationwide+Population-Based+Study%5BTitle%5D)+AND+%22JNCI+Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Ovarian Cancer Risk After Salpingectomy: A Nationwide Population-Based Study.</a> JNCI Journal of the National Cancer Institute. 107 (2), dju410(2015).</li>
<li>Dean, M., Davis, D. A., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activin+A+Stimulates+Migration+of+the+Fallopian+Tube+Epithelium%2C+an+Origin+of+High-Grade+Serous+Ovarian+Cancer%2C+through+Non-Canonical+Signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Letters%22%5BJournal%5D)">Activin A Stimulates Migration of the Fallopian Tube Epithelium, an Origin of High-Grade Serous Ovarian Cancer, through Non-Canonical Signaling.</a> Cancer Letters. 391, 114-124 (2017).</li>
<li>King, S. M., Burdette, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+Progenitor+Cells+of+Ovarian+Cancer%3A+Analysis+of+Current+Animal+Models%5BTitle%5D)+AND+%22BMB+Reports%22%5BJournal%5D)">Evaluating the Progenitor Cells of Ovarian Cancer: Analysis of Current Animal Models.</a> BMB Reports. 44 (7), 435(2011).</li>
<li>Reznik, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Landscape+of+Metabolic+Variation+across+Tumor+Types%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Systems%22%5BJournal%5D)">Landscape of Metabolic Variation across Tumor Types.</a> Cell Systems. 6 (3), 301-313 (2018).</li>
<li>Watkins, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+Impact+of+Selective+and+Nonselective+Beta-Blockers+on+Survival+in+Patients+with+Ovarian+Cancer%3A+Beta-Blockers+and+Ovarian+Cancer+Survival%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Clinical Impact of Selective and Nonselective Beta-Blockers on Survival in Patients with Ovarian Cancer: Beta-Blockers and Ovarian Cancer Survival.</a> Cancer. 121 (19), 3444-3451 (2015).</li>
<li>Lutgendorf, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress-Related+Mediators+Stimulate+Vascular+Endothelial+Growth+Factor+Secretion+by+Two+Ovarian+Cancer+Cell+Lines%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Stress-Related Mediators Stimulate Vascular Endothelial Growth Factor Secretion by Two Ovarian Cancer Cell Lines.</a> Clinical Cancer Research. 9 (12), 4514-4521 (2003).</li>
<li>Sood, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stress+Hormone-Mediated+Invasion+of+Ovarian+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Stress Hormone-Mediated Invasion of Ovarian Cancer Cells.</a> Clinical Cancer Research. 12 (2), 369-375 (2006).</li>
<li>Hoffmann, T., Dorrestein, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homogeneous+Matrix+Deposition+on+Dried+Agar+for+MALDI+Imaging+Mass+Spectrometry+of+Microbial+Cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+The+American+Society+for+Mass+Spectrometry%22%5BJournal%5D)">Homogeneous Matrix Deposition on Dried Agar for MALDI Imaging Mass Spectrometry of Microbial Cultures.</a> Journal of The American Society for Mass Spectrometry. 26 (11), 1959-1962 (2015).</li>
<li>Zink, K. E., Dean, M., Burdette, J. E., Sanchez, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+Mass+Spectrometry+Reveals+Crosstalk+between+the+Fallopian+Tube+and+the+Ovary+That+Drives+Primary+Metastasis+of+Ovarian+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Central+Science%22%5BJournal%5D)">Imaging Mass Spectrometry Reveals Crosstalk between the Fallopian Tube and the Ovary That Drives Primary Metastasis of Ovarian Cancer.</a> ACS Central Science. 4 (10), 1360-1370 (2018).</li>
<li>Armaiz-Pena, G. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Src+Activation+by+%CE%B2-Adrenoreceptors+Is+a+Key+Switch+for+Tumour+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Src Activation by β-Adrenoreceptors Is a Key Switch for Tumour Metastasis.</a> Nature Communications. 4, 1403(2013).</li>
<li>Choi, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HTERT+Mediates+Norepinephrine-Induced+Slug+Expression+and+Ovarian+Cancer+Aggressiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">HTERT Mediates Norepinephrine-Induced Slug Expression and Ovarian Cancer Aggressiveness.</a> Oncogene. 34 (26), 3402(2015).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa yoktur

HGSOC12,17,18norepinefrin'ın rolü implicates kanıt büyüyen bir ceset ve bu teknik daha mekanik bilgi katkıda bulunmuştur. Gen ve hücre özgüllük yanı sıra tek bir IMS medya denetimleri çalıştırmak gibi en az sekiz biyolojik koşullar ile aynı slayt üzerinde mevcut, biyolojik denetimler için yöntem hesap. Yöntem optimize edildi, ancak değerlendirmek için birincil metastaz HGSOC, herhangi bir hücre, bir modeli küçük moleküller değiş...

Kütle spektrometresi (IMS) görüntüleme en iyi duruma getirilmiş üç yaygın olarak kullanılan uygulamalarda moleküler özelliklerinin mekansal dağılımı niteleyen: dokusu dilimlerin, pulcuklarının ve mikrobiyal kolonileri1,2,3. Dokusu dilimlerin metabolitleri, hedeflenen ya da belirli bir kitle aralığı içinde hedefsiz bir ev sahibi, biyolojik koşullar bağlamında lokalizasyonu değerlendirmek için kullanılabilir. Ancak, bir sağlıklı doku hastalıklı bir durum, örneğin, bir tümör karşılaştırıldığında moleküler özellikleri arasındaki farklar en önemli ve açık vardır. Bu IMS yaklaşım özellikle hastalık biyolojik tespiti için adapte, ancak, hastalık ilerleme (tümör notlar gibi) farklı aşamalarında doku örnekleri alınıyor kabul töreni için önemli olabilir sinyalleri tanımlaması engellemektedir hastalık. Uzayda bilgi alışverişi birçok biyolojik sistemleri her yerde bulunan bir özelliktir ve dokusu dilimlerin dinamik bu kimyasal aktarma yakalamak değildir. Kimyasal değişimi ve Difüzyon görselleştirme kapasitesine sahip bir mikrobiyal kolonileri Ağar kaplamalar üzerinde yetiştirilen IMS tekniktir; küçük moleküller aracılığıyla ve agar genelinde yaygın edebiliyoruz ve matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonlaşma (MALDI-TOF) kütle spektrometresi4yolu ile yakalanabilir. Bu büyüme Kur ayrı biyolojik varlıklar (kolonileri) arasında değiş tokuş molekülleri tanımlamak için kullanılan ve yön metaboliti üretim öğeleri de belirleyebilirsiniz. Mikrobiyal koloni büyüme için tasarlanan platformu doku explants memeli hücreleri ile yetiştirilen birincil metabolizma keşfetmek için adapte oldu ve IMS dinamik kimyasal değişimi tüp bebek bir memeli sisteminde değerlendirmek için kullanıldı.
Son birkaç yıl içinde yüksek dereceli seröz over kanseri (HGSOC) kez fallopian tüp epitel (FTE) kaynaklanan ve yumurtalık için erken hastalığı geliştirme5,6sırasında, metastaz açık hale gelmiştir 7 , 8. tumorigenic FTE nerede büyük tümör sonunda oluşturmak ve daha fazla metastaz, yumurtalık yayılmasına hücreleri nedeni şu anda belli değil. Önceki araştırma yumurtalık için birincil metastaz yumurtalık proteinlerin rolü üzerinde odaklanmıştır; Ancak, bu son zamanlarda tumorigenic bir doku için sağlıklı bir geçiş hücre metabolizması büyük bozulma sonuçları ve üretim küçük moleküller9,10,11değiştirir kanıtlanmıştır. Bu nedenle, biz olan küçük moleküller FTE yumurtalık arasında değiş tokuş kısmen HGSOC birincil metastaz için sorumlu olabilir.
Bizim yeni geliştirilen IMS işlemi uygulayarak, biz coculture tumorigenic FTE ve sağlıklı yumurtalık dokusu yumurtalık üzerinden norepinefrin üretimini indükler belirledik. Ancak, diğer hücre tipleri veya normal FTE hücreleri bu etkiyi temin değil. Bu yöntem olağanüstü bir avantajı nedir Moleküler üretim ve Satım gerçek moleküller temsil sinyallerin görselleştirildiği, bu yüzden bile bir coculture bir sinyalin kaynağını saptamak mümkündür. Bu analiz homojenize örnekleri, üzerinde bir avantaj nerede bütün mekansal bilgi kaybolur. Modeli sistemimizde açıkça norepinephrine üretimi için yumurtalık atamak başardık. Metastaz ve yumurtalık kanserlerinin chemoresistance norepinefrin bağlantılı ve bu molekül bizim tespiti roman IMS yöntemi biyolojik ilgili molekülleri12,13, ortaya çıkarabilir geçerliliği 14. bu doğrulama IMS bu yeni uygulama coculture ortamlarda küçük moleküller tanıtmakta ve hücre dönüşüm etkisi erken olayları anlamaya çalışıyorsunuz gruplar araştırma özellikle yararlı olabilir teklif izin veriyor ve metastaz. Bu yöntem genel kimlik ve küçük moleküller kayma dağılımını doku ve organları, vitro 3D hücre kültürleri veya ex vivo dokusu tarafından temsil edilen arasında değişim sırasında aydınlatmak için hedeftir.

<table><tbody><tr><td>15 mL Falcon tüpleri</td><td>Denville</td><td>C1017-O</td><td>Hücreleri toplamak için</td></tr><tr><td>8 oyuklu oda (Millipore EZ-slayt odası)</td><td>Millipore</td><td>PEZGS0816</td><td>Millipore Millicell EZ-slayt odası slaytından yeniden tasarlandı</td></tr><tr><td>Asetonitril</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>34998-4L</td><td>Püskürtülmüş matris için çözücü</td></tr><tr><td>Alfa Minimum Temel Orta (&alfa; MEM)</td><td>Fisher</td><td>10-022-CV</td><td>Hücre kültürü ortamı</td></tr><tr><td>Otofleks hızı MALDI-TOF LRF</td><td>Bruker</td><td></td><td>IMS veri analizi için</td></tr><tr><td>Santrifüj</td><td>Eppendorf</td><td>5810 R</td><td>Hücreleri toplamak ve süpernatanı çıkarmak için</td></tr><tr><td>CHCA Matrisi</td><td>Bruker Daltonic</td><td>8201344</td><td>Matrix kurutulmuş slayt üzerine püskürtülür</td></tr><tr><td>DHB Matrix</td><td>Bruker Daltonic</td><td>8201346</td><td>Matrix püskürtülür kurutulmuş slayt üzerine</td></tr><tr><td>Tek Kullanımlık Neşterler</td><td>Fisher</td><td>22-079-707</td><td>Yumurtalıkların çıkarılması için</td></tr><tr><td>Diseksiyon Makası</td><td>Fisher</td><td>13-804-6</td><td>Yumurtalıkların çıkarılması için</td></tr><tr><td>DMEM Media</td><td>Gibco</td><td>11995-065</td><td>Agaroz</td></tr><tr><td>epidermal büyüme faktörü</td> ile karıştırılmış ortam <td>Peprotech Inc.</td><td>100-15</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>Eppendorf tüpleri</td><td>Genesee Scientific</td><td>22-282</td><td>Agaroz alikotları</td></tr><tr><td>için Estradiol-17 ve beta;</td><td>Simga-Aldrich</td><td>E2758</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu</td><td>Denville</td><td>fb5001</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>FlexControl 3.4</td><td>Bruker Daltonic</td><td></td><td>IMS veri toplama yazılımı</td></tr><tr><td>FlexImaging 4.1</td><td>Bruker Daltonic</td><td></td><td>IMS veri analiz yazılımı</td></tr><tr><td>Forseps (ince)</td> <td>Fsiher</td><td>22-327379</td><td>Hücre kültürü ortamının çıkarılması için yumurtalıklar</td></tr><tr><td>Gentamisin</td><td>Cellgro</td><td>30-005-CR</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>İnsülin, Transferrin, Selenyum (ITS)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>11074547001</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>ITO kaplı slayt</td><td>Bruker</td><td>8237001</td><td>Ko-kültür inkübasyonu için platform</td></tr><tr><td>Leibovitz'in L-15 Ortamı</td><td>Gibco</td><td>11415064</td><td>Doku sırasında kullanılan ortam diseksiyon</td></tr><tr><td>L-glutamin</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>Düşük erime noktalı agaroz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9414-10G</td><td>Kaplama için ortam ile karıştırılmış</td></tr><tr><td>Ortam havzası</td><td>Corning</td><td>4870</td><td>Bölünmüş odalar için plastik bölücüleri kesmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Penisilin-streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>Hücre kültürü ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>Peptit Kalibrasyon Standardı</td> Orta kütle aralığı için <td>Bruker Daltonic</td><td>8206195</td><td>Kalibrantı</td></tr><tr><td>Phophorus kırmızı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>343-242-5G</td><td>Düşük kütle aralığı için Kalibrant</td></tr><tr><td>SCiLS Lab 2015</td><td>Bruker Daltonic</td><td></td><td>IMS verileri istatistiksel analiz</td></tr><tr><td>Cerrahi Forseps (künt)</td><td>Fisher</td><td>08-875-8B</td><td>Yumurtalıkların çıkarılması için</td></tr><tr><td></td><td>TFA Fisher Teknolojiler</td><td>A116-50</td><td>Matris çözümüne eklendi</td></tr><tr><td>TM Püskürtücü</td><td>HTX Teknolojileri</td><td></td><td>Matris uygulamak için</td></tr></tbody></table>

doku ve kütle spektrometresi imaging kullanarak hücreleri arasında küçük molekül iletişim yakalama

Capturing Small Molecule Communication Between Tissues and Cells Using Imaging Mass Spectrometry

Kütle spektrometresi (IMS) görüntüleme rutin olarak uygulanmış örnekleri üç tür: doku bölümler, pulcuklarının ve mikrobiyal koloniler. Bu örnek türleri faiz biyolojik örnek arasında proteinler, lipidler ve metabolitleri dağılımını görselleştirmenizi matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonlaşma uçuş zaman kütle spektrometresi (MALDI-TOF MS) kullanılarak analiz. Memeli hücre kültürleri içinde özel içine tohum tarafından kanser, kimyasal iletişim tanımlamak için underexplored bir yaklaşım adrese üç önceki uygulama güçlü bir araya getiren bir roman örnek hazırlama yöntemi geliştirdik sağlıklı dokulara kuruma örnek tarafından takip ile coculture. Memeli doku ve hücreleri yakın üzerinden Difüzyon doku ve hücreleri arasındaki kimyasal iletişim sağlayan cocultured. Zaman belirli noktalarda, mikrobiyal kolonileri IMS analiz için hazırlanan aynı şekilde özel tabanlı örnek kurutulur. Bizim yöntem yüksek dereceli seröz over kanseri metastaz sırasında yumurtalık ile etkileşim gibi fallopian tüp sizden türetilmiş arasındaki iletişimi modellemek için geliştirilmiştir. Numune hazırlama duruma getirilmesi norepinefrin kimlik anahtar kimyasal bileşen olarak yumurtalık microenvironment sonuçlandı. Yeni geliştirilen bu yöntem bitişik hücreleri veya doku arasındaki kimyasal iletişim bir anlayış gerektiren diğer biyolojik sistemleri uygulanabilir.

En iyi şekilde kurutulmuş ITO slayt ile düz bir kabuktan örnek yol açacak hiçbir kırışıklıkları özel ve slayt (şekil 3) üzerinde kayma ayrılık korumak özel parçalar yüzey üzerinde çok az. Şekil 3A şekil 3B kaçınılmalıdır kırışıklıkları gösterirken en iyi kurutma gösterir. Bu iyileştirme üzerinde bağıl nem tabanlı fırında, slaydın tam zaman değişebilir gibi izleme dikkatli gerektirir. Kırışıklıkları b...

Numune hazırlama bir roman yöntemi görüntüleme kütle spektrometresi kullanılarak küçük molekül alışverişte algılamak için hücre ve doku coculture karşılamak için geliştirilmiştir.

Doku ve kütle spektrometresi Imaging kullanarak hücreleri arasında küçük molekül iletişim yakalama

Imaging mass spectrometry (IMS) has routinely been applied to three types of samples: tissue sections, spheroids, and microbial colonies. These sample ...

Protokolümüz hücreler ve dokular arasındaki küçük moleküllü kimyasal iletişimi haritalayabilir ve bunu özellikle yumurtalık kanseri metatezindeki küçük molekülleri keşfetmek için uyguladık. Tekniğimizin en büyük avantajı, küçük molekülleri etiketsiz bir şekilde ölçebilme ve hücrelerin ve dokuların 2Boyutlu uzamsal bütünlüğünü koruyabilme yeteneğidir. Bu teknik bize hedefsiz bir şekilde yumurtalık kanseri metastazküçük moleküllerin katkısını sorgulamak için izin verdi.Bu daha önce gözden kaçan yeni terapötik hedefler ve yollar ortaya olabilir. Bu metodoloji kolayca agarose ve bir mekansal bileşeni ortaya çıkan hücresel fenotip için önemli olabilir başka bir hastalık yetiştirilebilir diğer kanserler için uzatılabilir. Tüm hücrelerin ve bileşenlerin elde olmasını sağlamak ve kurutma işlemine sabır sağlamak bu protokol için gereklidir.Acele bir kurutma adımı genellikle düşük kaliteli kütle spektrometresi verilerine yol açabilir. Bu yöntemin görsel gösterimi, agar üzerinde doku veya mikrop kullanan tipik görüntüleme kütle spektrometresi deneylerinden büyük ölçüde saptırDığı için, örnek hazırlama ve kurutma adımlarımızı anlamada yararlıdır. Başlamak için, bir sıcak plaka üzerinde 70 santigrat derece agarose sıvılaştırmak.Sekiz iyi bölücüyü ITO ile tedavi edilen kaydıranın üzerine yerleştirin. Standart tripsin tedavisi ile, 15 mililitrelik konik tüp, santrifüj MOE hücreleri toplamak ve 150 mikrolitre başına 50, 000 hücre konsantrasyonu elde etmek için resuspend bir kez DMEM medya ekleyin, hangi iki kez nihai yoğunluğu istenen. Bölünmemiş cocultures için, dört kuyunun merkezine yumurtalık ekstrüzyonu eklemek için forseps kullanın.Kaplamahemen önce, hücre süspansiyon 200 mikrolitre ve tek tek iki mililitre tüpler sıvılaştırılmış agarose 200 mikrolitre birleştirir. Pipetleme sırasında hava kabarcıkları kaçının. Hemen, her kuyuya hücre-agarose karışımının 300 mikrolitresini ekleyin ve kuyular arasında sızıntı veya karıştırma olmaması nı sağlamak için bölücüye sürekli hafif aşağı doğru basınç uygulayın.Hiçbir hava kabarcıkları ve yumurtalık kuyunun merkezinde kalır olduğundan emin olun. Pipetli agarose yumurtalık rahatsız varsa, yavaşça agarose soğumadan önce ortalamak için pipet ucu kullanın. Daha sonra, 37 santigrat derece ve nemlendirilmiş bir kuluçka makinesinde% 5 karbondioksit slayt kuluçka.Bölünmüş cocultures için, ince, pürüzsüz plastik ten bölücüler kesti. Steril, tek kullanımlık bir ortam havzasının kenarları kullanılır. Kuyunun hipotenüse sığacak kadar geniş kesin.Sekiz iyi bölücüyü ITO ile işlenmiş kaydıranın üzerine yerleştirin ve plastik bölücüleri çapraz olarak kuyulara yerleştirin. Hücre kültürlerini daha önce olduğu gibi hazırlayın ve 100 mikrolitre hücre süspansiyonu ve 100 mikrolitre sıvılaştırılmış agarose'u iki mililitrelik bir tüpte birleştirin. Hemen, bölücü üzerinde aşağı doğru basınç tutarken bölücü bir tarafında hücre-agarose karışımı plaka 150 mikrolitre.Agarose'un yaklaşık bir dakika soğumasını ve katılamasını bekleyin ve bölücüyü çıkarın. Kuyunun boş yarısının ortasına yumurtalık ekstrüzyonu yerleştirmek için forceps kullanın. Yumurtalık üstüne hücre-agarose karışımı 150 mikrolitre ekleyin.37 santigrat derece ve nemlendirilmiş bir kuluçka makinesinde% 5 karbondioksit slayt kuluçka. Dört gün sonra, agarose fişleri oda bölücü çıkarın. Düz bir spatula ile, odadan agarose tarafayırmak ve yavaşça yukarı oda çekin.Herhangi bir agarose fişleri taşınırsa, yavaşça birbirlerine dokunmadan onları yeniden konumlandırın. Slama işlemini yaklaşık dört saat boyunca 37 derecelik bir fırına yerleştirin ve numune boyunca ısı dağılımını eşit olarak sağlamak için saatte 90 derece döndürün. Slayt tamamen kurutulmalıdır.Aksi takdirde, MALDI-TOF kütle spektrometresinin yüksek vakum ortamında numunenin patlamasına yol açabilir. Kaydıraktan kurutma ve ilerlemenin izlenmesi, yüksek uzamsal çözünürlük ve kaliteli kütle spektrumları elde etmek için en kritik adımdır. Pullanma veya aşırı kırışıklık oluşursa, kütle spektrometresi verilerinin toplanması önermiyoruz.Matris püskürtücüüzerine ayarlanan parametrelerle, slayta matris çözeltisi uygulayın. Fosfor Kırmızısı'nı kalıtım olarak kullanmak için, slayttaki net bir noktaya bir mikrolitre Fosfor Kırmızısı ekleyin. Peptit karışımını kalibrasyon olarak kullanmak için, iyonizasyona yardımcı olmak için parafilm üzerindeki matrisle bire bir oranında karıştırın ve slaytüzerine 0,5 ila bir mikrolitre nokta.Kütle spektrometresi veri toplama görüntüleme den önce kalibrantın kurumasını bekleyin. Slaytın her köşesinde kalıcı bir işaretleyici kullanarak bir X çizin ve 1200 dpi'de bir kamera veya tarayıcı kullanarak optik görüntü çekin. Bu deneyde, fırında slayt dikkatli izlenmesi agarose yüzeyinde en az ve hiçbir kırışıklık ile düz kurutulmuş örnek ile sonuçlanır optimum kurutulmuş ITO slayt sağlamak için gereklidir.Bu rakam kaçınılması gereken kırışıklıkları gösterir. Kırışıklıklar yüksekliği ve dolayısıyla görüntüleme kütle spektrometresi sinyallerinin kütle doğruluğunu biraz etkileyebilir. Hafif kırışıklıklar verilerin kalitesini etkilemez.En iyi şekilde konumlanmış bir doku mümkün olduğunca merkeze yakın olmalıdır. ImS verilerinin elde edilmesikenar etkilerle kirlenmemesi için bölünmüş sayılmaması halinde kullanılan doku kuyunun merkezinde veya yarım üçgenin ortasında olmalıdır. Kötü konumlandırılmış doku, görüntülendiğinde, kenar etkileri yanlış kitle sinyalleri neden olabilir.Kurutulmuş slayt görüntüsü, MALDI-TOF kütle spektrometresine hangi bölgelerin görüntülenemesini öğretmek için kullanılır. 50 mikrometrede IMS için yumurtalık dokusu çevresindeki küçük bölgeler seçilmiştir. Bölünmüş ortak kültürlerin yanı sıra bölünmüş oda kurulumu için m-over-z sinyalinin temsili bir görüntüsü gösterilir.Unutulmaması gereken en önemli şey, elde edilen verilerin yalnızca örnek hazırlama kadar iyi olduğudur. Kurutma işlemine özellikle dikkat edin. En heyecan verici yönü, etkili konsantrasyon hakkında bilgilendirmek ve insan biyolojisine çevirmek için istila tahlilleri veya kolonizasyon tahlilleri gibi diğer deneyler kullanarak bu şekilde keşfedilen küçük molekülleri doğrulamaktır.Bunun yumurtalık kanserinin primer metatezindeki süreçleri daha iyi anlayarak yumurtalık kanseri için potansiyel tedavi hedeflerinin yeni yollarını keşfetmenin önünü açacağını ugörüyoruz.

capturing-small-molecule-communication-between-tissues-cells-using

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Desorpsiyon elektrosprey iyonizasyon kütle spektrometresi (DESI-MS) biyolojik dokular dahil olmak üzere örnekler, minimum numune hazırlama ile görüntülenebilir hangi bir ortam yöntemdir. Iyonizasyon probu aşağıdaki örnek rastering tarafından, bu sprey tabanlı teknik doku bölümleri içinde ilgi moleküler özellikleri ayırt etmek yeterli uzaysal çözünürlüğü sağlar.

Desorpsiyon Elektrosprey İyonizasyon Kütle Spektrometresi ile Biyolojik Dokuların Görüntüleme

Burada, MS analizi için minyatür çok işlevli bir cihaz olan tek probu kullanarak hem dokuların ortam kütle spektrometresi görüntülemesini (MSI) hem de yerinde canlı tek hücreli MS (SCMS) analizini gerçekleştirmek için protokoller sunuyoruz.

Tek prob Uygulamalar: Ortam Koşullarında Kütle Spektrometre Görüntüleme ve Tek Hücre Analizi

Entegre hücre manipülasyon platformu, ortam koşullarında bireysel süspansiyon hücrelerinin on-line analizi için tek prob Kütle Spektrometrisi kurulumu ile birlikte kullanılmak üzere geliştirilmiştir.

Entegre hücre manipülasyon platformu tek süspansiyon hücrelerinde Ilaçların ve metabolitlerin Kütle Spektrometrisi analizi için tek prob ile birleştiğinde

Bu protokolün amacı, biyolojik örneklerde metabolik ve moleküler tespiti en üst düzeye çıkarmak için MALDI MSI kullanarak deneyler planlarken numune hazırlama konusunda ayrıntılı rehberlik sağlamaktır.

MALDI Kütle Spektrometresi Görüntüleme Kullanarak Metabolik Profilleme için Örnek Hazırlama

Kanser immünoterapisi çağında, tümör mikroçevre dinamiklerini aydınlatmaya olan ilgi çarpıcı bir şekilde artmıştır. Bu protokol, boyama ve görüntüleme adımlarıyla ilgili olarak kütle spektrometresi görüntüleme tekniğini detaylandırır ve bu da oldukça çoklanmış mekansal analize izin verir.

Formalin-Sabit ve Parafin-Gömülü Doku Örneklerinin Kütle Spektrometrisi Görüntülemesini Kullanarak Tümör Mikroçevresinin Kavranmasının Genişletilmesi

Matris yardımlı lazer desorpsiyon/iyonizasyon görüntüleme kütle spektrometrisi ile agara bazlı, bakteriyel makrokolonilerin analizi için yeni bir numune hazırlama yöntemi gösterilmiştir.

Enfeksiyon Sırasında Agar ve Dokuda Yetişen Bakteri Kolonilerinin Görüntüleme Kütle Spektrometrisi Analizi Yoluyla Mikrobiyal İşbirliğinin İncelenmesi

Beyin organoidlerinin kütle spektrometresi görüntülemesi (MSI) için bu modeller içindeki metabolit dağılımlarının haritalanmasına izin veren gelişmiş bir yöntem geliştirilmiştir. Bu teknoloji, erken gelişim sırasında ve hastalıkta beyin metabolik yolları ve metabolit imzaları hakkında bilgi sunarak insan beyninin işlevinin daha derin bir şekilde anlaşılmasını vaat ediyor.

İnsan Beyni Organoidlerinin Kütle Spektrometresi Kullanılarak Moleküler Görüntülenmesi 

Bu protokol, floresan kılavuzlu, tek hücreli MALDI-2 kütle spektrometresi için mikroMS kullanımını ana hatlarıyla belirtir ve birincil sıçan nöronal hücrelerinin gelişmiş moleküler profilini çıkarmayı sağlar.

Bireysel Sıçan Nöral Hücrelerinin Lazer Kaynaklı Postiyonizasyon Kütle Spektrometresi ile Floresan Kılavuzluğunda Matris Destekli Lazer Desorpsiyon/İyonizasyon

Bu protokol, uçucu tuz çözeltisi yıkama, hızlı sıvı nitrojen söndürme, dondurarak kurutma ve -8 °C'de depolamayı birleştirerek tek hücreli kütle spektrometrisi (SCMS) için hücre metabolitlerini korumayı amaçlamaktadır. Metabolit profillerini korumak için sıvı nitrojen söndürmenin gerekli olduğunu, metabolik değişiklikleri önlemek için uzun süreli soğuk depolamanın en aza indirilmesi gerektiğini göstermektedir.

Tek Hücreli Kütle Spektrometresi Metabolomik Çalışmaları için Numune Hazırlama: Kombine Hücre Yıkama, Söndürme, Kurutma ve Depolama

Bu protokol, yüksek mekansal çözünürlüklü metabolomik analiz için desorpsiyon elektrosprey iyonizasyonu ve Orbitrap kütle spektrometreleriyle eşleştirilen OVCAR-8 hücrelerinin tek hücreli kütle spektrometrisi görüntülemesini açıklar.

Orbitrap Kütle Spektrometrelerine Bağlı Desorpsiyonlu Elektrosprey İyonizasyon Kullanarak Tek Hücreli Kütle Spektrometrisi Görüntüleme

Öğrenin, görüntüleme kütle spektrometresi kullanarak hücreler arasında küçük molekül iletişimini haritalama yöntemini. Bu etiketsiz teknik, yumurtalık kanseri metastazındaki yeni tedavi hedeflerini ortaya çıkarmaya yardımcı olur.

Doku ve kütle spektrometresi Imaging kullanarak hücreleri arasında küçük molekül iletişim yakalama

Daha fazla video keşfet