Name: Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü 11C SNAP-7941 (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-04-28T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: Öğrenin [11C]SNAP-7941'in otomatik sentezi ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesi yöntemini. Bu teknik, PET görüntüleme ile reseptör ekspresyon seviyelerini incelemek için kullanılır ve metabolik hastalıklar araştırmalarına katkı sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Avusturya Bilim Fonu (FWF P26502-B24, M. Mitterhauser) tarafından destekleniyordu. Biz T. Zenz ve A. Krcal teknik destek için minnettarız. Dahası, ön-dağıtım için AgOTf ve H. Spreitzer hazırlanması için K. Pallitsch teşekkür ederiz.

<ol><li>Saito, Y., Maruyama, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+melanin-concentrating+hormone+receptor+and+its+impact+on+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Zoology%22%5BJournal%5D)">Identification of melanin-concentrating hormone receptor and its impact on drug discovery.</a> Journal of Experimental Zoology. 305, 761-768 (2006).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+in+vitro+%26+in+vivo+evaluation+of+%5B11C%5DSNAP-7941+-+the+first+PET+tracer+for+the+melanin+concentrating+hormone+receptor+1%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Preclinical in vitro & in vivo evaluation of [11C]SNAP-7941 - the first PET tracer for the melanin concentrating hormone receptor 1.</a> Nuclear Medicine and Biology. 40, 919-925 (2013).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiosynthesis+of+%5B+11C%5DSNAP-7941-the+first+PET-tracer+for+the+melanin+concentrating+hormone+receptor+1+%28MCHR1%29%5BTitle%5D)+AND+%22Applied.+Radiation+and+Isotopes%22%5BJournal%5D)">Radiosynthesis of [ 11C]SNAP-7941-the first PET-tracer for the melanin concentrating hormone receptor 1 (MCHR1).</a> Applied. Radiation and Isotopes. 70, 2287-2294 (2012).</li>
<li>Philippe, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SNAPshots+of+the+MCHR1%E2%80%AF%3A+a+Comparison+Between+the+PET-Tracers+%5B+18+F+%5D+FE+%40+SNAP+and+%5B+11+C+%5D+SNAP-7941%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+Biology%22%5BJournal%5D)">SNAPshots of the MCHR1 : a Comparison Between the PET-Tracers [ 18 F ] FE @ SNAP and [ 11 C ] SNAP-7941.</a> Molecular Imaging Biology. , 1-12 (2018).</li>
<li>Schirmer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syntheses+of+precursors+and+reference+compounds+of+the+melanin-+concentrating+hormone+receptor+1+%28MCHR1%29+Tracers+%5B11C%5DSNAP-7941+and+%5B18F%5DFE%40SNAP+for+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Syntheses of precursors and reference compounds of the melanin- concentrating hormone receptor 1 (MCHR1) Tracers [11C]SNAP-7941 and [18F]FE@SNAP for positron emission tomography.</a> Molecules. 18, 12119-12143 (2013).</li>
<li>Miller, P. W., Long, N. J., Vilar, R., Gee, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthese+von+11C-%2C+18F-%2C+15O-+und+13N-Radiotracern+f%C3%BCr+die+Positronenemissionstomographie%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie%22%5BJournal%5D)">Synthese von 11C-, 18F-, 15O- und 13N-Radiotracern für die Positronenemissionstomographie.</a> Angewandte Chemie. 120, 9136-9172 (2008).</li>
<li>Pichler, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+on+PET+radiochemistry%3A+part+1+-+covalent+labels+-+18+F%2C+11+C%2C+and+13+N%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">An overview on PET radiochemistry: part 1 - covalent labels - 18 F, 11 C, and 13 N.</a> Journal of Nuclear Medicine. 59, 1350-1354 (2018).</li>
<li>Pichler, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molar+activity+-+The+keystone+in+11C-radiochemistry%3A+An+explorative+study+using+the+gas+phase+method%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Molar activity - The keystone in 11C-radiochemistry: An explorative study using the gas phase method.</a> Nuclear Medicine and Biology. 67, 21-26 (2018).</li>
<li>Larsen, P., Ulin, J., Dahlstrøm, K., Jensen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synthesis+of+%5B11C%5Diodomethane+by+iodination+of+%5B11C%5Dmethane%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Radiation+and+Isotopes%22%5BJournal%5D)">Synthesis of [11C]iodomethane by iodination of [11C]methane.</a> Applied Radiation and Isotopes. 48, 153-157 (1997).</li>
<li>Dahl, K., Halldin, C., Schou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+methodologies+for+the+preparation+of+carbon-11+labeled+radiopharmaceuticals%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Translational+Imaging%22%5BJournal%5D)">New methodologies for the preparation of carbon-11 labeled radiopharmaceuticals.</a> Clinical and Translational Imaging. 5, 275-289 (2017).</li>
<li>Raaphorst, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiopharmaceuticals+for+assessing+ABC+transporters+at+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical.+Pharmacollogy+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Radiopharmaceuticals for assessing ABC transporters at the blood-brain barrier.</a> Clinical. Pharmacollogy & Therapeutics. 97, 362-371 (2015).</li>
<li>Nics, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Speed+matters+to+raise+molar+radioactivity%3A+Fast+HPLC+shortens+the+quality+control+of+C-11+PET-tracers%5BTitle%5D)+AND+%22Nuclear+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Speed matters to raise molar radioactivity: Fast HPLC shortens the quality control of C-11 PET-tracers.</a> Nuclear Medicine and Biology. 57, 28-33 (2018).</li>
<li>Zeilinger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+approaches+for+the+reliable+in+vitro+assessment+of+binding+affinity+based+on+high-resolution+real-time+data+acquisition+of+radioligand-receptor+binding+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging+%28Research%29%22%5BJournal%5D)">New approaches for the reliable in vitro assessment of binding affinity based on high-resolution real-time data acquisition of radioligand-receptor binding kinetics.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging (Research). 7, 22(2017).</li>
</ol>

İfşa etmemiz gereken bir şey yok.

[11C] SNAP-7941 radyosentezi ticari sentez modülünde kurulmuştur. Hazırlık prosedürünü tamamen otomatikleştirmek olasılığı nedeniyle, radyosentez güvenilir olması ve operatörün radyasyon koruması ile ilgili gelişmeler elde edildi. Synthesizer hazırlanması özellikle molar aktivite açısından, radiotracer kalitesi üzerinde büyük bir etkiye sahiptir. Bu nedenle, sürekli olarak inert koşullarda çalışmak (örneğin helyum atmosferi) ve reaksiyon gemisinden önce bulunan tüm hatları (hedef hat, [11C] ch3I üretim döngüsü ve reaktör) temizlemenin esastır (bkz. Şekil 2)). Dahası, nem ve atmosferik karbon kaldırmak için sentezin başlamadan önce ilgili tuzaklar ve Fırınlar Isıtma avantajlı molar etkinliğini artırır. Özellikle Grafit karbon ile emgili agotf sütun, nem için son derece duyarlıdır. Herhangi bir nem kaynağının bile küçük miktarlarda [11c] ch3I [11c] ch3OTF dönüşümü rahatsız. Sentezi başlatmadan önce, [11c] Co2 tuzağı ve [11c] ch3ı tuzağı, sonraki bindirmeyi etkinleştirmek için oda sıcaklığına tekrar soğutulması gerekir. Ayrıca, sentezi başlatmadan kısa bir süre önce öncüsünü çözülür ve tabanı doğrudan öncü çözüme eklemesi tavsiye edilir.
Carbon-11 radiotracers için kalite kontrolü, sürekli ve hızlı bir iş akışı için rasyonel olarak tasarlanmalıdır. Ancak, hücre kültürü çalışmaları için en önemli parametreler, geçerli sonuçlar elde etmek için radyokimyasal saflık ve molar aktivitesidir. Molar aktivitesinin doğru değerlendirilmesi için sağlam bir analitik HPLC yöntemi gerekir ve kalibrasyon eğrisi son ürünün konsantrasyon aralığını kapsayacak şekilde gerekir. Radiotracers için zorlu kısmı, radyosentezi sırasında üretilen küçük miktarlarda, miktarın (LOQ) sınırı üzerinde bir konsantrasyon elde etmektir. Bu nedenle, sanat reseptör doygunluk ve yeterince yüksek konsantrasyonları önlemek için yüksek molar faaliyetleri arasındaki dengeyi bulmak için hala radyoaktif olmayan sinyali ölçmek mümkün.
[11C] SNAP-7941, insan P-GP taşıyıcısının güçlü bir substrat olduğu doğrulandı, çünkü hızlı efflux nedeniyle tedavi edilmemiş veya araç tedavi edilen MDCKıı-hMDR1 hücrelerinde hiçbir birikim görülmemiştir. Buna karşılık, hem deneysel set up (MDCKıı-WT veya önceden engellenen MDCKıı-hMDR1 hücreleri) benzer sonuçlar (birikimi sağladı [11C] SNAP-7941), bu in vitro tahlil çok yönlülük destekleyen. MDCKıı-hMDR1 hücreleri istikrarlı transfeksiyon, hızlı büyüme ve dönen hücre kültürü çanak nedeniyle kesme stres karşı kalıcı nedeniyle LigandTracer deneyler için son derece uygundur. Bu nedenle P-GP taşıyıcı aracılığıyla "effluks" nedeniyle ortaya çıkabilir [11C] Snap-7941 sıçan ve fareler beyninde Alım almak eksikliği. İnsan çok ilaç direnci protein 1 ile köpek böbrek hücrelerinin transfeksiyon nedeniyle (hmdr-1, P-GP), insanlarda "effluks" taşıyıcı bağlayıcı için bu yöntemin öngörü değeri yüksek, hangi gelecekteki bir klinik uygulama açısından uygundur. Ancak, şimdiye kadar, diğer "effluks" taşıyıcı karşı seçicilik doğrulanmadı. Bu nedenle, diğer hücre hatları, meme kanseri direnci protein (bcrp) veya birden fazla direnç protein-1 (MRP-1), bu taşıyıcılar doğru etkileşimleri incelemek için farklı belirgin "effluks" taşıyıcıları ifade kullanılabilir. Yöntem klasik birikme veya taşıma ile karşılaştırıldığında çok basit ve hemen niteliksel sonuçlar verir. Dahası, en büyük avantaj, bu teknolojinin, dolaylı ölçüme (çoğunlukla deplasman) kullanarak konvansiyonel denemenin aksine, gerçek zamanlı olarak PET Tracer ve hedefin doğrudan etkileşiminin değerlendirilmesine olanak sağlar. Ayrıca, gerçek zamanlı radyotahlil yazılımı deneysel esneklik sağlar (örneğin, nükle çürümesi düzeltmesi, zaman ve pozisyonlar ölçme, vb.) ve bu nedenle, kullanıcılar için yüksek özgürlük. Diğer tarafta, yöntemin sınırlamaları, aynı anda yalnızca bir hücre çanak ölçülmesi gibi düşük örnek bir verim içerir. Ayrıca, birkaç diğer teknik ve operasyonel sorunlar dikkate alınmalıdır: açıklanan teknoloji çok arka plan radyasyon duyarlıdır; Bu nedenle, radyasyon kaynakları uzaktan tutulmalıdır ve deney öncesinde arka plan ölçümüne vurgu konulmalıdır. Oda sıcaklığından daha yüksek sıcaklıklarda deneyler ile ilgili bir başka sorun, eğimli desteğinin ısıtılması: hücre kültürü ortamının buharlaşma dedektörü etkileyebilir. Isıtma yerine, tüm cihaz tercihen kuluçku içine yerleştirilir. Ayrıca, yöntem yapışıcı hücre hatları ile sınırlıdır. Hücre kültürü çanak dönüşü sayesinde, kesme stres hassas hücreler, geçersiz sonuçlara yol açabilir çanak, ayırabilir.
Yine de, deney bu küçük dezavantajları dikkat ederse yöntemi preklinik PET-tracers kinetik davranış analizi için hızlı ve güvenilir sonuçlar sunar.

[11C] SNAP-7941 ilk pozitron emisyon tomografi (PET) olarak gelişti-Tracer melanin-konsantre hormon reseptörü hedefleyen 1 (MCHR1)-bir reseptör özellikle iştah ve gıda alımı merkezi düzenlenmesi dahil1. Karbon-11 Snap-7941 etiketlemesi, iyi karakterize MCHR1 antagonisti, otantik Pet-Tracer2,3,4,5vermiştir. Ancak, tam otomatik radyosentezi kısa ömürlü radiyonüklid karbon-11 ile zaman etkinliği ve yeniden Üretilebilirlik açısından son derece zorlu bir yarı ömrü sunan 20 dk6. Genel sentezi zaman en az tutulması gereken, ve başparmak bir kural olarak 2-3 yarı hayatlarını aşmamalıdır (yani, yaklaşık 40-60 dk Carbon-11 için)7. Özellikle, düşük ifade yoğunluklarına sahip reseptör sistemlerini hedefleyen radyotraclar için sentezleme prosedürleri, yeterli verim elde etmek ve dolayısıyla yüksek molar aktivitesi8için kapsamlı bir şekilde optimize edilmelidir. Sentetik strateji genellikle bir siklotron içinde radiyonüklid üretimini takip ve synthesizer [11C] Co2 serbest. Orada, [11c] Co2 ilk olarak [11 c] ch4 ' e düşürüldü ve daha sonra [11c] ch3I ile gaz fazı yöntemi9,10 yoluyla verim için iyot ile reaksiyona gelmiştir. Gümüş triflat verimleri ile daha fazla tedavi [11C] ch3OTF doğrudan on-line. Daha sonra, bu reaktif karbon-11 etiketli ara preüror molekül içeren bir çözüm haline getirilmiştir. Otomatik radyosentezi Ayrıca, preklinik ve klinik çalışmalar için uygun ürünün sonraki formülasyonu da dahil olmak üzere yarı Preparatif RP-HPLC ile bir arıtma süreci içerir.
Radyonüklid 'in yarı ömrü ve radyosentezi zaman çabası ne olursa olsun, bir radyoopharmaceutical farmakokinetik PET-Tracer gelişimi sırasında değerlendirilmek üzere en kritik parçasıdır. Nörogörüntüleme açısından, PET-Tracer beyin giriş ana önkoşuldur. Ancak, kan beyin bariyeri (BBB), beynin bir "güvenlik sınırı", son derece küçük molekülleri boşaltabilir "effluks" taşıyıcıları ifade (örneğin, PET-tracers) ve verimli bir şekilde uygulanabilirliği engelliyor.
Preklinik değerlendirme sırasında büyük bir dezavantajı bu "effluks" taşıyıcıları, genellikle in vitro deneylerde tanınmayan ve pet-Tracer In vivo başarısızlık önde gelen beklenmeyen etkileşimler, [11C] Snap-7941 için gözlenen gibi. Ratlarda μPET görüntüleme düşük beyin birikimi göstermiştir, hangi P-GP inhibitörü tariquidar uygulamadan sonra dramatik artış11. Bu veriler, [11C] Snap-7941, bu "effluks" taşıyıcı sisteminin MCHR1 merkezine bağlayan ligand bağlayıcı bir substrat olduğunu önerdi. Ne yazık ki, hala izleme gelişimi erken bir aşamada BBB penetrasyon tahmin sağlayan yeterli in vitro modelleri eksikliği vardır.
Burada, Carbon-11 metilasyonları için bir synthesizer kullanarak [11C] SNAP-7941 otomatik sentezi açıklanmaktadır. Bu çalışmanın vurgu, otomatik sentez, kalite kontrolü ve çok kısa ömürlü çekirdekler Carbon-11 ile ardışık in vitro değerlendirme de dahil olmak üzere ardışık deneysel bir yaklaşım düzenlemek için nasıl bir genel bakış vermesidir.
İlk olarak, en az zaman harcaması ve maksimal verim ile başarılı bir radyosentez için önemli adımlar açıklanmıştır. Daha sonra, güvenilir bir kalite kontrol prosedürü biyodağılımın potansiyel klinik çalışmalar için kullanılabilir hale ayarlamak ve Avrupa Pharmacopoeia12kriterlerini karşılayan. Molar konsantrasyonunun ölçülmesini ve ilgili molar aktivitesinin hesaplanması, ardışık kinetik ölçümler için gerekli bir gerekliliktir.
Son olarak, yeni ve basit bir in vitro yöntemi değerlendirmek [11C] Snap-7941 ' in "effluks" taşıyıcı karşı etkileşimleri, P-GP (hMDR1), sunulmaktadır. Önerilen kinetik model hemen veri yorumu sağlayan ve minimum hücre kültürü çaba13gerektiren bir kolay tanıtıcı cihaz kullanır.

<table><tbody><tr><td>Tablo 1: [11C]SNAP-7941</td><td></td><td></td><td></td>Ni katalizörü Shimadzu'nun tam otomatik radyosentezinin malzeme ve enstrümantasyonunun listesi</tr> <tr><td></td><td>Shimadzu, Kyoto, Japonya</td><td></td><td>Shimalilte Ni azaltılmış, 80/100 mesh</td></tr><tr><td>İyot Merck</td><td>, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>1.04761.0100</td></tr><tr><td>Asetonitril</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>DNA sentezi için, < 10 ppm H2O</td></tr><tr><td>Asetonitril</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD</td><td></td><td>HPLC sınıfı</td></tr><tr><td>Amonyum asetat</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Asetik asit</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>buzul</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>%96</td></tr> <tr><td>NaCl</td><td>B. Braun, Melsungen, Almanya</td><td></td><td>%0,9 </td></tr><tr><td>Tetrabütilamonyum hidroksit</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD</td><td></td><td>HPLC sınıfı</td></tr><tr><td>SPE kartuşu</td><td>Sular, Milford, MA, ABD</td><td></td><td>SepPak C18plus</td></tr><tr><td>Yarı hazırlayıcı RP-HPLC sütunu</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>Chromolith SemiPrep RP-18e, 100-10 mm</td></tr><tr><td>Ön sütun</td><td>Merck, Darmstadt, Almanya</td><td></td><td>Kromolith Koruması RP-18e, 5-4,6 mm</td></tr><tr><td>Öncü</td><td>Viyana Üniversitesi, Avusturya</td><td></td><td>SNAP-asit</td></tr><tr><td>Referans bileşiği</td><td>Viyana Üniversitesi, Avusturya</td><td></td><td>SNAP-7941</td></tr><tr><td>Gümüş triflorometansülfonat</td><td>Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Graphpa GC</td><td>Alltech, Deerfield, IL, ABD</td><td></td><td>80/100 ağ</td></tr><tr><td>PET iz 860 siklotron</td><td>GE Healthcare, Uppsala, İsveç</td><td></td><td></td></tr><tr><td>[11C]CO2 yüksek basınç hedefi</td><td>Air Liquide, Viyana, Avusturya</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TRACERlabFX2 C</td><td>GE Sağlık Hizmetleri, Uppsala, İsveç</td><td></td><td></td></tr><tr><td>N2 +% 1 O2</td><td>Air Liquide, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Hedef gaz</td></tr><tr><td>İsim</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Tablo 2: [11C]SNAP-7941.</td><td></td><td></td><td></td>Merck Hitachi LaChrom'un kalite kontrolünün malzeme ve enstrümantasyon listesi</tr><tr><td>, L-7100</td><td>Hitachi Vantara Austria GmbH (Viyana, Avusturya)</td><td></td><td>HPLC pompası</td></tr><tr><td>Merck Hitachi, L7400</td><td>Hitachi Vantara Austria GmbH (Tokyo, Japonya)</td><td></td><td>UV dedektörü</td></tr><tr><td>NaI-radyodedektör</td><td>Raytest (Straubenhardt, Almanya)</td><td></td><td>NaI-radyodedektör</td></tr><tr><td>Chromolith Performance RP-18e, 100-4.6 mm</td><td>Merck (Darmstadt, Almanya)</td><td></td><td>HPLC sütunu</td></tr><tr><td>430-GC</td><td>Bruker (Bremen, Almanya)</td><td></td><td>Gaz kromatografı</td></tr><tr><td>Kılcal kolon ID-BP20; 12 mx0.22 mmx0.25 mm</td><td>SGE Ananlytical Science Pty. Ltd. (Victoria, Avustralya)</td><td></td><td>Gaz kılcal</td></tr><tr><td>Wesco, ozmometre Vapro 5600</td><td>Sanoya Medical Systems (Viyana, Avusturya)</td><td></td><td>Ozmometre</td></tr><tr><td>g-spektrometresi</td><td></td><td></td><td>g-spektrometresi</td></tr><tr><td>Gaz kromatografisi kontrol yazılımı</td><td>VARIAN (Palo Alto, California, ABD)</td><td></td><td>Gökada Sürüm 1.9.302.952</td></tr><tr><td>Gama spektrometresi kontrol yazılımı</td><td>ORTEC (Oak Ridge, Tenessee, ABD)</td><td></td><td>Windows için Maestro Sürüm 6.06</td></tr><tr><td>Gama spektrumu geri çağırma yazılımı</td><td>ORTEC (Oak Ridge, Tenessee, ABD)</td><td></td><td>Winplots sürüm 3.21</td></tr><tr><td>HPLC kontrol yazılımı</td><td>Raytest (Straubenhardt, Almanya)</td><td></td><td>Gina Star Sürüm 5.9</td></tr><tr><td>inolab 740</td><td>WTW (Weilheim, Almanya)</td><td></td><td>pH metre</td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Katalog Numarası</td><td>Yorumlar</td></tr><tr><td>Tablo 3: [11C]SNAP-7941.</td><td></td><td></td><td></td>Madin-Darby Köpek Böbrek hücre hattının gerçek zamanlı kinetik davranışının değerlendirilmesi için malzeme ve enstrümantasyon listesi</tr> <tr><td>(MDCKII-hMDR1)</td><td>Hollanda Kanser Enstitüsü (NKI, Amsterdam, Hollanda)İnsan</td><td></td> <td>P-glikoproteininin (hMDR1) eksprese</td></tr> <tr><td>edilmesiMadin-Darby Köpek Böbrek hücre hattı (MDCKII-WT)</td><td>Hollanda Kanser Enstitüsü (NKI, Amsterdam, Hollanda)</td><td></td><td>Wildtype (WT)</td></tr><tr><td>DMEM GlutaMAX</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Gibco 61965-026</td></tr><tr><td>Fetal Buzağı Serumu (FCS)</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Gibco 10270-106</td></tr><tr><td>Penisilin / Streptomisin</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Gibco 15140</td></tr><tr><td>Hücre kültürü kabı</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Almanya</td><td></td><td>Cellstar 100 mm x 20 mm, Mfr.No. 664160</td></tr><tr><td>In vitro deneyler</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMEM GlutaMAX</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Gibco 61965-026</td></tr><tr><td>(&plusmn;)-Verapamil hidroklorür</td><td>Sigma Aldrich (St. Louis, Missouri, ABD)</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma Aldrich (St. Louis, Missouri, ABD)</td><td></td><td>276855-100 mL</td></tr><tr><td>Hücre kültürü kabı</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Almanya</td><td></td><td>Cellstar 100 mm x 20 mm, Mfr.No. 664160</td></tr><tr><td>Steril tek kullanımlık plastik pipetler</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Sterilin, 5 mL & ndash; 25 mL</td></tr><tr><td>Steril pipet uçları</td><td>VWR International GmbH, Viyana, Avusturya</td><td></td><td>Eppendorf epT.I.P.S. Biopur 20 ve mikro; L &ndash; 200 ve mikro; L</td></tr><tr><td>Hücre kültürü şişeleri</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Frickenhausen, Almanya</td><td></td><td>Cellstar 250 mL, 75 cm2 kırmızı filtre vidalı kapak, Mfr.No.658175</td></tr><tr><td>LigandTracer kontrolü Sürüm 2.2.2</td><td>Ridgeview Instruments AB, Uppsala, İsveç.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LigandTracer Sarı</td><td>Ridgeview Instruments AB, Uppsala, İsveç.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LigandTracer White</td><td>Ridgeview Instruments AB, Uppsala, İsveç.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prizma 6.0</td><td>GraphPad Yazılımı, Inc.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>El otomatik Hücre Sayacı</td><td>Millipore Corporation Billerica MA01821</td><td></td><td>Asa (Cat.No. PHC00000)</td></tr> <tr><td>Hücre Sayacı Sensörleri</td><td>Millipore Corporation Billerica MA01821</td><td></td><td>Asa Sensörü 60 & m (Cat.No. PHCC60050)</td></tr></tbody></table>

otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [11c] snap-7941

Technical Aspect of the Automated Synthesis and Real-Time Kinetic Evaluation of [11C]SNAP-7941

Pozitron emisyon tomografisi (PET), Ways ve In vivo araştırmaları için spesifik hedeflenen radioligands kullanarak yol anlayışları sağlayan temel bir moleküler görüntüleme tekniktir. Bu protokol içinde, [11C] SNAP-7941, melanin-konsantre hormon reseptörü 1 için bir antagonisti olan sağlam ve güvenilir bir uzaktan kumandalı radyosentezi açıklanmıştır. Radyosentez, [11 c] ch3OTF 'e bir gaz fazı geçişi yoluyla daha sonra tepki gösteren [11c]Co2 ' ye üretilen siklotron ile başlar. Daha sonra, bu reaktif ara öncü çözüme tanıtıldı ve ilgili radyotracer oluşturur. Kimyasal ve radyokimyasal saflık, RP-HPLC ile belirlenir, rutin olarak radyoopharmaceutical kalite kontrol sürecinde uygulanır. Ayrıca, molar etkinliği aşağıdaki gerçek zamanlı kinetik araştırmalar için bir zorunluluk olduğu gibi hesaplanır. Ayrıca, [11C] SNAP-7941, p-glycoprotein (p-GP) ifadesinin hücre birikiminde etkisini değerlendirmek için MDCKıı-WT ve Mdckıı-hMDR1 hücrelerine uygulanır. Bu nedenle, P-GP ifade hücre hattı (MDCKıı-hMDR1) ya olmadan ya da P-GP substrat (±)-verapamil yoluyla deneyler öncesinde engelleme ile kullanılır ve sonuçlar wildtype hücreler için gözlenen olanlar ile karşılaştırıldığında. Genel deneysel yaklaşım, karbon-11 (Half-Life: 20 dk) gibi kısa ömürlü çekirdeklerle radyülatif PET izleyiciler kullanarak her preklinik ve klinik çalışma için gerekli olan kesin bir zaman yönetimi önemini göstermektedir.

[11c] SNAP-7941 ' i n tam otomatik radyosentezi, formüle edilmiş ürünün 5,7 ± 2,5 GBQ (eob 'de 4,6 ±% 2,0, [11c] ch3OTF; n = 10) temelinde 14,9 ± 5,9% ' i sağladı. Genel sentezi yaklaşık sürdü 40 dk, burada 15 dk hazırlanması için gerekli olduğu [11C] ch3OTF gaz faz yöntemi ile , başka bir 5 dakika öncesinde radiolabelling için gerekli, sonra 10 dakika yarı hazırlık RP-HPLC arıtma, C18 kartuş katı faz ekstraksiyon ve formülasyonu için 10 dk. Daha sonra, kalite kontrol için sorumlu kişiye küçük bir kısım (yaklaşık 100-200 μL) teslim edildi, ancak kullanıma hazır izleyici içeren orijinal ürün şişesi gerçek zamanlı kinetik analizinin denenmeye geçti.
Sentezi bittikten sonra 10 dakika içinde kalite kontrolü tamamlanmıştır. Molar etkinliği 72 ± 41 GBq/μmol (n = 10) aralığında ve radyokimyasal saflık her zaman &gt;% 95 idi. Diğer tüm parametreler (pH, osmolalite, kalıntı çözücüler) serbest bırakma kriterlerini yerine getirmiştir. Gerçek zamanlı kinetik tahlil için üç farklı deneysel kurulumlar seçildi: (A) tedavi edilmemiş ve tedavi edilmemiş (araç) MDCKıı-WT hücreleri, (B) araç MDCKıı-hMDR1 hücreleri ile tedavi edilmemiş veya tedavi edilmemiş veya (C) önceki gerçek zamanlı engelleme ile ikinci hücre hattı Transporter (±)-verapamil kullanarak kinetik tahlil. [11C] SNAP-7941 joker karakter hücre satırına MDCKıı-WT (p-GP ifade) ve Mdckıı-HMDR1 (p-GP ifade) uygulaması, joker hücre çizgisine hızlı bir birikim olduğu için farklı bir kinetik davranışı gösterir, ancak hiçbir birikim görülmemiştir MDCKıı-hMDR1 hücreleri için. Ancak, P-GP "effluks" Transporter ınmdckıı-hMDR1 hücrelerini engelleme (±)-verapamil wildtype hücre hattı için zaten görülen karşılaştırılabilir bir gerçek zamanlı kinetik yol açtı (Şekil 5).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig1.jpg"> Şekil 1: iş akışına genel bakış. [11C] SNAP-7941 gerçek zamanlı kinetik ölçümünün radyosentezi, kalite kontrolü ve performansının çalışma akışı. Siyah oklar radyoaktivitenin taşıma yolunu gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig1large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig2.jpg"> Şekil 2: otomatik synthesizer Radyosentetik şeması. Otomatik synthesizer anahtarlama devresi, dolaşım ünitesi ile başlayan [11c] ch3ı/[11c] ch3OTF üretim, reaktör çözüm ve SPE arıtma içine etkinliğin tanıtımı için (SPE = katı faz ekstraksiyon; PCV = ürün toplama şişesi). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig2large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig3.jpg"> Şekil 3: [11C] Snap-7841 ' in tam otomatik Radyosentezi temsilcisi kromatogramları. Yarı Preparatif RP-HPLC kromatogram üst ve analitik bir alt üzerinde arıtma sonra gösterilmiştir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig3large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig4.jpg"> Şekil 4: gerçek zamanlı deneyler Için hücre kültürü çanak hazırlama. Adım 1, hücre tipine ve büyüme hızına bağlı olarak 2,5 x 105 ' e kadar 1 x 106 ' nın tohumlarını içerir. Daha sonra, kültür çanak bir eğik düzlemde yerleştirilir (yaklaşık 30-45 °). Bu nedenle, sağlanan metal aparat veya bir hücre kültürü çanak kapağı tabak eğimli konumunu stabilize etmek için kuluçlaklık kullanılabilir. Sonraki gün (24 saat) çanak yatay olarak ayarlanır ve hücre yüzeyini tamamen kapsayacak şekilde taze hücre kültürü ortamı eklenir. Deney gününde, hücre canlılığı ve konfluence incelenir. Deneysel protokole göre hücreler DPBS ile yıkanır, medyası serum içermeyen orta (2 mL) ile değiştirilir ve kültür yemeği deneylerin başlaması kadar eğik bir pozisyona yeniden yerleştirilir. Bundan sonra, hücreler inhibitör veya araç ile tedavi edilebilir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig4large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59557/59557fig5.jpg"> Şekil 5: [11C] SNAP-7941 gerçek zamanlı kinetik ölçümler. [11C] Snap-7941 temsilcisi gerçek zamanlı kinetiği üç farklı ayarda GÖSTERILIR: mdckıı-WT hücrelerini kullanarak; MDCKıı-hMDR1 hücreleri (±) ile ön bloke-P-GP inhibitörü ve MDCKıı-hMDR1 hücreleri tıkanmadan olarak verapamil. Y ekseni, sırasıyla tedavi edilmemiş veya araç tarafından işlenmiş MDCKıı-MDR1 hücrelerinin sonuçlarına göre önceden engellenen MDCKıı-hMDR1 ve WT hücrelerinin artış hızını gösterir (hiçbir alım, 0%). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59557/59557fig5large.jpg" target="_blank">Bu figürün daha büyük bir versiyonunu görmek Için lütfen tıklayınız.</a>

Burada, [11C] SNAP-7941 tam otomatik radiolabelling ve P-GP ifade ve non-ifade HÜCRELERI Bu Pet-Tracer gerçek zamanlı kinetiği analizi için bir protokol temsil eder.

Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [11C] SNAP-7941

Positron emission tomography (PET) is an essential molecular imaging technique providing insights into pathways and using specific targeted radioligands ...

Karbon-11 radyoetiketleme, molekülü değiştirmeden pozitron emisyon tomografisi veya PET için küçük bileşiklerin kullanılmasını sağlar. Bu reseptör ekspresyonu düzeylerini araştırmak için gereklidir. Karbon-11 radyolabeling avantajı doğrudan gerçek zamanlı olarak melanin konsantre hormon reseptörüne doğru SNAP'in bağlayıcılar kinetik değerlendirmek için PET kullanabilirsiniz.Bir melanin konsantre hormon reseptör antagonisti olarak SNAP bu reseptör ve obezite ve diyabet gibi metabolik koşullar ile ilişkisi daha iyi anlaşılmasına katkıda bulunacaktır. Efflux taşıyıcılar kan-beyin bariyerinde ifade önemli ölçüde merkezi reseptör ekspresyonu görüntüleme için radyofarmasötik kullanımını engelleyebilir. Bu nedenle in vitro izleri değerlendirmek önemlidir.SNAP'in otomatik radyosentezi, kolayca değerlendirilebilen bir metil grubu olan radyoetiketli düşük molekül ağırlıklı bileşikler için geniş ölçüde uygulanabilir. Bir kez bu prosedür diğer bileşikler için adapte edilebilir kuruldu. Gösteriye yardımcı olacak kıdemli doktora öğrencileri Sarah Pfaff ve Theresa Balber olacak.Karbon-11 SNAP sentezine başlamak için uygun reaktifler ve malzemelerle temiz bir karbon-11 otomatik sentez modülü ayarlayın. Sistem kontrolleri ve koşullandırma ile başlayacak modül bilgisayarda SNAP sentez işlemini başlatın. Modül C-11 teslimatı için hazır hale gelmeden yaklaşık 30 ila 40 dakika önce, siklotrondaki C-11 karbondioksit hedefini seçin ve ışını 65 mikroampere'den başlatın.Modül teslime hazır olduğunda iç pencereyi ve dış kapıyı kapatın. CO2 tuzağının en az 40 santigrat dereceye kadar soğudugunu ve metan kapanı soğumaya başladı. Cyclotron yaklaşık 120 gigabecquerel si c-11 CO2 ürettikten sonra, co2 tuzağı aracılığıyla hedeften yolu açmak için modül yazılımında Tamam'ı tıklatın.Siklotron bilgisayarında modüle C-11 CO2 ulaştırılmasına başlanması. Modül bilgisayarındaki etkinlik transferini izleyin ve üç dakika sonra CO2'nin metan gazına indirgenmesini sağlayın. Ortaya çıkan metan metan tuzağına atılır ve iyot fırın yoluyla sirkülasyon tarafından metil iyodür dönüştürülür gibi süreci izleyin.Dönüşüm sırasının sonunda yan ürünler metil iyodür tuzağından egzoza atılır ve reaktörün Tamam'a tıklayarak etkinlik almaya hazır olduğunu onaylayın. Metil iyodür, metil triflate fırın yoluyla kızarılmış ve reaktör içinde sıkışıp, tuzak serbest bırakılır gibi sistemi izleyin. Reaktör platolarında aktivite bindirmenin tamamladığını doğruladığında. Reaksiyon karışımı 75 derecede üç dakika boyunca tepki verirken bekleyin.Daha sonra reaksiyon karışımı 35 santigrat derecenin altına soğutulup 1,5 mililitre su ile söndürdün gibi sistemi izleyin. Reaksiyon karışımı HPLC enjeksiyon halkasına yüklenir ve yarı hazırlık HPLC sütununa enjekte edilir ken sistemi izleyin. Kromatografi ilerledikçe UV ve gama dedektörü izlerini izleyin.Ürün tepe işlemi manuel olarak görünmeye başladığında, modülün yuvarlak alt toplama şişesinde ürünü toplamaya başlayın. Gama sinyali saniyede yaklaşık 400 sayar altına düştüğünde toplamayı el ile sonla. Ürün helyum basıncı altında katı faz çıkarma kartuşuna yüklendiğinde yuvarlak alt şişedeki sıvı seviyesini izleyin.Şişe boşaldıktan ve sıvı SPE kartuşundan geçtikten sonra, kartuşa hapsolmuş ürünleri yıkamaya başlamak için Tamam'ı tıklatın. Daha sonra ürün önce kartuştan şişeye girerken ve daha sonra %0,9 tuzlu çözelti ile seyreltilirken, ürün toplama şişesindeki etkinliği izleyin. Hasat basıncı altında steril filtre ile ürün şişesine aktarılırken izleyin.Transfer tamamlandığında ürün çıkış valfi kapatın. Radyotracer ürün şişesi geldiğinde mutlak radyoaktif verimi ölçer. Daha sonra 100 mikrolitrelik izleyiciyi kalite kontrol için küçük bir şişeye aktarmak için kurşun korumalı şırınga kullanın.Kalite kontrol örneğini korumalı kalite kontrol çalışma alanına getirin. QC numunesinin 40 mikrolitresini gaz geçirmez bir şırıngaya yerleştirin, analitik bir kolonla donatılmış hazırlanmış bir HPLC aletine yükleyin ve ürünü enjekte edin. HPLC çalışması sırasında diğer kalite kontrol ölçümlerini gerçekleştirin.HPLC çalışması tamamlandıktan sonra, SNAP radyo kimyasal saflığında %95'ten fazla olup olmadığını belirlemek için radyoaktivite dedektöründen kromatogramdaki tüm zirveleri entegre edin ve ürünün kimyasal saflığını belirlemek için UV kromatografisindeki zirveleri birleştirin. Belirli bir etkinliği hesaplamak için UV ürün zirvesinin altındaki alanı kullanın. Ürün kullanım gereksinimlerini karşılamak için onaylandıktan sonra gerçek zamanlı kinetik deney laboratuarına radyo izleyicisi bırakın.Deneyden en az 30 dakika önce hazırlanan yabani tipi veya transfected hücreleri DPBS ile yıkayın ve iki mililitre serumsuz büyüme ortamı ekleyin. Transfektif hücreleri engellemek için dimetil sülfoksit racemic verapamil hidroklorür 20.4 milimolar çözelti0.98 mikrolitre ekleyin. Hücreleri eğik bir düzlemde 30 dakika kuluçkaya yatırın.Ardından gerçek zamanlı test cihazını ve ilgili bilgisayarı açın. Kontrol yazılımını açın ve bir hedef seçin. Konum sayısını ikiye, algılama süresini üç saniyeye, algılama gecikme süresini iki saniyeye ve ilk aşamanın adını taban çizgisine ayarlayın.Alt taraftaki hücre direği ile hücre kültürü çanasını cihazın eğimli desteğine takın. Hücre kutbu hücre kültürü orta kaplı olduğundan emin olun. 10 dakikalık bir arka plan ölçümü başlatın ve dosya adını ve yolu ayarlayın.Zaman ölçeğini dakikaya, nüklid koleksiyonunu karbon-11'e ayarlayın. Grafiği arka plan, hedef ve arka plan çıkarılan hedef verileri gösterecek şekilde yapılandırın. Radyo izleyicisi teslim edildikten ve kullanım için onaylandıktan sonra, test için küçük bir örnek alın.Radyo izleyici çözeltisinin gerekli hacmini hesaplayın ve bir pipet hazırlayın. Alet yazılımında çalıştırmayı duraklatın ve çanak döndürmenin durmasını bekleyin. Cihazın kapağını açın, desteği 90 derece sola çevirin, hazırlanan pipetle radyo izleyicisini ekleyin ve cihazı ilk konumuna getirin.Aygıtın kapağını kapatın ve denemeye hemen devam edin. Denemeyi bitirmeden önce 20 dakika boyunca çalıştırın. Hücrelerdeki SNAP alımını değerlendirmek için verileri işleyip analiz edin.Şimdi prosedür DMSO tedavi kontrol hücre kültürü çanak ve yabani tip hücre hattı için tekrarlanabilir. Gerçek zamanlı kinetik tahliller olmayan PGP yabani tip hücreleri ifade ile yapıldı, PGP ifade hücreleri pgp inhibitörü olarak verapamil ile önceden bloke, ve engellenmemiş PGP hücreleri. Tedavi edilmeyen hücreler ile araç la tedavi edilen hücreler arasında anlamlı bir fark gözlenmedi.Karbon-11 SNAP, PGP ifade eden hücrelerde birikme gözlenmezken yabani tip hücrelerde hızla birikti. PGP efflux taşıyıcının verapamil ile önceden engellenmesi, PGP hücrelerinde yabani tip hücrelerle karşılaştırılabilir SNAP birikimine neden oldu. Gerçek zamanlı kinetik ölçümlerile birlikte bu kurulum düşük molekül ağırlıklı bileşiklerin farmakokinetiğinin geniş bir şekilde anlaşılmasını sağlar ve bu nedenle radyofarmasötiklerin klinik öncesi gelişimi için son derece önemlidir.Zamanlama ve organizasyon karbon-11 yarı ömrü sadece 20 dakika olduğu gibi sonraki gerçek zamanlı kinetik deneyler ile başarılı bir karbon-11 radyosentez için ana maddelerdir. Karbon-11'in kısa yarı ömrü nedeniyle bu işlemin birçok bölümü aynı anda gerçekleştirilir. İlgili herkesin rolünün kapsamını ve zamanlamasını anlaması önemlidir.Hem ürün güvenliği hem de radyasyondan korunma radyofarmasötiklerin hazırlanmasında anahtardır. Tüm deneyler, operatörün radyasyona maruz kalmasını sınırlamak için makul olarak ulaşılabilir olan en düşük veya ALARA Prensibi'ni izlemelidir.

technical-aspect-automated-synthesis-real-time-kinetic-evaluation

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Ugi reaksiyon hızlı bileşiklerin çeşitli kütüphane oluşturmak için uygun bir yol olduğu kanıtlanmıştır. Bir amin reaksiyon, bir aldehit, bir karboksilik asit ve oda sıcaklığında genellikle bir isonitrile metanol içerir. Bu video, filtrasyon tüpleri ve bir Mettler-Toledo MiniMapper otomatik sıvı işleyici reaktifler ve solvent teslim etmek için kullanılan ile donatılmış bir 48-yuvası Mettler-Toledo MiniBlock kullanmaktadır. Konsantrasyonu, çözücü bileşimi ve bazı reaktifler fazla ilgi...

Paralel Sentezi ve Otomatik Liquid Handling kullanma Ugi Reaksiyon optimizasyonu

Fotostabil siyanin boyaları, enerji transferi ile hibridizasyonun izlenmesi için oligonükleotidlere bağlanır.

Işığa siyanin boyası kullanarak Dalgaboyu değiştiren DNA Hibridizasyon Sondalar Sentezi

[18F] 3F4AP'in yarı otomatikleştirilmiş radyokimyasal sentezini ve kalite kontrol prosedürlerini gösteririz.

Otomatik Radyokimyasal Sentez [<sup&gt; 18</sup&gt; F] 3F4AP: Demyelinizan Hastalıkların Görüntülenmesine Yönelik Yeni Bir PET İzleyici

1,2-dithiolane sentezi için bir protokol peptid ve peptid kendinden montajlı kaynaklanan supramolecular yapıları karakterizasyonu değiştiren.

1,2-Dithiolane malzemelerin ve kendi kendine montaj peptidler değiştirilme tarihi

Pozitron emisyon tomografi (PET) görüntüleme siteleri birden çok erken araştırma klinik deneylere katılan sağlam ve çok yönlü radiotracer üretim yeteneklerini gerekir. Radiotracer [18F] kullanarak Clofarabine örnek olarak, esnek, kaset tabanlı radiosynthesizer kullanarak bir radiotracer sentezi otomatikleştirmek ve klinik kullanım için sentez doğrulamak nasıl göstermek.

Klinik üretim için bir pozitron emisyon tomografi (PET) Radiotracer sentez protokolü'nün Otomasyon

Pozitron Emisyon Tomografisi (PET) için katı faz ekstraksiyon kartuşları kullanarak klinik olarak alakalı izleyiciler üretmek için etkili bir karbon-11 radyoetiketleme tekniği rapor ediyoruz. 11.11.20 C-metilasyon maddesi, yüksek radyokimyasal verimlerde kimyasal ve radyokimyasal olarak saf PET izleyicileri sağlar, öncül ve art arda elüsyon ile önceden yüklenmiş bir kartuştan geçirilir.

Pet İzleyicilerin Üretimi için Katı Faz 11C-Metilasyon, Arıtma ve Formülasyon

Burada, daha önce sentezlenmiş spirosiklik oksimleri test etmek için 3-(4′,5′-dimetiltiazol-2′-il)-2,5- difeniltetrazolyum bromür (MTT) kullanan bir biyotahlil tarif ediyoruz.

İşlevselleştirilmiş spirrosiklik heterosiklus sentezi ve sitotoksisite testi

Bu yöntem, nanomole miktarlarda reaktif kullanarak radyofarmasötiklerin hızlı ve ekonomik optimizasyonu için damlacık kimyasal reaksiyonlarına dayanan yeni bir yüksek verimli metodolojinin kullanımını açıklar.

Damlacık Dizileri Kullanılarak Radyokimyasal Reaksiyonların Optimizasyonu

Burada, protein sistemlerine uyarlanabilen reaktif karbonil türleri ile modifiye edilmiş amino asit kalıntılarının optimizasyonu ve parametrelendirilmesi için bir protokol açıklıyoruz. Protokol adımları, yapı tasarımı ve optimizasyonu, yük atamaları, parametre yapımı ve protein sistemlerinin hazırlanmasını içerir.

Moleküler Dinamik Simülasyonları Kullanılarak Yapısal Etkilerin Değerlendirilmesi için Reaktif Karbonillerle Modifiye Edilmiş Amino Asitlerin İnsiliko Sentezlenmesi 

Bu protokol, "döngü yöntemi" [11 C] metilasyonu yoluyla dört karbon-11radyoizleyici hazırlamak için ayrıntılı bir prosedür sunar. [11C]ER-176'yı sentezleme prosedürünü, üç ek radyoizleyici için verilerle açıklıyoruz: [11C]MRB, [11C]mHED ve [11C]PiB. Döngü yöntemi, geleneksel reaksiyon kabı [11C] metilasyonuna karşı artan radyokimyasal verimlerle verimli bir sentez sağlar.

Döngü Yöntemini Kullanarak Klinik Araştırmalar için Karbon-11 Radyoligandlarının Verimliliğini ve Radyoetiketleme Verimlerini Artırma

Bu araştırma, fibroblast aktivasyon proteininin PET görüntülemesi için GAIA V2 sentezleyici ile [68Ga] Ga-3BP-3940 üretimi için otomatik süreci açıklamaktadır. Üç test partisi üzerinde gerçekleştirilen kalite kontrol testlerinin sonuçları da sunulmaktadır.

Tümör Mikroçevresinin PET Görüntülemesi için Bir Sentez Modülünde [68Ga] Ga-3BP-3940'ın Otomatik Hazırlanması

Öğrenin [11C]SNAP-7941'in otomatik sentezi ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesi yöntemini. Bu teknik, PET görüntüleme ile reseptör ekspresyon seviyelerini incelemek için kullanılır ve metabolik hastalıklar araştırmalarına katkı sağlar.

Otomatik sentez ve gerçek zamanlı kinetik değerlendirmesinin teknik yönü [¹¹C] SNAP-7941

Daha fazla video keşfet