Topikal Elastaz Indüklenen İndüklenen Torasik Aort Anevrizması Murine Cerrahi Modeli

Bu protokol farelerde tutarlı boyut ve yer sağlam torasik aort anevrizmaları üretme yeteneğine sahiptir ve murin göğsüne güvenli erişim için bir rehber olarak hizmet vermektedir. Bu protokol, diğer modellere göre makul bir süre içinde farelerde torasik aort anevrizmaları üretmek için basit ve tutarlı bir yöntemdir. Sekiz ila 10 haftalık erkek c57 siyah altı farede uygun bir sedasyon seviyesini doğruladıktan sonra, fareyi sağ lateral dekübitus pozisyonuna yerleştirin ve ön patinin burunla aynı hizada olması için sağ kol rostrally'yi bantlayın.

Sağ kol ve kuyruk arasında gerginlik bir çizgi oluşturmak için kuyruk caudally çekin, omurgauzantısı üreten, ve doğal pozisyonda sol bacak bant. Sonra, sol kol ventrally haddelenmiş gazlı bez üzerinde bant. İşleme başlamadan önce sol omzundan sol sol adadan sol kanadı tıraş etmek için makas kullanın.

İlk betadyne çözeltisini fırçalamak için pamuk uçlu aplikatör kullanın, sonra cerrahi alan üzerinde %70 etanol. Cilt kuruduğunda, hayvanın üzerine steril bir örtü yerleştirin. Hemothoraks orta noktasında iki santimetre lateral kesi yapmak ve kaburga görünür olana kadar kas tabakalarını bölmek için el elektrokoter kullanın.

10 ila 15x büyütme altında, doğrudan kaburga arasında iki milimetrelik bir kısmını katuterize ve koterize kısmı ile plevral alana incelemek için kaburga alanında tuzlu ıslak, ince pamuk uçlu aplikatör kullanın. Akciğeri çökertmek için toraksa tuzlu, üçer iki milimetrelik bir sünger yerleştirin. Daha sonra, diyafram görünür ventrally ve kesi paraspinus kasları dorsally birkaç milimetre uzakta olana kadar torakotomi genişletmek için makas kullanın.

Aortu ortaya çıkarmak için, torakotomi kesi içine kaburga retractors yerleştirin ve dikkatle akciğer yüzeyinden sünger çıkarın. Bir tuzlu ıslak, uçları rostrally ve caudally işaret ile altı dört milimetrelik sünger ile akciğer kapak ve sünger üzerinde geniş, düz akciğer retractor yerleştirin. Daha sonra, azalan torasik aort maruz kalana kadar retraktör ventrally doğru kaydırın ve aort bağ dokusu ve yağ yaklaşık beş milimetrelik bir bölümünü incelemek için yedi numaralı forceps kullanın.

Elastaz uygulamak için, ilk olarak, domuz pankreas elastaz 12 mikrolitre ile bir milimetre sünger 0,5 doymuş ve aort maruz yüzeye sünger yerleştirmek için bir mikropipet kullanın. Üç ila beş dakika sonra, elastaz süngeri çıkarmak ve akciğer retraktörünü çıkarmak için yedi numaralı forceps kullanın. Steril salin mililitre yaklaşık yarım ile göğüs boşluğu sulamak.

Akciğer süngeri çıkarın ve kalan tuzlu sulama emmek için gazlı bez bir haddelenmiş iki inç parça kullanın. Kaburga retractors çıkarın ve üç kesilen altı-oh olmayan emültürler ile kaburga degifi, dikişleri aşağı bağlamadan her dikiş gevşek bir düğüm bağlama. Akciğer ilerlettikten sonra, dikişleri bağlayın ve çalışan beş-oh emilebilir örgülü dikiş ile kas tabakalarını yeniden approximate.

7-10 kesilen beş-oh olmayan emdirilebilir dikişler ile cildi kapatın. Sonra, tam recumbency kadar hayvan izlemek. Uygun deneysel bitiş noktasında, periton girmemeye dikkat ederek, sol kanattan merkezi karın için orta derecede deri eğim makas kullanın.

Dorsal sol kanadından sol omzuna doğru deri eğim ve sternum axilla ile 90 derecelik bir açıyla bir kesi yapmak. Kateter kullanarak, sol hemothoraks ortaya çıkarmak için farenin ventral yönü doğru deri flep incelemek ve sol diyafram alt ortaya çıkarmak için dorsal yönden ventral sol costal marjı boyunca karın girmek için makas kullanın. Diyaframın lateral-en kenarı açılmıyorsa, diyaframı en lateral kenarına doğru eğin.

Bu deliğe kateterucuucu ucu yerleştirerek, ksifoid sürecine costal marjı diyafram cauterize ve hafifçe göğüs duvarına herhangi bir yapışma akciğer serbest etmek için nemli, ince uçlu pamuk uçlu aplikatör kullanın. Akciğer in yolunun dışında olduğundan emin olurken, ilk kaburga maliyet marjı kaburga ve göğüs duvarı ile kesmek için elektrokoter kullanın, orta aksiller çizgi ye dorsal, ama aort en az iki milimetre. İlk kaburga nın üstün kenarı boyunca kesin ve hemothoraks ortaya çıkarmak için göğüs kafesi ventrally yansıtır.

Akciğer üzerine retractors yerleştirin ve medially çekin. Diyafram üzerine bir retraktör veya tuzlu ıslak gazlı bez yerleştirin ve mümkün olduğunca aort kadar ortaya çıkarmak için caudally çizin. Aort anevrizması ve etkilenmemiş distal segmentteki yapışıklıkları gidermek için kuru, pamuk uçlu aplikatör kullanın ve etkilenmemiş kontrol segmentinin çapını ve elastaz ile tedavi edilen anevrizmanın en geniş kısmını ölçmek için video mikrometrisini kullanın.

Aort hasat için, tedavi segmentine sadece distal sadece distal ve forceps distal kesmek için makas kullanın zararları ile damar kavramak. Omurilik kapalı aort diseksiyon ve anevrizmal doku kaldırmak için tedavi segmentine damar proksimal kesti. Daha sonra, bir tüberkülin şırınga ve iğne kullanarak, aort lülesini tuzlu su yla yıkayın ve numuneyi planlanan aşağı deneysel analize göre işlayın.

Formda fusiform olarak geliştirilen torasik anevrizmalar ve sadece aort üzerinde tedavi kısmında meydana gelir. Bu temsili video mikrometri ölçümünde doku hasatında aort genişlemesi %130 olarak saptandı. Nitekim, tip elastaz tedavi fareler gün üç, yedi, 14 ve 21 post-tedavi de aort genişlemesi önemli bir artış sergilerken maksimal dilatasyon gün 14 kontrol vahşi tip fareler ile karşılaştırıldığında gözlenen.

Histolojik analizler yabani tip anevrizmaların ince ve parçalanmış elastin liflerine sahip olduğunu ortaya koymaktadır. Makrofaj ve interlukin tek beta ekspresyonunda artış ile daha az düz kas hücresi boyama da vardır. Minten akciğeri son derece hassastır ve yaralanma genellikle ölümcüldür.

Göğüs içine ilk giriş ile son derece dikkatli alın ve sadece tuzlu ıslak sünger ile akciğer işlemek. Bu model, inen torasik aort anevrizmalarının patogenezinde interlukin bir-beta ve interlukin altının rolünün ve ablukalarının bu anevrizmaların cerrahi olmayan yönetimini nasıl kolaylaştırabileceğini niçin açıklığa kavuşturmaya yardımcı olmuştur.