Küçük Kemirgenlerde Sosyal Tercih Davranışının Dinamiklerini İzleme Sistemi

Sosyal davranışın nörobiyolojik mekanizmalarının araştırılması, hayvan modellerine tarafsız ve gözlemci bağımsız bir şekilde uygulanabilecek davranışsal testler gerektirir. Sistemimiz küçük kemirgen modellerinde sosyal davranışların ve dinamiklerinin ayrıntılı bir şekilde araştırılmasını sağlar ve suşlar, koşullar ve tedaviler arasındaki doğru karşılaştırmaları destekler. Bu sistem, erkekler ve kadınlar arasında ayrımcılık gibi her türlü sosyal ayrımcılık testi için kullanılabilir.

Ayrıca, deneklerin boyutları için bir sınır yoktur. Analiz, izleme için en uygun parametreleri seçmek için biraz deneyim gerektirir. Yeni kullanıcılar için ilk değerlendirme için bilgisayar ekranında izleme öneririz.

Analizden en az bir saat önce tüm farelerin ev kafeslerini alışma için deneysel odaya yerleştirin. Alışma süresinin sonunda arenanın iki zıt köşesinden arenaya iki boş oda yerleştirin. Daha sonra, akustik oda içinde arena bulmak ve alışkanlık 15 dakika boyunca arenanın ortasında konu fareler yerleştirin.

Bu dönemde, iki sosyal uyarıcı fareyi alışma için arenanın dışında bulunan farklı odalara yerleştirin. Ve başka bir odada farklı bir şekil ve renk ile 5x5x5 santimetre plastik oyuncak. SP testini gerçekleştirmek için bir video kamerayla kayıt yapmaya başlayın.

Hemen iki boş odaları kaldırın ve yerleşim sırasında boş olmuştu arenanın köşelerinde sosyal ve nesne uyaran odaları yerleştirin. Deneklerin kaydı durdurmadan ve odacıkları içeren uyaranları arenadan çıkarmadan önce beş dakika boyunca uyaranlarla etkileşime girmelerine izin verin. Sonra, 15 dakika boyunca boş arenada konu bırakın.

Sosyal yenilik tercihi testi yapmak için video kaydına başlayın ve SP testinde kullanılan aynı sosyal uyarıcı hayvanları içeren odayı ve sp testi için kullanılmayan arenanın iki köşesine yeni sosyal uyarıcı fareyi içeren odayı yerleştirin. Deneklerin kaydı durdurmadan ve konuları ve odaları arenadan çıkarmadan önce beş dakika boyunca uyaranlarla etkileşime girmelerine izin verin. Daha sonra, akan su ve% 10 etanol ile arena ve odaları temizleyin.

Fare davranışını çözümlemek için parça kemirgen grafik kullanıcı arabirimini kullanmak için MATLAB'ı açın ve İzole Dizini'ni seçin, Yol'a Ekle'yi seçmek için sağ tıklatın, Seçili Klasörler ve Alt Klasörler tüm alt klasörleri çalışma yoluna eklemek için. Komut penceresine TrackRodent girin ve Enter tuşuna basın. Tek veya birden çok video dosyası yüklemek için Yükle Oturum Dosyasını seçin.

Video klibin kare incelemesi ile bir çerçeve sağlayan bir film denetçisi hemen listedeki ilk dosya için açılacaktır. Ek video dosyalarını incelemek için video denetçisini açmak ve istediğiniz zaman belirli bir video dosyası seçmek için Filmi İncele'yi tıklatın. Gerekirse test edilen türleri seçin ve konu ve arenanın renklerine uygun olarak izlemeyi kesintiye uğratan tüm alanları hariç tutmak için Alanı Hariç Tut'a tıklayın.

Her odayı konu tarafından incelenmesi için bir uyarıcı alanı olarak tanımlamak için, çokgen veya eliptik kutuyu işaretleyin ve uyarıcı alanların işaretlebilmesi için Stimulus X'e tıklayın. Ardından, listeden istenen algoritmayı seçin ve ilgili düzen kutularındaki çözümleme için başlangıç ve bitiş karesi numaralarını girin. Belirli bir eşik için konu kenarlıklarının otomatik olarak algılanmasını değerlendirmek için ilgili eşik alanına bir değer girin ve Enter tuşuna basın.

Seçili dosyaların tümünün davranış analizini başlatmak için ilk dosyaya geçin ve Başlat'ı tıklatın. Doğru eşiği bulmak çok önemlidir ve deneyim gerektirir. Yeni kullanıcıların hızlı olmayan algoritmaları kullanmaları ve düzgün çalıştıklarından emin olmak için çözümlemeyi çevrimiçi olarak izlemeleri önerilir.

Çözümlemenin sonunda, film dosyalarının aynı dizininde her film için bir sonuç dosyası kaydedilir. Her film dosyasının sonuçlarını incelemek için Yükle Sonuçları Dosyası'nı tıklatın ve davranış analizi tarafından oluşturulan MAT dosyalarını seçin. Fare nin konum izini, oturum boyunca uyaran ların keşfini ve toplam uyarankeşif süresini incelemek için geçiş düğmeleri arasında hareket ettirin.

MATLAB'daki TrackRodent klasöründe nüfus analizi için komut penceresinde tek bir sözcük olarak TrackRodentPopulationSummary girin. Birden çok TrackRodent sonuç dosyasını yüklemek için Sonuç Dosyalarını Girin'i tıklatın ve sonuç dosyalarını seçin. Analiz, test adı, uyarıcı bir ad ve uyarıcı iki ad için son çerçevenin numaralarını doldurun ve isteğe bağlı listeden istenilen analizler için uygun kutuların tümünü seçin.

Sonuçları tek bir dosyadaki elektronik tabloya ayıklamak için Dışa Aktarma kutusunu işaretleyin. Ardından Başlat'ı tıklatın ve program durum satırında çözümleme parametrelerini ve verileri kaydedilene kadar bekleyin. Bu deneyde, deneklerin popülasyonunun iki uyarandan her birine yönelik ortalama toplam araştırma süresi, deneklerin toplumsal uyarıcıya karşı açık bir tercihini ortaya konur.

Sosyal tercih, oturum boyunca konu tarafından sürdürüldü, ancak tercih oturumun başlarında biraz daha güçlü görünüyordu. Her uyarıcıiçin araştırma süresi, toplam araştırma süresine ek olarak kısa, orta ve uzun nöbetlere göre sınıflandırılabilir. Görüldüğü gibi, orta ve uzun müsabakalar net sosyal tercihler gösterirken, kısa nöbetlerde uyaranlar arasında hiçbir fark yoktu, bu da C57 Black 6J farelerinin kısa nöbetlerinin merakı yansıttığını, uzun nöbetlerin ise konu ile uyarıcı arasındaki etkileşimi yansıttığını düşündürmektedir.

Buna ek olarak, test süresince sosyal uyarıcı ve nesneye yönelik araştırmanın ısı haritaları, müsabaka süresini kodlayan renklere sahip tüm denekler için oluşturulabilir. Daha da önemlisi, deneklerin bir uyarıcıdan diğerine geçiş oranı, yavaş yavaş azalan dan önce testin ilk iki dakikasında en yüksek ti. Aynı eğilim, ortalama geçiş oranının zaman içinde dağılımında da belirgindi.

Bu yöntem elektrofizyolojik kayıt veya optogenetik uyarıcı sistemlere bağlı herhangi bir fare ile bir tel ile kullanılabilir. Bunun için özel bir algoritma kullanıyoruz. Sistemimiz şu anda küçük kemirgen izleme gerektiren çeşitli paradigmalar için dünya çapında çeşitli laboratuvarlar tarafından kullanılmaktadır.

Herhangi bir ayrımcılık testinde davranış dinamiklerini değerlendirmek için kullanılabilir.