Name: Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-20T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 9 s
Description: Keşfedin sıçanlarda mono-iyodoasetat ile intra-artiküler enjeksiyon yöntemini. Bu prosedür osteoartrit ağrı modeli oluşturur ve davranışsal değişiklikleri değerlendirir. Araştırmacılar için tekrarlanabilir bir yöntem sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma, Çin Zhejiang İl Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe No: LY17H270016), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe No: 81774331, 81873049 ve 81673997) ve Çin Geleneksel Çin Tıbbı Zhejiang İl Bilim ve Teknoloji Projesi (Hibe No: 2013ZQ007 ve 2016ZZ011) tarafından finanse edilmiştir.

Hayvan denekleri içeren prosedürler, Zhejiang Çin Tıp Üniversitesi Tıbbi Normlar ve Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır ve laboratuvar hayvanlarının kullanımı ve bakımı ile ilgili Çin mevzuatına uygundur.
1. Dizde mono-iyodoasetatın eklem içi enjeksiyonu
<ol><li>Bir haftalık alışmadan sonra, rastgele ve eşit olarak 180-200 g (4-5 haftalık) ağırlığındaki 40 erkek Sprague-Dawley sıçanını dört gruba ayırın (n = 10 sıçan / grup). NOT: Kontrol grubundaki sıçanlara eklem içi olarak 50 μL salin enjekte edilirken, deney gruplarındaki sıçanlar sırasıyla 50 μL salin içinde çözünmüş 0.5, 1.5 veya 3 mg MIA ile muamele edilecektir.</li>
	<li>Enjeksiyon gününde, MIA çözeltisini 15, 30 ve 60 mg / mL konsantrasyonunda steril salin (% 0.9 NaCl) ve% 10 pentobarbital çözelti içinde steril salin (% 0.9 NaCl) içinde taze olarak hazırlayın. DİKKAT: MIA, mukoza zarı, üst solunum yolu, göz, cilt ve diğer dokular üzerinde son derece yıkıcı bir etkiye sahiptir. Bu nedenle, bir çözelti hazırlarken maske ve eldivenler önerilir.</li>
	<li>60 mg / kg'da intraperitoneal ketamin ve 5 mg / kg'da ksilazin enjeksiyonu ile sıçanları anestezik hale getirin (her ikisi de salin içinde hazırlanır). Anesteziyi doğrulamak için sıçanın ayak parmaklarını bir cımbızla hafifçe sıkıştırın.</li>
	<li>Sıçanı sırtı aşağı bakacak şekilde yerleştirin. Dizleri tıraş edin ve diz eklemini çevreleyen alanı alkolle silin.</li>
	<li>Diz 90 ° açıyla tutun ve patellanın altındaki beyaz patellar tendonu ortaya çıkarın. Patellanın altındaki boşluğu bulmak için patellar tendonu parmak ucuyla bastırın.</li>
	<li>Enjeksiyon bölgesi olarak boşluğun ve lateral patellar tendonun birleşme yerini seçin. Ardından, 26 G iğneyi yaklaşık 5 mm sahaya dikey olarak yerleştirin. İğne eklem boşluğundayken direnç hissedilmemelidir. NOT: İğneyi enjeksiyon bölgesine dik tutmak önemlidir.</li>
	<li>Eklem boşluğuna 50 μL salin veya MIA çözeltisi enjekte edin. İğneyi yavaşça dışarı çekin ve reflü ve sızıntıyı en aza indirmek için enjeksiyon bölgesinin etrafına bir parça gazlı bez sarın. Anestezi iyileşmesinden sonra, gazlı bezi çıkarın.</li>
	<li>Ağrıyla ilgili davranışı, bölüm 2'de açıklandığı gibi enjeksiyonlardan 1, 7, 14, 21, 28 ve 35 gün sonra test edin.</li>
</ol>2. Davranışsal değerlendirmeler
<ol><li>Mekanik geri çekilme eşiği (MWT) NOT: MWT, von Frey testi13 ile ölçüldü ve gözlemci, hayvanların aldığı enjeksiyonlara kör edildi.<ol><li>Bir sıçanı, bir masanın 50 cm yukarısına asılı bir tel örgü tabana sahip yükseltilmiş bir plastik kafese (17 cm x 11 cm x 13 cm) yerleştirin. Test ortamının sessiz olduğundan emin olun ve sıçana çevreye uyum sağlaması için 30 dakika verin.</li>
		<li>Von Frey iğnesini her sıçanın arka pençesinin plantar yüzeyine dik olarak bastırın. Basıncı kademeli olarak (yaklaşık 20 g / s) ve pençe kaldırma veya pençe yalama gerçekleşene kadar doğrusal olarak artırın.</li>
		<li>Eşiğin minimum geri çekilme kuvveti olduğundan emin olmak için önceki eşikten daha düşük bir kuvvet kullanın. Her sıçanı en az 3-5 dakika arayla üç kereden fazla test edin.</li>
		<li>Pençe çekme refleksini ortaya çıkaran minimum kuvveti kaydedin. Verilerin ortalamasını sıçanların MWT'si olarak alın.</li>
	</ol></li>
	<li>Termal geri çekilme gecikmesi (TWL) NOT: TWL, plantar test cihazı (Malzeme Tablosu) kullanılarak ölçüldü ve gözlemci, hayvanların aldığı enjeksiyonlara kör edildi.<ol><li>3 mm kalınlığında bir cam plaka üzerine bir pleksiglas kutu (60 cm x 20 cm x 14 cm, 6 bölmeye bölünmüş) yerleştirin ve sıçanları kutuya koyun (her bölmede bir tane). Ortamın sessiz olduğundan ve oda sıcaklığının sabit olduğundan emin olun.</li>
		<li>Sıçanlara test ortamına uyum sağlamaları için 30 dakika verin.</li>
		<li>Kızılötesi radyometre aracılığıyla termal uyaranı kalibre edin. İstenilen kızılötesi yoğunluğu 70 üniteye ayarlayın.</li>
		<li>Kızılötesi yayıcıyı/dedektörü, test edilen pençenin tam merkezinin altındaki kabın üzerine yerleştirin.</li>
		<li>BAŞLAT düğmesine basmak. Zamanlayıcı otomatik olarak başlayacaktır. Kontrolör kızılötesi ışığı otomatik olarak kapatacak ve pençenin hareketi gerçekleşir gerçekleşmez zamanlayıcıyı tamamen durduracaktır.</li>
		<li>Pençe çekilmesi ve pençe yalama görünümü olduğunda reaksiyon süresini kaydedin. NOT: Test için olumlu bir cevap, pençe çekilmesi ve pençe yalama olarak kabul edilir. Sadece pençe çekilmesi meydana gelirse, olumlu bir cevaptan ziyade sıçanın gönüllü bir hareketi olarak kabul edilmelidir.</li>
		<li>Testi üç defadan fazla tekrarlayın. Verileri sıçanların TWL'si olarak ortalama. NOT: Radyant ısının her maruziyeti 20 sn'yi geçmemelidir. Aynı arka pençedeki kızılötesi stimülasyonlar en az 3-5 dakika aralıklarla olmalıdır.</li>
	</ol></li>
	<li>Yürüme paterni analizleri NOT: Yürüme paterni analizleri bir görüntüleme sistemi (Malzeme Tablosu) kullanılarak ölçüldü ve gözlemci, hayvanların aldığı enjeksiyonlara kör edildi.<ol><li>Yürüme bölmesinin her iki ucundaki düğmeleri sıçanlar için uygun uzunluğa (örneğin, 61 cm) kullanarak yürüme bölmesinin uzunluğunu ayarlayın.</li>
		<li>Yürüme bölmesine bir sıçan yerleştirin ve resmi deneyden önce 18 cm / s hızında en az 5 adım döngüsü boyunca kesintisiz koşular yapmak için fareleri eğitin. NOT: Bir sıçan ilk kez yürüme bölmesine yerleştirildiğinde, hız yaklaşık 20 cm / s'ye ayarlanabilir ve 2 s civarında koşarken kapatılabilir. Ardından hızı 18 cm / s olarak ayarlayın. Sıçan yürüme sırasında duraklarsa veya geri çekilirse, sıçanın arkasına bölme ile hafifçe dokunun. Hızı kademeli olarak 18 cm / s'den 10 cm / s'ye düşürmeye çalışın. Sıçan sonunda testi gerçekleştiremezse, test için başka bir sıçan seçmek kabul edilebilir.</li>
		<li>Hedef hıza (18 cm / s) ulaşana kadar koşu bandının hızını yavaşça artırın. Şeffaf koşu bandı kemerinin altına monte edilmiş yüksek hızlı dijital video kamera ile sıçanın sürekli hareketinin en az 5 s videosunu çekin.</li>
		<li>En az üç kesintisiz çalışma elde etmek için her sıçanı en az 5 dakika arayla test edin.</li>
		<li>Görüntüleme yazılımında hayvan yürüyüşü görüntüsünün sınırını tanımlamak için bir "sınırlayıcı kutu" çizin ve her video için çalışma hızını girin. Videoları grup olarak seçin ve videoları yazılım tarafından otomatik olarak işleyin. Videoları işledikten sonra, yazılım duruş, salıncak, frenleme, tahrik, kadans, adım sırası vb. dahil olmak üzere yürüme endekslerini raporlamak için çeşitli elektronik tablolar çıkaracaktır.</li>
		<li>Toplam pençe alanını (cm2), ortalama adım uzunluğunu (cm) hesaplayın ve adım uzunluğunu birleştirin. NOT: Toplam pençe alanı, her sıçan grubunun dört pençesinin toplam alanının ortalamasıdır ve pençe alanı, adım döngüsünün duruş aşamasında koşu bandı ile temas halinde olan maksimum pençe alanı olarak tanımlanır. Adım uzunluğu, aynı pençenin ilk temasları arasındaki mesafedir. Birim adım uzunluğu = ortalama adım uzunluğu (cm)/vücut uzunluğu (cm).</li>
	</ol></li>
</ol>3. Histopatolojik ve immünohistokimyasal analizler
<ol><li>150 mg / kg'da intraperitoneal pentobarbital sodyum enjeksiyonu ile sıçanları ötenazi hale getirin (salin içinde hazırlanır). Histolojik analizler için diz eklemlerini hemen rezeke edin.</li>
	<li>Eklemleri 24 saat boyunca% 10 formalin içinde sabitleyin, 8 hafta boyunca fosfat tamponlu salin (PBS) içinde% 10 EDTA ile kireçlenin ve ardından eklemleri parafin içine gömün. DİKKAT: Formalin göz, cilt ve solunum yolu tahrişine neden olabilir. Bir davlumbazda ele alınmalıdır.</li>
	<li>Parafin gömülü derzleri 3 mm kalınlığında bir mikrotom ile kesitleyin ve damıtılmış su içeren 40 °C'lik bir su banyosunda yüzer.</li>
	<li>Bölümleri cam slaytlara aktarın. Slaytları gece boyunca kurutun ve aşağıdaki boyamaya devam etmek için slaytları oda sıcaklığında (RT) saklayın.</li>
	<li>Slaytları 60 °C'lik bir fırına 4 saat boyunca deparafinize yerleştirin.</li>
	<li>RT'de slaytları sırasıyla 5 dakika boyunca sırasıyla ksilen, ksilen,% 100 etanol,% 100 etanol,% 95 etanol,% 80 etanol ve% 75 etanol içine daldırın.</li>
	<li>Adım 3.8-3.12'de açıklandığı gibi, hematoksilin ve eozin (H & E), safranin-O (SO) ve Alcian mavi hematoksilin (ABH) ile birlikte sıçan tip II kollajen (Col2), tip X kollajen (Col10) ve matriks metalloproteinaz 13'e (MMP13) karşı antikorlar içeren leke kesitleri.</li>
	<li>H&E boyama<ol><li>Deiyonize H2O ile kızakları 3 dakika durulayın. Leke 3-5 dakika boyunca hematoksilin ile kayar.</li>
		<li>Deiyonize H2O 3x ile slaytları, yüzeyde hematoksilin kalmayana kadar her biri 1 dakika durulayın.</li>
		<li>Leke 30 s için eozin ile kaydırır. Daha sonra, deiyonize H2O 3x ile slaytları, yüzeyde eozin kalmayana kadar her biri 1 dakika durulayın.</li>
		<li>Slaytları 10−20 s için% 0.1 amonyağa batırın. Ardından, slaytları deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Slaytları sırasıyla %95 etanol, %100 etanol, ksilen, ksilen ve ksilen'e 1 dakika boyunca daldırın.</li>
		<li>Slaytları nötr reçine ile örtün.</li>
	</ol></li>
	<li>SO boyama<ol><li>Deiyonize H2O ile kızakları 3 dakika durulayın. Leke 3-5 dakika boyunca hematoksilin ile kayar.</li>
		<li>% 1 asit alkolde (yaklaşık 3 sn) hızlı bir şekilde farklılaşın. Daha sonra, yüzeyde hematoksilin kalmayıncaya kadar deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile slaytları durulayın.</li>
		<li>Hızlı Yeşil (FCF) solüsyonlu leke kızakları 5 dakika. Ardından, slaytları deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Leke 1-2 dakika boyunca SO ile kaydırılır. Ardından, slaytları deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Artık FCF'yi çıkarmak için% 1 asetik asit ile kızakları 1-2 dakika boyunca durulayın. Deiyonize H2O ile kızakları 1 dakika durulayın.</li>
		<li>Slaytları sırasıyla %95 etanol, %100 etanol, ksilen, ksilen ve ksilen'e 1 dakika boyunca daldırın.</li>
		<li>Slaytları nötr reçine ile örtün.</li>
	</ol></li>
	<li>ABH boyama<ol><li>Deiyonize H2O ile kızakları 3 dakika durulayın. Slaytları 30 sn boyunca% 1 asit alkole batırın ve bir kağıt havluya kısaca boşaltın (durulamayın).</li>
		<li>Slaytları 1 saat boyunca ABH'ye daldırın. Daha sonra, deiyonize H2O 3x ile slaytları, yüzeyde ABH kalmayana kadar her biri 1 dakika durulayın.</li>
		<li>% 1 asit alkolde (yaklaşık 3 sn) hızlı bir şekilde farklılaşın. Deiyonize H2O 3x ile kızakları durulayın, her biri 1 dakika.</li>
		<li>Slaytları 15 saniye boyunca% 0,5 amonyum suya batırın. Ardından, slaytları deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Slaytları 1 dakika boyunca% 95 etanol içine daldırın. Slaytları 1,5 dakika boyunca eozin/turuncu G çözeltisine batırın.</li>
		<li>Slaytları sırasıyla %95 etanol, %100 etanol, ksilen, ksilen ve ksilen'e 1 dakika boyunca daldırın.</li>
		<li>Slaytları nötr reçine ile örtün.</li>
	</ol></li>
	<li>Tüm slaytları mikroskop altında inceleyin ve Mankin'in puanlama sistemi14'e göre çift kör gözlemle 0-13 ölçeğinde istatistiksel olarak derecelendirin.</li>
	<li>İmmünohistokimya<ol><li>Deiyonize H2O ile kızakları 3 dakika durulayın.</li>
		<li>Slaytları 0,1 M sodyum sitrat içine daldırın ve antijeni almak için slaytları 60 ° C'lik bir fırında 4 saat boyunca yerleştirin.</li>
		<li>Slaytları PBS'de %0,3 Triton X-100'e 10 dakika daldırın. Ardından, slaytları PBS 2x, her biri 3 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Endojen peroksidaz aktivitesinibloke etmek için RT'de metanol içinde% 3H2 O 2 çözeltisindeki bölümleri 10 dakika boyunca inkübe edin. Kızakları PBS 2x, her biri 3 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Spesifik olmayan herhangi bir bağlanmayı engellemek için RT'de 30 dakika boyunca PBS'de% 5 keçi serumu içeren bölümleri inkübe edin. Kızakları PBS 2x, her biri 3 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Kesitleri 4 °C'de gece boyunca 100 μL PBS ile seyreltilmiş (1:1.000) sıçan tip II kollajen (Col2), tip X kollajen (Col10) ve matriks metalloproteinaz 13'e (MMP13) karşı primer antikorlarla inkübe edin. Kızakları PBS 2x, her biri 3 dakika ile durulayın.</li>
		<li>RT'de 20 dakika boyunca 100 μL PBS ile seyreltilmiş (1:1.000) ikincil antikor (keçi anti-fare sekonder veya keçi anti-fare ikincil) içeren bölümleri inkübe edin.</li>
		<li>100 μL 3,3′-diaminobenzidin (DAB) çalışma çözeltisi ile bölümleri inkübe edin. Kromojenik reaksiyon epitop bölgelerini kahverengiye çevirirken reaksiyonu izleyin. DİKKAT: DAB bir kanserojendir. DAB ile çalışırken daima eldiven giyin ve bir başlıkta çalışın. NOT: Renk geliştirme süresi birkaç saniye ile 10 dakika arasında değişebilir.</li>
		<li>Kesitlerde kahverengi bir renk gelişir gelişmez, slaytları deiyonize H2 O 2x, her biri 3 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Slaytları lekelemek için slaytları hematoksilin içine 1-2 dakika batırın. Ardından, slaytları deiyonize H2O 3x, her biri 1 dakika ile durulayın.</li>
		<li>Slaytları sırasıyla %95 etanol, %100 etanol, ksilen, ksilen ve ksilen'e 1 dakika boyunca daldırın.</li>
		<li>Slaytları nötr reçine ile örtün.</li>
		<li>Mikroskop altındaki bölümlerde antikor boyamasının rengini gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Hunter, D. J., Schofield, D., Callander, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+individual+and+socioeconomic+impact+of+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">The individual and socioeconomic impact of osteoarthritis.</a> Nature Reviews Rheumatology. 10 (7), 437-441 (2014).</li>
<li>Neogi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+and+impact+of+pain+in+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">The epidemiology and impact of pain in osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 21 (9), 1145-1153 (2013).</li>
<li>Teeple, E., Jay, G. D., Elsaid, K. A., Fleming, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+osteoarthritis%3A+challenges+of+model+selection+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Animal models of osteoarthritis: challenges of model selection and analysis.</a> AAPS Journal. 15 (2), 438-446 (2013).</li>
<li>Woolf, A. D., Pfleger, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Burden+of+major+musculoskeletal+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+the+World+Health+Organization%22%5BJournal%5D)">Burden of major musculoskeletal conditions.</a> Bulletin of the World Health Organization. 81 (9), 646-656 (2003).</li>
<li>Bijlsma, J. W., Berenbaum, F., Lafeber, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoarthritis%3A+an+update+with+relevance+for+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Osteoarthritis: an update with relevance for clinical practice.</a> Lancet. 377 (9783), 2115-2126 (2011).</li>
<li>McCoy, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Osteoarthritis%3A+Comparisons+and+Key+Considerations%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Pathology%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Osteoarthritis: Comparisons and Key Considerations.</a> Veterinary Pathology. 52 (5), 803-818 (2015).</li>
<li>O'Neill, T. W., Felson, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+Osteoarthritis+%28OA%29+Pain%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Osteoporosis+Reports%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of Osteoarthritis (OA) Pain.</a> Current Osteoporosis Reports. 16 (5), 611-616 (2018).</li>
<li>Kuyinu, E. L., Narayanan, G., Nair, L. S., Laurencin, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+osteoarthritis%3A+classification%2C+update%2C+and+measurement+of+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Surgery+and+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of osteoarthritis: classification, update, and measurement of outcomes.</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 11, 19(2016).</li>
<li>Takahashi, I., Matsuzaki, T., Hoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+histopathological+developments+in+knee-joint+components+in+a+rat+model+of+osteoarthritis+induced+by+monosodium+iodoacetate%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physical+Therapy+Science%22%5BJournal%5D)">Long-term histopathological developments in knee-joint components in a rat model of osteoarthritis induced by monosodium iodoacetate.</a> Journal of Physical Therapy Science. 29 (4), 590-597 (2017).</li>
<li>Liu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ongoing+pain+in+the+MIA+model+of+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Ongoing pain in the MIA model of osteoarthritis.</a> Neuroscience Letters. 493 (3), 72-75 (2011).</li>
<li>Combe, R., Bramwell, S., Field, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monosodium+iodoacetate+model+of+osteoarthritis%3A+a+model+of+chronic+nociceptive+pain+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">The monosodium iodoacetate model of osteoarthritis: a model of chronic nociceptive pain in rats.</a> Neuroscience Letters. 370 (2-3), 236-240 (2004).</li>
<li>Pomonis, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+pharmacological+characterization+of+a+rat+model+of+osteoarthritis+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Pain%22%5BJournal%5D)">Development and pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain.</a> Pain. 114 (3), 339-346 (2005).</li>
<li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li>
<li>Mankin, H. J., Dorfman, H., Lippiello, L., Zarins, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochemical+and+metabolic+abnormalities+in+articular+cartilage+from+osteo-arthritic+human+hips.+II.+Correlation+of+morphology+with+biochemical+and+metabolic+data%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bone+and+Joint+Surgery%22%5BJournal%5D)">Biochemical and metabolic abnormalities in articular cartilage from osteo-arthritic human hips. II. Correlation of morphology with biochemical and metabolic data.</a> Journal of Bone and Joint Surgery. 53 (3), 523-537 (1971).</li>
<li>Yan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chondroprotective+effects+of+platelet+lysate+towards+monoiodoacetate-induced+arthritis+by+suppression+of+TNF-%CE%B1-induced+activation+of+NF-%C4%B8B+pathway+in+chondrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Aging%22%5BJournal%5D)">Chondroprotective effects of platelet lysate towards monoiodoacetate-induced arthritis by suppression of TNF-α-induced activation of NF-ĸB pathway in chondrocytes.</a> Aging. 11 (9), 2797-2811 (2019).</li>
<li>Yan, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-Articular+Injection+of+Extract+Attenuates+Pain+Behavior+and+Cartilage+Degeneration+in+Mono-Iodoacetate+Induced+Osteoarthritic+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Intra-Articular Injection of Extract Attenuates Pain Behavior and Cartilage Degeneration in Mono-Iodoacetate Induced Osteoarthritic Rats.</a> Frontiers in Pharmacology. 9, 1360(2018).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agkistrodon+ameliorates+pain+response+and+prevents+cartilage+degradation+in+monosodium+iodoacetate-induced+osteoarthritic+rats+by+inhibiting+chondrocyte+hypertrophy+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Agkistrodon ameliorates pain response and prevents cartilage degradation in monosodium iodoacetate-induced osteoarthritic rats by inhibiting chondrocyte hypertrophy and apoptosis.</a> Journal of Ethnopharmacology. 231, 545-554 (2019).</li>
<li>Yamada, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+monosodium+iodoacetate+dosage+to+induce+knee+osteoarthritis%3A+Relation+with+oxidative+stress+and+pain%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Rheumatic+Diseases%22%5BJournal%5D)">Evaluation of monosodium iodoacetate dosage to induce knee osteoarthritis: Relation with oxidative stress and pain.</a> International Journal of Rheumatic Diseases. 22 (3), 399-410 (2019).</li>
<li>Schuelert, N., McDougall, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrophysiological+evidence+that+the+vasoactive+intestinal+peptide+receptor+antagonist+VIP6-28+reduces+nociception+in+an+animal+model+of+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Electrophysiological evidence that the vasoactive intestinal peptide receptor antagonist VIP6-28 reduces nociception in an animal model of osteoarthritis.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 14 (11), 1155-1162 (2006).</li>
<li>Lee, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choline%2C+an+alpha7+nicotinic+acetylcholine+receptor+agonist%2C+alleviates+hyperalgesia+in+a+rat+osteoarthritis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Choline, an alpha7 nicotinic acetylcholine receptor agonist, alleviates hyperalgesia in a rat osteoarthritis model.</a> Neuroscience Letters. 548, 291-295 (2013).</li>
<li>Piesla, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abnormal+gait%2C+due+to+inflammation+but+not+nerve+injury%2C+reflects+enhanced+nociception+in+preclinical+pain+models%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Abnormal gait, due to inflammation but not nerve injury, reflects enhanced nociception in preclinical pain models.</a> Brain Research. 1295, 89-98 (2009).</li>
<li>Udo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monoiodoacetic+acid+induces+arthritis+and+synovitis+in+rats+in+a+dose-+and+time-dependent+manner%3A+proposed+model-specific+scoring+systems%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Monoiodoacetic acid induces arthritis and synovitis in rats in a dose- and time-dependent manner: proposed model-specific scoring systems.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 24 (7), 1284-1291 (2016).</li>
<li>Guingamp, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mono-iodoacetate-induced+experimental+osteoarthritis%3A+a+dose-response+study+of+loss+of+mobility%2C+morphology%2C+and+biochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+%26+Rheumatism%22%5BJournal%5D)">Mono-iodoacetate-induced experimental osteoarthritis: a dose-response study of loss of mobility, morphology, and biochemistry.</a> Arthritis & Rheumatism. 40 (9), 1670-1679 (1997).</li>
<li>Jeong, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eupatilin+Exerts+Antinociceptive+and+Chondroprotective+Properties+in+a+Rat+Model+of+Osteoarthritis+by+Downregulating+Oxidative+Damage+and+Catabolic+Activity+in+Chondrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Eupatilin Exerts Antinociceptive and Chondroprotective Properties in a Rat Model of Osteoarthritis by Downregulating Oxidative Damage and Catabolic Activity in Chondrocytes.</a> PLoS ONE. 10 (6), 0130882(2015).</li>
<li>Cook, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+cartilage+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+%26+Joint+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models of cartilage repair.</a> Bone & Joint Research. 3 (4), 89-94 (2014).</li>
<li>Little, C. B., Zaki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+constitutes+an+%22animal+model+of+osteoarthritis%22--the+need+for+consensus%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">What constitutes an "animal model of osteoarthritis"--the need for consensus.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 20 (4), 261-267 (2012).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

MIA tarafından indüklenen OA'nın sıçan modeli, iyi kurulmuş, yaygın olarak kullanılan bir modeldir. MIA'nın eklem içi enjeksiyonu başlangıçta OA 17,18'in daha uzun ve dejeneratif fazına yol açan şiddetli ve akut inflamasyona neden olur. Bu araştırmada, MWT ve TWL ile nosiseptif duyarlılığı ölçtük ve yürüme değişikliklerini bir görüntüleme sistemi ile değerlendirdik. Önceki raporlar, MIA enjeksiyonunun, termal hiperaljezi ve azaltılmış mekanik eşik<sup class="xref...

Osteoartrit (OA) dünyada en sık görülen eklem hastalığıdır ve yetişkinlerde tahmini %10-12 oranında popülasyonu etkilemektedir1. En sık tutulan eklem dizdir ve OA yaşlı erişkinlerde, özellikle de kadınlarda daha yüksek bir insidansa sahiptir2. Kronik bir hastalık olarak OA, kıkırdak kaybı, sinovyal inflamasyon, osteofitozis, azalmış fonksiyon ve kronik ağrı gibi semptomlarla on yıllar içinde giderek eklem yetmezliğine dönüşür3. Dünya Sağlık Örgütü'ne (WHO) göre OA, kadınlarda dördüncü en sık görülen hastalık ve erkeklerde sekizinci en yaygın hastalıktır. 2020 yılına gelindiğinde, OA insanlarda dördüncü en çok engelleyici hastalık haline gelebilir4. Bununla birlikte, OA'nın şu anda mevcut tedavileri sadece semptomları ele almakta ve eklem replasman cerrahisine kadar süreyi uzatmaktadır5.
İnsan hastalarda spontan OA'nın eklem ağrısı gibi klinik semptomlar üretmesi genellikle uzun zaman alır6. OA'nın erken evrelerinde ağrı genellikle aralıklıdır ve hastalık ilerledikçe daha sık ve şiddetli hale gelir ve bu da onu hastaların baskın şikayeti haline getirir7. Bu nedenle, ağrı kesici tedaviyi teşvik etmek için son yarım yüzyılda OA ağrısı için kapsamlı hayvan modelleri geliştirilmiştir. OA modelleri klasik olarak spontan ve indüklenmiş modellere ayrılmıştır. Spontan modeller, insanlarda primer OA'nın seyrini daha yakından simüle edebilen doğal olarak oluşan modelleri ve genetiği değiştirilmiş modelleri içerir8. İndüklenen modeller genellikle iki kategoriye ayrılabilir: 1) cerrahi veya diğer travmalarla indüklenen travma sonrası OA; veya 2) kondrotoksik veya pro-inflamatuar maddelerin eklem içi enjeksiyonu3. Bu modeller OA'nın patofizyolojik çalışması için bir temel oluşturur ve ağrıyı azaltmak ve fonksiyonu arttırmak için ilaçların geliştirilmesine büyük katkıda bulunur.
Son zamanlarda, OA modellemesi için en yaygın kullanılan indükleyici mono-iyodoasetattır (MIA). Bir gliseraldehit-3-fosfat dehidrogenaz inhibitörü olan MIA, insan osteoartritinin patolojik değişikliklerine benzer şekilde kıkırdak matrisinde, bozulmada, kıkırdak kaybında, sinovitte ve diğer değişikliklerde değişikliklere nedenolabilir. MIA'nın eklem içi enjeksiyonunun, MIA uygulamasından 28 gün sonra devam eden ağrıya neden olduğu ve MIA modelinin kronik nosiseptif ağrıyı araştırmak için yararlı olabileceğini gösterdiği belirtilmiştir 10,11,12. Bu çalışmada, erkek Sprague-Dawley sıçanlarına diz eklemlerinde 0.5, 1.5 veya 3 mg MIA ile eklem içi enjeksiyonlar yapıldı. MIA'ya bağlı eklem ağrısının şiddeti, enjeksiyonlardan 1, 7, 14, 21, 28 ve 35 gün sonra mekanik ve termal duyarlılığın değerlendirilmesiyle ölçüldü. Bu temelde, enjeksiyonlardan 28 gün sonra yürüyüş paternlerini ve histolojik değişiklikleri değerlendirmek için son konsantrasyon olarak 1.5 mg MIA seçildi.

<table><tbody><tr><td>Anti-Kollajen II antikoru</td><td>Abcam(İngiltere)</td><td>34712</td><td>İmmünohistokimya için primer antikor(IHC)</td></tr><tr><td>Anti-Kollajen X (Col10) antikoru</td><td>Abcam(İngiltere)</td><td>49945</td><td>IHC DigiGait Görüntüleme Sistemi için primer antikor</td></tr><tr><td></td><td>Fare Özellikleri (Boston, MA, ABD)</td><td></td><td>Yürüyüş paternleri analizleri için ekipman</td></tr><tr><td>Eosin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>861006</td><td>HE için boya boyama</td></tr><tr><td>Hızlı Yeşil FCF</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F7252</td><td>SO boyama için boya</td></tr><tr><td>Keçi anti-fare antikoru</td><td>ZSGQ-BIO (Pekin, Çin)</td><td>PV-9002</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan antikoru</td> için ikincil antikor <td>ZSGQ-BIO (Pekin, Çin)</td><td>PV-9001</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Hematoksilen</td> için ikincil antikor <td>Sigma-Aldrich</td><td>H3163</td><td>HE boyama</td></tr> <tr>için boya<td>MIA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I4386-10G</td><td>toz</td></tr><tr><td>MMP13</td><td>Hücre Sinyalleme Teknolojisi, Inc. (Danvers, MA, ABD)</td><td>69926</td> IHC Modüler doku gömme merkezi <td>için birincil antikor</td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific (ABD)</td> <td>EC 350</td><td>Parafin blokları üretin.</td></tr><tr><td>Plantar Test cihazı</td><td>UgoBasile (İtalya)</td><td>37370</td><td>TWL tahlili için ekipman</td></tr><tr><td>PrimeScript RT reaktif Kiti (Mükemmel Gerçek Zamanlı)</td><td>TaKaRa Biotechnology Co. Ltd. (Dalian, Çin)</td><td>RR037A</td><td>Kültürlenmiş hücrelerden toplam RNA'yı çıkarın</td></tr><tr><td>Döner ve Kayan Mikrotomlar</td><td>Thermo Fisher Scientific (ABD)</td><td>HM325</td><td>Hassas parafin bölümleri.</td></tr><tr><td>Safranin-O</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S2255</td><td>SO boyama boyası</td></tr><tr><td>Tissue-Tek VIP 5 Jr</td><td>Sakura (Japonya)</td><td></td><td>Vakum İnfiltrasyon İşlemcisi</td></tr></tbody></table>

sıçanlarda mono-İyodoasetatın eklem İçi enjeksiyonu ile İndüklenen osteoartrit ağrı modeli

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

Osteoartritin (OA) mevcut hayvan modelleri, her ikisi de insan OA'sının patofizyolojik değişikliklerini simüle etmeyi amaçlayan spontan modellere ve indüklenmiş modellere ayrılabilir. Bununla birlikte, OA'nın geç evresinde ana semptom olarak, ağrı hastaların günlük yaşamını etkiler ve çok fazla model yoktur. Mono-iyodoasetat (MIA) kaynaklı model, esas olarak kemirgenlerde kullanılan en yaygın kullanılan OA ağrı modelidir. MIA, kondrosit ölümüne, kıkırdak dejenerasyonuna, osteofitlere ve hayvan davranışında ölçülebilir değişikliklere neden olan gliseraldehit-3-fosfat dehidrogenazın bir inhibitörüdür. Ayrıca, MIA ile indüklenen modelde matriks metalloproteinaz (MMP) ve pro-inflamatuar sitokinlerin (IL1 β ve TNF α) ekspresyon değişiklikleri tespit edilebilir. Bu değişiklikler insanlarda OA patofizyolojik koşulları ile tutarlıdır, bu da MIA'nın ölçülebilir ve başarılı bir OA ağrı modelini indükleyebileceğini göstermektedir. Bu çalışma, sıçanlarda eklem içi MIA enjeksiyonunun metodolojisini tanımlamayı ve ortaya çıkan ağrıya bağlı davranışları ve histopatolojik değişiklikleri tartışmayı amaçlamaktadır.

Bu metodoloji ile sıçanda OA ağrı modeli oluşturduk ve ortaya çıkan değişiklikleri tespit ettik. MWT ve TWL sırasıyla mekanik allodini ve termal hiperaljezi yansıtıyordu. Şekil 1'de gösterildiği gibi, MIA indüklenen mekanik allodinya ve termal hiperaljezi doza bağımlı bir şekilde mevcuttur. Dikkat çekici bir şekilde, MWT'nin düşüşü 21 günden 28 güne kadar bir zirveye ulaştı ve daha sonra toparlandı, bu da eklem onarımının bu aşamada gerçekleşebileceğini düşündürdü, ancak 3 mg MIA grubunun MW...

Bu çalışma, sıçanlarda mono-iyodoasetatın eklem içi enjeksiyon yöntemini açıklamakta ve gelecekteki uygulamalar için referans sağlayan ağrıya bağlı davranışları ve histopatolojik değişiklikleri tartışmaktadır.

Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

Eklem içi MI enjeksiyonu, ağrı ile ilgili davranışta ölçülebilir değişikliklere neden olur, bu da modellemenin başarısını değerlendirmede önemli bir rol oynar Prosedür tekrarlanabilir ve zaman açısından verimlidir. Ek olarak, hızlandırılan doz, hafif memelilerin yanı sıra küçük de kontra etiketli düşer. Ve prosedürü gösteren, laboratuvarımızdan bir yüksek lisans öğrencisi olan Zuxiang Chen olacak.Anestezi uygulanmış fareyi sırtüstü pozisyona getirin ve kürkü bir dizinden çıkarın. Maruz kalan cildi alkolle dezenfekte edin ve patellanın altındaki beyaz patella tendonunu ortaya çıkarmak için dizinizi 90 derecelik bir açıyla konumlandırın. Patellanın altındaki boşluğu bulmak için patellar tendona parmak ucunuzla baskı uygulayın.Ve iğneyi eklemlere dik tutarak, boşluğun ve lateral patellar tendonun birleştiği yere 26 gauge bir iğne yerleştirin. İğne yerindeyken, iğneyi yavaşça geri çekmeden önce eklem boşluğuna 50 mikrolitre MIA solüsyonu enjekte edin. Ardından, reflü ve sızıntıyı en aza indirmek için enjeksiyon bölgesinin etrafına bir parça gazlı bez sarın.Enjeksiyondan 1, 7, 14, 21, 28 ve 35 gün sonra, enjekte edilen bir fareyi, sessiz bir ortamda, bir masanın 50 santimetre üzerinde asılı bir tel örgü tabanı olan 17 x 11 x 13 santimetrelik yükseltilmiş bir plastiğe yerleştirin Bir arka pençenin ekici yüzeyine dik bir Von Frey İğnesine basmadan önce fareye çevreye uyum sağlaması için 30 dakika verin. Pençe kaldırma veya pençe yalama gerçekleşene kadar basıncı kademeli ve doğrusal olarak artırmak. Pençe çekilmesi meydana geldiğinde, eşiğin minimum çekme kuvveti olduğundan emin olmak için önceki eşikten daha düşük bir kuvvet kullanın.Her sıçan en az üç ila beş dakika arayla en az dört kez test edildiğinde, pençe çekme refleksini ortaya çıkaran minimum kuvveti kaydedin ve verilerin sıçanların MWT'si olarak ortalamasını alın. TWL'yi test etmek için, 60 x 20 x 14 santimetrelik bir pleksiglas kutunun her bir bölmesine enjekte edilmiş bir sıçan yerleştirin. Sabit bir sıcaklığa sahip sessiz bir odada üç milimetre kalınlığında bir cam plakaya yerleştirin ve farelere test ortamına uyum sağlamaları için 30 dakika verin.Oryantasyon süresinin sonunda, termal uyaranı bir kızılötesi radyometre ile kalibre edin ve istenen kızılötesi yoğunluğu 70 birime ayarlayın. Kızılötesi yayıcı dedektörünü doğrudan test edilen pençenin merkezinin altındaki kabın üzerine yerleştirin ve başlat düğmesine basın. Zamanlayıcı otomatik olarak başlayacaktır.Pençenin hareketi gerçekleşir gerçekleşmez, kontrolör kızılötesi ışığı otomatik olarak kapatacak ve zamanlayıcıyı durduracaktır. Pençe çekme ve pençe yalama gözlendiğinde tepki süresini kaydedin. Testi her sıçan için en az dört kez tekrarladıktan sonra, verilerin sıçanların TWL'si olarak ortalamasını alın.MIA ile tedavi edilen sıçanların kapı modelini değerlendirmek için, bölmenin uzunluğunu 61 santimetreye ayarlamak için önce bir yürüme bölmesinin her iki ucundaki düğmeleri kullanın. Daha sonra, bir fareyi yürüme bölmesine yerleştirin ve fareyi saniyede 18 santimetre hızında en az beş adım döngüsü boyunca kesintisiz koşular yapması için eğitin. Sıçan eğitildiğinde, şeffaf koşu bandı kayışının altına monte edilmiş yüksek hızlı bir dijital video kamera ile her bir sıçanın sürekli hareketinin en az beş saniyelik videolarını çekin.Beş dakika arayla kesintisiz en az üç koşu yakaladıktan sonra, görüntüleme yazılımında yürüyen hayvan görüntüsünün sınırını tanımlamak için bir sınırlayıcı kutu çizin ve her video için koşu hızını girin. Ardından yazılım tarafından otomatik analizi başlatın. İşlemden sonra yazılım, duruş, salınım, kırma, itme, kadans ve adım sırası dahil olmak üzere kapı indekslerini bildiren birkaç elektronik tablo çıkaracaktır.MIA, doza bağlı bir şekilde mekanik allodini ve termal hiperaljeziyi indükler. Dikkat çekici bir şekilde, MWT'nin azalması, geri tepmeden önce 21 günden 28 güne kadar bir zirveye ulaşır ve bu aşamada eklem onarımının meydana gelebileceğini düşündürür. Üç miligram MIA grubunun MWT'sinin bu zaman noktalarında hala düşük bir seviyede olduğunu unutmayın.TWL'nin değişimi, MWT için gözlemlenenle kabaca tutarlıdır. 1.5 miligram MIA'da, toplam pençe alanı ve birim adım uzunluğu dahil olmak üzere yürüyüş parametrelerinin seviyeleri MIA grubunda önemli ölçüde azalır. 28 gün sonra, MIA'nın sıçanlarda osteoartrit ile ilişkili eklem ağrısına neden olduğunu düşündürmektedir.Makin Skorlama ile yapılan histopatolojik analiz, MIA grubunda belirgin kıkırdak dejenerasyonu, kollajen bozulması ve matriks düzensizliğini ortaya koymaktadır. Ek olarak, 1.5 miligram MIA ile tedavi, MMP 13 ve kollajen tip 10'un önemli ölçüde yukarı regülasyonuna ve tip iki kollajenin önemli ölçüde aşağı regülasyonuna neden olur. Doğru kavşağı bulmak önemlidir.İğne atriküler boşluğa ulaştığında herhangi bir direnç doldurulmamalıdır. Bu teknik, stabil ve tekrarlanabilir bir OA ağrı modelinin üretilmesini kolaylaştırmış, ağrıyı azaltacak ve fonksiyonu artıracak ilaçların geliştirilmesine önemli katkı sağlamıştır. MI'nın diğer bir tarafı, dolu zarı üzerinde son derece objektif bir etkiye sahiptir ve bu çözelti hazırlanırken maske ve eldivenler her zaman giyilmelidir.

osteoarthritis-pain-model-induced-intra-articular-injection-mono

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Osteoartrit (OA), ya da dejeneratif eklem hastalığı, yalnızca kısmen kullanılabilir analjezik tarafından kontrol kalır ağrı ile ilişkili bir zayıflatıcı bir durumdur. Hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek için geliştirilmektedir. Burada fare OA ağrısının monoiodoacetate modeli için bir yöntem tarif eder.

Fare Osteoartrit Ağrı Monoiodoacetate Modeli

Biz artrit ağrı uyarılmış bir ölçüsü geliştirdik ve kimyasal olarak indüklenen artrit farklı fare modellerinde spontan acı ölçmek için standart bir yöntem ile birleştiğinde. Bu hassas ve eklem ağrısı farklı türleri için tekrarlanabilir önlemlerdir.

Fare modelleri Monoarticular diz ağrısı kendiliğinden ve uyarılmış önlemler

Bu protokolde modifiye Videman yöntemi kullanılarak diz osteoartriti modeli hazırlanmış olup, akupotominin operasyon prosedürleri ve önlemleri detaylandırılmıştır. Akupupotominin etkinliği, kuadriseps, femoris ve tendonun mekanik özellikleri ve kıkırdağın mekanik ve morfolojik özellikleri test edilerek gösterilmiştir.

Tavşanda Diz Osteoartrit Modelinde Akupotomi Uygulaması

Bu protokol, Tuina'nın KOA hayvan modellerinde uygulanması için bir referans sağlayan, diz osteoartritinin (KOA) sodyum monoiyodoasetat enjeksiyonuna bağlı sıçan modelinde Tuina müdahale yöntemlerini açıklar. Bu protokol aynı zamanda Tuina'nın KOA için etkili mekanizmasını da incelemektedir ve sonuçlar uygulamasının desteklenmesine yardımcı olacaktır.

Diz Osteoartritinin Sodyum Monoiyodoasetat Enjeksiyonuna Bağlı Sıçan Modelinde Tuina Müdahalesi

Bu protokol, Komple Freund Adjuvanı (CFA) ile indüklenen inflamatuar temporomandibular eklem (TME) ağrısında ısırma kuvveti ve baş çekilme eşiğinin ölçülmesinin ağrı davranışını nasıl yakalayabileceğini açıklar.

Farelerde Isırma Kuvveti ve Von Frey Filament Deneyleri ile Temporomandibular Eklem Ağrısı Ölçümü

Protokol, farelerde diz hiperaljezisinin nasıl ölçüleceğini açıklar. Akut diz ağrısının fare modellerinde ve osteoartrit (OA) modellerinde örnekler gösteriyoruz.

Farelerde Diz Hiperaljezisinin Basınç Uygulama Ölçümü Kullanılarak Değerlendirilmesi

Cerrahi basitlik ve sağlam davranışsal sonuçları nedeniyle, siyatik sinirin kronik daralma nöropatik ağrı seçkin hayvan modelleri biridir. Ameliyat sonrası 24 saat içinde, ağrı aşırı duyarlılık kurulan ve kantitatif bir von Frey aesthesiometer (mekanik test) ve plantar analjezi metre (termal testi) kullanılarak ölçülebilir.

Siyatik Sinir Sıçanlarda Ağrı aşırı duyarlılık Test Kronik daraltma

, Dekolmanı bir tekrarlanabilir ve sürekli yüksekliği ile deneysel retina dekolmanı oluşturma ve subretinal kanama olmadan retina hastalığında fotoreseptör hücre kaybı patofizyolojisi okuyan ve potansiyel terapötik müdahalelerin değerlendirilmesi için önemlidir. Burada ayrıntılı olarak, böyle bir yöntem sunulmaktadır.

Sodyum Hyaluronat subretinal Enjeksiyon Kemirgenler Retina Dekolmanı Modeli

Glokomu modellemek için sıçan gözüne manyetik mikroküreler enjekte ederek yüksek göz içi basıncını (GİB) indüklemek için bir yöntem sunuyoruz. Bu, güçlü basınç artışlarına ve geniş nöronal ölüme yol açar. Bu protokolün uygulanması kolaydır, tekrar enjeksiyonları gerektirmez ve stabil uzun süreli GİB artışları üretir.

Deneysel Glokom Manyetik Mikrokürelerin Göz Enjeksiyon Bağlı

Kronik oküler hipertansiyon circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler, Retina ganglion hücrelerinin glokom ile tutarlı fonksiyonel ve yapısal bozulma yol uygulayarak indüklenen.

Manken Circumlimbal dikiş sıçanlar ve fareler tarafından indüklenen glokom

Keşfedin sıçanlarda mono-iyodoasetat ile intra-artiküler enjeksiyon yöntemini. Bu prosedür osteoartrit ağrı modeli oluşturur ve davranışsal değişiklikleri değerlendirir. Araştırmacılar için tekrarlanabilir bir yöntem sunar.

Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli

Daha fazla video keşfet