Name: Kuyruk Ven Metastaz Tahlilleri ve Gerçek Zamanlı Vivo Görüntüleme Kombine Kullanımı Meme Kanseri Metastatik Kolonizasyon ve Yük Akciğerlerde Quantify için (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-19T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Öğrenin meme kanseri metastazını kuyruk veni testi ve gerçek zamanlı vivo görüntüleme ile izleme yöntemini. Bu protokol invaziv işlemler olmadan akciğerlerde metastaz sayısını ve boyutunu nicelendirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Emily Norton'a viral enfeksiyonlara ve el yazmasının eleştirel okumaya yardımcı olduğu için teşekkür ederiz. Biz de akciğerlerde yeşil metastaz görüntü analizi ile yardım için akciğer ve Kate E. Tubbesing görüntüleri elde yardımcı olmak için Ryan Kanai teşekkür ederiz. Biz destek ve bu video hazırlanmasında yardım için hayvan araştırma tesisi personeli teşekkür ederiz. Bu çalışma, J.M.L.'ye (#CCR17477184) verilen Susan G. Komen Career Catalyst Grant tarafından desteklenmiştir.

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Yöntemin kritik adımları Belirli bir hücre hattı ve fare zorlanması için enjekte edilen hücre sayısını (adım 3) optimize etmek önemlidir, çünkü bu, oluşan metastaz sayısını ve deneyin uzunluğunu büyük ölçüde etkileyebilir. Çok fazla hücre enjekte edilirse veya metastazlar çok uzun süre büyürse, metastazların genetik manipülasyonun etkilerini değerlendirmek zorlaştıkça sayılması zor olabilir. Ancak, çok az hücre enjekte edilirse, az veya hiç metastaz oluşabilir. Bu nedenle, metastazların büyüme süresin...

Kanser ölüm dünya çapında ikinci önde gelen nedeni olmaya devam etmektedir1 ve metastaz bu ölümlerin çoğunluğu sorumludur2,3. Ancak, metastatik kolonizasyon ve sonraki büyüme yöneten moleküler mekanizmaların sınırlı bir anlayış metastatik hastalık için etkili tedavilerin gelişimini engellemiştir. Yeni terapötik hedeflerin belirlenmesi, bir aday genin metastaz oluşumunu ve büyümesini nasıl etkilediğini test etmek için bir test gerektirir. Otokton fare modellerinin avantajları olsa da, zaman alıcı dır ve oluşturmak pahalıdır, bu da onları hedef bulma yerine hedef doğrulama için daha uygun hale getirir. Aday genin kanser hücrelerinde in vitro olarak tedirgin olduğu ve metastatik potansiyel üzerindeki etkilerinin in vivo olarak değerlendirildiği nakil modeli sistemleri, otokton modellere göre daha ucuz ve daha yüksek iş âldeki sistemlerdir. Buna ek olarak, RNAi, CRISPR/CAS9 ve transgenlerin istikrarlı teslimatı için viral vektörler yaygın olarak mevcuttur, bu da kanser hücresi hatlarında ilgi çeken hemen hemen her geni veya geni tedirgin etmeyi nispeten kolaylaştırır. Bu yaklaşım aynı zamanda insan kanser hücresi hatlarında metastatik kolonizasyon ve büyüme de immünozveya insanlaşmış fareler içine hücreleri naklederek aday genlerin rolünü titretmek için kullanılabilir.
Nakledilen kanser hücrelerinin in vivo tarafından metastaz oluşumunu test etmek için kullanılan iki tip tahlilssi spontan metastaz tahlilleri ve deneysel metastaz tahlilleridir. Spontan metastaz tahlillerinde4,5, kanser hücreleri farelere enjekte edilir, primer tümör oluşturmasına izin verilir, ve daha sonra spontan metastaz oluşumu ve sonraki büyüme tahlil edilir. Bu modelin gücü hücrelerin metastatik tümörler oluşturmak için metastatik sürecin tüm adımlarını tamamlamak gerekir. Ancak, birçok kanser hücre hatları spontan metastaz modellerinde verimli metastaz yok, ve primer tümör büyümesini etkileyen hücrelerin herhangi bir manipülasyon metastaz tahsin sonuçlarını şaşırtmak olabilir. Kanser hücrelerinin doğrudan dolaşıma enjekte edildiği deneysel metastaz tahlilleri bu tuzakları önlemek için kullanılır. Yaygın deneysel metastaz tahlilleri kuyruk ven enjeksiyonuiçerir 6,7,8 (ve burada gösterilmiştir), intrakardiyak enjeksiyon9, ve portal venenjeksiyonu 10.
Burada sunulan protokolün amacı, bir araştırmacının metastaz oluşumunu ve büyümesini gerçek zamanlı olarak izlemesine olanak tanıyan in vivo deneysel metastaz testi sağlamak ve aynı farenin akciğerlerindeki nokta metastaz sayısını ve boyutunu ölçmektir. Bunu başarmak için, geleneksel deneysel kuyruk ven metastaz tahlilleri6,7,8 canlı hayvan görüntüleme ile birleştirilir, in vivo görüntüleme cihazı kullanarak9,11,12,13,14. Hem luciferase hem de floresan proteini ifade eden tümör hücreleri lateral kuyruk damarı ile farelere enjekte edilir ve daha sonra in vivo görüntüleme cihazı zamanla akciğerlerdeki metastatik yükteki değişiklikleri ölçmek için kullanılır(Şekil 1). Ancak, in vivo canlı hayvan görüntüleme cihazı ayırt edemez veya bireysel metastaz boyutunu ölçmek. Bu nedenle, deney sonunda, bir floresan stereomikroskop sayısını saymak ve kesit ve histoloji veya immünohistokimya gerek kalmadan akciğerlerde floresan metastaz boyutunu ölçmek için kullanılır(Şekil 1). Bu protokol, aday genin ekspresyonunun veya işlevinin değiştirilmesinin metastaz oluşumunu ve büyümeyi nasıl etkilediğini test etmek için kullanılabilir. Küçük moleküller veya fonksiyon bloke antikorlar gibi potansiyel terapötik bileşikler de test edilebilir.
Bu yaklaşımı göstermek için, ilk olarak metastatik fare meme kanseri hücrelerinde temel replikasyon faktörü olan replikasyon proteini A3'ün (RPA3) yıkıldığı kavram deneyinin bir kanıtını gerçekleştirdik. RPA3 nakavt hücreleri enjekte edilen farelerin kontrol hücreleri ile enjekte edilen farelere kıyasla her zaman önemli ölçüde daha az metastatik yüke sahip olduğunu gösteriyoruz. Metastaz içeren akciğerlerin analizi, bu azalan metastatik yükün metastatik kolonizasyonun önemli ölçüde azalması ve oluşan metastazların büyüme bozukluğunun bir sonucu olduğunu göstermektedir. Bu tekniği daha da göstermek için, EVET ilişkili proteinin (YAP) ve transkripsiyonel koaktivatörün PDZ bağlayıcı motifli (TAZ) aynı anda yıkılması metastatik kolonizasyonu mu yoksa sonraki büyümeyi mi bozduğunu test ettik. YAP ve TAZ, Hippo Pathway'in kritik downstream efektörleri olan iki ilgili transkripsiyonel ko-aktivatörlerdir. Biz15,16 ve diğerleri metastaz YAP ve TAZ karıştığı var(17içinde gözden ,18,19),Bu proteinleriyi tedavi hedefleri olduğunu düşündüren. Sürekli olarak, YAP/TAZ nakavt hücrelerine enjekte edilen farelerin metastatik yükü önemli ölçüde azalttığını gördük. Akciğerlerin analizi YAP/TAZ knockdown hücrelerinin çok daha az metastaz oluşturduğunu ve oluşan metastazların daha küçük olduğunu gösterdi. Bu deneyler, deneysel metastaz tahlillerinin bir araştırmacının metastaz oluşumu ve büyümesinde aday genin rolünü hızlı ve ucuz bir şekilde test etmesine nasıl olanak sağladığını göstermektedir. Ayrıca canlı hayvan görüntüleme ve tüm akciğerlerde metastaz floresan nicel kombine kullanımı nın araştırmacının metastatik kolonizasyon sırasındaki adımları daha iyi anlamasına nasıl olanak sağladığını göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>%10 SDS-PAGE Jel</td><td></td><td></td><td>Western blot için</td></tr><tr><td>%2.5 Tripsin</td><td>Gibco</td><td>15090-046</td><td>Doku kültürü için tripsin</td></tr><tr><td>96 kuyu düz tabanlı beyaz tahlil plakası</td><td>Corning</td><td>3922</td><td>Kültürlenmiş hücrelerde lusiferaz ve renilla sinyalini ölçmek için</td></tr><tr><td>Alkollü mendiller</td><td></td><td></td><td>Kuyruk damarı enjeksiyonlarından önce enjeksiyon bölgesini sterolize etmek için</td></tr><tr><td>BALB/C fareleri ( dişi, 6 hafta)</td> <td>Takonik</td><td>BALB-F</td><td>Kuyruk damarı metastatik kolonizasyonu ve yük tahlilleri için</td></tr><tr><td>BSA düzenli</td><td>VWR Ameresco</td><td>97061-416</td><td>Batı lekesi için</td></tr><tr><td>Hücre lizis tamponu</td><td>Hücre Sinyali</td><td></td><td>Protien örneklerini toplamak için</td></tr><tr><td>Celltreat Şırınga Filtreleri, PES 30mm, 0.45 & mu; m</td><td>Celltreat</td><td>40-229749-CS</td><td>Viral süpernatan</td></tr><tr><td>CO2 ve ötenazi odasını</td><td></td><td></td><td>filtrelemek için Farelere ötenazi yapmak için</td></tr><tr><td>Çift lusiferaz raportör test kiti</td><td>Promega</td><td>E1960</td><td>Kültürlenmiş hücrelerde lusiferaz ve renilla sinyalini ölçmek için</td></tr><tr><td>Dulbecco& 39; </td><td>PBS</td>EDTA VWR 97061-406 için s fosfat tamponlu salin <td></td><td>Himedia TS1006</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>Doku kültürü için tripsini seyreltmek için kullanılır</td></tr><tr><td>FBS %100 ABD menşeli</td><td>VWR</td><td>97068-085</td><td>Tam büyüme ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Fujifilm LAS-3000 jel görüntüleyici</td><td>Fujifilm</td><td></td><td>Western blot</td></tr><tr><td>için GAPDH (14C10) Rabibit mAb</td><td>Hücre Sinyali</td><td>2118</td><td>için batı lekesi</td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan IgG (H + L) İkincil Antikor, HRP konjugat</td><td>Thermo Scientific</td><td>31460</td><td>Batı lekesi için</td></tr><tr><td>İnsan embriyonik böbrek hücreleri, HEK-293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td>Virüsü paketlemek için kullanılan hücre hattı</td></tr><tr><td>HyClone DMEM / Yüksek clucose</td><td>GE Healthcare yaşam bilimleri</td><td>SH30243.01</td><td>Tam büyüme ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Higromisin B, Ultra Saf Sınıf</td><td>VWR Ameresco</td><td>97064-810</td><td>Enfekte hücrelerin antibiyotik seçimi için</td></tr><tr><td>I3-P/i3 Çok Modlu Mikroplaka/EA</td><td>Moleküler cihazlar</td><td></td><td>Kültürlenmiş hücrelerde lusiferaz ve renilla sinyalini ölçmek için</td></tr><tr><td>Imagej</td><td></td><td></td><td>Akciğer metastazlarının görüntü analizi için kullanılır: eşik 25 ve 100 olarak ayarlandı</td></tr><tr><td>İmmüno-Blot PVDF Membran</td><td>Biorad</td><td>1620177</td><td>Western blot için</td></tr><tr><td>Fare anestezisi için</td> <td>izofluran</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IVIS Lumina XRMS In Vivo Görüntüleme Sistemi (in vivo canlı hayvan görüntüleme cihazı)</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136340</td><td>Metastatik yükün in vivo görüntülenmesi için</td></tr><tr><td>Leica M205 FA & Lecia DCF3000 G (GFP ve parlak alan filtreleri)</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>Akciğerlerdeki metastazları görüntülemek, saymak ve çekmek için mikroskop ve kamera; 10X büyütme, 3,5 sn maruz kalma, 1,4 kazanç</td></tr><tr><td>L-Glutamin</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td>Tam büyüme ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Lipofectamine 3000</td><td>Life teknolojileri</td><td>L3000008</td><td>YAP/TAZ-TEAD muhabir transfeksiyonu için</td></tr><tr><td>Living Image 3.2 (görüntü yazılım programı)</td><td>IVIS</td>Fare meme kanseri hücreleri için <td>PerkinElmer</td><td></td> Yazılımı</tr><tr><td>, 4T1</td><td>Karmanos Kanser Enstitüsü</td><td>Aslakson, CJ ve ark.,1992</td><td>Fare metastatik göğüs kafesi hücre hattı</td></tr><tr><td>Multi-Gauge sürüm 3.0</td> Batı <td>leke bandı yoğunluğunu ölçmek için</td><td>Fujifilm</td><td></td> Yazılımı</tr><tr><td>Opti-MEM (transfeksiyon tamponu)</td><td>Gibco</td><td>31985-062</td><td>Virüs ve transfeksiyon paketlemek için</td></tr><tr><td>Penisilin Streptomisin</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>Tam büyüme ortamının bileşeni</td></tr><tr><td>Pierce BCA protein tahlil kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Protein konsantrasyonunu ölçmek için</td></tr><tr><td>Pierce Fosfataz İnhibitörü Mini Tabletler</td><td>Thermo Scientific</td><td>A32957</td><td>Hücre lizis tamponuna eklendi</td></tr><tr><td>Pierce Proteaz İnhibitörü Mini Tabletler</td><td>Thermo Scientific</td><td>A32953</td><td>Hücre lizis tamponuna eklendi</td></tr><tr><td>Polibren (heksadimetrin bromür)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>45-H9268</td><td>Enfeksiyon için</td></tr><tr><td>Puromycin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>45-P7255</td><td>Enfekte hücrelerin antibiyotik seçimi için</td></tr><tr><td>Kemirgen kısıtlayıcı</td><td></td><td></td><td>Kuyruk damarı enjeksiyonu sırasında fareleri kısıtlamak için</td></tr><tr><td>SDS-PAGE çalışma tamponu</td><td></td><td></td><td>Batı lekesi için</td></tr><tr><td>TAZ (V3886) Antikor</td><td>Hücre Sinyalizasyonu</td><td>4883</td><td>Western blot için</td></tr><tr><td>TBST tamponu</td><td></td><td></td><td>Western blot</td></tr><tr><td>için TC20 otomatik hücre sayacı</td><td>Bio-Rad</td><td></td><td>Hücreleri saymak için</td></tr><tr><td>Vektörler Vektörlerin</td><td></td><td></td><td>tam listesi için Tablo 1'e bakın</td></tr><tr><td>VWR Ters Floresan Mikroskobu VWR</td><td></td><td>89404-464</td><td>Floresansı görselleştirmek için ZSGreen etiketli hücreler</td></tr><tr><td>Batı transfer tamponu</td><td></td><td></td><td>Western blot için</td></tr><tr><td>XenoLight D-Luciferin K+ Tuzu</td><td>PerkinElmer</td><td>122799</td><td>İn vivo biyolüminesans IVIS görüntüleri için farelere enjekte edilen substrat</td></tr><tr><td>X-tremeGENE 9 DNA transfeksiyon reaktifi (transfeksiyon için lipid çözeltisi)</td><td>Roche</td><td>6365787001</td><td>Virüs paketlemek için</td></tr><tr><td>YAP (D8H1X) XP Tavşan mAb</td><td>Hücre Sinyali</td><td>14074</td><td>Batı lekesi için</td></tr></tbody></table>

kuyruk ven metastaz tahlilleri ve gerçek zamanlı vivo görüntüleme kombine kullanımı meme kanseri metastatik kolonizasyon ve yük akciğerlerde quantify için

Combined Use of Tail Vein Metastasis Assays and Real-Time In Vivo Imaging to Quantify Breast Cancer Metastatic Colonization and Burden in the Lungs

Metastaz kansere bağlı ölümlerin ana nedenidir ve metastatik hastalığı olan hastalar için sınırlı tedavi seçenekleri vardır. Metastatik hastalık için daha iyi tedavilerin geliştirilmesini kolaylaştıracak yeni tedavi hedeflerinin tanımlanması ve test edilmesi, in vivo modellerinde preklinik preklinik gerektirir. Burada gösterilen meme kanseri metastatik kolonizasyon ve sonraki büyüme atamak için bir syngeneic fare modelidir. Metastatik kanser hücreleri, ateş böceği luciferase ve ZsGreen proteinlerini kodlayan viral vektörlerle şantiye edilir. Aday genler daha sonra koably luciferase / ZsGreen ifade kanser hücrelerinde manipüle edilir ve daha sonra hücreler metastatik kolonizasyon ve büyüme saymak için lateral kuyruk damarı ile fareleriçine enjekte edilir. Bir in vivo görüntüleme cihazı daha sonra zaman içinde metastatik yük değişiklikleri ölçmek için canlı hayvanlarda tümör hücrelerinin biyolüminesans veya floresan ölçmek için kullanılır. Floresan proteinin ekspresyonu, deney sonunda kesit veya histolojik boyama ya da metastaz gerekkalmadan akciğerlerdeki metastazların sayısının ve boyutunun ölçülmesine olanak tanır. Bu yaklaşım, metastatik kolonizasyon ve büyüme aday genlerin rolünü test etmek için nispeten hızlı ve kolay bir yol sunuyor, ve geleneksel kuyruk ven metastazı tahlilleri çok daha fazla bilgi sağlar. Bu yaklaşımı kullanarak, meme kanseri hücrelerinde PDZ bağlayıcı motifli (TAZ) ile Evet ilişkili protein (YAP) ve transkripsiyonel koaktivatörün aynı anda yıkılması nın akciğerlerde metastatik yükün azalmasına yol açtığını ve bu azaltılmış yükün metastatik kolonizasyonun ve metastazların büyümesinin azalmasısonucu olduğunu göstermektedir.

Yukarıdaki yaklaşımı göstermek için, kritik bir çoğaltma faktörü olan RPA3'ün metastatik fare meme karsinomu hücre hattında (4T122)yıkıldığı bir kavram deneyinin kanıtını gerçekleştirdik. Protokol, hücrelerin genetik manipülasyondan önce hem luciferase hem de floresan proteinlerle etiketlendiğini açıklarken, rnai vektörleri de ZsGreen'i teslim ettiği için modifiye edilmiş bir yaklaşım kullandık (Şekil 2A). İlk olarak, 4T1 hücreleri ateş böceği lucifer...

Açıklanan yaklaşım, akciğerlerdeki metastaz sayısı ve boyutunun ölçülmesine ek olarak meme kanseri metastazı oluşumunun ve büyümesinin gerçek zamanlı olarak izlenmesine olanak sağlamak için deneysel kuyruk ven metastazı tahlillerini in vivo canlı hayvan görüntülemeile birleştirir.

Kuyruk Ven Metastaz Tahlilleri ve Gerçek Zamanlı Vivo Görüntüleme Kombine Kullanımı Meme Kanseri Metastatik Kolonizasyon ve Yük Akciğerlerde Quantify için

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification ...

Protokolümüz metastatik kolonizasyon ve büyüme de herhangi bir aday genin rolünü hızlı ve kolay bir şekilde test etmek için kullanılabilir. Protokol aynı zamanda metastaz, oluşum ve büyümenin gerçek zamanlı olarak izlenmesine ve aynı hayvanlarda metastaz sayısı nın ve büyüklüğünün rezeksiyon veya histolojik boyamaya gerek kalmadan ölçülmesine olanak sağlar. Plaka dört T1 hücreleri 150, 000 hücreleri iyi başına 12-iyi plaka tam büyüme ortamı.Bir gecede 37 santigrat derecede %5 karbondioksit le kuluçkaya yat. Ertesi gün, hücrelerden büyüme ortamı aspire. Aynı anda hem luciferase ve floresan protein viral supernatants ile hücreleri enfekte etmek için luciferase viral supernatant ve floresan protein viral supernatant 500 mikrolitre ekleyin.Daha sonra, mililitre hekaksimethrine bromür başına sekiz miligram bir mikrolitre ekleyin ve 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksit 24 ila 48 saat için kuluçka. Dört T1 hücresini 500 mikrolitre tripsin ile deneyin. İki ila beş dakika sonra, seçim medya dört mililitre içinde altı santimetre lik bir çanak için tüm hücreleri aktarın, bu nedenle trippsin söndürme.Seçim tamamlandıktan sonra, enfekte dört T1 hücreleri 50 ila 100 kez büyütme bir ters flore

combined-use-tail-vein-metastasis-assays-real-time-vivo-imaging-to

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu çalışmada bildirilen yeni protokol kombine farelerde tek hücreli çözünürlükte metastaz seçici algılama...

Kombine tarafından Farelerde Tek Hücre çözünürlükte Akciğer Metastaz Geliştirilmiş Görselleştirme<em&gt; In-situ</emAkciğer Doku ve X-Gal Boyanma&gt; Perfüzyon<em&gt; LacZ</em&gt;-Tagged Tümör Hücreleri

Kemik metastazının patogenezine, anjiyojenez önemli bir proses ve bu nedenle görüntüleme ve tedavi için bir hedef temsil eder. Burada siteye özel meme kanseri kemik metastazı bir sıçan modeli sunmak ve non-invaziv görüntü anjiyogenez için stratejiler...

Manyetik Rezonans Görüntüleme, Volumetrik Bilgisayarlı Tomografi ve Ultrason Kullanımı Meme Kanseri Kemik metastazı bir Nude Rat Model Angiogenezis Multi-modal Görüntüleme

Bu videoda, bir fare modeline kuyruk damarı enjeksiyonu kullanılarak etiketli kanser hücrelerinin enjekte edilmesi tekniği açıklanmaktadır. Gerçek zamanlı in vivo canlı hayvan görüntülemeyi kullanarak meme kanseri, metastaz oluşumunu ve büyümesini daha fazla izliyoruz.

Kuyruk Damarı Enjeksiyonu: Bir Fare Modelinde Metastatik Çalışmalar için Kanser Hücrelerini Uygulamak İçin Bir Yöntem

Bu el yazması tümör hücresi birikimi Akciğerlerde tümör metastazı, bir hayvan modeli ölçmek için bir yöntem açıklanır.

Akciğer tümör hücre işe alım tahlil

Bu protokol fare akciğer dokusu içindeki metastazı temsil tümör hücre spesifik mRNA tespit etmek için kantitatif gerçek zamanlı PCR (QRT-PCR) nasıl kullanılacağı açıklanır.

Kantitatif gerçek zamanlı PCR ile fare meme tümör modellerinde akciğer metastazı Değerlendirilmesi

Farelerde floresan haberci kullanılarak, akciğer metastazı olan tümör hücre stromanın etkileşimleri ex vivo canlı görüntüleme için nispeten basit bir yöntem tarif eder. iplik disk konfokal mikroskopi kullanılarak, bu teknik, en az 4 saat boyunca canlı hücre görüntülenmesini sağlayarak ve diğer enflamatuar akciğer koşulları incelemek için adapte edilebilir.

Ex Akciğer Metastaz ve Bunların mikroçevresinin Canlı Görüntüleme vivo

Bu çalışma, yeşil floresan protein ve biyolüminesans sinyallerinin yanı sıra kantitatif moleküler algılama tekniğinin entegrasyonu ile tümör yüklemesini doğru bir şekilde değerlendirmek için gelişmiş bir protokol hazırlaştır.

Ortotopik Meme Kanseri Modeli Kullanarak Üçlü Negatif Meme Kanseri Eğitimi

Kanser hücrelerinin intravenöz enjeksiyonu genellikle metastaz araştırmalarında kullanılır, ancak metastatik tümör yükünü analiz etmek zor olabilir. Burada, metastazın kuyruk damarı enjeksiyon modelini gösteriyoruz ve ortaya çıkan metastatik akciğer tümörü yükünü analiz etmek için yeni bir yaklaşım içeriyoruz.

Tümör Hücrelerinin Lateral Kuyruk-Damar Enjeksiyonu Sonrasında Akciğer Metastazının Patolojik Analizi

Biz Fiji-ImageJ kullanarak 4T1 meme kanseri modelinde akciğer metastazı ölçmek için daha tutarlı ve hızlı bir yöntem açıklar.

4T1 Meme Kanseri Modelinde Akciğer Metastazının Nicelleştirilmesini Geliştirmek Için Bilgisayar Tabanlı Görüntü Analizinin Kullanılması

Burada, akciğerin yüksek çözünürlüklü, intravital görüntülemesini sağlayan murine toraks için kalıcı olarak indwelling optik pencerenin cerrahi implantasyonu için bir protokol sunuyoruz. Pencerenin kalıcılığı, akciğerdeki dinamik hücresel süreçlerin, özellikle de yayılan tümör hücrelerinin metastatik ilerlemesi gibi yavaş gelişen süreçlerin incelenmesine çok uygun hale getirir.

Akciğere Kanser Metastazını Araştırmak İçin Kalıcı Bir Pencere

El yazması, ortotopik olarak enjekte edilen meme tümörlerinden spontan akciğer metastazının kurulması ve uzunlamasına büyüme izlemesi için metastatik kaskadının tüm aşamalarında müdahaleye uygun bir metodolojiyi açıklamaktadır.

In vivo (İn canlı) Ortotopik Olarak Enjekte Edilen Meme Tümörü Hücrelerinin Spontan Akciğer Metastazını Ölçmek için Görüntüleme

Öğrenin meme kanseri metastazını kuyruk veni testi ve gerçek zamanlı vivo görüntüleme ile izleme yöntemini. Bu protokol invaziv işlemler olmadan akciğerlerde metastaz sayısını ve boyutunu nicelendirir.

Kuyruk Ven Metastaz Tahlilleri ve Gerçek Zamanlı Vivo Görüntüleme Kombine Kullanımı Meme Kanseri Metastatik Kolonizasyon ve Yük Akciğerlerde Quantify için (Video) | JoVE Journal

Kuyruk Ven Metastaz Tahlilleri ve Gerçek Zamanlı Vivo Görüntüleme Kombine Kullanımı Meme Kanseri Metastatik Kolonizasyon ve Yük Akciğerlerde Quantify için

Daha fazla video keşfet