Name: Tek DNA Moleküllerinden Kitlesel Paralel Protein Sentezi için Femtolitre Damlacık Dizisi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 45 s
Description: Keşfedin femtolitre damlacık dizisi kullanarak tek DNA moleküllerinden kitlesel paralel protein sentezi yöntemini. Bu teknik, hücre dışı protein sentezi ve enzim aktivitesi ölçümünü hızlandırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma JSPS KAKENHI hibe numarası JP18K14260 ve Japonya Ajansı Deniz-Dünya Bilim ve Teknoloji için bütçe tarafından desteklenmiştir. Biz shigeru Deguchi (JAMSTEC) ve Tetsuro Ikuta (JAMSTEC) karakterizasyon tesisleri sağlamak için teşekkür ederiz. Ken Takai'ye (JAMSTEC) ticari yazılım desteği için teşekkür ederiz. Mikro fabrikasyon, Eğitim, Kültür, Spor, Bilim ve Teknoloji Bakanlığı 'Nanoteknoloji Platform Programı (MEXT), Japonya, Grant Number JPMXP09F19UT0087 tarafından desteklenen Tokyo Üniversitesi Takeda Sentanchi Supercleanroom'da gerçekleştirilmiştir.

<ol><li>Chiu, D. T., Lorenz, R. M., Jeffries, G. D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Droplets+for+ultrasmall-volume+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Droplets for ultrasmall-volume analysis.</a> Analytical Chemistry. 81 (13), 5111-5118 (2009).</li>
<li>Squires, T. M., Quake, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidics%3A+fluid+physics+at+the+nanoliter+scale%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+of+Modern+Physics%22%5BJournal%5D)">Microfluidics: fluid physics at the nanoliter scale.</a> Reviews of Modern Physics. 77 (3), 977-1026 (2005).</li>
<li>Guo, M. T., Rotem, A., Heyman, J. A., Weitz, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Droplet+microfluidics+for+high-throughput+biological+assays%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Droplet microfluidics for high-throughput biological assays.</a> Lab on a Chip. 12 (12), 2146-2155 (2012).</li>
<li>Zhu, P. A., Wang, L. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Passive+and+active+droplet+generation+with+microfluidics%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Passive and active droplet generation with microfluidics: a review.</a> Lab on a Chip. 17 (1), 34-75 (2017).</li>
<li>Griffiths, A. D., Tawfik, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Miniaturising+the+laboratory+in+emulsion+droplets%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Miniaturising the laboratory in emulsion droplets.</a> Trends in Biotechnology. 24 (9), 395-402 (2006).</li>
<li>Tran, T. M., Lan, F., Thompson, C. S., Abate, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+tubes+to+drops%3A+droplet-based+microfluidics+for+ultrahigh-throughput+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physics+D%3A+Applied+Physics%22%5BJournal%5D)">From tubes to drops: droplet-based microfluidics for ultrahigh-throughput biology.</a> Journal of Physics D: Applied Physics. 46 (11), 114004(2013).</li>
<li>Zhang, Y., Jiang, X. Microfluidic tools for DNA analysis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhang%2C+Y+%22DNA+Nanotechnology%22">DNA Nanotechnology</a>. Fan, C. , Springer. Heidelberg. 113-153 (2013).</li>
<li>Dubuc, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+microcompartmentalised+transcription-translation+for+the+prototyping+of+synthetic+communication+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Cell-free microcompartmentalised transcription-translation for the prototyping of synthetic communication networks.</a> Current Opinion in Biotechnology. 58, 72-80 (2019).</li>
<li>Damiati, S., Mhanna, R., Kodzius, R., Ehmoser, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+approaches+in+synthetic+biology+utilizing+microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Cell-free approaches in synthetic biology utilizing microfluidics.</a> Genes. 9 (3), (2018).</li>
<li>Lee, K. H., Kim, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+cell-free+protein+synthesis+in+synthetic+biology%3A+Interfacing+bio-machinery+with+synthetic+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Journal%22%5BJournal%5D)">Applications of cell-free protein synthesis in synthetic biology: Interfacing bio-machinery with synthetic environments.</a> Biotechnology Journal. 8 (11), 1292-1300 (2013).</li>
<li>Supramaniam, P., Ces, O., Salehi-Reyhani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidics+for+artificial+life%3A+techniques+for+bottom-up+synthetic+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Micromachines%22%5BJournal%5D)">Microfluidics for artificial life: techniques for bottom-up synthetic biology.</a> Micromachines. 10 (5), (2019).</li>
<li>Bowman, E. K., Alper, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdroplet-assisted+screening+of+biomolecule+production+for+metabolic+engineering+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Microdroplet-assisted screening of biomolecule production for metabolic engineering applications.</a> Trends in Biotechnology. , (2019).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accurate+high-throughput+screening+based+on+digital+protein+synthesis+in+a+massively+parallel+femtoliter+droplet+array%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Accurate high-throughput screening based on digital protein synthesis in a massively parallel femtoliter droplet array.</a> Science Advances. 5 (8), 8185(2019).</li>
<li>Silverman, A. D., Karim, A. S., Jewett, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+gene+expression%3A+an+expanded+repertoire+of+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Genetics%22%5BJournal%5D)">Cell-free gene expression: an expanded repertoire of applications.</a> Nature Reviews Genetics. , (2019).</li>
<li>Sakane, Y., Suzuki, Y., Kasagi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+a+high-performance+perfluorinated+polymer+electret+and+its+application+to+micro+power+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Micromechanics+and+Microengineering%22%5BJournal%5D)">The development of a high-performance perfluorinated polymer electret and its application to micro power generation.</a> Journal of Micromechanics and Microengineering. 18 (10), 104011(2008).</li>
<li>Sakakihara, S., Araki, S., Iino, R., Noji, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-molecule+enzymatic+assay+in+a+directly+accessible+femtoliter+droplet+array%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">A single-molecule enzymatic assay in a directly accessible femtoliter droplet array.</a> Lab on a Chip. 10 (24), 3355-3362 (2010).</li>
<li>Watanabe, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arrayed+lipid+bilayer+chambers+allow+single-molecule+analysis+of+membrane+transporter+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Arrayed lipid bilayer chambers allow single-molecule analysis of membrane transporter activity.</a> Nature Communications. 5, 4519(2014).</li>
<li>Chiu, C., Lisicka-Skrzek, E., Tait, R. N., Berini, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+surface+plasmon+waveguides+and+devices+in+Cytop+with+integrated+microfluidic+channels%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vacuum+Science+%26+Technology+B%22%5BJournal%5D)">Fabrication of surface plasmon waveguides and devices in Cytop with integrated microfluidic channels.</a> Journal of Vacuum Science & Technology B. 28 (4), 729-735 (2010).</li>
<li>Krupin, O., Asiri, H., Wang, C., Tait, R. N., Berini, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biosensing+using+straight+long-range+surface+plasmon+waveguides%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Biosensing using straight long-range surface plasmon waveguides.</a> Optics Express. 21 (1), 698-709 (2013).</li>
<li>Hanada, Y., Ogawa, T., Koike, K., Sugioka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+the+invisible+visible%3A+a+microfluidic+chip+using+a+low+refractive+index+polymer%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Making the invisible visible: a microfluidic chip using a low refractive index polymer.</a> Lab on a Chip. 16 (13), 2481-2486 (2016).</li>
<li>Berry, S., Kedzierski, J., Abedian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+voltage+electrowetting+using+thin+fluoroploymer+films%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Colloid+and+Interface+Science%22%5BJournal%5D)">Low voltage electrowetting using thin fluoroploymer films.</a> Journal of Colloid and Interface Science. 303 (2), 517-524 (2006).</li>
<li>Lin, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+voltage+electrowetting-on-dielectric+platform+using+multi-layer+insulators%5BTitle%5D)+AND+%22Sensors+and+Actuators+B-Chemical%22%5BJournal%5D)">Low voltage electrowetting-on-dielectric platform using multi-layer insulators.</a> Sensors and Actuators B-Chemical. 150 (1), 465-470 (2010).</li>
<li>Kimura, H., Yamamoto, T., Sakai, H., Sakai, Y., Fujii, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+microfluidic+system+for+long-term+perfusion+culture+and+on-line+monitoring+of+intestinal+tissue+models%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">An integrated microfluidic system for long-term perfusion culture and on-line monitoring of intestinal tissue models.</a> Lab on a Chip. 8 (5), 741-746 (2008).</li>
<li>Yang, T. J., Choo, J., Stavrakis, S., de Mello, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluoropolymer-coated+PDMS+microfluidic+devices+for+application+in+organic+synthesis%5BTitle%5D)+AND+%22Chemistry-a+European+Journal%22%5BJournal%5D)">Fluoropolymer-coated PDMS microfluidic devices for application in organic synthesis.</a> Chemistry-a European Journal. 24 (46), 12078-12083 (2018).</li>
<li>de Gennes, P. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wetting%3A+statics+and+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+of+Modern+Physics%22%5BJournal%5D)">Wetting: statics and dynamics.</a> Reviews of Modern Physics. 57 (3), 827-863 (1985).</li>
<li>Holtze, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biocompatible+surfactants+for+water-in-fluorocarbon+emulsions%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Biocompatible surfactants for water-in-fluorocarbon emulsions.</a> Lab on a Chip. 8 (10), 1632-1639 (2008).</li>
<li>Wagner, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biocompatible+fluorinated+polyglycerols+for+droplet+microfluidics+as+an+alternative+to+PEG-based+copolymer+surfactants%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Biocompatible fluorinated polyglycerols for droplet microfluidics as an alternative to PEG-based copolymer surfactants.</a> Lab on a Chip. 16 (1), 65-69 (2016).</li>
<li>Mashaghi, S., Abbaspourrad, A., Weitz, D. A., van Oijen, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Droplet+microfluidics%3A+a+tool+for+biology%2C+chemistry+and+nanotechnology%5BTitle%5D)+AND+%22TrAC+Trends+in+Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Droplet microfluidics: a tool for biology, chemistry and nanotechnology.</a> TrAC Trends in Analytical Chemistry. 82, 118-125 (2016).</li>
<li>Mazutis, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Droplet-based+microfluidic+systems+for+high-throughput+single+DNA+molecule+isothermal+amplification+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Droplet-based microfluidic systems for high-throughput single DNA molecule isothermal amplification and analysis.</a> Analytical Chemistry. 81 (12), 4813-4821 (2009).</li>
<li>Galinis, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((DNA+nanoparticles+for+improved+protein+synthesis+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Angewandte+Chemie-International+Edition%22%5BJournal%5D)">DNA nanoparticles for improved protein synthesis in vitro.</a> Angewandte Chemie-International Edition. 55 (9), 3120-3123 (2016).</li>
<li>Zhang, Y., Noji, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Digital+bioassays%3A+theory%2C+applications%2C+and+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Digital bioassays: theory, applications, and perspectives.</a> Analytical Chemistry. 89 (1), 92-101 (2017).</li>
<li>Mazutis, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+analysis+and+sorting+using+droplet-based+microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Single-cell analysis and sorting using droplet-based microfluidics.</a> Nature Protocols. 8 (5), 870-891 (2013).</li>
<li>Courtois, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+device+for+monitoring+time-dependent+in+vitro+expression+from+single+genes+in+picolitre+droplets%5BTitle%5D)+AND+%22ChemBioChem%22%5BJournal%5D)">An integrated device for monitoring time-dependent in vitro expression from single genes in picolitre droplets.</a> ChemBioChem. 9 (3), 439-446 (2008).</li>
<li>Baret, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surfactants+in+droplet-based+microfluidics%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">Surfactants in droplet-based microfluidics.</a> Lab on a Chip. 12 (3), 422-433 (2012).</li>
<li>Agresti, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh-throughput+screening+in+drop-based+microfluidics+for+directed+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh-throughput screening in drop-based microfluidics for directed evolution.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (9), 4004-4009 (2010).</li>
<li>Fallah-Araghi, A., Baret, J. C., Ryckelynck, M., Griffiths, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+completely+in+vitro+ultrahigh-throughput+droplet-based+microfluidic+screening+system+for+protein+engineering+and+directed+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+on+a+Chip%22%5BJournal%5D)">A completely in vitro ultrahigh-throughput droplet-based microfluidic screening system for protein engineering and directed evolution.</a> Lab on a Chip. 12 (5), 882-891 (2012).</li>
<li>Duncombe, T. A., Dittrich, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Droplet+barcoding%3A+tracking+mobile+micro-reactors+for+high-throughput+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Droplet barcoding: tracking mobile micro-reactors for high-throughput biology.</a> Current Opinion in Biotechnology. 60, 205-212 (2019).</li>
<li>Qin, D., Xia, Y. N., Whitesides, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Soft+lithography+for+micro-+and+nanoscale+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Soft lithography for micro- and nanoscale patterning.</a> Nature Protocols. 5 (3), 491-502 (2010).</li>
<li>Mukhopadhyay, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((When+PDMS+isn%27t+the+best%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">When PDMS isn't the best.</a> Analytical Chemistry. 79 (9), 3248-3253 (2007).</li>
<li>Shaner, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+bright+monomeric+green+fluorescent+protein+derived+from+Branchiostoma+lanceolatum%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">A bright monomeric green fluorescent protein derived from Branchiostoma lanceolatum.</a> Nature Methods. 10 (5), 407-409 (2013).</li>
<li>Bradshaw, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino+acid+sequence+of+Escherichia+coli+alkaline+phosphatase%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Amino acid sequence of Escherichia coli alkaline phosphatase.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 78 (6), 3473-3477 (1981).</li>
<li>Shimizu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell-free+translation+reconstituted+with+purified+components%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Cell-free translation reconstituted with purified components.</a> Nature Biotechnology. 19 (8), 751-755 (2001).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fiji%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Fiji: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Mantilla, C. B., Prakash, Y. S., Sieck, G. C. Volume measurements in confocal microscopy. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMantilla%2C+CB+%22Techniques+in+Confocal+Microscopy%22">Techniques in Confocal Microscopy</a>. Conn, P. M. , Academic Press. Oxford, UK. 143-162 (2010).</li>
<li>Noji, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-molecule+counting+of+biomolecules+with+femtoliter+dropret+chamber+array%5BTitle%5D)+AND+%22The+17th+International+Conference+on+Solid-State+Sensors%2C+Actuators+and+Microsystems+%28TRANSDUCERS+%26+EUROSENSORS+XXVII%22%5BJournal%5D)">Single-molecule counting of biomolecules with femtoliter dropret chamber array.</a> The 17th International Conference on Solid-State Sensors, Actuators and Microsystems (TRANSDUCERS & EUROSENSORS XXVII. , 630-632 (2013).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-localization+for+fast+analysis+of+arrayed+microfluidic+immunoassays%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Methods%22%5BJournal%5D)">Matrix-localization for fast analysis of arrayed microfluidic immunoassays.</a> Analytical Methods. 4 (10), 3466-3470 (2012).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two+dimensional+barcode-inspired+automatic+analysis+for+arrayed+microfluidic+immunoassays%5BTitle%5D)+AND+%22Biomicrofluidics%22%5BJournal%5D)">Two dimensional barcode-inspired automatic analysis for arrayed microfluidic immunoassays.</a> Biomicrofluidics. 7 (3), 034110(2013).</li>
<li>Gonzalez, R. C., Woods, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGonzalez%2C+RC+%22Digital+image+processing%22">Digital image processing</a>. , Pearson. New York, NY. (2018).</li>
<li>Cohen, L., Walt, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-molecule+arrays+for+protein+and+nucleic+acid+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Single-molecule arrays for protein and nucleic acid analysis.</a> Annual Review of Analytical Chemistry. 10 (1), 345-363 (2017).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

FemDA'daki son derece düzgün, kararlı ve biyouyumlu damlacıkları temel alan son derece nicel ölçüm, çalışmamızın diğerlerinden farklı benzersiz özelliği olan ayrık dağılımı sağladı. Bu yazıda mikrofabrikasyon ve damlacık oluşum süreçlerini sistematik olarak optimize ettik ve ayrıntılı olarak anlattık. Kurulan protokolde birkaç kritik adım vardır.
İlk olarak, dikdörtgen ince cam alt tabaka üzerinde son derece viskoz CYTOP polimer düzgün kaplama büyük ölçüde ortaya çıkan substrat kalitesini beli...

Araştırmacılar biyo/kimyasal reaksiyonları gerçekleştirmek için reaktörleri kullanırlar. Reaktörün boyutunu küçültmek ve iş verimliliğini artırırken reaktif tüketimini azaltmak için deneysel verimi artırmak için önemli çabalar gösterilmiştir. Her iki açıdan da araştırmacıları ağır bir iş yükünden kurtarmayı, maliyeti azaltmayı ve araştırma ve geliştirmeyi hızlandırmayı amaçlamaktadır. Reaktör teknolojilerinin gelişimi hakkında reaksiyon hacimleri ve iş hacmi açısından net bir tarihsel yol haritası var: tek beaers / şişe / test tüpleri, mililitre tüpler, mikrolitre tüpler, mikrolitre 8-tüp şeritler, mikrolitre 96/384/1536-iyi plaka, ve mikroakışkan nanolitre / picoliter /femtolitre reaktörler1,2,3,4,5,66. Son yıllarda yarı iletken endüstrisinde ki entegre devre yongalarındaki transistörlerin özellik boyutunu küçültmeye benzer şekilde, biyo/kimyasal mikroreaktörler hacim azaltma ve sistem entegrasyonundan geçmaktadır. Bu tür küçük ölçekli araçlar hücre tabanlı veya hücresiz sentetik biyoloji, biyoüretim ve yüksek iş letibine prototipleme ve tarama8,9,,10,11,12üzerinde derin bir etkisi olmuştur. Bu yazı benzersiz bir damlacık dizi teknolojisinin geliştirilmesi bizim son çaba açıklar ve CFPS13,sentetik biyoloji ve moleküler tarama toplulukları için temel bir teknoloji14onun uygulama göstermektedir. Özellikle, FemDA cihazını herkes için erişilebilir hale getirmek için kasıtlı olarak optimize edilmiş ve düşük maliyetli bir protokol salıyoruz. Minyatürleştirilmiş cihaz için düşük maliyetli ve kullanımı kolay protokol üniversitelerin eğitim amaçlarına katkıda bulunacak ve teknolojinin yayılmasına yardımcı olacaktır.
FemDA, efemtolitre damlacıklarını 1cm 2'de 106'lık ultra yüksek yoğunlukta düzlemsel cam bir yüzey üzerinde hazırlar. Biz bir hidrofobik polimer kaplı, CYTOP15, cam substrat ve seçici kazınmış (kaldırıldı) CYTOP önceden tanımlanmış pozisyonlarda substrat üzerinde bir mikrooda dizi oluşturmak için. Böylece, ortaya çıkan mikrohazon hidrofobik yanak (CYTOP) ve hidrofilik alt (cam) oluşur. Sırayla desenli yüzey üzerinde su ve yağ akan zaman, su sıkışmış ve mikroodaları içine mühürlü olabilir. Hidrofilik-in-hidrofobik yapı mikroodaları dışında su püskürtmeiçin hayati önem taşımaktadır, bireysel mikroreaktörler izole, ve femtolitre alanı içinde küçük bir sulu çözüm istinat. Benzersiz özelliği başarıyla su-in-oil damlacıkları ve lipid bilayer mikrobölmeleri16,,17hazırlanması için uygulanmıştır. Prototip cihaz16ile karşılaştırıldığında, ilk cytop polimer tam bir kaldırma yanı sıra cam alt tam bir pozlama gerçekleştirmek için mikroüretim süreci optimize. CYTOP, cam, plastik ve silikon gibi geleneksel mikroreaktör malzemelerinden son derece düşük yüzey gerilimine (19 mN/m) daha düşük olan özel bir floropolimerdir. Onun iyi optik, elektrik, ve kimyasal performans zaten mikroakışkan cihazların yüzey tedavisinde kullanılmıştır18,19,20,21,22,,23,24. FemDA sisteminde, CYTOP yüzeyinde yağIyi ıslatma elde etmek için, yağ yüzey gerilimi katı yüzey25daha düşük olmalıdır. Aksi takdirde, katı yüzeyle temas eden sıvı yağ, yüzeye yayılmak yerine küresel olma eğilimindedir. Ayrıca, bazı popüler perflorokarbon yağlarının (örneğin, 3M FC-40)16 ve hidrofloroether yağlarının (örneğin, 3M Novec serisi) CYTOP'un amorf morfolojisi sonucunda CYTOP'u eritebileceğini ve damlacıklar arasında çapraz kontaminasyon açısından şüpheli olduğunu bulduk. Neyse ki, daha düşük (< 19 mN/m) yüzey gerilimi sergileyen biyouyumlu ve çevre dostu bir yağ tespit ettik13. Biz de düşük konsantrasyonda seçilen yağ ve fonksiyon çözünebilir yeni bir yüzey aktif bulundu (0.1%, en az 10 kat daha önce bildirilen popüler olanlar26,27)13. Ortaya çıkan su/yağ arabirimi yüzey aktif madde ile stabilize edilebilir. Yağın yüksek buharlaşma oranı nedeniyle, yağ ile floş aşağıdaki, biz mikrochambers mühür ilk yerine başka bir biyouyumlu ve çevre dostu yağ uygulanır. İlk yağa (ASAHIKLIN AE-3000 % 0,1 wt SURFLON S-386) "floş yağı" ve ikinci yağı (Fomblin Y25) sırasıyla "sızdırmazlık yağı" diyoruz.
İki aşamalı yağ sızdırmazlık stratejisi, femtolitre damlacık dizisinin birkaç dakika içinde ve sofistike enstrümantasyon olmadan sağlam bir oluşumunu gerçekleştirebilir. Buharlaşma sorunu nedeniyle, pikolitre hacimleri28daha küçük mikroreaktörler oluşturmak için zor kabul edilmiştir. FemDA bu sorunu mikroreaktörlerin/damlacıkların hazırlanmasında kullanılan malzeme ve prosesleri sistematik olarak optimize ederek ele aldı. Elde edilen damlacıkların dikkat çekici birçok özelliği arasında femtolitre ölçeğinde yüksek tekdüzelik (veya monodispersite), stabilite ve biyouyumluluk sayılabilir. Damlacık hacminin varyasyon katsayısı (CV) sadece %3'tür (mikroskobik görüntüler için vinyet düzeltmesi yapılmadan), dünyadaki damlacık platformları arasında en küçük CV'dir ve bu da son derece paralel ve nicel bir ölçüm sağlar. Femtolitre damlacık, oda sıcaklığındaki damlacıklar arasında çapraz kontaminasyon olmadan en az 24 saat stabildir ve bu da güvenilir bir zaman dilimi ölçümü için değerlidir. Biyouyumluluk ile ilgili olarak, biz daha önce zor veya verimsiz29,30olarak kabul edilmişti femtolitre damlacık, tek kopya şablon DNA çeşitli proteinler sentezleyerek başardı. FemDA'da sentezlenebilen bazı proteinlerin neden diğer damlacık sistemlerinde sentezlenemediğini açıklığa kavuşturmaya değer. FemDA sadece teknik bir ilerleme değildi, aynı zamanda protein verimini (damlacık floresan yoğunluğu tarafından yansıttığı gibi) her damlacıktaki şablon DNA moleküllerinin sayısıyla ilişkilendirebilen eşi görülmemiş nicel bir ölçüm gerçekleştirdi. Sonuç olarak, FemDA tabanlı CFPS damlacıkların floresan yoğunluğunun histogramı, eşit pik-tepe aralıklarında Gauss'un dağılımlarının toplamı ile güzelce monte edilebilen ayrı bir dağılım gösterdi. Ayrıca, farklı sayıda DNA molekülü içeren damlacıkların oluşma olasılığı Poisson dağılımı31'emükemmel bir uyum du. Böylece, her damlacık farklı protein verimi ayrık dağılımına göre normalize edilebilir. Bu kritik özellik, enzimatik aktivite bilgilerini henüz diğer mikroreaktör platformlarında bulunmayan görünür yoğunluktan ayırmamızı sağlar. Mevcut mikroakışkan hücre / damlacık sıralama sistemleri tam otomatik sıralama ve iyi konsantre örnekleri yetenekli ama bazen sadece analitik açıdan nispeten geniş veya uzun kuyruklu histogram çıktı olabilir32,33. Son derece nicel ve biyouyumlu FemDA sistemimiz mikroreaktör geliştirme alanında yeni bir kriter ve yüksek analitik standart belirlemez.
Damlacıkların hazırlanmasında kullanılabilecek yağlar ve yüzey aktif maddeler hala çok sınırlıdır34. FEmDA'da kurulan ASAHIKLIN AE-3000 ve SURFLON S-386 kombinasyonu sulu faz ve petrolfazı 13arasındaki fizyokimyasal arayüzün büyüyen cephaneliğinin yeni bir üyesidir. FemDA yeni arayüzü fiziksel olarak kararlı, kimyasal olarak durağan ve biyolojik olarak karmaşık transkripsiyon, çeviri ve proteinlerin birçok tür için post-çevirisel modifikasyon makine ileuyumludur 13. Bunun yerine damlacık ayarlarında sentezlenemeyen bir protein bulmak oldukça cazip olacaktır. Ayrıca, reaktiflerin maliyet tasarrufu daha nanolitre ve pikolitre reaktör sistemlerinde daha femtolitre damlacık sistemi daha belirgindir35,36. Özellikle, genellikle mikroakışkan damlacık üretim sistemlerinde, ama bizim FemDA esas olarak tüp veya dış malzemeleri neden olduğu büyük bir ölü hacim olurdu. Dizi biçimi aynı zamanda her bir reaktör37için tekrarlanan ve ayrıntılı mikroskobik karakterizasyon (sözde yüksek içerik analizine benzer) tarafından tercih edilir, hızlı hareket eden bir nesne için sadece tek bir anlık görüntü yerine. Femtolitre ölçeği, bir milyondan fazla reaktörün parmak büyüklüğünde bir alana entegrasyonunu sağlarken, aynı sayıda nanolitre reaktör (varsa) metrekare nin üzerinde bir alan gerektirmesine neden oldu ve bu sistem için hiç şüphesiz pratik olmayacaktır.

<table><tbody><tr><td>(3-aminopropil) trietoksisilan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>440140</td><td></td></tr><tr><td>1 mL şırınga</td><td>Terumo</td><td>SS-01T</td><td></td></tr><tr><td>2-propanol</td><td>Kanto Chemical</td><td>EL sınıf</td><td>EL: elektronik kullanım için.</td></tr><tr><td>3D lazer taramalı konfokal mikroskop</td><td>Lasertec</td><td>OPTELICS HYBRID</td><td>Diğer benzer mikroskoplar (örneğin, Keyence VK-X1000, Olympus LEXT OLS5000) da uygulanabilir.</td></tr><tr><td>50 mL şırınga</td><td>Terumo</td><td>SS-50LZ</td><td></td></tr><tr><td>6,8-difloro-4-metilumbelliferil fosfat</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D6567</td> Dimetil sülfoksit Aseton Kanto Kimyasal EL sınıfı <td>EL'de 5 mM'lik bir stok çözeltisi hazırlayın</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>: elektronik kullanım için. Saflık% 99,8.</td></tr><tr><td>Hava üfleyici</td><td>Hozan</td><td>Z-263</td><td></td></tr><tr><td>Alüminyum blok</td><td>BIO-BIK</td><td>AB-24M-02</td><td></td></tr><tr><td>Alüminyum mikrotüp standı</td><td>BIO-BIK</td><td>AB-136C</td><td></td></tr><tr><td>ASAHIKLIN AE-3000</td><td>AGC</td> <td>(Test örneği)</td> <td>AGC'ye yapılan soruşturma üzerine ücretsiz test örneği temin edilebilir.</td></tr><tr><td>BEMCOT PS-2 silecek</td><td>Ozu</td><td>028208</td><td></td></tr><tr><td>Pistonlu biyopsi zımbası</td><td>Kai</td><td>BPP-10F</td><td></td></tr><tr><td>Kapak camı</td><td>Matsunami Camı</td><td>No. 1 (24 mm ve kez; 32 mm, 0.13 ~ 0.17 mm kalınlık)</td> <td>Boyuta özel.</td></tr><tr><td>Kapak cam boyama rafı</td><td>Nakayama</td><td>803-131-11</td><td></td></tr><tr><td>CRECIA TechnoWipe temiz silecek</td><td>Nippon Kağıt Crecia</td><td>C100-M</td><td></td></tr><tr><td>Kesme matı</td><td>GE Sağlık</td><td>WB100020</td><td></td></tr><tr><td>CYTOP</td><td>AGC</td><td>CTL-816AP</td><td></td></tr><tr><td>Hava alma karıştırıcısı</td><td>Thinky</td><td>AR-100</td><td></td></tr><tr><td>Masaüstü kesici</td><td>Roland</td><td>STIKA SV-8</td><td></td></tr><tr><td>Geliştirici</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZ 300 MIF</td><td>AZ Electronic Materials şimdi Merck. tarafından satın alındı Diğer alkali geliştiriciler de uygulanabilir olabilir, ancak geliştirme koşullarının (zaman, sıcaklık vb.) optimizasyonunu gerektirmelidir.</td></tr><tr><td>Çift taraflı yapışkan Kapton film bandı</td><td>Teraoka Seisakusho</td><td>7602 # 25</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Kanto Chemical</td><td>EL sınıfı</td><td>EL: elektronik kullanım için. Saflık% 99,5.</td></tr><tr><td>Fiji</td><td></td><td></td><td>Sürümü: ImageJ 1.51n</td></tr><tr><td>Düz kablo kesici</td><td>Tokyo-IDEAL</td><td>MT-0100</td><td></td></tr><tr><td>Fomblin yağı</td><td>Solvay</td><td>Y25 veya Y25/6</td><td>Ücretsiz test örneği, Solvay'a yapılan soruşturma üzerine temin edilebilir. Fomblin Y25/6, Y25 hazır değilse bir alternatiftir.</td></tr><tr><td>Sıcak plaka</td><td>AS ONE</td><td>TH-900</td><td></td></tr><tr><td>Enjeksiyon iğnesi</td><td>Terumo</td><td>NN-2270C</td><td>22G ve zamanları; 70 mm</td></tr><tr><td>Ters floresan mikroskobu</td><td>Nikon</td><td>Eclipse Ti-E</td><td>Epifloresan özelliği, CCD veya sCMOS kamera, motorlu sahne, otofokus sistemi ve yüksek NA objektif lens gereklidir.</td></tr><tr><td>KaleidaGraph</td><td>Synergy</td><td></td><td>Sürümü: 4.5</td></tr><tr><td>Maske hizalayıcı</td><td>SUSS</td><td>MA-6</td><td>Vakum temas modu mevcut olduğu sürece diğer maske hizalayıcıları da uygulanabilir.</td></tr><tr><td>MICROMAN pipet</td><td>GILSON</td><td>E M250E</td><td>Kılcal piston ucu: CP250</td></tr><tr><td>Microsoft Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td>Sürüm: 16.16.15</td></tr><tr>BİR <td>MVP-100MV</td><td></td><td>GİBİ</td><td>mini vakum odası</td></tr><tr><td>Nükleaz içermeyen su</td><td>NIPPON GENE</td><td>316-90101</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Amcor</td><td>PM-996</td><td></td></tr><tr><td>PCR tüpü</td><td>NIPPON Genetiği</td><td>FG-021D/SP</td><td></td></tr><tr><td>Petri kabı</td><td>AS ONE</td><td>GD90-15</td><td>Çap 90 mm, yükseklik 15 mm.</td></tr><tr><td>Photoresist</td><td>AZ Electronic Materials</td><td>AZ P4903</td><td>AZ Electronic Materials şimdi Merck tarafından satın alındı. AZ P4620 bir alternatiftir.</td></tr><tr><td>Plaka okuyucu</td><td>BioTek</td><td>POWERSCAN HT</td><td></td></tr><tr><td>Polietilen eldiven</td><td>AS ONE</td><td>6-896-02</td><td>Ticari adı: Saniment.</td></tr><tr><td>PURExpress in vitro protein sentez kiti</td><td>New England Biolabs</td><td>E6800S veya E6800L</td><td>Hücresiz protein sentezi reaksiyonu için.</td></tr><tr><td>Reaktif iyon aşındırma sistemi</td><td>Samco</td><td>RIE-10NR</td><td>Diğer RIE sistemleri de uygulanabilir ancak RIE koşullarının (gaz akış hızı, oda basıncı, RF gücü, aşındırma süresi vb.) optimizasyonunu gerektirmelidir.</td></tr><tr><td>RNase inhibitörü</td><td>New England Biolabs</td><td>M0314S</td><td></td></tr><tr><td>Scotch bant</td><td>3M</td><td>810-1-18D</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum hidroksit çözeltisi</td><td>FUJIFILM Wako Saf Kimyasal</td><td>194-09575</td><td>8 M konsantrasyon; tehlike.</td></tr><tr><td>Spin kaplayıcı</td><td>Oshigane</td><td>SC-308</td><td></td></tr><tr><td>SURFLON S-386 yüzey aktif madde</td><td>AGC</td> <td>(Test örneği)</td> <td>AGC'ye sorulduğunda ücretsiz test örneği mevcut olabilir.</td></tr><tr><td>SYLGARD 184 silikon elastomer</td><td>Dow</td><td>Sylgard184</td><td>Kimyasal bileşim: polidimetilsiloksan. Varsayılan karışım oranı bazdır: kürleme maddesi = 10 : 1 (m/m).</td></tr><tr><td>Cımbız</td><td>İdeal-tek</td><td>2WF. SA.1 2A</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonik temizleyici</td><td>AS ONE</td><td>ASU-2M</td><td></td></tr><tr><td>Vakumlu ayna</td><td>Oshigane</td> <td>(Özelleştirilmiş)</td> <td>Malzeme: delrin; çok delikli dikdörtgen numune aşaması (her biri 1 mm çapında 48 delik); Boyut, kapak camının boyutuna (24 mm ve kez; 32 mm) uyacak şekilde özelleştirilmiştir.</td></tr></tbody></table>

tek dna moleküllerinden kitlesel paralel protein sentezi için femtolitre damlacık dizisi

A Femtoliter Droplet Array for Massively Parallel Protein Synthesis from Single DNA Molecules

Bilimsel enstrümantasyonun mekansal çözünürlük ve algılama duyarlılığındaki gelişmeler, biyolojik ve kimyasal araştırmalar için küçük reaktörlerin uygulanmasını mümkün kılabilir. Yüksek performanslı mikroreaktörlere olan talebi karşılamak için femtolitre damlacık dizisi (FemDA) cihazı geliştirdik ve büyük ölçüde paralel hücresiz protein sentezi (CFPS) reaksiyonlarında uygulamaya örnek verdik. Bir milyondan fazla tek tip damlacık, iki aşamalı bir yağ sızdırmazlık protokolü kullanılarak parmak büyüklüğünde bir alanda kolayca üretildi. Her damlacık hidrofilik bir alt ve hidrofobik bir yanak oluşan bir femtolitre mikrohazna demirledi. Hibrit hidrofilik-in-hidrofobik yapısı ve özel sızdırmazlık yağları ve yüzey aktif maddeler buharlaşma kaybı olmadan femtolitre uzayda femtolitre sulu çözeltisi stably istinat için çok önemlidir. Femtolitre konfigürasyonu ve FemDA cihazının basit yapısı minimum reaktif tüketimine olanak sağladı. Damlacık reaktörlerinin tek düze boyutu, büyük ölçekli nicel ve zaman-kurs ölçümleri ikna edici ve güvenilir yaptı. FemDA teknolojisi CFPS reaksiyonunun protein verimini her damlacıktaki DNA moleküllerinin sayısıyla ilişkilendirdi. Cihazın mikro imalatı, femtolitre damlacıklarının oluşumu ve mikroskobik görüntü verilerinin elde edilmesi ve analizi ile ilgili prosedürleri kolaylaştırdık. Optimize edilmiş düşük çalışma maliyeti ile ayrıntılı protokol FemDA teknolojisi standart temiz oda tesisleri ve kendi yerinde geleneksel floresan mikroskop olan herkes için erişilebilir hale getirir.

Mikrofabrikasyon işlemi substrat temizliği, yüzey işlevselleştirmesi, CYTOP kaplama, fotolitografi, kuru gravür, fotodirenç sıyırma ve son temizlikten oluşmaktadır. Daha da önemlisi, sunulan protokol, standart kapaklı cam yüzey üzerinde son derece paralel hidrofilik-in-hidrofobik bir yapı üreten mikrochambers Şekil 3Aiçinde hidrofobik CYTOP polimerin tamamen çıkarılmasına olanak sağlamıştır. Yağ sızdırmazlık protokolü yardımıyla, ortaya çıkan damlacıkların tek düze boyutu mikroodalarda flore...

Protokolün genel amacı, hücre içermeyen protein sentezi için kullanılabilecek 1 cm2 düzlemsel substrat üzerinde bir milyondan fazla sipariş, üniforma, kararlı ve biyouyumlu femtolitre damlacıkları hazırlamaktır.

Tek DNA Moleküllerinden Kitlesel Paralel Protein Sentezi için Femtolitre Damlacık Dizisi

Advances in spatial resolution and detection sensitivity of scientific instrumentation make it possible to apply small reactors for biological and ...

Damlacıklardan bir milyondan fazla üniforma parmak büyüklüğünde substrat üzerinde üretilmektedir. Ve tek DNA molekülleri her damlacık içine rastgele dağıtılır. Protein verimi bir damlacıktaki molekül sayısıile orantılıdır.Tekniğimiz karmaşık protein ekspresyonu ve saflaştırma olmadan enzim aktivitesinin hızlı ve nicel ölçümü için kullanılabilir. Başlamak için, bir boyama raf üzerinde bir kapak cam ayarlayın ve sekiz azı lı sodyum hidroksit raf yerleştirin. Kapak camı ve boyama rafını oda sıcaklığında 15 dakika sonicate edin.Boyama rafını sodyum hidroksitten çıkarın ve kapak camı 10 kez suyla durulayın. Kapak camı hava tabancasıyla kurulayın. Sonra fırında ve beş dakika boyunca 200 derece santigrat bir sıcak tabakta kapak cam kuru.%0.05 aminosilane çözeltisi hazırlayın. Kapak camı bu çözeltiye batırın ve oda sıcaklığında bir saat kuluçkaya yatırın. Kapak camı saf suda beş kez durulayın.Sonra bir hava tabancası kullanarak kapak cam kuru. Beş dakika boyunca 80 derece santigrat sıcak tabakta pişirin. Kapak cam yüzeyini spin kaplama için özelleştirilmiş bir vakum lu aynaya yerleştirin.Cam substratının ortasına 70 ila 90 mikrolitre tip-A CYTOP polimer dağıtın. Sonra hemen polimer spin-co

a-femtoliter-droplet-array-for-massively-parallel-protein-synthesis

Research

JoVE Journal

Chemistry

Kimya

Biz protein dizilerin ifade etmek için bir mikroakışkan bir yaklaşım sunuyoruz. Cihaz, mikro-mekanik vana ile kontrol reaksiyon odaları binlerce oluşur. Mikroakışkan cihaz bir mikro baskılı gen kütüphanesi ile birleştirilmiştir. Bu genler daha sonra transkripsiyonu ve deneysel kullanıma hazır bir protein dizisi sonucunda, on-chip çevrilir.

Bir mikroakışkan Platform kullanarak Yüksek throughput Protein Ekspresyonu Jeneratör

Yapı-esaslı ecza tasarımı ilaç gelişmesinde önemli bir rol oynar. Paralel olarak birden çok hedef edinerek büyük ölçüde kurşun keşfi için başarı şansını artırır. Aşağıdaki makale Enfeksiyon Hastalıkları için Seattle Yapısal Genomik Merkezi PB2 influenza A alt birimi gen-için-yapı tayini için bir çoklu hedef yaklaşım kullanır nasıl vurgulamaktadır.

Grip Polimeraz Gen-to-yapı belirlenmesi PB2 alt birimi için çoklu hedef Paralel İşleme Yaklaşımı

Bu protokol hücre sinyal çalışmalar ve biyolojik belirteç tespiti potansiyel uygulamalar ile büyük ölçekli imalat, mültipleksli iki boyutlu DNA veya antikor dizisi, özetlemektedir.

Yüksek yoğunluklu Barkod Antikor Mikroarray Akışı-desen Rehberli Fabrikasyon

Sıvı işleme robotlar üzerinde modüler bir klon DNA derleme yöntemi kullanılarak modüler DNA "aygıt" derleme gerçekleştirmek için otomatik bir iş akışı burada anlatılan. Protokol bir sezgisel yazılım aracı kullanarak iki sıvı taşıma platformları göstermek Kombinatorik DNA aygıt kitaplığı oluşturma için sıvı işleyicisi picklists üretmek için kullanır.

Robot sıvı işleme derleme modüler DNA cihazların otomatik

Burada adresli damlacık microarrays (ADM'ler), bir damlacık array tabanlı yöntemi mutlak protein bolluk içinde tek hücreleri belirlemek mümkün mevcut. Biz heterojenite tümör baskılayıcı protein p53 bir insan kanser hücre satırı ifade derecesinin ADM'ler kapasitesini göstermek.

Proteinler adresli damlacık Microarrays ile tek kişilik hücrelerde sayma

Bu eser mikrosıvısal damlacık tabanlı platformlar imalatı ve polyacrylamide mikroküreler microsphere-PCR güçlendirme için uygulanması için bir yöntem sağlar. Microsphere-PCR yöntemi, Çift iplikçikli DNA ayıran olmadan tek iplikçikli DNA amplicons elde olanak verir.

Bir damlacık dayalı mikrosıvısal yaklaşım ve Microsphere-PCR güçlendirme tek iplikçikli DNA'Amplicons için

Bu iletişim kuralı adımları, maliyetleri ve ekipman E. colioluşturmak için gerekli ayrıntıları-hücre özleri dayalı ve 4 gün içinde veya daha az vitro protein sentez reaksiyonları uygulamak. Bu platformun geniş uygulamalar için esnek yapısı kullanabilmeniz için biz uyarlanmış ve en iyi duruma getirilmiş reaksiyon koşulları tartışıyorlar.

Escherichia coli-boş hücre Protein sentezi dayalı: sağlam, esnek ve erişilebilir platform teknolojisi için iletişim kuralları

Bu makalede, yerinde üretilen nükleik asit mikrodizilerinin sentezi ve uygulamalarındaki yeni gelişmeleri sunmakta ve tartışıyoruz. Özellikle, DNA sentezi protokollerinin RNA'ya nasıl genişletilebileceğini ve mikrodizilerin geri alınabilir nükleik asit kitaplıkları oluşturmak için nasıl kullanılabileceğini gösteriyoruz.

Yüksek Yoğunluklu DNA ve RNA mikrodizileri - Fotolitografik Sentez, Hibridizasyon ve Büyük Nükleik Asit Kütüphanelerinin Hazırlanması

In vitro transkripsiyon reaksiyonlarını düzenlemek için yeni bir DNA bağlı T7 RNA polimerazının mühendisliğini anlatıyoruz. Protein sentezi ve karakterizasyonu için adımları tartışıyoruz, kavram kanıtı transkripsiyonel düzenlemeyi doğrulıyoruz ve moleküler bilgi işlem, teşhis ve moleküler bilgi işlemedeki uygulamalarını tartışıyoruz.

Programlanabilir In vitro Transkripsiyon ve Moleküler Hesaplama için DNA-Bağlı RNA Polimeraz

Çalışma, sentetik gen parçalarından protein tarama kampanyaları için klonlama yapmadan veya canlı hücreler kullanmadan büyük (μg-mg) miktarlarda DNA oluşturmak için bir protokol tanımlamaktadır. Minimal şablon enzimmatik olarak sindirilir ve daireselleştirilir ve daha sonra izotermal yuvarlanan daire amplifikasyonu kullanılarak yükseltilir. Hücresiz ifade reaksiyonları, teşvik edilmemiş ürünle gerçekleştirilebilir.

Hücresiz Sistemler Kullanarak Protein Prototipleme için Minimal, Doğrusal Şablonların Amplifikasyonu için Hızlı, Enzymatik Yöntemler

Keşfedin femtolitre damlacık dizisi kullanarak tek DNA moleküllerinden kitlesel paralel protein sentezi yöntemini. Bu teknik, hücre dışı protein sentezi ve enzim aktivitesi ölçümünü hızlandırır.

Tek DNA Moleküllerinden Kitlesel Paralel Protein Sentezi için Femtolitre Damlacık Dizisi

Daha fazla video keşfet