Tamamlayıcı Pıhtı Karakterizasyonu için Bulanıklık ve Tromboelastografiden Yararlanma

Tromboelastografi ve bulanıklık tahlilleri pıhtı karakterizasyonu için iki basit ve ayırt edici yöntemdir. Bu teknikler birlikte pıhtılaşma değişkenlerinin pıhtı özelliklerini nasıl etkilediğikonusunda daha kapsamlı bir anlayış sunar. Bu tahlillerin her ikisi de, sadece uç nokta pıhtı analizi sunmak değil, aynı zamanda zaman içinde fibrin pıhtı oluşumu çekmek, diğer birçok pıhtı karakterizasyon araçları aksine Bu teknikler tromboz hastalarının fibrinolitik devlet güvenilir tanı sağlayabilir fizyolojik olarak ilgili sentetik pıhtı platformu geliştirmeye yardımcı olabilir zaman içinde pıhtı bulanıklığı izlemek için, 350-700 nanometre bir absorbans aralığı olan herhangi bir ticari olarak kullanılabilir spektrometre kullanın.

Spektrometreyi açın ve ilgili analiz yazılımını açın. Ardından birinci plakayı seçin ve plaka ayarları sekmesini açın. Zaman içinde dinamik bir emiciliği izlemek için ABS ve kinetik'i tıklatın.

Dalga boyu sekmesinde 550 nanometre seçin, ardından zamanlama sekmesine geçin ve toplam çalışma süresini 30 saniye lik bir aralıkla 60 dakikaya ayarlayın, bunları vurgulayarak ilgi kuyularını seçin. Pipet 140 mikrolitre PBS uv şeffaf 96 kuyu plakabir kuyuiçine. Sonra trombin 10 mikrolitre ekleyin ve karıştırın, hemen iyi ve pipet beş kez yukarı ve aşağı kabarcıklar oluşturmayı önlemek için özen pipet sadece ilk durağı kullanarak fibrinojen 50 mikrolitre ekleyerek pıhtılaşma başlatmak.

Plakayı plaka tutucuya yerleştirin ve bulanıklık okumasını başlatmak için yazılımda okumayı tıklatın. Okuma, bulanıklık verilerini aldığında ve zaman içinde emicilerin değişimini çizerek bulanıklık izleme eğrisi elde ettiğinde, zaman içinde eğrinin maksimum emici değerini alarak maksimum bulanıklık elde edin, ardından maksimum bulanıklığı 0,9 ile çarparak maksimum bulanıklığı %90 hesaplayın. Pıhtı başlatmadan %90 maksimum bulanıklığa kadar olan zamanı hesaplayarak maksimum bulanıklığa kadar geçen süreyi elde edin.

Tromboelastografiyi veya TEG analizörü açın ve sıcaklığın 37 santigrat derecede sabitolmasını bekleyin, sonra TEG yazılımını açın ve KIMLIK bölümünün altında bir deneme adı oluşturun. TÜM KANALLAR İçİn eTest testi yapmak için TEG sekmesini tıklayın ve ekrandaki istemleri takip edin. Ardından tüm kontroller tamamlandıktan sonra kolu yük konumuna geri yerleştirin.

Kullanılacak kanallar için bilgi sayfasında yapılanları tıklatın ve örnek bilgileri girdi. İlgili kanala açık bir kaplamasız TEG kabı yerleştirin. Taşıyıcıyı yukarı doğru kaydırın ve pini burulma çubuğuna sabitlemek için bardağın alt altına beş kez bastırın ve ardından taşıyıcıyı düşürün ve tıklanına kadar bardağı tabanına doğru bastırın.

Pipet 20 mikrolitre trombin çözeltisi TEG kabına, daha sonra 360 mikrolitre pıhtılaşma çözeltisi elde etmek için bardağa 340 mikrolitre fibrinojen ekleyerek pıhtılaşmayı başlatın. Beş kez yukarı ve aşağı boru lama tarafından fincan içeriğini karıştırın. Fincan yüklü taşıyıcıyı yukarı kaydırın kolu okuma konumuna getirin ve TEG okumasını başlatmak için yazılımda başlat'a tıklayın.

Okuma tamamlandıktan sonra parametreleri alın ve zaman içinde genlik çizerek bir TEG izleme eğrisi elde edin. MA'yı maksimum genlik olarak seçin, bu da pıhtı zorlanmasının ve TMA'nın yazılımdan maksimum genliğe kadar zaman olarak göstergesidir. Temsili bulanıklık ve farklı fibrinojen düzeylerinde insan ve büyükbaş fibrin pıhtılarının TEG izleme eğrileri burada gösterilmiştir.

Takip eğrileri pıhtı inisiyasyonu ndan sonraki bir gecikme döneminden sonra pıhtı oluşumunun sonunda zamanla pıhtı bulanıklığının veya pıhtı genliğinin arttığını ve seviyelerde arttığını göstermektedir. Maksimum bulanıklık ve maksimum bulanıklık için zaman bulanıklık türetilen iki parametre, maksimum genlik ve maksimum genlik için zaman TEG türetilmiştir. Pıhtılaşma çözeltisinde daha yüksek bir fibrinojen seviyesinde dört değer de artar.

Maksimum bulanıklık, fibrin lif kalınlığı ve fibrin ağ yoğunluğunun göstergesi olan pıhtı yapısının optik bir ölçüsüdür. Maksimum genlik mutlak pıhtı gerilimini yansıtan mekanik bir ölçü iken, iki değer birlikte alındığında pıhtı mikro yapıları hakkında ücretsiz bir fikir sağlar. Bu yordam, esas olarak fibrin polimerizasyonunu etkileyen değişkenleri incelemek için basitleştirilmiş bir pıhtılaşma modeli göstermektedir.

Bu model, diğer parametreleri incelemek için ek pıhtılaşma faktörleri nin eklenmesi yle özelleştirilebilir. Pıhtılaşma modeli, pıhtı oluşumunu ve antitrombotik ilaçların varlığında hayal kırıklığını izlemek için klinik plazma örnekleri kullanılarak kolayca değiştirilebilir. Sonuçlar hastalarda terapötik tedaviye rehberlik edebilir.