Donma ve Uçuş Davranışını İncelemek İçin Yeni Bir Pavlovian Korku Şartlandırma Paradigması

Bu paradigmanın genel amacı kemirgenlerdeki karmaşık savunma davranışını değerlendirmektir. Bu protokol önemlidir, çünkü savunma davranışları arasındaki geçişlerle ilgili araştırmaları kolaylaştırır ve bu da onu tehdide karşı karmaşık uyarlanabilir yanıtları incelemek isteyen araştırmacılar için ideal hale getirir. Bu protokol, savunma yanıtları arasında geçiş sağlamak için geçici olarak hassas durum uyaranlarını kullanır ve bireysel denek içinde her ikisini de, koşullandırılmış donma ve uçuş davranışlarını incelememizi sağlar.

Savunma davranışının mekanizmalarını ortaya çıkarmak için bu modeli kullanmak, TSSB ile ilgili işlev bozukluğu ve panik bozukluklar hakkında fikir verebilir ve yeni terapötiklerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Davranış protokollerini ayarlamak için, programda SCS'yi tanımlayın, uyaranları on saniyelik saf ton veya on saniyelik Beyaz Gürültü olarak ayarlayın ve her denemeyi takiben sahte rastgele sunulacak deneme aralıklarını tanımlayın. Yazılım izlemeyi ayarlamak için, ilgili her bağlamda bir test faresi yerleştirin, ağırlık merkezini tanımlayın ve kontur boyutunu ayarlayın.

Kalibrasyon katsayısını belirlemek için odaların boyutunu ve kameranın piksel boyutlarını kullanın. Ardından, merkezi bilgisayarın olay işaretçilerini gerçek zamanlı oluşumlarıyla eşitlemek için TTL darbe kodunu oluşturun. Bir deneye başlamadan önce korku koşullandırma kutusu denetleyicisini, şoklayıcıyı ve video kayıt yazılımını açın.

İşitsel uyaranların 75 desibelde teslimi için bağlamların üzerine bir tepegöz hoparlör takın ve önceden tanımlanmış bir programda işitsel uyaranlar oluşturmak için programlanabilir bir ses jeneratörü ayarlayın. Ton ve Beyaz Gürültü'nün işlevsel olduğunu doğruladıktan sonra, veri toplama sistemini ayarlayın ve üç ila beş aylık erkek veya dişi fareleri koşullandırma odasına taşıyın. Ön koşul denemesine başlamadan önce, Bağlam A odası olarak kullanılacak% 1 asetik asit ile 30 santimetre çapında, 30 santimetre yüksekliğinde açık silindirik pleksiglas bir oda temizleyin.

Önkoşul için, fareyi Bağlam A'ya yerleştirin ve fareyi 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığına sahip dört 20 saniyelik SCS izine maruz bırakmadan önce üç dakika boyunca alışmasına izin verin. 10 dakikalık alışmadan sonra, bir fareyi Bağlam A odasına aktarın ve hemen korku koşullandırma sistemini ve veri toplama programlarını etkinleştirin. Bir korku şartlandırma deneyine başlamadan önce, bağlam B odası olarak kullanılacak% 70 etanollü bir elektrik şebekesi zemini ile en az 35 santimetre yüksekliğinde, 25'e 30 santimetre dikdörtgen bir muhafaza temizleyin.

Ardından, şoklayıcıyı Bağlam B odasının elektrik şebekesi zeminine bağlayın ve uygun bilgisayar programındaki şokların sıklığını, başlangıcını ve süresini tanımlayın. Tüm parametreler ayarlandığında, şok yoğunluğunun hem şok edici hem de ızgara zeminden düzgün bir şekilde teslim edildiğinden emin olun. İkinci ve üçüncü günlerde, hayvanı bir saniye, 0,9 miliamp AC ayak şoku ve 120 saniyelik ortalama deneme aralığı ile birlikte sonlandırırken SCS'nin beş eşleşmesine maruz kalmadan önce fareyi üç dakika boyunca Bağlam B odasına yerleştirin.

Oturumun sonunda, fareyi ev kafesine geri koyun. Deneyin amacına bağlı olarak, hayvanları bir Geri Çağırma oturumuna tabi etmek için, dördüncü günde, fareyi, hayvanın Korku Hatırlama yanıtını test etmek için 590 saniye boyunca 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığı ile ayak şoku olmadan dört SCS denemesi sunmadan önce üç dakika boyunca Bağlam A odasına yerleştirin. Veya, Fear Extinction için test etmek için, dördüncü günde, fareyi, hayvanı 1,910 saniyelik bir süre boyunca 90 saniyelik ortalama sözde rastgele deneme aralığı ile ayak şoku olmadan 16 SCS denemesine tabi tutmadan önce üç dakika boyunca Bağlam B odasına yerleştirin.

Farenin davranışını ölçmek için, deneyin sonunda, analize kör bir gözlemciye sahip olun, otomatik dondurma dedektörü eşiğini kullanarak donma davranışı için kaydedilen videoları puanladı ve ardından piksel değişikliklerinin kare kare analizi yapıldı. Dondurmayı, en az bir saniye solunum için gerekli olanlar dışında, bedensel hareketlerin tamamen durması olarak tanımlayın. Dört pençenin de zeminden ayrılmasıyla dikey ve/veya yatay bir hareketle sonuçlanan bir örnek olarak bir sıçrama puanlayın.

Tüm segment analiz edildiğinde, işaretli dosyayı dondurma, atlama ve olay işaretçileriyle dışa aktarın ve ilgili olayları tanımlanan zaman dilimlerinden bir elektronik tabloya ayıklayın. Dondurma süresini hesaplamak için, ilgili her deneme döneminin bitiş saatinden başlangıç saatini çıkarın. Belirli bir deneme süresinden toplam atlama sayısını toplayın.

Farenin hızını hesaplamak için, farenin ağırlık merkezinin kare kare XY ekseni hareketinden koordinatları izleyin. Uçuş puanlarını hesaplamak için, her SCS sırasındaki ortalama hızı on saniyelik SCS öncesi ortalama hıza bölün ve her kaçış atlayışı için bir puan ekleyin. Bir uçuş puanı, SCS öncesi dönemden itibaren uçuş davranışında bir değişiklik olmadığını gösterir.

Daha sonra, uygun bir istatistiksel analiz yazılım programı kullanarak istatistiksel öneme sahip verileri analiz edin. Ön pozlama oturumundaki SCS sunumları farelerde uçuş veya donma tepkileri ortaya çıkmaz. Koşullandırma sırasında yapılan davranışsal analiz, SCS'nin Ton bileşeninin SCS öncesi dönemde donmaya kıyasla donma olasılığını önemli ölçüde artırdığını ortaya koymaktadır.

Uçuş puanları seanslar arasında önemli ölçüde değişti ve fareler Ton işaretine kıyasla Daha yüksek hızlar ve Beyaz Gürültü işaretine daha fazla sıçrama sergiliyor. Fareler, Ton sırasında daha düşük uçuş puanları ve Beyaz Gürültü sırasında daha yüksek uçuş puanları sergileyen ve donma yanıtları için tam tersi gözlemlenen açık bir savunma davranışı geçişi gösterir. 16 yok olma eğitimine tabi tutulan fareler, ton işaretine kıyasla Beyaz Gürültü sırasında daha yüksek ölçümler yapılan dört denemenin ilk bloğu sırasında dövüş puanları ile koşullu uçuşun hızlı bir şekilde yok olduğunu göstermektedir.

Yok olma seansının sonunda, uçuş davranışı artık her iki işaret tarafından da ortaya çıkarılıyor. Tona donmak, yok olma sırasında dört denemenin ilk bloğu için Beyaz Gürültü'ye donmaktan önemli ölçüde daha yüksektir. Ton kaynaklı donma, 16 yok olma denemesinde azalırken, Beyaz Gürültü aracılı donmada bir artış gözlenmektedir.

Geri Çağırma oturumunda, uçuş puanları birin altında olduğu için nötr bir bağlamda Beyaz Gürültüye maruz kalmak uçuşa neden olmaz. Bunun yerine, nötr bağlamdaki Beyaz Gürültü sunumları, Ton tarafından ortaya çıkanlardan daha yüksek donma tepkileri ortaya çıkarır. Bağlamı boyunca temizlemek önemlidir ve bir deneye başlamadan önce şok genliği ve ses basıncı seviyesini test etmek önemlidir.

Bu paradigma şu anda savunma davranışının karmaşıklığını anlamakla ilgilenen gruplar tarafından kullanılmaktadır ve savunma eylemi seçimi anlayışımızı ilerletmek için kullanılabilir.