Name: Diş Çürüklerini Önlemek İçin Bitkilerin Özlerinden ve Fraksiyonlarından Yeni Antimikrobiyal ve Antibiyofilm Moleküllerini Tanımlamak için Sistematik Yaklaşım (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-03-31T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 20 s
Description: Keşfedin, bitki özlerinden antimikrobiyal ve antibiyofilm bileşikleri izole etmek için ultrason destekli ekstraksiyon yöntemini. Streptococcus mutans üzerindeki etkileri değerlendirerek diş çürüklerine karşı doğal ürünler geliştirin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

UnESP, Araraquara/SP Kimya Enstitüsü'nden Núcleo de Bioensaios, Biossíntese e Ecofisiologia de Produtos Naturais'e (NuBBE) tesis malzemesi hazırlamak için laboratuvarları sağladığı için şükranlarımızı sunuyoruz. Diş Malzemeleri ve Prosthodonti Bölümü, UNESP, Araraquara/SP Uygulamalı Mikrobiyoloji Laboratuvarı'na da teşekkür ediyoruz. Bu araştırma, São Paulo Araştırma Vakfı'nın (FAPESP #2013/07600–3'ten AJC'ye) bir araştırma hibesi ve bursların yanı sıra genel gider fonları (FAPESP #2017/07408–6 ve FAPESP #2019/23175-7'den SMR'ye; #2011/21440–3 ve #2012/21921–4 ila PCPB). FAPESP ile birlikte Ulusal Bilimsel ve Teknolojik Gelişim Konseyi ek destek sağladı (INCT CNPq #465637/2014–0 ve FAPESP #2014/50926–0'dan AJC'ye).

Çıkar çatışması bildirilmedi.

Doğal ham özlerle yapılan çalışmalarla ilgili temel zorluklar, karmaşık bileşimlerini ve klasik biyo-güdümlü izolasyon çalışmalarının yetersizliklerini içerir. Bu süreç yavaş olmasına rağmen etkilidir ve NP araştırmalarında önemli bulgulara yol açmıştır. Rasyonalize etmek için önceliklendirme odaklı çalışmalara ihtiyaç vardır. Bu nedenle, izolasyondan önce CE ve dereplication analizi için modern kimyasal profilleme yaklaşımlarının kullanılması, çalışılan malzemeyi karakterize etmek için önemlidir ve özellikle biyolojik a...

Toplumlarda kullanılan en eski tıp modelleri doğal ürünlere (NP) dayanıyordu. O zamandan beri, insanlar doğada ilaçlara dönüştürülebilecek yeni kimyasallararıyorlar 1. Bu arama, etnobotanik tarama 1,2,3için teknolojilerin ve yöntemlerin sürekliiyileştirilmesineneden oldu. NP'ler, alternatif veya yardımcı tedaviler geliştirmek için yararlı olan çok çeşitli biyolojik faaliyetlerle, yapısal olarak çeşitli maddelerin zengin bir kaynağını sunar. Bununla birlikte, doğal karmaşık bitki matrisi, aktif bileşiklerin izolasyonu ve tanımlanmasını zorlu ve zaman alıcı bir görev haline getirir4.
NPS bazlı ilaçlar veya formülasyonlar, diş çürükleri de dahil olmak üzere ağızları etkileyen çeşitli durumları önlemek ve / veya tedavi etmek için kullanılabilir4. Küresel olarak en sık görülen kronik hastalıklardan biri olan diş çürükleri, diş yüzeyinde oluşan ve mikrobiyal metabolizmadan elde edilen organik asitlerin neden olduğu demineralizasyona yol açan şeker bakımından zengin diyet ve mikrobiyal biyofilmlerin (diş plağı) etkileşiminden kaynaklanır ve tedavi edilmezse diş kaybına yol açar5,6. Diğer mikroorganizmalar ilişkili olsa da7, Streptococcus mutans kritik bir kardiyojenik bakteridir çünkü asidojenik, asidikürik ve hücre dışı matris oluşturucudur. Bu tür, virülans belirleyicisi9olan eksopolisakkaritler bakımından zengin hücre dışı matrisi oluşturmak için substrat8 olarak sakkaroz kullanan birden fazla ekzoenzim (örneğin, glikosiltransfezazyonlar veya Gtfs) kodlar. Ayrıca, mantar Candida albicans bu hücre dışı matris üretimini artırmak olabilir7. Çeşitli modalitelerde uygulanan florür, diş çürüklerini önlemenin temeli olmaya devam etse de10, etkinliğini artırmak için yardımcılar olarak yeni yaklaşımlara ihtiyaç vardır. Ek olarak, mevcut anti-plak yöntemleri geniş spektrumlu mikrobisidal ajanların (örneğin klorheksidin) kullanımına dayanmaktadır11. Alternatif olarak, NP'ler biyofilmleri kontrol etmek ve diş çürüklerini önlemek için potansiyel tedavilerdir12,13.
Bitkilerden yeni biyoaktif bileşiklerin keşfinde daha fazla ilerleme, aşağıdaki gibi gerekli adımları veya yaklaşımları içerir: (i) bitkilerin genellikle spesifik değişkenlik gösterdiği göz önüne alındığında, örnekleme için güvenilir ve tekrarlanabilir protokollerin kullanılması; (ii) kapsamlı özlerin ve bunların ilgili fraksiyonlarının küçük ölçekte hazırlanması; (iii) kimyasal profillerinin karakterizasyonu ve/veya dereplication' ı, örneğin GC-MS, LC-DAD-MS veya NMR gibi çok boyutlu verilerin elde edilmesi; (iv) biyoaktiviteyi değerlendirmek için uygulanabilir ve yüksek verimli modellerin kullanılması; (v) çok değişkenli veri analizine veya diğer istatistiksel araçlara dayalı potansiyel yeni isabetlerin seçimi; (vi) hedeflenen bileşiklerin veya gelecek vaat eden adayların izolasyon ve saflaştırılmasını gerçekleştirmek; ve (vii) izole bileşikler kullanılarak karşılık gelen biyolojik faaliyetlerin doğrulanması2,14.
Dereplication, ham ekstrakttaki bilinen bileşiklerin hızla tanımlanması işlemidir ve yeni bileşiklerin daha önce çalışılmış olanlardan ayırt edilmesine izin verir. Ayrıca, biyoaktivite belirli bileşikler için tanımlanmış olduğunda bu işlem izolasyonu önler ve özellikle "sık vurucuları" tespit etmek yararlıdır. Ana bileşik tanımlamadan veya aktivite güdümlü fraksiyonasyonun hızlandırılmasından öz koleksiyonlarının kimyasal profillenmesine kadar farklı hedefsiz iş akışlarında kullanılmıştır. CE'nin hedefsiz kimyasal profillenebilmesi veya metabolitlerin hedefli tanımlanması için metabolomik çalışmalarla tam olarak entegre edilebilir. Tüm bunlar sonuçta izolasyon prosedürlerinden önce özlere öncelik verilmesine yol açar1,15,16,17.
Bu nedenle, mevcut yazıda, bitki özlerinden ve fraksiyonlarından antimikrobiyal ve antibiyofilm moleküllerini tanımlamak için sistematik bir yaklaşım tarif ediyoruz. Dört multidisipliner adım içerir: (1) bitki malzemesinin toplanması; (2) ham özlerin (CE) ve fraksiyonların (CEF) hazırlanması, ardından kimyasal profil analizleri; (3) biyoassaylar; ve (4) biyolojik ve kimyasal veri analizleri (Şekil 1). Bu nedenle, Casearia sylvestris özlerinin ve fraksiyonlarının Streptococcus mutans ve Candida albicans13'ekarşı antimikrobiyal ve antibiyofilm faaliyetlerinin yanı sıra fitokimyasal karakterizasyon ve veri analizi prosedürlerini analiz etmek için geliştirilen protokolü sunuyoruz. Basitlik için, buradaki odak noktası, bakteriyi kullanarak doğal bileşikleri tarama yaklaşımını göstermektir.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/61773/61773fig01v2.jpg"> Şekil 1: Bitki özlerinden ve fraksiyonlarından aktif molekülleri tanımlamak için Sistematik Yaklaşımın akış şeması. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/61773/61773fig01v2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

<table><tbody><tr><td>96 oyuklu mikroplakalar ve nbsp;</td><td>Kasvi</td><td>Düz tabanlı</td><td></td></tr><tr><td>Aktif karbon</td><td>LABSYNTH</td><td>Temizleme ve/veya fraksiyonlama adımı</td><td></td></tr><tr><td>Analitik değirmen</td><td>Ika LabortechniK</td><td>Model A11 Temel</td><td></td></tr><tr><td>Kan agar plakaları</td><td>Laborclin</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kromatografik kolon C18</td><td>Phenomenex Kinetex</td><td>150 & kez; 2,1 mm, 2,6 & mikro; m, 100&Acirc;</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit ve nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Araç çözümü</td><td></td></tr><tr><td>ELISA plaka okuyucu</td><td>Biochrom Ez</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>J. T. Baker</td><td>Ekstraksiyon ve fraksiyonlama adımları ve mobil faz bileşimi</td><td></td>için</tr><tr><td>Etanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Araç çözeltisi</td><td></td></tr><tr><td>Etil asetat</td><td>J. T. Baker</td><td>Fraksiyonlama adımı</td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Yazılımı</td><td>La Jolla</td><td>GraphPad Prism7</td><td></td></tr><tr><td>Hekzan</td><td>J. T. Baker</td><td>Fraksiyonasyon aşaması</td><td></td></tr><tr><td>İnkübatörü</td><td>Termo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>İzopropanol</td><td>J. T. Baker</td><td>Ekstraksiyon adımı</td><td></td>için</tr><tr><td>Liyofilizatör (dondurarak kurutucu)</td> <td>Savant</td><td>Modulyo</td><td></td></tr><tr><td>Naylon Millipore</td><td>LAC</td><td>0.22 & m x 13 mm</td><td></td></tr><tr><td>Orbital çalkalayıcı</td><td>Quimis</td><td>Model G816 ve ince; M20</td><td></td></tr><tr><td>Poliamid katı faz ekstraksiyon kartuşu</td><td>Macherey-Nagel</td><td>Temizleme ve / veya fraksiyonlama adımı</td><td></td></tr><tr><td>Silika jel</td><td>Merck</td><td>40&ndash; 63&ince; &mu; m, 60 ve ince; &Acirc;</td><td></td></tr><tr><td>Sodyum Klorür (NaCl)</td><td>Suda</td> %<td></td><td>0,89</td></tr><tr><td>Sentez Katı faz ekstraksiyon kartuşları (SPE)</td><td>Macherey-Nagel</td><td>Temizleme ve/veya fraksiyonlama adımı</td><td></td></tr><tr><td>Tripton</td><td>Difco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>UHPLC-DAD</td><td>Dionex</td><td>Ultimate 3000 RS</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonik banyo</td><td>UNIQUE</td><td>Model USC 2800</td><td></td></tr><tr><td>Maya özü</td><td>Difco Bilişim</td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Teknolojileri

diş Çürüklerini Önlemek İçin bitkilerin Özlerinden ve fraksiyonlarından yeni antimikrobiyal ve antibiyofilm moleküllerini tanımlamak için sistematik yaklaşım

Systematic Approach to Identify Novel Antimicrobial and Antibiofilm Molecules from Plants' Extracts and Fractions to Prevent Dental Caries

Doğal ürünler, sayısız biyolojik aktivite ile yapısal olarak farklı maddeler sağlar. Bununla birlikte, karmaşık bitki matrisi ve zaman alıcı izolasyon ve tanımlama prosedürleri nedeniyle aktif bileşiklerin bitkilerden tanımlanması ve izolasyonu zordur. Bu nedenle, potansiyel olarak aktif moleküllerin izolasyonu ve tanımlanması da dahil olmak üzere bitkilerden doğal bileşiklerin taranmasına yönelik adım adım bir yaklaşım sunulmaktadır. Bitki materyalinin toplanmasını içerir; ham özlerin hazırlanması ve fraksiyonasyonu; analiz ve bileşik tanımlama için kromatografi ve spektrometre (UHPLC-DAD-HRMS ve NMR) yaklaşımları; biyoassaylar (antimikrobiyal ve antibiyofilm aktiviteleri; tükürük pelikül ve seçilen tedavilerle tedavi edilen ilk glukan matrisine bakteriyel "yapışma mukavemeti"); ve veri analizi. Model basittir, tekrarlanabilir ve birden fazla bileşiğin, konsantrasyonların ve tedavi adımlarının yüksek verimli bir şekilde taranabilmesini sağlar. Elde edilen veriler, en aktif özlere ve/veya fraksiyonlara sahip formülasyonlar, moleküllerin izolasyonu, moleküllerin mikrobiyal hücrelerdeki belirli hedeflere modellanması ve biyofilmler de dahil olmak üzere gelecekteki çalışmalar için temel sağlar. Örneğin, kardiyojenik biyofilmi kontrol etmek için bir hedef, hücre dışı matrisin glukanlarını sentezleyen Streptococcus mutans glukoziltransferazlarının aktivitesini inhibe etmektir. Bu enzimlerin inhibisyonu biyofilm birikimini önleyerek virülansını azaltır.

Olası yeni çürük önleyici tedaviler için potansiyel olarak aktif molekülleri tanımlamak için bitki özlerinin ve fraksiyonlarının biyolojik aktivitesini taramak için sistematik bir yaklaşım kullanarak bir örnek sunuyoruz: Casearia sylvestris özlerinin Streptococcus mutans ve Candida albicans13'ekarşı farklı Brezilya biyomlarından antimikrobiyal ve antibiyofilm aktiviteleri 13 .
Arka plan Sakkaroz ve nişasta bakımından zengin...

Doğal ürünler, yeni ilaçların ve terapötik ajanların gelişimi için umut verici başlangıç noktalarını temsil eder. Bununla birlikte, yüksek kimyasal çeşitlilik nedeniyle, bitkilerden yeni terapötik bileşikler bulmak zor ve zaman alıcı bir iştir. Bitki özlerinden ve fraksiyonlarından antimikrobiyal ve antibiyofilm moleküllerini tanımlamak için basitleştirilmiş bir yaklaşım tanımlıyoruz.

Diş Çürüklerini Önlemek İçin Bitkilerin Özlerinden ve Fraksiyonlarından Yeni Antimikrobiyal ve Antibiyofilm Moleküllerini Tanımlamak için Sistematik Yaklaşım

Natural products provide structurally different substances, with a myriad of biological activities. However, the identification and isolation of active ...

Sunulan protokol, oral biyofilmleri kontrol etmek için doğal ürünlerdeki biyoaktif adayların doğru taranır ve analiz edilir. Ayrıca diğer biyofilm araştırma alanlarındaki uygulamalar için de uyarlanabilir. Bu nişaste tarama ve analiz yöntemi, biyoaktif bileşenlerin aynı anda çıkarılmasını mümkün klar.Diş çürükleri biyofilm diyeti türetilmiş, oldukça yaygın, kronik bir hastalıktır. Bu protokol, biyofilmleri ve dolayısıyla diş çürüklerini kontrol etmek için doğal ürünlerin tanımlanmasına yardımcı olabilir. Ekstraksiyon çözücüsüyü hidroalkolik bir karışımla hazırlayarak başlayın.Ekstraksiyon çözücüsunun mililitresi başına 50 ila 100 miligram arasında konsantrasyonları örneklersiniz ve mikrotüplerde 15 dakikalık ultrason destekli ekstraksiyonlar gerçekleştirirsiniz. Çıkarma işlemini üç kez tekrarlayın. Her ekstraksiyon adımından sonra, katı kalıntının kafasını kesmek ve süpernatantı çıkarmak için numuneyi santrifüj edin.Her ekstraksiyon adımındaki süpernatantları birleştirin ve filtreleyin. Aliquot'ları kimyasal analiz ve biyoassaylar için sakla. Fraksiyonasyon için, ilk ekstraksiyon çözücüsünü kullanarak mililitre çözeltisi başına 100 miligram elde etmek için ham ekstrakt örneğini seyreltin.Ardından, bu numunenin bir mililitresini bir gram Emici ve altı mililitre kapasiteli ön koşullanmış bir katı faz çıkarma kartuşuna aktarın. Her ekstraksiyon LUN'un yaklaşık üç ölü hacmini kullanarak kesirleme gerçekleştirin ve LUN bileşimine göre bir kesir toplayın. Aliquotları kimyasal analiz ve biyoassaylar için sakla.Çözücüyü vakum, azot akışı veya lyophilization altında çıkarın ve ağırlığı ve verimi kaydedin. Kuru maddeyi mümkün olan en iyi çözücülerle yeniden inşa edin. Metin el yazmasındaki formülü kullanarak stok çözeltisi için çözücü konsantrasyonunu hesaplayın.S.mutans UA 159'un mikrobiyal suşunu kan agarı üzerinde yeniden etkinleştirin ve sıvı kültür ortamında kültür edin. Aynı kültür ortamını kullanarak başlangıç kültürünün bir ila 20 seyreltilmesini gerçekleştirin ve orta kütük büyüme aşamasına ulaşana kadar kuluçkaya yatırın. TYEG'de tanımlanmış bir popülasyona sahip inoculumu anti-mikrobiyal tahliller için ve biyofilm tahlilleri için %1 sakkaroz ile TYE hazırlayın.Anti-mikrobiyal aktivite için, analiz için numunenin konsantrasyonu tanımlayın ve 96 kuyulu bir plakaya ekleyin. Metin taslağında açıklandığı gibi, her plakaya bir dizi denetim ekleyin. TYEG kullanarak hacmi 100 mikrolitreye ayarlayın, 100 mikrobiyal kültürü aşılayın ve plakayı %5 karbondioksitte 37 santigrat derecede 24 saat kuluçkaya yatırın.Kuyuların görsel muayenesi ile bulanıklığa göre bakteri üremesini analiz edin. Belirli agar plakalarında istenen seyreltmenin bir aliquotunu kopyalarda aşılayın ve plakaları kuluçkaya yatırın. Kuluçkadan sonra koloni sayımları gerçekleştirin.Hidroksiapatit boncukları mikrotüplerde tartın ve sterilize edin. Daha sonra boncukları yıkayın, adsorpsiyon tamponu kullanarak Ab.Bir tükürük filmi oluşturmak için mikrotüplere 500 mikrolitre tükürük ekleyin ve 40 dakika boyunca dakikada 24 dönüşle 37 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Tükürük süpernatantını çıkarın ve boncukları aşağı akış testlerine hazırlamak için Ab ile üç kez yıkayın.Tükürük peliküllü boncuk içeren her mikrotüp içine numunenin veya kontrolün 500 mikrolitresini ekleyin ve 30 dakika boyunca dakikada 24 dönüş ve 37 santigrat derecede kuluçkaya yatırın. Boncukları Ab ile üç kez yıkayın.Her mikrotüpe 500 mikrobiyal kültür ekleyin ve tüpleri bir saat boyunca benzer koşullarda kuluçkaya yatırın. Ardından ilişkisiz hücreleri Ab arabelleği ile üç kez yıkayın.Her numuneyi bir mililitre Ab arabelleğiyle yeniden dirildi ve 30 saniye boyunca yedi Watt'ta centicade. Her süspansiyonun aliquotlarını seri olarak seyreltin, on kat ve belirli agar plakalarına plakalayın. Plakaları %5 karbondioksitte 37 santigrat derecede 48 saat kuluçkaya yatırın ve kolonileri sayın.Veri analizi için, biyoassayların ham verilerini bir elektronik tabloya girin ve her tedaviye göre mikrobiyal büyüme inhibisyonunun günlüğünü ve kontrole kıyasla mikrobiyal büyüme inhibisyonunun günlük yüzdesini hesaplayın. Okumaların optik yoğunluğunu düzeltin ve biyokütle inhibisyonunun yüzdesini hesaplayın. Üç çeşit C.sylvestris özünde, yani sylvestris, orta ve lingua'da Clerodane tipi diterpenler ve glikosillenmiş flavonoidlerin miktarı için biyolojik taramanın kimyasal profili burada gösterilmiştir.Ham verilerin analizinden sonra, dört öz olumlu bir yanıt gösterdi. Bu dört özün kromatografik verileri Clerodane tipi diterpenlerin ve glikosillenmiş flavonoidlerin aynı anda varlığını göstermektedir. Ek olarak, aynı biyom ve çeşitliliği içerirler.Tedavi edilen planktonik hücrelerin hesaplanan yüzde CFU'su, tedavi edilen biyofilmlerin yüzde biyokütlesi ve tedavi edilen biyofilmin yüzde CFU'su burada gösterilmiştir. Hiçbir ham ekstrakt tükürük pelikül yapışarak S.mutans hücrelerinin uzaklaştırılmasını önemli ölçüde etkilemedi. S.mutans hücrelerinin glukan matrisine yapışmışlığı, ham özlerden üçü tarafından zayıflatıldı.Her bitki türü optimize edilmiş ve spesifik kimyasal analiz yöntemleri gerektirdiğinden, en iyi çözücü fraksiyonu ve analitik yöntem önceki raporlardan seçilmeli veya deneysel tasarımla tanımlanmalıdır. Biyofilmlerin ve boşlukların gelişmesini önlemek için en aktif ham ekstrakt ve fraksiyonlarla formülasyonlar hazırlamak ve bunları karmaşık modellerde test etmek önemlidir.

systematic-approach-to-identify-novel-antimicrobial-antibiofilm

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Diş yüzeylerinde oluşan Biyofilmler, son derece karmaşık ve kendi mimari modüle doğuştan sabit ve dışsal çevre sorunlarına, fizyoloji ve transcriptome maruz. Bileşimi, yapısal organizasyon ve oral biyofilmlerin biyofilm araştırmanın diğer alanlara adapte olabilen gen ekspresyonu, incelemek için bir araç kutusu geliştirdi.

Analitik Oral Biyofilmler Kapsamlı biyokimyasal, yapısal ve Transcriptome Değerlendirme Aracı-box mutans Streptokok tarafından aracılığı ile

Ortodontik aletler doğal oral biyofilm yapısal ve kompozisyon analizi için bir protokol...

Floresan In-Situ Hibridizasyon ve Konfokal Lazer Tarama Mikroskopi Palatal Genişleticilerden Oral Biyofilm Analizi

Bu yöntemler kağıt amacı tipik insan Mikrobiyal dental plak tespit türler içeren çok tür biyofilm gelişmesi için mikroakışkan sisteminin kullanımını tarif etmektir. Yöntem biyofilm mimarisi, biyofilm canlılığı ve vurgulanır kültür-bağımlı veya kültür-bağımsız analizler için hasat biyofilm bir yaklaşım açıklamak için.

Yüksek verimli bir kullanımı<em&gt; İn Vitro</em&gt; Mikroakışkan Sistemi Ağız Çok türler biyofilm Geliştirmek İçin

Çoğu bakteriyel enfeksiyon bir biyofilm üretir. Çevreleri nedeniyle, biyofilm ile ilişkili bakteriler genellikle fenotipik olarak ilaca dirençlidir. Biyofilmlerdeki bakterileri öldüren yeni antibakteriyel moleküller bu nedenle yüksek bir önceliğe sahiptir. Biyofilmleri yok etmede etkili olan antimikrobiyal bileşikleri hızlı bir şekilde taramak için bir test oluşturuyoruz.

Biyofilm İlişkili Hedefleme<em&gt; Staphylococcus aureus</emKullanma&gt; Resazurin Tabanlı İlaç-duyarlılık Deneyi

Bu çalışma, biyofilm inhibitörlerini ve bunların Bacillus subtilis çok hücrelilik üzerindeki etkilerini incelemek için tekrarlanabilir metodolojilerin geliştirilmesini sunmaktadır.

Araştırma yöntemleri<em&gt; B. subtilis</emKüçük Molekül Biyofilm İnhibitörleri Karakterizasyonu için Bir Model Olarak&gt; Biyofilmler

Biyofilm enfeksiyonları kemoterapiye karşı yüksek tolerans gösterir. Tek bir tahlil biyofilmlerin karmaşıklığını yakalayamaz. Bunun yerine, tamamlayıcı tahlillere ihtiyaç vardır. Canlılık, biyokütle ve biyofilm matrisi tahlillerini birleştiren bir tarama platformu (S. aureus için geliştirilmiş) sunuyoruz. Uzun vadeli kemoterapötik etkilerin değerlendirilmesi de dahil olmak üzere anti-biyofilm ilaç keşfine izin verir.

Doğal Bileşik Kütüphaneleri Exploration uygundur Anti-biyofilm Tahliller Bir Platform

İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

Burada, sözlü biyofilm oluşumu için diş protez ayakları bakteri hücreleri canlılığı ve morfolojik özellikleri analizi de dahil olmak üzere, titanyum ve zirkon malzemeler üzerinde değerlendirmek için bir protokol mevcut. Güçlü mikroskobu teknikleri ile ilişkili bir in situ modeli sözlü biyofilm analizi için kullanılır.

Diş implantları için farklı malzemeler üzerinde sözlü biyofilm oluşumu

Antikorların C. tropicalis tarafından oluşturulan biyofilmler üzerindeki etkilerini incelemek için 2,3-bis (2-metoksi-4-nitro-5-sülfofenil)-5-karboksanil-2H-tetrazolyum (XTT) indirgeme testi kullanan 96 kuyucuklu mikrotitrek plaka bazlı bir protokol burada açıklanmıştır. Bu in vitro protokol, potansiyel yeni antifungal bileşiklerin biyofilmlerdeki Candida türü hücrelerinin metabolik aktivitesi üzerindeki etkisini kontrol etmek için kullanılabilir.

Antikorların Candida tropicalis Biyofilmleri Üzerindeki Etkisini Değerlendirmek için Çözünür Tetrazolyum Bazlı İndirgeme Testi

Bu protokol, fitokimyasalların geleneksel biyositlerin bakterisit etkilerini nasıl artırabileceğini değerlendirmek için sistematik bir çerçeve sunar; bakterisit aktivite modellemesi ve kombinatoryal etkileşim testleri kullanarak, mikrobiyal kontrolü iyileştiren ve genel biyosit kullanımını azaltan sinergistik karışımları belirlemeyi amaçlar.

In Vitro Bitki kaynaklı moleküllerin geleneksel biyositler üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi

Keşfedin, bitki özlerinden antimikrobiyal ve antibiyofilm bileşikleri izole etmek için ultrason destekli ekstraksiyon yöntemini. Streptococcus mutans üzerindeki etkileri değerlendirerek diş çürüklerine karşı doğal ürünler geliştirin.

Diş Çürüklerini Önlemek İçin Bitkilerin Özlerinden ve Fraksiyonlarından Yeni Antimikrobiyal ve Antibiyofilm Moleküllerini Tanımlamak için Sistematik Yaklaşım (Video) | JoVE Journal

Diş Çürüklerini Önlemek İçin Bitkilerin Özlerinden ve Fraksiyonlarından Yeni Antimikrobiyal ve Antibiyofilm Moleküllerini Tanımlamak için Sistematik Yaklaşım

Daha fazla video keşfet