Name: Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 37 s
Description: Öğrenin, farelerde heterotopik abdominal kalp nakli için yeni bir cerrahi teknik. Bu yöntem, donor aort ve intratorasik inferior vena kava anastomozları ile alloimmün yanıtları incelemeyi kolaylaştırır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Seslendirme sanatçısı olarak yardımları için Dr. Yun Xu'ya, video düzenlemedeki yardımları için Dr. med. Jianhua Peng'e ve yorumları ve desteği için Dr. Annika Kuckhahn'a teşekkür ederiz. Bu çalışma kısmen Alman Araştırma Vakfı (DFG) tarafından uluslararası işbirliklerini (HO2581/4-1'den AH'ye) ve Çin Ulusal Bilim Vakfı (NSFC; FJ'ye #81760291) tarafından desteklendi.

Tüm hayvan deneyleri, Avrupa Parlamentosu'nun 2010/63/AB sayılı bilimsel amaçlarla kullanılan hayvanların korunmasına ilişkin direktifinin yönergelerine uygun olarak yapılmıştır (Etik kurul onaylı, #G1071/09).
NOT: Ön hazırlık, anestezi, ameliyat sonrası bakım ve izleme çalışmaları geleneksel cerrahi yöntemlerde yapılanla aynıdır1,2,4. BALB/c fareleri kalp bağışçısı, C57BL/6J ise nakil alıcısı olarak görev yaptı. Fareler 8-12 haftalıktı, transplantasyonda ~ 30 g ağırlığındaydı ve standart koşullar altında barındırıldı.
1. Hazırlık adımları
<ol><li>Anestezi için farelere inhalatif izofluran verin (%2) uykuya dalana kadar, ardından ketamin (100 mg/ kg) + ksilazin (10 mg / kg) + asepromazin (2 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonları. Ameliyat sonrası analjezi için Metamizol (200 mg/kg) p.o. ve Carprofen (5 mg/kg) s.c. NOT: Bu maddeler immünolojik yanıtları etkileyebileceğinden antibiyotik uygulaması kasıtlı olarak çekimser kaldı.</li>
	<li>Ameliyat için mikro makas, mikro forseps, iğne tutucu ve mikro hemostatik kelepçeler dahil olmak üzere bir dizi mikroskobik alet kullanın. Elektrocerrahi bir kalem de gereklidir. 7/0er, 10/0er ve 4/0er naylon tiplerini kullanarak dikişleri gerçekleştirin.</li>
	<li>Fareyi izofluran soluma için bir kutuya yerleştirin (%2) 40-60 saniye boyunca. Pençeyi cımbızla sıkarak anestezinin derinliğini belirleyin. Bu uyaran için tam bir yanıt eksikliği varsa, bir sonraki adıma geçin.</li>
	<li>Fare uykuya daldığında, fareyi tartın.</li>
	<li>Uyuşturulmuş fareye ketamin (100 mg/kg) + ksilazin (10 mg/kg) + asepromazin (2 mg/kg) intraperitoneal enjeksiyon uygulayın.</li>
	<li>Karın kürkü kırpın ve fareyi ameliyat masasına yerleştirin. 3 kez povidone iyodür kullanarak dezenfeksiyon gerçekleştirin, ardından fenestrated cerrahi havlu kullanarak fareyi düzgün bir şekilde örtün.</li>
</ol>2. Donör operasyon prosedürü
<ol><li>Cildi boyundan alt karın bölgesine kesmek için makas kullanın ve cildin tam tabakasını her iki aksillanın orta çizgisine kadar soyun.</li>
	<li>Karın duvarının kaslarını kesmek için makas kullanın ve visserayı yavaşça sola doğru hareket ettirin (operatörün görüşüne göre). İç organları, alt vena kavayı güvenli bir şekilde ortaya çıkarmak için tuzlu imbibed gazlı bezle sarın.</li>
	<li>Heparin çözeltisinin 0,4 mL'lik kısmını (500 U heparin içerir) yavaşça alt vena kavasına enjekte etmek için 1 mL şırınga kullanın ve iğneyi çıkarmadan önce 1 dakika bekleyin.</li>
	<li>İğneyi çekin ve eksanguinasyonu hızlandırmak için hem alt vena kavayı hem de abdominal aortu kesmek için bir mikro makas kullanın.</li>
	<li>U şeklinde bir kesim yaparak göğüs boşluğunu açmak için makas kullanın; kalbi, akciğerleri ve tüm göğüs kan damarlarını tamamen açığa çıkarır.<ol>
<li>Torasik aortu aort süzül, lümenin 1/2'sini kesin ve ardından sulama ve drenajı kolaylaştırmak için pulmoner damarı kesin.</li>
		<li>Torasik aortun açıklığı içine bir sulama tüpü yerleştirin, pulmoner damar çıkışı tamamen temizleninceye ve kalp tamamen durana kadar en az 2 mL 4 °C soğuk histidin-triptofan-ketoglutarat kardiyopleji çözeltisi (Custodiol HTK çözeltisi)9 enjekte edin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sulama tüpünü çıkarın ve sternumu ayırın.</li>
	<li>Timus çıkarmak ve aort kemerinin etrafındaki yağı hafifçe soymak için mikro makas kullanın.</li>
	<li>Arteri pulmonalis gövdesini (aort kemerinin sağ tarafında) 10/0 dikişle ortaya çıkarmak ve ligate etmek için düz ve kavisli önlük kullanın.</li>
	<li>IIVC'ye bağlı yağ ve bağ dokusunu ayırmak, üstün vena kavayı (aort kemerinin sol tarafında) 7/0 dikişle ortaya çıkarmak ve ligatlamak için mikro makas kullanmak için mikro tokmak kullanın.</li>
	<li>Aort kemerinin, IIVC'nin ve her iki kulak kepçesinin altındaki kalbin tabanı etrafında 7/0 dikiş yapın. Daha sonra pulmoner arter dallarını ve venöz akciğer damarlarını ligat.</li>
	<li>Aort kemerini mümkün olduğunca distal, bağın altındaki akciğer damarlarını ve diyaframın yakınındaki IIVC'yi transekte etmek için mikro makas kullanın. Kalbi göğsünden çıkar.</li>
	<li>Ekilen donörün kalbini 4 °C soğuk HTK kardiyopleji çözeltisine yerleştirin ve geçici olarak koruyun.</li>
</ol>3. Alıcı operasyon prosedürü
NOT: İlk operasyon adımları, anestezi ve dezenfeksiyon da dahil olmak üzere donör fare için daha önce gösterilenlere benzer.
<ol><li>Karın derisinin enine bir şekilde kesilmesini gerçekleştirin, tuzlu su çözeltisi kullanarak karın organlarını ıslak bir gazlı bezle örtün.</li>
	<li>Alt vena kava ve abdominal aortu ortaya çıkarmak ve onları çevreleyen yağ dokusundan kurtarmak için mikro tokmaklar kullanın.</li>
	<li>Yan dal damarlarını (yanal veya damar/aort altında) renal damarların altında lige etmek veya elektrokouterize etmek için mikro tokalar kullanın.</li>
	<li>Klips aplikatör forsepsleri, her iki aort/ damar için de 1 cm'den fazla mesafe bırakarak sağdan gelen venin / aortun karın kısmına iki mikro hemostatik kelepçe yerleştirmek için, aralarında anastomozun inşası için alan sağlamak için kullanın.</li>
	<li>Aort içine bir kesi yapmak için mikro makas kullanın alt kelepçeye üst kelepçeye göre biraz daha yakın. Alternatif olarak, küçük bir delik açmak ve mikro makasla açmak için 30 G'lik bir iğne kullanın.</li>
	<li>Alıcı fareyi, aort diğer tarafta vena kava ile operatöre bakacak şekilde konumlandırın. Daha sonra kalbi karın boşluğuna yerleştirin ve küçük bir ıslak gazlı bezle örtün.</li>
	<li>Donör aortunu alıcı aorta kaudally başlayarak uyarlamak ve dikmek için 10/0 dikiş kullanın, bir düğüm yapın ve kesiğin tepesine (yaklaşık 4-5 dikiş) çalışan bir dikişle devam edin. Daha sonra, kalbi sağa çevirin (öznenin görüşüne göre), tekrar örtün ve kaudal uca ulaşana kadar sol tarafta dikişe devam edin ve düğüm atın.</li>
	<li>Donörün IIVC'sını yıkamak için en az 0,5 mL 4 °C HTK kardiyopleji çözeltisi enjekte etmek için bir sulama tüpü kullanın.</li>
	<li>Alıcının karın inferior vena kavasında aynı boyutta donör IIVC lümenine sahip olması gereken yuvarlak bir delik açmak için mikro makas kullanın. Kesi aort anastomoz açıklığın üzerinde bulunmalıdır. Damar kesisini aort kesisinden daha büyük hale getirin.</li>
	<li>Donör IIVC'yi alıcı vena cava'ya dikmek için 10/0 dikiş kullanın. Bir düğüm bağlayın ve kesiğin tepesine ulaşılana kadar akan bir dikiş gerçekleştirin. Beş dikiş kullanın ve soldaki dikişe devam edin. Son olarak, kuyruk köşesine bir düğüm bağlayın ve dikkatlice sıkın (çok sıkı çekmemeye dikkat edin).</li>
	<li>Hemostatik süngerin küçük kısımlarını damarın ve aort anastomozlarının etrafına yerleştirin.</li>
	<li>Önce alt ve sonra üst mikro-hemostatik kelepçeleri çıkarmak ve karın boşluğunu 38.0 °C temperli% 0.9 sodyum klorür ile durulamak için klips aplikatör tokalarını kullanın.</li>
	<li>Hemostatik süngeri almak için mikroasipler kullanın.</li>
	<li>Nakledilen kalbin kalp atışını gözlemleyin.</li>
	<li>Bağırsakları tekrar karın boşluğuna koymak için önseçimleri ve karın yarasını 4/0 dikişle kapatmak için iki katmanlı dikişleri (karın kasları ve ardından cilt) kullanın.</li>
	<li>Nakledilen farelerin iyileşmesi için sıcak ve oksijen bakımından zengin bir ortam sağlamak için fareleri bir oksijen ve sıcaklık kontrol iş istasyonu odasına (örneğin INVIVO2-400) koyun, farelerin uyanmasını bekleyin.</li>
	<li>Ameliyat sonrası analjezi için, operasyondan sonra metamizol'e doğrudan os başına 200 mg/kg verin. Operasyondan dört ve 16 saat sonra Metamizol'e os+ Carprofen (5mg/kg) s.c başına 200 mg/kg verin. Daha sonraki takipte, operasyondan sonraki üç gün boyunca her 24 saatte bir nakledilen farelere Carprofen (5 mg / kg) s.c verin.</li>
</ol>

<ol><li>Corry, R., Winn, H., Russell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primarily+vascularized+allografts+of+heart+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Primarily vascularized allografts of heart in mice.</a> Transplantation. 16, 343-350 (1973).</li>
<li>Habertheuer, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donor+tissue-specific+exosome+profiling+enables+noninvasive+monitoring+of+acute+rejection+in+mouse+allogeneic+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Donor tissue-specific exosome profiling enables noninvasive monitoring of acute rejection in mouse allogeneic heart transplantation.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 155 (6), 2479-2489 (2018).</li>
<li>Plenter, R. J., Zamora, M. R., Grazia, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Four+decades+of+vascularized+heterotopic+cardiac+transplantation+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Investigative+Surgery%22%5BJournal%5D)">Four decades of vascularized heterotopic cardiac transplantation in the mouse.</a> Journal of Investigative Surgery. 26, 223-228 (2013).</li>
<li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+technique+for+blood+circuit+reconstruction+in+mouse+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Novel technique for blood circuit reconstruction in mouse heart transplantation model.</a> Microsurgery. 26, 594-598 (2006).</li>
<li>Alamran, F. G., Shahkolahi, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Total+arterial+anastomosis+heterotopic+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Total arterial anastomosis heterotopic heart transplantation model.</a> Transplantation Proceedings. 45, 625-629 (2013).</li>
<li>Melanie, L., et al. Potential of Heterotopic Cardiac Transplantation in Mice as a Model for Elucidating Mechanisms of Graft Rejection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMelanie%2C+L+%22Cardiac+Transplantation%22">Cardiac Transplantation</a>. Moffatt-Bruce, S. D., et al. , IntechOpen (2012).</li>
<li>Westhofen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+heterotopic+heart+transplantation+in+mice+as+a+small+animal+model+to+study+mechanical+unloading+-+Establishment+of+the+procedure%2C+perioperative+management+and+postoperative+scoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The heterotopic heart transplantation in mice as a small animal model to study mechanical unloading - Establishment of the procedure, perioperative management and postoperative scoring.</a> PLoS One. 14 (4), 0214513(2019).</li>
<li>Wang, C., Wang, Z., Allen, R., Bishop, G. A., Sharland, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Modified+Method+for+Heterotopic+Mouse+Heart+Transplantion%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e51423(2014).</li>
<li>Mokbel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate+Solution+for+Donor+Heart+Preservation+Is+Safe+for+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate Solution for Donor Heart Preservation Is Safe for Transplantation.</a> Annals of Thoracic Surgery. 109 (3), 763-770 (2020).</li>
<li>Song, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+Suture+Technique+in+a+Mouse+Heart+Transplant+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Modified Suture Technique in a Mouse Heart Transplant Model.</a> Asian Journal of Surgery. 34 (2), 86-91 (2011).</li>
<li>Martins, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+graft+function+in+rodent+models+of+heart+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Assessment of graft function in rodent models of heart transplantation.</a> Microsurgery. 28 (7), 565-570 (2008).</li>
<li>Wu, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((cold+storage+using+a+new+histidine-tryptophan-ketoglutarate-based+preservation+solution+in+isogeneic+cardiac+mouse+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">cold storage using a new histidine-tryptophan-ketoglutarate-based preservation solution in isogeneic cardiac mouse grafts.</a> European Heart Journal. 32 (4), 509-516 (2011).</li>
<li>Türk, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+chronic+graft+injury+with+a+new+HTK-based+preservation+solution+in+a+murine+heart+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cryobiology%22%5BJournal%5D)">Reduction of chronic graft injury with a new HTK-based preservation solution in a murine heart transplantation model.</a> Cryobiology. 64 (3), 273-278 (2012).</li>
</ol>

Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği çok zordur ve bu, bu modelin yaygın kullanımına bir kısıtlama getirmekle ilgilidir.
Konvansiyonel tekniğin dezavantajlarından biri, donörün pulmoner arterinin (PA) sınırlayıcı uzunluğudur. Genellikle yaklaşık 2 mm uzunluğundadır, modelimizde kullanılan donör kalbin IIVC uzunluğu genellikle yaklaşık 1 cm'dir (Şekil 2). Bu, modifiye modelde, IIVC anastomozunun, anastomozların daha iyi ameliyatını sağlayan...

Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği transplantasyon immünolojisinde araştırma için standart bir modeli temsil eder1,2,3. Ancak, gerçekleştirmek çok zordur ve bu modelin yaygın kullanımına bir kısıtlama getirmektedir4,5.
Geleneksel fare kalbi naklinde (THTx), donör aort ve alıcı abdominal aort anastomos edilirken pulmoner arter alıcıya inferior vena kava6,7,8anastomos edilir.
Bu modifiye fare kalp nakli tekniğinde donör aort alıcı abdominal aorta ve donör IIVC alıcı inferior vena kava(3 , 4,6) ( Şekil2 ve Şekil 3)anastomosed edilir.

<table><tbody><tr><td>30G-iğneler</td><td>Braun</td><td>456300</td><td></td></tr><tr><td>asepromazin</td><td>CP Pharma</td><td>Tranquisol P</td><td></td></tr><tr><td>BALB/c AnNCrl fareler</td><td>Charles River. Almanya</td><td>katalog numarası</td><td></td>yok</tr><tr><td>Bepanthen göz merhemi</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 01578675</td><td></td></tr><tr><td>Bonn Mikro Forseps</td><td>FST</td><td>11083-07</td><td></td></tr><tr><td>İzolasyon ve oksijen besleme cihazı için kutu</td><td>RUSKINN</td><td>INVIV</td><td></td></tr><tr><td>C57BL / 6J & nbsp; fareler</td><td>Charles Nehri. Almanya</td><td>katalog numarası</td><td></td>yok</tr><tr><td>Carprofen</td><td>Zoetis</td><td>Rimadyl 50 mg/ml</td><td></td></tr><tr><td>KATETER-FEP 26G</td><td>TERUMO</td><td>Surflo-W</td><td></td></tr><tr><td>Klips Aplikatörü Forseps Stili</td><td>FST</td><td>18057-14</td><td></td></tr><tr><td>Kavisli forseps</td><td>WPI</td><td>14114-G</td><td></td></tr><tr><td>custodiol/HTK</td><td>Dr. Franz K&ouml; hler Chemie</td><td>katalog numarası</td><td></td>yok</tr><tr><td>Cutasept cilt dezenfeksiyonu</td><td>VWR</td><td>BODL980365</td><td></td></tr><tr><td>elektrocerrahi kalemi</td><td>Bovie</td><td>CHANGE-A-TIP</td><td></td></tr><tr><td>gazlı bez pedleri, pamuklu çubuklar</td><td>Lohmann-Rauscher</td><td>13353</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma matı</td><td>THERMO MAT PRO 30W</td><td>HTP-30</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatik sünger</td><td>CuraSpon</td><td>J1276A</td><td></td></tr><tr><td>heparin çözeltisi</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 03029820</td><td></td></tr><tr><td>Buz kutusu</td><td>PETZ</td><td>Katalog Numarası mevcut</td><td></td>değil</tr><tr><td>İnhalasyon anestezi cihazı</td><td>GROPPLER</td><td>BKGM 0616</td><td></td></tr><tr><td>izolasyon ve oksijen besleme cihazı</td><td>RUSKINN</td><td>INVIV</td><td></td></tr><tr><td>izofluran</td><td>CP İlaç</td><td>İzofluran CP 1 ml / ml</td><td></td></tr><tr><td>ketamin</td><td>Zoetis</td><td>katalog numarası</td><td></td>yok</tr><tr><td>metamizol</td><td>WDT</td><td>katalog numarası</td><td></td>yok</tr><tr><td>Mikro makas</td><td>FST</td><td>15000-00,15000-10</td><td></td></tr><tr><td>Mikro Serin ( Kelepçe ) Açılı / 16 mm</td><td>FST</td><td>18055-06</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Leica</td><td>LEICAMZ6</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop ışığı</td><td>SCHOTT</td><td>KL2500LED</td><td></td></tr><tr><td>Tuzlu çözelti (NaCl% 0.9)</td><td>Haus-Apotheke</td><td>PZN 06178437</td><td></td></tr><tr><td>Makas</td><td>Peha Aletleri</td><td>991083/4</td><td></td></tr><tr><td>küçük Petri kabı</td><td>Sarstedt</td><td>833900</td><td></td></tr><tr><td>Düz forseps</td><td>WPI</td><td>14113-G</td><td></td></tr><tr><td>cerrahi bant</td><td>BSN</td><td>4120</td><td></td></tr><tr><td>Sütür Bağlama Forseps - 10 cm</td><td>FST</td><td>18025-10</td><td></td></tr><tr><td>Sütürler(10-0)</td><td>Medtronic</td><td>N2540</td><td></td></tr><tr><td>Sütürler(4-0)</td><td>ETHILON</td><td>V4940H</td><td></td></tr><tr><td>Sütürler(7-0)</td><td>ETHILON</td><td>1647H</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga (0.3 mL)</td><td>BD</td><td>324826</td><td></td></tr><tr><td>Şırınga (1 mL)</td><td>BD</td><td>320801</td><td></td></tr><tr><td>ksilazin</td><td>Bayer</td><td>Rompun</td><td></td></tr></tbody></table>

abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu

Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği transplantasyon immünolojisinde araştırma için standart bir modeldir. Burada heterotopik abdominal kalp nakli modelinde modifiye kan devresi rekonstrüksiyonu için kurulan teknik sunulmuştur. Bu yöntem, alıcının alt vena kavasına anastomoz için donör kalbin pulmoner arteri yerine intratorasik inferior vena kavasını (IIVC) kullanır. Farelerde karın kalp nakli için başarı oranlarını kolaylaştırıyor ve iyileşiyor.

Burada, daha önce laboratuvarımızda geliştirilen ve son 16 yıldır yararlı olduğu kanıtlanmış farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin değiştirilmiş bir tekniği sunulmaktadır. Daha önce, genel olarak 40 vena kava olgusunda vena cava (V-V grubu) geleneksel pulmoner arterden vena cava (P-V grubu) anastomoz prosedürü4 (Tablo 1)'yekıyasla, anastomoz damarının V-V grubunda 20.8±1.3 dakika sürdüğü bildirilmiştir. P-V grubundan önemli ölçüde daha kısaydı (27.5±1.3 dk, p&lt;0...

Heterotopik abdominal fare kalp nakli modelinde kan devresi rekonstrüksiyonu için yeni bir teknik gösterilmiştir.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...

Farede kalp nakli alloimmün yanıtı incelemek için değerli bir modeldir Burada farede heterotopik karın kalp naklinin yeni bir cerrahi tekniğini tanıtıyoruz. Geleneksel fare kalbi naklinde donör aort ve alıcı abdominal aort anastomosed edilir. Pulmoner arter alıcı inferior vena kavaya anastomosed edilir.Bu yeni fare kalp naklinde. Donör aort alıcı abdominal aort için anastomosed ve donör intratorasik inferior vena kava alıcı inferior vena kava anastomosed edilir. Şimdi deneysel gösteriye başlıyoruz.İsofluran soluma ve anestezi için fareyi kutuya koyduktan sonra fareyi tartın. Farenin ağırlığına göre, fareyi uyuşturmak için ketamin ksilazinin asepromacinin intraperitoneal enjeksiyonu vermek. Anestezi etkisini gösterdiğinde ameliyat masasında fareyi sabitle ve dezenfekte et.Cildi boyundan alt karın bölgesine kadar kesin. Karın duvarının kaslarını kesin ve soldaki iç organları nazikçe çıkarın. Sonra, aşağı vena kava ortaya.Heparin çözeltisinin 0,4 mililitresini yavaşça alt vena kavaya enjekte edin ve iğneyi çıkarmadan önce bir dakika bekleyin. İğneyi çekin ve eksanguinasyonu hızlandırmak için hem alt vena kavayı hem de abdominal aortu makasla kesin. U şeklinde bir kesim yaparak göğüs boşluğunu açın.Kalbi, akciğerleri ve tüm göğüs kan damarlarını tamamen açığa çıkarır. Torasik aortu açığa çıkar. Lümen yarısını kes.Sulama tüpünü torasik aortun açıklığı içine yerleştirin. Sulama ve drenajı kolaylaştırmak için pulmoner damarı kesin. Dört derece htk çözeltisinin en az iki milimetre enjekte edin.Akciğer damarı çıkışı tamamen net olana kadar kalp tamamen durur. Sulama tüpünü çıkarın ve sternumu ayırın. Timus'un çıkar.Aort kemerinin etrafındaki yağı hafifçe soyun. Arteria pulmonalis gövdesini 10 sıfır dikişle açığa çıkar ve ligatlayın. İntratorasik inferior vena kavaya bağlı gerçeği ve bağ dokusunu ayırın Üstün vena kavasını yedi sıfır dikişle açığa çıkarıp ligatlatın ve ligasyonun arkasında kesin.Aort kemerinin altındaki kalbin tabanına yedi sıfır dikiş at. İnferior vena kava ve her iki kulak kepçesi, daha sonra pulmoner arter dallarını ve venöz akciğer damarlarını ligat. Aort kemerini mümkün olduğunca distal olarak transekte edin, ancak yan dalların açıklıkları olmadan bir açık lümene sahip olduğundan emin olun.Diyaframın yakınındaki bağ ve intratorasik inferior vena kava altındaki akciğer damarları. Şimdi, kalbi göğsünden çıkar. Ekilen donörün kalbini 4 derece soğuk HDK çözeltisine yerleştirin ve geçici olarak koruyun.Soğuk iskemi süresini 60 dakikadan daha uzun uzatmamaya dikkat edin. Şimdi, reseptör operasyonunu göstermeye başlıyoruz. İlk operasyon adımları, anestezi ve sterilizasyon da dahil olmak üzere donör fare için daha önce gösterilenlere benzer.Karın derisi enine bir şekilde kesilmiş. Bağırsak diseksiyonu sonrası, tuzlu su çözeltisi kullanarak karın organlarını ıslak bir gazlı bezle örtün. Alt vena kava ve abdominal aort maruz ve çevre yağ dokusu serbest.Gerekirse, yan dal damarlarını renal damarların altında ligat veya elektrokoterleştirin. İlk mikro hemostatik kümesleri sağdan beynin üst kısmına ve aortları renal damarların altına yerleştirin. İkinci mikro hemostatik kümes uçlarını beynin alt kısmına sağdan yerleştirin ve aort.İki hemostatik forseps arasında anastomoz için hem aort hem de damar alanı için bir santimetreden fazla vardır. Aort içine bir kesi yapın, alt kelepçeye üst kelepçeye göre biraz daha yakın. Ayrıca, küçük bir delik açmak ve mikro makasla açmak için 30G iğne kullanabilirsiniz.Kalbi karın boşluğuna yerleştirin. Görüşteki aort ve diğer taraftaki vena kava ve küçük bir ıslak gazlı bezle kaplar. Donör aortlarını alıcı aorta uyarlayıp dikin, kaudally başlayarak.Bir düğüm yapın ve bu kesiğin üstüne yaklaşık dört ila beş dikiş atarak akan bir dikişle devam edin. Ardından, kalbi sağa çevirin, tekrar örtün ve kaudal uca ulaşana kadar sol tarafta dikişe devam edin ve düğüm atın. Alıcının karın inferior vena kavasında yuvarlak bir delik açmak için mikro makas kullanın, bu da donörün intratorasik inferior vena kava lümeninin aynı boyutuna sahip olmalıdır.Kesi, planlanan aort anastomozunu cranial olarak konumlandırmalıdır. Damar kesisini aort kesisinden daha büyük hale getirin. Flush donörün intratorasik inferior vena kava.Donör intratorasik inferior vena kavayı alıcı vena cava'ya kaudally başlayarak dikin. Bir düğüm bağlayın ve kesiğin tepesine ulaşılana kadar akan bir dikiş gerçekleştirin. Beş dikiş kullanın ve soldaki dikişe devam edin.Son olarak, bir kuyruk köşesine bir düğüm bağlayın ve dikkatlice sıkın. Çok sıkı çekmemeye dikkat edin. Hemostatik süngerin küçük kısımlarını damarın etrafına ve aort anastomozunun etrafına koyun.Önce alt ve sonra üst mikro hemostatik kelepçeleri çıkarın ve karın boşluğunu ılık% 0.9 sodyum klorür ile durulayın. Hemostatik süngeri alın. Nakledilen kalbin kalp atışını gözlemleyin.Her şey yolundaysa, kalp tekrar kasmaya başlar. Bağırsakları tekrar karın boşluğuna koyun ve dört sıfır dikişle kapatın. Nakledilen farelerin iyileşmesi için sıcak ve oksijen bakımından zengin bir ortam sağlayın.Önceki araştırma çalışmalarımızda, genel 40 vena kava vakasının vena kava ile 40 geleneksel pulmoner arter vakasının vena cava anastomoz prosedürüne karşı karşılaştırılmasını rapor ettik. Vena kava grubundan vena cava grubuna kadar olan damar anastomozunda ameliyat süresi, geleneksel pulmoner arterden vena kava grubuna göre anlamlı derecede kısaydı. Farelerde heterotopik abdominal kalp naklinin cerrahi tekniği transplantasyon immünolojisinde araştırma için standart bir modeli temsil etmektedir.Burada sunulan kan devresi rekonstrüksiyonu için bu yeni teknik farelerde karın kalp naklini kolaylaştırıyor. Ve buna, aşılanmış kalbin azaltılmış sıcak iskemi ve rebeating zamanı ile birlikte denir, böylece bu modelin başarı oranını arttırır.

blood-circuit-reconstruction-an-abdominal-mouse-heart-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Fare heterotopik kalp transplantasyonu modeli ret ve immün yanıt mekanizmaları eğitim için önemli bir yöntem olduğu birçok araştırmacı tarafından kanıtlanmıştır. Ancak, söz konusu teknikleri hala zorlu. Standart teknikler değiştirerek 1000 nakli ile daha fazla başarı elde ettiler.

Farelerde Heterotopik Kalp Nakli

Sıçangil modeli servikal kalp nakli immünolojik hem de iskemi reperfüzyon yaralanması çalışmasından için uygundur. Biz olmayan bir dikiş manşet tekniği kullanılarak prosedür değiştirilmiş ve bu yaklaşım ile 1.000 'den fazla başarılı nakli gerçekleştirildi.  Burada, videoyu tamamlamak için bu tekniğin ek ayrıntıları.

Modifiye Manşet Tekniği Sıçangiller Servikal Kalp Nakli Modeli

Farelerde kalplerin heterotopik nakli için mikrocerrahi prosedür için, donör toplama ve alıcı damar anastomozu için basitleştirilmiş yöntemler de dahil olmak üzere bir teknik gösterilmiştir.

Heterotopik Fare Kalp NAKLİ için Modifiye Yöntem

El yazması fare heterotopik kalp nakli gerçekleştirmek için gereken adımları açıklar.

Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Manşet tekniği, küçük damarların teknik olarak zorlayıcı sütür anastomozlarından kaçınarak farelerde heterotopik servikal kalp nakli modelini kısaltır ve kolaylaştırır. Bu video makalesinde gösterilen teknik ayrıntılar, araştırmacıların bu modeli laboratuvarlarında kurmalarına izin vermelidir.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

Kombine katı organ ve vaskülarize kompozit allotransplantasyonu incelemek için, servikal dikişsiz manşet tekniği kullanarak farelerde yeni bir heterotopik en blok göğüs duvarı, timus ve kalp nakli modelini açıklıyoruz.

Farelerde A Novel Mikrocerrahi Heterotopik Modeli, En Bloku Göğüs Duvarı, Thymus ve Kalp Nakli

Bu protokolde, kardiyak allogreft rejeksiyon mekanizmasını araştırmak için bir fare kalp nakli modeli kullanılmıştır. Bu heterotopik kalp nakli modelinde, modifiye Manşet tekniği kullanılarak kalp implantasyonunun servikal uçtan uca anastomozu ile operasyon etkinliği artırılır ve kalp greftlerinin sağkalımı sağlanır.

Fare Servikal Heterotopik Kalp Transplantasyon Modeli için Modifiye Manşet Tekniği

Fare kardiyak transplantasyon modelleri, transplantasyon immünolojisini incelemek için değerli araştırma araçlarını temsil etmektedir. Mevcut protokol, laminer kan akışına izin vermek için alıcının ortak karotis arterine ve donörün pulmoner arter gövdesine manşetlerin yerleştirilmesini içeren fare heterotopik servikal kardiyak transplantasyonunu detaylandırmaktadır.

Vasküler Manşetler Kullanılarak Fare Heterotopik Servikal Kardiyak Transplantasyonu

Bu protokol, sare servikal kalp nakli için basitleştirilmiş ve uçtan yana dikiş anastomozu tekniği sunarak nakil immünolojisini incelemek için sağlam ve tekrarlanabilir bir model sunar.

Nakil İmmünolojisini Çalışmak İçin Uçtan Yana Anastomoz Tekniği Kullanılarak Servikal Heterotopik Fare Kalp Nakli

Biz sıçan kadavradan karaciğer nakli için klasik iki manşet tekniğinin kolay bir tesis revizyonu sunuyoruz.

Sıçanlarda Ortotopik Karaciğer Nakli

Öğrenin, farelerde heterotopik abdominal kalp nakli için yeni bir cerrahi teknik. Bu yöntem, donor aort ve intratorasik inferior vena kava anastomozları ile alloimmün yanıtları incelemeyi kolaylaştırır.

Abdominal Fare Kalp Nakli Modelinde Kan Devresi Rekonstrüksiyonu

Daha fazla video keşfet