Name: Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 41 s
Description: Öğrenin, farelerde subaraknoid kanama sonrası serebral vazospazmı yüksek frekanslı renkli dubleks sonografi ile invaziv olmayan şekilde izlemeyi. Bu yöntem, intrakraniyal ve ekstrakraniyal internal karotis arterlerdeki kan akım hızlarının uzunlamasına değerlendirilmesini sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, videodaki illüstrasyonların hazırlanması için Stefan Kindel'e teşekkür etmek istiyor. PW, MM ve SHK, Almanya Federal Eğitim ve Araştırma Bakanlığı (BMBF 01EO1503) tarafından desteklendi. Çalışma, Alman Araştırma Vakfı'nın (DFG INST 371/47-1 FUGG) Büyük Enstrümantasyon Hibesi ile desteklendi. MM, Else Kröner-Fresenius-Stiftung (2020_EKEA.144) tarafından hibe ile desteklendi.

Hayvan deneyleri sorumlu hayvan bakım komitesi (Landesuntersuchungsamt Rheinland-Pfalz) tarafından onaylandı ve Alman Hayvan Refahı Yasası (TierSchG) uyarınca gerçekleştirildi. Hayvanların bakımı ve kullanımı için geçerli tüm uluslararası, ulusal ve kurumsal yönergelere uyuldu. Bu çalışmada 11-12 haftalık kadın C57BL/6N farelerde vücut ağırlığı 19-21 g arasında olan intrakraniyal ve ekstrakraniyal arterlerin kan akış hızlarının ölçümlerini yaptık. Fareler, başka bir yerde ayrıntılı olarak açıklanan SAH indüksiyonu veya sham ameliyatına maruz kaldı10,12,13.
1. Malzemelerin hazırlanması
<ol><li>Ultrason makinesini aç ve hayvan kimliğine gir.</li>
	<li>Ultrason sisteminin ısıtma plakasını 37 °C'ye ısıtın. Rektal sıcaklık probun kullanıma hazır olduğundan emin olun.</li>
	<li>Ultrason jelini 37 °C'ye ısıtmak için bir su banyosu kullanın. Epilasyon kremi, elektrotlar için temas kremi ve göz merhemi hazırlayın.</li>
</ol>2. Anestezi
<ol><li>Fareyi 1 dakika boyunca% 4 izofluran ve% 40 O2 ile yıkanmış bir odaya koyarak anesteziye neden olabilir. Gözleri göz merhemiyle koruyun. Sadece yeterince derin bir anesteziye ulaşıldıktan sonra devam edin (ağrı uyaranlarına reaksiyon olmaması).</li>
	<li>Tüm işlem boyunca anestezi maskesi kullanarak %1,5 izofluran ve%40 O 2 ile anesteziyi koruyun.</li>
</ol>3. Transkraniyal yüksek frekanslı Dubleks sonografi ile intrakraniyal iç karotid arterlerin kan akış hızlarının belirlenmesi
<ol><li>37 °C vücut sıcaklığını korumak için fareyi ultrason sisteminin ısıtma plakasına eğilimli konuma yerleştirin.</li>
	<li>Hayvanın dört ekstremitesini iletken macunla kaplayın ve tahtaya gömülü EKG elektrotlarına bantla sabitleyin. Fizyolojik parametrelerin (EKG, solunum sinyali) görüntüleme sisteminin ekranında doğru görüntülenip görüntülenmey olduğunu kontrol edin (örneğin, Vevo3100). Gerekirse, dakikada 400-500 atım (bpm) hedef kalp atış hızı elde etmek için anestezi seviyesini ayarlayın.</li>
	<li>Yağlamayı bir rektal sıcaklık probuna yerleştirin ve vücut sıcaklığını izlemek için dikkatlice yerleştirin. Gerekirse ilave bir ısıtma lambası kullanın.</li>
	<li>İlk sınavdan önce, epilasyon kremi kullanarak oksiput'taki kürkü kimyasal olarak çıkarın. Saçlar dökülmeye başlayana kadar kremi 2 dakika boyunca yaymak ve ovalamak için pamuklu çubuk kullanın.<ol>
<li>Ek 2 dakika sonra, krem ve tüyleri bir spatula ile çıkarın ve cildi alkollü bir cilt antiseptiği ile dezenfekte edin. 37 °C'ye ısıtılmış ultrason jeli ile kaplayın.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ultrason görüntüleri elde etmek ve probu mekanik kola sabitlemek için 38 MHz doğrusal dizi dönüştürücüsü ve 200 kare/sn'nin üzerinde bir kare hızı kullanın. Dönüştürücüsü 30° geriye doğru eğilmiş oksiput üzerine yerleştirin.</li>
	<li>Sağ intrakraniyal iç karotid arteri görselleştirmek ve dönüştürücüsü kontrol ünitesiyle ileri geri hareket ettirmek için Parlaklık(B)- modunu ve Renk dalgası(CW) Doppler modunu kullanın, arterlerin maksimum akışı bulunana kadar.</li>
	<li>Anatomik bilgi toplamak için geleneksel B-Mode ve CW-Doppler modunu kullanın ve Edin düğmesine tıklayarak edinimi başlatın.<ol>
<li>İntrakraniyal gemilerin akış özellikleri hakkında bilgi kaydetmek için Pulse-Wave (PW) Doppler düğmesine tıklayın, numune hacmini geminin ortasına yerleştirin ve 3 s'den uzun bir sinüs döngüsü elde edin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin.</li>
	<li>Ekstrakraniyal karotis arterlere devam edin.</li>
</ol>4. Yüksek frekanslı Dubleks sonografi ile ekstrakraniyal iç karotid arterlerin kan akışı hızlarının belirlenmesi
<ol><li>37 °C vücut sıcaklığını korumak için fareyi ultrason sisteminin ısıtma plakasına geriye doğru yerleştirin.</li>
	<li>Hayvanın dört ekstremitesini iletken macunla kaplayın ve tahtaya gömülü EKG elektrotlarına bantla sabitleyin. Fizyolojik parametrelerin ekranda doğru görüntülenmesi için tekrar kontrol edin.</li>
	<li>İlk sınavdan önce yukarıda açıklandığı gibi epilasyon kremi kullanarak ön boyundaki kılları kimyasal olarak çıkarın. Ön boynu 37 °C'ye kadar ısıtılmış ultrason jeli ile kaplayın.</li>
	<li>Ultrason görüntüleri elde etmek için 38 MHz doğrusal dizi dönüştürücüsü ve 200 kare/sn'nin üzerinde bir kare hızı kullanın. Dönüştürücüsü hayvana paralel yerleştirin ve sağ şahdamarının boyuna görüntülerini elde etmek için pozisyonu ayarlayın.</li>
	<li>Doğru karotid arteri görselleştirmek için Parlaklık(B)- modunu ve Renk dalgası(CW) Doppler modunu kullanın. Görüntüde sağ ortak karotis arter (RCC), sağ iç karotis arter (RICA) ve sağ dış şahdamar (RECA) yer almalıdır.</li>
	<li>Anatomik bilgi toplamak için geleneksel B-Mode ve CW-Doppler modunu kullanın ve Edin düğmesine tıklayarak edinimi başlatın.<ol>
<li>Ekstrakraniyal karotis arterin akış özellikleri hakkında bilgi kaydetmek için Pulse-Wave (PW) Doppler düğmesine tıklayın, numune hacmini ortak karotis arterin, iç şahdamarının ve dış şahdamarının ortasına yerleştirin ve 3 s'den uzun bir sinevizyon döngüsü elde edin.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin.</li>
	<li>Anesteziyi sonlandırın ve hayvanı ısıtma plakasından çıkarın. Hipotermiyi önlemek ve tam iyileşmeyi kontrol etmek için hayvanı 1 saat boyunca 37 °C'ye ısıtılmış bir inkübatöre yerleştirilmiş bir kafese geri koyun.</li>
</ol>5. Ultrasonografi verilerinin işlenmesi
<ol><li>Yüksek frekanslı ultrason verilerinin işlenmesi sonrası için harici bir iş istasyonu kullanın. B modu, CW-Doppler modu ve PW-Doppler modu görüntülerini ve cine döngülerini dışa aktarın.</li>
	<li>İhraç edilen ultrason çalışmasını açın. Bir hayvan seçin ve intrakraniyal karotid arterin PW-Doppler cine döngüsünü açın. Bu protokolde genellikle 7 ila 8 kalp atışı ve karşılık gelen akış hızı eğrileri kaydedilir.</li>
	<li>Cine döngüsünü duraklatın ve Ölçüm düğmesine tıklayın. Vasküler Paketi seçin ve tepe sistolik basıncını (PSV) ölçmek için RICA PSV'ye tıklayın. Şimdi bir hız eğrisinin zirvesinde sola tıklayın ve düz çizgiyi sıfır çizgisine çekin. Sağ fare düğmesiyle bir tıklamayla ölçümü belirleyin.</li>
	<li>Şimdi enddiyastolik hızı (EDV) ölçmek için RICA EDV'yi seçin. Diyastole'nin sonundaki hız eğrisinin minimum döküntüsüne sola tıklayın. Çizgiyi doğrudan sıfır çizgisine çekin ve sağ fare düğmesiyle bir tıklamayla ölçümü belirleyin.</li>
	<li>Hız süresi integralini (VTI) ölçmek için RICA VTI'yi seçin. Hız eğrisinin başında sola tıklayın ve diyastolik platonun sonuna kadar fareyle eğriyi izleyin. Ardından ölçümü belirlemek için tekrar sağa tıklayın.</li>
	<li>Rapor düğmesini kullanarak intraserebral iç karotid arterlerin verilerini dışa aktarın. Dışarı Aktar'a basın ve verileri VSI Rapor dosyası olarak kaydedin.</li>
	<li>Doğru ekstrakraniyal iç karotid arterlerin PSV, EDV ve VTI'larını ölçmek ve verileri buna göre dışa aktarmak için aynı yaklaşımı kullanın.</li>
	<li>Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin.</li>
</ol>

<ol><li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li>
<li>Macdonald, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+neurological+deterioration+after+subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Neurology%22%5BJournal%5D)">Delayed neurological deterioration after subarachnoid haemorrhage.</a> Nature Reviews Neurology. 10 (1), 44-58 (2014).</li>
<li>Francoeur, C. L., Mayer, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+delayed+cerebral+ischemia+after+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Management of delayed cerebral ischemia after subarachnoid hemorrhage.</a> Critical Care. 20 (1), 277(2016).</li>
<li>van Lieshout, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+introduction+to+the+pathophysiology+of+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgical+Review%22%5BJournal%5D)">An introduction to the pathophysiology of aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgical Review. , (2017).</li>
<li>Altay, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+subarachnoid+hemorrhage+to+induce+vasospasm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">A novel method for subarachnoid hemorrhage to induce vasospasm in mice.</a> J Neurosci Methods. 183 (2), 136-140 (2009).</li>
<li>Momin, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+delivery+of+nitric+oxide+inhibits+leukocyte+migration+and+prevents+vasospasm+in+haptoglobin+2-2+mice+after+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Controlled delivery of nitric oxide inhibits leukocyte migration and prevents vasospasm in haptoglobin 2-2 mice after subarachnoid hemorrhage.</a> Neurosurgery. 65 (5), 937-945 (2009).</li>
<li>Froehler, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+in+haptoglobin+2-2+mice+can+be+prevented+with+a+glutathione+peroxidase+mimetic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vasospasm after subarachnoid hemorrhage in haptoglobin 2-2 mice can be prevented with a glutathione peroxidase mimetic.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 17 (9), 1169-1172 (2010).</li>
<li>Provencio, J. J., Altay, T., Smithason, S., Moore, S. K., Ransohoff, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depletion+of+Ly6G%2FC%28%2B%29+cells+ameliorates+delayed+cerebral+vasospasm+in+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroimmunology%22%5BJournal%5D)">Depletion of Ly6G/C(+) cells ameliorates delayed cerebral vasospasm in subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Neuroimmunology. 232 (1-2), 94-100 (2011).</li>
<li>Kamp, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+murine+single-blood-injection+SAH+model%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a murine single-blood-injection SAH model.</a> PLoS One. 9 (12), 114946(2014).</li>
<li>Luh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Contractile+Apparatus+Is+Essential+for+the+Integrity+of+the+Blood-Brain+Barrier+After+Experimental+Subarachnoid+Hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">The Contractile Apparatus Is Essential for the Integrity of the Blood-Brain Barrier After Experimental Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Volumetric+Method+for+Quantification+of+Cerebral+Vasospasm+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments. (137), (2018).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+Vessel+Vasospasm+Is+Not+Associated+with+Cerebral+Cortical+Hypoperfusion+in+a+Murine+Model+of+Subarachnoid+Hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Large Vessel Vasospasm Is Not Associated with Cerebral Cortical Hypoperfusion in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophils+mediate+early+cerebral+cortical+hypoperfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+haemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Neutrophils mediate early cerebral cortical hypoperfusion in a murine model of subarachnoid haemorrhage.</a> Scientific Reports. 9 (1), 8460(2019).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Volumetric+analysis+of+intracranial+vessels%3A+a+novel+tool+for+evaluation+of+cerebral+vasospasm%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Comput+Assist+Radiol+Surg%22%5BJournal%5D)">Volumetric analysis of intracranial vessels: a novel tool for evaluation of cerebral vasospasm.</a> Int J Comput Assist Radiol Surg. 14 (1), 157-167 (2019).</li>
<li>Washington, C. W., Zipfel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Participants+in+the+International+Multi-disciplinary+Consensus+Conference+on+the+Critical+Care+Management+of+Subarachnoid%2C+H.+Detection+and+monitoring+of+vasospasm+and+delayed+cerebral+ischemia%3A+a+review+and+assessment+of+the+literature%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroCritical+Care%22%5BJournal%5D)">Participants in the International Multi-disciplinary Consensus Conference on the Critical Care Management of Subarachnoid, H. Detection and monitoring of vasospasm and delayed cerebral ischemia: a review and assessment of the literature.</a> NeuroCritical Care. 15 (2), 312-317 (2011).</li>
<li>Greke, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+defined+segments+of+intracranial+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgical+Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of defined segments of intracranial arteries.</a> Journal of Neurosurgical Anesthesiology. 25 (1), 55-61 (2013).</li>
<li>Neulen, A., Prokesch, E., Stein, M., Konig, J., Giese, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-guided+transcranial+Doppler+sonography+for+monitoring+of+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Image-guided transcranial Doppler sonography for monitoring of vasospasm after subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 145, 14-18 (2016).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Image-Guided+Transcranial+Doppler+Ultrasound+for+Monitoring+Posthemorrhagic+Vasospasms+of+Infratentorial+Arteries%3A+A+Feasibility+Study%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Image-Guided Transcranial Doppler Ultrasound for Monitoring Posthemorrhagic Vasospasms of Infratentorial Arteries: A Feasibility Study.</a> World Neurosurgery. 134, 284-291 (2020).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+of+cardiac+function+and+cerebral+perfusion+in+a+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Correlation of cardiac function and cerebral perfusion in a murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Scientific Reports. 11 (1), 3317(2021).</li>
<li>Neulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+segmentation-based+volumetric+approach+to+localize+and+quantify+cerebral+vasospasm+based+on+tomographic+imaging+data%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A segmentation-based volumetric approach to localize and quantify cerebral vasospasm based on tomographic imaging data.</a> PLoS One. 12 (2), 0172010(2017).</li>
<li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+Review+of+In+Vivo+Animal+Models+of+Subarachnoid+Hemorrhage%3A+Species%2C+Standard+Parameters%2C+and+Outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Stroke+Research%22%5BJournal%5D)">Systematic Review of In Vivo Animal Models of Subarachnoid Hemorrhage: Species, Standard Parameters, and Outcomes.</a> Translational Stroke Research. , (2018).</li>
<li>Figueiredo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+digital+subtraction+angiography%2C+micro-computed+tomography+angiography+and+magnetic+resonance+angiography+in+the+assessment+of+the+cerebrovascular+system+in+live+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neuroradiology%22%5BJournal%5D)">Comparison of digital subtraction angiography, micro-computed tomography angiography and magnetic resonance angiography in the assessment of the cerebrovascular system in live mice.</a> Clinical Neuroradiology. 22 (1), 21-28 (2012).</li>
<li>Lindegaard, K. F., Nornes, H., Bakke, S. J., Sorteberg, W., Nakstad, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+vasospasm+diagnosis+by+means+of+angiography+and+blood+velocity+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica%22%5BJournal%5D)">Cerebral vasospasm diagnosis by means of angiography and blood velocity measurements.</a> Acta Neurochirurgica. 100 (1-2), 12-24 (1989).</li>
<li>Cassia, G. S., Faingold, R., Bernard, C., Sant'Anna, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+hypoxic-ischemic+injury%3A+sonography+and+dynamic+color+Doppler+sonography+perfusion+of+the+brain+and+abdomen+with+pathologic+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Neonatal hypoxic-ischemic injury: sonography and dynamic color Doppler sonography perfusion of the brain and abdomen with pathologic correlation.</a> American Journal of Roentgenology. 199 (6), 743-752 (2012).</li>
<li>Shen, Q., Stuart, J., Venkatesh, B., Wallace, J., Lipman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inter+observer+variability+of+the+transcranial+Doppler+ultrasound+technique%3A+impact+of+lack+of+practice+on+the+accuracy+of+measurement%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Monitoring+and+Computing%22%5BJournal%5D)">Inter observer variability of the transcranial Doppler ultrasound technique: impact of lack of practice on the accuracy of measurement.</a> Journal of Clinical Monitoring and Computing. 15 (3-4), 179-184 (1999).</li>
</ol>

Yazarlar rakip çıkarlar beyan etmemektedir.

Bilgimiz dahilinde, bu çalışma, yüksek frekanslı transkraniyal renk kodlu Dubleks ultrason ile SAH'ın bir murine modelinde serebral vazospazm izlenmesi için bir protokol sunan ilk çalışmadır. Bu yöntemin farelerde SAH indüksiyonu sonrası intrakraniyal kan akışı hızlarında bir artışı ölçebileceğini gösteriyoruz. İnsan tıbbında bu fenomen iyi bilinmektedir3,15. Çeşitli klinik çalışmalar, büyük intrakraniyal arterlerin yüksek kan akışı hızlarının ve intrakraniyal ka...

Spontan subaraknoid kanama (SAH), çoğunlukla intrakraniyal anevrizma1'inyırtılmasından kaynaklanan hemorajik inme şeklidir. Nörolojik sonuç esas olarak iki faktörden etkilenir: kanamanın ve buna bağlı geçici küresel serebral iskeminin etkilerinden kaynaklanan erken beyin hasarı (EBI) ve kanamayı takip eden haftalarda ortaya çıkan gecikmiş serebral iskemi (DCI),2,3. DCI'nın SAH hastalarının %30'una kadar etkilediğibildirilmiştir 2. DCI'nın patofizyolojisi anjiyografik serebral vazospazm, mikrovazospaz ve mikrotemozun neden olduğu rahatsız bir mikrositülasyon, kortikal yayılır depresyonlar ve iltihabın tetiklediği etkileri içerir4. Ne yazık ki, tam patofizyoloji belirsizliğini koruyor ve DCI3'üetkili bir şekilde önleyen bir tedavi yok. Bu nedenle DCI birçok klinik ve deneysel çalışmada araştırılmaktadır.
Günümüzde, SAH ile ilgili çoğu deneysel çalışmada, özellikle farelerde5, 6 , 7,8,9,10,11,12,13küçük hayvan modellerikullanmaktadır. Bu tür çalışmalarda serebral vazospazm uç nokta olarak sıkça araştırılmaktadır. Vasospasm ex vivo derecesini belirlemek yaygındır. Bunun nedeni, kısa anestezi süresi gerektiren ve hayvanlara sadece az sıkıntı uygulayan serebral vazospazm in vivo muayenesi için noninvaziv yöntemlerin eksik olmasıdır. Bununla birlikte, serebral vazospazm in vivo muayenesi avantajlı olacaktır. Bunun nedeni, farelerde vazospazm üzerinde uzunlamasına in vivo çalışmalara izin vermesidir (yani, SAH'ın indüksiyondan sonraki günlerde farklı zaman noktalarında serebral vazospazm görüntüleme). Bu, farklı zaman noktalarında elde edilen verilerin karşılaştırıllanabilirliğini artıracaktır. Ayrıca, uzunlamasına bir çalışma tasarımı kullanmak hayvan sayılarını azaltmak için bir stratejidir.
Burada farelerde serebral arterlerdeki kan akışını belirlemek için yüksek frekanslı transkraniyal ultrasonun kullanımını gösteriyoruz. Klinik uygulama 14, 15 ,16,17 ,18'detranskraniyal Doppler sonografi (TCD) veya transkraniyal renk kodlu Dubleks sonografiye (TCCD) benzer şekilde, bu yöntemin murine modelinde SAH indüksiyonu sonrası intrakraniyal arterlerin kan akış hızlarını ölçerek serebral vazospazmı izlemek için kullanılabileceğini gösteriyoruz.

<table><tbody><tr><td>Balea epilasyon kremi</td><td>Balea; Almanya</td><td>ASIN B0759XM39V</td><td>epilasyon kremi</td></tr><tr><td>C57BL/6N fareler</td><td>Janvier; Saint-Berthevin Cedex, Fransa</td><td>n.a.mice</td><td></td></tr> <tr><td>Corneregel</td><td>Bausch & Lomb; Rochester, NY, ABD</td><td>REF</td> 81552983 <td>göz merhemi, kayganlaştırıcı</td></tr><tr><td>pamuklu çubuklar</td><td>Hecht Assistent; Sondenheim vor der R&ouml; hn, Almanya</td><td>REF 44302010</td><td>pamuklu çubuklar</td></tr><tr><td>Ecco-XS tıraş bıçağı</td><td>Tondeo; Soligen, Almanya</td><td>DE 28693396</td><td>ustura</td></tr><tr><td>Elektrot kremi</td><td>GE; Boston, MA, ABD</td><td>REF</td><td>21708318 iletken macun</td></tr><tr><td>Isıtma plakası</td><td>Medax; Kiel, Almanya</td><td>2005-205-01</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abvie; Wiesbaden, Almanya</td><td>n.a.uçucu</td> <td>anestezik</td></tr><tr><td>Leukofix</td><td>BSN medikal; Hamburg, Almanya</td><td>REF 02137-00</td><td>bant</td></tr><tr><td>Mekanik kol + mikromanipülatör</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>P/N 11277</td><td></td></tr><tr><td>Mikrobac dokuları</td><td>Paul Hartmann AG; Hamburg, Almanya</td><td>REF 981387</td><td>antimikrobiyal dokular</td></tr><tr><td>MZ400, 38 MHz doğrusal dizi dönüştürücü</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>REF 51068-30</td><td>ultrason dönüştürücü</td></tr><tr><td>Sonosid</td><td>ASID Bonz GmbH; Herrenberg, Almanya</td><td>REF 782010</td><td>ultrasonografi jeli</td></tr><tr><td>Isıtma plakalı ve EKG kayıt</td><td>VisualSonics ile ultrason platformu; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>P/N 11179</td><td></td></tr><tr><td>UniVet-Porta</td><td>Groppler; Oberperasberg, Almanya</td><td>S/N BKGM0437</td><td>izofluran buharlaştırıcı</td></tr><tr><td>Vevo3100</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>REF 51073-45</td><td>ultrasonografi cihazı</td></tr><tr><td>VevoLab yazılımı</td><td>VisualSonics; FujiFilm, Toronto, CA</td><td>n.a.</td> <td>değerlendirme yazılımı</td></tr></tbody></table>

yüksek frekanslı transkraniyal dubleks ultrason ile subaraknoid kanamanın murine modelinde serebral vazospazm analizi

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Bir tür hemorajik inme olan subaraknoid kanamadan sonraki haftalarda ortaya çıkan serebral vazospazm, gecikmiş serebral iskemiye katkıda bulunur. SAH'ın murine modellerinin kullanılarak yapılan deneysel çalışmalarda karşılaşılan bir sorun, farelerde serebral vazospazm in vivo izleme yöntemlerinin eksik olmasıdır. Burada fareler üzerinde transkraniyal Dubleks sonografi muayeneleri yapmak için yüksek frekanslı ultrason uygulamasını gösteriyoruz. Yöntem kullanılarak, iç karotis arterler (ICA) tanımlanabilir. intrakraniyal ICA'lardaki kan akışı hızları SAH indüksiyonu sonrasında önemli ölçüde hızlanırken, ekstrakraniyal ICA'lardaki kan akışı hızları düşük kalarak serebral vazospazmı gösterdi. Sonuç olarak, burada gösterilen yöntem, bir murine SAH modelinde serebral vazospazm fonksiyonel, noninvaziv in vivo izlenmesine izin verir.

3'unda endovasküler filament perforasyon modeli kullanılarak SAH indüklenen 6 farede, 3'ü sham ameliyatı elde edilirken, intrakraniyal iç karotis arterin (ICA) ve ekstrakraniyal ICA'nın kan akış hızları ameliyattan bir gün önce, ameliyattan 1, 3 ve 7 gün sonra belirlendi. Ölçümler, vücut ısısı 37 °C19'datutulurken izofluran ile anestezi altında yapılan başka bir çalışmanın ekokardiyografi incelemelerinin bir parçası olarak gerçekleştirildi.
Ameliyattan önce, ekstra ve i...

Bu makalenin amacı, farelerde serebral arterlerde kan akışının in vivo görüntülenmesini sağlayan sonografi tabanlı bir yöntem sunmaktır. Subaraknoid kanamanın (SAH) murine modellerinde vazospazm ile ilişkili kan akışı hızlarındaki değişiklikleri belirlemek için uygulamasını gösteriyoruz.

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Bu prosedürün genel amacı, in vivo farelerde subaraknoid kanamadan sonra serebral vazospazm izlemektir. Bu, izofluran ile anestezi altında yüksek frekanslı renk kodlu dubleks sonografinin uygulanması ile gerçekleştirilir. Görüntüleme verileri intra ve ekstrakraniyal iç karotis arterlerdeki kan akış hızlarını belirlemek için işlenir.Hızlandırılmış intrakraniyal kan akışı hızı serebral vazospazmı gösterir. Bu çalışmada, 11 ila 12 haftalık C57BL/6N farelerde intrakraniyal ve ekstrakraniyal arterlerin kan akış hızlarının ölçümlerini yaptık. Fareler, başka bir yerde ayrıntılı olarak açıklanan SAH indüksiyonu veya sham ameliyatına tabi tutuldu.Ultrasonografi muayene anahtarını ultrason makinesine hazırlamak ve hayvan kimliğine girmek için.Ultrason sisteminin ısıtma plakasını 37 santigrat dereceye ısıtın. Rektal sıcaklık probun kullanıma hazır olduğundan emin olun. Ultrason jelini 37 santigrat dereceye ısıtmak için ılık bir su banyosu kullanın.Epilasyon kremini, elektrotlar için temas kremini ve göz merhemini hazırlayın. Dönüştürücünün mekanik kola düzgün bir şekilde monte edildiğinden emin olun ve anestezi indüksiyon odasının% 4 izofluran ve% 40 oksijen ile yıkanmasını sağlayın. Fareyi bir dakika boyunca odaya koyarak anesteziye neden olur.Gözleri merhemle koruyun. Sadece yeterince derin bir anesteziye ulaşıldıktan sonra devam edin. Tüm işlem boyunca anestezi maskesi kullanarak %1,5 izofluran ve %40 oksijen ile anesteziyi koruyun.İlk adımda transkraniyal yüksek frekanslı dubleks sonografi ile intrakraniyal iç karotid arterlerin kan akış hızları belirlenir. Vücut sıcaklığını 37 santigrat derece korumak için fareyi ultrason sisteminin ısıtma plakasına eğilimli konuma yerleştirin. Her iki tarafa da göz merhemi uygulayın.İlk sınavdan önce occiput'taki kürkü elektrikli tıraş makinesi ile kısaltın. Daha sonra epilasyon kremi kullanarak kalan tüyleri kimyasal olarak çıkarın. Saç dökülmeye başlayana kadar kremi iki dakika boyunca yaymak ve ovalamak için pamuklu çubuk kullanın.Ek iki dakika sonra kremi ve saçı bir spatula ile çıkarın ve cildi alkollü bir cilt antiseptiği ile dezenfekte edin. Hayvanın dört ekstremitesini iletken macunla kaplayın ve tahtaya gömülü EKG elektrotlarına bantla sabitleyin. Yağlamayı bir rektal sıcaklık probuna yerleştirin ve gerekirse ek ısıtma lambası kullanarak vücut sıcaklığını izlemek için dikkatlice yerleştirin.Ultrason sisteminin ekranında fizyolojik parametrelerin, EKG ve solunum sinyalinin doğru görüntülenip görüntülenmey olduğunu kontrol edin. Gerekirse, anestezi seviyesi dakikada 4 ila 500 atım hedef kalp atış hızı elde etmek için ayarlanabilir. Ultrason jeli ile kapla.Ultrason görüntüleri elde etmek ve mekanik kola monte etmek için doğrusal bir dizi dönüştürücü ve saniyede 200 karenin üzerinde bir kare hızı kullanın. Dönüştürücüsü 30 derece geriye doğru eğilmiş oksiput üzerine yerleştirin. Sağ intrakraniyal iç karotid arteri görselleştirmek ve arterlerin maksimum akışını bulana kadar dönüştürücüyu kontrol ünitesiyle ileri geri hareket ettirmek için B modu ve CW-Doppler modunu kullanın.Anatomik bilgi toplamak için geleneksel B modunu ve CW-Doppler modunu kullanın ve acquire düğmesine tıklayarak edinimi başlatın. İntrakraniyal damarların akış özellikleri hakkında bilgi kaydetmek için darbe dalgası doppler düğmesine tıklayın, geminin ortasına bir örnek hacim yerleştirin ve üç saniyeden uzun bir sinüs döngüsü elde edin. Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin.Bir sonraki adımda ekstrakraniyal iç karotis arterlerin kan akış hızları yüksek frekanslı dubleks sonografi ile belirlenir. 37 santigrat derecelik bir vücut sıcaklığını korumak için fareyi ultrason sisteminin ısıtma plakasındaki supine konumuna yerleştirin. İlk sınavdan önce boynun ön kısmının kıllarını elektrikli tıraş makinesi ile çıkarın.Daha sonra daha önce açıklandığı gibi epilasyon kremi kullanarak kalan tüyleri kimyasal olarak çıkarın. Hayvanın dört ekstremitesini iletken macunla kaplayın ve tahtaya gömülü EKG elektrotlarına bantla sabitleyin. Yağlamayı bir rektal sıcaklık probuna yerleştirin ve vücut sıcaklığını izlemek için dikkatlice yerleştirin.Gerekirse ek ısıtma lambası kullanma. Fizyolojik parametrelerin ekranda doğru görüntülenmesi için tekrar kontrol edin. Boynun önünü 37 santigrat dereceye kadar ısıtılmış ultrason jeli ile kaplayın.Dönüştürücüsü hayvana paralel yerleştirin ve sağ şahdamarının boyuna görüntülerini elde etmek için pozisyonu ayarlayın. Sağ şahdamarını görselleştirmek için B modu CW-Doppler modunu kullanın. Görüntüde sağ ortak karotis arter, sağ iç şahdamar ve sağ dış şahdamarı yer almalıdır.Anatomik bilgi toplamak için geleneksel B modunu ve CW-Doppler modunu kullanın ve acquire düğmesine tıklayarak edinimi başlatın. Ekstrakraniyal karotid arterin akış özellikleri hakkında bilgi kaydetmek için nabız dalgası doppler düğmesine tıklayın, numune hacmini ortak şahdamarının ortasına iç karotis arter ve dış karotid arterin ortasına yerleştirin ve üç saniyeden uzun bir sinevizyon döngüsü elde edin. Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin.Anesteziyi sonlandırın ve hayvanı ısıtma plakasından çıkarın ve hipotermiyi önlemek ve tam iyileşmeyi kontrol etmek için bir saat boyunca 36 santigrat dereceye ısıtılmış bir inkübatöre yerleştirilen bir kafese koyun. Bir sonraki adım ultrasonografi verilerini işlemektir. Yüksek frekanslı ultrason verilerinin sonrası işlenmesi için harici iş istasyonunun kullanılması.B modu, CW-Doppler modu ve PW-Doppler modu görüntülerini ve cine döngülerini Vevo LAB yazılımına dışa aktarın. İhraç edilen ultrason çalışmasını açın. Bir hayvan seçin ve intrakraniyal karotid arterin PW-Doppler cine döngüsünü açın.Bu protokolde genellikle karşılık gelen akış hızı eğrilerinde yedi ila sekiz kalp atışı kaydedilir. Cine döngüsünü duraklatın ve ölçüm düğmesine tıklayın. Vasküler paketi seçin ve sağ intrakraniyal karotid arterin tepe sistolik basıncını ölçmek için RICA PSV'ye tıklayın.Şimdi bir hız eğrisinin zirvesinde sola tıklayın ve düz çizgiyi sıfır çizgisine çekin. Sağ fare düğmesiyle bir tıklamayla ölçümü belirleyin. Şimdi uç diyastolik hızını ölçmek için RICA EDV'yi seçin.Diyastole'nin sonundaki hız eğrisinin minimum döküntüsüne sola tıklayın. Çizgiyi doğrudan sıfır çizgisine çekin ve sağ fare düğmesiyle bir tıklamayla ölçümü belirleyin. Hız süresi integralini ölçmek için RICA VTI'yi seçin.Hız eğrisinin başında sola tıklayın ve diyastolik platonun sonuna kadar eğriyi fareyle izleyin. Ve sonra ölçümü belirlemek için tekrar sağa tıklayın. Rapor düğmesini kullanarak intraserebral iç karotid arterlerin verilerini dışa aktarın.Dışarı aktar'a basın ve verileri VSI rapor dosyası olarak kaydedin. Doğru ekstrakraniyal iç karotid arterlerin PSV, EDV ve VTI ölçümlerinde aynı yaklaşımı kullanın ve verileri buna göre dışa aktarın. Sol tarafla aynı şekilde ilerleyin ve LICA PSV, EDV ve VTI kullanın.Beş farede ve üçü SAH indüklenirken ikisi sham ameliyatı elde edilirken intrakraniyal iç arterin ve ekstrakraniyal iç karotid arterin kan akış hızları ameliyattan bir gün önce ve ameliyattan bir, üç ve yedi gün sonra belirlendi. Ameliyattan önce, ekstra ve intrakraniyal kan akışı hızlarının yanı sıra intrakraniyal kan akışı oranı SAH ve sham hayvanları arasında benzerdi. SAH indüksiyonu sonrası ilk gün intra veya ekstrakraniyal kan akışı hızlarında veya intrakraniyal ve ekstrakraniyal kan akışı arasındaki oranlarda büyük bir değişiklik olmadı.Üçüncü ve yedinci günlerde iç karotid arterin intrakraniyal kan akışı hızları belirgin bir şekilde arttı ve SAH'dan sonra serebral vazospazmı gösteren SAH hayvanlarından ikisi. Ekstrakraniyal kan akışı hızları neredeyse değişmeden kaldığından, serebral vazospazmı gösteren SAH hayvanlarında intrakraniyal ve ekstrakraniyal kan akışı hızlarının oranları da yedinci günde önemli ölçüde artmıştır. Sonuç olarak, farelerde intrakraniyal kan akışının hızlarının in vivo ölçümlerini yapmak için yüksek frekanslı renk kodlu transkraniyal dubleks sonografi kullanılabilir.İnsan hastalardaki duruma benzer şekilde intrakraniyal kan akışı hızları, vasospazmı gösteren SAH'dan sonra farelerde hızlanır. Burada gösterilen ultra sonografik yöntem hızlı ve az invazivdir. Murine SAH modellerinde vazospazmin boyuna çalışmalarına izin verir.

analysis-cerebral-vasospasm-murine-model-subarachnoid-hemorrhage-with

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) zaman bir anevrizma rüptürü subaraknoid boşluğa oluşur kanıyor. Subaraknoid kanama birkaç yıl önce olduğu gibi aynı olmaya devam ediyor sonra bu olay gelen morbidite ve mortalite gelişmiş tedavi yaklaşımları nedeniyle bir düşüş, vazospazm riski olmuştur da. Serebral vazospazm başlatan olayları tanımlamak için kapsamlı ve tekrarlanabilir hayvan modeli kurmanın önemi Barry tarafından 1979 yılında deneysel vazospazm modelinde sıçanların ilk kullanımından bu yana...

Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli

Willis perforasyon intralüminal Circle subaraknoid kanama standartlaştırılmış bir fare modeli tarif edilmektedir. Gemi perforasyon ve subaraknoid kanama intrakranial basınç izleme tarafından izlenir. Buna ek olarak, çeşitli çok önemli parametreler kaydedilir ve fizyolojik koşulları sağlamak için kontrol edilir.

Subaraknoid Kanama bir fare modeli

Bu makalenin amacı mikro bilgisayarlı tomografi ve serebral vasospasm ölçmek için kullanılan tüm gemi parçaları hacimleri belirlenmesi sonra farelerde serebrovasküler ağaç 3 boyutlu rekonstrüksiyon sağlayan bir yöntem sunmaktır fare modelleri subaraknoid kanama.

Subaraknoid kanama, bir fare modeli serebral Vasospasm miktar hacimsel bir yöntemi

Bu protokolde, otolog tam kandan cisterna magna'ya çift enjeksiyon la standart laştırılmış subaraknoid kanama (SAH) fare modeli tanımlanmıştır. Çift enjeksiyon prosedürünün yüksek standardizasyon derecesi mortalite ile ilgili göreceli güvenlik ile SAH bir orta-akut modeli temsil eder.

Subaraknoid Kanama Modeli olarak Cisterna Magna içine Kan Çift Doğrudan Enjeksiyon

Fonksiyonel transkraniyal Doppler ultrason, bazal serebral arterler içindeki serebral kan akışındaki uyaran kaynaklı değişikliklerin yüksek zamansal çözünürlük ölçümü ile diğer fonksiyonel görüntüleme yöntemlerini tamamlar. Bu Yöntemler makalesi, fonksiyonel bir görüntüleme deneyi gerçekleştirmek için fonksiyonel transkraniyal Doppler ultrason kullanmak için adım adım talimatlar verir.

Serebral Kan Akışını İzlemek için Fonksiyonel Transkraniyal Doppler Ultrason

Burada, doğru kanama bölgesini sağlamak ve diğer ilgili intrakraniyal patolojileri dışlamak için operasyondan 24 saat sonra manyetik rezonans görüntüleme (MRG) ile kombine edilen endovasküler filament perforasyonu ile indüklenen standartlaştırılmış bir SAH fare modeli sunulmaktadır.

Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) ile Kombine Subaraknoid Kanama için Endovasküler Perforasyon Modeli

Transkraniyal ultrason, çeşitli nörolojik rahatsızlıkları olan hastaları izlemek için önemli bir araçtır. Danışma çalışmalarında yaygın olarak protokolize bir şekilde kullanılmasına rağmen, beyin, bakım noktası ultrasonu (PoCUS) kullanan birçok protokolde göz ardı edilmiştir. Bu çalışma bir PoCUS görüntü elde etme protokolü önermektedir.

Bakım Noktası Orta Serebral Arterin Transkraniyal Renk Kodlu Dubleks Ultrasonu

Bu çalışma, ferrik klorür ile indüklenen superior sagital sinüs trombozunun tekrarlanabilir, minimal invaziv bir fare modeli oluşturmak için bir protokol sunmaktadır; bu yöntem, lazer benek kontrast görüntüleme ve yüksek çözünürlüklü ultrasonla birlikte ipek-dikiş yöntemi kullanılarak değerlendirilmektedir.

Modifiye Ferrik Klorür Kaynaklı Superior Sagittal Sinüs Trombozunun Kurulması

Fonksiyonel transkraniyal Doppler ultrasonografi (fTCD), bilişsel işlevler, özellikle dil lateralizasyonu değerlendirmek için kullanılan bir basit ve non-invaziv bir ultrason tekniği ve çocuklarla birlikte kullanım için uygundur.

Fonksiyonel Transkraniyal Doppler Ultrasonografi kullanarak Çocuklarda Serebral Lateralizasyon Değerlendirme (fTCD)

Bu protokolü açıklanan farelerde intraserebral kanama otolog kan enjeksiyonu modeli, iğne izi kadar kan reflü, pompa sistemi hiçbir antikoagülanlar riskini en aza indirmek için çift enjeksiyon tekniği kullanır ve sistemdeki tüm ölü boşluk ve genişletilebilir boru ortadan kaldırır.

Farelerde Spontan İntraserebral Kanama Model Otolog Kan Enjeksiyon

Öğrenin, farelerde subaraknoid kanama sonrası serebral vazospazmı yüksek frekanslı renkli dubleks sonografi ile invaziv olmayan şekilde izlemeyi. Bu yöntem, intrakraniyal ve ekstrakraniyal internal karotis arterlerdeki kan akım hızlarının uzunlamasına değerlendirilmesini sağlar.

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Daha fazla video keşfet