Tek Taraflı İskemi-Reperfüzyon Hasarının Etkili Bir Fare Modeli

Renal iskemi-reperfüzyon hasarı akut böbrek yetmezliğinin önde gelen nedenidir. Bu model, iskemik bir hakaret sonrası böbrekte meydana gelen patofizyolojik değişiklikleri anlamak için çok yararlıdır. Bu model zaman ve uygun maliyetlidir ve yüksek oranda yeniden üretilebilir veriler sunar.

Buna ek olarak, bu Tek Taraflı Renal İskemi Modeli, araştırmacının yüksek hayatta kalma oranını korurken daha uzun iskemik sürelerle çalışmasına izin verir. Başlangıç olarak, anestezi uygulanan fareyi ameliyat masasına yerleştirin. Cerrahi alanı sterilize ettikten sonra, kaburganın arkasındaki sağ kanatta yaklaşık bir santimetrelik dorsal lateral cerrahi kesi yapmak için bir neşter bıçağı kullanın ve bel orta hattına yaklaşık bir santimetre paralel olarak coddley’e devam edin.

Retroperitoneal boşluğu görselleştirmek için makas kullanarak karın kas sistemini transekte edin. Kasların kesilmesi sırasında üretilen az miktarda kanı çıkarmak için steril bir pamuklu çubuk kullanın. Ardından, sağ böbreği karın boşluğundan dışarı itin.

Böbreği yavaşça ve dikkatlice gri forseps ile açığa çıkarın ve böbrek pedikülünü tanımlayın. Daha sonra pedikülün etrafındaki yağ dokusunu dikkatlice çıkarın. Vasküler kelepçeyi manipüle etmek için Halsted Sivrisinek Hemostatı kullanın.

İskemiyi indüklemek için, vasküler kelepçeyi renal arterin üzerine yerleştirin ve bitişik üreterin sıkışmasını önlemek için renal pedikülde bulunan damarı yerleştirin. Kekemelenmiş böbreği, kurumayı önlemek için tuzlu suya batırılmış steril gazlı bezle örtün. Böbrekleri gazlı bez üzerinde 30 dakika bekletin ve gazlı bezin anestezi derinliğini ve nemini periyodik olarak izleyin.

İskemi döneminin bitiminden kısa bir süre önce, böbreği ortaya çıkarın ve kelepçe çıkarılması için hazır olan Halsted Sivrisinek Hemostatını tutun. İskemi döneminin sonunda, vasküler kelepçeyi hemostatla açın ve böbreğin perfüzyonuna izin vermek için kelepçeyi çıkarın. Sahte kontrol hayvanları için, gösterilen ameliyatı böbrek pedikülünü sıkıştırmadan gerçekleştirin.

Böbrek rengi değişimini doğruladıktan sonra, böbreği karın boşluğuna geri döndürün. Karın kaslarını emilebilir sütür 5-0 ile çapraz bir düzende kapatın. Cildi emilebilir dikiş 5-0 ile yatay bir yatak deseninde kapatın.

Yarayı povidon-iyot çözeltisi ile temizleyin. İskemi perfüzyon hasarından sonra, başlangıçtaki vücut ağırlığının% 10’undan daha az olan bazı farelerde vücut ağırlığı azalması görülmüştür. Bununla birlikte, çoğu fare, ameliyat sonrası 4 ila 7. günler arasında ilk vücut ağırlıklarını geri kazandı.

Kontrol fareleri ameliyat sonrası herhangi bir vücut ağırlığı değişikliği göstermedi. Ameliyat sonrası renal morfolojide çeşitli değişiklikler hematoksilin-eozin, Periyodik asit-Schiff ve Masson Trikrom boyama kullanılarak tanımlandı. Boru şeklindeki lümende proteinli alçı varlığı dört saat sonra gözlendi.

Sekiz saatte tübüler dilatasyon saptandı ve IRI cerrahisinden 16 saat sonra medüller segmentlerde tübüler alçı ve hücresel nekroz fark edildi. Ameliyattan 24 saat sonra tübüler dilatasyon gözlendi. 48 saat sonra lenfositlerin ve makrofajların ve genişlemiş hücre çekirdeklerinin infiltrasyonu tespit edildi.

4. günde mitotik tübüler hücreler gözlendi ve IRI sonrası 7. günde fokal fibroz tespit edildi. Erken reperfüzyon sırasında farelerin renal korteksi PAS boyama kullanılarak izlendi ve fırça sınırının ilerleyici zayıflaması görüldü. Ameliyat sonrası 7. günde interstisyel fibroz alanları, Masson’un Trikom boyaması kullanılarak görselleştirildi.

Zaman içindeki hasarı kategorize etmek için boru şeklindeki yaralanma skorlama sistemi geliştirilmiştir. En yüksek tübüler yaralanma skorları Renal IRI’yi takiben 8 saat ile 24 saat arasında elde edildi. En kritik adımlardan bazıları, vasküler kelepçenin böbrek pedikülüne doğru yerleştirilmesi ve ameliyat sırasında sabit bir vücut ısısının korunmasıdır.