Name: Akciğer Transplantasyonunda Deneysel Organ Bağışı Modellerinin İncelenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-03-15T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 56 s
Description: Keşfedin akciğer bağışı modellerini: beyin ölümü, dolaşım ölümü ve hemorajik şok sonrası bağış. Bu yöntemler iltihabi süreçleri ve patolojik bozuklukları karşılaştırarak organ nakli sonuçlarını iyileştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

FAPESP'e (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo) finansal destek sağladığı için teşekkür ederiz.

Hayvan deneyleri, São Paulo Üniversitesi Tıp Fakültesi Deney Hayvanları Kullanımı ve Bakımı Etik Kurulu'na (protokol numarası 112/16) uygundur.
1. Hayvan gruplaması
<ol><li>Hayvan modelleriyle ilişkili etkileri analiz etmek ve karşılaştırmak için on iki erkek Sprague Dawley sıçanı (250-300 g) rastgele üç deney grubundan birine (n = 4) atayın.</li>
	<li>Hayvanları hemorajik şok grubuna atayın (HS, n=4): hemorajik şok indüksiyonu + 360 dakika bakım + kardiyopulmoner blok ekstraksiyonu + analiz için numune hazırlama ile vasküler kateterizasyona tabi tutulan hayvanlar.</li>
	<li>Hayvanları beyin ölümü grubuna atayın (BD, n=4): beyin ölümüne maruz kalan hayvanlar + 360 dakika bakım + kardiyopulmoner blok ekstraksiyonu + analiz için numune hazırlama.</li>
	<li>Hayvanları dolaşım ölüm grubuna atayın (CD, n=4): vasküler kateterizasyon + dolaşım ölümü indüksiyonu + ventilasyonun askıya alınması + 180 dakika oda sıcaklığında iskemi + analiz için numune hazırlamaya tabi tutulan hayvanlar.</li>
</ol>2. Anestezi ve cerrahi öncesi hazırlık
<ol><li>Sıçanı 1-4 dakika boyunca% 5 izofluran içeren kapalı bir odaya yerleştirin. Ayak parmağı sıkıştırma refleksini kontrol ederek uygun anesteziyi onaylayın. Refleks reaksiyonlarının yokluğunda (pençe retraksiyonu yok), pediatrik laringoskop yardımıyla orotrakeal entübasyon (14-G anjiyokat) yapın.</li>
	<li>Önceden ayarlanmış bir mekanik ventilatör ile (FiO2 0, tidal hacim 10 mL/kg, 90 döngü/dak ve PEEP 3.0 cmH2O), trakeal kateteri ventilatöre bağlayın ve anestezik konsantrasyonu %2'ye ayarlayın. NOT: Hayvan modelleriyle ilgili tüm prosedürler, bu bölümde açıklanan aynı anestezi protokolünü izlemiştir.</li>
	<li>İlgilenilen bölgelerden (baş, boyun, göğüs ve karın) kürkü çıkarın. Daha sonra gazlı bez kullanarak cerrahi alanı ve hayvanın kuyruğunu dezenfekte edin. Dezenfeksiyon, üç alternatif tur alkollü bir klorheksidin diglukonat ovma çözeltisi ile gerçekleştirilir.</li>
	<li>Hayvanın kuyruğunun ucunu kesin, başparmağınızı ve işaret parmağınızı kuyruğun tabanına yerleştirin ve ardından bastırıp tabandan uzağa kaydırın. Toplam lökosit sayısı8 için kuyruktan periferik kan örneği (20 μL) alın. NOT: Bu prosedür trakeostomi başlamadan önce ve her protokolün hemen sonunda yapılmalıdır (BD ve HS - 360 dakika sonra).</li>
	<li></ol><ol><li><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;"></li><li><li><li><li><li></li></ol><ol><li><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;"></li><li><li> </li><li><li></ol><ol><li><img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62975/62975eq01.jpg" style="margin: auto;"> </li><li><li> </li><li> </li></ol><ol><li><li><li></ol><ol><li><li><li><li><li><li><li> </li></ol>

<ol><li>Paterno, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+implications+of+donor+warm+and+cold+ischemia+time+in+donor+after+circulatory+death+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Clinical implications of donor warm and cold ischemia time in donor after circulatory death liver transplantation.</a> Liver Transplantation. 25 (9), 1342-1352 (2019).</li>
<li>Yusen, R. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+registry+of+the+International+Society+for+heart+and+lung+transplantation%3A+thirty-third+adult+lung+and+heart-lung+transplant+report-2016%3B+focus+theme%3A+primary+diagnostic+indications+for+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The registry of the International Society for heart and lung transplantation: thirty-third adult lung and heart-lung transplant report-2016; focus theme: primary diagnostic indications for transplant.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 35 (10), 1170-1184 (2016).</li>
<li>Jung, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+transplant+outcomes+for+low-level+and+standard-level+tacrolimus+at+different+time+points+after+kidney+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Comparison of transplant outcomes for low-level and standard-level tacrolimus at different time points after kidney transplantation.</a> Journal of Korean Medical Science. 34 (12), e103(2019).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+International+Society+for+heart+and+lung+transplantation+donation+after+circulatory+death+registry+report%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The International Society for heart and lung transplantation donation after circulatory death registry report.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 34 (10), 1278-1282 (2015).</li>
<li>Drake, M., Bernard, A., Hessel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+death%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Brain death.</a> Surgical Clinics of North America. 97 (6), 1255-1273 (2017).</li>
<li>Nepomuceno, N. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hypertonic+saline+in+the+pretreatment+of+lung+donors+with+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Effect of hypertonic saline in the pretreatment of lung donors with hemorrhagic shock.</a> Journal of Surgical Research. 225, 181-188 (2018).</li>
<li>Menegat, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+bone+marrow+downregulation+in+brain-dead+rats%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Experimental+Pathology%22%5BJournal%5D)">Evidence of bone marrow downregulation in brain-dead rats.</a> International Journal of Experimental Pathology. (3), 158-165 (2017).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+versus+cold+ischemic+donor+lung+preservation+on+the+underlying+mechanisms+of+injuries+during+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of warm versus cold ischemic donor lung preservation on the underlying mechanisms of injuries during ischemia and reperfusion.</a> Transplantation. (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Cypel, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+ex+vivo+perfusion+prevents+lung+injury+compared+to+extended+cold+preservation+for+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Normothermic ex vivo perfusion prevents lung injury compared to extended cold preservation for transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 9 (10), 2262-2269 (2009).</li>
<li>Wauters, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+lung+injury+at+increasing+time+intervals+in+a+murine+brain+death+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Evaluating lung injury at increasing time intervals in a murine brain death model.</a> Journal of Surgical Research. 183 (1), 419-426 (2013).</li>
<li>Smith, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiologic+changes+during+brain+stem+death--lessons+for+management+of+the+organ+donor%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Physiologic changes during brain stem death--lessons for management of the organ donor.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 23 (9), S217-S222 (2004).</li>
<li>Belhaj, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+versus+humoral+determinants+of+brain+death-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mechanical versus humoral determinants of brain death-induced lung injury.</a> PLoS One. 12 (7), e0181899(2017).</li>
<li>Kolkert, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gradual+onset+brain+death+model%3A+a+relevant+model+to+study+organ+donation+and+its+consequences+on+the+outcome+after+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">The gradual onset brain death model: a relevant model to study organ donation and its consequences on the outcome after transplantation.</a> Laboratory Animals. 41 (3), 363-371 (2007).</li>
<li>Rocha-E-Silva, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+effects+of+shock+and+trauma+in+experimental+models%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Brasileira+de+Cirurgia+Cardiovascular%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular effects of shock and trauma in experimental models: A review.</a> Revista Brasileira de Cirurgia Cardiovascular. 31 (1), 45-51 (2016).</li>
<li>Manara, A. R., Murphy, P. G., O'Callaghan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Anaesthesia%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death.</a> British Journal of Anaesthesia. 108, i108-i121 (2012).</li>
<li>Dhital, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+heart+transplantation+with+distant+procurement+and+ex-vivo+preservation+of+donor+hearts+after+circulatory+death%3A+a+case+series%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Adult heart transplantation with distant procurement and ex-vivo preservation of donor hearts after circulatory death: a case series.</a> The Lancet. 385 (9987), 2585-2591 (2015).</li>
<li>Boucek, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+heart+transplantation+after+declaration+of+cardiocirculatory+death%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pediatric heart transplantation after declaration of cardiocirculatory death.</a> The New England Journal of Medicine. 359 (7), 709-714 (2008).</li>
<li>Kramer, A. H., Baht, R., Doig, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+trends+in+organ+donation+after+neurologic+determination+of+death%3A+a+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22CMAJ+Open%22%5BJournal%5D)">Time trends in organ donation after neurologic determination of death: a cohort study.</a> CMAJ Open. 5 (1), E19-E27 (2017).</li>
<li>Reino, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trauma+hemorrhagic+shock-induced+lung+injury+involves+a+gut-lymph-induced+TLR4+pathway+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Trauma hemorrhagic shock-induced lung injury involves a gut-lymph-induced TLR4 pathway in mice.</a> PLoS One. 6 (8), e14829(2011).</li>
<li>Pascual, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+resuscitation+of+hemorrhagic+shock+diminishes+neutrophil+rolling+and+adherence+to+endothelium+and+reduces+in+vivo+vascular+leakage%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline resuscitation of hemorrhagic shock diminishes neutrophil rolling and adherence to endothelium and reduces in vivo vascular leakage.</a> Annals of Surgery. 236 (5), 634-642 (2002).</li>
<li>Van Zanden, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+donor+lung+quality+deteriorates+more+after+fast+than+slow+brain+death+induction%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Rat donor lung quality deteriorates more after fast than slow brain death induction.</a> PLoS One. 15 (11), e0242827(2020).</li>
<li>Shivalkar, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+effects+of+explosive+or+gradual+increase+of+intracranial+pressure+on+myocardial+structure+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Variable effects of explosive or gradual increase of intracranial pressure on myocardial structure and function.</a> Circulation. 87 (1), 230-239 (1993).</li>
<li>López-Aguilar, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Massive+brain+injury+enhances+lung+damage+in+an+isolated+lung+model+of+ventilator-induced+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Massive brain injury enhances lung damage in an isolated lung model of ventilator-induced lung injury.</a> Critical Care Medicine. 33 (5), 1077-1083 (2005).</li>
<li>Catania, A., Lonati, C., Sordi, A., Gatti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detrimental+consequences+of+brain+injury+on+peripheral+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Detrimental consequences of brain injury on peripheral cells.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 23 (7), 877-884 (2009).</li>
<li>McKeating, E. G., Andrews, P. J., Mascia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leukocyte+adhesion+molecule+profiles+and+outcome+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochirurgica+Supplement%22%5BJournal%5D)">Leukocyte adhesion molecule profiles and outcome after traumatic brain injury.</a> Acta Neurochirurgica Supplement. 71, 200-202 (1998).</li>
<li>Ott, L., McClain, C. J., Gillespie, M., Young, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokines+and+metabolic+dysfunction+after+severe+head+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Cytokines and metabolic dysfunction after severe head injury.</a> Journal of Neurotrauma. 11 (5), 447-472 (1994).</li>
<li>Avlonitis, V. S., Wigfield, C. H., Kirby, J. A., Dark, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hemodynamic+mechanisms+of+lung+injury+and+systemic+inflammatory+response+following+brain+death+in+the+transplant+donor%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">The hemodynamic mechanisms of lung injury and systemic inflammatory response following brain death in the transplant donor.</a> American Journal of Transplantation. 5 (4), 684-693 (2005).</li>
<li>De Jesus Correia, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypertonic+saline+reduces+cell+infiltration+into+the+lungs+after+brain+death+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pulmonary+Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Hypertonic saline reduces cell infiltration into the lungs after brain death in rats.</a> Pulmonary Pharmacology & Therapeutics. 61, 101901(2020).</li>
<li>Kalsotra, A., Zhao, J., Anakk, S., Dash, P. K., Strobel, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+trauma+leads+to+enhanced+lung+inflammation+and+injury%3A+evidence+for+role+of+P4504Fs+in+resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Brain trauma leads to enhanced lung inflammation and injury: evidence for role of P4504Fs in resolution.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 27 (5), 963-974 (2007).</li>
<li>Simas, R., Zanoni, F. L., Silva, R., Moreira, L. F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+death+effects+on+lung+microvasculature+in+an+experimental+model+of+lung+donor%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Brasileiro+de+Pneumologia%22%5BJournal%5D)">Brain death effects on lung microvasculature in an experimental model of lung donor.</a> Journal Brasileiro de Pneumologia. 46 (2), e20180299(2020).</li>
<li>Moore, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physiological+response+to+hemorrhagic+shock%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Emergency+Nursing%22%5BJournal%5D)">The physiological response to hemorrhagic shock.</a> Journal of Emergency Nursing. 40 (6), 629-631 (2014).</li>
<li>Fülöp, A., Turóczi, Z., Garbaisz, D., Harsányi, L., Szijártó, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+hemorrhagic+shock%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Experimental models of hemorrhagic shock: a review.</a> European Surgical Research. 50 (2), 57-70 (2013).</li>
<li>Hillen, G. P., Gaisford, W. D., Jensen, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+changes+in+treated+and+untreated+hemorrhagic+shock.+I.+Early+functional+and+ultrastructural+alterations+after+moderate+shock%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pulmonary changes in treated and untreated hemorrhagic shock. I. Early functional and ultrastructural alterations after moderate shock.</a> The American Journal of Surgery. 122 (5), 639-649 (1971).</li>
<li>Sprung, J., Mackenzie, C. F., Green, M. D., O'Dwyer, J., Barnas, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chest+wall+and+lung+mechanics+during+acute+hemorrhage+in+anesthetized+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+and+Vascular+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">Chest wall and lung mechanics during acute hemorrhage in anesthetized dogs.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 11 (5), 608-612 (1997).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+BTK+protects+lungs+from+trauma-hemorrhagic+shock-induced+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Medicine+Reports%22%5BJournal%5D)">Inhibition of BTK protects lungs from trauma-hemorrhagic shock-induced injury in rats.</a> Molecular Medicine Reports. 16 (1), 192-200 (2017).</li>
<li>Maeshima, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+hemorrhagic+shock-induced+lung+injury+by+heme+arginate+treatment+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Prevention of hemorrhagic shock-induced lung injury by heme arginate treatment in rats.</a> Biochemical Pharmacology. 69 (11), 1667-1680 (2005).</li>
<li>Gao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+different+resuscitation+fluids+on+acute+lung+injury+in+a+rat+model+of+uncontrolled+hemorrhagic+shock+and+infection%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Trauma%22%5BJournal%5D)">Effects of different resuscitation fluids on acute lung injury in a rat model of uncontrolled hemorrhagic shock and infection.</a> The Journal of Trauma. 67 (6), 1213-1219 (2009).</li>
<li>Wohlauer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nebulized+hypertonic+saline+attenuates+acute+lung+injury+following+trauma+and+hemorrhagic+shock+via+inhibition+of+matrix+metalloproteinase-13%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Nebulized hypertonic saline attenuates acute lung injury following trauma and hemorrhagic shock via inhibition of matrix metalloproteinase-13.</a> Critical Care Medicine. 40 (9), 2647-2653 (2012).</li>
<li>Morrissey, P. E., Monaco, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+circulatory+death%3A+current+practices%2C+ongoing+challenges%2C+and+potential+improvements%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Donation after circulatory death: current practices, ongoing challenges, and potential improvements.</a> Transplantation. 97 (3), 258-264 (2014).</li>
<li>Snell, G. I., Levvey, B. J., Levin, K., Paraskeva, M., Westall, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Donation+after+brain+death+versus+donation+after+circulatory+death%3A+lung+donor+management+issues%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Donation after brain death versus donation after circulatory death: lung donor management issues.</a> Seminars in Respiratory and Critical Care Medicine. 39 (2), 138-147 (2018).</li>
<li>Iskender, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+warm+versus+cold+ischemic+donor+lung+preservation+on+the+underlying+mechanisms+of+injuries+during+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Effects of warm versus cold ischemic donor lung preservation on the underlying mechanisms of injuries during ischemia and reperfusion.</a> Transplantation. 102 (5), 760-768 (2018).</li>
<li>Yamamoto, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activations+of+mitogen-activated+protein+kinases+and+regulation+of+their+downstream+molecules+after+rat+lung+transplantation+from+donors+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">Activations of mitogen-activated protein kinases and regulation of their downstream molecules after rat lung transplantation from donors after cardiac death.</a> Transplantation Proceedings. 43 (10), 3628-3633 (2011).</li>
<li>Kang, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+signatures+in+donor+lungs+from+donation+after+cardiac+death+vs+after+brain+death%3A+a+functional+pathway+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Heart+and+Lung+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Transcriptional signatures in donor lungs from donation after cardiac death vs after brain death: a functional pathway analysis.</a> The Journal of Heart and Lung Transplantation. 30 (3), 289-298 (2011).</li>
</ol>

Bu yayınla ilişkili bilinen herhangi bir çıkar çatışması olmadığını ve bu çalışma için sonucunu etkileyebilecek önemli bir mali destek olmadığını teyit etmek istiyoruz.

Son yıllarda, beyin ölümü tanılarının sayısının artması, nakil amaçlı organ ve dokuların en büyük sağlayıcısı haline gelmesine neden olmuştur. Ancak bu büyümeye, dolaşım ölümünden sonra bağışlarda inanılmaz bir artış eşlik etti. Multifaktöriyel doğasına rağmen, ölüm nedenlerini tetikleyen mekanizmaların çoğu, yoğun kan içeriği kaybı ile travmadan sonra başlar veya travmaya eşlik eder 4,18.
Bu bağlamda, beyin ölümü, dolaşım durması ve hemorajik şokun deneysel modelleri, donör ölümünün nedeni ile ilişkili komplikasyonların ve bunların transplantasyona yönelik potansiyel organların canlılığı üzerindeki etkilerinin prospektif çalışması için önemli araçlardır 6,8,10. Model oluşturma için domuz, tavşan, sıçan ve fare gibi çeşitli hayvan soyları önerilmiştir. Sıçan ve fare modelleri, çok pahalı olmamaları ve incelenen patofizyolojik olayları tatmin edici bir şekilde yeniden üretirken düşük lojistik zorluk içermeleri nedeniyle literatürde daha yaygındır 8,13,14,15.
Son kılavuzların ve çalışmaların, perioperatif ağrı ve hayvan refahının daha kapsamlı yönetimini amaçlayan, akut durumlarda bile cerrahi protokollerin ayrılmaz bir parçası olarak preanestezik analjezinin kullanımını onayladığını vurgulamak isteriz. Araştırmacıların gelecekteki çalışmalarda böyle bir yaklaşımı değerlendirmelerini öneriyoruz.
Beyin ölümü (BH) Behçet modeli, ICP'deki ani bir artışla tekrarlanabilir bulundu. Uygun aletlerin ve eğitimli personelin kullanılması, birkaç haftalık eğitimle cerrahi başarıya ve tekniğin çoğaltılmasına olanak sağlar. Behçet tekniğinin geliştirilmesi sırasında kateterde gevşeklik olmayacak şekilde uygun bir motorlu matkap ile trepanasyon yapılmalı, böylece beyin dokusunun delikten dışarı çıkması engellenmelidir. Ek olarak, delme sırasında, kafatasının sunduğu ilk direnç aşılır aşılmaz matkabın ileri hareketi durdurulmalıdır.
Araştırmacılar tetikte kalmalı ve kateterin hızlı bir şekilde şişmesini sağlamalıdır, çünkü kademeli şişirme farklı inflamatuar ve hemodinamik tepkileri teşvik eder21. Kan basıncı değişiklikleri, protokol boyunca, özellikle kateter insüflasyonu sırasında, MAP'de ani bir artışın eşlik etmesi gereken ve Behçet hastalığının kurulmasından sonraki ilk saat boyunca (enflasyon sonrası hipotansiyon dönemi) sürekli olarak izlenmelidir. Bu sonuçlar, kateter insüflasyonundan hemen sonra hipertansif bir pikin kurulduğunu ve ardından dolaşımdaki katekolamin seviyelerindeki geçici artışa olası bir yanıt olarak basınç seviyelerinde bir azalma olduğunu gösteren literatürle uyumludur22.
Hayvanı uzun süre Behçet hastalığında tutmak, hipotansiyona ve ardından dolaşım ölümüne yol açarak deneyi olanaksız hale getirebilir. Buna göre, literatürde kullanılan çoğu protokol 4 ila 6 saat arasında değişen bir takip süresi belirlemekte ve bu süreden sonra vazoaktif ilaçların verilmesi gerekmektedir 12,13,21,22,23.
Hemodinamik değişikliklere ek olarak, serebral enfarktüs ve iskemi, akciğerlere ulaştıklarında akciğer parankimi hasarına katkıda bulunan proinflamatuar faktörlerin sistemik dolaşımında bir artışı teşvik eder 24,25,26.
Çalışmamızda, Behçet hastalığına doku IL-1β ekspresyonunda (CD üzerinden) ve pulmoner ödem indeksi olan ıslak/kuru ağırlık oranında anlamlı bir artış eşlik etti. Önceki çalışmalar, bir Behçet hastalığından sonra dolaşımdaki proinflamatuar sitokin seviyelerinde bir artış olduğunu göstermiştir, bu da sonuçta adezyon moleküllerinin ekspresyonunun modülasyonunu, artmış vasküler geçirgenliği ve bunun sonucunda lökosit göçünü destekleyebilir 27,28,29,30.
Hemorajik şok (HS) Uzun süreli hipotansiyon bakımı (≤ 50 mmHg) amacıyla kan alikotlarının geri çekilmesi veya yeniden infüzyonu yoluyla kurulan HS'nin sabit basınç modeli, hemorajik sürecin neden olduğu kan hacmindeki azalmayı ve sonuç olarak sistemik dolum basıncının zayıflamasını taklit etmeyi amaçlar. Bu olaylar, pulmoner perfüzyon basıncında bir azalmaya eşlik eden MAP'de bir azalmaya yol açar31,32.
Bu HS modelinin avantajları arasında, önceden sabitlenmiş bir kan hacmine dayalı modellere kıyasla tekniğin daha fazla tekrarlanabilirliğine ek olarak, hipotansiyonun derecesini ve süresini kontrol etme olasılığı vardır. Buna göre, literatürde kullanılan çoğu protokol, çalışmada seçilen analize bağlı olarak ortalama kan basıncı seviyeleri 20-55 mmHg arasında değişen, 15 dakika ile 180 dakika arasında değişen bir protokol süresi belirlemektedir 6,32. Bu çalışmada, HS'ye maruz kalan hayvanlarda hipotansiyon 3 saat boyunca korunmuş, doku direncinin artmasına ve ardından akciğer kompliyansının azalmasına neden olmuştur. Bunu doğrulayan literatürdeki farklı çalışmalar, HS'de geçirilen süre ile hipovoleminin hava yolu direnci ve akciğer kompliyansı üzerindeki etkileri arasında orantılı bir ilişki olduğunu göstermiştir 6,33,34.
Ek olarak, bu çalışmada HS'ye belirgin lökositoz ve IL-1β (CD'ye göre) ve TNF-α'nin artmış doku ekspresyonu eşlik etti. Birincil hipoksi ve yerleşik iskemi sürecinden reaktif oksijen türlerinin salınmasıyla indüklenen pulmoner mikrovasküler endotel yaralanması, pulmoner arter basıncındaki artışla birlikte lökositler için kemotaktik bir faktör olarak hareket edecek vasküler geçirgenliği artıracak ve daha sonra inflamatuar mediatörlerin salınması 6,20,31,35,36, 37,38.
Dolaşım ölümü (CD) Behçet ve ÇH işlemlerinden kaynaklanan marjinal greftler arasındaki temel fark, bazı araştırmacılar tarafından periferik nabızların yokluğu ile yaşam destek ekipmanının çıkarılması nedeniyle kan akışının kesilmesi arasında geçen süre olarak tanımlanan, greftin maruz kalacağı sıcak iskemi zamanıdır (WIT) organın soğuk veya bölgesel perfüzyonunakadar geçen süre 17, 39,40.
Bu çalışmada, CD modelinden elde edilen hayvanların organ ve dokuları 180 dakikalık bir WIT periyoduna tabi tutulmuştur. Literatürdeki birçok çalışma, WIT ile transplantasyon sonrası disfonksiyon arasında orantılı bir ilişki olduğunu ortaya koymuştur, bu da iskemi süresinin her organın özelliklerine ve bütünlüğüne göre değişmesi gerektiğini düşündürmektedir. Bu bağlamda, sıçanlardan alınan akciğer greftlerinin 3 saate kadar sıcak iskemiyi tolere ettiği gösterilmiştir41,42.
Baskın sempatik fazın neden olduğu doku hasarı, hemodinamik instabilite ve Behçet hastalığından kaynaklanan sistemik inflamasyon kanıtları ile, dolaşım durması sonrası bağışlar, transplantasyonla ilişkili komplikasyonları azaltmak için potansiyel bir strateji olarak yeniden gözden geçirilmiştir 41,42,43. Bu anlamda, verilerimiz, incelenen diğer iki modele göre CD modelinde IL-1β ve TNF-α seviyelerinde dramatik bir düşüşe işaret etmektedir. Bunu doğrulayan Iskender ve ark.4, WIT'den sonra hala tam olarak anlaşılamayan mekanizmalar yoluyla bağışlanan dokulara sahip sıçanlarda bir akciğer reperfüzyonu modelinde düşük doku sitokin seviyelerine dikkat çekti.
Yukarıdakilere dayanarak, metodoloji seçimi ve uyarlamaları araştırmacı tarafından geliştirilen hedeflere bağlı olmalıdır. Bu hedefler belirlendikten sonra bağış modelinin türünü, protokol süresini ve yapılacak analizleri yönlendirmelidir. Bağış türünü, akciğer yenileme ve reperfüzyonun hayvan modelleriyle ilişkilendirmek de mümkündür.
Sonuç Sonuç olarak, burada açıklanan organ bağışı modelleri, farklı greft toplama metodolojileri ile ilişkili değişikliklerin incelenmesinde potansiyel araçlardır ve burada sunulan metodolojilerin tekrarlanabilirliği ve güvenilirliği göz önüne alındığında, bu organların kalitesinin nakil sonrası sonuçlar üzerindeki etkisinin tam olarak anlaşılmasını sağlayacak araçlar sağlayabilir.

Klinik uygunluk Organ nakli, birçok ciddi patoloji için iyi bilinen bir terapötik seçenektir. Son yıllarda, organ transplantasyonunun klinik ve deneysel alanlarında, primer greft disfonksiyonunun (PGT) patofizyolojisi hakkında daha fazla bilgi sahibi olmak ve yoğun bakım, immünoloji ve farmakoloji alanlarındaki ilerlemeler gibi birçok ilerleme kaydedilmiştir 1,2,3. İlgili cerrahi ve farmakolojik prosedürlerin kalitesindeki başarılara ve gelişmelere rağmen, mevcut organ sayısı ile bekleme listesindeki alıcı sayısı arasındaki ilişki ana zorluklardan biri olmaya devam etmektedir 2,4. Bu bağlamda, bilimsel literatür, organ bağışçılarına organ nakli zamanına kadar organları tedavi etmek ve/veya korumak için uygulanabilecek tedavileri incelemek için hayvan modelleri önermiştir 5,6,7,8.
Klinik uygulamada gözlemlenen farklı olayları taklit ederek, hayvan modelleri, ilişkili patolojik mekanizmaların ve bunların ilgili terapötik yaklaşımlarının incelenmesine izin verir. Bu olayların deneysel indüksiyonu, çoğu izole vakada, organ nakli ile ilgili bilimsel literatürdegeniş çapta araştırılan deneysel organ ve doku bağışı modelleri oluşturmuştur 6,7,8,9. Bu çalışmalar, beyin ölümü (BH), hemorajik şok (HS) ve dolaşım ölümüne (CD) neden olanlar gibi farklı metodolojik stratejiler kullanır, çünkü bu olaylar bağışlanan organ ve dokuların işlevselliğini tehlikeye atan farklı zararlı süreçlerle ilişkilidir.
Beyin ölümü (BH) BD, farklı sistemlerin ilerleyici bozulmasına yol açan bir dizi olayla ilişkilidir. Genellikle beyin travması veya kanama nedeniyle kafa içi basıncında (ICP) akut veya kademeli bir artış meydana geldiğinde ortaya çıkar. ICP'deki bu artış, Cushing refleksi10,11 olarak bilinen bir süreçte stabil bir serebral kan akışını sürdürmek amacıyla kan basıncında bir artışı teşvik eder. Bu akut değişiklikler, nakil sonrası morbidite ve mortaliteyi etkilemenin yanı sıra, bağışlanan organların miktarını ve kalitesini tehlikeye atan kardiyovasküler, endokrin ve nörolojik işlev bozukluklarına neden olabilir 10,11,12,13.
Hemorajik şok (HS) HS, sırayla, çoğu organ bağışçıları ile ilişkilidir, çünkü bunların çoğu önemli kan hacmi kaybına neden olan travma kurbanlarıdır. Akciğerler ve kalp gibi bazı organlar, hipovolemi ve bunun sonucunda ortaya çıkan doku hipoperfüzyonu nedeniyle HS'ye karşı özellikle savunmasızdır14. HS, artan kılcal geçirgenlik, ödem ve enflamatuar hücrelerin infiltrasyonu yoluyla akciğer hasarına neden olur, birlikte gaz değişimini tehlikeye atan ve ilerleyici organ bozulmasına yol açan mekanizmalar, sonuç olarak bağış sürecini raydan çıkarır 6,14.
Dolaşım ölümü (CD) CD sonrası bağışın kullanımı büyük dünya merkezlerinde katlanarak artmakta ve böylece toplanan organ sayısının artmasına katkıda bulunmaktadır. CD sonrası donörlerden elde edilen organlar, düşük (agonik faz) veya kan akışı (asistolik faz) aralığından sonra ortaya çıkan sıcak iskeminin etkilerine karşı savunmasızdır8,15. Hipoperfüzyon veya kan akışının olmaması, ani ATP kaybı ve dokularda metabolik toksinlerin birikmesi ile ilişkili doku hipoksisine yol açacaktır15. Klinik uygulamada transplantasyon için mevcut kullanımına rağmen, bu organların kullanımının transplantasyon sonrası greftin kalitesi ve hasta sağkalımı üzerindeki etkisi hakkında birçok şüphe devam etmektedir15. Bu nedenle, ÇH ile ilişkili etiyolojik faktörlerin daha iyi anlaşılması için deneysel modellerin kullanımı da artmaktadır 8,15,16,17.
Deneysel modeller Çeşitli deneysel organ bağışı modelleri (BD, HS ve CD) vardır. Bununla birlikte, çalışmalar genellikle bir seferde yalnızca bir stratejiye odaklanır. İki veya daha fazla stratejiyi birleştiren veya karşılaştıran çalışmalarda gözle görülür bir boşluk vardır. Bu modeller, bağış sayısını artırmayı ve sonuç olarak potansiyel alıcıların bekleme listesini azaltmayı amaçlayan tedavilerin geliştirilmesinde çok faydalıdır. Bu amaçla kullanılan hayvan türleri, çalışmadan çalışmaya değişir, amaç insan morfo fizyolojisi ile daha doğrudan bir çeviri olduğunda ve hayvanın büyüklüğü nedeniyle cerrahi prosedürde daha az teknik zorluk olduğunda domuz modelleri daha yaygın olarak seçilir. Faydalarına rağmen, lojistik zorluklar ve yüksek maliyetler domuz modeliyle ilişkilidir. Öte yandan, düşük maliyet ve biyolojik manipülasyon olasılığı, kemirgen modellerinin kullanımını destekleyerek, araştırmacının lezyonları çoğaltmak ve tedavi etmek için güvenilir bir modelden başlamasına ve ayrıca organ nakli alanında edinilen bilgileri entegre etmesine olanak tanır.
Burada, beyin ölümü, dolaşım ölümü ve hemorajik şok bağışının kemirgen bir modelini sunuyoruz. Bu modellerin her biri ile ilişkili enflamatuar süreçleri ve patolojik durumları tanımladık.

<table><tbody><tr><td>14 gauge anjiyokat,</td><td>DB</td><td>38186714</td>, <td>Orotrakeal entübasyon,</td></tr><tr><td>2.0-ipek</td><td>Brasutür</td>, <td>AA553</td>, <td>Trakeal tüp fiksasyonu,</td></tr><tr><td>24-gauge anjiyokat,</td><td>DB</td><td>38181214</td>, <td>Arteriyel ve venöz erişim</td></tr>, <tr><td>4.0-ipek</td><td>Brasutür</td>, <td>AA551</td>, <td>Arteriyel ve venöz kanüllerin fiksasyonu</td></tr>, <tr><td>Alkolik klorheksidin diglukonat çözeltisi (% 2).</td><td>Vic Pharma</td><td>Y/N</td><td>Asepsi</td></tr><tr><td>Trikotomi cihazı</td><td>Oster</td><td><güçlü>Y/N</güçlü></td><td><güçlü>Kırpma cihazı</güçlü></td></tr><tr><td>Hassas terazi</td><td><güçlü>Shimadzu</güçlü></td><td>D314800051</td><td>Yaş / kuru ağırlık oranının analizi</td></tr><tr><td>Barbitürat (Tiyopental)</td> <td>Crist&aacute; lia</td><td>18080003</td><td>DC indüksiyon</td></tr><tr><td>Balon kateter (Fogarty-4F)</td><td>Edwards Life Since</td><td>120804</td><td>BD indüksiyon</td></tr><tr><td>Yenidoğan genişletici</td><td>Embramed</td><td>497267</td><td>24 G anjiyokat,</td></tr><tr><td>FlexiVent</td><td>Scireq</td><td>1142254</td> yardımıyla kateter olarak kullanılır <td>Ventilasyon parametrelerinin analizi</td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Blau Farmaceutica SA</td><td><güçlü>7000982-06</güçlü></td><td><güçlü>Antikoagülan</güçlü></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Crist&aacute; lia</td><td>10,29,80,130</td><td>İnhalasyon anestezisi</td></tr><tr><td>Mikropipet (1000 & mikro; L)</td><td><güçlü>Eppendorf</güçlü></td><td><güçlü>347765Z</güçlü></td><td><güçlü>Küçük hacimli sıvıların işlenmesi</güçlü></td></tr><tr><td>Mikropipet (20 ve mikro; L)</td> <td><güçlü > Eppendorf< / güçlü ></td> <td>< güçlü>H19385F< / güçlü ></td> <td>< güçlü > Küçük hacimli sıvıların taşınması< / güçlü ></td></tr> <tr><td>Mikroskop</td><td>Zeiss</td><td>1601004545</td><td>Cerrahi prosedür için yapıların görselleştirilmesinde yardım</td></tr><tr><td>Çok parametreli monitör</td><td>Dixtal</td><td>101503775</td><td>MAP kaydı</td></tr><tr><td>Motorlu matkap</td><td>Midetronic</td><td>MCA0439</td><td>1 mm kalibreli bir sondaj deliği açmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Neubauer odası</td><td>Kasvi</td><td>D15-BL</td><td>Hücre sayımı</td></tr><tr><td>Pediatrik laringoskop</td><td>Oxygel</td><td>Y/N</td><td>Trakeal entübasyon sırasında yardım</td></tr><tr><td>Şırınga (3 mL)</td><td>SR</td><td>3330N4</td><td>HS protokolü sırasında hidrasyon ve kan kaybı</td></tr><tr><td>Basınç dönüştürücü</td><td>Edwards Life Since</td><td>P23XL</td><td>MAP kaydı</td></tr><tr><td>Metalik trakeal tüp</td><td>Biyomedikal</td><td>006316/12</td><td>FlexiVent ventilatör ile analiz için sert kanül</td></tr><tr><td>İzofluran buharlaştırıcı</td><td>Harvard Bioscience</td><td>1,02,698</td><td>Anestezi sistemi</td></tr><tr><td>Küçük hayvanlar için mekanik ventilatör (683)</td><td>Harvard Apparatus</td><td>MA1 55-0000</td><td>Mekanik ventilasyon</td></tr><tr><td>xMap metodolojisi</td><td>Millipore</td><td>RECYTMAG-65K-04</td><td>İnflamatuar belirteçlerin analizi</td></tr></tbody></table>

akciğer transplantasyonunda deneysel organ bağışı modellerinin İncelenmesi

Study of Experimental Organ Donation Models for Lung Transplantation

Deneysel modeller, çeşitli patofizyolojik olaylarda yer alan etiyolojik fenomenleri anlamak için önemli araçlardır. Bu bağlamda, transplantasyon sonrası primer greft disfonksiyonunun patofizyolojisini tetikleyen unsurları incelemek ve potansiyel tedavileri değerlendirmek için farklı hayvan modelleri kullanılmıştır. Şu anda, deneysel bağış modellerini iki büyük gruba ayırabiliriz: beyin ölümünden sonra bağış ve dolaşım durmasından sonra bağış. Ek olarak, organ bağışının hayvan modelleri göz önüne alındığında hemorajik şokla ilişkili zararlı etkiler de göz önünde bulundurulmalıdır. Burada, üç farklı akciğer bağışı modelinin (beyin ölümü sonrası bağış, dolaşım sonrası ölüm bağışı ve hemorajik şok sonrası bağış) oluşturulmasını anlatıyor ve bu olaylarla ilişkili inflamatuar süreçleri ve patolojik bozuklukları karşılaştırıyoruz. Amaç, bilimsel topluluğa, ilişkili patolojik mekanizmaları incelemek ve transplantasyon için uygun greft sayısını optimize etmek için yeni terapötik hedefler aramak için güvenilir hayvan akciğer bağışı modelleri sağlamaktır.

Ortalama arter basıncı (MAP) Behçet hastalığı ve HS'nin hemodinamik yansımalarını belirlemek için protokolün 360 dakikası boyunca MAP değerlendirildi. Başlangıç ölçümü, sırasıyla BD veya HS'ye maruz kalan hayvanlar için deri çıkarma ve kafatası sondajından sonra ve kan alikotu toplanmadan önce toplandı. Behçet hastalığı ve HS indüksiyonundan önce, iki grubun başlangıç haritası benzerdi (BD: 110.5 ± 6.1'e karşı HS: 105.8 ± 2.3 mmHg; p=0.5; iki yönlü ANOVA). Kateter insüflasyonundan sonra, Behçet hastalığı grubu kan basıncı seviyelerinde ani bir artış yaşadı (138.7 ± 10.1 mmHg). Hipertansif pik, artmış intrakraniyal basınçla ilgili tuhaf bir olaydır ve Behçet hastalığının oluşumunun ilk kanıtı olarak kabul edilebilir. Ayrıca tüm hayvanlarda refleks, bilateral midriyazis ve post-şişirme apnesinin olmadığını gözlemledik. Bu pik basıncı, MAP'de hızlı bir düşüş izledi (10 dakika - 81.2 ± 10 mmHg). Hipotansiyon yaklaşık 50 dakika devam etti, daha sonra MAP seviyeleri başlangıçtakilere yakın değerlere (120 dakika - 120.7 ± 7.5 mmHg) geri döndü (Şekil 1).
Behçet grubundan farklı olarak, HS grubundaki MAP'deki azalma, deneyin ilk 10 dakikasında kan alikotlarının çekilmesi ile ilişkilidir. Hipovolemik şok 360 dakika boyunca korundu (protokol boyunca ortalama varyasyon 52.3 ± 1.2 mmHg). Protokolün bitiminden sonra, Behçet grubu, HS grubundan 6 saatlik takipte önemli ölçüde farklı bir MAP paterni gösterdi (BD: 93.7 ± 4.5'e karşı HS: 52.3 ± 0.5 mmHg; p&lt;0.0001; Öğrenci t testi).
Pulmoner mekanik Solunum sisteminin elastik ve dirençli parametrelerini değerlendirmek için, BD ve HS'ye maruz kalan hayvanların akciğer mekaniğinin bir analizi yapıldı. Başlangıçtan 360 dakika sonra ve hipotansiyon idamesinden sonra, HS grubu artmış akciğer dokusu direnci (G) sergiledi (HS: Başlangıç - 0.26 ± 0.02 vs. Final - 0.51 ± 0.05 cmH2O.mL-1; p=0.03; Iki yönlü ANOVA), ardından azalmış solunum sistemi kompliyansı (Crs) izledi (HS: Başlangıç - 0.64 ± 0.05 vs. Final - 0.23 ± 0.004 cmH2O/mL; p=0.001; Iki yönlü ANOVA) (Şekil 2A,B).
Pulmoner ödem Protokol sonunda tüm gruplardan sağ akciğer orta lobu toplandı ve pulmoner ödem indeksi olarak kullanılan ıslak/kuru ağırlık oranını analiz etmek için ağırlığı ölçüldü. Islak ağırlık, organın çıkarılmasından hemen sonra değerlendirildi ve kuru ağırlık, 80 ° C'lik bir fırında 24 saat sonra ölçüldü. Bu orana göre Behçet grubu (2,32 ± 0,1) HS (1,97 ± 0,03) ve CD gruplarına (2,04 ± 0,02) göre daha fazla ödem göstermiştir (Şekil 3).
Sistemik ve doku inflamatuar parametreleri Protokolün sonunda, HS uygulanan gruptaki toplam sistemik lökosit sayısında önemli bir artış vardı (Başlangıç - 13888 ± 887.3 vs. Final - 35263 ± 4076 mm3; p = 0.0189); Iki yönlü ANOVA) (Şekil 4). HS grubu ayrıca hem başlangıç değerlerine kıyasla hem de Behçet grubuna göre lökosit sayısında bir artış gösterdi (p = 0.0132).
Doku iltihabı, akciğer dokusundaki inflamatuar belirteçlerin ölçülmesiyle değerlendirildi. Bu amaçla, akciğer dokusu biyopsi örnekleri fosfat tamponunda homojenize edildikten sonra tümör nekroz faktör alfa (TNF-α) ve interlökin 1 beta (IL1-β) ekspresyonu için analize gönderildi. IL1-β ekspresyon düzeyleri Behçet grubunda (304.4 ± 91 pg/mg) ve HS grubunda (327.5 ± 25.2 pg/mg) CD grubuna göre (8 ± 2.3 pg/mg; p=0.004; Tek yönlü ANOVA) (Şekil 5B). HS grubu ayrıca daha yüksek TNF-α seviyeleri gösterdi (4.7 ± 0.3 pg / mg; p&lt;0.0001; Tek yönlü ANOVA) BD grubundan (1.3 ± 0.3 pg / mg) ve CD grubundan (0.4 ± 0.2 pg / mg) daha fazladır (Şekil 5B).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig01.jpg"> Şekil 1: Beyin ölümü (BH) ve hemorajik şok (HS) gruplarında ortalama arter basıncının (MAP) zaman seyri. Tüm ölçümlerin değerleri, ortalamaların standart hataları (SEM'ler) ± ortalamaları olarak ifade edilir. MAP, ortalama arter basıncı; Behçet hastalığı, beyin ölümü; HS, hemorajik şok. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig02.jpg"> Şekil 2: Akciğer mekaniği. Beyin ölümü (BH) grubunda ve hemorajik şok (HS) grubunda (A) solunum sistemi uyumu ve (B) doku direnci ile belirlenen akciğer mekaniği. * HS grubunda başlangıç ve nihai değerler arasında anlamlı farklılıklar olduğunu gösterir (p&lt;0.05). Tüm ölçümler için değerler, ortalamaların standart hataları (SEM'ler) ± ortalamaları olarak ifade edildi ve karşılaştırmalar için iki yönlü ANOVA kullanıldı. Crs, solunum sisteminin uyumu; G, doku direnci; Behçet hastalığı, beyin ölümü; HS, hemorajik şok. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig03.jpg"> Şekil 3: Beyin ölümü (BH) grubunda ve hemorajik şok (HS) grubunda akciğer ıslak-kuru ağırlık oranına göre belirlenen akciğer ödemi. Tüm ölçümler için değerler, ortalamaların standart hataları (SEM'ler) ± ortalamalar olarak ifade edildi ve karşılaştırmalar tek yönlü ANOVA ile yapıldı. Behçet hastalığı, beyin ölümü; HS, hemorajik şok; CD, dolaşım ölümü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig04.jpg"> Şekil 4: Hemorajik şok (HS) grubu ve beyin ölümü (BH) grubunun lökogramı. * HS grubunda başlangıç ve son değerler arasında anlamlı farklılıklar olduğunu gösterir (p&lt;0.05). Tüm ölçümler için değerler, ortalamanın standart hataları (SEM'ler) ± ortalamaları olarak ifade edildi ve karşılaştırmalar iki yönlü ANOVA ile yapıldı. Behçet hastalığı, beyin ölümü; HS, hemorajik şok. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62975/62975fig05.jpg"> Şekil 5: Lokal inflamatuar yanıtlar dolaşım ölümü (CD) grubunda daha az belirgindi. (A) IL-1β'nın akciğer dokusu ekspresyonu; (B) TNF-α'in akciğer dokusu ekspresyonu. Tüm ölçümler için değerler, ortalamanın standart hataları (SEM'ler) ± ortalamalar olarak ifade edildi ve karşılaştırmalar tek yönlü varyans analizi ile yapıldı. Behçet hastalığı, beyin ölümü; HS, hemorajik şok; CD, dolaşım ölümü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62975/62975fig05large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Bu çalışma, üç farklı akciğer bağışı modelinin (beyin ölümü sonrası bağış, dolaşım sonrası ölüm bağışı ve hemorajik şok sonrası bağış) kurulduğunu göstermektedir. Bu olaylarla ilişkili enflamatuar süreçleri ve patolojik bozuklukları karşılaştırır.

Akciğer Transplantasyonunda Deneysel Organ Bağışı Modellerinin İncelenmesi

Experimental models are important tools for understanding the etiological phenomena involved in various pathophysiological events. In this context, ...

Deneysel organ bağışı modelleri genellikle ölüm süreciyle ilgili izole doku hasarı durumlarını ve/veya organın korunması ve implantasyonu ile ilgili olayları taklit eder. Bu modeller, bağış sayısını artırmayı ve sonuç olarak potansiyel alıcıların ağırlık listesini azaltmayı amaçlayan tedavilerin geliştirilmesinde çok faydalıdır. Buna bağlı olarak, beyin ölümüne neden olan ve dolaşım ölümünü tetikleyen modeller gibi farklı modellerin geliştirilmesi önemli hale gelmiştir.Çünkü bu olaylar, bağışlanan organların ve dokuların işlevselliğini tehlikeye atan farklı zararlı süreçlerle ilişkilidir. Anestezi ve cerrahi öncesi hazırlık. Sıçanı bir ila dört dakika boyunca% 5 izofluran içeren kapalı bir odaya yerleştirin.Ayak parmağı sıkıştırma refleksini kontrol ederek uygun anesteziyi onaylayın. Refleks reaksiyonların yokluğunda, pediatrik laringoskop yardımıyla orotrakeal entübasyon, 14 gauge Anjiyokat, gerçekleştirin. Önceden ayarlanmış bir mekanik ventilatör ve kilogram başına 10 mililitre, dakikada 90 döngü ve PEEP 3.0 santimetre H2O ile trakeal kateteri ventilatöre bağlayın ve anestezik konsantrasyonu %2'ye ayarlayın İlgilenilen bölgelerden, baş, boyun, göğüs ve karın bölgesinden kürkü çıkarın.Daha sonra, gazlı bez kullanarak, cerrahi alanı ve hayvanın kuyruğunu alkollü bir Klorheksidin diglukonat çözeltisi ile temizleyin,% 2 Dezenfeksiyon işlemi üç kez tekrarlandı. Hayvanın kuyruğunun ucunu kesin, başparmağınızı ve işaret parmağınızı kuyruğun tabanına yerleştirin ve ardından bastırıp tabandan uzağa kaydırın. Toplam lökosit sayımı için kuyruktan 20 mikrolitre periferik kan örneği alın. Trakeostomi.Boynun orta üçte birinden başlayarak suprasternal çentiğe kadar servikal trakeanın uzunlamasına diseksiyonunu yapın. Yaklaşık 1,5 santimetre kesi. Deri ve deri altı dokusunun kesilmesinden sonra, trakea açığa çıkana kadar servikal kasları inceleyin.2.0 ipek bağı trakeanın altına yerleştirin. Mikro makas kullanarak, düzgün ventilasyon sağlamak için trakeanın üst üçte birini trakeostomi yapar. Metal bir kanülün çapını 3,5 santimetre olacak şekilde yerleştirmek için trakeayı iki kıkırdaklı halka arasında yatay olarak kesin.Havalandırma tüpünü yerleştirin ve hazırlanan ligatürlerle sabitleyin. Havalandırma tüpünü küçük hayvan havalandırma sistemine bağlayın. Sıçanı kilogram başına 10 mililitre tidal hacim, dakikada 70 devir hızı ve 3 santimetre H2O PEEP ile havalandırın.Femoral arter ve ven kateterizasyonu. Bu nedenle, femoral üçgeni kasık bölgesinde yaklaşık 1,5 santimetre olan küçük bir kesiden ortaya çıkarın. Femoral damarları tanımlayın ve izole edin.Bu prosedür için, 3,2 kat büyütme stereo mikroskop kullanın. Kan damarlarının, damarın veya arterin altına, biri distal ve diğeri proksimal olmak üzere iki adet 4.0 ipek bağ yerleştirin. En distal ligatürü kapatın ve proksimal ligatüre önceden ayarlanmış bir düğüm yerleştirin ve çekin.Kateteri damarlarda önceden oluşturulmuş küçük bir kesiden yerleştirin. Çıkığı önlemek için kanülü sabitleyin. MAP'ı kaydetmek için arter kateterini bir basınç dönüştürücüsüne ve bir yaşamsal belirti izleme sistemine bağlayın.Dönüştürücü, hayvanın kalbi seviyesine yerleştirilmelidir. MAP'ı kaydetmek için okçuluk kateterini bir basınç dönüştürücüsüne ve yaşamsal belirti izleme sistemine bağlayın. Dönüştürücü, hayvanın kalbi seviyesine yerleştirilmelidir.Şırınga kateterini damar içine 3 mililitre yerleştirin, gerektiğinde hidrasyon ve kan kaybını hedefleyin. Hemorajik şok indüksiyonu. Venöz eksen yoluyla ve heparinize bir şırınga ile, yaklaşık 50 milimetre cıva MAP değerlerine ulaşılana kadar küçük hacimlerde kanı çıkarın.Böylece, hemorajik şok oluşturmak. Unutmayın, kan alikotları 10 dakikalık aralıklarla alınmalıdır. Basıncı 360 dakikalık bir süre boyunca yaklaşık 50 milimetre cıvada sabit tutun.Bunu yapmak için, basınç sırasıyla artar veya azalırsa, kan alikotlarını çıkarın veya ekleyin. Hipotermiyi önlemek için yakına bir ısı kaynağı koyun. Protokolün sonunda, pulmoner bloğu toplama için toplam akciğer kapasitesinde hasat edin ve sıvı nitrojen içinde hızlı dondurma veya daha ileri çalışmalar için sabitleme solüsyonuna yerleştirin.Dolaşım ölümü indüksiyonu. Dolaşım ölümünü indüklemek için, venöz hattan kilogram sodyum tiyopental başına 150 miligram uygulayın. Ardından havalandırma sistemini kapatın.MAP'deki aşamalı düşüşe dikkat edin. Hayvan, oda sıcaklığında 180 dakika boyunca ılık iskemi içinde kalmalıdır. Protokolün sonunda, akciğerleri mekanik ventilatöre yeniden bağlayın ve pulmoner bloğu toplama için toplam akciğer kapasitesinde toplayın.Ve ya sıvı nitrojen içinde flaş dondurulur ya da daha ileri çalışmalar için fiksasyon çözeltisine yerleştirilir. Beyin ölümü indüksiyonu. Fareyi yüzüstü pozisyona getirin.Cerrahi makas kullanarak cildi kafatasından çıkarın. Sagital sütürün 1 milimetre kalibreli bir sondaj deliği, 2.8 milimetre ön ve 10 milimetre ventral ve 1.5 milimetre lateral delin. Tüm balon kateterini kraniyal boşluğa yerleştirin ve balonun 500 mikrolitre salin ile önceden doldurulduğundan emin olun.Bir şırınga yardımıyla, kateteri hızla şişirin. Ani MAP yükselmesini gözlemleyerek beyin ölümünü doğrulayın. Cushing refleksi, reflekslerin yokluğu, bilateral midriyazis ve apne.Onaylandıktan sonra anesteziyi bırakın ve hayvanı 360 dakika mekanik ventilasyonda tutun. Hipotermiyi önlemek için yakına bir ısı kaynağı yerleştirin. Protokolün sonunda, toplama için toplam akciğer kapasitesinde pulmoner bloğu hasat edin. Sonuç -ları.Kateter insüflasyonundan sonra, beyin ölümü grubu kan basıncı seviyelerinde ani bir artış yaşadı. Hipertansif pik, kafa içi basıncın artmasıyla ilgili tuhaf bir olaydır ve beyin ölümünün oluşumunun ilk kanıtı olarak kabul edilebilir. Bu pik basıncı MAP'de hızlı bir düşüş izledi.Hipotansiyon yaklaşık 50 dakika devam etti, bundan sonra MAP seviyeleri başlangıçtakilere yakın değerlere geri döndü. Beyin ölümü grubundan farklı olarak, hemorajik şok grubunda MAP'deki azalma, deneyin ilk 10 dakikasında kan alikotlarının geri çekilmesi ile ilişkilidir. Hipovolemik şok 360 dakika sürdürüldü.Hemorajik şokun başlamasından altı saat sonra, hayvanlar akciğer dokusu direncinde artış ve ardından solunum sistemi uyumunda azalma sergiledi. Akciğer ödemindeki değişiklikleri değerlendirmek için yaş ve kuru ağırlık oranı incelendi. Bu bağlamda, beyin ölümü hemorajik şok ve dolaşım ölümü grubuna göre daha fazla ödem gösterdi.Son olarak, hemorajik şok grubu, başlangıç değerlerine kıyasla artmış toplam sistemik lökosit sayısı ve beyin ölümü grubu ile ilişkili olarak ilişkilendirildi. Buna, beyin ölümü grubunda ve hemorajik şok grubunda dolaşım ölümüne göre artmış IL1 Beta ekspresyon seviyeleri eşlik etti. Hemorajik şok grubu ayrıca beyin ölümü grubu ve dolaşım ölümü grubuna kıyasla daha yüksek TNF Alfa seviyeleri gösterdi.Burada açıklanan organ bağışı modelleri, farklı greft toplama metodolojileri ile ilişkili değişikliklerin incelenmesinde potansiyel araçlardır ve bu organların kalitesinin transplantasyon sonrası sonuçlar üzerindeki etkisinin tam olarak anlaşılmasını sağlayan araçlar sağlayabilir. Burada sunulan metodolojilerin tekrarlanabilirliği ve güvenilirliği göz önüne alındığında.

study-of-experimental-organ-donation-models-for-lung-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Ex-Vivo Akciğer Perfüzyon (EVLP) insanlarda akciğer transplantasyonu daha kolay kullanılabilir donör havuzu organları değerlendirmek ve genişletmek için yeteneği sağlayarak haline izin verdi. Burada, bir sıçan EVLP programı ve gelecekteki genişleme için bir tekrarlanabilir model izin ayrıntılandırmaları gelişimini açıklar.

İzole Yöntemi<em&gt; Ex vivo</emBir Rat Modelinde&gt; Akciğer Perfüzyon: Sıçan EVLP Programı Geliştirme Öğrenilmiş Dersler

Burada, sonuçları iyileştirmeye hizmet eden bir sıçan akciğer nakli modeline optimizasyonlar sunuyoruz. Vücut ağırlığına göre manşetler için bir boyut kılavuzu, 4. interkostal boşluğu belirlemek için bir ölçüm stratejisi ve yara kapatma ve BAL (bronkoalveoler lavaj) sıvı ve doku toplama yöntemleri sunuyoruz.

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

Bu protokol, ESLP araştırmalarında kullanılmak üzere tasarlanmış ortotopik sol akciğer allotransplantasyonunun bir juvenil domuz modelini açıklamaktadır. Anestezi ve cerrahi tekniklerin yanı sıra kritik adımlar ve sorun gidermeye odaklanılır.

ESLP için Juvenil Domuz Modelinde Sol Akciğer Ortotopik Transplantasyonu

Protokol, kontrollü asistol donörlerinde abdominal greft alımı için akciğer soğutma hızlı iyileşme tekniğini abdominal normotermik bölgesel perfüzyon ile birleştirerek, donör havuzunu genişletmek için güvenli ve kullanışlı bir yöntemdir.

Dolaşım Ölümü Sonrası Kontrollü Donasyonda Abdominal Normothermik Rejyonel Perfüzyon ile Kombine Akciğer Hızlı İyileşme Tedariği

Protokol, dolaşım ölümünden sonra büyük hayvan (domuz) bağış modelini, ardından kalp naklindeki klinik senaryoyu yakından simüle eden ve terapötik çalışmaları ve stratejileri kolaylaştırma potansiyeline sahip torakoabdominal normotermik bölgesel perfüzyonu tanımlamaktadır.

Dolaşım Ölümü Sonrası Büyük Hayvan Bağış Modeli ve Kardiyak Değerlendirme için Norannemik Bölgesel Perfüzyon

Burada, bir sıçan EVLP modeli oluşturmak için gerekli adımları açıklıyoruz ve perfüze akciğerlerle ilişkili inflamatuar profili gösteriyoruz. Amaç, sıçan EVLP modeli hakkındaki bilgi ve deneyimleri yaymak ve bu devrim niteliğindeki teknikle ilişkili biyolojik tepkilerin bütünsel olarak anlaşılmasını sağlamaktır.

Akciğer naklinde translasyonel içgörüler için ex vivo akciğer perfüzyon sıçan modelinin oluşturulması

Amaç, EVLP boyunca 4 saat boyunca tutarlı akciğer fonksiyonunu sürdürebilen sıçanlarda yeni bir ex vivo akciğer perfüzyonu (EVLP) modeli geliştirmek ve endüstriye EVLP'yi kemirgen modellerine uygulamak için sağlam bir yöntem sunacak uygulama özellikleri sağlamaktır.

Dolaşım Ölümü Sonrası Sıçan Akciğerleri için Yeni Bir Ex Vivo Akciğer Perfüzyon Sisteminin Kurulması

Bu makale, hücreden arındırma ve yeniden hücreselleştirme yöntemleri kullanılarak biyomühendislik ürünü fare akciğerlerinin nasıl oluşturulacağını açıklamaktadır. Ayrıca sonraki ortotopik akciğer naklini de detaylandırır.

Hücreden Arındırılmış Fare Akciğerleri ve Primer İnsan Endotel Hücreleri Kullanılarak Biyomühendislik Ürünü Akciğerin Transplantasyonu

Bu protokol, sıçanlarda ortotopik sol akciğer nakli için operasyonel zorluğu azaltmaya ve sağkalım oranlarını iyileştirmeye odaklanan gelişmiş bir tekniği tanımlar.

Sıçanlarda Ortotopik Sol Akciğer Nakli

Fareler, kornea nakli de dahil olmak üzere birçok transplantasyon şeklini incelemek için bir model olarak kullanılmıştır.  Bu yazıda hem akut hem de geç dönem kornea nakli için bir murin modeli tanımlanmıştır.

Sıçangiller Kornea Nakli: Katı Organ Nakli En Yaygın Formu Eğitim için Bir Model

Keşfedin akciğer bağışı modellerini: beyin ölümü, dolaşım ölümü ve hemorajik şok sonrası bağış. Bu yöntemler iltihabi süreçleri ve patolojik bozuklukları karşılaştırarak organ nakli sonuçlarını iyileştirmeye yardımcı olur.

Akciğer Transplantasyonunda Deneysel Organ Bağışı Modellerinin İncelenmesi

Daha fazla video keşfet