Name: Böbrekte Salgılanan Proteinlerin Kaynağının Brefeldin A Enjeksiyonu ile Belirlenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-11-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 15 s
Description: Keşfedin, böbrek hasarında sitokin üreten hücreleri Brefeldin A enjeksiyonu ile belirleme yöntemini. Fare modelinde salgıyı inhibe ederek TGF beta birikimini analiz edin ve böbrek hastalığı patobiyolojisini anlayın.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>GBD Chronic Kidney Disease Collaboration. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global%2C+regional%2C+and+national+burden+of+kidney+disease%2C+1990-2017%3A+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2017%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Global, regional, and national burden of kidney disease, 1990-2017: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017.</a> Lancet. 395 (10225), 709-733 (2020).</li>
<li>Canaud, G., Bonventre, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+cycle+arrest+and+the+evolution+of+chronic+kidney+disease+from+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology+Dialysis+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Cell cycle arrest and the evolution of chronic kidney disease from acute kidney injury.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 30 (4), 575-583 (2015).</li>
<li>Chawla, L. S., Eggers, P. W., Star, R. A., Kimmel, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury+and+chronic+kidney+disease+as+interconnected+syndromes%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury and chronic kidney disease as interconnected syndromes.</a> New England Journal of Medicine. 371 (1), 58-66 (2014).</li>
<li>Berger, K., Moeller, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+epithelial+repair+and+regeneration+after+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of epithelial repair and regeneration after acute kidney injury.</a> Seminars in Nephrology. 34 (4), 394-403 (2014).</li>
<li>Bonventre, J. V., Yang, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular+pathophysiology+of+ischemic+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+clinical+investigation%22%5BJournal%5D)">Cellular pathophysiology of ischemic acute kidney injury.</a> The Journal of clinical investigation. 121 (11), 4210-4221 (2011).</li>
<li>Kurts, C., Panzer, U., Anders, H. J., Rees, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immune+system+and+kidney+disease%3A+basic+concepts+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Immunology%22%5BJournal%5D)">The immune system and kidney disease: basic concepts and clinical implications.</a> Nature Reviews. Immunology. 13 (10), 738-753 (2013).</li>
<li>Panzer, U., Steinmetz, O. M., Stahl, R. A., Wolf, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+diseases+and+chemokines%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Kidney diseases and chemokines.</a> Current Drug Targets. 7 (1), 65-80 (2006).</li>
<li>Commins, S. P., Borish, L., Steinke, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunologic+messenger+molecules%3A+cytokines%2C+interferons%2C+and+chemokines%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Allergy+and+Clinical+Immunology%22%5BJournal%5D)">Immunologic messenger molecules: cytokines, interferons, and chemokines.</a> The Journal of Allergy and Clinical Immunology. 125 (2), Suppl 2 53-72 (2010).</li>
<li>Jaber, B. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytokine+gene+promoter+polymorphisms+and+mortality+in+acute+renal+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cytokine%22%5BJournal%5D)">Cytokine gene promoter polymorphisms and mortality in acute renal failure.</a> Cytokine. 25 (5), 212-219 (2004).</li>
<li>Black, L. M., Lever, J. M., Agarwal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+inflammation+and+fibrosis%3A+A+double-edged+sword%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Histochemistry+and+Cytochemistry%22%5BJournal%5D)">Renal inflammation and fibrosis: A double-edged sword.</a> Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 67 (9), 663-681 (2019).</li>
<li>van Kooten, C., Woltman, A. M., Daha, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunological+function+of+tubular+epithelial+cells%3A+the+functional+implications+of+CD40+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Immunological function of tubular epithelial cells: the functional implications of CD40 expression.</a> Experimental Nephrology. 8 (4-5), 203-207 (2000).</li>
<li>Canaud, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclin+G1+and+TASCC+regulate+kidney+epithelial+cell+G2-M+arrest+and+fibrotic+maladaptive+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Cyclin G1 and TASCC regulate kidney epithelial cell G2-M arrest and fibrotic maladaptive repair.</a> Science Translational Medicine. 11 (476), (2019).</li>
<li>Burton, C. J., Combe, C., Walls, J., Harris, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secretion+of+chemokines+and+cytokines+by+human+tubular+epithelial+cells+in+response+to+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology%2C+Dialysis%2C+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Secretion of chemokines and cytokines by human tubular epithelial cells in response to proteins.</a> Nephrology, Dialysis, Transplantation. 14 (11), 2628-2633 (1999).</li>
<li>Ripley, C. R., Fant, J., Bienkowski, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brefeldin+A+inhibits+degradation+as+well+as+production+and+secretion+of+collagen+in+human+lung+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Brefeldin A inhibits degradation as well as production and secretion of collagen in human lung fibroblasts.</a> Journal of Biological Chemistry. 268 (5), 3677-3682 (1993).</li>
<li>Kovacs, S. B., Oh, C., Aachoui, Y., Miao, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+cytokine+production+by+flow+cytometry+using+brefeldin+A+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocols%22%5BJournal%5D)">Evaluating cytokine production by flow cytometry using brefeldin A in mice.</a> STAR Protocols. 2 (1), 100244(2021).</li>
<li>Fujiwara, T., Oda, K., Yokota, S., Takatsuki, A., Ikehara, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brefeldin+A+causes+disassembly+of+the+Golgi+complex+and+accumulation+of+secretory+proteins+in+the+endoplasmic+reticulum%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Brefeldin A causes disassembly of the Golgi complex and accumulation of secretory proteins in the endoplasmic reticulum.</a> Journal of Biological Chemistry. 263 (34), 18545-18552 (1988).</li>
<li>Sadeghipour, A., Babaheidarian, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+formalin-fixed%2C+paraffin+embedded+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Making formalin-fixed, paraffin embedded blocks.</a> Methods in Molecular Biology. 1897, 253-268 (2019).</li>
<li>Qin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cutting+and+floating+method+for+paraffin-embedded+tissue+for+sectioning%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">The cutting and floating method for paraffin-embedded tissue for sectioning.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (139), e58288(2018).</li>
<li>Honvo-Houeto, E., Truchet, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indirect+immunofluorescence+on+frozen+sections+of+mouse+mammary+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Indirect immunofluorescence on frozen sections of mouse mammary gland.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (106), e53179(2015).</li>
<li>Chung, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TGF-%CE%B2+promotes+fibrosis+after+severe+acute+kidney+injury+by+enhancing+renal+macrophage+infiltration%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">TGF-β promotes fibrosis after severe acute kidney injury by enhancing renal macrophage infiltration.</a> JCI Insight. 3 (21), 123563(2018).</li>
<li>Meng, X. M., Nikolic-Paterson, D. J., Lan, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TGF-%CE%B2%3A+the+master+regulator+of+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Nephrology%22%5BJournal%5D)">TGF-β: the master regulator of fibrosis.</a> Nature Reviews. Nephrology. 12 (6), 325-338 (2016).</li>
<li>Kok, H. M., Falke, L. L., Goldschmeding, R., Nguyen, T. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+CTGF%2C+EGF+and+PDGF+pathways+to+prevent+progression+of+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Targeting CTGF, EGF and PDGF pathways to prevent progression of kidney disease.</a> Nature Reviews. Nephrology. 10 (12), 700-711 (2014).</li>
<li>Engel, J. E., Williams, E., Williams, M. L., Bidwell, G. L., Chade, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+VEGF+%28vascular+endothelial+growth+factor%29+therapy+induces+long-term+renal+recovery+in+chronic+kidney+disease+via+macrophage+polarization%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Targeted VEGF (vascular endothelial growth factor) therapy induces long-term renal recovery in chronic kidney disease via macrophage polarization.</a> Hypertension. 74 (5), 1113-1123 (2019).</li>
<li>Liu, B. C., Tang, T. T., Lv, L. L., Lan, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renal+tubule+injury%3A+a+driving+force+toward+chronic+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Renal tubule injury: a driving force toward chronic kidney disease.</a> Kidney International. 93 (3), 568-579 (2018).</li>
<li>de Haij, S., Woltman, A. M., Bakker, A. C., Daha, M. R., van Kooten, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+inflammatory+mediators+by+renal+epithelial+cells+is+insensitive+to+glucocorticoids%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Production of inflammatory mediators by renal epithelial cells is insensitive to glucocorticoids.</a> British Journal of Pharmacology. 137 (2), 197-204 (2002).</li>
<li>Hong, S., Healy, H., Kassianos, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+emerging+role+of+renal+tubular+epithelial+cells+in+the+immunological+pathophysiology+of+lupus+nephritis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">The emerging role of renal tubular epithelial cells in the immunological pathophysiology of lupus nephritis.</a> Frontiers in Immunology. 11, 578952(2020).</li>
<li>Hwang, B., Lee, J. H., Bang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+RNA+sequencing+technologies+and+bioinformatics+pipelines%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+%26+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Single-cell RNA sequencing technologies and bioinformatics pipelines.</a> Experimental & Molecular Medicine. 50 (8), 1-14 (2018).</li>
<li>See, P., Lum, J., Chen, J., Ginhoux, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+single-cell+sequencing+guide+for+immunologists%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">A single-cell sequencing guide for immunologists.</a> Frontiers in Immunology. 9, 2425(2018).</li>
<li>Gewin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deleting+the+TGF-%CE%B2+receptor+attenuates+acute+proximal+tubule+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Deleting the TGF-β receptor attenuates acute proximal tubule injury.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 23 (12), 2001-2011 (2012).</li>
<li>Nlandu-Khodo, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+TGF-%CE%B2+and+%CE%B2-catenin+epithelial+crosstalk+exacerbates+CKD%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Blocking TGF-β and β-catenin epithelial crosstalk exacerbates CKD.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 28 (12), 3490-3503 (2017).</li>
<li>Brooks, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((KIM-1-%2FTIM-1-mediated+phagocytosis+links+ATG5-%2FULK1-dependent+clearance+of+apoptotic+cells+to+antigen+presentation%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">KIM-1-/TIM-1-mediated phagocytosis links ATG5-/ULK1-dependent clearance of apoptotic cells to antigen presentation.</a> EMBO Journal. 34 (19), 2441-2464 (2015).</li>
<li>Kishi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+tubule+ATR+regulates+DNA+repair+to+prevent+maladaptive+renal+injury+responses%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Proximal tubule ATR regulates DNA repair to prevent maladaptive renal injury responses.</a> The Journal of Clinical Investigation. 129 (11), 4797-4816 (2019).</li>
<li>Yu, S. M., Bonventre, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+kidney+injury+and+maladaptive+tubular+repair+leading+to+renal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Nephrology+and+Hypertension%22%5BJournal%5D)">Acute kidney injury and maladaptive tubular repair leading to renal fibrosis.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 29 (3), 310-318 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 mL İnsülin şırıngaları</td><td>BD</td><td>329654</td><td></td></tr><tr><td>10 mL Şırınga</td><td>BD</td><td>302995</td><td></td></tr><tr><td>2 mL tüp</td><td>Fisher marka</td><td>05-408-138</td><td></td></tr><tr><td>20 mL Şırınga</td><td>BD</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>25 G iğneler</td><td>BD</td><td>305125</td><td></td></tr><tr><td>28 G iğneler</td><td>BD</td><td>329424</td><td></td></tr><tr><td>96 kuyulu plaka</td><td>Corning</td><td>9017</td><td></td></tr><tr><td>Aristolochic acid-I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9461</td><td></td></tr><tr><td>&alpha;-SMA antikoru, Cy3</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C6198</td><td>RRID ile konjuge edilmiştir: AB_476856</td></tr><tr><td>Kriyostat CL Sturkey için bıçak</td><td>. Inc</td><td>DT315R50</td><td></td></tr><tr><td>Sığır serum albümini (BSA)</td><td>&nbsp; Sigma-Aldrich</td><td>A7906</td><td></td></tr><tr><td>Brefeldin A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>B6542</td><td></td></tr><tr><td>Sisplatin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4394</td><td></td></tr><tr><td>Sitrik asit</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>791725</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal mikroskop</td><td>ZEISS&</td><td>nbsp; LSM710</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal mikroskopi objektifleri</td><td>ZEISS</td><td>40x / 1.10 LD C-Apochromat WATER</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal yazılım</td><td>ZEISS</td><td>ZEN</td><td></td></tr><tr><td>Coplin kavanoz</td><td>Fisher Scientific</td><td>19-4</td><td></td></tr><tr><td>Kapak camı</td><td>Fisher marka</td><td>12545F</td><td></td></tr><tr><td>Kriyostat</td><td>Leica</td><td>CM1850</td><td></td></tr><tr><td>CTGF antikoru</td><td>Genetex</td><td>GTX124232</td><td>RRID:AB_11169640</td></tr><tr><td>Cy3-AffiniPure Eşek Anti-Tavşan IgG (H + L)</td> <td>Jackson immün araştırma</td><td>711-165-152</td><td>RRID: AB_2307443</td></tr><tr><td>Cy5-AffiniPure Eşek Anti-Keçi IgG (H + L)</td> <td>Jackson immün araştırma</td><td>705-175-147</td><td>RRID: AB_2340415</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542</td><td></td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Tek kullanımlık taban kalıpları</td><td>Fisher marka</td><td>22-363-553</td><td></td></tr><tr><td>eşek serumu</td><td>Jackson immunoresearch</td><td>017-000-121</td><td></td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Decon Labs, Inc.</td><td>2701</td><td></td></tr><tr><td>Forseps</td><td>VETUS</td><td>ESD-13</td><td></td></tr><tr><td>Glisin</td><td>Fisher marka</td><td>12007-0050</td><td></td></tr><tr><td>Isıtma pedleri</td><td>Kent scientific</td><td>DCT-20</td><td></td></tr><tr><td>Heparin sodyum tuzu</td><td>ACROS organikleri</td><td>41121-0010</td><td>100mg/15ml dH2O</td></tr><tr><td>Nemlendirilmiş oda</td><td>Invitrogen</td><td>44040410</td><td>Folyo ile kaplı plastik bir kutu olarak kullanılabilir. alternatif nemlendirilmiş oda.</td></tr><tr><td>İnsülin şırıngaları</td><td>BD</td><td>329461</td><td></td></tr><tr><td>Ters mikroskop</td><td>NIKON</td><td>Eclipse Ti-E2</td><td>immünofloresan</td></tr><tr><td>KIM-1 antikoru</td><td>R & D</td><td>AF1817</td><td>RRID: AB_2116446</td></tr><tr><td>Lemozol (Histo-clear)</td><td>Ulusal tanı</td><td>HS-200</td><td></td></tr><tr><td>lotus tetragonolobus lektin</td><td>Vektör</td><td>FL-13212</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop lamı</td><td>Fisher scientific</td><td>12-550-343</td><td></td></tr><tr><td>Mikrotom</td><td>Reichert</td><td>Jung 820 II</td><td></td></tr><tr><td>monokrom CMOS kamera</td><td>NIKON&</td><td>nbsp; DS-Qi-2</td><td></td></tr><tr><td>Fare cerrahi kiti</td><td>Kent scientific</td><td>INSMOUSEKIT</td><td></td></tr><tr><td>NIS Elemanları</td><td>NIKON</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hedefleri</td><td>NIKON</td><td>Plan Apo 20x/0.75</td><td>Eclipse Ti-E2'ye bağlı görüntü elde etme yazılımı (ters mikroskop)</td></tr><tr><td>OCT bileşiği</td><td>Scigen</td><td>4586</td><td></td></tr><tr><td>Pap kalem</td><td>Vector</td><td>H-4000</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum ve magnezyum içeren PBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CV</td><td></td></tr><tr><td>Kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS</td><td>&nbsp; Corning</td><td>21-031-CV</td><td></td></tr><tr><td>PDGF-D antikoru</td><td>Thermo-Fisher bilimsel</td><td>40-2100</td><td></td></tr><tr><td>PFA</td><td>Elektron Mikroskobu Bilimi</td><td>15710</td><td>RRID: AB_2533455</td></tr><tr><td>Plaka okuyucu</td><td>Promega</td><td>GloMax ve reg; Discover Microplate Reader</td><td>4% PFA, PBS'de% 16'dan seyreltilir.</td></tr><tr><td>povidon-iyot (Betadine)</td><td>Avrio Health L.P.</td><td>NDC 67618-151-17</td><td></td></tr><tr><td>Düdüklü tencere</td><td>&nbsp; Tristar 8</td><td>Qt. Power Cooker Plus</td><td></td></tr><tr><td>ProLong Altın Antifade Reaktifi</td><td>Invitrogen</td><td>P36930</td><td></td></tr><tr><td>Quantichrom Üre (BUN) test Kiti II</td><td>BioAssay Sistemleri</td><td>DUR2-100</td><td></td></tr><tr><td>Böbrek diseksiyonu için tek kenarlı tıraş bıçağı (.009", 0.23 mm)</td><td>IDL aletleri</td><td>521013</td><td></td></tr><tr><td>Slayt ısıtıcı</td><td>Lab Scientific Inc.,</td> <td>XH-2001</td><td></td></tr><tr><td>Yazılım</td><td>NIKON</td><td>NIS elemanları</td><td></td></tr><tr><td>Sükroz</td><td>RPI</td><td>S24060</td><td></td></tr><tr><td>TGF-b1 anitbody</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SAB4502954</td><td></td></tr><tr><td>Tris EDTA tamponu</td><td>Corning</td><td>46-009-CM</td><td>RRID: AB_10747473</td></tr><tr><td>Trisodyum sitrat dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SLBR6660V</td><td></td></tr><tr><td>Trisodyum sitrat dihidrat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td>SLBR6660V</tr><tr><td>Triton</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>9002-93-1</td><td></td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1379</td><td></td></tr><tr><td>Beyaz Cam Şarjlı Mikroskop Slaytı, 25 x 75 mm Boyut, Zemin Kenarları, Mavi Buzlu</td><td>Küre Scientific</td><td>1358D</td><td></td></tr></tbody></table>

böbrekte salgılanan proteinlerin kaynağının brefeldin a enjeksiyonu ile belirlenmesi

Identification of the Source of Secreted Proteins in the Kidney by Brefeldin A Injection

Sisplatin kaynaklı ABH'yi takiben sitokin üretiminde tübüler epitel hücrelerinin rolünü incelemek için, sisplatin enjeksiyonundan sonraki 3. günde 20 mg / kg'lık bir konsantrasyonda sisplatin enjekte edildi ve ardından 0.25 mg BFA intravenöz enjeksiyonu yapıldı. Böbrekler 6 saat sonra alındı. Parafine gömülü böbrekler, ABH'de doku onarımından sorumlu temsili sitokinler olan TGF-β, PDGF-D ve CTGF ile kesitlere ayrıldı ve boyandı. Şekil 2A'da gösterildiği gibi, BFA varlığında sisplatin ile ted...

Böbrekte Salgılanan Proteinlerin Kaynağının Brefeldin A Enjeksiyonu ile Belirlenmesi

Chronic kidney disease (CKD) is one of the top ten leading causes of death in the USA. Acute kidney injury (AKI), while often recoverable, predisposes ...

identification-source-secreted-proteins-kidney-brefeldin

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

2-foton mikroskopi yüksek çözünürlüklü intavital kullanan bir teknik doğrudan görselleştirmek ve yüzey glomerüllerde gloemrular filtrasyon ölçmek için. Bu yöntem, normal ve hastalıklı hem Devletler makromoleküllerin geçirgenlik özelliklerinin doğrudan belirlenmesi için olanak sağlar.

Münih Wistar Sıçanlarda 2-Foton Mikroskopi kullanarak Floresan Makromoleküllerin Glomerüler geçirgenliği miktarının

Zebra balığı yetişkin böbrek böbrek yenilenmesi ve hastalık çalışmalar için mükemmel bir sistemdir. Böyle bir araştırmanın önemli bir yönü nefron yapısı ve fonksiyonu değerlendirmesidir. Bu protokol nefron borucuk kompozisyonunun ve böbrek geri emiliminin değerlendirilmesi için uygulanabilecek çeşitli yöntemler anlatılmaktadır.

Yetişkin Zebra balığı Böbrek Nefron Kompozisyon ve Fonksiyon Analizi

Böbrek yapıları doku Mühendisliği zararlı etkileri diyaliz ve organ sıkıntısı için bir çözüm sağlar. Burada, bir protokol mikro tarif yalıtım kortiko-medüller segmentleri için fare böbrekler incelemek. Bu segmentler oluşturan böbrek organoids iskele-Alerjik Hücresel yapıları implante edilir.

Mikrodiseksiyon birincil böbrek doku parçaları ve roman iskele-Alerjik yapı teknolojisi ile birleşme

Bu iletişim kuralı bir tam böbrek iş-up glomerular hastalığı fare modellerinde yürütülmesi gereken açıklar. Yöntemler glomerular hastalığı tüm fare modelleri uygulanabilir glomerular işlevinin ayrıntılı işlevsel, yapısal ve mekanik analiz için olanak sağlar.

Fare modelleri Glomerular hastalığı böbrek fonksiyonlarının değerlendirilmesi

Burada fare vivo biotin ile glomerular hücre yüzey proteinlerin etiketleme için bir iletişim kuralı mevcut. Bu protokolü nasıl fare böbrekler sıvı, glomeruli ayırma ve ilgi proteinin endojen immunoprecipitation gerçekleştirmek yönergeler içerir.

Yalıtım Glomeruli ve Glomerular hücre yüzey proteinleri Vivo etiketleme

Burada, farelerde çok hassas, radyoaktif olmayan bir izleyici kullanarak glomerüler geçirgenliği test etmek için bir protokol sıyoruz. Bu yöntem küçük idrar hacimleri ile tekrarlayan idrar analizleri sağlar.

Floresan Isotiyoyanat-polisucrose 70 ile Farelerde Glomerüler Geçirgenliğin Yüksek Hassas Ölçümü

Antikor etiketleme, optik temizleme ve gelişmiş ışık mikroskobu kombinasyonu, tam yapıların veya organların üç boyutlu analizini sağlar. Burada açıklanan, kalın böbrek dilimleri immünolabeling birleştirmek için basit bir yöntemdir, etil cinnamate ile optik Temizleme, ve üç boyutlu böbrek yapıların görselleştirme ve kantifikasyon sağlayan konfoköz görüntüleme.

Optik temizleme ve Immünolabeled böbrek dokusu görüntüleme

Mevcut protokol, farelerde lupus ilerlemesini izlemek için bir yöntem açıklamaktadır. Böbreklerde hücre infiltrasyonu ve protein birikimine bağlı lupus nefritini karakterize etmek için iki ek prosedür sunulmuştur.

Lupus Eğilimli MRL/lpr Farelerde Proteinüri, Lökositlerin Renal İnfiltrasyonu ve Proteinlerin Renal Birikimi Analizleri

Mevcut protokol, bir membranöz nefropati (MN) hayvan modelinin kurulmasını ve Kemeng Fang'ın inhibisyonunun PI3K / AKT sinyal yolunu aktive ederek MN sıçan podosit apoptozunu nasıl azalttığını açıklamaktadır.

Kemeng Fang'ın PI3K / AKT Sinyal Yolu ile Membranöz Nefropatili Sıçanlarda Podosit Apoptozunu İnhibisyon Mekanizması

Bu protokol, obstrüktif nefropatide doku fibrozunun ilerlemesini incelemek için farelerde tek taraflı üreter tıkanıklığını (UUO) indüklemek için bir yöntemi tanımlar. Cerrahi prosedürleri, ameliyat sonrası bakımı ve fibroz değerlendirmesi için yöntemleri içerir.

Böbrek İnterstisyel Fibrozisinin Araştırılmasında Tek Taraflı Üreter Obstrüksiyon Modeli

Keşfedin, böbrek hasarında sitokin üreten hücreleri Brefeldin A enjeksiyonu ile belirleme yöntemini. Fare modelinde salgıyı inhibe ederek TGF beta birikimini analiz edin ve böbrek hastalığı patobiyolojisini anlayın.

Böbrekte Salgılanan Proteinlerin Kaynağının Brefeldin A Enjeksiyonu ile Belirlenmesi

Daha fazla video keşfet