Name: Melanom Metastazının Yeni Arabulucularının Belirlenmesi için Sağlam Bir Keşif Platformu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Keşfedin, melanom metastazının yeni arabulucularını değerlendirmek için sağlam ve standartlaştırılmış bir in vivo çalışma akışını. Bu yöntem, hedef keşfi ve tedavi geliştirme için güvenilir veri sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NYU Langone Health'teki İleri Araştırma Teknolojileri Bölümü'ne (DART) ve özellikle Perlmutter Kanser Merkezi Destek Hibe / NCI 5P30CA016087 tarafından kısmen desteklenen Deneysel Patoloji Araştırma Laboratuvarı, Genom Teknoloji Merkezi, Sitometri ve Hücre Sıralama Laboratuvarı, Klinik Öncesi Görüntüleme Çekirdeği'ne teşekkür ederiz. NYU Disiplinlerarası Melanom İşbirliği Grubu'na (PI: Dr. Iman Osman), IRB onaylı protokoller (Universal Consent study #s16-00122 ve Interdisciplinary Melanom Cooperative Group study #10362) aracılığıyla elde edilen hasta kaynaklı melanom kısa süreli kültürlerine+ (10-230BM ve 12-273BM) erişim sağladığı için teşekkür ederiz. 113/6-4L ve 131/4-5B1 melanom hücre hatları* sağladığı için Dr. Robert Kerbel'e (Toronto Üniversitesi) ve WM 4265-2, WM 4257s-1, WM 4257-2 melanom kısa süreli kültürleri sağladığı için Dr. Meenhard Herlyn'e (Wistar Enstitüsü) teşekkür ederiz**. E.H., NIH / NCI R01CA243446, P01CA206980, Amerikan Kanser Derneği-Melanom Araştırma İttifakı Ekibi Bilim Ödülü ve bir NIH Melanom SPORE (NCI P50 CA225450; PI: I.O.). Şekil 1, Biorender.com ile oluşturulmuştur.

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Cancer+Statistics+2020%3A+GLOBOCAN+Estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN Estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Adler, N. R., Haydon, A., McLean, C. A., Kelly, J. W., Mar, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+in+patients+with+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways in patients with cutaneous melanoma.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 30 (1), 13-27 (2017).</li>
<li>Platz, A., Egyhazi, S., Ringborg, U., Hansson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+cutaneous+melanoma%3B+a+review+of+NRAS+and+BRAF+mutation+frequencies+in+relation+to+histogenetic+subclass+and+body+site%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Oncology%22%5BJournal%5D)">Human cutaneous melanoma; a review of NRAS and BRAF mutation frequencies in relation to histogenetic subclass and body site.</a> Molecular Oncology. 1 (4), 395-405 (2008).</li>
<li>Alonso, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+study+in+melanoma+identifies+epithelial-mesenchymal+transition+as+a+major+determinant+of+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">A high-throughput study in melanoma identifies epithelial-mesenchymal transition as a major determinant of metastasis.</a> Cancer Research. 67 (7), 3450-3460 (2007).</li>
<li>Rowe, C. J., Khosrotehrani, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+biological+determinants+of+melanoma+progression%3A+Should+all+be+considered+for+clinical+management%5BTitle%5D)+AND+%22Australasian+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Clinical and biological determinants of melanoma progression: Should all be considered for clinical management.</a> Australasian Journal of Dermatology. 57 (3), 175-181 (2016).</li>
<li>Plebanek, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-metastatic+cancer+exosomes+induce+immune+surveillance+by+patrolling+monocytes+at+the+metastatic+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Pre-metastatic cancer exosomes induce immune surveillance by patrolling monocytes at the metastatic niche.</a> Nature Communications. 8 (1), 1319(2017).</li>
<li>Orgaz, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+pigment+epithelium-derived+factor+enables+migration%2C+invasion+and+metastatic+spread+of+human+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Loss of pigment epithelium-derived factor enables migration, invasion and metastatic spread of human melanoma.</a> Oncogene. 28 (47), 4147-4161 (2009).</li>
<li>Ladhani, O., Sanchez-Martinez, C., Orgaz, J. L., Jimenez, B., Volpert, O. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pigment+epithelium-derived+factor+blocks+tumor+extravasation+by+suppressing+amoeboid+morphology+and+mesenchymal+proteolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Pigment epithelium-derived factor blocks tumor extravasation by suppressing amoeboid morphology and mesenchymal proteolysis.</a> Neoplasia. 13 (7), 633-642 (2011).</li>
<li>Ju, R. J., Stehbens, S. J., Haass, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+melanoma+cell-stroma+interaction+in+cell+motility%2C+invasion%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine+-+Dermatology%22%5BJournal%5D)">The role of melanoma cell-stroma interaction in cell motility, invasion, and metastasis.</a> Frontiers in Medicine - Dermatology. 5, 307(2018).</li>
<li>Wiley, H. E., Gonzalez, E. B., Maki, W., Wu, M. T., Hwang, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+CC+chemokine+receptor-7+and+regional+lymph+node+metastasis+of+B16+murine+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Expression of CC chemokine receptor-7 and regional lymph node metastasis of B16 murine melanoma.</a> Journal of the National Cancer Institute. 93 (21), 1638-1643 (2001).</li>
<li>Meier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+pathways+and+time+courses+in+the+orderly+progression+of+cutaneous+melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Metastatic pathways and time courses in the orderly progression of cutaneous melanoma.</a> British Journal of Dermatology. 147 (1), 62-70 (2002).</li>
<li>Turner, N., Ware, O., Bosenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+metastasis%3A+melanoma+and+other+cancers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Metastasis%22%5BJournal%5D)">Genetics of metastasis: melanoma and other cancers.</a> Clinical & Experimental Metastasis. 35 (5-6), 379-391 (2018).</li>
<li>Ubellacker, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lymph+protects+metastasizing+melanoma+cells+from+ferroptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Lymph protects metastasizing melanoma cells from ferroptosis.</a> Nature. 585 (7823), 113-118 (2020).</li>
<li>Cukierman, E., Pankov, R., Stevens, D. R., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taking+cell-matrix+adhesions+to+the+third+dimension%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Taking cell-matrix adhesions to the third dimension.</a> Science. 294 (5547), 1708-1712 (2001).</li>
<li>Cunningham, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin-binding+protein+requirement+for+cortical+stability+and+efficient+locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin-binding protein requirement for cortical stability and efficient locomotion.</a> Science. 255 (5042), 325-327 (1992).</li>
<li>Unger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+human+carcinomas%3A+physiologically+relevant+3D+models+to+improve+anti-cancer+drug+development%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Modeling human carcinomas: physiologically relevant 3D models to improve anti-cancer drug development.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 79-80, 50-67 (2014).</li>
<li>Fong, E. L., Harrington, D. A., Farach-Carson, M. C., Yu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heralding+a+new+paradigm+in+3D+tumor+modeling%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Heralding a new paradigm in 3D tumor modeling.</a> Biomaterials. 108, 197-213 (2016).</li>
<li>Nakamura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+mouse+melanoma+cell+lines+by+their+mortal+malignancy+using+an+experimental+metastatic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Science%22%5BJournal%5D)">Characterization of mouse melanoma cell lines by their mortal malignancy using an experimental metastatic model.</a> Life Science. 70 (7), 791-798 (2002).</li>
<li>Meeth, K., Wang, J. X., Micevic, G., Damsky, W., Bosenberg, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+YUMM+lines%3A+a+series+of+congenic+mouse+melanoma+cell+lines+with+defined+genetic+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">The YUMM lines: a series of congenic mouse melanoma cell lines with defined genetic alterations.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 29 (5), 590-597 (2016).</li>
<li>Koya, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BRAF+inhibitor+vemurafenib+improves+the+antitumor+activity+of+adoptive+cell+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">BRAF inhibitor vemurafenib improves the antitumor activity of adoptive cell immunotherapy.</a> Cancer Research. 72 (16), 3928-3937 (2012).</li>
<li>Jenkins, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+murine+BRaf%28V600E%29+melanoma+cell+lines+with+sensitivity+to+PLX4032%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Multiple murine BRaf(V600E) melanoma cell lines with sensitivity to PLX4032.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 27 (3), 495-501 (2014).</li>
<li>Tuncer, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SMAD+signaling+promotes+melanoma+metastasis+independently+of+phenotype+switching%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">SMAD signaling promotes melanoma metastasis independently of phenotype switching.</a> The Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2702-2716 (2019).</li>
<li>Schwartz, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+Melanoma+Brain+Metastases+Instigate+Astrogliosis+and+Neuroinflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Incipient Melanoma Brain Metastases Instigate Astrogliosis and Neuroinflammation.</a> Cancer Research. 76 (15), 4359-4371 (2016).</li>
<li>Perez-Guijarro, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodel+preclinical+platform+predicts+clinical+response+of+melanoma+to+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Multimodel preclinical platform predicts clinical response of melanoma to immunotherapy.</a> Nature Medicine. 26 (5), 781-791 (2020).</li>
<li>Krepler, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Comprehensive+Patient-Derived+Xenograft+Collection+Representing+the+Heterogeneity+of+Melanoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">A Comprehensive Patient-Derived Xenograft Collection Representing the Heterogeneity of Melanoma.</a> Cell Reports. 21 (7), 1953-1967 (2017).</li>
<li>Agrawal, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+biology+approach+identifies+FUT8+as+a+driver+of+melanoma+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">A systems biology approach identifies FUT8 as a driver of melanoma metastasis.</a> Cell. 31 (6), 804-819 (2017).</li>
<li>Hanniford, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epigenetic+silencing+of+CDR1as+drives+IGF2BP3-mediated+melanoma+invasion+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Epigenetic silencing of CDR1as drives IGF2BP3-mediated melanoma invasion and metastasis.</a> Cancer Cell. 37 (1), 55-70 (2020).</li>
<li>Kim, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PRMT5+control+of+cGAS%2FSTING+and+NLRC5+pathways+defines+melanoma+response+to+antitumor+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">PRMT5 control of cGAS/STING and NLRC5 pathways defines melanoma response to antitumor immunity.</a> Science Translational Medicine. 12 (551), (2020).</li>
<li>de Miera, E. V., Friedman, E. B., Greenwald, H. S., Perle, M. A., Osman, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+five+new+melanoma+low+passage+cell+lines+representing+the+clinical+and+genetic+profile+of+their+tumors+of+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development of five new melanoma low passage cell lines representing the clinical and genetic profile of their tumors of origin.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 25 (3), 395-397 (2012).</li>
<li>Morsi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+clinically+relevant+mouse+model+of+melanoma+brain+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Pigment+Cell+Melanoma+Research%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a clinically relevant mouse model of melanoma brain metastasis.</a> Pigment Cell Melanoma Research. 26 (5), 743-745 (2013).</li>
<li>Huynh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+in+vivo+microRNA+targeting+of+liver+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Oncogene%22%5BJournal%5D)">Efficient in vivo microRNA targeting of liver metastasis.</a> Oncogene. 30 (12), 1481-1488 (2011).</li>
<li>Zou, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+variables+that+affect+human+hepatocyte+AAV+transduction+in+liver+chimeric+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+Methods+and+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">Experimental variables that affect human hepatocyte AAV transduction in liver chimeric mice.</a> Molecular Therapy Methods and Clinical Development. 18, 189-198 (2020).</li>
<li>Kleffman, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melanoma-secreted+Amyloid+Beta+Suppresses+Neuroinflammation+and+Promotes+Brain+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Melanoma-secreted Amyloid Beta Suppresses Neuroinflammation and Promotes Brain Metastasis.</a> bioRxiv. , 854885(2019).</li>
<li>Curtis, A., Calabro, K., Galarneau, J. R., Bigio, I. J., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+variations+of+skin+pigmentation+in+C57BL%2F6+mice+affect+optical+bioluminescence+quantitation%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Temporal variations of skin pigmentation in C57BL/6 mice affect optical bioluminescence quantitation.</a> Molecular Imaging and Biology. 13 (6), 1114-1123 (2011).</li>
<li>Sil, P., Wong, S. W., Martinez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((More+than+skin+deep%3A+autophagy+is+vital+for+skin+barrier+function%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">More than skin deep: autophagy is vital for skin barrier function.</a> Frontiers in Immunology. 9, 1376(2018).</li>
<li>Chen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-wide+CRISPR+screen+in+a+mouse+model+of+tumor+growth+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Genome-wide CRISPR screen in a mouse model of tumor growth and metastasis.</a> Cell. 160 (6), 1246-1260 (2015).</li>
<li>Hart, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+CRISPR+screens+reveal+fitness+genes+and+genotype-specific+cancer+liabilities%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">High-resolution CRISPR screens reveal fitness genes and genotype-specific cancer liabilities.</a> Cell. 163 (6), 1515-1526 (2015).</li>
<li>Wang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+and+characterization+of+essential+genes+in+the+human+genome%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Identification and characterization of essential genes in the human genome.</a> Science. 350 (6264), 1096-1101 (2015).</li>
<li>Edgar, R., Domrachev, M., Lash, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+Expression+Omnibus%3A+NCBI+gene+expression+and+hybridization+array+data+repository%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Research%22%5BJournal%5D)">Gene Expression Omnibus: NCBI gene expression and hybridization array data repository.</a> Nucleic Acids Research. 30 (1), 207-210 (2002).</li>
<li>Lappalainen, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+European+Genome-phenome+Archive+of+human+data+consented+for+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Genetics%22%5BJournal%5D)">The European Genome-phenome Archive of human data consented for biomedical research.</a> Nature Genetics. 47 (7), 692-695 (2015).</li>
<li>Cerami, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cBio+cancer+genomics+portal%3A+an+open+platform+for+exploring+multidimensional+cancer+genomics+data%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">The cBio cancer genomics portal: an open platform for exploring multidimensional cancer genomics data.</a> Cancer Discovery. 2 (5), 401-404 (2012).</li>
<li>Grossman, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+shared+vision+for+cancer+genomic+data%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Toward a shared vision for cancer genomic data.</a> New England Journal of Medicine. 375 (12), 1109-1112 (2016).</li>
</ol>

Yazarların beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Bu teknik raporun amacı, melanom metastazındaki potansiyel aktörlerin araştırılması için standartlaştırılmış, yukarıdan aşağıya bir iş akışı sunmaktır. İn vivo deneyler maliyetli ve zaman alıcı olabileceğinden, verimliliği en üst düzeye çıkarma ve elde edilen bilgilerin değerini artırma stratejileri çok önemlidir.
Aynı deneydeki bulguları çapraz doğrulamak için tamamlayıcı yaklaşımların kullanılması zorunludur. Örneğin, hem NuMA immünohistokimyasal boyama hem de BLI, metastatik yükü ö...

Metastatik melanom ile ilişkili yüksek mortalite, dünya çapında melanom insidansının artmasıyla birleştiğinde1 (2025 yılına kadar tahminen% 7.86'lık bir artış) yeni tedavi yaklaşımları gerektirmektedir. Hedef keşfindeki ilerlemeler, oldukça karmaşık bir süreç olan tekrarlanabilir metastaz modellerine dayanmaktadır. Metastatik kaskadın adımları boyunca, melanom hücreleri bağışıklık sisteminden kaçmak ve uzak dokuların kolonizasyonunu sağlamak için sayısız engelin üstesinden gelmelidir2. Melanom hücrelerinin esnekliği ve uyarlanabilirliği, yüksek genetik mutasyon yükü 3 ve nöral tepe kökeni de dahil olmak üzere çok sayıda faktörden kaynaklanır ve bu da çok önemli fenotipik plastisite 3,4,5'i sağlar. Her adımda, transkripsiyonel programlar, metastaz yapan melanom hücrelerinin, bağışıklık sistemi6, hücre dışı ortam 7,8 ve temas ettikleri fizikselbariyerlerin hücresel mimarisini içeren mikro çevre ile çapraz konuşmadan gelen ipuçlarına dayanarak bir durumdan diğerine geçmesine izin verir. Örneğin, melanom hücreleri, önemli bağışıklık astarlayıcı tümör salgılanan faktörlerin ekspresyonunu azaltarak bağışıklık gözetimindenkaçarlar 6.
Çalışmalar, melanom hücrelerinin metastaz10 için uzak "hedef" organı hazırlamak için kemokinler ve sitokinler salgıladığı bir "premetastatik niş" tanımlamaktadır. Bu bulgular, metastatik melanom hücrelerinin organ tropizmi ve uzak dokulara erişmek için izledikleri anatomik yol hakkında önemli sorular ortaya çıkarmaktadır. İntravazasyondan sonra, melanom hücrelerinin lenfatikler (lenfatik yayılım) ve kan damarları (hematojen yayılım) yoluyla metastaz yaptıkları bilinmektedir2,11. Hastaların çoğu lokalize hastalık ile başvururken, olguların küçük bir alt kümesi uzak metastatik hastalık ile başvurmakta ve lenfatik yayılım göstermemektedir (negatif lenf nodu tutulumu)11, melanom için alternatif metastatik yolakların varlığını düşündürmektedir.
Metastatik bir bölgeyi kolonize ettiklerinde, melanom hücreleri epigenetik ve metabolik adaptasyonlara uğrar12,13. Yeni bölmelere erişmek ve istila etmek için, melanom hücreleri proteazlar 14 ve sitoiskelet modifikasyonları11,15 kullanır, bu da yeni konumlarına geçmelerini ve büyümelerini sağlar. Melanom hücrelerini hedeflemedeki zorluk, bu tür adaptasyonların karmaşıklığında ve sayısında yatmaktadır; Bu nedenle, alan mümkün olduğunca çok sayıda adımı ve uyarlamayı deneysel olarak yeniden yaratmak için çaba göstermelidir. Organoidler ve 3D kültürler16,17 gibi in vitro tahlillerdeki sayısız ilerlemeye rağmen, bu modeller sadece in vivo metastatik kaskadı tam olarak özetlememektedir.
Murin modelleri, tekrarlanabilirlik, teknik fizibilite ve insan hastalığının simülasyonu arasında bir denge kurarak değer göstermiştir. İntravasküler, ortopik ve heterotopik olarak implante edilmiş melanom hücreleri, hasta kaynaklı ksenogreftlerden veya kısa süreli kültürlerden bağışıklık sistemi baskılanmış veya insanlaştırılmış farelere metastatik melanomda hedef keşfinin bel kemiğini temsil eder. Bununla birlikte, bu sistemler genellikle metastaz üzerinde çok önemli bir biyolojik kısıtlamadan yoksundur: bağışıklık sistemi. Bu kısıtlamaya sahip olan sinjenik melanom metastazı modelleri bu alanda nispeten azdır. B16-F1018, YUMM hücre hatları ailesi 19, SM1 20, D4M3 21, RIM3 22veya daha yakın zamanda immünokompetan farelerde geliştirilen bu sistemler, RMS 23 veM1 (Mel114433), M3 (HCmel1274), M4 (B2905) 24 melanom hücre hatları dahil olmak üzere, melanom progresyonunda konakçı immün yanıtının karmaşık rolünün araştırılmasını kolaylaştırır.
Burada, melanom metastazı hedef tanımlaması için bir boru hattı sunulmaktadır. Melanom hasta kohortlarından üretilen artan ve daha büyük 'omik' veri kümeleri ile, en klinik vaat eden çalışmaların, büyük veri entegrasyonundan kaynaklanan çalışmalar olduğunu ve titiz fonksiyonel ve mekanik sorgulamaya yol açtığını varsayıyoruz25,26,27,28. Metastatik süreçteki potansiyel hedefleri incelemek için fare modellerini kullanarak, in vivo-spesifik olayları ve doku etkileşimlerini açıklayabilir, böylece klinik çeviri olasılığını artırabilir. Metastatik yükü ölçmek için birden fazla yöntem özetlenmiş ve herhangi bir deneyin sonuçları hakkında tamamlayıcı veriler sağlanmıştır. Çeşitli organlardaki tümörlerden tek hücreli izolasyon için bir protokol, metastatik hücrelerde gen ekspresyonunun tarafsız karakterizasyonuna yardımcı olmak için tanımlanmıştır, bu da tek hücreli veya toplu RNA diziliminden önce gelebilir.

<table><tbody><tr><td>#15 Günah Bıçağı&nbsp;</td><td>Cerrahi prosedürler için</td> <td>WPI</td><td>500242</td></tr> <tr><td># 3 Scapel Kolu</td><td>WPI</td><td>500236</td><td>Cerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>1 mL Tüberkülin şırıngası, kayma ucu&nbsp;</td><td>BD</td><td>309626</td><td>Enjeksiyonları</td></tr><tr><td>10 mL şırınga, kayma ucu&nbsp;</td><td>BD</td><td>301029</td><td>Perfüzyon</td></tr><tr><td>%10 Formalin Sodyum Tamponlu</td><td>EK Industries</td><td>4499-20L</td><td>Perfüzyon/doku fiksatifi</td></tr><tr><td>için 15 mL Konik</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430052</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>15 mL Konik Polipropilen Santrifüj Tüpleri</td><td>Falcon</td><td>352196</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>200 Kanıt Etanol</td><td>Deacon Labs</td><td>04-355-223</td><td>Histoloji</td></tr><tr><td>22G &ndash; 22mm iğne</td><td>BD</td><td>305156</td><td>Perfüzyon</td></tr><tr><td>4-0 Vicryl</td><td>Sütür Ethicon</td><td>J464G</td><td>Sütür</td></tr><tr><td>%4 Carson fosfat tamponlu Paraformaldehit&nbsp;</td><td>EMS</td><td>15733-10</td><td>Perfüzyon / doku fiksatif</td></tr><tr><td>40 ve mikro için; m</td><td>Corning</td><td>431750</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>5-0 Emilebilir Sütür&nbsp;</td><td>Ethicon</td><td>6542000</td><td>Kapatma</td></tr><tr><td>50 mL Konik&nbsp;</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430828</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>50mL Konik Polipropilen Santrifüj Tüpleri</td><td>Falcon</td><td>352070</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>7-0 İpek sütür&nbsp;</td><td>FST</td><td>18020-70</td><td>Ligatür</td></tr><tr><td>70 ve mikro; m</td><td>Corning</td><td>431751</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>Solmaya karşı dayanıklı montaj ortamı&nbsp; &nbsp;</td><td>Vector Labs</td><td>H-1000-10</td> Forseps uygulayan <td>İmmünofloresan</td></tr><tr><td>Yaklaşımı, 10cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>14189</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>Avance</td><td>Bruker</td><td>3 HD</td><td>NMR Konsolu&nbsp;</td></tr><tr><td>Biospec 7030&nbsp;</td><td>Bruker</td><td>7030</td><td>Mikro MRI</td></tr><tr><td>BSA</td><td>Bioreg</td><td>A941</td><td>NuMA Boyama</td></tr><tr><td>Castroviejo dikiş forsepsleri, düz uçlar 5.5mm bağlama platformu, 11cm&nbsp;</td><td>WPI</td><td>WP5025501</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>Coplin Boyama Kavanozu</td><td>Bel-Art&nbsp;</td><td>F44208-1000</td><td>Histoloji</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542-1MG</td><td>İmmünofloresan</td></tr><tr><td>dCas9-KRAB</td><td>Addgene</td><td>110820</td><td>Genetik manipülasyon</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>NEB</td><td>M0303L</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Corning</td><td>21-030-CM</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>Ekstra Keskin Kaplamasız Tek Kenar Bıçağı</td><td>GEM</td><td>62-0167</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>Hücre Dışı Matriks Substratı&nbsp;</td><td>Corning</td><td>354234</td><td>Azaltılmış Büyüme Faktörünü Düşünün (alternatif olarak&nbsp;</td></tr><tr><td>FBS</td><td>Cytiva</td><td>SH30910.03</td><td>Hücre kültürü Fiji</td></tr><tr><td>Image J</td><td>Fiji Image J</td><td>Software</td><td>Immunofluorescence</td></tr><tr><td>Keçi anti-tavşan HRP konjuge multimer&nbsp;</td><td>Thermo Fisher</td><td>A16104</td><td>NuMA Boyama Keçi</td></tr><tr><td>Serumu</td><td>Gibco</td><td>PCN5000</td><td>İmmünofloresan</td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Corning</td><td>21-020-CV</td><td>Doku işleme</td></tr><tr><td>Hematoksilen ve nbsp;</td><td>Richard-Allan Bilimsel&nbsp;</td><td>7231</td><td>Histoloji</td></tr><tr><td>Illumina III&nbsp;</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136334</td><td>BLI Enstrüman</td></tr><tr><td>İnsülin şırınga 28G - 8mm iğne</td><td>BD</td><td>329424</td><td>Enjeksiyonları</td></tr><tr><td>İnsülin şırınga 31G - 6mm iğne ve nbsp;</td><td>BD</td><td>326730</td><td>Enjeksiyonlar</td></tr><tr><td>İris Forseps, 10.2cm, Tam Eğri, tırtıklı</td><td>WPI</td><td>504478</td><td>Perfüzyon ve cerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>İzofluran USP</td><td>Covetrus</td><td>11695067772</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Kuyumcular #7 Forseps Titanyum 11 cm 0.07 x 0.01 mm Uç</td><td></td><td>WPI WP6570</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>Ketamin HCl 100mg/mL</td><td>Mylan Ind.</td><td>1049007</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>lentiCRISPRv2</td><td>Addgene</td><td>98290</td><td>Genetik manipülasyon</td></tr><tr><td>Lycopersicon Esculentum (Domates) Lektin, DyLight 649</td><td>Invitrogen</td><td>L32472</td><td>Vasküler endotel hücreleri marker</td></tr><tr><td>MEM esansiyel olmayan amino asitler X 100</td><td>Corning</td><td>25-025-CI</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Metzenbaum Makas</td><td>WPI</td><td>503269</td><td>Cerrahi için prosedürler</td></tr><tr><td>Mikroenjeksiyon Ünitesi</td><td>KOPF</td><td>5000</td><td>İntrakardiyak enjeksiyonlar</td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Fisher</td><td>S25877&nbsp;</td><td>NuMA Boyama</td></tr><tr><td>İğne 30G x 25mm</td><td>BD</td><td>305128</td><td>İntrakardiyak Enjeksiyon</td></tr><tr><td>İğnesi 33G x 15mm</td><td>Hamilton</td><td>7747-01</td><td>İntrakarotis Enjeksiyon</td></tr><tr><td>İğnesi tutucusu, Castroviejo, 14cm, kilitli, 1.2mm Tırtıklı Çeneler</td><td>WPI</td><td>14137-G</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>NOD. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ fareler</td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td>005557</td><td>Murine modeli</td></tr><tr><td>NU/J fareleri</td><td>Jackson Laboratuvarı</td><td>002019</td><td>Murine modeli</td></tr><tr><td>Nükleer Mitotik Cihaz Protein poliklonal tavşan anti-insan&nbsp;</td><td>Abcam</td><td>97585</td><td>NuMA Boyama</td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin 10000U/mL</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Percoll</td><td>GE</td><td>0891-01</td><td>yoğunluk ayırma çözeltisi &nbsp;</td></tr><tr><td>PI Klasik Cerrahi Eldivenler</td><td>Kardinal Sağlık</td><td>2D72PT75X</td><td>Cerrahi</td></tr><tr><td>pLKO Tet-On</td><td>Addgene</td><td>21915</td><td>Genetik manipülasyon</td></tr><tr><td>Povidon-İyot% 10 Çözelti</td><td>Medline</td><td>MDS093943</td><td>Cerrahisi</td></tr><tr><td>Proparakain Damlaları% 0.5</td> <td>Akorn Pharma</td><td>AX0501</td><td>Oftalmik lokal anestezik</td></tr><tr><td>Puralube Petrolatum Oftalmik Merhem</td><td>Dechra</td><td>83592</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Tıraş Bıçağı Çift Kenarlı Bıçaklar&nbsp;</td><td>EMS</td><td>72000</td><td>Tıraş ve Vibrotomlu Beyin Dilimleme&nbsp;</td></tr><tr><td>Refleks 9mm EZ Klips&nbsp;</td><td>Beyin Ağacı</td><td>EZC-&nbsp; KIT</td><td>Yara kapatma</td></tr><tr><td>RPMI 1640&nbsp;</td><td>Corning</td><td>10-040-CM</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Makası, Bahar 10.5cm Str, 8mm Bıçaklar</td><td>WPI</td><td>501235</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>Yarı Otomatik Titreşimli Bıçak Mikrotom</td><td>Leica</td><td>VT1200</td><td>Beyin Dilimi İmmünofloresan</td></tr><tr><td>Tek Kanallı Anestezi Buharlaştırıcı Sistemi</td><td>Kent Scientific</td><td>VetFlo-1210S&nbsp;</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Smartbox Masaüstü Oda Sistemi ve Egzoz Blower</td><td>EZ Sistemleri</td><td>TT4000</td><td>CO2 Ötenazi</td></tr><tr><td>Steril Fenestre Tek Kullanımlık Örtü</td><td>Medline</td><td>NON21002</td><td>Cerrahisi</td></tr><tr><td>Set-In Kollu Steril Takviyesiz Aurora Cerrahi Önlükler</td><td>Medline</td><td>DYNJP2715</td><td>Cerrahisi</td></tr><tr><td>T25 Şişesi</td><td>Corning&nbsp;</td><td>430639</td><td>Hücre kültürü</td></tr><tr><td>Tris</td><td>Corning</td><td>46-031-CM</td><td>NuMA Boyama</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>X100-500ML</td><td>İmmünofloresan</td></tr><tr><td>Troutman bağlama forsepsleri, 10cm, Kavisli G deseni, bağlama platformlu 0,52 mm uç</td><td>WPI</td><td>WP505210</td><td>Mikrocerrahi prosedürler için</td></tr><tr><td>Damar klipsleri 10G Basınç 5x 0.8mm Çeneler, 5 / paket</td><td>WPI</td><td>15911</td><td>İçin mikrocerrahi prosedürler</td></tr><tr><td>Visiopharm</td><td>Visiopharm Visiopharm</td><td></td><td>NuMA Boyama Kantitasyon Yazılımı</td></tr><tr><td>Ksilazin 100mg/mL</td><td>Akorn Pharma</td><td>59399-111-50</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Ksilen</td><td>Fisher</td><td>X3P-1GAL</td><td>Histoloji</td></tr></tbody></table>

melanom metastazının yeni arabulucularının belirlenmesi için sağlam bir keşif platformu

A Robust Discovery Platform for the Identification of Novel Mediators of Melanoma Metastasis

Metastaz, hücrelerin in vitro tahlillerle sadece eksik modellenen engellerin üstesinden gelmelerini gerektiren karmaşık bir süreçtir. Melanom metastazındaki yeni oyuncuları tanımlamak için sağlam, tekrarlanabilir in vivo modeller ve standartlaştırılmış yöntemler kullanılarak sistematik bir iş akışı oluşturulmuştur. Bu yaklaşım, bir genin metastazdaki rolünü tam olarak karakterize etmek için belirli deneysel aşamalarda veri çıkarımına izin verir. Modeller, genetiği değiştirilmiş melanom hücrelerinin intrakardiyak, intradermal veya subkutan enjeksiyonlar yoluyla farelere sokulması ve ardından seri in vivo görüntüleme ile izlenmesiyle oluşturulur. Önceden belirlenmiş son noktalara ulaşıldıktan sonra, primer tümörler ve / veya metastaz taşıyan organlar toplanır ve çeşitli analizler için işlenir. Tümör hücreleri, tek hücreli RNA dizilimi de dahil olmak üzere çeşitli 'omik' platformlardan herhangi birine sıralanabilir ve tabi tutulabilir. Organlar, metastazların genel yükünü ölçmek ve spesifik anatomik konumlarını haritalamak için görüntüleme ve immünohistopatolojik analizlere tabi tutulur. Engraftma, izleme, doku hasadı, işleme ve analiz için standartlaştırılmış protokoller de dahil olmak üzere bu optimize edilmiş boru hattı, hasta tarafından türetilmiş, kısa vadeli kültürler ve çeşitli katı kanser türlerinin insan ve murin hücre hatları için benimsenebilir.

Aşağıdaki rakamlar, melanom metastazının yeni sürücülerinin tanımlanması için açıklanan iş akışının nasıl uygulandığını göstermektedir. Şekil 2 , fukoziltransferaz FUT8'in in vivo melanom metastazının susturulmasının etkilerinin incelendiği yayınlanmış bir çalışmanın sonuçlarını özetlemektedir26. Kısaca, insan hasta glikomik verilerinin analizi (lektin dizileri ile elde edilen) ve transkriptomik profilleme, karşılık gelen fukoziltransferazdaki (FUT8) artışla ...

Bu makalede, melanom metastazının yeni aday aracılarını ve etki mekanizmalarını test etmek için kullanılan tekniklerin bir iş akışı açıklanmaktadır.

Melanom Metastazının Yeni Arabulucularının Belirlenmesi için Sağlam Bir Keşif Platformu

Metastasis is a complex process, requiring cells to overcome barriers that are only incompletely modeled by in vitro assays. A systematic workflow was ...

Bu protokol, melanom metastazının aday düzenleyicilerinin in vivo etkilerini ve aynı zamanda diğer solid malignitelerin metastazını değerlendirmek için kullanılabilecek sürekli bir iş akışı içindeki bir dizi tekniği açıklamaktadır. Sistematik iş akışımızın temel avantajı, sağlam ve standartlaştırılmış in vivo modeller ve teknikler sayesinde verilerin tekrarlanabilirliğinin artmasıdır. Bu boru hattı, Omics verilerinden veya in vitro tahlillerden çıkarılan adayları in vivo bir ortamda test ederek hedef keşfi ve terapi geliştirme için bir yol sunar.Bu protokolde sunulan tekniklerle ilişkili öğrenme eğrisi, sağlanan materyaller kullanılarak ve adımları uygularken ayrıntılı açıklama izlenerek kısaltılır. Prosedürün gösterilmesine yardımcı olmak, Preklinik Görüntüleme Çekirdeği'nde bir araştırma bilimcisi olan Orlando Aristizabal ve laboratuvarımda bir eğitmen olan Ran Moubarak olacak. İntradermal enjeksiyonlar için, aseptik koşulları korurken biyogüvenlik kabini içinde sekiz ila 10 haftalık bir fareyi anestezi altına alın ve tıraş edin.Daha sonra cildi iğne bıçağının yörüngesine karşı geriye doğru kavrayın ve geri çekin ve altı milimetre uzunluğunda, 31 gauge insülin şırınga iğnesi kull

a-robust-discovery-platform-for-identification-novel-mediators

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu makale, insan kanser hücre hatları metastatik potansiyelini belirlemek için kullanılan deneysel bir metastaz testinin prosedürleri açıklamaktadır.

Deneysel metastaz Testi

Bu videoda, kolorektal kanser hastadan türetilmiş ksenogreftlerin veya PDX'lerin spontan metastaz fare modelini oluşturmak için kullanılan protokol açıklanmaktadır. Bu ksenogreft modelleri, insan karsinomlarının özelliklerini kısmen taklit eder ve invazyon ve metastaz dahil olmak üzere insan malignitelerinin kritik yönlerini anlar.

Spontan Metastaz Fare Modelleri: Ortototopik Olarak Enjekte Edilen Kolorektal Kanser Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

Bu videoda, fare modelinde melanom hücreleri kuyruk damarından intravenöz olarak enjekte edilmektedir. Melanom hücreleri dolaşım sistemi boyunca daha fazla hareket eder, uzak mikro çevreye adapte olur ve akciğerler gibi organlarda metastaza neden olur.

Deneysel Metastatik Melanom Fare Modeli: Akciğerlerdeki Melanom Hücrelerinin Metastatik Potansiyelini İncelemek İçin Bir Platform

Bu protokol, yumurtalık eksplantlarını fallop tüpü kanseri hücreleriyle birlikte kültürleyerek numune hazırlama tekniğini açıklar. Bu örnekler, tümör gelişimine yol açan hücreler ve dokular arasındaki küçük molekül değişimini tespit etmek için görüntüleme kütle spektroskopisi veya IMS kullanılarak görselleştirilir.

Görüntüleme Kütle Spektrometresi Analizi için Over Kanseri İletişiminin Modellenmesi: Metastatik Over Tümörü Gelişiminde Küçük Moleküllü Kimyasal İletişimcileri Tanımlamak İçin Bir Yöntem

Metastazı, kanserin virülansında derin bir rol oynar ve ölümlerin tahminen %90'ını oluşturur.  Farelerde metastatik melanom modeli için terapötik ajanların bu klinik fenomene karşı etkinliğini belirlemek için yararlı olan bir protokol sunuyoruz.

Singenik Fare Melanom Hücreleri Enjeksiyon Akciğerler Onların Metastatik Potansiyeli belirleme

Burada, biz mevcut her iki mimari beyannamedir bir 3D organotypic Melanom küresel Cilt modeli oluşturmak için bir protokol ve bir organ/tümör vivo içinde ama aynı zamanda çok hücreli karmaşıklık barındırır sistematik deneysel müdahale.

3D Organotypic Melanom küresel Cilt modeli

Biz mikroRNA (miRNAs) dolaşan ifade düzeylerini değerlendirmek için bir protokol kanserli hastalarda plazma örnekleri mevcut. Özellikle, biz piyasada bir kit miRNA çıkarma ve ters transkripsiyon dolaşan için kullanılır. Son olarak, gerçek zamanlı önceden benekli sonda özel plakaları kullanarak 24 seçili miRNAs oluşan bir panel analiz ettik.

Metastatik kolorektal kanser hastalarında dolaşımdaki mikroRNA özel Panel tespiti

İmmünoterapi ve tek hücreli genomik profilleme çağında, kanser biyolojisi, tümör-bağışıklık arayüzünü uygun bir mekansal zamansal bağlamda araştırmak için yeni in vitro ve hesaplama araçları gerektirir. Hücresel fonksiyonların dinamik, multiparametrik izlenmesi ile uyumlu, 2D ve 3D ortamlarda tümör-immün mikroakışkan ko-kültürlerden yararlanmak için protokolleri açıklıyoruz.

İn vitro tümör mikroortamlarında immün yanıtı diseksiyon için mikroakışkan ko-kültür modelleri

Bu, kanser metastazının baskılayıcılarını veya sürücülerini taramak için etkili bir yöntemdir. Bir ifade kütüphanesi ile transdüklenen hücreler, metastatik koloniler oluşturmak için tavuk chorioallantoic membran vaskülatürüne enjekte edilir. İnvazivliği azalmış veya artmış koloniler, fenotiplerini doğrulamak için ekscised, genişletilmiş, reenjected ve son olarak, yüksek verim sıralaması kullanılarak analiz edilir.

Hızlı ve Nicel Intravital Chick Chorioallantoic Membran Modeli Kullanılarak Metastatik Regülatörlerin Keşfi

Melanom, hızla diğer organlara yayılan çok agresif bir hastalıktır. Bu protokol, metastatik melanomun Braf / Pten fare modelindeki inguinal lenf düğümlerinin hacmini izlemek için 3D render ile birlikte ultra yüksek frekanslı ultrason görüntülemenin uygulanmasını açıklamaktadır.

Braf/Pten Genetiği Mühendisliğiyle Tasarlanmış Melanom Fare Modelinde Ultra Yüksek Frekanslı Ultrason Görüntüleme ile Lenf Düğümü Hacminin Analizi

Burada, taze melanom dokularından ayrışmış hücre süspansiyonlarını kültürleyerek melanom hastadan türetilmiş organoidler oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Bu organoidler, hastaya özgü tümörleri in vitro olarak aslına uygun olarak özetleyerek, tümör immünosupresif mekanizmalarını, ilaç taramasını, ilaç direnç mekanizmalarını ve kanser sürveyans yaklaşımlarını keşfetmek için yenilikçi bir yaklaşım sunar.

Melanom Hasta Kaynaklı Organoid Modellerle Terapötik Fırsatların Ortaya Çıkarılması

Keşfedin, melanom metastazının yeni arabulucularını değerlendirmek için sağlam ve standartlaştırılmış bir in vivo çalışma akışını. Bu yöntem, hedef keşfi ve tedavi geliştirme için güvenilir veri sağlar.

Melanom Metastazının Yeni Arabulucularının Belirlenmesi için Sağlam Bir Keşif Platformu

Daha fazla video keşfet