Name: Murin Deri nakli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-01-16T10:34:00.000+00:00
Duration: 6 min 42 s
Description: Öğrenin, BALB/c ve C57BL/6 fare türleri kullanılarak murin deri nakli prosedürünü. Bu yöntem, allogeneik yanıtları ve greft reddini incelemek için standart bir tekniktir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

NIH İmmünoloji Eğitim Hibe T32 AI 60.573 (KBY) ve NIH hibe GM 41.514 (MDC)

Deney başlamadan önce: <ul><li> IACUC onayını alın </li><li> Cerrahi aletler ve Q-ipuçları sterilize </li></ul> I. Hasat Donör Doku <ol><li> Donör fare Euthanize (kurumun SOP ile uygun) </li><li> Islak saç geri alkol ile kulak baz </li><li> Hasat bağış deri üssünde kulak keserek </li><li> Buz üzerinde plaka koyun doku </li><li> Split kulak: sıçan diş forseps ile kulağının dibinde doku tutam ventral ve dorsal taraf; nazikçe doku ayrı çekin; şamandıra dorsal doku, iç yüzeyi aşağı, PBS içinde buz üzerinde; kollajenöz ventral flep atın </li></ol> II. Alıcı nakli için hazırlayın <ol><li> Anestezisi fare Onaylanan prosedür kullanarak </li><li> Post-op ağrı kesici (yani 0.05-0.1 mg / g Bupernex ip) analjezik Yönetici </li><li> Lateral pozisyonda yerleştirin fare </li><li> Hayvan yeterli sedasyon sağlamak için ayak tutam yapın </li><li> Islak saç ve alkol ile toraks tıraş </li><li> Temiz alan alkollü bez ile silin </li></ol> III. Deri Nakli <ol><li> Sıçan dişli forseps ile çadır cilt ve forseps aşağıdaki ~ 0.25-0.5 cm kesme: ~ 1 cm&#39;lik kesi olun </li><li> PBS bağış deri grefti yatak tepesinde yer (greft yatak karşı karşıya kulak cilt iç yüzeyi ile birlikte) çıkarın ve steril Q-tip aşırı PBS kaldırmak </li><li> Bu nakli (altında greft kenarları kıvrılmış ve greft alıcının gövde cilde akşamdan değildir olduğunu emin olun) greft yatak içinde kesin bir dille yalanlar o kadar dikkatlice uzakta fazla bağış deri Döşeme </li><li> Steril bandaj sarın alıcı (deri grefti üzerine yerleştirilen yapışkanlı olmayan gazlı segment) </li><li> Bu bandaj (hayvan nefes değerlendirmek) çok sıkı değildir sağlanması ve bu silah serbestçe cep </li><li> Güvenli bandaj tek bir 2-0 ipek sütür ile </li><li> Temiz bir kafes yerleştirin hayvan (hayvan kadar ısıtma lambası altında yeterince anestezi kurtarıldı) </li><li> Monitör alıcı sıkıntı belirtileri ve ağrı kesici için gerekli gibi analjezik yönetmek için 1-2/day </li></ol> IV. Bandaj Kaldırma (6-7 gün transplantasyon sonrası) <ol><li> Anestezisi fare Onaylanan prosedür kullanarak </li><li> Ipek sütür kesin ve kaldırma </li><li> Bandaj (greft bozmaya emin) ile dikkatlice kesilerek künt sonunda makas, kullanma ve hafifçe kaldırın </li><li> Temiz kafes fare dön </li><li> Kabuklanma ya da daralma belirtileri için bandaj çıkarıldıktan sonra greft ~ 8 saat kontrol edin. Varsa, greft vascularize başarısız olmuş ve teknik bir başarısızlık olarak kabul edilmelidir. </li><li> Reddedilme işaretleri (genellikle ~% 80 nekroz donör doku olarak tanımlanan) günlük Monitör </li><li> Allojenik deri nakli genellikle d8-12 post-op arasında reddedecektir </li></ol> V. Yardımcı İpuçları <ol><li> Kulak tabanına yakın donör doku Hasat: 1) greft boyutu en üst düzeye çıkarmak, ve 2) bölme kolaylaştırmak dengesiz bir ventral çıkıntı </li><li> Her zaman alıcı tıraş için yeni bir jilet kullanın </li><li> Analjezik ip verilecek ise, (greft kesintiye şansını en aza indirmek) post-op kullanımını en aza indirmek için prosedür nakli için önce yönetmek </li><li> Mümkünse, bandaj uygulamadan önce eldiven çıkarın. Eldiven bandaj sopa ve komplike uygulama eğilimindedir </li><li> Bandaj sonunda tek bir sütür yerleştirilmesi erken kaldırılması en aza indirecektir. </li><li> Sıkı izin ve dikiş yerleştirerek ÖNCE nefes değerlendirmek bandaj sarın. Bandaj çok sıkı ise, hayvan solunum durur. Bandaj çok gevşek ise, hayvan kaldıracak. </li></ol>

Yazarların beyan edilecek bir çıkar çatışması yoktur.

Bu video-makale gösterdiği gibi, deri nakli modeli allojenik T hücre yanıtları izlenmesi için hızlı ve kolay bir yöntemdir. Allojenik deri nakli geniş bir uygulama yelpazesine sahiptir ve tahlil için immünosupresif ajanlar ve tolerans protokolleri yanı sıra araştırmak için çeşitli engelleme antikorların biyolojik etkileri çeşitli verimlilik kullanılmıştır.

<table><tbody><tr><td>Mikro-diseksiyon penseti (eğri)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F4142</td><td></td></tr><tr><td>Sıçan diş penseti (1x2 dişli, düz)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11053-10</td><td>n=2</td></tr><tr><td>Şaşılık makası (küt uçlu)</td><td>Fine Science Tools</td><td>14074-11</td><td></td></tr><tr><td>İris penseti (eğri)</td><td>Fine Science Tools</td><td>11065-07</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı makas (açılı)</td><td>Fine Science Tools</td><td>15006-09</td><td></td></tr><tr><td>Halsey mikro iğne tutucu</td><td>Fine Science Tools</td><td>12500-12</td><td></td></tr><tr><td>10 cm plaklar</td><td>Corning</td><td>430167</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Cellgro</td><td>21-040-CV</td><td></td></tr><tr><td>Bupernex (Buprenorfini hidroklorür)</td><td>Reckitt Benckiser</td><td>517201</td><td></td></tr><tr><td>İnsülin şırıngaları (29 Ga)</td><td>Monoject</td><td>8881 600145</td><td></td></tr><tr><td>Pamuklu çubuklar</td><td>Solon Manufacturing Company</td><td>362</td><td></td></tr><tr><td>Tek kenarlı jiletler (#9)</td><td>Smith &amp;amp; Nephew Inc.</td><td>67-0238</td><td></td></tr><tr><td>İpek sütür (2-0; PS-2)</td><td>Ethicon Inc.</td><td>583H</td><td></td></tr></tbody></table>

murin deri nakli

Murine Skin Transplantation

Biri olarak en sıkı ve en teknik açıdan zor modelleri, deri nakli ana T hücre yanıtları donör antijenleri MHC-birbirinden farklı tahlil için standart bir yöntem. Bu video makalenin amacı, fare modeli kullanarak deri nakli adım adım görsel gösteri ile izleyici sağlamaktır. 2) nakli için alıcı hazırlanıyor; 3) deri nakli, 4) bandaj kaldırılması ve greft reddi izlenmesi; 5) yararlı ipuçları 1) hasat donör cilt: 5 ana bileşenleri protokol ayrılmıştır. Bir kez usta, prosedür kendisi gerçekleştirmek için &lt;10 dakika sürer.

Allojenik deri nakli ana T hücre yanıtları donör antijenleri MHC-birbirinden farklı tahlil için bir standart model. Bu video-makale BALB/c--&gt; C57BL / 6 deri nakli yapmak dahil her adım görsel bir öğretici sağlar.

Murin Deri nakli

En katı ve teknik açıdan en az zorlayıcı modellerden biri olan deri transplantasyonu, ...'ya karşı konakçı T hücresi yanıtlarını değerlendirmek için standart bir yöntemdir.

Dr. Michael Kalen'in laboratuvarına hoş geldiniz. Ben Kim Gard. Bugün, doku grefti reddinin en katı ve teknik olarak en az zorlayıcı modellerinden biri olan allojenik BC'den black six suşu kombinasyonunu kullanan bir deri transplantasyonu modelini göstereceğiz.Deri transplantasyonu, allojenik yanıtları analiz etmek için kullanılan standart bir tekniktir ve çeşitli tolerans indükleme stratejilerinin etkinliğini değerlendirmek amacıyla yaygın olarak kullanılır. Öyleyse başlayalım. Bu prosedür, BAB seed donör faresinden derinin alınmasıyla başlar.Öncelikle donör hayvanı Iacuc SOP'ye uygun olarak ötanize edin. Ardından, saç diplerini alkolle ıslatın; kulağı tabana mümkün olduğunca yakın bir yerden çıkararak deriyi hasat edin ve buz üzerine yerleştirin. Sonrasında, her bir kulağı boyuna ayırarak kolajen ventral flebi atın ve dokuyu buz üzerinde yüzdürün.Artık donör deri transplantasyon için hazırdır. Transplantasyon prosedürü, alıcı hayvanın onaylanmış prosedürler kullanılarak anestezi altına alınmasıyla başlar. Alıcı yeterince anestezi altına alındığında, hayvanı kamaradan çıkarın ve ağrı kesici olarak IP yoluyla bup ve next uygulayın.Alıcıyı yan pozisyona getirin ve ayak parmağına dokunarak hayvanın tamamen sedate olduğundan emin olun. Islak tüyleri alkolle sıkıştırarak tıraş edin. Alıcı temiz bir şekilde tıraş edildikten sonra, yaklaşık bir ila iki santimetrelik bir insizyon yapın.Donör taramasını insizyonun üzerine yerleştirin ve fazla sıvıyı steril bir kulak çubuğuyla alın. Şimdi fazla donör deri sargısını, hayvanı ve bandajı dikkatlice kesin. Solunumu değerlendirerek bandajın çok sıkı olmadığından emin olun ve ardından kolların serbestçe hareket edebildiğini kontrol edin.Şimdi bandajı tek bir dikişle sabitleyin. Hayvan ilk birkaç gün boyunca iyileşene kadar fareyi ısıtıcı lambalı temiz bir kafese yerleştirin. Cerrahi işlem sonrası, hayvanı günde birkaç kez stres belirtileri açısından izlemeli ve ağrı için gerektiğinde buprece asistir vermelisiniz.Ameliyatı takip eden beş ila yedi gün sonra bandajlar çıkarılır. Bandaj çıkarma işlemini, transplantasyon sonrası altıncı gündeki bir alıcı üzerinden göstereceğim. Fare tamamen anestezi altına alındığında, sütürü çıkarın ve küt uçlu bir makas kullanarak bandajı kesin ve transplantasyona zarar vermemeye dikkat ederek nazikçe çıkarın.Hayvanı temiz bir kafese geri koyun ve reddedilme belirtileri açısından günlük olarak izleyin. Seçtiğiniz suş kombinasyonuna bağlı olarak, çoğu deri nakli reddedilir ve bu durum genellikle sekizinci ila 12. güne kadar %80 nekroz olarak tanımlanır. Bu fare operasyon sonrası sekizinci gündedir ve bilateral nakil almıştır.Solda, reddedilmeyecek olan kontrol sinjenik siyah altı nakli yer almaktadır. Sağda ise reddedilecek olan allojenik BAB deniz nakli bulunmaktadır. Burada ise reddedilme sürecinde olan başka bir tarih nakli görülmektedir.Son olarak, neredeyse tamamen reddedilen farklı tarihli bir transplant örneği görülmektedir. Böylece bu üç örnek, deri transplant reddinin kinetiğindeki normal varyasyonu göstermektedir. Önceki deneyde, aynalama deri transplantının nasıl gerçekleştirileceğini gösterdik.Bu model, allojenik yanıtların izlenmesi için hızlı ve kolay bir yöntemdir ve geniş bir uygulama alanına sahiptir. Örneğin, deri transplantasyonu; çeşitli immünsupresif ajanların, bloklayan antikorların ve tolerans indüksiyon protokollerinin etkinliğini değerlendirmek için kullanılabilir. Hepsi bu kadar.İzlediğiniz için teşekkürler, deneylerinizde başarılar dileriz.

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu raporda, üç boyutlu bir cilt, mimari ve kompozisyon insan deri taklit modeli yeniden açıklar. Melanosit fizyolojisi, melanom ilerlemesi ve dermal kök hücre kaderi cilt modeli yeniden kullanarak incelenmiştir. Model preklinik ilaç değerlendirilmesi için bir araç olarak da yararlıdır.

Üç Boyutlu İnsan Cilt Model Yeniden İnşa: Aracı Normal Cilt ve Melanom İlerleme Eğitim

Kazanç ya da kayıp fonksiyon-arabuluculuk lentivirüs kullanarak bir saç kökü yenilenme modeli Doku özgü analizi.

Saç Rejenerasyon sırasında epitelyal-mezenkimal Sinyal Rapid Genetik Analizi

Bu videoda, baskılanmış nötrofil yanıtı olan immün yetmezliği olan bir fareye insan derisinin aşılanması için bir yöntem gösterilmektedir. Yöntem, farenin greft yatağına insan bölünmüş kalınlıkta derisinin uygulanmasını, mühürlenmesini ve geri kazanım için örtülmesini içerir. Sonunda, insan derisi farenin derisine yapışır, vaskülarizasyon ve dolaşım sağlar ve başarılı bir deri ksenogrefti ile sonuçlanır.

Bir fare modelinde insan derisi grefti için bir teknik

Neisseria meningitidis kan damarları bulaşan bir insan özgü patojendir. Bu protokolde insan mikrodamarlar bağışıklığı fare üzerine insan cildi aşılama yaparak bir fare sokulur. Bakteriler genellikle insan durumda gözlenen purpurik döküntü vasküler hasar ve gelişimine yol açan, insan gemilere yoğun yapışır.

Insanlaşmış Fare Modeli mikrovaskülatürde Hedefleme Bakteriyel Enfeksiyonlar Eğitim için

Kuyruk-deri transplantasyonu, farelerde allojenik immün yanıtlar sırasında T hücresine bağlı reddi ve tolerans indüksiyonunu incelemek için güçlü bir modeldir. Bu protokolün avantajları, minör invaziv cerrahi ve alıcı fareyi feda etmeye gerek kalmadan izleme kolaylığıdır.

Farelerde allojenik CD4 + T hücre Cevapları Eğitim için Kuyruk Cilt Nakli

Mürin tam kalınlıkta deri transplantasyonu alloimmun ortamda reddini incelemek için iyi kurulmuş bir modeldir. &gt; C57BL / 6 tam kalınlıkta deri nakli - Burada bir BALB / c performans katılan her adımda bir öğretici sağlar.

Mürin Tam kat Cilt Nakli

Biz İndüklenmiş pluripotent kök hücre kaynaklı lenfositi ve fibroblastlar ayırt etmek ve bir 3B cilt organoid oluşturmak gösterilmiştir bir protokol bu lenfositi ve fibroblastlar kullanarak öneriyoruz. Bu iletişim kuralı insanlaşmış fareler model oluşturma ek bir adım içerir. Burada sunulan teknik dermatolojik araştırma artıracaktır.

3B cilt Organoid kablosu kan kaynaklı nesil Pluripotent kök hücreler indüklenen

Bu çalışmanın amacı yanık yara iyileşmesi bir murine modeli geliştirmektir. Önceden ısıtılmış pirinç şablonu kullanılarak farelerin sırt derisinde termal yanık yapıldı. Yanmış doku debrideed ve genetik olarak benzer donör fare kuyruğundan hasat bir deri greft içip kaplandı.

Allojenik Deri Grefti ile Yeniden Yapılandırılan Yanık Yarasının Murine Modeli

Mevcut protokol, insan derisinin obez olmayan diyabetik (NOD)-scid interlökin-2 gama zinciri reseptörü (NSG) farelere nasıl aşılanacağını açıklamaktadır. Nakil için insan derisinin hazırlanması, nakil için farelerin hazırlanması, bölünmüş kalınlıkta insan derisinin nakli ve nakil sonrası iyileşme prosedürünün ayrıntılı bir açıklaması raporda yer almaktadır.

İnsan Bağışıklık Tepkilerini In Vivo'da Manipüle Etmek için Ksenograft Cilt Modeli

Bu yazıda heterotopik vaskülarize kardiyak transplantasyon için modifiye edilmiş bir teknik, güncel aseptik teknik, analjezi ve anestezi anlatılmaktadır.

Çağdaş Aseptik Teknik, Anestezi ve Analjezi Standartlarına Uygun Modifiye Murin Heterotopik Kalp Nakli Protokolü

Heterotopik arka uzuvdan boyuna vaskülerize kompozit allotransplantasyonlu tekrarlanabilir bir fare modeli sunuyoruz. Bu süpermikrocerrahi protokol, 0,3-0,5 mm damar anastomozlarını içerir ve naylon filament yönlendirmesi ile venöz kelepçeleme ile birleştirilir. Vaskülerize kompozit allotransplantasyonda tolerans, iskemi-reperfüzyon hasarı ve immünolojik mekanizmalar üzerine translasyonel çalışmalar için güvenilir bir platform sağlar.

Farede Heterotopik Arka Uzuvdan Boyuna Nakil: Vaskülerize Kompozit Allotransplantasyonun Süpermikrocerrahi Modeli

Öğrenin, BALB/c ve C57BL/6 fare türleri kullanılarak murin deri nakli prosedürünü. Bu yöntem, allogeneik yanıtları ve greft reddini incelemek için standart bir tekniktir.

Murin Deri nakli

Daha fazla video keşfet