Name: Festuca rubra ve Zea maysın Köklerinde Kolonizasyon Kalıplarını ve Mantar Stratejilerini Keşfetmek İçin Bir Araç Olarak Mikorizal Haritalar (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Keşfedin MycoPatt yöntemiyle Festuca rubra ve Zea mays köklerindeki arbusküler mikorizal kolonizasyon kalıplarını. Bu yöntem, bitki-fungal etkileşimlerini anlamak ve tarımsal uygulamaları geliştirmek için mikorizal yapıların hassas haritalanmasını sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu yazıda, Victoria Pop-Moldovan tarafından yürütülen "Agronomik Girdilerin Yönlendirdiği Mısır Mikorizal Desenleri" ve Prof. Dr. Roxana Vidican'ın koordinasyonunda Larisa Corcoz tarafından yürütülen "Dağ Otlak Baskın Türlerinde Kolonileşmenin Mikorizal Durumu ve Gelişimi" tematik alanındaki iki doktora çalışmasından elde edilen veriler kullanılmıştır.

1. Biyolojik materyal seçimi, kök örneklemesi ve depolama
<ol><li>Bitkilerin tüm kökünü bir kürekle (Şekil 1A) her varyant için ayrı ayrı toplayın ve çoğaltın. Büyük toprak topaklarını köklerden nazikçe çıkarın, elle çıkarın. Tüm kök sistemini yıkayın ve 1 cm x 1 cm hücreli bir ölçekte ölçün (Şekil 1B). Kökleri her bitki için ayrı ayrı kesin ve plastik bir torbaya koyun.</li>
	<li>Her bitkinin tüm temiz köklerini plastik bir torbada toplayın ve bir varyanttan tüm örnekleri daha büyük bir torbada toplayın. Her torbaya aşama/varyant adını ve örnekleme tarihini yazın. Kökleri bir buzdolabında veya dondurucuda işleme kadar -4 °C ile -20 °C arasındaki bir sıcaklıkta saklayın.</li>
</ol>2. Mikroskopi için kök işleme, temizleme ve boyama
NOT: Protokolün bu adımı için eldiven, maske ve mikrobiyolojik/kimyasal başlık kullanın.
<ol><li>Kök çözme işleminin oda sıcaklığında yavaşça yapıldığından emin olun. Tüm işleme adımları için, gerekli ajanların miktarını azaltmak için küçük kavanozlar (30-50 mL) kullanın.</li>
	<li>Yavaş temizleme ve boyama prosedürünün aşağıdaki dört adımını uygulayın15. Tüm adımları oda sıcaklığında yapın. Bu yöntem, kaynatma için bir su banyosu kullanılmadan aynı anda çok sayıda numunenin işlenmesine izin verir.<ol><li>Kök temizleme: Bir bitkinin tüm köklerini bir kavanoza yerleştirin. Musluk suyuyla% 10'luk bir NaOH çözeltisi hazırlayın ve kökleri tamamen kaplayana kadar her kavanoza dökün. Köklerde temizleme çözeltisinin homojen bir dağılımını sağlamak için kavanozları 1 dakika veya 2 dakika boyunca kuvvetlice çalkalayın. Bu prosedürü 24 saat sonra tekrarlayın ve kökleri temizleme çözeltisinde en az 48 saat bekletin. NOT: Temiz köklerin soluk sarı (beyaza kadar) bir yönü vardır ve tutarlılık yumuşaktır (bir cımbızla bastırılarak kolayca ezilebilirler).</li>
		<li>Kök durulama: Bir seferde bir kavanozun içeriğini bir elek içinden geçirin. Takas çözümünü geri dönüştürün. Temizleme çözeltisi tamamen çıkarılana kadar kökleri musluk suyunda birkaç kez durulayın. NOT: Temizleme çözeltisi tamamen çıkarılmazsa, boyama prosedürünün kalitesini etkileyecektir.</li>
		<li>Kök boyama: Durulanmış kökleri temiz bir kavanoza yerleştirin. Musluk suyuyla% 5:% 5'lik bir mürekkep-sirke çözeltisi hazırlayın (5 mL mavi mürekkep + 5 mL% 9 asetik asit + 90 mL musluk suyu). Çözeltiyi, kökleri tamamen kaplayana kadar her kavanoza dökün. Köklerde boyama çözeltisinin homojen bir şekilde dağılmasını sağlamak için kavanozları 1 dakika veya 2 dakika boyunca kuvvetlice çalkalayın. Bu prosedürü 24 saat sonra tekrarlayın ve kökleri bu çözeltide 48 saat bekletin. NOT: Lekeli kökler yoğun mavi bir renge sahiptir.</li>
		<li>Kök kısmi destaining: Lekeli kökleri musluk suyunda 1-2 dakika durulayın. Ekstra boyama solüsyonunu çıkarmak için kavanozları kuvvetlice çalkalayın. Boyama çok yoğunsa ve net bir mikroskobik değerlendirmeye izin vermiyorsa prosedürü tekrarlayın. NOT: Lekeli kökler, lekelenme kalitesini değiştirmeden oda sıcaklığında 1 haftaya kadar musluk suyunda tutulabilir (Şekil 2). Daha uzun süreler boyunca, kökler% 5'lik bir ticari elma sirkesi çözeltisinde (% 5 asetik asit) 2-3 aya kadar muhafaza edilebilir.</li>
	</ol></li>
</ol>3. Mikroskopi için kök işleme
<ol><li>Kök segmentasyonu: Her numuneden lekelenmiş kökleri ölçekli bir kesme tahtasına yerleştirin (Şekil 3A). Kökleri 1 cm'lik segmentler halinde kesin (Şekil 3B). Her varyasyon için 15 segment seçin.</li>
	<li>Segment hazırlama için nazik kırma yöntemi: Kökleri bir slayta yayın. Kökleri örtmek için bir laminasyon torbası kullanın ve bir kenardan başlayarak yavaşça ezin (Şekil 3C, D). Slayttaki kökleri yavaşça görüntülemek için cımbız, neşter sapı, kalem veya sindirimli bir kalem gibi yumuşak plastik bir alet kullanın. Laminasyon torbasını dikkatlice çıkarın ve numuneyi bir kapak kayması ile örtün (Şekil 3E). NOT: Kökler boru şeklinde bir forma sahiptir, bu nedenle onları iki boyutlu bir düzlemde ayırmak gerekir. Bu eylem, köklerin orta noktada ayrıldığını varsayar ve iç çapın iki parçasının görüntülenmesine yol açar. Laminasyon torbalarının nazik kırma prosedüründe kullanılması, silindir formuna sahip köklerin, biri solda, diğeri sağda olmak üzere iki parça halinde orta noktalarına doğru görüntülenmesini sağlar. Bu şekilde, tüm kök derinlemesine analiz edilir ve kolonizasyon derecesi, hacimsel kolonizasyonu gösteren parametredir (MycoPatt11 üzerindeki orijinal çalışmada açıklanmıştır). Temel olarak, bir silindiri ikiye böleriz ve ondan sonra matematiksel olarak yeniden inşa ederiz.</li>
	<li>Slaytın bir köşesine pipetle su ekleyin ve suyun yavaşça slayta yayılmasına izin verin (Şekil 3F). Ekstra suyu bir kağıt havluyla çıkarın.</li>
</ol>4. Kök örneklerinin mikroskobik analizi
<ol><li>İyi bir çözünürlüklü kamera ile donatılmış bir mikroskop kullanın.</li>
	<li>Bir ekstremiteden başlayarak slaytları analiz edin. Her mikroskobik alanı yakalayın. Kök parçaların gerçek birleşme sonrasına izin verecek bir kodla yakalanan her görüntüyü yeniden adlandırın. Kalın kökler için 10x veya 40x büyütmeyi kullanın ve ince kökler için 40x büyütmeyi kullanın. Bir türden tüm kök kümesi için aynı hedefi ve büyütmeyi kullanın.</li>
</ol>5. Mikroskopi sonrası görüntü montajı
<ol><li>Görüntü montajı için bir çizim tahtası tasarlamak üzere sunum yazılımını kullanın. Genişliği görüntü genişliğinden 2-3 cm daha geniş olarak ayarlayın. Bir segmentten yakalanan tüm görüntüleri yakalama sırasına göre ekleyin ve kök segmentin tüm uzunluğunu yeniden yapılandırın (Şekil 4A).<ol><li>Kısacası, her 1 cm'lik segment için toplam 15 resim toplayın ve segmenti yeniden oluşturmak için sunum yazılımında 1'den 15'e kadar dikey olarak düzenleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Ortadaki görüntüleri hizalayın. Her görüntünün bir öncekini takip ettiğinden emin olmak için dikey hizalamayı kullanın. Tüm resimlerde, tüm kök segmenti kapsayacak şekilde 10 hücre x 150 hücreden oluşan bir ızgara yerleştirin.<ol><li>Ek olarak, her bir resme 10 x 10 ızgara yerleştirin ve bu ızgaranın her hücresine, bir yapısı görünüyorsa bir ila altı arasında bir sayı ekleyin veya yapısı yoksa boş bırakın. Bu şekilde, işlemin doğruluğu, yapılarının konumunda hiçbir hata gözlenmeden maksimumdur.</li>
	</ol></li>
	<li>Genişliği 10 hücreli ve uzunluğu 150 hücreli (10 hücreli 15 kare x 10 hücreli) bir kılavuz için tablo ekleyin. Tablo genişliği boyutlarını görüntülerin genişliğine değiştirin. Tablonun uzunluğunu tüm görüntüleri içerecek şekilde değiştirin (Şekil 4B).</li>
</ol>6. Mikorizal kolonizasyonun puanlanması
<ol><li>Hifa için mikorizal desenler yöntemi11: 1'de açıklandığı gibi her bir yapı tipini puanlamak için benzersiz sayıyı kullanın; Arbusküller için 2; Veziküller için 3; Sporlar için 4; Yardımcı hücreler için 5; ve giriş noktaları için 6 (Şekil 4C). Daha önce uygulanan ızgaraların her hücresinden gözlemlenen her mikorizal yapıyı puanlayın (Şekil 4D).</li>
</ol>7. Ham veri analizi ve sonuç çıkarma
<ol><li>Elde edilen tüm puanları MycoPatt elektronik tablosu11'e ekleyin. Sunumdaki tüm puanları rawdata olarak adlandırılan ilk sayfaya aktarmak için kopyala/yapıştır işlevini kullanın (Şekil 5).</li>
	<li>Sonuçların birincil analizi: Sonuçları üç biçimde ayrı ayrı yüzde (%) olarak görselleştirmek için MycoPatt elektronik tablo aracındaki parametreler adlı üçüncü sayfayı kullanın (Şekil 6A-C). Kolonizasyonun yatay görüntüsünü analiz etmek için A'dan K'ya sütunları kullanın; kolonizasyonun dikey görüntüsünü analiz etmek için M'den W'ye sütunlar; ve 15 10 x 10 karenin (satır 2-17) her biri için enine (ortalama) kolonizasyonu ve son ortalama kolonizasyonu (satır 19-20) analiz etmek için Y'den AI'ya sütunlar. NOT: Enine ortalama kolonizasyon, hem yatay hem de dikey analizle ilgili gerçek kolonizasyon parametrelerinin hesaplanmasında kullanılır. Bu şekilde, yalnızca yatay veya dikey analizin kullanılması ile karşılaştırıldığında hiçbir hata yapılamaz (orijinal çalışma11'de ayrıntılı olarak açıklanmıştır). Ayrıca, bu parametre kümesi mikroskobik alanın tüm yüzeyi için hesaplanır.<ol><li>Sonuçları analiz etmek için her parametreye özgü tanımları ve formülleri kullanın11. Aşağıdaki kolonizasyon parametrelerini kullanın: kolonizasyon sıklığı (%), kolonizasyon yoğunluğu (%), arbusküller (%) ve veziküller (%), sporlar (%) ve yardımcı hücreler (%), giriş noktaları (%), mikorizal olmayan alanların yüzdesi (%), genel kolonizasyon derecesi (%) ve mikorizal/mikorizal olmayan alanların raporu. NOT: Analiz edilen numunelerde arbusküller, veziküller, sporlar, yardımcı hücreler ve giriş noktaları eksikse, MycoPatt elektronik tablosu bunları sıfır (0) olarak puanlayacaktır.</li>
	</ol></li>
	<li>Mikorizal haritaların üretimi ve ekstraksiyonu: Mikorizal yapı kodunun renklere dönüştürülmesinden elde edilen görüntüyü MycoPatt adlı grafiklerin ikinci sayfasında görselleştirin (Şekil 7A). Elde edilen görüntüyü grafik sayfasında görüntü olarak dışa aktarın (Şekil 7B). Mikorizal desenlerin analizi için göstergedeki renk kodunu kullanın.</li>
	<li>Mikorizal harita analizi: Mikorizal haritalarda en önemli yapıları ve bunların montajını tanımlayın. Analiz edilen köklerde gözlenen mikorizal kolonizasyon paternini tanımlayın. Mikorizal kolonizasyon stratejisini kökte gözlenen yapısal gelişime, dallanma paternine ve arbuskül / vezikül gelişimine dayanarak tanımlayın.</li>
</ol>

<ol><li>Trivedi, P., Leach, J. E., Tringe, S. G., Sa, T., Singh, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plant-microbiome+interactions%3A+From+community+assembly+to+plant+health%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Plant-microbiome interactions: From community assembly to plant health.</a> Nature Reviews Microbiology. 18 (11), 607-621 (2020).</li>
<li>Jeffries, P., Barea, J. M. 4 Arbuscular Mycorrhiza: A Key Component of Sustainable Plant-Soil Ecosystems. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJeffries%2C+P+%22The+Mycota.+IX+Fungal+Associations%22">The Mycota. IX Fungal Associations</a>. Hock, B. , SpringerVerlag. Berlin, Germany. 51-75 (2012).</li>
<li>Parniske, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arbuscular+mycorrhiza%3A+the+mother+of+plant+root+endosymbioses%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Arbuscular mycorrhiza: the mother of plant root endosymbioses.</a> Nature Reviews Microbiology. 6 (10), 763-775 (2008).</li>
<li>Gianinazzi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agroecology%3A+The+key+role+of+arbuscular+mycorrhizas+in+ecosystem+services%5BTitle%5D)+AND+%22Mycorrhiza%22%5BJournal%5D)">Agroecology: The key role of arbuscular mycorrhizas in ecosystem services.</a> Mycorrhiza. 20 (8), 519-530 (2010).</li>
<li>Lee, E. -H., Eo, J. -K., Ka, K. -H., Eom, A. -H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diversity+of+arbuscular+mycorrhizal+fungi+and+their+roles+in+ecosystems%5BTitle%5D)+AND+%22Mycobiology%22%5BJournal%5D)">Diversity of arbuscular mycorrhizal fungi and their roles in ecosystems.</a> Mycobiology. 41 (3), 121-125 (2013).</li>
<li>Zhang, Y., Zeng, M., Xiong, B., Yang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecological+significance+of+arbuscular+mycorrhiza+biotechnology+in+modern+agricultural+system%5BTitle%5D)+AND+%22Ying+Yong+Sheng+Tai+Xue+Bao+%3D+The+Journal+of+Applied+Ecology%22%5BJournal%5D)">Ecological significance of arbuscular mycorrhiza biotechnology in modern agricultural system.</a> Ying Yong Sheng Tai Xue Bao = The Journal of Applied Ecology. 14 (4), 613-617 (2003).</li>
<li>Shah, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+endophytic+Bacillus+megaterium+colonization+on+structure+strengthening%2C+microbial+community%2C+chemical+composition+and+stabilization+properties+of+Hybrid+Pennisetum%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Science+of+Food+and+Agriculture%22%5BJournal%5D)">Effect of endophytic Bacillus megaterium colonization on structure strengthening, microbial community, chemical composition and stabilization properties of Hybrid Pennisetum.</a> Journal of the Science of Food and Agriculture. 100 (3), 1164-1173 (2020).</li>
<li>Souza, T. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSouza%2C+T+%22Handbook+of+Arbuscular+Mycorrhizal+Fungi%22">Handbook of Arbuscular Mycorrhizal Fungi</a>. , Springer. New York City, NY. (2015).</li>
<li>Sun, X. -G., Tang, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+four+routinely+used+methods+for+assessing+root+colonization+by+arbuscular+mycorrhizal+fungi%5BTitle%5D)+AND+%22Botany%22%5BJournal%5D)">Comparison of four routinely used methods for assessing root colonization by arbuscular mycorrhizal fungi.</a> Botany. 90 (11), 1073-1083 (2012).</li>
<li>Smith, S., Read, D. Colonization of Roots and Anatomy of Arbuscular Mycorrhiza. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+S+%22Mycorrhizal+Symbiosis%22">Mycorrhizal Symbiosis</a>. Smith, S. E., Read, D. J. , Academic Press. London, UK. 42-90 (2008).</li>
<li>Stoian, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+approach+and+future+perspectives+in+microscopic+patterns+of+mycorrhizal+roots%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Sensitive approach and future perspectives in microscopic patterns of mycorrhizal roots.</a> Scientific Reports. 9 (1), 10233(2019).</li>
<li>Pop-Moldovan, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Divergence+in+corn+mycorrhizal+colonization+patterns+due+to+organic+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Divergence in corn mycorrhizal colonization patterns due to organic treatment.</a> Plants. 10 (12), 2760(2021).</li>
<li>Corcoz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycorrhizal+patterns+in+the+roots+of+dominant+Festuca+rubra+in+a+high-natural-value+grassland%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Mycorrhizal patterns in the roots of dominant Festuca rubra in a high-natural-value grassland.</a> Plants. 11 (1), 112(2021).</li>
<li>Corcoz, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deciphering+the+colonization+strategies+in+roots+of+long-term+fertilized+Festuca+rubra%5BTitle%5D)+AND+%22Agronomy%22%5BJournal%5D)">Deciphering the colonization strategies in roots of long-term fertilized Festuca rubra.</a> Agronomy. 12 (3), 650(2022).</li>
<li>Stoian, V., Florian, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycorrhiza+-+Benefits%2C+influence%2C+diagnostic+method%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+University+of+Agricultural+Sciences+and+Veterinary+Medicine+Cluj-Napoca.+Agriculture%22%5BJournal%5D)">Mycorrhiza - Benefits, influence, diagnostic method.</a> Bulletin of University of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine Cluj-Napoca. Agriculture. 66 (1), 2009(2009).</li>
<li>Prates Júnior, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Agroecological+coffee+management+increases+arbuscular+mycorrhizal+fungi+diversity%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Agroecological coffee management increases arbuscular mycorrhizal fungi diversity.</a> PLoS One. 14 (1), 0209093(2019).</li>
<li>Rillig, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+farmers+should+manage+the+arbuscular+mycorrhizal+symbiosis%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytologist%22%5BJournal%5D)">Why farmers should manage the arbuscular mycorrhizal symbiosis.</a> New Phytologist. 222 (3), 1171-1175 (2019).</li>
<li>Rillig, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+an+integrated+mycorrhizal+technology%3A+Harnessing+mycorrhiza+for+sustainable+intensification+in+agriculture%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Towards an integrated mycorrhizal technology: Harnessing mycorrhiza for sustainable intensification in agriculture.</a> Frontiers in Plant Science. 7, 1625(2016).</li>
<li>Bhale, U. N., Bansode, S. A., Singh, S. Multifactorial Role of Arbuscular Mycorrhizae in Agroecosystem. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBhale%2C+UN+%22Fungi+and+their+Role+in+Sustainable+Development%3A+Current+Perspectives%22">Fungi and their Role in Sustainable Development: Current Perspectives</a>. Gehlot, P., Singh, J. , Springer. New York City, NY. 205-220 (2018).</li>
<li>Khaliq, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+control+of+dry+root+rot+of+chickpea+caused+by+Rhizoctonia+bataticola+under+the+natural+field+condition%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Reports%22%5BJournal%5D)">Integrated control of dry root rot of chickpea caused by Rhizoctonia bataticola under the natural field condition.</a> Biotechnology Reports. 25, 00423(2020).</li>
<li>Vaida, I., Păcurar, F., Rotar, I., Tomoș, L., Stoian, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+diversity+due+to+long-term+management+in+a+high+natural+value+grassland%5BTitle%5D)+AND+%22Plants%22%5BJournal%5D)">Changes in diversity due to long-term management in a high natural value grassland.</a> Plants. 10 (4), 739(2021).</li>
<li>Taxonomy of Arbuscular Fungi. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.zor.zut.edu.pl/Glomeromycota/Taxonomy.html">http://www.zor.zut.edu.pl/Glomeromycota/Taxonomy.html</a> (2022).</li>
<li>The International Collection of (Vesicular) Arbuscular Mycorrhizal Fungi. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://invam.wvu.edu/collection">https://invam.wvu.edu/collection</a> (2022).</li>
<li>The International Bank for the Glomeromycota. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.i-beg.eu/">https://www.i-beg.eu/</a> (2022).</li>
</ol>

Yazarlar çıkar çatışması olmadığını beyan ederler.

Mikorizal kolonizasyon üzerine yapılan çalışmalar, agronomik alanda yeni strateji geliştirme için hayati öneme sahiptir. Birden fazla ekili bitkinin arbusküler mikorizalarla simbiyotik bir ilişki kurma potansiyeli, onları agroekosistemin sürdürülebilir gelişiminin ve sağlığının korunmasının önemli bir bileşeni haline getirmiştir 16,17,18,19,20. Bu nedenle, bir...

Arbusküler mikoriza () mantarları, araştırmacılar için sürekli ilgi alanı olan toprak kaynaklı endofitlerin bir kategorisidir. Çoğu bitkinin köklerindeki varlıkları ve besin döngülerine katılımları, onları otsu bitkilerin bulunduğu her ekosistemin stabilitesinde hayati bileşenler haline getirir 1,2. Ekstra-radiküler miselyumları sayesinde, özellikle ulaşılması zor bölgelerde, bitki kökleri için mantar uzantısı görevi görür3. Ana aktivite,'nin büyük hifa ağları ve arbuskül adı verilen spesifik hücre içi yapılar geliştirdiği konakçı bitki köklerindedir. Konakçı özgüllüğünün olmaması, simbiyontun aynı anda birden fazla türü kolonileştirmesine izin verir. Bu yetenek,'ye ekosistemde kaynak tahsisi ve besin düzenlemesinin rolünü sağlar; mantar ayrıca bitki hayatta kalmasında destek sağlar ve bitki performansına yardımcı olur 4,5,6,7. türlerinin konakçı köklere reaksiyonu, intraradiküler miselyumun uzaması ve konumunda ve hücre içinde gelişen arbusküllerin varlığında ve şeklinde görülebilir. Hücre içi arbusküller, iki simbiyont arasında bir değişim noktası görevi görür ve hızlı transfer süreçleri ile karakterize edilen alanları temsil eder. 'nin ürettiği yapılar türe bağımlıdır ve arbusküllere ek olarak, köklerde veziküller, sporlar ve yardımcı hücreler de gelişir.
Bitki köklerinde simbiyontlarının değerlendirilmesinde birçok zorluk vardır 8,9. Birincisi, konakçıların tüm bitki örtüsü döneminde sürekli gelişimleridir ve bu da hifal arbusküler yapısında çoklu değişikliklere yol açar. Arbusküler büyümenin farklı aşamaları, çöküşlerine kadar, köklerde açıkça bulunur, ancak yaşlanan yapıları bazen sindirilir, bu da onları sadece kısmen görünür kılar10. İkinci zorluk, boyama yöntemi ve protokolü, kök sistemlerinin büyük çeşitliliği, hücrelerinin boyutu ve birleşik bir yöntem önermeyi zorlaştıran kalınlık farklılıkları ile temsil edilir. Son zorluk, kolonizasyonunun değerlendirilmesi ve puanlanması ile temsil edilir. 'yi farklı derecelerde nesnellikle puanlayan çok sayıda yöntem vardır ve bunların çoğu hala mikroskopi teknikleriyle sınırlıdır. Basit olanlar kök korteksteki yapıların varlığına / yokluğuna dayanırken, daha karmaşık olanlar görsel skorlamaya ve kolonizasyon sınıflarının kullanımına, kolonizasyon fenomeninin sıklığının ve yoğunluğunun entegrasyonuna dayanmaktadır. Son on yıllarda birden fazla türün mikorizal durumu hakkında birçok veri üretilmiştir, ancak yöntemlerin çoğu, kök korteksteki her bir yapının gerçek konumuna işaret etmeden kolonizasyonun gözlemlenen değeri ile sınırlıdır. kolonizasyonunda daha doğru sonuçların gerekliliğine yanıt olarak, ayrıntılı mikorizal haritaları dijital bir biçimde birleştirmek için köklerdeki mikorizal paternlerin (MycoPatt) mikroskobik analizine dayanan bir yöntem geliştirilmiştir11. Ayrıca, yöntem kolonizasyon parametrelerinin objektif olarak hesaplanmasına ve kökteki her yapının gerçek konumunun belirlenmesine izin verir.
mantar yapılarının konumu aşağıdaki iki soruyu cevaplamada önemli olabilir. Birincisi, bir bitkinin bitki örtüsü döngüsünden belirli bir anda kolonizasyonun analizi ile ilgilidir. Bu bağlamda arbusküler/vezikül bolluğunu gözlemlemek, kökte nasıl yerleştiklerini raporlamak, çok net bir kolonizasyon görüntüsü ve parametreleri sağlamak çok yararlıdır. İkincisi, mantar stratejisinin tespiti ve yönelimi ve hatta gelecekteki gelişiminin tahmini ile ilgilidir. MycoPatt'ın bir uygulaması, günlük, her 2-3 günde bir, haftada bir veya çeşitli büyüme aşamalarında analiz edilen bitkiler için olabilir. Bu bağlamda, veziküllerin / arbusküllerin yeri, kolonizasyonunun biyolojik mekanizmasını daha iyi anlamak için önemlidir. Bu parametreler ve gözlemler matematiksel parametreleri tamamlamak için çok yararlıdır.
Bu makalenin amacı, MycoPatt sisteminin farklı gelişim aşamalarında Zea mays (mısır) köklerinde ve farklı uzun süreli döllenme koşulları altında Festuca rubra (kırmızı fescue) köklerinde doğal mantar kolonizasyon potansiyelini ve stratejisini keşfetme yeteneğini göstermektir. Amacı gerçekleştirmek için, iki deneyden iki büyük veritabanı analiz edildi. Mısır deneyi Cojocna'da (46°44′56" enlem N ve 23°50′0" uzunluğunda) kurulmuştur. E), Cluj Tarım Bilimleri ve Veterinerlik Üniversitesi Deneysel Didaktik Çiftliğinde, tınlı dokulu bir toprağa sahip bir phaeoziom üzerinde12. Kırmızı fescue deneyi, 2001 yılında Ghețari, Apuseni Dağları'nda (46 ° 49'064 " enlem N ve 22 ° 81'418 '' uzunluğunda) kurulan daha büyük bir deney alanının bir parçasıdır. E), prelüvosol (terra rossa) toprak tipi13,14. Mısır beş farklı büyüme fenofazında toplandı12: B1 = 2-4 yaprak (mikorizal kolonizasyonun başlangıcı için bir kontrol noktası olarak); B2 = 6 yaprak; B3 = 8-10 yaprak; B4 = koçan oluşumu; B5 = fizyolojik olgunluk. 2-4 yaprak aşamasından (A0) başlayarak, organik bir tedavi uygulandı ve bu da iki mezuniyet faktörü ile sonuçlandı (A1 = kontrol ve A2 = tedavi edildi). Kırmızı fescue'nin kökleri çiçeklenme sırasında beş uzun süreli döllenme ile yapılan bir deneyden toplandı13,14: V1 = kontrol, döllenmemiş; V2 = 10 t·ha-1 gübre; V3 = 10 t·ha-1 gübre + N 50 kg·ha-1, P 2 O5 25 kg·ha-1, K2O 25 kg·ha-1; V4 = N 100 kg·ha-1, P 2 O5 50 kg·ha-1, K2O 50 kg·ha-1; V5 = 10 t·ha-1 gübre + N 100 kg·ha-1, P 2 O5 50 kg·ha-1, K2O 50 kg·ha-1. Her gelişme aşamasında, her gübreleme varyantından beş bitki toplandı. Boyama protokolleri ve numune işleme süresi ve boyama kalitesi açısından performansları analiz edildi. hifye gelişimi ile yapılarının köklerdeki varlığı arasındaki ilişki, her tür için ayrı ayrı analiz edilmiş ve kolonizasyon için en izin verilen köklerin belirlenmesiyle devam etmiştir. Her kök sisteminin spesifik kolonizasyon kalıpları, kolonizasyon haritalarına ve parametrelerinin değerine göre analiz edildi.
Mısır, köklerin sürekli büyümesini ima eden yıllık bir bitkidir ve bu, MycoPatt'ı büyüme aşamalarında uygulamanın ana nedeniydi. Kırmızı fescue, farklı gübrelerle uzun süre tedavi edilmiş bir otlaktan çok yıllık bir bitkidir. Kökleri 1 yıl daha kısa bir gelişime sahiptir ve antez, bitki metabolizmasını vejetatiften üretkene değiştirdiğinde bitki örtüsü noktası olarak kabul edilir. Bu yoğun aktivite dönemlerinde bu bitkileri yakalamak için yukarıda belirtilen zaman noktaları seçilmiştir. Bitki örtüsü döneminde örnekleme, doğal otlaklarda yetiştirildiğinde bu tür için zordur.

<table><tbody><tr><td>Elma sirkesi 5%</td><td>FABRICA DE CONSERVE RAURENI SRL</td><td>O?ET DE MERE</td><td></td></tr> https://www.raureni.ro/ro-ro/produs/otet-de-mere <tr><td>Mavi Mürekkep</td><td>Pelikan</td><td>4001</td><td>https://www.pelikan.com/pulse/Pulsar/ro_RO.Store.displayStore.224848./cerneal%C4%83-4001-de-la-pelikan</td></tr><tr><td>Kapak fişleri</td><td>Menzel-Glaser</td><td>D 263 M</td><td>https://si.vwr.com/store/product/20545757/cover-glasses-menzel-glaser</td></tr><tr><td>Forseps, PMP</td><td>Vitalab</td><td>9.171 411</td><td>http://shop.llg.de/info881_Forceps_PMP_lang_UK. htm nedir? UID=55005bf838d8000000000000 & Amp; OFS=33</td></tr><tr><td>Cam kavanoz 47 mL</td><td>İndigo Kartlar</td><td>BORCAN 47 ML ALTIGEN</td><td>https://indigo.com.ro/borcan-47-ml-hexagonal</td></tr><tr><td>Laminasyon Torbaları</td><td>Şeftali</td><td>PP525-08</td><td>Kartvizit (60x90mm) / https://supremoffice.ro/folie-laminare-60x90mm-125mic-carte-vizita-100-top-peach-pp525-08-510328</td></tr><tr><td>Mikro Akış Sınıf II ABS Kabini</td><td>Bioquell UK Ltd</td><td>Mikro Akış Sınıf II ABS Dolabı</td><td>http://www.laboratoryanalysis.co.uk/graphics/products/034_11%20CLASS%202BSC%20(STD).pdf</td></tr><tr><td>Mikroskop slaytları</td><td>Deltalab</td><td>D100001</td><td>https://distrimed.ro/lame-microscop-matuite-la-un-capat-26x76-mm-deltalab/?utm_source=Google%20Shopping&utm_campaign= google%20shopping%20distrimed& utm_medium=TBM& utm_term=1647& gclid=CjwKCAjwu YWSBhByEiwAKd_n_odzr8CaCXQ hl9VQkAB3p-ODo2Ssuou9cnoRtz1Gb xsjqPY7F05HmhoCj6oQAvD_BwE</td></tr><tr><td>Microsoft Office 365</td><td>Microsoft</td><td>Office 365</td><td>Excel ve Powerpoint; elektronik tablo ve sunum</td></tr><tr><td>NaOH</td><td>Oltchim</td><td>01-2119457892-27-0065</td><td>http://www.sodacaustica.com.ro/pdf/fisa-tehnica-soda-caustica.pdf</td></tr><tr><td>Nitril eldiven</td><td>SemperGuard</td><td>816780637</td><td>https://www.sigmaaldrich.com/RO/en/product/aldrich/816780637?gclid=CjwKCAjwuYWSBhByEiwAKd _n_rmo4RRt8zBql7ul8ox AAYhwhxuXHWZcw4hlR x0Iro_4IyVt69aFHRoCmd wQAvD_BwE</td></tr><tr><td>Optika kamera</td><td>OPTIKA</td><td>CP-8; P8 Pro Kamera, 8.3 MP CMOS, USB 3.0</td><td>https://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/c-p-series/</td></tr> <tr><td>Optika Mikroskop</td><td>OPTIKA</td><td>B383pL</td><td>https://www.optikamicroscopes.com/optikamicroscopes/product/b-380-series/</td></tr> <tr><td>Koruyucu maske FFP3</td><td>Hermes Hediye</td><td>HERMES000100</td><td>EN 149-2001+A1:2009 / https://www.emag.ro/set-10-masti-de-protectie-respiratorie-hermes-gift-ffp3-5-straturi-albe-hermes000100/pd/DTZ8CXMBM/#specification-section</td></tr><tr><td>Neşter</td><td>Kesme</td><td>9409814</td><td>https://shop.thgeyer-lab.com/erp/catalog/search/search.action;jsessionid=C258CA 663588CD1CBE65BF 100F85241B?model.query=9409809</td></tr><tr><td>Beyaz şarap sirkesi %9</td> <td>FABRICA DE CONSERVE RAURENI SRL</td><td>O?ET DE VIN ALB</td><td></td></tr></tbody></table> https://www.raureni.ro/ro-ro/produs/otet-de-vin-alb

festuca rubra ve zea mays'ın köklerinde kolonizasyon kalıplarını ve mantar stratejilerini keşfetmek İçin bir araç olarak mikorizal haritalar

Mycorrhizal Maps as a Tool to Explore Colonization Patterns and Fungal Strategies in the Roots of Festuca rubra and Zea mays

Arbusküler mikorizal mantarlar bitki köklerindeki simbiyontlardır. Rolleri, konakçı gelişimini sürdürmek ve ekosistemlerdeki beslenme dengesini korumaktır. Kolonizasyon süreci toprak ekolojisi, mantarların ve konakçıların genetik çeşitliliği ve agronomik uygulamalar gibi çeşitli faktörlere bağlıdır. Senkronize etkileri, karmaşık bir hifal ağının gelişmesine yol açar ve kök hücrelerde veziküllerin ve arbusküllerin ikincil gelişimine yol açar. Bu araştırmanın amacı, mantar yapılarının Festuca rubra ve Zea mays köklerinde konumlandırılmasında mikorizal paternler (MycoPatt) yönteminin etkinliğini analiz etmektir. Diğer bir amaç, her türün mikorizal haritalarının ortaya koyduğu mantar kolonizasyon stratejisini araştırmaktı. Birden fazla mikroskobik görüntünün elde edilmesi ve bir araya getirilmesi, hem mısır hem de kırmızı fescue bitkilerinde mikorizal kolonizasyon değerlendirmesinin, gelişmiş yapıların gerçekçi konumu hakkında bilgi sağlamasına izin verir. Gözlemlenen mikorizal desenler, uygulanan tedavilerin ve büyüme aşamasının neden olduğu toprak simbiyotik mantarları ile bağlantılar geliştirmek açısından her bitkinin değişken verimliliğini vurgulamaktadır. MycoPatt yöntemi ile elde edilen mikorizal detaylı haritalar, topraktan simbiyotik edinimde bitki etkinliğinin erken tespiti için yararlıdır.

Boyama işlemlerinden sonra köklerin nazik kırma yönteminin doğru kullanımı, hem Zea mays (Şekil 8A-C) hem de Festuca rubra (Şekil 9A-E) için mikorizal yapıların iyi ayrıntılarını, mikorizal yapılar ve kök hücreleri arasında iyi bir kontrast ve mavi renk nedeniyle stelin doğrulanmasını sağlar. Temizleme ve boyama prosedürleri başarılı olamazsa, kök örneklerinin ezilmesi zordur v...

Buradaki protokol, arbusküler mikorizal kolonizasyon paternlerinin değerlendirilmesi için yöntemleri ve iki türün köklerindeki stratejiyi açıklamaktadır: Zea mays ve Festuca rubra. MycoPatt yönteminin kullanılması, parametrelerin hesaplanmasına, mikorizal yapıların dijital verilere dönüştürülmesine ve köklerdeki gerçek konumlarının haritalandırılmasına izin verir.

Festuca rubra ve Zea mays'ın Köklerinde Kolonizasyon Kalıplarını ve Mantar Stratejilerini Keşfetmek İçin Bir Araç Olarak Mikorizal Haritalar

Arbuscular mycorrhizal fungi are symbionts in the roots of plants. Their role is to sustain host development and maintain the nutritional equilibrium in ...

MycoPatt yöntemi, köklerde arbusküler mikorizal kolonizasyonun derinlemesine araştırılmasına izin verir. Mikorizal haritalar mantar genişlemesine işaret eder ve her yapının gerçek konumunu belirli bir desen olarak sunar. Mikorizal kolonizasyon objektif olarak %1 çözünürlükte analiz edilir.Her kök segment otomatik olarak dijital matrise dönüştürülür ve kolonizasyon parametrelerinin kapsamlı bir veritabanını oluşturur. Başlamak için, kökleri buzdolabından çıkarın ve oda sıcaklığında çözülmesi için bir çalışma platformuna yerleştirin. Kök temizliği yapmak için, bir bitkideki tüm kökleri 30 ila 50 mililitrelik bir kavanoza yerleştirin, ardından musluk suyuyla% 10'luk bir sodyum hidroksit çözeltisi hazırlayın ve kökleri tamamen kaplayana kadar kavanoza dökün.Temizleme çözeltisinin köklerde homojen bir şekilde dağılması için kavanozu bir ila iki dakika boyunca kuvvetlice çalkalayın. Köklerin temizleme çözeltisinde 48 saat kalmasına izin verin. Kök durulama için, kavanozun içeriğini bir elek içinden geçirin.Temizleme çözeltisi tamamen çıkarılana kadar kökleri musluk suyunda birkaç kez durulayın. Daha sonra durulanmış kökleri lekeleme için temiz bir kavanoza yerleştirin. Daha sonra musluk suyuyla yüzde beş ila beş mürekkep sirkesi çözeltisi hazırlayın.Kökleri örtene kadar kavanoza dökün ve bir ila iki dakika çalkalayın. Kısmi destaining için 48 saat sonra, lekeli kökleri musluk suyunda bir ila iki dakika durulayın. Ekstra lekelenme solüsyonunu çıkarmak için kavanozu kuvvetlice sallayın.Mikroskobik değerlendirme için kökler temizlenene kadar prosedürü tekrarlayın. Kök segmentasyonu için, lekeli kökleri ölçekli bir kesme tahtasına yerleştirin. Kökleri bir santimetre segmente ayırın.Her varyasyon için 15 segment seçin. Daha sonra, kökleri segment hazırlığı için bir slayta yayın, kökleri örtmek için bir laminasyon torbası kullanın ve bir kenardan başlayarak yavaşça ezin. Slayttaki kökleri görüntülemek için yumuşak plastik bir alet kullanın.Laminasyon torbasını dikkatlice çıkarın ve numuneyi bir kapak kayması ile örtün. Slaytın bir köşesine pipetle su ekleyin ve suyun yavaşça kaydırağa yayılmasına izin verin. Ekstra suyu bir kağıt havluyla çıkarın.Mikroskobik analiz için, iyi bir çözünürlüklü kamera ile donatılmış bir mikroskop kullanın. Bir ekstremiteden başlayarak slaytları analiz edin. Her mikroskobik alanı yakalayın.Kalın kökler için 10 veya 40x büyütme ve ince kökler için 40x büyütme kullanın. Yakaladıktan sonra, her görüntüyü kök parçaların gerçek montajına izin verecek bir kodla yeniden adlandırın. Görüntü montajı için bir çizim tahtası tasarlamak üzere sunum yazılımını kullanın, genişliği görüntü genişliğinden iki ila üç santimetre daha geniş ayarlayın.15 fotoğraf çektikten sonra, bir segmentten yakalanan tüm görüntüleri, bir ila 15 ile başlayarak yakalama sırasına göre ekleyin ve kök segmentin tüm uzunluğunu yeniden oluşturun. Ardından, merkezdeki görüntüleri hizalamak için dikey hizalamayı kullanın ve her görüntünün bir öncekini takip ettiğinden emin olun. Tüm kök segmenti kapsayacak şekilde tüm resimlere 10 x 150 hücreden oluşan bir ızgara yerleştirin.Ek olarak, her resme ve bu ızgaranın her hücresine 10 x 10 ızgara yerleştirin, arbusküler mikorizal veya yapısı görünüyorsa bir ila altı arasında bir sayı ekleyin veya yapısı yoksa boş bırakın. Genişliği 10 hücreden ve uzunluğu 150 hücreden oluşan bir kılavuz için tablo ekleyin. Boyutları olan tabloyu görüntülerin genişliğine değiştirin, ardından tablonun uzunluğunu tüm görüntüleri içerecek şekilde değiştirin.Mikorizal kolonizasyonu puanlamak için, mikorizal desen yönteminde açıklandığı gibi her bir yapı tipini puanlamak için benzersiz sayıyı kullanın. Hifalar için bir, arbusküller için iki, veziküller için üç, sporlar için dört, yardımcı hücreler için beş ve giriş noktaları için altı kullanın. Daha önce uygulanan ızgaraların her hücresinden gözlemlenen her mikorizal yapıyı puanlayın.Puanlamadan sonra, elde edilen tüm puanları MycoPatt elektronik tablosuna ekleyin. Sunumdaki tüm puanları Ham Veri adlı ilk sayfaya aktarmak için kopyala yapıştır işlevini kullanın. Birincil analiz için, sonuçları üç biçimde ayrı ayrı yüzdeler olarak görselleştirmek için Parametreler adlı üçüncü sayfayı kullanın.Kolonizasyonun yatay görüntüsünü analiz etmek için A'dan K'ya sütunları, kolonizasyonun dikey görüntüsü için M'den W'ye sütunları ve 15 10 x 10 karenin her biri için enine kolonizasyonu ve son ortalama kolonizasyonu analiz etmek için Y'den AI'ya sütunları kullanın. Ardından, her parametreye özgü tanımları ve formülleri uygulayın. Mikorizal haritaların üretimi ve çıkarılması için, mikorizal yapı kodunun renklere dönüştürülmesinden elde edilen görüntüyü Grafikler adlı ikinci sayfada görselleştirin.Ardından, elde edilen görüntüyü grafik sayfasında görüntü olarak dışa aktarın ve mikorizal desenleri analiz etmek için göstergedeki renk kodunu kullanın. Mikorizal harita analizi için, en önemli yapıları ve bunların montajını tanımlayın. Daha sonra analiz edilen köklerde gözlenen mikorizal kolonizasyon paternini tanımlayın, ardından kökte gözlenen yapısal gelişime, dallanma paternine ve arbusküler vezikül gelişimine dayanan bir kolonizasyon stratejisi izleyin.Bu protokol, Zea mays ve Festal rubra için mikorizal yapılar ve kök hücreler arasında iyi kontrast ile mikorizal yapıların ayrıntılarını sağlar. Başarısız temizleme ve boyama prosedürleri, Festal rubra ve Zea mays'taki mikorizal yapıların belirsiz mikroskobik görüntülerine neden oldu. Mikorizal kolonizasyon paternleri, kolonizasyon mekanizmasının tam bir şekilde araştırılmasına izin verdi, bu yöntem, kolonizasyon parametrelerinin ek bir görsel ifadesi ile Zea mays ve Festuca rubra için kolonizasyon modellerinin ve stratejilerinin derin, küçük ölçekli bir araştırmasını sağlar.Zea Mays'te bitkinin gelişim aşamasına bağlı olarak oldukça dalgalanan kolonizasyon potansiyeli gözlenmiştir, ancak Festuca rubra'da kolonizasyon süreçleri köklerin içinde meydana gelir ve hifal ağlarının gelişimi köklerin düşük gelişim hızı ile ilişkilendirilmiştir. MycoPatt, herhangi bir bitkideki arbusküler mikorizal kolonizasyonun haritalandırılması için uygundur. Kolonizasyon mekanizmasını tam olarak araştırmak ve kökler boyunca mantar stratejisini değerlendirmek de yararlıdır.

mycorrhizal-maps-as-tool-to-explore-colonization-patterns-fungal

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Kazı alanından bitki köklerinin yanı sıra endosphere, rizosferde ve toprak içine örnekleri işleme DNA ekstraksiyon ve veri analiz yöntemleri de dahil olmak üzere ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Bu kağıt bu teknikleri toprak, endosphere ve rizosferde microbiomes çalışma için kullanmak diğer laboratuvarlar sağlamak için tasarlanmıştır.

Yalıtım ve mikrobiyal topluluklarda toprak, rizosferde ve kökleri çok yıllık çim deneylerde Analizi

Toplumları büyük olasılıkla içinde birçok bitki arbuscular mikorizal (AM) mantarlar tarafından birbirine bağlanır, ancak onlar tarafından bitki etkileşimlerin arabuluculuk öncelikle mycorrhizas olmadan karşı ile bitkiler büyüyen tarafından araştırıldı. Biz onların sonuçları bitki etkileşimleri için araştırmaya mikorizal bitkiler arasında ortak mikorizal ağları yönetmek için bir yöntem mevcut.

Bitki etkileşimleri döndürülmüş çekirdeği kullanan ortak mikorizal ağlar üzerinden incelenmesi

Bu protokol, mikoheterotrofik bitki örneklerinin toplanması, sabitlenmesi ve sürdürülmesi için ayrıntılı prosedürler sağlamayı, mikorizal mantarlarla çimlenmiş bitki dokularında ve tohumlarda mantar kolonizasyonunu incelemek için tarama ve iletim elektron mikroskobu, ışık, konfokal ve floresan mikroskobu gibi farklı mikroskopi tekniklerini uygulamayı amaçlamaktadır.

Mikoheterotrofik Bitki Dokularında Mantar Kolonizasyonunu Yorumlamak ve Tohumların Simbiyotik Çimlenmesi için Mikroskopi Teknikleri

Toprağın opaklığı nedeniyle, kurucu mikroplar arasındaki etkileşimler hücresel çözünürlükle kolayca görselleştirilemez. Burada, mantar-mikrobiyal etkileşimleri araştırmak için yeni fırsatlar sunan iki mikroakışkan araç sunulmaktadır. Cihazlar çok yönlü ve kullanımı kolaydır, bu da hücresel düzeyde yüksek mekansal zamansal kontrol ve yüksek çözünürlüklü görüntüleme sağlar.

Hücresel Düzeyde Mantar-Mikrobiyal Etkileşimleri Probalamak için Mikroakışkan Araçlar

Bu makale, bitki ilişkili endofitik mantarların izolasyonu, izolatların uzun süreli korunması, morfolojik karakterizasyon ve sonraki moleküler tanımlama ve metagenomik analizler için toplam DNA ekstraksiyonu için ayrıntılı ve yeterli protokoller sağlamayı amaçlamaktadır.

Mikoheterotrofik Bitkilerde Endofitik Mantarları Tanımlamak için İzolasyon, Karakterizasyon ve Toplam DNA Ekstraksiyonu

Bu makale, mantar bitki patojenleri ile mısır etkileşimlerinin tekrarlanabilir sitolojik, fizyolojik ve moleküler çalışmaları için ayrılmış mısır yaprağı kılıflarını kullanan optimize edilmiş bir aşılama protokolünü detaylandırmaktadır. Yaprak kılıfları, sabitlenmemiş dokularda canlı bitki ve mantar arasındaki hücresel etkileşimlerin gerçek zamanlı gözlemini kolaylaştırır.

Mantar yaprakları mısır patojenlerinin neden olduğu enfeksiyonun canlı hücre görüntülemesi için müstakil mısır kılıfları

Burada, süper emici polimer bazlı ototrofik sistemlerde arbusküler mikorizal mantarları aşılamak ve gözlemlemek için basit ve ucuz bir tekniği açıklıyoruz.

Süper Emici Polimer Bazlı Ototrofik Sistemlerde Arbusküler Mikorizal Kültürlerin Aşılanması ve Gözlemlenmesi

Bu makale, pirinçte ile geliştirilmiş tuz stresi toleransını araştırmak için arbusküler mikorizal () mantar aşısı oluşturmak için bir protokolü açıklamaktadır.

Arbusküler Mikorizal () Fungal İnokulum Üretimi ve Tuzlu Koşullarda Pirinç ve Simbiyozunun Fenotipik Değerlendirilmesi

Burada, P. blakesleeanus çiftleşmesinin indüksiyonu için temel bir protokol sunuyoruz.

Mucoromycete Phycomyces blakesleeanus ile Cinsel Haçlar

CLEM tekniği enjekte edilen moleküller tarafından etkilenen membranlar, organeller ve hücre içi yapıların ultrastrüktürel morfolojisini analiz etmek için adapte edilmiştir. Bu yöntem çok nanometre çözünürlükte milimetre izin mikromanipülasyon / mikroenjeksiyon güçlü teknikleri, konfokal floresan mikroskopi ve elektron mikroskopi birleştirir. Bu teknik, uygulamaların geniş bir çeşitliliği için müsait.

Bir Aracı Olarak Korelatif Işık ve Elektron Mikroskobu (CLEM) microinjected Moleküller ve Ökaryotik Alt hücresel Hedefler Visualize&#39;a

Keşfedin MycoPatt yöntemiyle Festuca rubra ve Zea mays köklerindeki arbusküler mikorizal kolonizasyon kalıplarını. Bu yöntem, bitki-fungal etkileşimlerini anlamak ve tarımsal uygulamaları geliştirmek için mikorizal yapıların hassas haritalanmasını sağlar.

Festuca rubra ve Zea maysın Köklerinde Kolonizasyon Kalıplarını ve Mantar Stratejilerini Keşfetmek İçin Bir Araç Olarak Mikorizal Haritalar (Video) | JoVE Journal

Festuca rubra ve Zea mays'ın Köklerinde Kolonizasyon Kalıplarını ve Mantar Stratejilerini Keşfetmek İçin Bir Araç Olarak Mikorizal Haritalar

Daha fazla video keşfet