Name: İnvaziv Drosophila suzukii için Umut Verici Bir Biyolojik Kontrol Ajanı olan Parazitoid Ganaspis brasiliensisi Yetiştirme Yöntemleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-02T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 56 s
Description: Öğrenin, Ganaspis brasiliensis parazitoidinin Drosophila suzukii'ye karşı küçük ve büyük ölçekli yetiştirme protokollerini. Bu yöntemler, biyolojik kontrol ajanının üretimini optimize eder.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Lukas Seehausen ve Marc Kenis'e (CABI, İsviçre) G1 G. brasiliensis'i nazik bir şekilde sağladıkları için teşekkür eder. İtalya'daki fonlar, Provincia Autonoma di Trento, Trento, İtalya ve ABD'de Ulusal Gıda ve Tarım Enstitüsü, USDA Özel Mahsuller Araştırma Girişimi ödülü (#2020-5118-32140), USDA Hayvan ve Bitki Sağlığı Denetim Hizmeti (Farm Bill, fon 14-8130-0463) ve USDA ARS CRIS temel fonları (proje 8010-22000-033-00D) tarafından sağlanmıştır. USDA, eşit fırsat sağlayıcısı ve işverendir ve bu yayında belirtilen ürünleri onaylamaz.

1. G3 Ganaspis brasiliensis'in küçük ölçekli laboratuvar yetiştiriciliği için yöntemler
<ol><li>Ev sahibi diyetini hazırlayın.<ol>
<li>1.500 mL'lik bir cam kaba 600 mL damıtılmış su ekleyin ve suyu sıcak bir tabakta ısıtın.</li>
		<li>Ticari olarak temin edilebilen 88.6 g kuru diyet ekleyin (agar, bira mayası, mısır unu, metil paraben ve sakarozdan yapılmış) veya Dalton ve ark.28 tarafından yayınlanan formülü kullanarak diyet hazırlayın (bkz. adım 2.1.2).</li>
		<li>Kuru diyete 300 mL damıtılmış su ekleyin ve diyet karışımını iyice karıştırın.</li>
		<li>Karışımı kaynar suya ekleyin.</li>
		<li>Sıcak plakadaki sıvı diyetin 10 dakika kaynamasına izin verirken, yanmasını önlemek için karışımı periyodik olarak karıştırın.</li>
		<li>Diyetin oda sıcaklığında 30 dakika soğumasına izin verirken, ısı salınımını eşit olarak dağıtmak ve diyetin yüzeyde katılaşmasını önlemek için ara sıra karıştırın.</li>
		<li>Bir kapta 6,7 mL% 95 EtOH ve başka bir kapta 3,5 mL 1 M propiyonik asit çözeltisi ölçün.</li>
		<li>Diyet soğuduktan sonra, EtOH'yi ve ardından propiyonik asit çözeltisini ekleyin, her eklemeden sonra iyice karıştırın.</li>
		<li>Yaban mersini (yerel pazardan satın alınan) soğuk suda, daha sonra sodyum hipoklorit ağartıcı çözeltisinde (% 5'e kadar seyreltilmiş) ve tekrar soğuk suda durulayarak hazırlayın.</li>
		<li>Meyveyi bir kağıt havluyla kurutun ve her meyvenin derisi kırılana ve meyvenin meyve suları ve eti açığa çıkana kadar elle ezin.</li>
		<li>Her 250 mL şişeye 25-30 g yaban mersini püresi ekleyin. Şişenin iç tabanının eşit bir yaban mersini püresi tabakasıyla kaplandığından emin olmak için şişenin kenarlarına dokunun.</li>
		<li>Hazırlanan diyeti her şişeye dökün, böylece sadece yaban mersini püresinin üstünü kaplar.</li>
		<li>Şişelerin boyunlarına köpük tıpalar ekleyin ve diyetin oda sıcaklığında katılaşmasına izin verin (Şekil 1).</li>
		<li>Diyet katılaştıktan sonra, hemen kullanın veya 3 haftaya kadar 5 ° C'de saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Arka ev sahibi Drosophila suzukii.
	<ol>
<li>Saklanan diyeti buzdolabından çıkarın ve ortam oda sıcaklığına dengelenmesine izin verin veya taze yapılmış diyet kullanın.</li>
		<li>Bir parça emici kağıt havluyu kesin (örneğin, 5 cm x 20 cm) ve ortasına doğru döndürün. Kağıt havlunun bükülmüş orta kısmını şişeye yerleştirin (Şekil 1).</li>
		<li>Nemi korumak için kağıt havluyu ve diyetin yüzeyini damıtılmış suyla ıslatın.</li>
		<li>Cinsel olarak olgun yetişkin sinekleri, mevcut koloni sinek şişelerinden, eski şişedeki durdurucuyu dikkatlice çıkararak ve şişeyi hızlı bir şekilde ters çevirerek ve eski şişenin açıklığını yeni şişeyle hizalayarak yeni bir diyet şişesine aktarın.</li>
		<li>Sineklerin yeni şişeye düşmesini sağlamak için eski şişenin yan tarafına hafifçe dokunun. Yeni şişede ~ 25-30 çiftleşme çifti D. suzukii olduğundan emin olun. Yeni şişede yeterince sinek olduğunda, eski şişeyi hızlı bir şekilde dik çevirin ve her iki şişedeki tıpaları değiştirin.</li>
		<li>Eski şişelerde sinek kalmayana kadar sineklerin transferlerini tekrarlayın. Gerekirse, şişe başına yeterli sinek (20-30 çift) olduğundan emin olmak için birden fazla eski şişedeki sinekleri yeni bir şişede birleştirin veya toplayın.</li>
		<li>Yeni şişeleri, yetişkin sineklere uygun koşullarda (21 °C, 16 L: 8 D fotoperiyot,% 60-% 80 bağıl nem [% RH%]) bir hafta maruz kaldıktan sonra, sineklerin ortaya çıkması için 3 hafta boyunca bir çevre odasında tutun.</li>
	</ol></li>
	<li>Konakçı larvaları parazitoidlere maruz bırakın.<ol>
<li>Herhangi bir yetişkin sineği ve bükülmüş kağıt havluyu şişeden çıkardıktan sonra sinek yumurtaları ve larvaları içeren bir şişe alın (bkz. adım 1.2.7).</li>
		<li>Bir parça emici kağıt havluyu ikiye katlayın ve parazitli larvalar için bir yavru substrat olarak şişeye koyun.</li>
		<li>Her şişeye altı adet dişi ve erkek G3 G. brasiliensis çifti aspire edin (Şekil 1). Köpük tıpanın dibine ince bir bal tabakası çizin.</li>
		<li>Parazitoidleri şişede 5 gün bekletin.</li>
		<li>5 günlük bir maruziyetten sonra, parazitoidleri çıkarın ve şişeleri, beklenen yaban arısı ortaya çıkana kadar 35 gün boyunca bir çevre odasında yukarıda açıklanan koşullar altında tutun.</li>
	</ol></li>
	<li>Yetişkin parazitoidleri toplayın ve saklayın.<ol>
<li>Kuluçkanın ikinci ve üçüncü haftalarında, şişeleri erken konakçı ortaya çıkması için haftalık olarak kontrol edin ve yetişkin sinekleri çıkarın.</li>
		<li>Yetişkin parazitoidler ortaya çıkmaya başladığında, haftada üç kez aspire edin ve drosophila şişelerinde tutun (örneğin, 2.5 cm x 9.5 cm) (Şekil 1).</li>
		<li>Şişenin dibine nemlendirilmiş, ancak doymamış küçük bir kağıt havlu parçası yerleştirin.</li>
		<li>Her şişeye ~ 60 parazitoid ekleyin ve şişeyi ortaya çıkış tarihleriyle etiketleyin. Köpük tıpanın dibine haftada iki kez ince bir bal tabakası çizin. Şişeleri, daha önce kullanılmadığı takdirde çevre odasında yukarıda açıklanan koşullar altında yetişkin parazitoidlerle birlikte bir aya kadar saklayın.</li>
		<li>Kağıdı şişede her 4-7 günde bir nemlendirin veya küf belirtileri varsa kağıt havluyu değiştirin.</li>
	</ol></li>
</ol>2. G1 Ganaspis brasiliensis'in büyük ölçekli yetiştirilmesi için yöntemler
<ol><li>Ev sahibi Drosophila suzukii'nin büyük ölçekli bir yetiştiriciliğini uygulayın.
	<ol>
<li>Arka D. suzukii , her biri 1.500-2.000 cinsel olarak olgun yetişkin sinek içeren büyük, örme örgü kaplı kafesler (örneğin, 50 cm x 50 cm x 100 cm) içinde (cinsiyet oranı 50:50) (Şekil 2).</li>
		<li>Standart Drosophila Medium'u (SDM), tüm malzemeleri (6 g bakteriyolojik agar, 75 g mısır unu, 17 g besin mayası, 15 g sakaroz, 10 g soya fasulyesi unu, 10 mL propiyonik asit) 1 L damıtılmış suda 10 dakika kaynatarak hazırlayınve karışımı 28 dakika boyunca periyodik olarak karıştırın.</li>
		<li>Karışımı 5 dakika soğumaya bırakın ve 5 g askorbik asit ekleyin.</li>
		<li>Taze pişmiş SDM'yi 9 cm'lik Petri kaplarına dökün ve plakaları kapatmadan önce ortamın oda sıcaklığında katılaşmasını bekleyin.</li>
		<li>SDM Petri tabaklarını üst üste koyun, yığını alüminyum folyo ile sarın ve bulaşıkları 4 °C'de 2 haftaya kadar saklayın.</li>
		<li>Her yetiştirme kafesinin içine, suya batırılmış pamuklu bir tabak ve SDM'li dört ila altı Petri kabı yerleştirin (Şekil 2).</li>
		<li>Haftada iki kez, istila edilmiş SDM Petri yemeklerini taze olanlarla değiştirin.</li>
		<li>İstilamış SDM Petri kaplarını kapaksız olarak ayrı ayrı plastik kaplara (13,3 cm çapında veya 800 mL) yerleştirin, her bir bardağı ince bir ağ (<0,5 mm) kaplamasıyla kapatın ve 23 ° C ve% 75 RH'de 12-15 gün boyunca inkübe edin (Şekil 2).</li>
		<li>Yeni yumurtadan çıkan D. suzukii yetişkinlerini plastik bardaklardan yetiştirme kafeslerine aktarın.</li>
	</ol></li>
	<li>Konakçı larvaları hazırlayın.<ol>
<li>Yaban mersini 1 dakika soğuk suda durulayın ve meyveleri 3 dakika boyunca bir ağartıcı çözeltisi (% 5'e seyreltilmiş) ile doldurulmuş bir havzaya batırın.</li>
		<li>Ağartıcı çözeltisini boşaltın ve yaban mersini durulamak için havzayı soğuk suyla doldurun. En az 30 saniye boyunca elle hafifçe karıştırın.</li>
		<li>Ağartıcı kalıntılarını ve meyvede bulunabilecek diğer eklembacaklıları (örneğin, akarlar, thrips) gidermek için 2.2.2 adımını tatlı suyla en az üç kez tekrarlayın.</li>
		<li>Meyveyi birkaç kat emici kağıt havlu içeren bir tepsiye yerleştirin ve tepsiyi dikkatlice ileri geri eğin, meyveleri kurutmak için yuvarlayın.</li>
		<li>Birkaç 9 cm'lik Petri kabı hazırlayın (üst veya alt yarım, yukarı bakacak şekilde) ve her birini yıkanmış yaban mersini ile doldurun (meyve büyüklüğüne bağlı olarak tabak başına 15-25 meyve).</li>
		<li>Öğleden sonra geç saatlerde, Petri bulaşıklarını konakçı yetiştirme kafesleri içindeki cinsel olarak olgun yetişkin sineklere maruz bırakın (bkz. adım 2.1) ve gece boyunca bırakın.</li>
		<li>Ertesi sabah, Petri bulaşıklarını, meyvelerdeki sinekleri yerinden çıkarmak için hafifçe üfleyerek veya üzerlerine dokunarak konakçı yetiştirme kafeslerinden çıkarın ve istila edilmiş meyveyi parazitoidlerin yetiştirilmesi için kullanın (bkz. adım 2.4).</li>
	</ol></li>
	<li>Büyük ölçekli bir parazitoid yetiştirme uygulayın.<ol>
<li>Parazitoidi desteklemek için iki tür kafes kullanın: biri parazitizm için, diğeri yaban arısı ortaya çıkması için.</li>
		<li>Parazitizm kafesinin kübik olduğundan (örneğin, her iki tarafta 45 cm), böcek aktivitesini gözlemlemek için ön tarafta şeffaf bir plastik panel, böceklerin eklenmesi veya çıkarılması ve gıda malzemesinin değiştirilmesi için ön panelde iki adet 18 cm'lik manşon açıklığı ve havalandırma için üst ve yanlarda ince polyester ağ (örneğin, 96 x 26 ağ) bulunduğundan emin olun.</li>
		<li>Çıkış kafesini daha küçük hale getirin (örneğin, her iki tarafta 30 cm), iki zıt tarafta tek bir kol açıklığı ve görünürlük için ön tarafta şeffaf bir plastik panel (Şekil 2).</li>
		<li>Her iki kafes tipinin de tavanın altında asılı olan ve bir ila birkaç besleyiciyi askıya alabilecek ince bir ipe sahip olduğundan emin olun (Şekil 2). NOT: Bir besleyici, dağınık bal damlacıkları ile kaplı büyük bir silindirik köpük tıpadan (9 cm çapında) oluşur ve kafes zeminine yerleştirilebilir veya kafes tavanına asılabilir (Şekil 2).</li>
		<li>Her kafesin içinde, RH'ye bağlı olarak her 5-7 günde bir selüloz asetat tapası (2,5 cm çapında) ile kapatılmış düz duvarlı bir drosophila şişesinde (2,5 cm x 9,5 cm) su sağlayın. Şişeyi kafes tavanından baş aşağı asın (Şekil 2).</li>
	</ol></li>
	<li>Konakçı larvaları parazitoidlere maruz bırakın.<ol>
<li>Petri bulaşıkları içindeki konakçı istilasına uğramış meyveyi, D. suzukii gece istilasından hemen sonra G1 G. brasiliensis'e maruz bırakın (bkz. adım 2.2.7).</li>
		<li>10-15 Petri istila edilmiş meyve tabağını 2-3 gün boyunca 1.500-2.000 eşekarısı içeren parazitasyon kafesinde bırakın.</li>
		<li>Parazitlenmiş konakçıları içeren meyveleri toplamak için altta emici kağıt katmanları bulunan plastik bardaklar (13.3 cm çapında veya 800 mL) kullanın (Şekil 2).</li>
		<li>Açık bardakları eklozyon kafesine yerleştirin ve 21 ° C'de ve% 65 RH'de en az 28 gün boyunca inkübe edin (Şekil 2).</li>
		<li>Kuluçkanın ikinci ve üçüncü haftalarında, kafesi erken konakçı eklosyonu için haftalık olarak kontrol edin ve parazitoidlerin art arda toplanmasını kolaylaştırmak için yetişkin sinekleri çıkarın.</li>
		<li>Kuluçkanın dördüncü haftasının sonunda, kafese bir besleyici ve bir su kaynağı ekleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Yetişkin parazitoidleri toplayın ve saklayın.<ol>
<li>Parazitoid ortaya çıkmaya başladığında, yetişkinlerin bir kısmını (% 10-% 15) toplayın ve eski verimsiz bireylerin yerini almak için parazitizm kafesine geri aktarın.</li>
		<li>Kalan parazitoidleri plastik kaplarda (13,3 cm çapında veya 800 mL) toplayın ve saklayın (Şekil 3A).</li>
		<li>Bardağın dibine suyla doldurulmuş ve bir diş pamuklu rulo (1 cm x 3,8 cm) ile kapatılmış bir tüp (2 mL) yerleştirin (Şekil 3A).</li>
		<li>Bardağı, besleyici substrat olarak çıkarılabilir bir köpük tıpa (3,5 cm çapında) ve havalandırma için ağ kaplı bir delik ile donatılmış modifiye edilmiş bir kapakla kapatın (Şekil 3B).</li>
		<li>Her bardağa 700 yetişkine kadar ekleyin (cinsiyet oranı 50:50), bardağı ortaya çıkış tarihi ile etiketleyin ve kullanılana kadar veya 1 aya kadar bir çevre odasında (17 ° C; % 65 RH) saklayın (Şekil 3B).</li>
	</ol></li>
	<li>Yetişkin parazitoidleri gönderin.<ol>
<li>Yetişkin parazitoidleri göndermek için konik tüpler (50 mL) kullanın.</li>
		<li>Kapaktaki bir havalandırma deliğini (8 mm çapında) delin ve ince bir ağ ile örtün (Şekil 3C).</li>
		<li>Kapağın iç kısmına bir selüloz asetat besleme halkası ekleyin (Şekil 3C).</li>
		<li>Damıtılmış su kullanarak doymuş bir sakkaroz çözeltisi hazırlayın, besleme halkasına birkaç damla uygulayın ve sıvıyı emmesine izin verin.</li>
		<li>Tüpün içine fan şeklinde bir emici kağıt havlu parçası yerleştirin (Şekil 3D).</li>
		<li>Her tüpe ~ 200 yetişkin parazitoid ekleyin ve tüpleri buz paketleriyle birlikte yalıtımlı bir nakliye kabına yerleştirin.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Asplen, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+biology+of+spotted+wing+drosophila+%28Drosophila+suzukii%29%3A+a+global+perspective+and+future+priorities%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Invasion biology of spotted wing drosophila (Drosophila suzukii): a global perspective and future priorities.</a> Journal of Pest Science. 88 (3), 469-494 (2015).</li>
<li>Tait, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%3A+A+decade+of+research+towards+a+sustainable+integrated+pest+management+program%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae): A decade of research towards a sustainable integrated pest management program.</a> Journal of Economic Entomology. 114 (5), 1950-1974 (2021).</li>
<li>Kirschbaum, D. S., Funes, C. F., Buonocore-Biancheri, M. J., Suárez, L., Ovruski, S. M. The biology and ecology of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae). <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKirschbaum%2C+DS+%22Drosophila+suzukii+management%22">Drosophila suzukii management</a>. Garcia, F. R. M. , Springer. Cham. 41-92 (2020).</li>
<li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Buffington, M. L., Hoelmer, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22CAB+Reviews%22%5BJournal%5D)">Biological control of Drosophila suzukii.</a> CAB Reviews. 15, 054(2020).</li>
<li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+control+of+spotted-wing+drosophila+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%3A+Current+and+pending+tactics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Integreated+Pest+Management%22%5BJournal%5D)">Biological control of spotted-wing drosophila (Diptera: Drosophilidae): Current and pending tactics.</a> Journal of Integreated Pest Management. 10 (1), 13(2019).</li>
<li>Wang, X. G., Lee, J. C., Daane, K. M., Hoelmer, K. A. Biological control of spotted-wing drosophila: An update on promising agents. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWang%2C+XG+%22Drosophilia+suzukii+management%22">Drosophilia suzukii management</a>. Garcia, F. R. M. , Springer. Cham. 143-167 (2020).</li>
<li>Daane, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+exploration+of+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+South+Korea+as+potential+classical+biological+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">First exploration of parasitoids of Drosophila suzukii in South Korea as potential classical biological agents.</a> Journal of Pest Science. 89 (3), 823-835 (2016).</li>
<li>Giorgini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploration+for+native+parasitoids+of+Drosophila+suzukii+in+China+reveals+a+diversity+of+parasitoid+species+and+narrow+host+range+of+the+dominant+parasitoid%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Exploration for native parasitoids of Drosophila suzukii in China reveals a diversity of parasitoid species and narrow host range of the dominant parasitoid.</a> Journal of Pest Science. 92 (2), 509-522 (2019).</li>
<li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+parasitoid+complex+of+D.+suzukii+and+other+fruit+feeding+Drosophila+species+in+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The parasitoid complex of D. suzukii and other fruit feeding Drosophila species in Asia.</a> Scientific Reports. 8 (1), 11839(2018).</li>
<li>Kacsoh, B. Z., Schlenke, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+hemocyte+load+is+associated+with+increased+resistance+against+parasitoids+in+Drosophila+suzukii%2C+a+relative+of+D.+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">High hemocyte load is associated with increased resistance against parasitoids in Drosophila suzukii, a relative of D. melanogaster.</a> PLoS ONE. 7 (4), 34721(2012).</li>
<li>Buffington, M. L., Forshage, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redescription+of+Ganaspis+brasiliensis+%28Ihering%2C+1905%29%2C+new+combination+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29%2C+a+natural+enemy+of+the+invasive+Drosophila+suzukii+%28Matsumura%2C+1931%29%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Procedings+of+the+Entomoogical+Society+of+Washington%22%5BJournal%5D)">Redescription of Ganaspis brasiliensis (Ihering, 1905), new combination (Hymenoptera: Figitidae), a natural enemy of the invasive Drosophila suzukii (Matsumura, 1931)(Diptera: Drosophilidae).</a> Procedings of the Entomoogical Society of Washington. 118 (1), 1-13 (2016).</li>
<li>Biondi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+olfactory+responses+of+Asobara+japonica+%28Hymenoptera%3A+Braconidae%29towards+fruits+infested+by+the+invasive+spotted+wing+drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Behavior%22%5BJournal%5D)">Innate olfactory responses of Asobara japonica (Hymenoptera: Braconidae)towards fruits infested by the invasive spotted wing drosophila.</a> Journal of Insect Behavior. 30 (5), 495-506 (2017).</li>
<li>Biondi, A., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+preference+of+three+Asian+larval+parasitoids+to+closely+related+Drosophila+species%3A+implications+for+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Host preference of three Asian larval parasitoids to closely related Drosophila species: implications for biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (2), 273-283 (2021).</li>
<li>Girod, P., Rossignaud, L., Haye, T., Turlings, T. C. J., Kenis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+Asian+parasitoids+in+larvae+of+Drosophila+suzukii+feeding+on+blueberry+and+artificial+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Development of Asian parasitoids in larvae of Drosophila suzukii feeding on blueberry and artificial diet.</a> Journal of Applied Entomology. 142 (5), 483-494 (2018).</li>
<li>Wang, X. G., Nance, A. H., Jones, J. M. L., Hoelmer, K. A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspects+of+the+biology+and+reproductive+strategy+of+two+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Aspects of the biology and reproductive strategy of two Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 121, 58-65 (2018).</li>
<li>Wang, X. G., Biondi, A., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+responses+of+three+candidate+Asian+larval+parasitoids+evaluated+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Functional responses of three candidate Asian larval parasitoids evaluated for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Economic Entomology. 113 (1), 73-80 (2020).</li>
<li>Wang, X. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Asobara+japonica+as+a+potential+biological+control+agent+for+the+spotted+wing+drosophila%2C+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Generalis%22%5BJournal%5D)">Assessment of Asobara japonica as a potential biological control agent for the spotted wing drosophila, Drosophila suzukii.</a> Entomologia Generalis. 41, 1-12 (2021).</li>
<li>Hougardy, E., Hogg, B. N., Wang, X. G., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+thermal+performances+of+two+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Comparison of thermal performances of two Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 136, 104000(2019).</li>
<li>Wang, X. G., Hogg, B. N., Hougardy, E., Nance, A. H., Daane, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+competitive+outcomes+among+three+solitary+larval+endoparasitoids+as+candidate+agents+for+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Control%22%5BJournal%5D)">Potential competitive outcomes among three solitary larval endoparasitoids as candidate agents for classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Biological Control. 130, 18-26 (2019).</li>
<li>Daane, K. M., Biondi, A., Wang, X. G., Hogg, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+host+ranges+of+three+Asian+larval+parasitoids+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Potential host ranges of three Asian larval parasitoids of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 94 (4), 1171-1182 (2021).</li>
<li>Girod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host+specificity+of+Asian+parasitoids+for+potential+classical+biological+control+of+Drosophila+suzukii%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Host specificity of Asian parasitoids for potential classical biological control of Drosophila suzukii.</a> Journal of Pest Science. 91 (4), 1241-1250 (2018).</li>
<li>Seehausen, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+a+cryptic+parasitoid+species+reveals+its+suitability+as+a+biological+control+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Evidence for a cryptic parasitoid species reveals its suitability as a biological control agent.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19096(2020).</li>
<li>Nomano, F. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+differentiation+of+Ganaspis+brasiliensis+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29+from+East+and+Southeast+Asia%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">Genetic differentiation of Ganaspis brasiliensis (Hymenoptera: Figitidae) from East and Southeast Asia.</a> Applied Entomology and Zoology. 52 (3), 429-437 (2017).</li>
<li>Kasuya, N., Mitsui, H., Ideo, S., Watada, M., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ecological%2C+morphological+and+molecular+studies+on+Ganaspis+individuals+%28Hymenoptera%3A+Figitidae%29+attacking+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">Ecological, morphological and molecular studies on Ganaspis individuals (Hymenoptera: Figitidae) attacking Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae).</a> Applied Entomology and Zoology. 48 (1), 87-92 (2013).</li>
<li>Matsuura, A., Mitsui, H., Kimura, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+preliminary+study+on+distributions+and+oviposition+sites+of+Drosophila+suzukii+%28Diptera%3A+Drosophilidae%29+and+its+parasitoids+on+wild+cherry+tree+in+Tokyo%2C+central+Japan%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Entomology+and+Zoology%22%5BJournal%5D)">A preliminary study on distributions and oviposition sites of Drosophila suzukii (Diptera: Drosophilidae) and its parasitoids on wild cherry tree in Tokyo, central Japan.</a> Applied Entomology and Zoology. 53 (1), 47-53 (2018).</li>
<li>Abram, P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+records+of+Leptopilina%2C+Ganaspis%2C+and+Asobara+species+associated+with+Drosophila+suzukii+in+North+America%2C+including+detections+of+L.+japonica+and+G.+brasiliensis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Hymenoptera+Research%22%5BJournal%5D)">New records of Leptopilina, Ganaspis, and Asobara species associated with Drosophila suzukii in North America, including detections of L. japonica and G. brasiliensis.</a> Journal of Hymenoptera Research. 78, 1-17 (2020).</li>
<li>Puppato, S., Grassi, A., Pedrazzoli, F., De Cristofaro, A., Ioriatti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+report+of+Leptopilina+japonica+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">First report of Leptopilina japonica in Europe.</a> Insects. 11 (9), 611(2020).</li>
<li>Dalton, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+survival+of+Drosophila+suzukii+under+simulated+winter+conditions+of+the+Pacific+Northwest+and+seasonal+field+trapping+in+five+primary+regions+of+small+and+stone+fruit+production+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Managagement+Science%22%5BJournal%5D)">Laboratory survival of Drosophila suzukii under simulated winter conditions of the Pacific Northwest and seasonal field trapping in five primary regions of small and stone fruit production in the United States.</a> Pest Managagement Science. 67 (11), 1368-1374 (2011).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Bir biyolojik kontrol ajanının uzun süreli araştırmaları ve müteakip saha salınımları, etkili ve ekonomik yetiştirme tekniklerinin mevcudiyetine bağlıdır. Bu çalışmada açıklanan yöntemlerin, Ganaspis brasiliensis'in hem küçük ölçekli hem de büyük ölçekli yetiştirilmesi için etkili protokoller olduğu kanıtlanmıştır. Küçük ölçekli yetiştirme protokolü, işgücü miktarını optimize etmek ve parazitoid ve konakçı kolonileri aynı anda korumak için gereken özel ekipmanı azaltmak için birkaç yıl içinde geliştirilmiştir. L...

Doğu Asya'ya özgü benekli kanatlı drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), Amerika, Avrupa ve Afrika'nın bazı bölgelerinde yaygın olarak kurulmuştur 1,2. Sinek son derece polifagustur, doğal ve istila edilmiş bölgelerinde yumuşak ve ince derili çeşitli ekili ve yabani meyveleri kullanabilen 1,2,3. Bu haşere için mevcut yönetim stratejileri, hassas meyveler olgunlaşırken mahsul tarlalarındaki yetişkin sinekleri hedef alan böcek öldürücülerin sık kullanımına büyük ölçüde dayanmaktadır. Tekrarlanan spreyler, muhtemelen rezervuar sineği popülasyonlarının mahsul dışı habitatlardan tutarlı bir şekilde yayılması ve işgal edilen bölgelerde yaşayan etkili doğal düşmanların bulunmaması nedeniyle sıklıkla kullanılır 1,4. Biyolojik kontrol, özellikle kendi kendini sürdüren özel parazitoidler aracılığıyla, peyzaj düzeyinde sinek popülasyonlarının bastırılmasına yardımcı olabilir ve bu son derece hareketli ve polifagot haşereninsürdürülebilir alan çapında yönetimi için kritik bir rol oynayabilir 4,5,6.
Son on yılda, araştırmacılar, sineğin Doğu Asya 7,8,9'daki doğal aralıklarında Drosophila suzukii'nin birlikte evrimleşmiş parazitoidlerini ve ayrıca sineğin Amerika ve Avrupa'daki istila edilmiş bölgelerinde etkili ancak yeni ilişkili parazitoidleri keşfetme çabalarına odaklandılar 4,5,6. Sineğin yeni istila edilen bölgelerinde, yaygın olarak ortaya çıkan larva Drosophila parazitoidleri, Asobara c.f. tabida (Nees) (Hymenoptera: Braconidae), Leptopilina boulardi (Barbotin ve ark.) ve L. heterotoma (Thompson) (Hymenoptera: Figitidae), sineğin güçlü bağışıklık direnci nedeniyle D. suzukii'den gelişemez veya düşük parazitizm seviyelerine sahip olamazlar10. Kuzey Amerika ve Avrupa'da Pachycrepoideus vindemiae (Rondani) (Hymenoptera: Pteromalidae) ve Trichopria drosophilae (Perkins) (Hymenoptera: Diapriidae) ve Güney Amerika'daki Trichopria anastrephae Lima gibi sadece bazı kozmopolit ve genelci pupa parazitoidleri bu sinek4'ten kolayca gelişebilir. Buna karşılık, Doğu Asya'daki keşifler, D. suzukii 4,5,6'dan bir dizi larva parazitoidi keşfetti. Bunlar arasında, Asobara japonica Belokobylskij, Ganaspis brasiliensis Ihering ve Leptopilina japonica Novković & Kimura, baskın larva parazitoidleri 7,8,9,11'dir. Özellikle, iki figitid (L. japonica ve G. brasiliensis), ağırlıklı olarak D. suzukii ve / veya doğal bitki örtüsündeki diğer yakından ilişkili drosofilidler tarafından istila edilen taze meyvelerde bulunan başlıca parazitoidlerdi7,8,9. Bu üç Asya larva parazitoidi, ABD ve Avrupa'daki karantina tesislerine ithal edildi ve göreceli verimlilikleri 12,13,14,15,16,17, iklimsel adaptasyon kabiliyeti18, potansiyel interspesifik rekabetçi etkileşimler 19 ve en önemlisi konakçı özgüllüğü 8,20,21 açısından değerlendirildi. ,22.
Karantina değerlendirmeleri, Ganaspis brasiliensis'in Drosophila suzukii'ye test edilen diğer Asya larva parazitoidlerinden daha fazla konakçı spesifik olduğunu, ancak muhtemelen farklı konakçı özgüllüğüne sahip farklı biyotiplerden veya şifreli türlerden oluştuğunu göstermiştir 8,21,22,23,24. Nomano ve ark.22, mitokondriyal sitokrom oksidaz I gen fragmanının moleküler analizlerine dayanarak, farklı coğrafi bölgelerden Ganaspis bireylerini beş genetik gruba (G1-G5 olarak adlandırılır) gruplandırmıştır. G2 ve G4 grupları sadece birkaç güney Asya tropikal bölgesinden bildirilmiştir ve G5 grubu Asya'dan ve diğer bölgelerden (örneğin, Arjantin, Brezilya, Hawaii ve Meksika) bilinmeyen konakçılardan (Buffington, kişisel gözlem) bildirilmiştir. Güney Kore7, Çin8 ve Japonya'da D. suzukii tarafından istila edilen yabani meyvelerin tarla koleksiyonları 9,23,25, tek başına G1'i veya G1 ve G3 gruplarını temsil eden örneklerin bir karışımını buldu. İki grup simpatrik gibi görünüyor ve D. suzukii ve diğer yakından ilişkili konakçı sineklerin yaşadığı aynı konakçı bitkilerde bir arada bulunuyor. Bununla birlikte, iki grup arasında bazı farklılıklar gözlenmiştir; G1, görünüşte D. suzukii'ye G3'ten daha yüksek bir konakçı veya konakçı habitat özgüllüğüne sahiptir, ancak her ikisi de karantina testlerinde21,22 ile yakından ilişkili bir dizi türe saldırmaktadır. Daha ayrıntılı moleküler analizler, özellikle G1 ve G3 grupları için türlerin durumunu belirlemeye yardımcı olabilir. Bu çalışma onları G1 G. brasiliensis ve G3 G. brasiliensis olarak adlandırmaktadır. Bazı erken çalışmalar ayrıca G1 G. brasiliensis'i G olarak adlandırdı. Bkz. brasiliensis 14,21,22. G1 G. brasiliensis yakın zamanda ABD ve İtalya'da D. suzukii'ye karşı saha sürümü için onaylanmıştır (diğer bazı Avrupa ülkeleri de şu anda tanıtımını düşünmektedir), G3 G. brasiliensis ise yakın gelecekte sahada serbest bırakılması düşünülebilir. Son zamanlarda yapılan anketler ayrıca British Columbia, Kanada26 ve Washington Eyaleti, ABD'de hem L. japonica hem de G1 G. brasiliensis'in maceracı popülasyonlarını (Beers ve ark., yayınlanmamış veriler) ve İtalya'nın Trento eyaletindeki maceracı L. japonica popülasyonlarını buldu27.
Drosophila suzukii yönetimi için biyolojik kontrol programlarının geliştirilmesine olan önemli ilgi ve Ganaspis brasiliensis'in maceracı ve kasıtlı tanıtımlarının önemli biyolojik kontrol potansiyeli göz önüne alındığında, gelecekteki uzun vadeli araştırmalar ve / veya saha salınımı için bu larva parazitoidi için verimli yetiştirme yöntemleri geliştirmeye ihtiyaç vardır. Bu protokol ve ilgili video makalesi, bu parazitoid için iki yetiştirme yöntemi setini açıklamaktadır: (1) D. suzukii kültürü için konakçı meyve (yaban mersini) ve yapay diyet karışımı kullanılarak şişelerde küçük ölçekli laboratuvar yetiştiriciliği. Yöntemler, orijinal olarak Kunming, Çin8'den toplanan G3 materyali kullanılarak geliştirilmiştir. (2) D. suzukii kültürü için konakçı meyve (yaban mersini) kullanılarak büyük kafeslerde tarla salınımı için kütle yetiştiriciliği. Büyük ölçekli yetiştirme için kullanılan genetik grup, Tokyo, Japonya 9,22 menşeli G1 stoğu idi. Her iki grup için şişeler veya küçük kaplar kullanmak gibi diğer yetiştirme yöntemleri ölçekleri de kısaca tartışılmaktadır.

<table><tbody><tr><td>Aktif kuru maya</td><td>Fleischmanns Mayası, Cincinatti, OH, ABD</td><td>Yok</td><td>Küf oluşumunu azaltmak ve sineklere karşı frui çekiciliğini artırmak için meyveyi kaplamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Bakteriyolojik agar</td><td>Merk Life Science S.r.l., Milano, İtalya</td><td>A1296 - 5KG</td><td>Standart Drosophila Orta Çamaşır Suyu çözeltisini hazırlamak için kullanılır</td></tr><tr><td></td><td>Clorox Company, Oakland, CA, ABD</td><td>Yok</td><td>Etli meyveleri</td></tr> <tr><td>dezenfekte etmek için kullanılırMavi tıpa</td><td>Azer Scientific, Morgantown, PA, ABD</td><td>ES3837</td><td>Böcekler için havalandırmaya izin verirken tüpü sızdırmaz hale getirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Yaban mersini</td><td>Bakkal, Newark, DE, ABD</td><td>Yok</td><td>Sinekler için konukçu meyve olarak sağlanır (çeşitli başka meyveler de kullanılabilir)</td></tr><tr><td>BugDorm böcek yetiştirme kafesi (G24,5 x D24,5 x Y63,0 cm)</td><td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Tayvan</td><td>4E3030</td><td>Parazitoit yetiştirmek için kullanılır (parazitizm kafesi)</td></tr><tr><td>BugDorm böcek yetiştirme kafesi (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td><td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Tayvan</td><td>4E4590</td><td>Sinek yetiştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>BugDorm böcek yetiştirme kafesi (W32.5 x D32.5 x H32.5 cm)</td><td>Mega View Science Co. Ltd., Taichung, Tayvan</td><td>4E4545</td><td>Parazitoitlerin yetiştirilmesinde kullanılır (eclosion kafesi)</td></tr><tr><td>Tavuk teli (0,64 cm, 19 gauge)</td><td>Everbilt, OH, ABD</td><td>308231EB</td><td>Maksimum parazitoid yumurtlamasına izin vermek için meyveyi kaldırmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Mısır</td> unu <td>Bakkal, Trento, TN, İtalya</td><td>Yok</td><td>Standart Drosophila Medium Dental pamuk rulosunu hazırlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>(1 x 3,8 cm)</td><td>Gima S.p.A., Gessate, MI, İtalya</td><td>35000</td><td>Saklama kabı içindeki parazitoitlere su sağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Drosophila diyeti</td><td>Frontier Scientific, Newark, DE, ABD</td><td>TF1003</td><td>Arka sinekler için kullanılan özel diyet</td></tr><tr><td>Drosophila flakon dar, Polistiren (2,5 x 9,5 cm)</td><td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td><td>75813-160</td><td>Kafes içindeki parazitoitlere su sağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Drosophila flakon tapaları, Selüloz asetat (2,5 cm)</td><td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td><td>89168-886</td><td>Kafes içindeki parazitoitlere su sağlamak için kullanılır</td></tr><tr><td>Erlenmeyer şişesi (250 mL)</td><td>Carolina Biological, Burlington, NC, ABD</td><td>731029</td><td>Sinek ve parazitoit yetiştirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Falcon tarzı santrifüj tüpü (50 mL)</td><td>VWR International, LLC., Radnor, PA, US</td><td>VWRI525-0611</td><td>Yetişkin parazitoitleri göndermek için modifiye edildi</td></tr><tr><td>Köpük tıpa</td><td>Jaece Industries, North Tanawanda, NY, ABD</td><td>L800-C</td><td>Böcekler için havalandırmaya izin verirken şişeleri sızdırmaz hale getirmek için kullanılır</td></tr><tr><td>Bal</td><td>Bakkalı, Newark, DE, ABD</td><td>Yok</td><td>Parazitoidler için gıda olarak sağlanır</td></tr><tr><td>Identi-Plug plastik köpük tıpa</td><td>Fisher Scientific Company, LLC, Pittsburg, PA, US</td><td>14-127-40E</td><td>Parazitoidler için besleyici olarak ve saklama kabını kapatmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Endüstriyel kağıt havlu</td><td>Bakkal, Newark, DE, ABD</td><td>Yok</td><td>Pupa ve azaltılmış nem için bir pupa substratı olarak sağlanır</td></tr><tr><td>Mikron örgü kumaş (250 mL)</td><td>Endüstriyel Ağ, Maple Grove, MN, ABD</td><td>WN0250-72</td><td>Böcekler için havalandırma kapağı yapmak için kullanılır</td></tr><tr><td>Besin mayası (gevreği)</td><td>Bakkal, Trento, TN, İtalya</td><td>Yok</td><td>Standart Drosophila Medium</td></tr><tr><td>Kağıt bardak altlığını hazırlamak için kullanılır (10,2 cm)</td><td>Hoffmaster, WI, ABD</td><td>35NG26</td><td>Sinekler ve parazitlenmiş pupalar</td></tr> <tr><td>için pupa substratı olarak kabul edilirPlastik bardak (&Oslash; 13.3 cm, 800 mL)</td><td>Berry Superfos, Taastrup, Danimarka</td><td>Unipak 5134</td><td>Yetişkin parazitoidleri saklamak için modifiye edilmiştir</td></tr><tr><td>Plastik kapak (&Oslash; 13.3 cm)</td><td>Berry Superfos, Taastrup, Danimarka</td><td>PP 2830</td><td>Yetişkin parazitoitleri depolamak için modifiye edilmiştir</td></tr><tr><td>Propiyonik asit</td><td>Merk Life Science S.r.l., Milano, İtalya</td><td>P1386 - 1L</td><td>Standart Drosophila Orta Sakkaroz'u</td></tr> <tr><td></td><td>hazırlamak için kullanılırBakkal, Trento, TN, İtalya</td><td>Yok</td><td>Standart Drosophila Orta Boy</td></tr><tr><td>Kapaklı Çorba bardağı hazırlamak için kullanılır (475 mL)</td><td>StackMan, Vietnam</td><td>DC1648</td> Soya fasulyesi ununu <td>pupa etmek için parazitlenmiş larvalar için kullanılır</td></tr><tr><td></td><td>Bakkal, Trento, TN, İtalya</td><td>Yok</td><td>Standart Drosophila Medium</td></tr><tr><td>Beyaz keçe yıkayıcıyı hazırlamak için kullanılır (0,64 cm kalınlığında, 5 mm İç Çap x 20 mm Dış Çap)</td><td>Quiklok, Lincoln, NH, ABD</td><td>WFW/.25 x 5 x 20 mm</td><td>Parazitoidler için besleme halkası olarak kullanılır</td></tr></tbody></table>

İnvaziv drosophila suzukii için umut verici bir biyolojik kontrol ajanı olan parazitoid ganaspis brasiliensis'i yetiştirme yöntemleri

Methods for Rearing the Parasitoid Ganaspis brasiliensis, a Promising Biological Control Agent for the Invasive Drosophila suzukii

Doğu Asya'ya özgü benekli kanatlı drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), son on yılda Amerika, Avrupa ve Afrika'nın bazı bölgelerinde yaygın olarak yerleşmiş ve işgal altındaki bölgelerinde çeşitli yumuşak tenli meyvelerin yıkıcı bir zararlısı haline gelmiştir. Biyolojik kontrolün, özellikle kendi kendini sürdüren ve uzmanlaşmış parazitoidler aracılığıyla, bu son derece hareketli ve polifagot zararlının sürdürülebilir alan çapında yönetimi için uygun bir seçenek olması beklenmektedir. Ganaspis brasiliensis Ihering (Hymenoptera: Figitidae), Doğu Asya'da yaygın olarak dağılmış bir larva parazitoididir ve D. suzukii'nin en etkili parazitoidlerinden biri olduğu bulunmuştur.
Etkinliğinin ve potansiyel hedef dışı risklerinin titiz giriş öncesi değerlendirmelerini takiben, bu türün daha konakçıya özgü genetik gruplarından biri (G1 G. brasiliensis) yakın zamanda Amerika Birleşik Devletleri ve İtalya'da giriş ve saha sürümü için onaylanmıştır. Doğu Asya'da D. suzukii'ye saldırdığı yaygın olarak bulunan başka bir genetik grup (G3 G. brasiliensis), yakın gelecekte giriş için düşünülebilir. Şu anda G. brasiliensis'in araştırma için yetiştirilmesine veya D. suzukii'ye karşı saha salınımı için seri üretime büyük ilgi var. Bu protokol ve ilgili video makalesi, bu parazitoid için hem araştırma için küçük ölçekte hem de seri üretim ve saha salınımı için büyük ölçekte etkili yetiştirme yöntemlerini açıklamaktadır. Bu yöntemler, bu Asya yerli parazitoidinin bu küresel istilacı haşere için umut verici bir biyolojik kontrol ajanı olarak daha uzun vadeli araştırmalara ve kullanımına fayda sağlayabilir.

Şekil 4, USDA-ARS Faydalı Böcekler Giriş Ünitesi'nin (Newark, Delaware) karantina tesisinde iki farklı parazitoid yoğunluk (altı veya 10 çift) ve iki farklı maruz kalma süresi (5 veya 10 gün) kullanılarak G3 Ganaspis brasiliensis'in küçük ölçekli laboratuvar yetiştirmesinin temsili sonuçlarını göstermektedir. Her parazitoid yoğunluk ve maruz kalma süresi kombinasyonu için 14 replika vardı. Toplamda, 64 şişe,% 49,5 ±% 1,9 dişi yavru ile 4.018 eşekarısı (şişe başına 71.7 ± 4.9 yavru) ...

Ganaspis brasiliensis - Drosophila suzukii'nin (küresel istilacı bir meyve mahsulü zararlısı) larva parazitoidi - bu haşerenin biyolojik kontrolü için Avrupa ve Amerika Birleşik Devletleri'ne giriş için onaylanmış veya düşünülmüştür. Bu makale, bu parazitoidin hem küçük ölçekli hem de büyük ölçekli yetiştirilmesi için protokoller sunmaktadır.

İnvaziv Drosophila suzukii için Umut Verici Bir Biyolojik Kontrol Ajanı olan Parazitoid Ganaspis brasiliensis'i Yetiştirme Yöntemleri

Native to East Asia, the spotted-wing drosophila, Drosophila suzukii (Matsumura) (Diptera: Drosophilidae), has established widely in the Americas, Europe, ...

Bir biyo-kontrol ajanının uzun süreli araştırılması ve kullanılması, etkili ve ekonomik yetiştirme tekniklerinin mevcudiyetine bağlıdır ve bu protokolün bu parazitoidin yetiştirilmesinde etkili olduğu kanıtlanmıştır. Şu anda bu parazitoidin araştırma veya saha salınımı için yetiştirilmesine büyük ilgi var ve protokol gelecekteki uzun vadeli araştırmalara ve bu umut verici biyo-kontrol ajanının kullanımına fayda sağlayacak. İlk kullanıcıların, makalede verilen ilgili referansları ve yöntemlerin bazı uygulamalarını okuyarak ilgili böceklerin bazı temel biyolojisini anlamaları gerekebilir.Ev sahibi diyetini yapmak için, öncelikle, diyetin sıvı kısmını makalede açıklandığı gibi hazırlayın. Daha sonra, 250 mililitrelik boş bir şişeye 25 ila 30 gram yaban mersini püresi ekleyin. Daha sonra, sıvıyı şişeye dökün, sıvı sadece yaban mersini püresinin üstünü kaplar.Daha sonra, ev sahibi Drosophila suzuki'yi yetiştirmek için, önce bir parça emici kağıt havlu kesin ve merkezde bükün. Ardından, kağıt havlunun bükülmüş orta bölümünü diyet şişesine yerleştirin. Nemi korumak için, kağıt havluyu ve diyeti ıslatmak için damıtılmış su kullanın.Daha sonra, cinsel olarak olgun yetişkin sinekleri aktarmak için, bir sinek kolonisi şişesinin tıpasını dikkatlice çıkarın ve diyet şişesine ters çevirin. Bu maruziyetten bir hafta sonra, sineklerin ortaya çıkması için sinekleri üç hafta boyunca bir çevre odasında tutun. Konakçı larvaları parazitoidlere maruz bırakmak için, önce yetişkin sinekleri ve kağıt havluyu şişeden çıkarın, sinek yumurtalarını ve larvalarını bırakın.Larvalar için bir yavru substrat görevi görmek için, yeni bir emici kağıt havlu katlayın ve şişeye yerleştirin. Daha sonra parazitoid G3 Ganaspis brasiliensis'in altı dişi ve erkek çiftini şişeye aspire edin ve köpük tıpanın dibine ince bir bal tabakası çizin. Parazitoidleri toplamak ve depolamak için, yetişkinleri beş gün sonra çıkarın.Daha sonra şişeyi daha önce belirtilen koşullar altında 35 gün boyunca çevre odasında saklayın. Yetişkin eşekarısı ortaya çıkmasıyla, haftada üç kez aspire edin. Eşekarısı tutmak için, önce nemlendirilmiş ancak damıtılmış suyla doyurulmamış bir kağıt havluyu 2,5 x 9,5 santimetrekarelik bir Drosophila şişesinin dibine yerleştirin.Ardından, yaklaşık 60 eşekarısı şişeye aktarın ve ortaya çıkış tarihini işaretleyin. Şişeyi çevre odasında saklayın. Haftada iki kez, şişelerin köpük tıpasının dibine ince bir bal tabakası çizin.İlk olarak, Drosophila suzuki'nin büyük ölçekli yetiştirilmesini, büyük, örülmüş, ağ kaplı bir kafese 50: 50 cinsiyet oranında 1.500 ila 2.000 cinsel olarak olgun yetişkin sinek yerleştirerek düzenleyin. Ardından, suya batırılmış pamuklu bir tabak ve kafese standart Drosophila ortamına sahip dört ila altı Petri kabı yerleştirin. Haftada iki kez, maruz kalan Petri yemeklerini taze olanlarla değiştirin.Her istila edilmiş Petri kabını kapaksız olarak 800 mililitrelik plastik bir kaba yerleştirin ve bardağı ince bir ağ ile örtün. Daha sonra, bardakları 12 ila 15 gün boyunca 23 santigrat derecede ve% 75 bağıl nemde inkübe edin. Kuluçkadan sonra, yeni yumurtadan çıkmış yetişkin Drosophila suzuki'yi bir yetiştirme kafesine aktarın.Daha sonra, yaban mersini bir dakika boyunca soğuk suda durulayarak konakçı larvaları hazırlamaya başlayın ve meyveleri üç dakika boyunca% 5'e seyreltilmiş bir ağartıcı çözeltisi ile doldurulmuş bir havzaya batırın. Ardından, dokuz santimetrelik Petri bulaşıklarını yıkanmış yaban mersini ile doldurun. Öğleden sonra geç saatlerde, Petri bulaşıklarını yetiştirme kafesine koyun ve gece boyunca bırakın.Ertesi sabah, sinekleri meyvelerden çıkarmak ve meyveleri yetiştirme kafesinden çıkarmak için Petri tabaklarına hafifçe dokunun. Bu arada, parazitoid G1 Ganaspis brasiliensis için bir parazitizm kafesi ve bir yaban arısı ortaya çıkma kafesi hazırlayın. Her iki kafesin de bir veya daha fazla besleyiciyi askıya almak için tavanın altında ince bir ip bulunmalıdır.Her kafeste, su içeren bir Drosophila şişesini askıya alın ve bağıl neme bağlı olarak her beş ila yedi günde bir tavandan baş aşağı bir selüloz asetat tıkacı ile kapatın. Drosophila suzuki kafesinden istila edilmiş yaban mersini çıkardıktan hemen sonra, onları iki ila üç gün boyunca 1.500 ila 2.000 Ganaspis brasiliensis eşekarısı ile parazitizm kafesine koyun. Daha sonra, meyveleri altta emici kağıt bulunan 800 mililitrelik plastik bir bardakta toplayın.Açık kabı ortaya çıkma veya eklozyon kafesinde en az 28 gün boyunca 21 santigrat derecede ve% 65 bağıl nemde inkübe edin. Kuluçkanın ikinci ve üçüncü haftalarında, erken konakçı eklosyonu için kafesi haftalık olarak kontrol edin. Ardışık parazitoid toplamayı kolaylaştırmak için yetişkin sinekleri çıkarın.Kuluçkanın dördüncü haftasının sonunda, kafese bir besleyici ve bir su kaynağı sağlayın. Yetişkin eşekarısının yaklaşık% 10 ila% 15'ini toplayın ve eski ve verimsiz eşekarısı yerine geçmek için parazitizm kafesine aktarın. Eklozyon kafesinin kalan eşekarısından, suyla doldurulmuş ve bardağın dibinde bir diş pamuklu rulo ile kapatılmış iki mililitrelik bir tüp içeren 800 mililitrelik bir plastik bardak ile 50: 50 cinsiyet oranında 700 yetişkine kadar saklayın.Bardağı bir aya kadar bir çevre odasında belirgin bir çıkış durumuna sahip olarak saklayın. Parazitoidleri nakletmek için, yaklaşık 200 yetişkini 50 mililitrelik konik bir tüpe yerleştirin. Ardından, tüm tüpleri buz paketleriyle birlikte yalıtkan bir nakliye kabına koyun.Bu protokol, laboratuvarda tarımsal haşere Drosophila suzuki'ye karşı parazitoid bir ajan olan G3 Ganaspis brasiliensis'in küçük ölçekli başarılı bir şekilde yetiştirilmesiyle sonuçlandı. Yavru üretimi, parazitoid yoğunluk ve maruz kalma süresindeki farklılıklardan etkilenmedi. Büyük ölçekli G1 Ganaspis brasiliensis üretimi de sağlanabilir, üretim ev sahibi Drosophila suzuki'ye ilk maruz kaldıktan beş hafta sonra başlar.8. haftadan 22. haftaya kadar, parazitoid üretimi onlara maruz kalan meyve miktarıyla orantılı hale geldi. Uygun bir yetiştirme sıcaklığını korumak, nemi kontrol etmek ve yetişkin böcekler için her zaman yiyecek sağlamak kritik öneme sahiptir. Yöntemler, eşekarısı üremesini en üst düzeye çıkarmak için konakçı ve parazitoidin yetiştirme yoğunluklarını optimize ederek ve bu parazitoidi alternatif konakçılar üzerinde yetiştirme olasılığını araştırarak daha da geliştirilebilir.

methods-for-rearing-parasitoid-ganaspis-brasiliensis-promising

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Fopius arisanus Tephritid meyve sinekleri bu önemli tropikal zararlıları biyolojik kontrol başarıyla kullanılan bir yumurta larva parazitoit. Biz burada F. yetiştirme için optimize edilmiş bir protokol tarif hazır malzemeler kullanılarak küçük bir ölçekte arisanus.

Yetiştirilmesi için Optimum Protokol Fopius arisanus Tephritid Meyve bir parazitoit Sinekler

Parazitoit (asalak) arılar dahil olmak üzere birçok böceklerin doğal düşmanları önemli bir sınıfını...

Paraziter Eşek Arıları Bir Giriş<em&gt; Drosophila</em&gt; Ve antiparaziter İmmün Yanıt

Mikroenjeksiyon Nasonia vitripennis embriyo kalıtsal genom değişiklikler oluşturmak için temel bir yöntemdir. Burada açıklanan mikroenjeksiyon ve büyük ölçüde bu organizma gelecekteki genom manipülasyon kolaylaştıracaktır Nasonia vitripennis embriyo nakli için detaylı bir işlemdir.

Embriyo mikroenjeksiyon ve Nasonia vitripennis genom manipülasyon için transplantasyonu tekniği

Burada, toprak örneklerinden entomopatojenik mantarların (EPF) izole edilmesi ve seçilmesi için kullanılan yemek kurdu (Tenebrio molitor)-yem sistemine dayanan bir protokol sunuyoruz. Sahada zararlı mikrobiyal kontrolü için fizyolojik özelliklere göre yüksek strese dayanıklı EPF seçmek için etkili bir konidia sayısı (ECN) formülü kullanılır.

Toprak Örneklerinden İntomopatojenik Mantarların İzolasyonu ve Seçimi ve Böcek Zararlılarına Karşı Mantar Virülansının Değerlendirilmesi

Bu yazıda, Oryantal meyve sineği Bactrocera dorsalis'in CRISPR / Cas9 mutagenezi için adım adım protokoller sunulmaktadır. Bu standartlaştırılmış protokol tarafından sağlanan ayrıntılı adımlar, B. dorsalis'teki fonksiyonel gen çalışmaları için mutant sineklerin üretilmesi için yararlı bir rehber görevi görecektir.

CRISPR / Cas9 Oryantal Meyve Sineği Bactrocera dorsalis'in mutagenezi için protokoller

RNA girişiminin (RNAi) manipülasyonu, Trichogramma yaban arıları gibi küçücük boyuta sahip birçok parazitoid türünde zorlu bir zorluk teşkil eder. Bu çalışma, Trichogramma denrolimi'de etkili bir RNAi yöntemini tanımlamıştır. Mevcut metodoloji, Trichogramma yaban arılarında gen regülasyonunu araştırmak için sağlam bir model sunmaktadır.

Yumurta Parazitoidinde RNA Girişimi, Trichogramma dendrolimi Matsumura

Bu makale, alt dipteran sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın laboratuvar bakımını (çiftleşme ve besleme dahil) özetlemektedir.

Alt Dipteran Sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın Laboratuvar Bakımı: Yeni/Eski Ortaya Çıkan Bir Model Organizma

Çiftçilere entomopatogenik nematodları biyo-böcek ilaçları olarak toplu olarak yaymaları için iki yöntem sunuyoruz. İlk yöntem, nematod kültürleme alt tabakası olarak poliakrilamid jel kullanırken, ikinci yöntem kültür substratı olarak polimer kaplı pamuk yünü kullanır. Her iki yöntem de böcek kadavralarında nematodların in vivo yayılmasına dayanır.

Yetiştirici Temelli Entomopatotik Nematodların In Vivo Yayılması

Bu protokolün amacı, Asobara japonica ve Drosophila melanogaster'de parazitoid–konak etkileşimlerinin fonksiyonel analizini kolaylaştırmaktır. optimize edilmiş yetiştirme yöntemleri, tek yumurtlama enfeksiyonu testi ve RNAi aracılı gen etkisi aralı.

Endoparazitoid eşek arısı Asobara japonica ve konak Drosophila melanogaster'in Verimli Yetiştirilmesi ve Fonksiyonel Analizi Protokolleri

Bu video, laboratuarda arka Anofel gambiae kullanılan genel teknikler gösterilmektedir. Kan besleme yetişkin için pupa larva organizmanın yaşam döngüsünün tüm aşamalarında laboratuar sivrisinek bakımı için yöntemleri gösterilmektedir.

Sivrisinek Yetiştirme Protokolü (A. gambiae)

Öğrenin, Ganaspis brasiliensis parazitoidinin Drosophila suzukii'ye karşı küçük ve büyük ölçekli yetiştirme protokollerini. Bu yöntemler, biyolojik kontrol ajanının üretimini optimize eder.

İnvaziv Drosophila suzukii için Umut Verici Bir Biyolojik Kontrol Ajanı olan Parazitoid Ganaspis brasiliensisi Yetiştirme Yöntemleri (Video) | JoVE Journal

İnvaziv Drosophila suzukii için Umut Verici Bir Biyolojik Kontrol Ajanı olan Parazitoid Ganaspis brasiliensis'i Yetiştirme Yöntemleri

Daha fazla video keşfet