Akut Böbrek Hasarı Araştırmaları için Bilateral Renal İskemi-Reperfüzyon Fare Modelinin Teknik İyileştirilmesi
3 Kasım 2023
Bu çalışma, akut böbrek hasarı araştırmaları için bilateral renal iskemi-reperfüzyonun bir fare modelinin teknik olarak iyileştirilmesine odaklanan bir protokol oluşturdu.
Akut böbrek hasarı, dolaşımın geri dönüşünden sonra kardiyak arrest olan hastalarda yüksek mortalite ile ilişkili önemli bir risk faktörüdür. Bu prosedür akut böbrek hasarını indüklemek için yapılabilir. Bu protokol, renal iskemi reperfüzyonunu doğru, güvenli ve tutarlı bir şekilde indüklemektir.
Prosedürü gösteren, laboratuvarımdan bir asistan olan Huang Cheng-Wei olacak. Başlamak için, anestezi uygulanmış sekiz haftalık bir C57BL / 6 erkek fareyi, vücut ısısını korumak için elektrikli battaniyeli bir ameliyat platformuna yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Ardından, arkaya dokunun, lomber omurgayı bulun ve son kaburganın her iki tarafının altındaki costovertebral açıları arayın.
Tıraş etmek için epilasyon losyonu uygulayın ve costovertebral açı bölgesinin her iki tarafına yakın saçları ovalayın. Cerrahi bölgeyi bir Betadine solüsyonu ve pamuk topları kullanarak% 75 alkol kullanarak dezenfekte edin. Cildi sol costovertebral açının altına nazikçe kaldırmak için ince uçlu forseps kullanın.
Daha sonra makas kullanarak sol kanatta lomber orta hattan cilt gerginlik çizgileri boyunca bir santimetre eğik dorsolateral kesi oluşturun. Ardından, sol böbreği görselleştirmek için sol kanadın kas duvarını kesin. Sol böbreği forseps ile çevre dokudan dikkatlice itin ve ayırın.
Ardından, böbrek pedikülünü tanımlayın. Sol renal pedikülü mikrovasküler bir klipsle sıkıştırın. Böbrek renginde pembeden koyu kırmızıya gözle görülür bir değişiklikle iskemiyi doğrulayın.
Sıkıştırma sırasında kurumayı önlemek için, böbreği steril tuzlu suyla ıslak pamuk topları ile örtün. 25 dakika sonra, sol böbreğin reperfüzyonunu başlatmak için sol mikrovasküler klipsi açın. Böbreği karın boşluğuna geri getirin.
Karın boşluğunu 6/0 emilebilir dikiş materyalleri ile kapatın. Serbestçe hareket etmeye ve beslenmeye başlayana kadar fareyi gözlemleyin. Renal pedikül klemplemesi sonrası renal iskemi burada gösterilmiştir.
Böbrek renginin pembeden koyu kırmızıya doğru değişmesi, böbrek perfüzyonunun yetersiz hale geldiğini ortaya koymaktadır. Kontrollerle karşılaştırıldığında, renal reperfüzyondan iki gün sonra serum kan üre azotu ve kreatinin düzeyleri arttı. Bu teknik, araştırmacıların akut böbrek hasarına karşı yeni terapötik yaklaşımları keşfetmeleri için bir yol açmaktadır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu çalışma, akut böbrek hasarı araştırmaları için bilateral renal iskemi-reperfüzyon fare modelinin teknik olarak geliştirilmesine odaklanan bir protokol oluşturmuştur. Prosedür, akut böbrek hasarının doğru ve tutarlı bir şekilde indüklenmesini amaçlamaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nefroloji
- Akut böbrek hasarı
- Hayvan modelleri
Arka Plan
- Akut böbrek hasarı, kardiyak arrest sonrası hastalarda yüksek mortalite için önemli bir risk faktörüdür.
- Çalışma, akut böbrek hasarı oluşturmak için bir yöntem olarak renal iskemi-reperfüzyona odaklanmaktadır.
- Bu sürecin anlaşılması, yeni terapötik yaklaşımlara yol açabilir.
- Protokol, renal hasarın oluşturulmasında doğruluk ve güvenliği hedeflemektedir.
Çalışmanın Amacı
- Akut böbrek hasarının incelenmesi için bir fare modelini geliştirmek.
- Renal iskemi-reperfüzyon indüksiyonu için güvenilir bir yöntemi göstermek.
- Böbrek hasarına yönelik terapötik müdahaleler üzerine yapılan araştırmaları kolaylaştırmak.
Kullanılan Yöntemler
- Prosedür için anestezi uygulanmış C57BL/6 erkek farelerin kullanımı.
- Sol böbreğe erişmek için cerrahi bir insizyon yapılması.
- İskemi oluşturmak için renal pedikülün klemplenmesi.
- İskemi göstergesi olarak böbrek renk değişiminin izlenmesi.
Temel Sonuçlar
- Böbrekteki görünür renk değişimi iskemiyi doğrulamıştır.
- Reperfüzyon sonrası kan üre azotu ve kreatinin serum seviyelerinde artış gözlemlenmiştir.
- Bu yöntem, akut böbrek hasarının indüklenmesi için tutarlı bir yaklaşım sağlar.
- Sonuçlar, terapötik stratejilerin daha fazla araştırılmasını desteklemektedir.
Sonuçlar
- Geliştirilmiş protokol, akut böbrek hasarı araştırmalarının güvenilirliğini artırmaktadır.
- Böbrek tedavileri üzerine yapılacak gelecek çalışmalar için bir temel oluşturmaktadır.
- Renal iskemi-reperfüzyonu anlamak, müdahale yöntemlerinin geliştirilmesi için kritik öneme sahiptir.
Sıkça Sorulan Sorular
Yönetici Endüstriyel Uygunluğu
Akut böbrek hasarının (AKI) güvenilir preklinik modelleri, erken terapötik hipotezlerin risklerini azaltmak ve kardiyak arrest sonrası renal patolojinin mekanik itici güçlerini netleştirmek için gereklidir. Bu geliştirilmiş bilateral renal iskemi-reperfüzyon fare modeli, AKI'nın tekrarlanabilir şekilde indüklenmesini ve miktarının belirlenmesini sağlayarak, hedef doğrulama ve translasyonel araştırmalarda prediktif güveni destekler. Standartlaştırılmış hasar protokolleri biyolojik değişkenliği azaltarak, nefroloji ilaç keşfinde güçlü portföy eleme ve ilerletme kararlarını kolaylaştırır.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Kardiyak arrest sonrası AKI ile ilgili renal hasar mekanizmalarının sorgulanmasını sağlar.
- Serum biyobelirteçleri aracılığıyla hasarı nicelendirerek fonksiyonel hedef doğrulamasını destekler.
- Kontrollü iskemi-reperfüzyon hasarı yoluyla mekanistik risk azaltmayı kolaylaştırır.
- Erken aşama nefroloji programları için öngörü güvenini artırır.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Aday müdahaleleri değerlendirmek için tekrarlanabilir bir in vivo sistem sağlar.
- Deney karşılaştırılabilirliği için yaralanma indüksiyonunu ve sonuç ölçümünü standartlaştırır.
- Bileşik taraması için kantitatif çıktılar (kan üre azotu, kreatinin) üretir.
- Preklinik iş akışlarında ölçeklenebilirliği ve çalışmalar arası tekrarlanabilirliği sağlar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Kardiyak arrest ve ROSC sonrası gözlemlenen klinik AKI patofizyolojisi ile uyumludur.
- Mekanistik keşiften preklinik etkinlik değerlendirmesine kadar olan sürekliliği destekler.
- Translasyonel açıdan ilgili son noktalar üzerinden nefroloji varlıklarının riskle ayarlanmış ilerlemesini sağlar.
- Gelecekteki klinik translasyon için biyobelirteç validasyonunu kolaylaştırır.
İşleme Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu model, mekanistik çalışmalar ile AKI müdahaleleri için translasyonel etkinlik testleri arasında köprü kurarak, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürecin içinde yer almaktadır.
- Keşif Biyolojisi: Böbrek hasarı mekanizmaları ve müdahale noktaları üzerindeki hipotez testlerini destekler.
- Tarama: Bileşik değerlendirmesi için standartlaştırılmış, kantitatif okumalar sağlar.
- Analitik: Serum belirteçleri aracılığıyla hasar şiddetinin ve terapötik etkinin istatistiksel karşılaştırmasına olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Biyobelirteç ve etkinlik doğrulaması için klinik olarak ilgili bir hasar modeli sunar.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Nefroloji araştırma portföyleri genelinde uygulanabilir bir protokol oluşturur.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: AKI araştırmalarında öngörü güvenini artırır ve mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: Preklinik renal hasar modellerinin tekrarlanabilirliğini ve standardizasyonunu geliştirir.
- Stratejik Değer: Nefroloji süreçlerinde devam/tamam kararlarına temel oluşturur ve kaynak tahsisini optimize eder.
- Portföy Etkisi: Renal terapötik adaylarının riskle ayarlanmış önceliklendirmesini ve ilerletilmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Küçük hayvan cerrahisi ve perioperatif bakım konularında uzmanlık gerektirir.
- Anesteziye, sıcaklık kontrolüne ve cerrahi enstrümantasyona erişim gerektirir.
- Ekipler arası tekrarlanabilirliği sağlamak için standardize edilmiş protokoller gereklidir.
- Farklı fare suşları veya yaralanma şiddetleri için adaptasyon gerekebilir.
- Güvenilir veri çıktıları sağlamak için mortalite ve değişkenlik yönetilmelidir.
