Akut Böbrek Hasarı Araştırmaları için Bilateral Renal İskemi-Reperfüzyon Fare Modelinin Teknik İyileştirilmesi
November 3rd, 2023
Bu çalışma, akut böbrek hasarı araştırmaları için bilateral renal iskemi-reperfüzyonun bir fare modelinin teknik olarak iyileştirilmesine odaklanan bir protokol oluşturdu.
Akut böbrek hasarı, dolaşımın geri dönüşünden sonra kardiyak arrest olan hastalarda yüksek mortalite ile ilişkili önemli bir risk faktörüdür. Bu prosedür akut böbrek hasarını indüklemek için yapılabilir. Bu protokol, renal iskemi reperfüzyonunu doğru, güvenli ve tutarlı bir şekilde indüklemektir.
Prosedürü gösteren, laboratuvarımdan bir asistan olan Huang Cheng-Wei olacak. Başlamak için, anestezi uygulanmış sekiz haftalık bir C57BL / 6 erkek fareyi, vücut ısısını korumak için elektrikli battaniyeli bir ameliyat platformuna yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Ardından, arkaya dokunun, lomber omurgayı bulun ve son kaburganın her iki tarafının altındaki costovertebral açıları arayın.
Tıraş etmek için epilasyon losyonu uygulayın ve costovertebral açı bölgesinin her iki tarafına yakın saçları ovalayın. Cerrahi bölgeyi bir Betadine solüsyonu ve pamuk topları kullanarak% 75 alkol kullanarak dezenfekte edin. Cildi sol costovertebral açının altına nazikçe kaldırmak için ince uçlu forseps kullanın.
Daha sonra makas kullanarak sol kanatta lomber orta hattan cilt gerginlik çizgileri boyunca bir santimetre eğik dorsolateral kesi oluşturun. Ardından, sol böbreği görselleştirmek için sol kanadın kas duvarını kesin. Sol böbreği forseps ile çevre dokudan dikkatlice itin ve ayırın.
Ardından, böbrek pedikülünü tanımlayın. Sol renal pedikülü mikrovasküler bir klipsle sıkıştırın. Böbrek renginde pembeden koyu kırmızıya gözle görülür bir değişiklikle iskemiyi doğrulayın.
Sıkıştırma sırasında kurumayı önlemek için, böbreği steril tuzlu suyla ıslak pamuk topları ile örtün. 25 dakika sonra, sol böbreğin reperfüzyonunu başlatmak için sol mikrovasküler klipsi açın. Böbreği karın boşluğuna geri getirin.
Karın boşluğunu 6/0 emilebilir dikiş materyalleri ile kapatın. Serbestçe hareket etmeye ve beslenmeye başlayana kadar fareyi gözlemleyin. Renal pedikül klemplemesi sonrası renal iskemi burada gösterilmiştir.
Böbrek renginin pembeden koyu kırmızıya doğru değişmesi, böbrek perfüzyonunun yetersiz hale geldiğini ortaya koymaktadır. Kontrollerle karşılaştırıldığında, renal reperfüzyondan iki gün sonra serum kan üre azotu ve kreatinin düzeyleri arttı. Bu teknik, araştırmacıların akut böbrek hasarına karşı yeni terapötik yaklaşımları keşfetmeleri için bir yol açmaktadır.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Genel Bakış
Bu çalışma, akut böbrek hasarı araştırması için bilateral renal iskemi-reperfüzyonun bir fare modelinin teknik olarak rafine edilmesine odaklanan bir protokol oluşturmuştur. Prosedür, akut böbrek hasarını doğru ve tutarlı bir şekilde indüklemayı amaçlamaktadır.
Çalışmanın Temel Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nefroloji
- Akut böbrek hasarı
- Hayvan modelleri
Arka Plan
- Akut böbrek hasarı, kardiyak arrest sonrası hastalar için yüksek mortalite riskidir.
- Çalışma, akut böbrek hasarına yol açan bir yöntem olarak renal iskemi-reperfüzyona odaklanmaktadır.
- Bu süreci anlamak yeni tedavi yaklaşımlarına yol açabilir.
- Protokol, renal hasarı indüklemekte doğruluk ve güvenliği amaçlamaktadır.
Çalışmanın Amacı
- Akut böbrek hasarını incelemek için bir fare modelini rafine etmek.
- Renal iskemi-reperfüzyonu indüklemeye yönelik güvenilir bir yöntemi göstermek.
- Böbrek hasarı için terapötik müdahaleler üzerine araştırmayı kolaylaştırmak.
Kullanılan Yöntemler
- Prosedür için anestezi altındaki C57BL/6 erkek farelerin kullanılması.
- Sol böbreye erişmek için cerrahi bir insizyon yaratılması.
- Iskemi indüklemek için renal pedikülün sıkıştırılması.
- Iskemiyi gösterge olarak böbreğin renk değişikliğini izlemek.
Ana Sonuçlar
- Böbrekte görülen renk değişikliği iskemiyi doğrulamıştır.
- Reperfüzyon sonrası kan üre azotu ve kreatinin seviyelerinde artış gözlenmiştir.
- Yöntem, akut böbrek hasarını indüklemeye yönelik tutarlı bir yaklaşım sağlamaktadır.
- Sonuçlar, terapötik stratejilerin daha fazla araştırılmasını desteklemektedir.
Sonuçlar
- Rafine edilmiş protokol, akut böbrek hasarı araştırmasının güvenilirliğini artırmaktadır.
- Böbrek tedavileri üzerine gelecekteki çalışmalar için temel sağlamaktadır.
- Renal iskemi-reperfüzyonu anlamak, müdahaleler geliştirmek için kritik öneme sahiptir.
Sıkça Sorulan Sorular
Executive Industry Relevance
Reliable preclinical models of acute kidney injury (AKI) are essential for de-risking early therapeutic hypotheses and clarifying mechanistic drivers of renal pathology following cardiac arrest. This refined bilateral renal ischemia-reperfusion mouse model enables reproducible induction and quantification of AKI, supporting predictive confidence in target validation and translational research. Standardized injury protocols reduce biological variability, facilitating robust portfolio triage and advancement decisions in nephrology drug discovery.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of renal injury mechanisms relevant to post-cardiac arrest AKI.
- Supports functional target validation by quantifying injury via serum biomarkers.
- Facilitates mechanistic de-risking through controlled ischemia-reperfusion injury.
- Improves predictive confidence for early-stage nephrology programs.
Screening & Assay Development
- Provides a reproducible in vivo system for evaluating candidate interventions.
- Standardizes injury induction and outcome measurement for assay comparability.
- Generates quantitative outputs (blood urea nitrogen, creatinine) for compound screening.
- Enables scalability and cross-study reproducibility in preclinical workflows.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with clinical AKI pathophysiology observed after cardiac arrest and ROSC.
- Supports continuity from mechanistic discovery to preclinical efficacy assessment.
- Enables risk-adjusted advancement of nephrology assets based on translationally relevant endpoints.
- Facilitates biomarker validation for future clinical translation.
Pipeline & Workflow Integration
This model positions within the discovery-to-preclinical continuum, bridging mechanistic studies and translational efficacy testing for AKI interventions.
- Discovery Biology: Supports hypothesis testing on renal injury mechanisms and intervention points.
- Screening: Delivers standardized, quantitative readouts for compound evaluation.
- Analytics: Enables statistical comparison of injury severity and therapeutic effect via serum markers.
- Translational Research: Provides a clinically relevant injury model for biomarker and efficacy validation.
- Enterprise Reuse: Establishes a protocol adaptable across nephrology research portfolios.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in AKI research.
- Operational Value: Enhances reproducibility and standardization of preclinical renal injury models.
- Strategic Value: Informs go/no-go decisions and optimizes resource allocation in nephrology pipelines.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization and advancement of renal therapeutic candidates.
Implementation Considerations
- Requires expertise in small animal surgery and perioperative care.
- Demands access to anesthesia, temperature control, and surgical instrumentation.
- Necessitates standardized protocols for cross-team reproducibility.
- Adaptation may be needed for different mouse strains or injury severities.
- Mortality and variability must be managed to ensure reliable data outputs.
