Name: Değiştirilmiş elektriksel aktiviteye maruz kalan bireysel canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesinin gerçek zamanlı ve tekrarlanan ölçümü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-16T14:10:00.000+00:00
Duration: 11 min 41 s
Description: Öğrenin, canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesini gerçek zamanlı ölçme yöntemini. Konfokal mikroskopi ve elektriksel stimülasyon kullanılarak kas gelişimi detaylı şekilde incelenir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Yazarlar, Hughes laboratuvar üyeleri Dr. Seetharamaiah Attili, Jana Koth, Fernanda Bajanca, Victoria C. Williams, Yaniv Hinits, Giorgia Bergamin ve Vladimir Snetkov'un açıklanan protokollerin geliştirilmesi için ve Henry Roehl, Christina Hammond, David Langenau ve Peter Currie'nin plazmidleri veya zebra balığı çizgilerini paylaşma çabalarına derinden borçludur. SMH, Program Hibe G1001029, MR / N021231 / 1 ve MR / W001381 / 1 desteğine sahip bir Tıbbi Araştırma Konseyi (MRC) Bilim Adamıdır. Yüksek Lisans, King's College London'dan MRC Doktora Eğitim Programı Doktora Öğrencisi olarak görev yaptı. Bu çalışma, akademisyen, akıl hocası ve arkadaşı David M. Robinson'un trigonometrik girdilerinden yararlandı.

Yazarlar rakip çıkarlar olmadığını beyan ederler.

Burada, pigmentasyonun görüntülemeye büyük bir engel teşkil etmediği ve geçici anestezi ve/veya immobilizasyonun iyi tolere edildiği aşamalarda veya genetik varyantlarda canlı zebra balığı larvalarının kas hacminin doğru ve etkili bir şekilde tahmin edilmesi için bir yöntem sunuyoruz. Lazer taramalı konfokal mikroskopiyi kullanmış olsak da, açıklanan yaklaşımlar dönen disk konfokal veya ışık tabakası mikroskobu ve farklı odak düzlemlerinde görüntü yığınları oluşturan diğer yöntemlere uygulanabilir. Doku boyutu ve hücre i...

Hücre sayısındaki (hiperplazi) ve / veya hücre boyutundaki (hipertrofi) artışı içeren düzenlenmiş doku büyümesi, gelişim, rejenerasyon ve ekolojik ve evrimsel adaptasyonda çok önemli bir faktördür. Son yıllarda hem hücre hem de gelişim biyolojisinin moleküler genetik anlayışındaki büyük ilerlemelere rağmen, doku ve organ büyüklüğünün düzenlenmesine ilişkin mekanik anlayış hala emekleme aşamasındadır. Bilgideki bu lakunanın bir nedeni, canlı organizmalardaki doku büyümesini gerekli mekansal ve zamansal doğrulukla ölçmenin zorluğudur.
Tüm organizmaların büyümesinin çeşitli yönleri zaman içinde tekrar tekrar ölçülebilir ve her birbirey için büyüme eğrileri ortaya çıkar 1,2,3,4,5. Çift X-ışını absorpsiyometrisi (DXA), bilgisayarlı tomografi (BT) ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG) gibi giderek daha sofistike hale gelen tarama yöntemleri, hem insan hem de model organizmalarda tek bireylerde tüm organların ve diğer vücut bölgelerinin (örneğin, bireysel olarak tanımlanmış iskelet kasları) büyümesinin izlenmesine izin verir 6,7,8,9,10 . Bununla birlikte, bu yöntemler henüz bireysel hücreleri ortaya çıkarma çözünürlüğüne sahip değildir ve bu nedenle hücresel davranışlar ile doku seviyesi büyümesi arasındaki bağlantıları ayırt etmek zor olmuştur. Bu tür bağlantılar kurmak için, geleneksel çalışmalar genellikle benzer bireysel hayvanların kohortlarına güvenmiştir; bunlardan birkaçı ardışık zaman noktalarında kurban edilir ve daha sonra sitolojik ayrıntılarla analiz edilir. Bu tür yaklaşımlar, (tercihen benzer, ancak yine de değişken) birey grupları arasında gözlemlenen değişikliklerin ortalamasını almayı gerektirir ve bu nedenle zamansal ve mekansal çözünürlük eksikliğinden muzdariptir, bu da hücresel düzeyde neden-sonuç düşündüren korelasyonlu olayları bulmayı zorlaştırır.
Başlangıçta C. elegans ve D. melanogaster'de omurgasız model organizmalar üzerine yapılan çalışmalar, hücresel çözünürlük elde etmek ve tek bireylerde zaman içindeki büyümeyi doğru bir şekilde ölçmek için optik mikroskopi geliştirerek bu sorunları aşmıştır. Bu tür çalışmalar, bu küçük model organizmaların büyümesinde çarpıcı bir şekilde değişmez hücre soy davranışlarını ortaya koymuştur 11,12,13,14,15,16,17. Bununla birlikte, tüm omurgalılar da dahil olmak üzere birçok hayvan, belirsiz hücre soylarına sahiptir ve genetik olarak kodlanmış büyüme programını, tüm kurucu dokuları ve organları uygun şekilde eşleşen işlevsel üç boyutlu bir organizmaya dönüştürmeye yarayan gizemli geri bildirim süreçleriyle doku büyümesini kontrol eder. Bu karmaşık büyüme süreçlerini anlamak için, seçim zamanında genetik, farmakolojik veya diğer müdahalelerle deneysel olarak manipüle edilebilen ve daha sonra analiz edilen etki olan tek bireylerde zaman içinde tüm dokuların veya organların görüntülenmesi arzu edilir.
Her omurgalı iskelet kası tanımlanmış bir boyuta, şekle ve işleve kemik, tendon ve sinirler gibi bitişik dokularla iyi karakterize edilmiş etkileşimlere sahiptir. Bazı kaslar küçüktür, cildin hemen altında bulunur ve bu nedenle yüksek çözünürlüklü görüntüleme çalışmaları için iyi adaylardır. Çoğu organa benzer şekilde, her kas stabil bir yetişkin boyutuna ulaşmadan önce embriyonik, doğum sonrası ve genç yaşam boyunca büyür. Bununla birlikte, kas, yetişkin yaşamı boyunca, kullanıma ve beslenmeye bağlı olarak boyut değiştirme konusunda benzersiz bir yeteneğe sahiptir18 ve bu özelliğin organizma zindeliği, spor performansı ve bağımsız yaşam üzerinde büyük bir etkisi vardır. Yaşlılıkta kas kütlesi ve fonksiyon kaybı, sarkopeni, yaşlanan bir nüfusla karşı karşıya kalan toplumlar için artan bir endişe konusudur 19,20,21.
Biz ve diğerleri, zebra balığı larvalarının segmental olarak tekrarlayan gövdesinde, doku büyümesinin, bakımının ve onarımının gözlemlenebileceği ve manipüle edilebileceği birkaç yüz hücre içeren görünüşte kapalı bir sistem olarak tanımlanmış iskelet kas dokusu bloklarının büyümesine odaklandık22,23,24,25,26. Bazı nicel çalışmalar daha önce 25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35 olarak bildirilmiş olsa da, zaman içinde bireysel omurgalı organizmalarda hücresel detaylarda kas büyümesini ölçmek için ayrıntılı ve doğrulanmış bir yöntem mevcut değildir. Burada, bu tür tekrarlanan ölçümlerin nasıl yapılacağına dair etkili bir protokol, doğrulama ile birlikte tanımlanmıştır ve değiştirilmiş elektriksel aktiviteye yanıt olarak hem hipertrofik hem de hiperplastik büyümedeki değişiklikleri analiz etmek için kullanımının bir örneği verilmiştir.

<table><tbody><tr><td>Yapıştırıcı, Blu Tack</td><td>Bostik</td> <td>-</td><td></td></tr> <tr><td>Aerosol vakum&nbsp;</td><td>-</td><td>-</td><td>Agarose</td></tr> <tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9539-Agaroz</td><td></td></tr><tr><td>, düşük jelleşme sıcaklığı</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9414</td><td>Eridikten sonra, tekrarlanan kullanım için sıvı halde kalması için bir blok ısıtıcıda 37oC'de tutun.</td></tr><tr><td>Blok ısıtıcı</td><td>Cole-Parmer</td><td>SBH130-BODIPY</td><td></td></tr> <tr><td>FL C5-seramid</td><td>Thermo Scientific</td><td>D3521</td><td>Balık suyunda seyreltilmek ve 5 && mikro'da kullanılmak üzere; Gece boyunca inkübasyon için M.</td></tr><tr><td>Timsah klipsleri ve</td> <td>telleri-</td><td>-</td><td></td></tr><tr><td>Fiji/imageJ</td><td>Ulusal Sağlık Enstitüleri, NIH</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Balık ortamı, Balık suyu-</td><td></td><td>-</td><td>Balık tesisinden toplanan sirkülasyon sistemi suyu.</td></tr><tr><td>Balık ortamı, E3 ortamı</td> <td>-</td><td></td> <td>E3, Zebra Balığı Kitabı'nda açıklanmıştır. http://zfin.org (5 mM NaCl, 0.17 mM KCl, 0.33 mM CaCl<alt>2</alt> ve 0.33 mM MgSO<alt>4 </alt>damıtılmış suda).</td></tr><tr><td>Floresan mikroskobu</td><td>Leica</td><td>Leica MZ16F</td><td>Diğer tür floresan mikroskobunun da uygun olması bekleniyor.</td></tr><tr><td>Cam iğne</td><td>Dünya Hassas Aletler, Inc.</td><td>1B100-6</td><td>Manipülasyon sırasında embriyoların zarar görmesini önlemek için ateşle parlatılmalıdır.</td></tr><tr><td>Çim stimülatörü</td><td>Çim Aletleri</td><td>S88</td><td>Diğer tür stimülatörlerin de uygun olması beklenmektedir.</td></tr><tr><td>Kimwipes, Hassas Görev Silecekleri</td><td>Kimberly-Clark Professional</td><td></td> <td>13258179-Lazer</td></tr> <tr><td>tarama mikroskobu (LSM)&nbsp;</td><td>Zeiss</td><td>Zeiss LSM 5 Exciter Diğer tür Zeiss LSM 880</td><td>LSM'nin de uygun olması bekleniyor.</td></tr><tr><td>Nunc Hücre Kültürü İşlemli, 6 oyuklu plaka</td><td>Thermo Scientific</td><td></td> <td>140675-Objektif</td></tr><tr><td>, 20 kez;/1.0W suya daldırma</td><td>Zeiss</td> <td>-</td><td></td></tr> <tr><td>Pasteur Pipeti, Dereceli 1 mL</td><td>Starlab Grubu</td><td>E1414-0100-Pastör</td><td></td></tr> <tr><td>Pipeti, Mikro İnce Uç 1 mL</td><td>Starlab Grubu</td><td>E1414-1100-Petri</td><td></td></tr> <tr><td>kabı, 60 mm</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P5481</td><td>-</td></tr><tr><td>Plazmid, CMV-Gök Mavisi</td><td>Christina L. Hammond (Bristol Üniversitesi)</td><td></td> <td>pCS2+_cerulean_kanR plazmit, tek hücre aşamasında 25-75 pg'de enjekte edilir. Alıntı: Bussman J ve Schulte-Merker S. (2011) Geliştirme 138: 4327-4332. doi: 10.1242/dev.068080.</td></tr><tr><td>Plazmid, pCS-mCherry-CAAX</td><td>Henry Roehl (Sheffield Üniversitesi)</td><td>-</td><td>SP6 promotörü kullanılarak in vitro transkripsiyon için (diğer membran etiketleme işaretleyicilerini içeren plazmitler kullanılabilir); sentezlenmiş kapaklı mRNA, tek hücreli aşamada 100-200 pg'de enjekte edilecek.</td></tr><tr><td>Nabız Kontrol Cihazı&nbsp;</td><td>Hoefer Scientific Instruments</td><td>PC750-Havya</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>-</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Tricaine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E10521</td><td>Etil 3-aminobenzoat metansülfonat / MS-222; balık suyunda çözülür ve 0.6 mM'de kullanılır.</td></tr><tr><td>Volocity</td><td>Perkin Elmer/Quorum Technologies Inc</td><td>-</td><td>-</td></tr><tr><td>Saatçi forseps, No. 5</td><td></td>-<td></td><td>-</td></tr><tr><td>Tel, Platin</td><td>Goodfellow</td><td>PT005142/12</td><td>0.40 mm çapında; Gümüşün pahalı bir alternatifi.</td></tr><tr><td>Tel, Silver</td><td>Acros Organics</td><td>317730010</td><td>0.25 mm çapında (0.25-0.5 mm gibi bir çap aralığı test edildi, bu da benzer sonuçlar verdi).</td></tr><tr><td>Zebra balığı, myog:H2B-mRFP</td><td>David M. Langenau (Massachusetts Genel Hastanesi; Harvard Kök Hücre Enstitüsü)</td><td>-</td><td>ZFIN resmi adı: Tg(myog:Hsa.HIST1H2BJ-mRFP), fb121Tg.&nbsp; http://zfin.org/ZDB-ALT-160803-2&nbsp; Alıntı: Tang Q, Moore JC, Ignatius MS, Tenente IM, Hayes MN, Garcia EG, Torres Yord&aacute; n N, Bourque C, He S, Blackburn JS, Look AT, Houvras Y, Langenau DM. Optik olarak açık bağışıklık eksikliği olan zebra balığına hücre naklini takiben tümör hücresi heterojenliğinin görüntülenmesi. Nat Komün. 2016 Ocak 21;7:10358. doi: 10.1038/ncomms10358.</td></tr><tr><td>Zebra balığı, &alpha;-actin:mCherry-CAAX</td><td>Peter D. Currrie (ARMI, Monash Üniversitesi)</td><td>-</td><td>ZFIN resmi adı: Tg(actc1b:mCherry-CAAX), pc22Tg.&nbsp; http://zfin.org/ZDB-ALT-150224-2 Alıntı: Berger J, Tarakci H, Berger S, Li M, Hall TE, Arner A ve Currie PD. Zebra balığı mutantında Tropomodulin4 kaybı tr&auml; GE, nemalin miyopatisini anımsatan sitoplazmik çubuk oluşumuna ve kas güçsüzlüğüne neden olur. Dis Model Mech. 2014 Aralık; 7(12):1407-15. doi: 10.1242/dmm.017376.</td></tr><tr><td>Zebra balığı, &beta;-aktin:HRAS-EGFP</td><td>-</td><td>-</td><td>ZFIN resmi adı: Tg(Ola.Actb:Hsa.HRAS-EGFP), vu119Tg. http://zfin.org/ZDB-ALT-061107-2&nbsp; Alıntı: Cooper MS, Szeto DP, Sommers-Herivel G, Topczewski J, Solnica-Krezel L, Kang HC, Johnson I ve Kimelman D. GFP için hayati bir karşı leke olarak BODIPY TR metil ester boyası kullanarak transgenik zebra balığı embriyolarında morfogenezin görselleştirilmesi. Dev Dyn. 2005 Şubat; 232(2):359-68. doi: 10.1002/dvdy.20252.</td></tr><tr><td>ZEN yazılımı</td><td>Zeiss</td><td>-</td><td>-</td></tr></tbody></table>

değiştirilmiş elektriksel aktiviteye maruz kalan bireysel canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesinin gerçek zamanlı ve tekrarlanan ölçümü

Real Time and Repeated Measurement of Skeletal Muscle Growth in Individual Live Zebrafish Subjected to Altered Electrical Activity

Canlı embriyonik, larva veya yavru zebra balıklarının vücudundaki bireysel hücreleri görselleştirmek için bir dizi yöntem kullanılabilir. Floresan işaretli plazma zarlarına sahip canlı balıkların, kas dokusunun hacmini ve mevcut kas liflerinin sayısını belirlemek için konfokal lazer tarama mikroskobunda taranabileceğini gösteriyoruz. Canlı hayvanlarda zaman içinde hücre sayısı ve büyüklüğünün ölçülmesi için etkili yaklaşımlar tanımlanmış ve daha zorlu segmentasyon yöntemlerine karşı doğrulanmıştır. Kas elektriksel ve dolayısıyla kasılma aktivitesinin kontrolüne izin veren yöntemler açıklanmaktadır. İskelet kası kasılma aktivitesinin kaybı, kas büyümesini büyük ölçüde azaltmıştır. Larvalarda, desenli elektriksel uyarılmış kontraktil aktivitenin yeniden sokulmasına izin veren bir protokol açıklanmaktadır. Açıklanan yöntemler, bireyler arası değişkenliğin etkisini en aza indirir ve elektriksel, genetik, ilaç veya çevresel uyaranların canlı organizma bağlamında çeşitli hücresel ve fizyolojik büyüme parametreleri üzerindeki etkisinin analizine izin verecektir. Tanımlanmış bir erken yaşam müdahalesinin bireyler üzerindeki ölçülen etkilerinin uzun süreli takibi daha sonra yapılabilir.

Somit hacminin hızlı ve hassas bir ölçümü Zebra balığı larvalarında kas büyümesinin hızlı bir şekilde ölçülmesini sağlayan bir numune hazırlama, veri toplama ve hacimsel analiz yöntemi açıklanmaktadır. Kas büyüklüğü, plazma zarlarında membran hedefli GFP (β-aktin:HRAS-EGFP ) veya mCherry (α-aktin:mCherry-CAAX ) ile etiketlenmiş balıklar kullanılarak canlı hayvanlarda ölçülebilir. Larvalar trikain kullanılarak geçici olarak uyuşturuldu, düşük erime noktalı agaroza monte edildi ve konf...

Optik berraklık, zebra balıklarında hücre biyolojik ve fizyolojik çalışmaları için önemli bir avantajdır. Bireysel hayvanlarda hücre büyümesinin ölçülmesi için sağlam yöntemler, iskelet kasının ve komşu dokuların büyümesinin tüm vücut büyümesiyle nasıl bütünleştiğine dair yeni bilgiler sağlayan tanımlanmıştır.

Değiştirilmiş elektriksel aktiviteye maruz kalan bireysel canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesinin gerçek zamanlı ve tekrarlanan ölçümü

A number of methods can be used to visualize individual cells throughout the body of live embryonic, larval or juvenile zebrafish. We show that live fish ...

Protokolümüz, iskelet kası gibi dokuların boyutlarını nasıl düzenlediğini incelememize izin verir, bu da önemli fizyolojik ve tıbbi etkileri olan hücre ve gelişim biyolojisinde kilit bir soru olmaya devam etmektedir. Tekniğimizin temel avantajı, hücresel büyümenin canlı hayvanlarda in vivo olarak yüksek derecede mekansal ve zamansal doğrulukla gözlemlenebilmesi ve ölçülebilmesidir. Erken kas büyümesinin temel anlayışındaki ilerleme, erken kas problemlerinin gelişimsel kökenlerini vurgulayabilir ve yaşlılarda ve kas israfı bozukluğu olan hastalarda kas kaybına karşı korunmak için Novo Therapeutics'in keşfine yol açabilir.1,5 mililitrelik bir tüpte% 1 LMA hazırlayın ve tekrarlanan kullanım için 37 santigrat derecelik bir ısı bloğunda tutun. Monte edilecek balıkları seçin ve her balığı geçici olarak uyuşturun. Isı şokunu önlemek için, LMA aliquot'u ısı bloğundan çıkarın ve ayarın hemen üstüne soğumaya bırakın.% 1'lik bir LMA tabakası ile kaplanmış 60 mililitrelik bir Petri kabı alın ve diseksiyon mikroskobunun sahnesine yerleştirin. Larvaları bir mililitrelik plastik Pasteur pipetle 60 milimetre kaplı bir Petri kabına aktarın ve mümkün olduğunca fazla transfer edilen ortamı çıkarın. D

real-time-repeated-measurement-skeletal-muscle-growth-individual-live

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Gelişim Biyolojisi

Bu video, felçli bir zebra balığı larvasındaki afferent nöronlardan gelen elektrik sinyallerinin, lateral hat ganglionunun yakınına bir mikropipet yerleştirerek ve sinyal yakalama için gevşek bir conta oluşturarak kaydedilmesini göstermektedir. Hücre dışı çözelti, bu işlem sırasında nöronal canlılığı korur.

İmmobilize Bir Zebra Balığı Larvasında Afferent Nöronlardan Gelen Elektrik Sinyallerinin İzlenmesi

Larva zebrafish önbeyin ekstrasellüler alanın potansiyellerini kaydetmek için basit bir yöntem tarif edilmiştir. Yöntem, bir sağlam...

Larva Zebra balığı olarak önbeyin Elektrofizyolojik Kaydı

Zebra balığı iskelet kası bozuklukları insan modellemek için ortaya çıkan bir sistemdir. Biz embriyonik ve larva zebrafish iskelet kası myofibers izole etmek için hızlı ve etkili bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, tek bir iskelet kas lifi morfolojisi çalışma için uygun olan yüksek yoğunluklu miyofiberde oluşan hazırlama, protein hücre içi lokalizasyonu ve kas fizyolojisi verir.

Disosiye Müstahzarlar gelen Embriyonik ve larval Zebra balığı İskelet myofibers Analizi

Kuvvet ölçümleri geliştirme, yaralanma, hastalık, tedavi ya da kimyasal toksisite nedeniyle kas fonksiyonu değişiklikleri göstermek için kullanılabilir. Bu video, Zebra balığı larva gövde kas bir maksimal kasılma sırasında güç ölçmek için bir yöntem ortaya koymaktadır.

Zebra balığı Larva kas fonksiyonu değerlendirmek için daralma sırasında Kuvvet Ölçümü

Zebra balığı artık kas distrofilerini, konjenital miyopatileri ve ilgili nöromüsküler hastalıkları modellemek için yerleşik ve güçlü bir araçtır. Çift kırılma ve dokunma ile uyarılmış kaçış davranışı, zebra balığı embriyolarının erken gelişim sırasında kas düzensizliği ve lokomotif bozukluğunun derecesini belirlemek için kullanılan iki yaygın noninvaziv testtir.

Larva Zebra Balıklarında İskelet Kası Defektlerinin Bikırılma ve Dokunma-Uyandırma Kaçış Yanıtı Deneyleri ile Analizi

Bu çalışma, bir yetişkin zebra balığı, hareketsiz entübe ve kayıtları ve bozulmamış bir hayvanda nöral faaliyet işleme izin vermek için in vivo elektrofizyolojik deneyler için nasıl kullanılabileceğini açıklar.

Sağlam Yetişkin Zebra balığı Beyin Elektrofizyolojik Kayıt

Zebra balığı, kas fonksiyonlarını ve hastalıklarını incelemek için mükemmel bir modeldir. Erken embriyogenez sırasında zebra balığı düzenli kas kasılmalarına başlar ve ritmik yüzme davranışı üretir ve bu da kas bozulduğunda değişir. Burada, yüzme performansını kas fonksiyonunun bir ölçüsü olarak incelemek için dokunma ile uyarılmış bir tepki ve hareket testini açıklıyoruz.

Dokunmatik uyarılmış Yanıt ve Hareket Deneyleri kullanarak Zebra balığı kas Performans ve fonksiyonunu değerlendirmek için

Burada açıklanan protokoller, zebra balığı embriyolarını in vivo bir sistemde kullanarak, ilgilenilen hücre tipinde seçici olarak ifade edilen bir floresan rezonans enerji transferi (FRET) tabanlı genetik olarak kodlanmış voltaj göstergesi (GEVI) ile birlikte uyarılabilir hücrelerin elektriksel özelliklerinin incelenmesine izin verir.

Canlı Zebra balığı Embriyolarında Biosense Motor Nöron Membranı Potansiyeli

Burada, bir hücresel elektrik voltaj muhabir Zebra balığı çizgi embriyonik gelişim, hareket, görselleştirmek için oluşturma sürecini göstermek ve in vivobalık tümör hücreleri.

Zebra balığı erken embriyo ve tümör hücresel elektrik aktivitesinin görselleştirme

İskelet kas rejenerasyonu, kas distrofisi gibi birçok kas hastalığında bozulan doku yerleşik kas kök hücreleri tarafından yönlendirilir ve bu da kasın yenilenememesi ile sonuçlanır. Burada, kas hastalığının zebra balığı modellerinde kas yenilenmesinin incelenmesini sağlayan bir protokol açıklıyoruz.

Kas Hastalığının Zebra Balığı Modellerinde Kas Yenilenmesinin İncelenmesi

Zebra balığı larva nöromüsküler kavşağı, sinaptik fizyolojiyi incelemek için çekici bir modeldir. Elektrofizyoloji ve optik görüntüleme dahil olmak üzere birçok deneysel tekniğe uygundur. Burada, dik bir epifloresan mikroskobu altında pHluorin bazlı bir prob kullanarak sinaptik iletimi görüntülemek için bir protokol açıklıyoruz.

Diseke Larva Zebra Balığının Nöromüsküler Kavşağında Sinaptik Vezikül Geri Dönüşümünün Canlı Görüntülenmesi

Öğrenin, canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesini gerçek zamanlı ölçme yöntemini. Konfokal mikroskopi ve elektriksel stimülasyon kullanılarak kas gelişimi detaylı şekilde incelenir.

Değiştirilmiş elektriksel aktiviteye maruz kalan bireysel canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesinin gerçek zamanlı ve tekrarlanan ölçümü (Video) | JoVE Journal

Değiştirilmiş elektriksel aktiviteye maruz kalan bireysel canlı zebra balıklarında iskelet kası büyümesinin gerçek zamanlı ve tekrarlanan ölçümü

Daha fazla video keşfet