Name: Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelesi için Mikrojel Yapı Taşlarının Mikroakışkan Sentezi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-16T14:40:00.000+00:00
Duration: 9 min 34 s
Description: Öğrenin mikroakışkan yöntemle mikrojel yapı taşları sentezleme ve mikro gözenekli tavlanmış partikül iskeleleri oluşturma. Bu yüksek verimli teknik rejeneratif tıp uygulamalarında doku bütünleşmesini iyileştirir.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazarlar, Joe de Rutte'ye ve Los Angeles'taki Kaliforniya Üniversitesi'ndeki Di Carlo Laboratuvarı'na, rapor edilen cihazın geliştirildiği orijinal mikroakışkan cihaz tasarımına ve PDMS cihaz üretimi ve sorun giderme konusundaki erken rehberliklerine ilişkin yardımları için teşekkür etmek istiyor. Şekil şemaları Biorender.com ile oluşturulmuştur.

<ol><li>Griffin, D. R., Weaver, W. M., Scumpia, P. O., di Carlo, D., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+wound+healing+by+injectable+microporous+gel+scaffolds+assembled+from+annealed+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Accelerated wound healing by injectable microporous gel scaffolds assembled from annealed building blocks.</a> Nature Materials. 14 (7), 737-744 (2015).</li>
<li>Koh, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+in+vivo+delivery+of+stem+cells+using+microporous+annealed+particle+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Enhanced in vivo delivery of stem cells using microporous annealed particle scaffolds.</a> Small. 15 (39), 1903147(2019).</li>
<li>Pruett, L. J., Jenkins, C. H., Singh, N. S., Catallo, K. J., Griffin, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparin+microislands+in+microporous+annealed+particle+scaffolds+for+accelerated+diabetic+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Heparin microislands in microporous annealed particle scaffolds for accelerated diabetic wound healing.</a> Advanced Functional Materials. 31 (35), 2104337(2021).</li>
<li>Darling, N. J., Sideris, E., Hamada, N., Carmichael, S. T., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+and+spatially+patterned+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+hydrogels+for+tissue+repair+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Injectable and spatially patterned microporous annealed particle (MAP) hydrogels for tissue repair applications.</a> Advanced Science. 5 (11), 1801046(2018).</li>
<li>Isaac, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microporous+bio-orthogonally+annealed+particle+hydrogels+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Microporous bio-orthogonally annealed particle hydrogels for tissue engineering and regenerative medicine.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 5 (12), 6395-6404 (2019).</li>
<li>Pruett, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+microporous+annealed+particle+hydrogel+for+long-term+vocal+fold+augmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Development of a microporous annealed particle hydrogel for long-term vocal fold augmentation.</a> Laryngoscope. 130 (10), 2432-2441 (2020).</li>
<li>Nih, L. R., Sideris, E., Carmichael, S. T., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+microporous+annealing+particle+%28MAP%29+hydrogels+in+the+stroke+cavity+reduces+gliosis+and+inflammation+and+promotes+NPC+migration+to+the+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Injection of microporous annealing particle (MAP) hydrogels in the stroke cavity reduces gliosis and inflammation and promotes NPC migration to the lesion.</a> Advanced Materials. 29 (32), (2017).</li>
<li>Griffin, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activating+an+adaptive+immune+response+from+a+hydrogel+scaffold+imparts+regenerative+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Activating an adaptive immune response from a hydrogel scaffold imparts regenerative wound healing.</a> Nature Materials. 20 (4), 560-569 (2021).</li>
<li>Sideris, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+hydrogels+based+on+hyaluronic+acid+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Particle hydrogels based on hyaluronic acid building blocks.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 2 (11), 2034-2041 (2016).</li>
<li>Schaeffer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+microannealed+porous+scaffold+for+articular+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Injectable microannealed porous scaffold for articular cartilage regeneration.</a> Annals of Plastic Surgery. 84, 6S Suppl 5 446-450 (2020).</li>
<li>Pruett, L., Ellis, R., McDermott, M., Roosa, C., Griffin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+heterogeneous+epidermal+growth+factor+release+from+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+hydrogel+for+improved+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Spatially heterogeneous epidermal growth factor release from microporous annealed particle (MAP) hydrogel for improved wound closure.</a> Journal of Materials Chemistry B. 9 (35), 7132-7139 (2021).</li>
<li>Jivan, F., Alge, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bio-orthogonal%2C+site-selective+conjugation+of+recombinant+proteins+to+microporous+annealed+particle+hydrogels+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bio-orthogonal, site-selective conjugation of recombinant proteins to microporous annealed particle hydrogels for tissue engineering.</a> Advanced Therapeutics. 3 (1), 1900148(2020).</li>
<li>de Rutte, J. M., Koh, J., di Carlo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+high-throughput+production+of+modular+microgels+for+in+situ+assembly+of+microporous+tissue+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Scalable high-throughput production of modular microgels for in situ assembly of microporous tissue scaffolds.</a> Advanced Functional Materials. 29 (25), 1900071(2019).</li>
<li>Pfaff, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+and+improved+photoannealing+of+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Selective and improved photoannealing of microporous annealed particle (MAP) scaffolds.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 7 (2), 422-427 (2021).</li>
<li>Darling, N. J., Hung, Y. S., Sharma, S., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+the+kinetics+of+thiol-maleimide+Michael-type+addition+gelation+kinetics+for+the+generation+of+homogenous+poly%28ethylene+glycol%29+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Controlling the kinetics of thiol-maleimide Michael-type addition gelation kinetics for the generation of homogenous poly(ethylene glycol) hydrogels.</a> Biomaterials. 101, 199-206 (2016).</li>
<li>Sandell, J. L., Zhu, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+in-vivo+optical+properties+of+human+tissues+and+its+impact+on+PDT%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">A review of in-vivo optical properties of human tissues and its impact on PDT.</a> Journal of Biophotonics. 4 (11-12), 773-787 (2011).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacağı bir çıkar çatışması yoktur.

Bu protokol, mikro gözenekli tavlanmış parçacık (MAP) iskeleleri için yapı taşları görevi gören mikrojellerin sentezlenmesi ve karakterize edilmesi için yöntemleri açıklar. Bu protokol, akış odaklı mikroakışkanlar 1,4,7,9 (yüksek monodisperisti, düşük verim), parti emülsiyonu 6,10 ve elektropüskürtme 5,12 gibi diğer yöntemlerle elde edilemeyen büyük miktarlarda tekdüze mikrojeller üretmek için yüksek verimli bir mikroakışkan yaklaşım kullanır. (düşük monodispersite, yüksek verim). Burada açıklanan yöntemlerle, monodisperse mikrojeller, çeşitli rejeneratif tıp uygulamaları (örneğin, hücre teslimi, yara iyileşmesi) için kullanılabilecek MAP iskelelerinde kullanılmak üzere yapılabilir.
Bu protokolün kritik bir adımı, PDMS mikroakışkan cihazlarının oluşturulmasıdır. Cihazlar doğru şekilde yapılmazsa, bunun mikrojel oluşumu ve monodispersite üzerinde olumsuz aşağı yönlü etkileri olabilir. Yükselmeden önce artefaktların (yani kabarcıkların, tozların) PDMS'ye girmesini önlemek önemlidir, çünkü bu kanalları tıkayabilir ve mikrojel oluşumunu önemli ölçüde etkileyebilir. Bunu mümkün olduğunca azaltmak için, herhangi bir tozu çıkarmak için bant kullanılmalı, cihazları tozsuz bir kapta saklamalı ve mümkünse tozsuz bir davlumbazda çalışmalıdır. Yüzey işleminde en iyi sonuçları elde etmek için cihazların 60 °C'de saklanması da önerilir.
PDMS cihazlarını dökerken, biyopsi zımbasının uzunluğuna eşit veya daha az olan düzgün bir kalınlığın korunması önemlidir. Cihaz çok kalınsa, biyopsi punch tüm yol boyunca nüfuz edemez. Biyopsi zımba ve / veya tüp yerleştirirken PDMS cihazı girişlerini / çıkışını yırtmamak da çok önemlidir. PDMS cihazındaki bir yırtılma, girişlerden/çıkıştan sızıntıya neden olur ve bu da jel öncü çözeltisinin kaybına neden olabilir. Bir PDMS cihazında sızıntı varsa, en iyi çözüm mümkün olan en kısa sürede yeni bir cihazla değiştirmektir.
Cihazı plazma ile işlemden geçirirken, 30 s için saf oksijen ve plazma muamelesi kullanımı, PDMS'yi cam kızağa yapıştırmak için en iyi sonuçları vermiştir. Cihaz doğru şekilde bağlanmazsa (yani, PDMS plazma işleminden sonra hala cam slayttan kaldırılabilir), plazma tedavi cihazının doğru çalıştığını ve cihazın ve slaytların iyice temizlenip temizlenmediğini iki kez kontrol etmelidir. Doğru silan yüzey işleminin kullanılması da önemlidir ve en iyi sonuç için PDMS cihazları kullanımdan hemen önce yüzey işlemine tabi tutulmalıdır. Kimyasal buhar biriktirme gibi diğer yüzey işleme yöntemleri de kullanılabilir.
Bir diğer önemli adım ise mikrojel oluşumu için PDMS mikroakışkan cihazlarının doğru kullanılmasıdır. En az 2: 1'lik bir akış hızı oranı kullanılması önerilir (bu protokol 6 mL / s yağ akış hızı ve 3 mL / s sulu akış hızı kullanır), ancak bu istenen mikrojel boyutunu elde etmek için ayarlanabilir. Mikrojel öncü çözeltisinin pH'ı, cihazın tıkanmasını önlemek için optimize edilmesi gereken önemli bir metriktir. Fosfat tamponlu salin (PBS), Michael tipi ilave kimyada tiyolat oluşumunu hızlandırır ve bu protokolde kullanılan PBS konsantrasyonları, mikroakışkan cihazlarda mikrojelasyon için en iyi sonuçları verir. Şırınga pompaları başlatıldıktan sonra, mikroakışkan kanallarda bazı kabarcıklar olabilir, ancak bu birkaç dakika sonra dengelenmelidir. Mikrojel oluşumunun mikroskopla izlenmesi önerilir. Akış bu videodakine benzemiyorsa ve / veya büyük parçacıklar üreten birkaç kanal varsa, bunun nedeni muhtemelen yüzey işleme adımındaki sorunlardan kaynaklanmaktadır. En iyi çözüm, cihazı taze yüzey işlemden geçirilmiş bir cihazla değiştirmektir.
Mikrojeller birleşiyor gibi görünüyorsa, bunun nedeni yetersiz FloroSürfaktan konsantrasyonu olabilir. Önerilen çözüm, yağ fazındaki yüzey aktif maddenin ağırlıkça% 'sini arttırmaktır. Bununla birlikte, yüksek konsantrasyonlarda yüzey aktif madde kullanmanın bir sınırlaması, saflaştırma adımı sırasında çıkarılmasının daha zor olabileceğidir. Mikroakışkan cihazların yalnızca bir kez kullanılması önerilir, ancak cihazdaki jelleşebilecek ve kanalları tıkayabilecek sulu çözeltileri gidermek için kullanımdan hemen sonra Novec yağı ile yıkanırsa cihazlar tekrar kullanılabilir. Bir mikroakışkan cihaz yüksek verimli bir mikrojel hacmi (mL / s) üretebilirken, bu üretim hızı paralel olarak birden fazla mikroakışkan cihaz kullanılarak ölçeklendirilebilir.
MAP iskele tertibatının tavlama adımı, radikal polimerizasyonun ışıkla aktive edilmiş bir fotobaşlatıcısının kullanımına dayanır ve fotobaşlatıcı, istenen uygulamaya göre seçilebilir. Örneğin, LAP fotobaşlatıcı, in vitro14 hücre canlılığı üzerinde minimum etkiye sahip olan uzun dalga UV ışığı kullanıldığında hızlı tavlama sürelerine (<30 s) sahiptir. Bununla birlikte, bu dalga boyu doku16 tarafından yüksek oranda emilir ve in vitro kadar in vivo tavlama etkinliğine sahip olmayabilir.
Eosin Y, görünür dalga boyları (505 nm) tarafından aktive edilen başka bir fotobaşlatıcıdır ve dokuya daha derin nüfuz eder, bu da MAP iskelesinin doku altında tavlanma yeteneğini arttırır. Bununla birlikte, Eozin Y tavlaması için gereken uzun ışığa maruz kalma süreleri, serbest radikallere hücre maruziyetini uzatabilir ve in vitro14 hücre canlılığını etkileyebilir. Bu yöntemlerin yüksek oranda homojen mikrojel yapı taşlarının yüksek verimli üretimi için kullanılması, MAP iskelesi odaklı araştırmaları hızlandıracak ve rejeneratif tıp için enjekte edilebilir gözenekli malzemeler alanındaki bilgileri ilerletecektir.

MAP iskele platformu, tamamen hidrojel mikropartiküllerinden (mikrojeller) oluşan, birbirine çapraz bağlandığında hücre ölçeğinde mikro gözeneklilik sağlayan, bozulmadan bağımsız hücre göçü ve toplu doku entegrasyonuna izin veren enjekte edilebilir bir biyomalzemedir1. Konakçı doku ile hızlı bir şekilde bütünleşme kabiliyeti ve doğası gereği düşük immünojenisitesi nedeniyle, MAP iskele platformu, dermal yara iyileşmesini hızlandırmak da dahil olmak üzere çok çeşitli rejeneratif tıp tedavileri 2,3,4,5,6,7,8,9,10 için klinik öncesi uygulanabilirlik göstermiştir 1,3 ,11, beyin inme boşluğunu revaskülarizeetmek, mezenkimal kök hücreleri2 vermek ve glottik yetmezliği tedavi etmek için doku şişkinliği sağlamak6. MAP'nin ayrıca M2 makrofajlarının işe alınması yoluyla konakçı dokuya anti-enflamatuar etkileri ilettiği gösterilmiştir3 ve hatta bir Th2 "doku onarımı" bağışıklık tepkisini teşvik etmek için ayarlanabilir8. MAP iskele platformunun bu olumlu özellikleri, çok çeşitli klinik uygulamalara genişletilmesini sağlar.
MAP iskele oluşumu için mikrojel üretmek için daha önce yayınlanmış yöntemler, akış odaklı damlacık-mikroakışkanlar 1,4,7,9, elektropüskürtme 5,12 ve toplu emülsiyon 6,10 ile baş üstü eğirmeyi içeriyordu. Damlacık mikroakışkan yöntemi, yüksek monodispersiteye sahip parçacıklar üretebilir, ancak düşük partikül verimi (μL / s) üreten çok yavaş akış hızları kullanır. Alternatif olarak, elektropüskürtme ve toplu emülsiyon yöntemleri, yüksek partikül polidispersitesine sahip, yüksek hacimli parçacıklar üretebilir. Bu protokol, de Rutte ve ark.13'ün çalışmalarına dayanarak, monodispers popülasyonlu mikrojeller üretmek için yüksek verimli bir mikroakışkan yöntem kullanır. Bu yöntem, bir fotomaskeden bir polidimetilsiloksan (PDMS) mikroakışkan cihaz yapmak için yumuşak litografi tekniklerini kullanır ve daha sonra bir cam slayda bağlanır. Cihaz tasarımı, yüksek miktarda mikrojel partikülü (mL / s) üretmek için kademeli emülsifikasyona dayanır. Bu yöntemle elde edilebilecek monodispersite, diğer tekniklere kıyasla gözenekliliğin üstün kontrolünü sağlar, çünkü monodisperse mikrojeller daha düzgün gözenek boyutlarına sahip iskeleler oluşturabilir2.
MAP iskeleleri için yapı taşları olarak hareket edebilen bireysel mikrojelleri sentezleme ve karakterize etme yöntemleri, özellikle mikrojel jelasyonu için tiol işlevselleştirilmiş çapraz bağlayıcılarla verimli Michael tipi eklemeye kolayca katılan bir maleimid (MAL) grubuna sahip bir PEG omurgasından oluşan mikrojellerin oluşturulması açısından bu makalede özetlenmiştir. Mikrojel jelasyonunu MAP iskele tavlamasından ayırmak için, bu el yazması ayrıca heterofonksiyonel bir metakrilamid/maleimid 4 kollu PEG makromeri olan yayınlanmış14 özel tavlama makromeri MethMAL'ın nasıl sentezleneceğini de açıklamaktadır. Metakrilamit fonksiyonel grupları, serbest radikal fotopolimerizasyonuna (mikrojel tavlama için) kolayca katılırken, MAL fonksiyonel grupları için Michael tipi ilaveyi teşvik eden koşullara nispeten inert kalır.
Ek olarak, bu makale PDMS mikroakışkan cihazlarının oluşturulması, mikrojel jelasyon kinetik belirlenmesi ve mikrojel boyutunun karakterize edilmesi için protokolleri özetlemektedir. Makalenin son kısmı, mikrojellerin yüzeylerini kovalent olarak birbirine bağlayan ikincil, foto-başlatılmış çapraz bağlama adımı aracılığıyla in situ olarak toplu bir iskeleye dönüştürüldüğü MAP iskele tavlamasını detaylandırmaktadır. Daha önce tarif edildiği gibi, enzim aracılı tavlama gibi ışık bazlı kimyasallara dayanmayan MAP iskele sistemlerinde uygulanabilecek başka tavlama yöntemleri olduğunu belirtmek önemlidir1. Genel olarak, bu yöntemler doğrudan kullanılabilir veya herhangi bir uygulama için MAP iskeleleri oluşturmak üzere farklı hidrojel formülasyon kimyaları (örneğin, hyaluronik asit bazlı) ile kullanılabilir.

<table><tbody><tr>MetMal Sentezi için <td>2-aminoethanethiol hidroklorür</td><td>Acros Organics</td><td>AC153770250</td><td> MW: 113.61 Da</td></tr><tr><td>35 mm plaka rotoru</td><td>HAAKE</td><td>P35/Ti</td><td>HAAKE viskozimetre için Geometri</td></tr><tr><td>4 kollu PEG-Maleimide (10 kDa)</td><td>NOF AMERICA Corporation</td><td>SUNBRIGHT PTE-100MA</td><td>Mikrojel öncü çözeltisi için</td></tr><tr><td>4 kollu PEG-Maleimide (20 kDa)</td><td>NOF AMERICA MetMal</td> Sentez için <td>Corporation SUNBRIGHT PTE-200MA</td><td> Her partiye özgü moleküler ağırlık</td></tr><tr><td>Luer-Lok Uçlu BD Şırınga</td><td>Becton Dickinson</td><td></td><td>Tek kullanımlık plastik şırıngalar</td></tr><tr><td>Biyopsi yumruğu</td><td>Mitex</td><td>MLTX33-31A-P / 25</td> MethMal Sentezi için <td>1,5 mm çaplı</td></tr><tr><td>Kloroform-d</td><td>Acros Organics</td><td></td><td></td></tr><tr><td>AC209561000 Kolimasyonlu LED Işık Kaynak</td><td>ThorLabs</td><td>M365LP1-C1</td><td>365 nm</td></tr><tr><td>Kültür kabı (15 cm)</td> <td>Corning</td><td>CLS430599</td><td>150 mm x 25 mm</td></tr><tr><td>DMTMM (4- (4,6-dimetoksi-1,3,5-triazin-2-il) -4-metil-morfolinyum klorür)</td> <td>Meşe Ağacı Kimyasal</td><td>151882</td><td>Metmal Sentezi İçin MW: 276.72 Da</td></tr><tr><td>Florosüraktif Madde</td><td>Ran Teknolojileri</td><td>008-Flurosurfactant-5wtH-200G</td><td>5 ağırlık yüzdesi 008- </td></tr><tr>MethMal Synthesis için HFE7500<td>FreeZone Triad Dondurarak Kurutma Sistemi</td><td>Labconco</td><td>7400000 Serisinde</td> Flurosurfactant<td> Liyofilizatör</td></tr><tr><td>Cam slaytlar</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-A3</td><td>Düz cam slaytlar, kaplamasız</td></tr><tr><td>HAAKE Rheowin viskozimetre</td><td>HAAKE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td></td><td></td><td>sürüm 1.8.0_172</td></tr><tr><td>KDS Legato 210 Çift Uçlu Şırınga Pompa</td><td>Kd Bilimsel&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>LED Sürücü</td><td>ThorLabs</td><td>DC2200</td><td></td></tr><tr><td>Lityum fenil-2,4,6-trimetilbenzoilfosfinat (LAP)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>900889</td><td>Foto Başlatıcı</td></tr><tr><td>Metakrilik Asit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>155721</td><td>Metmal Sentezi için MW: 86.09 Da Yoğunluk: 1.015g/mL</td></tr><tr><td>Mikroakışkan cihaz SU8-Si ana gofret</td><td>FlowJem</td><td>N/A</td><td>Özel yapım, silanizasyonlu</td></tr><tr><td>MMP-2 parçalanabilir çapraz bağlayıcı</td><td>FlowJem</td><td></td><td>Sırası: Ac-GCGPQGIAGQDGCG-NH2</td></tr><tr><td>İğneler (25 G, eğimli)</td><td>BD</td><td>305122</td><td>Uzunluk: 15,88 mm Ölçer: 0,5 mm</td></tr><tr><td>Novec 7500</td><td>3M</td><td>7100025016</td><td>Florlu yağ</td></tr><tr><td>Oksijen</td><td>Praxair</td><td>UN1072</td><td>Sıkıştırılmış</td></tr><tr><td>Peek hortumu</td><td>Trajan Scientific</td><td>03-350-523</td><td>1/32 "Dış Çap; 0.02 "İç Çap; 10 'Uzunluk</td></tr><tr><td>PFOCTS (trikloro (1H, 1H, 2H, 2H-perflorooktil) silan)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>448931</td><td>Yüzey işleme için</td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Tuzlu</td><td>Fisher BioReagants</td><td>BP3994</td><td>Ultra saf suda 1x'e seyreltilmiş, pH = 7.4</td></tr><tr><td>Plazma temizleyici</td><td>Harrick Plazma</td><td>PDC-001-HP</td><td></td></tr><tr><td>Tıraş bıçağı</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>RGD hücre yapıştırıcı peptit</td><td>WatsonBio Sciences</td><td></td><td>Sıra: Ac-RGDSPGGC-NH2</sub</td></tr><tr><td>>Rheowin yazılımı</td><td>HAAKE&nbsp;</td><td></td><td>HAAKE viskozimetre ile uyumlu yazılım</td></tr><tr><td>Neşter bıçağı</td><td>Bard-Parker</td><td>371210</td><td>Boyut: #10</td></tr><tr><td>Neşter kolu</td><td>Bard-Parker</td><td>371030</td><td>Boyut: # 3</td></tr><tr>MethMal<td>Sentezi için Sodyum Klorür</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP358-1</td><td> MW: 58.44 Da</td></tr><tr><td>Sylgard 184 silikon elastomer kiti</td><td>DOW Chemical</td><td>2065622</td><td>Baz ve kürleme maddesi</td></tr><tr>MethMal Sentezi için <td>Trietilamin</td><td>Fisher Scientific</td><td>O4884-100</td><td> MW: 101.19 Da Yoğunluk: 0.73g/mL</td></tr><tr><td>Tygon boru</td><td>Saint Gobain Performans Plastikleri</td><td>AAD04103</td><td>Kimliği: 0,51 mm Dış Çap: 1,52 mm</td></tr><tr><td>Varian Inova 500 Spektrometre</td><td>Varian</td><td></td><td>NMR UVA Biyomoleküler Manyetik Rezonans Tesisinde yer almaktadır</td></tr></tbody></table>

mikro gözenekli tavlanmış partikül İskelesi için mikrojel yapı taşlarının mikroakışkan sentezi

Microfluidic Synthesis of Microgel Building Blocks for Microporous Annealed Particle Scaffold

Mikro gözenekli tavlanmış parçacık (MAP) iskele platformu, granüler hidrojellerin bir alt sınıfıdır. İkincil bir ışık bazlı kimyasal çapraz bağlama adımını (yani tavlama) takiben in situ hücre ölçeğinde gözenekliliğe sahip yapısal olarak stabil bir iskele oluşturabilen enjekte edilebilir bir mikrojel bulamacından oluşur. MAP iskelesi, dermal yara iyileşmesi, vokal kıvrım büyütme ve kök hücre dağıtımı dahil olmak üzere çeşitli rejeneratif tıp uygulamalarında başarı göstermiştir. Bu yazıda, bir MAP iskelesi oluşturmak için yapı taşları olarak poli(etilen glikol) (PEG) mikrojellerin sentezi ve karakterizasyonu için yöntemler anlatılmaktadır. Bu yöntemler, özel bir tavlama makromerinin (MethMAL) sentezlenmesini, mikrojel öncü jelasyon kinetiğinin belirlenmesini, mikroakışkan cihaz üretimini, mikrojellerin mikroakışkan üretimini, mikrojel saflaştırmayı ve mikrojel boyutlandırma ve iskele tavlaması dahil olmak üzere temel iskele karakterizasyonunu içerir. Spesifik olarak, burada açıklanan yüksek verimli mikroakışkan yöntemler, özellikle rejeneratif tıp alanında, istenen herhangi bir uygulama için MAP iskeleleri üretmek için kullanılabilecek büyük miktarlarda mikrojeller üretebilir.

Bu protokolün amacı, bir MAP iskelesinde kullanılacak mikrojel yapı taşlarının sentezlenmesi için gerekli tüm adımları özetlemektir. MethMAL tavlama makromeri oldukça seçici ve verimlidir ve çoklu polimer omurgalarla uyumludur14. Yüksek tavlama verimliliği sağlamak için 20 kDa PEG-maleimidin en az% 67-75'inin metakrilamit fonksiyonel grupları ile modifiye edilmesi önemlidir. Yüzde modifikasyonu, Şekil 1'de gösterildiği gibi 1H-NMR spektrum zirvesini analiz ederek en kolay şekilde belirlenebilir. Bir viskozimetre ile belirlenen jelasyon kinetiği, her jel formülasyonu için dikkate alınması gereken önemli bir metriktir. Bu protokol, mikrojel jelasyonu için tiol işlevselleştirilmiş çapraz bağlayıcılarla verimli bir şekilde reaksiyona giren bir MAL grubuna sahip bir PEG omurgasından oluşan bir jel öncü çözeltisi kullanır. Bununla birlikte, burada açıklanan yüksek verimli mikroakışkan yöntemi ile mikrojelleri üretmek için birçok hidrojel kimyası kullanılabilir. Jelleşmenin başlama zamanı, mikroakışkan mikrojel üretiminin süresi hakkında fikir verecektir. 30 dakika (Şekil 2) ile 2 saat arasında jelleşmeyi başlatabilen bir jel öncüsü pH seçilmesi önerilir.
Jelleşme süresi çok hızlıysa, jel öncü çözeltisi mikroakışkan cihaz içinde polimerize olmaya başlayacak ve kanalları tıkayacaktır. Ek olarak, değişen tiyollenmiş ligand konsantrasyonlarının (örneğin, RGD) jelasyon sırasında ağ oluşumu üzerinde etkileri olabileceğini ve formülasyonun ayarlanmasıyla hesaba katılması gerekebileceğini belirtmek önemlidir. Mikroakışkan cihaz üretim adımları sıkıcı olabilir, ancak başarılı bir şekilde bağlanmış bir cihazın temsili sonuçları Şekil 3'te gösterilmiştir. Bu protokol, de Rutte ve ark.13 tarafından yapılan bir tasarımdan uyarlanan yüksek verimli, paralelleştirilmiş, kademeli emülsifikasyonlu bir mikroakışkan cihaz kullanır ve silikon gofret üretimi bir mikroakışkan teknoloji şirketine dış kaynak olarak sağlanmıştır. Bununla birlikte, bu protokolde özetlenen adımlar, SU-8 silikon gofret fotomaskesi üzerine kazınmış herhangi bir cihaz tasarımıyla kullanılabilir. Fotomaske üzerindeki kanalların adım boyutunun, mikrojel parçacıklarının boyutunu etkileyeceğinden, cihaz üretimi sırasında optimize edilmesi gerektiğine dikkat etmek önemlidir.
Mikrojellerin mikroakışkan üretimi için akış hızları, jelasyon süresi, istenen partikül boyutu ve mikroakışkan cihaz tasarımı gibi faktörlere dayanarak her jel formülasyonu için optimize edilmelidir. Yüksek verimli cihaz kullanılıyorsa, sulu faz için akış hızları 5 mL/s'ye kadar çıkabilir. Şekil 4B, bu protokolde kullanılan yüksek verimli cihazların kurulumunu gösterir. Cihaz doğru çalışıyorsa, mikrojel oluşumu Şekil 4D'de gösterilene benzer görünmelidir. Saflaştırmadan önce, mikrojeller opak olacaktır. Çeşitli yağ, PBS ve hekzan yıkamalarını tamamladıktan sonra, jel Şekil 5'teki temsili görüntü gibi net görünmelidir. Mikrojellere bir florofor dahil edilirse, saflaştırılmış ürün hafif renkli bir renk tonuna sahip olabilir, ancak yine de yarı saydamlığa yakın olmalıdır. Saflaştırma ve şişmeden sonra, mikrojeller boyut olarak çok düzgün olmalı ve Şekil 6'da gösterildiği gibi 1.00 ila 1.05 arasında bir PDI'ya sahip olmalıdır. MAP iskelelerinin fototavlanması için çeşitli foto-başlatıcılar kullanılabilir. Burada açıklanan LAP'a bir alternatif kullanılıyorsa, daha önce tarif edildiği gibi tavlama kinetiğibelirlenmelidir 14. Ek olarak, ışık kaynağı fotobaşlatıcıya karşılık geldiği sürece fototavlama için çeşitli ışık kaynakları kullanılabilir. Işık kaynağını kalibre ettiğinizden ve odakladığınızdan emin olunmalıdır. Tavlama süresi ve ışık yoğunluğunun, jel formülasyonuna ve fotobaşlatıcı konsantrasyonuna göre optimize edilmesi gerekebilir. Bu protokolde özetlenen tavlama yöntemi, in vitro ve in vivo çalışmalar için kullanılabilir. Tavlamadan sonra, mikrojeller iki foton mikroskobu ile görselleştirilebilen gözenekli bir iskele oluşturacaktır (Şekil 7B-C).

Bu protokol, çeşitli rejeneratif tıp uygulamaları için kullanılabilecek mikro gözenekli tavlanmış parçacık iskelesi için mikrojel yapı taşlarını sentezlemek için bir dizi yöntemi açıklamaktadır.

Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelesi için Mikrojel Yapı Taşlarının Mikroakışkan Sentezi

The microporous annealed particle (MAP) scaffold platform is a subclass of granular hydrogels. It is composed of an injectable slurry of microgels that ...

Mikro gözenekli tavlanmış parçacık iskeleleri için monodispers mikrojel yapı taşlarının yüksek verimli üretimi, iskele gözenekliliğinin daha iyi kontrol edilmesini sağlar. Bu, gözenek boyutunu ve sonraki doku entegrasyon sonuçlarını etkileyebilir. Bu protokol, akış odaklı mikroakışkanlar, toplu emülsiyon ve elektropüskürtme gibi diğer yöntemlerle elde edilemeyen büyük hacimli monodispers mikrojeller üretmek için yüksek verimli bir mikroakışkan yaklaşım kullanır.Üretilen mikrojeller, hızlı doku ve büyümeye izin veren hücre ölçeği gözenekliliği nedeniyle rejeneratif tıp uygulamaları için avantajlı olan mikro gözenekli tavlanmış parçacık iskeleleri halinde oluşturulabilir. PDMS mikroakışkan cihaz başına bir cam slayt hazırlayarak başlayın. Slayttaki tozları temizlemek için bant, filtrelenmiş hava veya izopropil alkollü yıkamalar kullanın.PDMS cihaz tasarım slaytına 96 delikli bir plaka kapağında yan yana bir cam slayt yerleştirin ve bir plazma temizleyiciye yerleştirin. Kapıyı ve hava akış valfini kapatın ve vakum pompasını açın. En az 30 saniye çalışmasına izin verin, ardından kapatın.Oksijen tankı gaz tüpünü hava akış valfine bağlayın. Plazma odasının 30 saniye boyunca oksijenle dolmasına izin verin, ardından oksijeni kapatın ve hava akış valfini kapatın. Vakum pompasını açın ve radyo frekansı seviyesini yüksek olarak ayarlayın.Oda mor pembe rengine dönene kadar bekleyin ve 30 saniye geçmesine izin verin. Zamanlayıcı söndüğünde, plazmayı ve vakumlamayı kapatın, ardından vakumu serbest bırakmak için hava akış valfini yavaşça açın. Tepsiyi plazma temizleyiciden çıkarın.PDMS cihazını yapıştırmak için yavaşça cam kızağın üzerine çevirin. Yapıştırma gerçekleştikçe, PDMS'nin şeffaflığındaki küçük farkı gözlemleyin. En iyi sonuçlar için, bağlı cihazları kullanımdan hemen öncesine kadar 60 santigrat derecede saklayın.PFOCTS ve Novec yağını seyrelterek yüzey işlemini hazırlayın ve üç ila dört cihaz için bir mililitre kullanın. Hacmi bir mililitrelik bir şırıngaya aktarın ve 25 gauge'lik bir iğne takın. Cihaz başına 10 ila 12 santimetrelik bir Tygon boru parçası kesin.Yaklaşık bir inç uzunluğunda bir parça PEEK borusu kesin. İğnenin Tygon boru girişlerini delmesini önlemek için Tygon borusunun ucuna birkaç milimetrelik PEEK borusu yerleştirin. Cihazları ısıtılmış odadan çıkarın ve Tygon borusunun PEEK olmayan ucunu sulu giriş deliğine yerleştirin.Yüzey işleme şırıngasının iğnesini PEEK borusuna yerleştirin ve yağ odası çıkış deliğini örtün. Tedaviyi yavaşça enjekte edin ve cihazı kabarcıklar olmadan doldurduğundan emin olun. Önce sulu odaların dolmasını, ardından daha küçük kanalların ve ardından yağ odasının dolmasını bekleyin.Tygon borusunu cihazdan çıkarın. Cihaz doldurulduktan sonra, oda sıcaklığında 10 dakika dinlendirin. Beş mililitrelik bir şırıngayı sadece yağ ile doldurun ve 25 gauge'lik bir iğne takın.Yüzey işlemini cihazdan giriş ve çıkıştan aspire edin. Tygon borusunu sulu girişe yerleştirin. Şırıngayı PEEK borusuna yağ ile yerleştirin ve her cihazı yağ ile yıkayın.Yağı cihazdan aspire edin. Yağ yıkamayı iki kez tekrarlayın ve Tygon borusunu çıkarın. Tygon borusunun PEEK olmayan ucunu mikroakışkan cihazların girişlerine yerleştirin.Ucunda PEEK borusu olmayan kalan Tygon boru parçasını mikroakışkan cihaz çıkışına yerleştirin. Beş mililitrelik plastik şırıngaya en az üç mililitre yağ ekleyin ve 25 gauge iğneye takın. İğneyi Tygon girişlerinden birindeki PEEK borusuna dikkatlice yerleştirin.Boruyu ve cihazı yavaşça yağla yıkayın. Yağı çıkıştan konik bir tüp içinde toplayın. Diğer Tygon girişindeki yağ yıkama işlemini tekrarlayın.Şırınga pompalarını istenen akış hızlarına ayarlayın. Yüzey aktif maddeyi içeren şırıngayı 25 gauge'lik bir iğne ile yağ girişine bağlayın ve mikroakışkan cihazın borusunu ve yağ kanalını beslemek için yeterli yağı yavaşça dağıtın. Cihaz ve yağ girişleri kurulduktan sonra, jel öncüsünü içerecek yeni bir beş mililitrelik şırıngaya 0,5 mililitre yağ ekleyin.Öncü çözeltinin mikroakışkan cihazdan temizlenmesine yardımcı olması için bu az miktarda yağı kullanın. Konik bir tüpte, 1,5 mililitre PEG omurga çözeltisini ve 1,5 mililitre çapraz bağlayıcı çözeltisini birleştirin. 30 saniye boyunca vorteks yapın ve kombine jel öncü çözeltisini beş mililitrelik şırıngaya hızlı bir şekilde aktarın.Şırıngayı jel öncü çözeltisi ile 25 gauge iğne ile sulu girişe bağlayın. Boruyu ve sulu kanalı astarlamak için yeterli çözeltiyi yavaşça dağıtın. Şırıngaları şırınga pompalarına kelepçeleyin ve çalıştırmaya basın.Kanallardan eşit büyüklükte parçacıklar arayın. Mikrojelleri prizden konik bir tüp içinde toplayın. Jelasyon tamamlandıktan sonra, yağ fazını tüpün altından dikkatlice çıkarmak için bir pipet kullanın.Bunu florlu atıklar için uygun bir atık kabına koyun. Mikrojel toplama tüpüne daha fazla yağ ekleyin. Toplama tüpünü hafifçe ters çevirerek karıştırın.Fazların ayrılmasına izin vermek için toplama tüpünün beş dakika boyunca yerleşmesine izin verin. Alttaki yağ fazını ve üstteki sulu mikrojel fazını arayın. Yağ yıkamalarını en az iki kez daha tekrarlayın.Daha önce gösterildiği gibi jel ile daha fazla yağ ekleyin, ardından jele PBS ekleyin. Birkaç kez karıştırmak için ters çevirin. Katmanları ayırmak için, tüpü yaklaşık 30 saniye boyunca 2.000 RCF'de santrifüj yapın.Tüpün altındaki yağ fazını, ortadaki jeli ve üstte PBS'yi arayın. Yağ fazını bir pipetle çıkarın ve bir atık kabına atın. Yağı tekrarlayın ve PBS iki kez yıkar.Son yıkamada jelin opaklıktan temizlemeye geçmesini bekleyin. Tüm yağı çıkarın. PBS'yi konik tüpten çıkarmayın.Kimyasal bir davlumbazda, PBS'ye eşit hacimde tüpe hekzan eklemek için bir cam pipet kullanın. Konik tüpü 30 saniye boyunca veya iyice karışana kadar vorteksleyin. Beş dakika boyunca 4.696 RCF'de santrifüj yapın.Ayırmadan sonra, üst katmanda altıgenler, ortada PBS ve altta jel arayın. Hekzan tabakayı çıkarın ve organik atık için bir kaba atın. PBS'yi aspire edin.PBS'de hekzanı tekrarlayın, en az iki kez veya jel neredeyse yarı saydam görünene kadar yıkar. Kalan hekzan kalıntılarını gidermek için jeli PBS ile bir kez daha yıkayın. Beş dakika boyunca 4.696 RCF'de santrifüj yapın ve PBS tabakasını aspire edin.20 kilodalton PEG maleimidin yaklaşık% 67-75'i, yüksek tavlama verimliliği sağlamak için metakrilamit fonksiyonel grupları ile modifiye edildi. Yüzde modifikasyonu, 1H NMR spektrum zirveleri analiz edilerek belirlendi. Jelleşmenin başlangıcı, mikroakışkan mikrojel üretiminin süresi hakkında fikir verdi.30 dakika ile iki saat arasında jelleşmeyi başlatabilen jel öncüsü pH'ın seçilmesi önerilir. Saflaştırma ve şişmeden sonra, mikrojeller monodisperse bir popülasyon olarak tanımlanan 1.00 ila 1.02 arasında eşit bir boyuta ve polidispersite indeksine sahipti. Tavlamadan sonra, mikrojeller iki foton mikroskobu ile görselleştirilen gözenekli bir iskele oluşturdu.PDMS cihazının cam kızağa doğru şekilde bağlanması ve cihazın doğru şekilde yüzeye işlenmesi, en iyi mikroakışkan cihaz performansı için çok önemlidir. Bu teknik, yara iyileşmesi de dahil olmak üzere çeşitli in vivo rejeneratif uygulamalar için kullanılabilecek harita iskeleleri oluşturmak için üniform mikrojel yapı taşlarının hızlı bir şekilde üretilmesini sağlar.

microfluidic-synthesis-microgel-building-blocks-for-microporous

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Tamamen aynı temel malzeme olan poli(N-izopropilakrilamid) (PNIPAAm)'den oluşan Janus mikrohidrojellerini, aşırı doymuş bir NIPAAm monomer çözeltisinin faz ayrımı üzerinde açıkça bölümlere ayrılmış bir yapı tabanı ile sentezlemek için bir protokol sunuyoruz. Sentezlenen Janus mikrohidrojelleri, anizotropik termo-duyarlılık ve organofilik/hidrofilik yükleme kabiliyeti gibi benzersiz özellikler gösterir.

Poli Sentezi (<em&gt; K</em&gt; -isopropylacrylamide) Yönbağımlı Termo yanıt ve organofilik / Hidrofilik Yükleme Kapasitesi için Janus Microhydrogels

Polidimetilsiloksan (PDMS) içinde iki mikrokanal arasında nanoakışkan bir bağlantı oluşturmak için silika kolloidal nanopartiküllerin basit bir kendi kendine montaj tekniği öneriyoruz. Bu teknik kullanılarak, bir mikrokanalın içine ~ 45 nm'ye kadar gözenek boyutuna sahip nano gözenekli bir boncuk zarı inşa edildi ve DNA örneklerinin elektrokinetik ön konsantrasyonuna uygulandı.

Kolloidal Parçacıkların Öz-Montaj Süreci yoluyla PDMS mikroakışkan Chip Sub-50 Nm Nanofluidic Junctions oluşturma

Burada, polidimetilsiloksandan (PDMS) yapılmış çift katmanlı bir mikroakışkan sistemin imalatını ve çalışmasını açıklıyoruz. Bu cihazın, kristalin bir moleküler malzemenin koordinasyon yolunu yakalama, yönlendirme ve çip üzerinde hapsolmuş yapılar üzerindeki kimyasal reaksiyonları kontrol etme potansiyelini gösteriyoruz.

Mikroakışkan Pnömatik Kafesler: Bir In-yonga Kristal Bindirme, Manipülasyon için Yeni Yaklaşım ve Kontrollü Kimyasal Arıtma

İletişim kuralları hydrazone toplu ölçek, microscale ve Nano, ikincisi jel nano tanecikleri ve nanofibers hazırlanması için polimer reaksiyonlar, cross-linking göre parçalanabilir thermoresponsive hydrogels imalatı için açıklanmıştır.

Parçalanabilir Thermoresponsive Hydrogels birden fazla uzunluğu ölçeklerde yolu ile reaktif ekstrüzyon, havacilik, kendinden montajlı imalatı ve Electrospinning

UV-crosslinkable hydrogels işlemek için bir katkı üretim stratejisi geliştirmiştir. Bu strateji microfabricated hidrojel yapıları katman katman Meclisi hem de, bağımsız bileşenler Meclisi tümleşik aygıtlar için manyetik çalıştırma duyarlı hareket bileşenleri içeren verimli sağlar.

Teknik hidrojel tabanlı Micromachines manyetik olarak duyarlı bileşenleri ile Facile ve hızlı üretim için üretim bir katkı

Yağdaki su damlacık tahlilleri analitik kimya, enzim evrimi ve tek hücre analizi için yararlıdır, ancak tipik olarak damlacıkları oluşturmak için mikroakışkanlar gerekir. Burada, damlacık tahlillerini gerçekleştirmek için mikroakışkan içermeyen bir yaklaşım olan parçacık şablonlu emülsifikasyonu açıklıyoruz.

Parçacık Şablonlu Emülsifikasyonu MikroakışkanSız Damlacık Tahlillerini Mümkün

Bu çalışma, ekstrüzyon parçalanması ile mikrojelleri üretmek, mikrojelleri enjekte edilebilir granüler hidrojellere işlemek ve granüler hidrojelleri biyomedikal uygulamalar için ekstrüzyon baskı mürekkepleri olarak uygulamak için basit, uyarlanabilir ve düşük maliyetli yöntemleri açıklamaktadır.

Biyomedikal Uygulamalar için Dökme Hidrojellerin Parçalanması ve Granüler Hidrojellere İşlenmesi

Tamamlayıcı reaktif gruplara sahip mikrojel çubuklar, sulu çözeltide birbirine bağlanma kabiliyetine sahip mikroakışkanlar yoluyla üretilir. Anizometrik mikrojeller, küresel tabanlı sistemlere kıyasla daha büyük gözeneklere sahip kararlı yapılara sıkışır ve birbirine bağlanır. GRGDS-PC ile modifiye edilmiş mikrojeller, hücre kültürü için kullanılabilecek makrogözenekli 3D yapılar oluşturur.

Mikrojel Çubuklardan Birbirine Bağlı Makrogözenekli 3D İskeleler

Granüler iskeleler içindeki partikül fraksiyonundaki değişkenliği en aza indirmek, tekrarlanabilir deneyleri kolaylaştırır. Bu çalışma, in vitro doku mühendisliği uygulamaları için kontrollü parçacık fraksiyonlarına sahip granüler iskeleler üretme yöntemlerini açıklamaktadır.

3D Hücre Kültürü için Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelelerinde Partikül Fraksiyonunun Kontrol Edilmesi

Mevcut protokol, yüksek çözünürlüklü mikroskopi görüntülemeyi eşzamanlı basınç farkı ölçümleriyle birleştirerek yarı-2D gözenekli ortamlarda biyofilm gelişimini incelemek için mikroakışkan bir platformu tanımlamaktadır. Platform, gözenekli ortamlardaki gözenek boyutunun ve sıvı akış hızlarının biyotıkanma üzerindeki etkisini ölçer.

Gözenekli Ortamlarda Biyotıkanıklığı İncelemek için Mikroakışkan Bir Platform

Bu makalede, mikroakışkan cihazlar kullanılarak yüksek verimli jelatin metakriloil mikrojel üretimi, mikrojellerin yeniden askıya alınabilir toza (mikro-aerojeller) dönüştürülmesi, granüler hidrojel iskeleleri oluşturmak için mikrojellerin kimyasal montajı ve 3D biyobaskı için korunmuş mikroporoziteye sahip granüler hidrojel biyomürekkeplerinin geliştirilmesi için protokoller açıklanmaktadır.

Jelatin Metakriloil Granül Hidrojel İskeleleri: Yüksek Verimli Mikrojel İmalatı, Liyofilizasyon, Kimyasal Montaj ve 3D Biyobaskı

Öğrenin mikroakışkan yöntemle mikrojel yapı taşları sentezleme ve mikro gözenekli tavlanmış partikül iskeleleri oluşturma. Bu yüksek verimli teknik rejeneratif tıp uygulamalarında doku bütünleşmesini iyileştirir.

Mikro Gözenekli Tavlanmış Partikül İskelesi için Mikrojel Yapı Taşlarının Mikroakışkan Sentezi

Daha fazla video keşfet