Name: Bir Murin Modelinde Superior Servikal Ganglionektomi için Cerrahi Teknik (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Öğrenin, farelerde superior servikal ganglionektomi ile adrenerjik innervasyon ablasyonunu. Bu cerrahi teknik, sempatik sinir sisteminin kanser ve diğer hastalıklardaki rolünü araştırmak için minimal invaziv bir yöntem sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Q. W., NIH T32CA009685 tarafından desteklendi. R. J. W., NIH R01CA219534 tarafından desteklendi. Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi Çekirdek Tesisleri, NIH P30CA008748 tarafından desteklenmiştir.

Burada açıklanan hayvan prosedürleri, Memorial Sloan Kettering Kanser Merkezi'ndeki Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır. Burada sekiz haftalık erkek ve dişi NSG fareleri kullanıldı. Hayvanlar ticari bir kaynaktan elde edilmiştir (bkz. Aletler sterilize edilir, cerrahi çalışma yüzeyi dezenfekte edilir, hayvanın cilt yüzeyi dezenfekte edilir ve cerrah işlem boyunca steril eldiven giyer.
1. Farelerin hazırlanması ve ameliyat öncesi kurulum
<ol><li>Ameliyattan önceki gün, fareyi bir indüksiyon odasında% 2 izofluran ile uyuşturun (3.75 inç genişlik x 9 derinlik x 3.75 yükseklik, Malzeme Tablosuna bakınız). NOT: Cerrahi anestezi düzlemi, bireysel hayvana bağlı olarak genellikle 3-5 dakika içinde elde edilir. Anestezinin yeterliliğini ayak parmağı tutamıyla değerlendirin ve izofluran yüzdesini uygun şekilde artırın.<ol><li>Boynun ventral yönünü tıraş edin veya üreticinin talimatlarına göre kimyasal bir epilasyon maddesi kullanın (bkz.</li>
	</ol></li>
	<li>Ameliyat gününde, fareyi bir indüksiyon odasında% 2 izofluran ile uyuşturun. Anestezinin yeterliliğini ayak parmağı tutamıyla değerlendirin ve izofluran yüzdesini uygun şekilde artırın.</li>
	<li>Önleyici sistemik analjezi için deri altına 2 mg / kg meloksikam uygulayın. Anestezi altında oküler yaralanmaları ve kuruluğu önlemek için topikal oftalmik merhem uygulayın ( Malzeme Tablosuna bakınız).</li>
	<li>Fareyi sırt tarafında bir diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin ve termal destek sağlayın. Hassas bir buharlaştırıcı ve burun konisi kullanarak% 2 -% 2.5 izofluran ile inhalasyon anestezisini koruyun. Her iki ön ayağı hipoalerjenik bantla nazikçe sabitleyin (bkz.</li>
	<li>Boynun traş edilmiş, ventral yönünü povidon-iyot ile temizleyin ve ardından% 70 alkolle silin. Bu işlemi iki kez daha tekrarlayın. Ameliyat bölgesinde gevşek saç bulunmadığından emin olun. NOT: Bir çift kısa kavisli forseps de kullanılabilir. Bu kapalı alanda yeterince çalışmak için bir çift ince veya oftalmik forseps kullandığınızdan emin olun. Kurumsal yönergelere göre ek ameliyat öncesi kurulum dahil edilebilir.</li>
</ol>2. Diseksiyon
<ol><li>Çenenin yaklaşık 2 mm altından sternal çentiğin 2 mm yukarısına kadar küçük bir makas kullanarak boynun ventral yönünde 1,5 cm'lik orta hat cilt kesisi yapın.</li>
	<li>Altta yatan fasya ve submandibular tükürük bezlerini ortaya çıkarmak için cildin kenarlarını forseps ile yanal olarak geri çekin. Her iki taraftaki derinin altına sivri uçlu makas sokarak ve yayarak cildi alttaki fasyadan ayırın. Altta yatan kasları ortaya çıkarmak için submandibular bezleri forseps ile kaudal olarak aşağı çekin.</li>
	<li>Digastrik kas ve omohyoid kasın arka göbeğinin kavşağını bulun (Şekil 1A, siyah daire). Anterior juguler ven uzunlamasına ve omohyoid kasın lateralinde uzandığı görülür. NOT: Omohyoid kas trakeayı uzunlamasına kaplarken, digastrik kas trakeanın kraniyal yönünde enine uzanır (Şekil 1C).<ol><li>45° açılı forsepsin ucunu, üstteki derin servikal fasyadaki bir açıklığı delmek ve yaymak için bu kavşağa, ön juguler venin lateraline yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>Adım 2.3.1'de oluşturulan bu pencereyi 45° açılı forseps ile açık tutun. Diğer elinizde bir çift kavisli forseps ile yayma manevraları yaparak bu açıklığı daha da genişletin.</li>
</ol>3. Ganglionun tanımlanması ve rezeksiyonu
<ol><li>Ortaya çıkan boşluğun lateral duvarındaki superior servikal ganglionu (SCG) bulun. Yuvarlak, inci gibi bir doku olarak görünür. NOT: SCG tanımlanmamışsa, bu boşluktaki dokuların daha yanal ve üst olarak incelenmesi gerekir. SCG, bu bölgede sıklıkla bulunan yağ ile kolayca karıştırılabilir. Yağın hafif sarı bir tonu vardır, aksine SCG inci beyazı görünür.</li>
	<li>Diğer elinizle forseps ile açıklığı korurken, SCG'yi forseps ile nazikçe kavrayın ve daha iyi görünmesi için açıklıktan dışarı çekin.</li>
	<li>SCG göründükten sonra, SCG'nin hala çevre dokulara bağlı olduğu lateral tabanını kavrayın. Diğer elinizi kullanarak, SCG'yi ventral ve kaudal yönde yavaşça ve nazikçe geri çekin.<ol><li>Ganglionu yavaş yavaş avulse etmek için SCG'yi birkaç kez geri çekin. Geride artık ganglion kalıntısı kalmadığından emin olmak için bu manevra sırasında gangliyonu sağlam tutun. NOT: Bu adım sırasında kanama olabileceğinden gangliyonu hafifçe çekin. Küçük bir kanama meydana gelirse, açıklığın üzerinde 30 s ila 1 dakika boyunca basınç tutmak için oksitlenmiş rejenere selüloz veya küçük bir steril gazlı bez şeridi kullanın. Ardından, gazlı bezi yavaşça kaldırın ve yeniden değerlendirin. Kanama durana kadar açıklık üzerinde basınç tutma işlemini gerektiği kadar tekrarlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Gangliyonun tabanını tutan diğer forsepsleri yavaşça serbest bırakın. Kan birikintisine bakarak kanama olup olmadığını kontrol edin. NOT: Şu anda hafif sızma normaldir. Prosedürü kapatmadan ve bitirmeden önce izleyin ve kalıcı veya önemli bir kanama olmadığından emin olun. Böyle bir durumda, adım 3.3.1'de açıklandığı gibi açıklığın üzerinde baskı tutun.</li>
	<li>Tükürük bezlerini normal anatomik pozisyonlarına geri getirin. Basit kesintili 5-0 naylon sütürler kullanarak cildi yaklaştırın ve kapatın (bkz.</li>
	<li>Anesteziden tam olarak iyileşmeyi sağlamak için fareyi tek başına temiz bir kafese yerleştirin. NOT: Farenin anesteziden tamamen uyanması 5-15 dakika sürebilir. Sternal yaslığı korumak için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar fareyi gözetimsiz bırakmayın. Tamamen iyileşene kadar fareyi diğer farelerle birlikte bir kafese koymayın. Fareyi 72 saat boyunca en az 24 saatte bir ameliyat sonrası iyileşme açısından değerlendirin.</li>
</ol>

<ol><li>Magnon, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+nerve+development+contributes+to+prostate+cancer+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Autonomic nerve development contributes to prostate cancer progression.</a> Science. 341 (6142), 1236361(2013).</li>
<li>Zhao, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Denervation+suppresses+gastric+tumorigenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Denervation suppresses gastric tumorigenesis.</a> Science Translational Medicine. 6 (250), 115(2014).</li>
<li>Zahalka, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adrenergic+nerves+activate+an+angio-metabolic+switch+in+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Adrenergic nerves activate an angio-metabolic switch in prostate cancer.</a> Science. 358 (6361), 321-326 (2017).</li>
<li>Amit, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+p53+drives+neuron+reprogramming+in+head+and+neck+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Loss of p53 drives neuron reprogramming in head and neck cancer.</a> Nature. 578 (7795), 449-454 (2020).</li>
<li>Renz, B. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cholinergic+signaling+via+muscarinic+receptors+directly+and+indirectly+suppresses+pancreatic+tumorigenesis+and+cancer+stemness%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">Cholinergic signaling via muscarinic receptors directly and indirectly suppresses pancreatic tumorigenesis and cancer stemness.</a> Cancer Discovery. 8 (11), 1458-1473 (2018).</li>
<li>Lucido, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innervation+of+cervical+carcinoma+is+mediated+by+cancer-derived+exosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Gynecologic+Oncology%22%5BJournal%5D)">Innervation of cervical carcinoma is mediated by cancer-derived exosomes.</a> Gynecologic Oncology. 154 (1), 228-235 (2019).</li>
<li>Peterson, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Basal+cell+carcinoma+preferentially+arises+from+stem+cells+within+hair+follicle+and+mechanosensory+niches%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Basal cell carcinoma preferentially arises from stem cells within hair follicle and mechanosensory niches.</a> Cell Stem Cell. 16 (4), 400-412 (2015).</li>
<li>Maronde, E., Stehle, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mammalian+pineal+gland%3A+Known+facts%2C+unknown+facets%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Endocrinology+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">The mammalian pineal gland: Known facts, unknown facets.</a> Trends in Endocrinology & Metabolism. 18 (4), 142-149 (2007).</li>
<li>Yamazaki, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ontogeny+of+circadian+organization+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Rhythms%22%5BJournal%5D)">Ontogeny of circadian organization in the rat.</a> Journal of Biological Rhythms. 24 (1), 55-63 (2009).</li>
<li>Huang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((S100%2B+cells%3A+A+new+neuro-immune+cross-talkers+in+lymph+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">S100+ cells: A new neuro-immune cross-talkers in lymph organs.</a> Scientific Reports. 3 (1), 1114(2013).</li>
<li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Melatonin+protects+the+retina+from+experimental+nonexudative+age-related+macular+degeneration+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pineal+Research%22%5BJournal%5D)">Melatonin protects the retina from experimental nonexudative age-related macular degeneration in mice.</a> Journal of Pineal Research. 68 (4), 12643(2020).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+superior+cervical+ganglionectomy+attenuates+the+progression+of+%CE%B2-aminopropionitrile-induced+aortic+dissection+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">Bilateral superior cervical ganglionectomy attenuates the progression of β-aminopropionitrile-induced aortic dissection in rats.</a> Life Sciences. 193, 200-206 (2018).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+the+superior+cervical+sympathetic+ganglion+in+ischemia+reperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">The role of the superior cervical sympathetic ganglion in ischemia reperfusion-induced acute kidney injury in rats.</a> Frontiers in Medicine. 9, 792000(2022).</li>
<li>Zhang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superior+cervical+ganglionectomy+alters+gut+microbiota+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Superior cervical ganglionectomy alters gut microbiota in rats.</a> American Journal of Translational Research. 14 (3), 2037-2050 (2022).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Adrenergic+signaling+induces+Notch-mediated+salivary+gland+progenitor+cell+control%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">β-Adrenergic signaling induces Notch-mediated salivary gland progenitor cell control.</a> Stem Cell Reports. 16 (11), 2813-2824 (2021).</li>
<li>Boyd, A., Aragon, I. V., Abou Saleh, L., Southers, D., Richter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+cAMP-phosphodiesterase+4+%28PDE4%29+controls+%CE%B2-adrenoceptor-+and+CFTR-dependent+saliva+secretion+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+Journal%22%5BJournal%5D)">The cAMP-phosphodiesterase 4 (PDE4) controls β-adrenoceptor- and CFTR-dependent saliva secretion in mice.</a> Biochemical Journal. 478 (10), 1891-1906 (2021).</li>
<li>Smith, B., Butler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+long-term+propranolol+on+the+salivary+glands+and+intestinal+serosa+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">The effects of long-term propranolol on the salivary glands and intestinal serosa of the mouse.</a> The Journal of Pathology. 124 (4), 185-187 (1978).</li>
<li>Sucharov, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Adrenergic+receptor+antagonism+in+mice%3A+A+model+for+pediatric+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">β-Adrenergic receptor antagonism in mice: A model for pediatric heart disease.</a> Journal of Applied Physiology. 115 (7), 979-987 (2013).</li>
<li>Ding, C., Walcott, B., Keyser, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+alpha1-+and+beta1-adrenergic+modulation+of+lacrimal+gland+function+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The alpha1- and beta1-adrenergic modulation of lacrimal gland function in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 48 (4), 1504-1510 (2007).</li>
<li>Grisanti, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prior+%CE%B2-blocker+treatment+decreases+leukocyte+responsiveness+to+injury%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Prior β-blocker treatment decreases leukocyte responsiveness to injury.</a> JCI Insight. 5 (9), 99485(2019).</li>
<li>Alito, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autonomic+nervous+system+regulation+of+murine+immune+responses+as+assessed+by+local+surgical+sympathetic+and+parasympathetic+denervation%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiologica%2C+Pharmacologica+et+Therapeutica+Latinoamericana%22%5BJournal%5D)">Autonomic nervous system regulation of murine immune responses as assessed by local surgical sympathetic and parasympathetic denervation.</a> Acta Physiologica, Pharmacologica et Therapeutica Latinoamericana. 37 (3), 305-319 (1987).</li>
<li>Yun, H., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+central+role+for+sympathetic+nerves+in+herpes+stromal+keratitis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">A central role for sympathetic nerves in herpes stromal keratitis in mice.</a> Ophthalmology & Visual Science. 57 (4), 1749-1756 (2016).</li>
<li>Haug, S. R., Heyeraas, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+sympathectomy+on+experimentally+induced+pulpal+inflammation+and+periapical+lesions+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effects of sympathectomy on experimentally induced pulpal inflammation and periapical lesions in rats.</a> Neuroscience. 120 (3), 827-836 (2003).</li>
<li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardized+surgical+technique+for+rat+superior+cervical+ganglionectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A standardized surgical technique for rat superior cervical ganglionectomy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (1), 22-33 (2010).</li>
<li>Garcia, J. B., Romeo, H. E., Basabe, J. C., Cardinali, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+superior+cervical+ganglionectomy+on+insulin+release+by+murine+pancreas+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Autonomic+Nervous+System%22%5BJournal%5D)">Effect of superior cervical ganglionectomy on insulin release by murine pancreas slices.</a> Journal of the Autonomic Nervous System. 22 (2), 159-165 (1988).</li>
<li>Ziegler, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Local+sympathetic+denervation+attenuates+myocardial+inflammation+and+improves+cardiac+function+after+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Local sympathetic denervation attenuates myocardial inflammation and improves cardiac function after myocardial infarction in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (2), 291-299 (2017).</li>
<li>Getsy, P. M., Coffee, G. A., Hsieh, Y. H., Lewis, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+superior+cervical+ganglia+modulate+ventilatory+responses+to+hypoxia+independently+of+preganglionic+drive+from+the+cervical+sympathetic+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">The superior cervical ganglia modulate ventilatory responses to hypoxia independently of preganglionic drive from the cervical sympathetic chain.</a> Journal of Applied Physiology. 131 (2), 836-857 (2021).</li>
<li>Dieguez, H. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Superior+cervical+gangliectomy+induces+non-exudative+age-related+macular+degeneration+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Superior cervical gangliectomy induces non-exudative age-related macular degeneration in mice.</a> Disease Models & Mechanisms. 11 (2), 031641(2018).</li>
<li>Zhang, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperactivation+of+sympathetic+nerves+drives+depletion+of+melanocyte+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Hyperactivation of sympathetic nerves drives depletion of melanocyte stem cells.</a> Nature. 577 (7792), 676-681 (2020).</li>
<li>Pirzgalska, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neuron-associated+macrophages+contribute+to+obesity+by+importing+and+metabolizing+norepinephrine%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neuron-associated macrophages contribute to obesity by importing and metabolizing norepinephrine.</a> Nature Medicine. 23 (11), 1309-1318 (2017).</li>
<li>Kajimura, D., Paone, R., Mann, J. J., Karsenty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foxo1+regulates+Dbh+expression+and+the+activity+of+the+sympathetic+nervous+system+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Foxo1 regulates Dbh expression and the activity of the sympathetic nervous system in vivo.</a> Molecular Metabolism. 3 (7), 770-777 (2014).</li>
</ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Bu protokol, SCG girişinin cerrahi tek taraflı ablasyonu için bir fare modelini açıklar. Bu teknik, çeşitli ortamlarda adrenerjik innervasyonun etkilerini incelemeye izin verir. Ek olarak, rezeke edilen sempatik ganglion, in vitro deneyler için 3D matrigel kültüründe de büyütülebilir30.
SCGx ile ilgili çalışmalar çoğunlukla sıçanlarda gerçekleştirilmiştir, çünkü daha büyük anatomileri daha kolay anatomik görselleştirme ve diseksiyona izin verir. Farelerde SCGx ...

Çok sayıda çalışma, tümör mikroçevresindeki sinirlerin tümör ilerlemesini desteklemede aktif bir rol oynadığını bildirmiştir. Adrenerjik sempatik sinirlerin ablasyonunun prostat ve mide kanserinde in vivo 1,2,3'te tümör gelişimini ve yayılımını bozduğu gösterilirken, adrenerjik reseptörlerin farmakolojik blokajı baş ve boyun kanserinde tümör büyümesini inhibe eder4. Sempatik nöral tutulum pankreas, servikal ve bazal hücreli karsinom progresyonunda da tanımlanmıştır 5,6,7.
Sempatik sinir sistemi içinde, superior servikal ganglion (SCG), sempatik gövdenin başı innerve eden tek ganglionudur. SCG, tükürük salgısı ve sirkadiyen ritim gibi çeşitli fizyolojik fonksiyonları düzenler ve servikal lenf düğümlerini doğrudan innerve eder 8,9,10. SCG ayrıca makula dejenerasyonu11 ve aort diseksiyonu12'nin ilerlemesi gibi patolojik süreçlerde de rol oynamaktadır. Ek olarak, SCG'nin rezeksiyonunun iskemi reperfüzyonuna bağlı akut böbrek hasarını13 şiddetlendirdiği ve ayrıca sıçanlarda bağırsak mikrobiyotasını değiştirdiğibildirilmiştir 14.
SCG'nin bir fare modelinde tam ablasyonu, kanser ve otonom sinir sistemi araştırmalarını mümkün kılmak için değerli bir deneysel tekniği temsil edecektir. Birçok çalışmada farmakolojik adrenerjik reseptör blokajı adrenerjik ablasyon olarak kullanılırken 15,16,17,18,19,20, cerrahi rezeksiyon tam, tek taraflı adrenerjik ablasyona izin verirken, tekrarlanan farmakolojik müdahale ihtiyacını ve ilişkili yan etkileri önler 21,22,23.
SCG'nin cerrahi rezeksiyonu sıçanlardatanımlanmıştır 24 ve superior servikal ganglionektominin (SCGx) etkisini inceleyen çoğu rapor sıçan modelini kullanmıştır. Sıçan modeliyle karşılaştırıldığında, SCGx, SCG'nin küçük boyutu nedeniyle farelerde teknik olarak daha zordur. Bununla birlikte, farelerin kullanımı nispeten daha kolaydır, daha uygun maliyetlidir ve genetik manipülasyona daha uygundur. Garcia ve ark. farelerde SCGx'i ilk bildirenlerden biriydi ve insülin salınımınıetkilediği bulundu 25. Daha yakın zamanlarda, Ziegler ve ark. sıçanlar için açıklanan yayınlanmış tekniğe dayanarak farelerde SCGx'itanımladı 24,26. Bu ve diğer makaleler, ortak karotis arterin (CCA) ilk olarak tanımlandığı ve diseke edildiği ve daha sonra SCG'nin CCA 21,22,27,28'in çatallanmasından çıkarıldığı bir yöntemi açıklamaktadır. Bu makalede, farelerde CCA'nın diseksiyonunu önleyen ve böylece bu prosedürün en ciddi komplikasyonu olan CCA'nın yaralanmasından kaynaklanan kanamayı en aza indiren daha az invaziv ve daha güvenli bir teknik açıklanmaktadır.

<table><tbody><tr><td>Anti-Tirozin Hidroksilaz Antikoru</td><td>EMD Millipore</td><td>AB152</td><td></td></tr><tr><td>Yapay Gözyaşı Yağlayıcı Oftalmik Merhem</td><td>Akorn</td><td>59399-162-35</td><td></td></tr><tr><td>Curity 2 x 2 İnç Gazlı Bez Sünger 8 Katlı, Steril</td><td>Covidien</td><td>1806</td><td></td></tr><tr><td>Derf İğne Tutucu</td><td>Thomas Scientific</td><td>1177K00</td><td></td></tr><tr><td>Diseksiyon Mikroskobu</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5/45 Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11251-35</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #7b Forseps</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>11270-20</td><td></td></tr><tr><td>ETHILON Naylon Sütür</td><td>Ethicon</td><td>698H</td><td></td></tr><tr><td>İnce Makas - ToughCut</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-09</td><td></td></tr><tr><td>Hipoalerjenik Cerrahi Bant</td><td>3M Blenderm</td><td>70200419342</td><td></td></tr><tr><td>İndüksiyon Hazne, 2 Litre</td><td>VetEquip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Baxter</td><td>1001936060</td><td></td></tr><tr><td>Nair</td><td>Kilisesi & Dwight Co., Inc</td><td>40002957</td><td>kimyasal epilasyon ajanı</td></tr><tr><td>NORADRENALIN ARAŞTIRMASI ELISA</td><td>Labor Diagnostika Nord (Rocky Mountain Diagnostics)</td><td>BA E-5200</td><td></td></tr><tr><td>NSG Mouse</td><td>Jackson Laboratory</td><td>JAX:005557</td><td></td></tr><tr><td>Povidon-İyot Swabstick</td><td>PDI</td><td>S41350</td><td></td></tr><tr><td>Webcol Alkol Hazırlıkları</td><td>Covidien</td><td>5110</td><td></td></tr></tbody></table>

bir murin modelinde superior servikal ganglionektomi için cerrahi teknik

Surgical Technique for Superior Cervical Ganglionectomy in a Murine Model

Artan kanıtlar, sempatik sinir sisteminin kanserin ilerlemesinde önemli bir rol oynadığını göstermektedir. Adrenerjik innervasyon tükürük bezi sekresyonunu, sirkadiyen ritmi, makula dejenerasyonunu, bağışıklık fonksiyonunu ve kalp fizyolojisini düzenler. Murin cerrahi sempatektomi, tekrarlanan farmakolojik müdahale ve ilişkili yan etkilere ihtiyaç duyulmadan tam, tek taraflı adrenerjik ablasyona izin vererek adrenerjik innervasyonun etkilerini incelemek için bir yöntemdir. Bununla birlikte, farelerde cerrahi sempatektomi, superior servikal ganglionun küçük boyutu nedeniyle teknik olarak zordur. Bu çalışma, sempatik sinir sistemini ablate etmek için superior servikal ganglionu güvenilir bir şekilde tanımlamak ve rezeke etmek için bir cerrahi tekniği tanımlamaktadır. Ganglionun başarılı bir şekilde tanımlanması ve çıkarılması, floresan sempatik gangliyonların transgenik bir fare kullanılarak görüntülenmesi, rezeksiyon sonrası Horner sendromunun tanımlanması, rezeke edilen gangliyonlarda adrenerjik belirteçlerin boyanması ve sempatektomiyi takiben hedef organlarda azalmış adrenerjik immünofloresansın gözlemlenmesiyle doğrulanır. Bu model, sempatik sinir sistemi tarafından düzenlenen diğer fizyolojik süreçlerin yanı sıra kanser ilerlemesinin gelecekteki çalışmalarını mümkün kılar.

Bu protokol, bir fare modelinde SCG'nin cerrahi olarak çıkarılmasını açıklar. Şekil 2 , CCA, anterior juguler ven ve SCG dahil olmak üzere anatomik işaretleri göstermektedir. Diseksiyonda (Şekil 2A), sağ anterior juguler ven trakeanın lateral sınırı boyunca uzanırken görülebilir. Anterior juguler venden daha derinde yer aldığından, sol CCA ve bunun internal karotis arter (İKA) ve eksternal karotis artere (ECA) bifurkasyonu venin lateralinde sadece belli belirsiz...

Bu protokol, superior servikal ganglionu tanımlayarak ve rezeke ederek adrenerjik innervasyonun ablasyonunun bir fare modelini tanımlamaktadır.

Bir Murin Modelinde Superior Servikal Ganglionektomi için Cerrahi Teknik

Growing evidence suggests that the sympathetic nervous system plays an important role in cancer progression. Adrenergic innervation regulates salivary ...

Sempatik sinir sistemi, kanserin ilerlemesinde ve diğer hastalıklarda önemli bir rol oynar. Cerrahi sempatektomi, tam tek taraflı adrenerjik ablasyonu indükleyerek bu süreçleri incelemek için değerli bir yöntemdir. Bu teknik, sempatik sinir sisteminin farmakolojik inhibisyonu ile ilişkili yan etkilerden kaçınır.Ek olarak, karotis arterin diseksiyonunu önlediği için daha önce tarif edilen yöntemlerden daha az invazivdir. Bu tekniği uygularken, ganglionun bulunduğu doğru boşluğa girmek ve onu yağdan ayırt etmek zor olabilir. Bu nedenle, dönüm noktasını ve uygulamayı belirlemek çok önemlidir.Anatomi hareket halindeyken ve disseke edilmediğinde biraz farklı görünür, bu nedenle görsel gösterim, bu teknik için anahtar olan anatomik dönüm noktasının nasıl tanımlanacağı konusunda daha iyi bir rehber sağlar. Oküler yaralanmaları ve kuruluğu önlemek için anestezi uygulanmış fareye topikal oftalmik merhem uygulayarak başlayın. Fareyi sırt tarafında bir diseksiyon mikroskobu altına yerleştirin ve hassas bir buharlaştırıcı ve burun konisi kullanarak inhalasyon anestezisini sürdürün.Her iki ön ayağı hipoalerjenik bantla sabitleyin. Boynun traşlanmış ventral yönünü povidon iyot ile temizleyin ve ardından% 70 alkolle silin. Temizleme işlemini iki kez daha tekrarladıktan sonra, ameliyat bölgesinin üzerine steril bir örtü yerleştirin.Daha sonra küçük bir makas kullanın ve boynun ventral yönünde, çenenin yaklaşık iki milimetre altından sternal çentiğin iki milimetre yukarısına kadar 1,5 santimetrelik bir orta hat cilt kesisi yapın. Her iki taraftaki derinin altına sivri uçlu makas sokarak ve yayarak cildi alttaki fasyadan ayırın. Ardından, altta yatan fasya ve submandibular tükürük bezlerini ortaya çıkarmak için cildin kenarlarını forseps ile yanal olarak geri çekin.Altta yatan kasları ortaya çıkarmak için submandibular bezleri forseps ile kaudal olarak çekin. Daha sonra, digastrik kas ve omohyoid kasın arka göbeğinin birleşimini bulun. 45 derece açılı forsepsin ucunu, üstteki derin servikal fasyada bir açıklığı delmek ve yaymak için ön juguler venin lateralindeki bu kavşağa sokun.45 derece açılı forseps ile bu pencereyi açık tutun ve diğer elinizde bir çift kavisli forseps ile açma manevraları yaparak bu açıklığı daha da genişletin. Ortaya çıkan boşluğun yan duvarındaki superior servikal ganglionu veya SCG'yi bulun. Diğer elinizle forseps ile açıklığı korurken, SCG'yi forseps ile nazikçe kavrayın ve daha iyi görünmesi için açıklıktan dışarı çekin.SCG göründükten sonra, SCG'nin yan tabanını hala çevre dokulara bağlı olduğu yerde kavrayın. Diğer elinizi kullanarak, gangliyonu yavaş yavaş avulze etmek için SCG'yi ventral ve kaudal yönde birkaç kez yavaşça ve nazikçe geri çekin. Geride artık ganglion kalıntısı kalmadığından emin olmak için bu manevra sırasında gangliyonu sağlam tutun.Gangliyonun tabanını yavaşça serbest bırakın ve kan birikintisi arayarak kanamayı kontrol edin. İşiniz bittiğinde, tükürük bezlerini normal anatomik konumlarına geri getirin. Basit kesintili 5-0 naylon dikişler kullanarak cildi yaklaştırın ve kapatın.Diseksiyon sırasında sağ anterior juguler ven trakeanın lateral sınırı boyunca uzandı. Kırmızı floresan nöronlara sahip P0 tdDomates transgenik faresi floresan mikroskobu altında incelendiğinde, floresan vagus sinirinin ana karotis artere lateral olarak aktığı ve floresan SCG'nin ön juguler venin lateralindeki ortak karotis arterin çatallanmasında izlendiği gözlendi. Transgenik bir farede rezeke edilen SCG, floresan olmayan SCG kontrolüne kıyasla kırmızı floresansı ile doğrulandı.İmmünofloresan boyama, adrenerjik sinirler için bir belirteç olan bir tirozin hidroksilazı doğruladı. Superior servikal ganglionektomi sonrası Horner sendromunun bir belirtisi olan pitozis yani göz kapağı düşüklüğü gözlendi. Sağ süperior servikal ganglionektomiyi takiben sağ submandibuler tükürük bezinde tirozin hidroksilaz için immünofloresan boyama, tirozin hidroksilaz sinir boyaması yokken adrenerjik sinyalin başarılı ablasyonunu doğruladı.Buna karşılık, sol kontrol submandibular bezi adrenerjik girişini korudu ve kantitifikasyon ile de doğrulanan bir tirozin hidroksilaz sinir boyamasını sağlam tuttu. Tükürük bezindeki norepinefrin miktarının ELISA ölçümü, superior servikal ganglionektomi tarafında submandibuler bezde norepinefrin ekspresyonunda kontrol sahte cerrahi tarafının aksine önemli bir azalma olduğunu doğruladı. SCG'yi çıkarırken sabırlı ve nazik olun.Parça parça yavaşça avulse. Aksi takdirde, SCG'ye bağlı karotis arter kolayca yaralanabilir ve kanamaya neden olabilir.

surgical-technique-for-superior-cervical-ganglionectomy-murine

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu, yeni doğmuş sıçan yavruların üstün servikal ganglion (SCG) birincil sempatik nöronlar izole ve kültür nasıl açıklayan bir protokoldür.

Rat Üstün Servikal Ganglia (SCG) kültür Sempatik Nöronlar Protokolü

Aynı fare zaman içinde bir bağışıklık yanıtı ilerlemesini takip etmek, lenf düğümleri sırayla ameliyatla çıkarılabilir. Burada, bu teknik gerçekleştirilebilir açıklanmıştır.

Mürin Yüzeysel lenf nodu Cerrahisi

Bu videoda, insan kaynaklı tümör hücrelerini bir farenin beyninin cisterna magnasına verme prosedürünü açıklıyoruz. Ortotopik fare modeli, kanserin kraniyal meninkslere metastatik yayılımını incelemek için kullanılabilir.

Cerrahi Sarnıç Magna Enjeksiyonu: Murin Modelinin Tümör Hücrelerini Doğrudan Merkezi Sinir Sistemine Uygulamak İçin Bir Yöntem

Farede fasiyal sinir üzerinde bir kesi veya ezme aksotomisinin nasıl yapılacağını detaylandıran bir cerrahi protokol sunuyoruz. Fasiyal sinir aksotomisi, sinir yaralanmasına fizyolojik yanıtı incelemek ve terapötik teknikleri test etmek için kullanılabilir.

Farelerde Yüz Sinir Aksotomi: Sakatlık Motonöron Yanıtı Eğitim için Bir Model

Burada servikal mürin modelinde sütür olmayan manşet tekniği ni kullanarak farelerde heterotopik aort transplantasyonu protokolünü salıyoruz. Bu model kronik allogreft vaskülopatinin (CAV) altta yatan patolojisini incelemek için kullanılabilir ve oluşumunu önlemek için yeni terapötik ajanların değerlendirilmesine yardımcı olabilir.

Modifiye Dikişsiz Manşet Tekniği Kullanılarak Murine Servikal Aort Transplantasyon Modeli

Burada, hastalarda fonksiyonel olarak bir Ommaya rezervuarı andıran bir murine ksinograft modelini tarif ediyoruz. Murine Ommaya'yı evrensel olarak ölümcül leptomeningeal hastalık için yeni terapötikleri incelemek için geliştirdik.

Leptomeningeal Hastalığın Doğrudan Hedefli Tedavisini Incelemek için Bir Murine Ommaya Xenograft Modeli

Farelerde beyin bölgelerini hedeflemek için stereotaksik cerrahi genellikle kafatası kemiklerinden erişimi içerir ve kafatası yer işaretleri tarafından yönlendirilir. Burada, beyin sapı yer işaretlerinin doğrudan görselleştirilmesine dayanan sarnıç magna aracılığıyla kaudal beyin sapı ve üst servikal omuriliği hedeflemek için alternatif bir stereotaksik yaklaşımı özetlemekteyiz.

Farelerde Cisterna Magna ile Kaudal Beyin Sapı ve Üst Servikal Omuriliğin Mikroenjekte Edilmesine Stereotaksik Cerrahi Yaklaşım

Bu protokol, fare üstün servikal ve yıldız gangliyonunun diseksiyonu, hücre ayrışması, kriyoprezervasyon, çekirdek izolasyonu ve hashtag barkodlaması dahil olmak üzere tek çekirdekli dizileme için ayrıntılı, düşük girişli numune hazırlığını açıklar.

Düşük Girişli Çekirdek İzolasyonu ve Tek Çekirdekli RNA Dizilimi için Fare Sempatik Ganglia'nın Barkodlu Antikorları ile Çoklama

Enjeksiyondan sonra bir fare modelinde intrakarotis arterin onarımı, enjekte edilen materyalin dağılımını olumsuz etkilemeden kan akışını artere geri döndürür. Enjeksiyon bölgesi onarımı, aynı arterden sonraki enjeksiyonları kolaylaştırır ve tam bir Willis Çemberi olmayan fare suşlarında serebral iskemiyi önler.

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Bu el yazması, postganglionik lomber sempatik nöronların bir fareden cerrahi olarak çıkarılması için bir protokol sunmaktadır. Bu prosedür, distal doku hedeflerinde sempatik innervasyonun rolünü araştırmayı amaçlayan çok sayıda çalışmayı kolaylaştıracaktır.

Farelerde Cerrahi Lomber Sempatektomi

Öğrenin, farelerde superior servikal ganglionektomi ile adrenerjik innervasyon ablasyonunu. Bu cerrahi teknik, sempatik sinir sisteminin kanser ve diğer hastalıklardaki rolünü araştırmak için minimal invaziv bir yöntem sunar.

Bir Murin Modelinde Superior Servikal Ganglionektomi için Cerrahi Teknik

Daha fazla video keşfet