Name: Mikrovasküler Fragmanlardan Vaskülarize Termojenik Yağ Dokusunun Üç Boyutlu Kültürü (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-03T13:30:00.000+00:00
Duration: 11 min 24 s
Description: Öğrenin, mikrovasküler fragmanlar kullanarak üç boyutlu vaskülarize termojenik yağ dokusu oluşturma yöntemini. Bu protokol, obezite ve metabolik hastalık araştırmalarında bej yağ taklitleri üretmek için basit bir hücre kaynağı sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dr. Acosta, Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından CA148724 ve TL1TR002647 hibeleri ile desteklenmektedir. Dr. Gonzalez Porras, Ulusal Sağlık Enstitüleri Ulusal Diyabet ve Sindirim ve Böbrek Hastalıkları Enstitüsü tarafından F32-0DK122754 Ödül Numarası altında desteklenmektedir. Bu çalışma, kısmen, Ulusal Sağlık Enstitüleri (5SC1DK122578) ve San Antonio'daki Teksas Üniversitesi Biyomedikal Mühendisliği Bölümü tarafından desteklenmiştir. İçerik yalnızca yazarların sorumluluğundadır ve Ulusal Sağlık Enstitüleri'nin resmi görüşlerini temsil etmek zorunda değildir. Rakamlar kısmen Biorender.com ile oluşturulmuştur.

<ol><li>Cohen, P., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+beige+fat%3A+molecular+parts+of+a+thermogenic+machine%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Brown and beige fat: molecular parts of a thermogenic machine.</a> Diabetes. 64 (7), 2346-2351 (2015).</li>
<li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+adipose+tissue+transplantation+reverses+obesity+in+Ob%2FOb+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Brown adipose tissue transplantation reverses obesity in Ob/Ob mice.</a> Endocrinology. 156 (7), 2461-2469 (2015).</li>
<li>Tharp, K. M., Stahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+beige+adipose+tissue+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Bioengineering beige adipose tissue therapeutics.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 164(2015).</li>
<li>Barquissau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((White-to-brite+conversion+in+human+adipocytes+promotes+metabolic+reprogramming+towards+fatty+acid+anabolic+and+catabolic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Metabolism%22%5BJournal%5D)">White-to-brite conversion in human adipocytes promotes metabolic reprogramming towards fatty acid anabolic and catabolic pathways.</a> Molecular Metabolism. 5 (5), 352-365 (2016).</li>
<li>Kim, S. H., Plutzky, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+fat+and+browning+for+the+treatment+of+obesity+and+related+metabolic+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+%26+Metabolism+Journal%22%5BJournal%5D)">Brown fat and browning for the treatment of obesity and related metabolic disorders.</a> Diabetes & Metabolism Journal. 40 (1), 12-21 (2016).</li>
<li>Lizcano, F., Vargas, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biology+of+beige+adipocyte+and+possible+therapy+for+type+2+diabetes+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Biology of beige adipocyte and possible therapy for type 2 diabetes and obesity.</a> International Journal of Endocrinology. 2016, 9542061(2016).</li>
<li>Mulya, A., Kirwan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+beige+adipose+tissue%3A+therapy+for+obesity+and+its+comorbidities%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology+and+Metabolism+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Brown and beige adipose tissue: therapy for obesity and its comorbidities.</a> Endocrinology and Metabolism Clinics of North America. 45 (3), 605-621 (2016).</li>
<li>Murphy, C. S., Liaw, L., Reagan, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+tissue-engineered+adipose+constructs+for+modeling+disease%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">In vitro tissue-engineered adipose constructs for modeling disease.</a> BMC Biomedical Engineering. 1, 27(2019).</li>
<li>Srivastava, S., Veech, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+and+brite%3A+The+fat+soldiers+in+the+anti-obesity+fight%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Brown and brite: The fat soldiers in the anti-obesity fight.</a> Frontiers in Physiology. 10, 38(2019).</li>
<li>Samuelson, I., Vidal-Puig, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+brown+adipose+tissue+in+a+human+in+vitro+context%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Studying brown adipose tissue in a human in vitro context.</a> Frontiers in Endocrinology. 11, 629(2020).</li>
<li>Wang, C. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRISPR-engineered+human+brown-like+adipocytes+prevent+diet-induced+obesity+and+ameliorate+metabolic+syndrome+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">CRISPR-engineered human brown-like adipocytes prevent diet-induced obesity and ameliorate metabolic syndrome in mice.</a> Science Translational Medicine. 12 (558), (2020).</li>
<li>Kaisanlahti, A., Glumoff, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Browning+of+white+fat%3A+agents+and+implications+for+beige+adipose+tissue+to+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Physiology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Browning of white fat: agents and implications for beige adipose tissue to type 2 diabetes.</a> Journal of Physiology and Biochemistry. 75 (1), 1-10 (2019).</li>
<li>Sato, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+capillary+networks+from+rat+microvascular+fragments+in+vitro%3A+the+role+of+myofibroblastic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Microvascular+Research%22%5BJournal%5D)">Development of capillary networks from rat microvascular fragments in vitro: the role of myofibroblastic cells.</a> Microvascular Research. 33 (2), 194-210 (1987).</li>
<li>Laschke, M. W., Später, T., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microvascular+fragments%3A+More+than+just+natural+vascularization+units%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Microvascular fragments: More than just natural vascularization units.</a> Trends in Biotechnology. 39 (1), 24-33 (2021).</li>
<li>Hoying, J. B., Boswell, C. A., Williams, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenic+potential+of+microvessel+fragments+established+in+three-dimensional+collagen+gels%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology-Animal%22%5BJournal%5D)">Angiogenic potential of microvessel fragments established in three-dimensional collagen gels.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. 32 (7), 409-419 (1996).</li>
<li>Acosta, F. M., Stojkova, K., Brey, E. M., Rathbone, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+straightforward+approach+to+engineer+vascularized+adipose+tissue+using+microvascular+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">A straightforward approach to engineer vascularized adipose tissue using microvascular fragments.</a> Tissue Engineering. Part A. 26 (15-16), 905-914 (2020).</li>
<li>Acosta, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipogenic+differentiation+alters+properties+of+vascularized+tissue-engineered+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Adipogenic differentiation alters properties of vascularized tissue-engineered skeletal muscle.</a> Tissue Engineering. Part A. 28 (1-2), 54-68 (2021).</li>
<li>Strobel, H. A., Gerton, T., Hoying, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+adipocyte+organoid+model+using+isolated+human+microvessel+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Biofabrication%22%5BJournal%5D)">Vascularized adipocyte organoid model using isolated human microvessel fragments.</a> Biofabrication. 13 (3), 035022(2021).</li>
<li>Acosta, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+functional+vascularized+beige+adipose+tissue+from+microvascular+fragments+of+models+of+healthy+and+type+II+diabetes+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Tissue+Engineering%22%5BJournal%5D)">Engineering functional vascularized beige adipose tissue from microvascular fragments of models of healthy and type II diabetes conditions.</a> Journal of Tissue Engineering. 13, 20417314221109337(2022).</li>
<li>Gonzalez Porras, M. A., Stojkova, K., Acosta, F. M., Rathbone, C. R., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+human+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Engineering human beige adipose tissue.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 10, 906395(2022).</li>
<li>Herold, J., Kalucka, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiogenesis+in+adipose+tissue%3A+The+interplay+between+adipose+and+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Angiogenesis in adipose tissue: The interplay between adipose and endothelial cells.</a> Frontiers in Physiology. 11, 1861(2021).</li>
<li>McCarthy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fat-On-A-Chip+models+for+research+and+discovery+in+obesity+and+its+metabolic+comorbidities%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Fat-On-A-Chip models for research and discovery in obesity and its metabolic comorbidities.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 26 (6), 586-595 (2020).</li>
<li>Klingelhutz, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold-free+generation+of+uniform+adipose+spheroids+for+metabolism+research+and+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Scaffold-free generation of uniform adipose spheroids for metabolism research and drug discovery.</a> Scientific Reports. 8 (1), 523(2018).</li>
<li>Yang, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolically+active+three-dimensional+brown+adipose+tissue+engineered+from+white+adipose-derived+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Metabolically active three-dimensional brown adipose tissue engineered from white adipose-derived stem cells.</a> Tissue Engineering. Part A. 23 (7-8), 253-262 (2017).</li>
<li>Vaicik, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrogel-based+engineering+of+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Hydrogel-based engineering of beige adipose tissue.</a> Journal of Materials Chemistry B. 3 (40), 7903-7911 (2015).</li>
<li>Tharp, K. M., Stahl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioengineering+beige+adipose+tissue+therapeutics%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Bioengineering beige adipose tissue therapeutics.</a> Frontiers in Endocrinology. 6, 164(2015).</li>
<li>Tharp, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-assisted+transplantation+of+functional+beige+adipose+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Matrix-assisted transplantation of functional beige adipose tissue.</a> Diabetes. 64 (11), 3713-3724 (2015).</li>
<li>Harms, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+human+white+adipocytes+cultured+under+membranes+maintain+identity%2C+function%2C+and+can+transdifferentiate+into+brown-like+adipocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Mature human white adipocytes cultured under membranes maintain identity, function, and can transdifferentiate into brown-like adipocytes.</a> Cell Reports. 27 (1), 213-225 (2019).</li>
<li>Frueh, F. S., Später, T., Scheuer, C., Menger, M. D., Laschke, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+murine+adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+as+vascularization+units+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Isolation of murine adipose tissue-derived microvascular fragments as vascularization units for tissue engineering.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55721(2017).</li>
<li>Cannon, B., Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brown+adipose+tissue%3A+Function+and+physiological+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Brown adipose tissue: Function and physiological significance.</a> Physiological Reviews. 84 (1), 277-359 (2004).</li>
<li>Unser, A. M., Tian, Y., Xie, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Opportunities+and+challenges+in+three-dimensional+brown+adipogenesis+of+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+Advances%22%5BJournal%5D)">Opportunities and challenges in three-dimensional brown adipogenesis of stem cells.</a> Biotechnology Advances. 33, 962-979 (2015).</li>
<li>Dani, V., Yao, X., Dani, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+fat+tissues+and+iPSC-derived+energy+expenditure+adipocytes+to+counteract+obesity-driven+metabolic+disorders%3A+Current+strategies+and+future+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Reviews+in+Endocrine+%26+Metabolic+Disorders%22%5BJournal%5D)">Transplantation of fat tissues and iPSC-derived energy expenditure adipocytes to counteract obesity-driven metabolic disorders: Current strategies and future perspectives.</a> Reviews in Endocrine & Metabolic Disorders. 23 (1), 103-110 (2022).</li>
<li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+as+vascularization+units+for+dental+pulp+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Endodontics%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments as vascularization units for dental pulp regeneration.</a> Journal of Endodontics. 47 (7), 1092-1100 (2021).</li>
<li>McDaniel, J. S., Pilia, M., Ward, C. L., Pollot, B. E., Rathbone, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+and+multilineage+potential+of+cells+derived+from+isolated+microvascular+fragments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Characterization and multilineage potential of cells derived from isolated microvascular fragments.</a> Journal of Surgical Research. 192 (1), 214-222 (2014).</li>
<li>Gealekman, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Depot-specific+differences+and+insufficient+subcutaneous+adipose+tissue+angiogenesis+in+human+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Depot-specific differences and insufficient subcutaneous adipose tissue angiogenesis in human obesity.</a> Circulation. 123 (2), 186-194 (2011).</li>
<li>Altalhi, W., Hatkar, R., Hoying, J. B., Aghazadeh, Y., Nunes, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+I+diabetes+delays+perfusion+and+engraftment+of+3D+constructs+by+impinging+on+angiogenesis%3B+which+can+be+rescued+by+hepatocyte+growth+factor+supplementation%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Type I diabetes delays perfusion and engraftment of 3D constructs by impinging on angiogenesis; which can be rescued by hepatocyte growth factor supplementation.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 12 (5), 443-454 (2019).</li>
<li>Altalhi, W., Sun, X., Sivak, J. M., Husain, M., Nunes, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+impairs+arterio-venous+specification+in+engineered+vascular+tissues+in+a+perivascular+cell+recruitment-dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Diabetes impairs arterio-venous specification in engineered vascular tissues in a perivascular cell recruitment-dependent manner.</a> Biomaterials. 119, 23-32 (2017).</li>
<li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+from+aged+donors+exhibit+an+impaired+vascularisation+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22European+Cells+%26+Materials%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments from aged donors exhibit an impaired vascularisation capacity.</a> European Cells & Materials. 28, 287-298 (2014).</li>
<li>Später, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularization+of+microvascular+fragment+isolates+from+visceral+and+subcutaneous+adipose+tissue+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+and+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Vascularization of microvascular fragment isolates from visceral and subcutaneous adipose tissue of mice.</a> Tissue Engineering and Regenerative Medicine. 19 (1), 161-175 (2021).</li>
<li>Später, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+tissue-derived+microvascular+fragments+from+male+and+female+fat+donors+exhibit+a+comparable+vascularization+capacity%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Bioengineering+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Adipose tissue-derived microvascular fragments from male and female fat donors exhibit a comparable vascularization capacity.</a> Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 9, 777687(2021).</li>
<li>Laschke, M. W., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+simpler%2C+the+better%3A+tissue+vascularization+using+the+body%27s+own+resources%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">The simpler, the better: tissue vascularization using the body's own resources.</a> Trends in Biotechnology. 40 (3), 281-290 (2022).</li>
<li>Yang, F., Cohen, R. N., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+co-culture+conditions+for+a+human+vascularized+adipose+tissue+model%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Optimization of co-culture conditions for a human vascularized adipose tissue model.</a> Bioengineering. 7 (3), 114(2020).</li>
<li>Pilkington, A. -C., Paz, H. A., Wankhade, U. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beige+adipose+tissue+identification+and+marker+specificity-Overview%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Beige adipose tissue identification and marker specificity-Overview.</a> Frontiers in Endocrinology. 12, 599134(2021).</li>
<li>Chiou, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scaffold+architecture+and+matrix+strain+modulate+mesenchymal+cell+and+microvascular+growth+and+development+in+a+time+dependent+manner%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+and+Molecular+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Scaffold architecture and matrix strain modulate mesenchymal cell and microvascular growth and development in a time dependent manner.</a> Cellular and Molecular Bioengineering. 13 (5), 507-526 (2020).</li>
</ol>

Yazarlar, araştırmanın potansiyel bir çıkar çatışması olarak yorumlanabilecek herhangi bir ticari veya finansal ilişkinin yokluğunda yapıldığını beyan etmektedir.

Kahverengi/bej yağ dokusu mühendisliği alanı büyük ölçüde olgunlaşmamış 22,23,24,25,26,27,28 olup, beyaz yağ dokusu için yağ modellerinin büyük kısmıgeliştirilmektedir 8,22,31. Mühendislik kahvereng...

Bu protokolün amacı, potansiyel olarak otolog tek bir kaynaktan, mikrovasküler fragmandan (MVF) vaskülarize bej yağ dokusu geliştirmek için bir yaklaşımı tanımlamaktır. Kahverengi ve bej yağ dokularının metabolik regülasyon ile ilgili faydalı özellikler gösterdiği gösterilmiştir; Bununla birlikte, yetişkinlerde bu yağ dokusu depolarının küçük hacmi, özellikle obezite veya tip 2 diyabet 1,2,3,4,5,6,7 gibi hastalıklı durumlarda, sistemik metabolizma üzerindeki potansiyel etkiyi sınırlar. Obezite ve komorbiditeleri ile bağlantılı zararlı metabolik etkilerin önlenmesinde terapötik bir hedef olarak kahverengi / bej yağa önemli bir ilgi vardır 8,9,10,11,12.
MVF'ler, yağ dokusundan doğrudan izole edilebilen, kültürlenebilen ve uzun süre üç boyutlu bir konfigürasyonda tutulabilen damar yapılarıdır13,14,15. Grubumuzun ve diğerlerinin önceki çalışmaları, MVF'lerin çok hücreli ve çok güçlü kapasitesini, özellikle yağ dokusu oluşumu16,17,18 ile ilgili olarak kullanmaya başlamıştır. Bu çalışmanın bir birikimi olarak, yakın zamanda sağlıklı ve tip 2 diyabet19'un kemirgen modellerinden ve insan deneklerden (50 yaşın üzerindeki yetişkinler)20 türetilen MVF'lerin, termojenik veya bej yağ dokusu oluşturmak için indüklenebilen hücreler içerdiğini gösterdik.
Burada, sadece bej yağ dokusu oluşturmakla kalmayıp aynı zamanda ilişkili ve kritik vasküler bileşenini de oluşturabilen tek bir kaynak MVF'nin kullanıldığı yenilikçi bir yaklaşımbulunmaktadır 21. Bu tekniğin kullanımı, termojenik yağ dokusu oluşumu için basit bir doku mühendisliği yaklaşımı arayan çalışmalar için büyük değer taşıyabilir. Bej yağ dokusu 22,23,24,25,26,27,28'in mühendisliğini amaçlayan diğer yöntemlerin aksine, bu çalışmada açıklanan süreç çoklu hücre tiplerinin veya karmaşık indüksiyon rejimlerinin kullanılmasını gerektirmez. Kemirgen ve insan kaynaklarından kaynaklanan MVF'ler ile vaskülarize bej ve beyaz yağ modelleri oluşturulabilir ve bu da büyük çeviri potansiyeli gösterir. Bu protokolün son ürünü, kahverengi yağ dokusu ile karşılaştırılabilir bir yapıya ve metabolik fonksiyona sahip, tasarlanmış bir bej termojenik yağ dokusudur. Genel olarak, bu protokol, kolayca erişilebilen ve muhtemelen otolog bir kaynak MVF'nin metabolik bozuklukları incelemek için değerli bir terapötik müdahale ve araç olabileceği fikrini sunmaktadır.

<table><tbody><tr><td>Aminokaproik Asit</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2504-100G</td><td>1 mg / mL konsantrasyonunda DMEM'e eklendi</td></tr><tr><td>Künt Uçlu Makas</td><td>Fisher scientific</td><td>12-000-172</td><td>Otoklavda sterilize</td></tr> edin <tr><td>Bovin Serum Albümini (BSA)</td> <td>Millipore</td><td>126575-10GM</td><td>PBS'de 4 mg / mL ve 1 mg / mL</td></tr><tr><td>Collagenase Tip 1'e</td> seyreltilmiş <td>Fisher bilimsel</td><td>NC9633623</td><td>BSA 4 mg / mL içinde 6 mg / mL'ye seyreltilmiş, Kıyılmış yağın sindirimi</td></tr><tr><td>Deksametazon</td><td>Thermo Scientific</td><td>AC230302500</td><td>2 mg / ml stok konsantrasyonunda etanol içinde seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Tek kullanımlık alt pedler</td><td>Fisher scientific</td><td>23-666-062</td><td>Ameliyat sırasında sıvı emilimi için</td></tr><tr><td>Diseksiyon Makası</td><td>Fisher scientific</td><td>08-951-5</td><td>Otoklavda</td></tr> <tr><td>sterilize edinDulbecco ve başbakan; s Modifiye Eagle & Prime; s Orta (DMEM)</td><td>Fisher bilimsel</td><td>11885092</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco&prime; s Modifiye Eagle & Prime; s Orta/Besin Karışımı F-12 Jambon (DMEM/F12)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D8062</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu&nbsp;</td><td>Fisher bilimsel</td><td>16140089</td><td>DMEM'de %20 v/v'ye eklendi.</td></tr><tr><td>Fibrinojen&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F8630-25G</td><td>20 mg / mL konsantrasyonunda DMEM'de çözündürülmüş, Kan plazmasında bulunan protein ve hidrojel Şişesi'nin ana bileşeni</td></tr><tr><td>, 250 mL</td><td>Fisher bilimsel</td><td>FB500250</td><td>Geniş bir yüzey alanı kullanarak yağın sindirilmesine izin verir</td></tr><tr><td>Forseps</td><td>Fisher scientific</td><td>50-264-21</td><td>Otoklavda sterilize edin, Doku ve filtrelerin kullanımı için</td></tr><tr><td>Forskolin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>F6886</td><td>10 mM stok konsantrasyonunda etanol içinde seyreltilmiş</td></tr><tr><td>İnsan MVF'si</td><td>Gelişmiş Çözümler Life Scienes, LLC</td><td>https://www.advancedsolutions.com/microvessels</td><td>Bu çalışmada üç farklı hastadan (52, 54 ve 56 yaşındaki kadınlar) izole edilen İnsan MVF'leri (hMVF'ler) kullanılmıştır.</td></tr><tr><td>İndometasin&nbsp;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>I7378</td><td>12.5 mM stok konsantrasyonunda etanol içinde seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Domuz pankreasından insülin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>I5523</td><td>5 mg / ml stok konsantrasyonunda 0.01 N HCl içinde seyreltilmiş</td></tr><tr><td>MycoZap</td><td>Fisher bilimsel</td><td>NC9023832</td><td>DMEM'de ağırlıkça %0.2'ye eklendi, Mikoplazma Profilaktik&nbsp;</td></tr><tr><td>Pennycilin/Streptomisin (10.000 U/mL)</td><td>Fisher bilimsel</td><td>15140122</td><td>DMEM'de %1 v/v'ye eklenir.</td></tr><tr><td>Petri kapları, polistiren (100 mm x 15 mm).</td><td>Fisher scientific</td><td>351029</td><td>3 kan damarlarının çıkarılması ve kıyma için, eleklerin önceden ıslatılması için 8 (kapak) ve 500 veya 37 & mikro ile filtreleme yaparken kullanım için 8 (çanak); M</td></tr><tr><td>, Petri kapları, polistiren (35 mm x 10 mm)</td> tarar.<td>Fisher scientific</td><td>50-202-036</td><td>Parçaları saymak için</td></tr><tr><td>Fosfat Tampon Salin (PBS)</td> <td>Fisher scientific</td><td>14-190-250</td><td>Steril deiyonize su ile 1x'e seyreltilir.</td></tr><tr><td>Sıçan Makası (Andwin Mini Arco Evcil Hayvan Düzeltici)</td><td>Fisher bilimsel</td><td>NC0854141</td><td></td></tr><tr><td>Rosiglitazone</td><td>Fisher bilimsel</td><td>R0106200MG</td><td>10 mM stok konsantrasyonunda DMSO'da seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Makas</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>14059-11</td><td>İlk insizyon için 1, epididimal insizyon için 1, uç kırpma için 1</td></tr><tr><td>Ekran&nbsp; 37 &mikro; M&nbsp;</td><td>Carolina Biyolojik Tedarik Şirketi</td><td>652222R</td><td>3 "yuvarlak kareler halinde kesin ve etilen oksit içinde sterilize edilmiş, Parça sıkışması ve çok küçük parçaların/tek hücrelerin ve döküntülerin çıkarılması</td></tr><tr><td>Ekran 500 ve mikro; M&nbsp;</td><td>Carolina Biyolojik Tedarik Şirketi</td><td>652222F</td><td>3 "yuvarlak kareler halinde kesin ve etilen oksit içinde sterilize edildi, Daha büyük parçaları/kalıntıları temizler</td></tr><tr><td>Tırtıklı Hemostat</td><td>Fisher scientific</td><td>12-000-171</td><td>Otoklavda sterilize edin, İnsizyondan önce cildin sıkıştırılması için</td></tr><tr><td>Steriflip Filter 0.22 &; m&nbsp;</td><td>Millipore</td><td>SE1M179M6</td><td></td></tr><tr><td>Trombin</td><td>Fisher scientific</td><td>6051601KU</td><td>Deiyonize suda 10 U / mL'ye seyreltilmiş, Fibrinojeni fibrine dönüştüren bir pıhtılaşma ajanı olarak kullanılır</td></tr><tr><td>Tiroid hormonu (T3)</td> <td>Sigma Aldrich</td><td>T2877</td><td>0.02 mM stok konsantrasyonunda 1N NaOH içinde seyreltilmiş</td></tr><tr><td>Zucker diyabetik yağlı (ZDF) sıçanlar - obez (FA / FA) veya yağsız (FA / +) erkek&nbsp;</td><td>Charles Nehri</td><td>https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-lean-fa?region=3611 https://www.criver.com/products-services/find-model/zdf-rat-obese?region=3611</td><td>Charles Nehri'nden (Wilmington, MA) elde edilmiştir. Sıçanlar 4 haftalıkken alındı ve ötenaziye kadar (15-19 haftalık) Purina 5008 ile beslendi. Çalışmada kullanılan tüm FA / FA sıçanlarında glikoz seviyeleri (lateral safen veninden gelen kan) 300 mg / dL'den yüksekti. Tüm hayvanlar, 12 saatlik aydınlık-karanlık döngüsü ile sıcaklık kontrollü bir ortamda barındırıldı ve ad libitum ile beslendi.</td></tr></tbody></table>

mikrovasküler fragmanlardan vaskülarize termojenik yağ dokusunun Üç boyutlu kültürü

Three-Dimensional Culture of Vascularized Thermogenic Adipose Tissue from Microvascular Fragments

Mühendislik termojenik yağ dokusu (örneğin, bej veya kahverengi yağ dokuları), metabolik hastalıklar için potansiyel bir tedavi olarak veya sağlık taraması ve ilaç testi için kişiselleştirilmiş mikrodokuların tasarımı için araştırılmıştır. Mevcut stratejiler genellikle oldukça karmaşıktır ve termojenik yağ dokusunun çok hücreli ve fonksiyonel özelliklerini tam olarak tam olarak tasvir edememektedir. Yağ dokusundan izole edilen arteriol, venüller ve kılcal damarlardan oluşan küçük bozulmamış mikrodamarlar olan mikrovasküler fragmanlar, vaskülarizasyon ve yağ dokusu oluşumunu sağlayan tek bir otolog hücre kaynağı olarak işlev görür. Bu makalede, mikrovasküler fragmanların yağ dokusu ve kültür koşullarından izole edilmesine yönelik protokoller de dahil olmak üzere, mikrovasküler fragmanlardan üç boyutlu, vaskülarize ve fonksiyonel termojenik yağ dokularının üretilmesini sağlamak için kültür koşullarını optimize etme yöntemleri açıklanmaktadır. Ek olarak, mühendislik dokularını karakterize etme teknikleri gibi en iyi uygulamalar tartışılmakta ve hem kemirgen hem de insan mikrovasküler fragmanlarından numune sonuçları sağlanmaktadır. Bu yaklaşım, obezite ve metabolik hastalıklara yönelik tedavilerin anlaşılması ve geliştirilmesi için kullanılma potansiyeline sahiptir.

Bej / kahverengi yağ dokusunun birkaç önemli fenotipik morfolojik özelliği vardır: multilokülerdir / küçük lipit damlacıkları içerir, çok sayıda mitokondriye sahiptir (karakteristik olarak "kahverengimsi" görünümünün nedeni in vivo), buna bağlı olarak yüksek oksijen tüketim oranına / mitokondriyal biyoenerjetik özelliklere sahiptir, yüksek vaskülarize olmuş, lipoliz / insülin ile uyarılmış glikoz alımını arttırmıştır ve en ünlüsü, termojenik solunumda rol oynayan mitokondriyal bir protein olan yüksek düzeyde ay...

Burada, kemirgen veya insan yağ dokusundan izole edilen mikrovasküler fragmanların işlevsel, vaskülarize bej yağ dokusunun mühendisliğine basit bir yaklaşım olarak kullanımını özetleyen ayrıntılı bir protokol sunuyoruz.

Mikrovasküler Fragmanlardan Vaskülarize Termojenik Yağ Dokusunun Üç Boyutlu Kültürü

Engineering thermogenic adipose tissue (e.g., beige or brown adipose tissues) has been investigated as a potential therapy for metabolic diseases or for ...

Bu protokol, mikrovasküler fragmanlardan veya MVF'lerden üç boyutlu vaskülarize ve fonksiyonel termojenik yağın oluşumunu tanımlar. termojenik yağ dokusunun mühendisliği için mevcut stratejiler karmaşıktır ve çok hücreli ve fonksiyonel özelliklerini tam olarak tasvir etmemektedir. MVF'ler vaskülarizasyon ve yağ dokusu oluşumunu sağlayan tek bir hücre kaynağıdır.Bej yağın biyolojik taklitlerini oluşturmak için basit bir tek kaynaklı yöntem olan MVF'ler, obezite ve metabolik hastalıklara yönelik tedavilerin anlaşılmasını veya geliştirilmesini teşvik etmek için önemli bir potansiyele sahiptir. % 70 etanol ile muamele edilmiş uygun şekilde traş edilmiş ve ötenazi edilmiş hayvanı sırtüstü pozisyonda yerleştirin ve kasık yağının izolasyonuna başlayın. Cildi penisin altına bir çift makasla kaldırın ve tüm yağ birikintisine erişmek için hayvanın arka tarafına ilmek atmadan önce, merkezden başlayıp yanal olarak keserek, bir V şekli oluşturarak insizyonu gerçekleştirin.Kesim yaparken, birbirine bağlı fasya dokusunu keserek cildin yağdan ayrılmasını sağlayın. Fasya uygun şekilde kesildikten sonra, kasıklardan arkaya doğru uzanan her iki taraftan da kasık yağının görülebildiğinden emin olun. Daha sonra, PBS'de 10 mililitre BSA içeren ve mililitre başına bir miligram konsantrasyonuna sahip ayrı konik tüplerde yağı iki taraftan çıkarın.Epididim yağını toplamak için, karın derisini kesin, ardından testisleri çevreleyen ince tabakayı dikkatlice kesin. Forseps kullanarak yağ dokusunu yavaşça çekin ve herhangi bir büyük görünür kan damarının diseksiyonundan kaçınırken makas kullanarak kesin. Şimdi, çıkarılan yağı PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram içeren 50 mililitrelik bir konik tüpe yerleştirin.Posterior subkutan yağını izole etmek için, sıçanı eğilimli hale getirin ve sırtın kalın derisini kafa derisine kadar kesmek için büyük makas kullanın, cildin altında çok derin kesmemeye dikkat edin. Cildi dokuya bağlayan fasyayı kesin. İntraskapular bölgede bulunan subkutan yağını, PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram içeren 50 mililitrelik bir konik tüpe izole etmeden ve yerleştirmeden önce omurgaya daha yakın bulunan kahverengi yağdan ayırt edin.Bir biyodavlumbazın içinde çalışırken, eksize edilen yağı PBS'de mililitre BSA başına 0.5 mililitre bir miligram içeren standart bir 100 mililitre Petri kabına yerleştirmek için forseps kullanın. Görünür kan damarlarını, kasları veya yabancı dokuları yağdan çıkarın. Makas kullanarak, yağı 10 dakika boyunca kıyın ve biraz daha BSA ekleyerek topakları kontrol edin.Gerekirse, kıyılmış yağ süspansiyonunu 10 mililitrelik pipetle steril 250 mililitrelik bir şişeye aktarmadan önce kıymaya devam edin. PBS'ye yeterli BSA ekleyerek şişedeki hacmi 20 mililitreye kadar çıkarın. Şimdi BSA'yı PBS'ye kollajenaza ekleyin ve çözeltiyi 0,22 mikronluk naylon bir net filtreden steril olarak filtrelemeden önce hafifçe çalkalayarak homojenize edin.Hemen gerekli miktarda kollajenaz çözeltisini kıyılmış yağ süspansiyonuna ekleyin ve şişeyi uygun bir süre boyunca 37 santigrat derecede bir su banyosunda dairesel bir hareketle sallayarak yağı sindirin. Sindirilmiş yağı, sindirilmiş yağ veya kıyılmış yağ etiketli 50 mililitrelik konik bir tüpe aktarın. Mikrovasküler parçaları veya MVF'leri kırmızı bir pelet haline getirmek için tüpü dört dakika boyunca 400 G'de santrifüj edin.Süpernatantı pelet rahatsız etmeden atık etiketli 50 mililitrelik konik bir tüpe yavaşça boşaltın. Daha sonra, pelet içeren tüpe PBS'de mililitre BSA başına 10 mililitre bir miligram ekleyin ve pelet süspansiyonunu, parçaları bozmadan hafifçe yukarı ve aşağı iki kez pipetleyerek karıştırın. Şimdi, PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre bir miligram içeren steril bir Petri kabına önceden batırılmış 500 mikronluk ekranı alın ve yeni bir Petri kabında tutulan plastik ekran tutucunun üzerine yerleştirin.Pipet, sindirilmiş pelet tüpünden eşmerkezli daireler halinde ekrana 10 mililitre süspansiyon. Filtreyi PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre ilave bir miligram ile yıkayın ve Petri kabının içindeki filtratı korurken atın. Ardından, önceden ıslatılmış 37 mikronluk ekranı yeni bir Petri kabı üzerindeki plastik ekran tutucunun üzerine yerleştirin.Yeni bir pipet kullanarak, filtratı ilk filtrasyondan eşmerkezli daireler halinde ekrana aktarın. Daha önce açıklandığı gibi, ekranı PBS'de BSA ile yıkayın ve bu sefer 37 mikronluk ekranı korurken filtreyi atın. 37 mikronluk ekranı, PBS'de mililitre BSA başına beş mililitre bir miligram içeren yeni bir Petri kabına kaydırın.Herhangi bir sıvı dökmeden, çanağı konik bir tutucuya hafifçe vurarak parçaları yerinden çıkarın. Filtreyi PBS'de ilave beş mililitre BSA ile durulayın. Daha sonra, sıvıyı Petri kabından steril 50 mililitrelik bir konik tüpe aktarın.37 mikronluk ekranı birkaç kez daha durulayın, toplanan toplam hacim 15 ila 20 mililitre olana kadar yıkamayı konik tüpe ekleyin. Son durulamadan sonra ekranı atın. 20 mikrolitrelik pipet ucunun ucunu makas kullanarak kesin.Kesilmiş pipet ucunu kullanarak 20 mikrolitrelik iki alikot çekmeden önce sıvıyı içeren tüpü yavaşça çalkalayın ve alikotların her birini temiz bir 35 milimetrelik Petri kabına pipetin. Standart bir ışık mikroskobu kullanarak her Petri kabındaki numunedeki fragman sayısını sayın ve makalede belirtilen formülü kullanarak, izole edilmiş mikrovasküler fragmanların toplam sayısını elde edin. MVF'yi toplamak için 50 mililitrelik konik tüpte kalan sıvıyı dört dakika boyunca 400 G'de döndürün.Eğirme işleminden sonra, süpernatantın çoğunu konik tüpten boşaltın ve tüpün kenarında kalan küçük hacimli sıvıyı çıkarmak için bir pipet kullanın. Daha sonra, jelleri dökmek için belirlenen kuyucuklara trombin ekleyin. 200 mikrolitrelik pipet ucunun ucunu kesin ve bunu kullanarak, istenen son yoğunluğu elde etmek için MVF'leri fibrinojen içinde nazikçe askıya alın.Süspansiyonu kuyucuktaki trombin çözeltisine pipetleyin ve yukarı ve aşağı pipetleyerek karışımı hızlı bir şekilde homojenize edin. Tüm jeller döküldükten sonra, jelin çapraz bağlanmasına izin vermek için kuyu plakasını 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte yaklaşık 15 dakika boyunca bir inkübatöre yerleştirin. Lipidler ve farklılaşmış adipositler, lipid boyası olarak BODIPY kullanılarak hidrojellerin konfokal mikroskopi görüntülemesi ile gözlendi.Beyaz adipojenik veya bej adipojenik medya kullanılarak vaskülarize edilmemiş yağ dokusunun kültürlenmesi, hem yağsız hem de diyabetik kemirgen kaynaklı MVF'lerden sırasıyla vaskülarize olmayan beyaz veya bej yağ dokusunun oluşmasına neden olmuştur. Benzer şekilde, beyaz adipojenik veya bej adipojenik medya kullanılarak vaskülarize yağ dokusunun kültürlenmesi, kemirgen kaynaklı MVF'lerden sırasıyla vaskülarize beyaz veya bej yağ dokusunun oluşmasına neden olmuştur.MVF'lerin bej yağ dokusuna farklılaşma kabiliyeti RT-qPCR kullanılarak genetik olarak doğrulandı. Doğrudan beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan yağsız ve diyabetik Kemirgen MVF'ler adipogenez, termojenez ve anjiyogenez açısından değerlendirildi. Beklendiği gibi çözülen protein 1'in ekspresyonu, bej adipojenik dokuda anlamlı derecede yüksekti.Benzer bir eğilim, dolaylı beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan kemirgen MVF'lerde ve ayrıca doğrudan beyaz adipojenik veya bej adipojenik ortama maruz kalan insan MVF'lerinde gözlenmiştir. Son olarak, mitokondriyal biyoenerjetik olarak, fonksiyonel olarak, bej yağ dokusunun her durumda karakteristik olarak daha yüksek oksijen tüketim oranına veya OCR seviyesine sahip olduğu açıktı. Yağ dokusunun enzimatik sindirimi, benzer boyut ve kalitede MVF'leri tutarlı bir şekilde çoğaltmak için optimize edilmelidir.Sindirim sonrası, MVF'ler, parçaların daha fazla parçalanmasını önlemek için özel bir özenle nazikçe ele alınmalıdır. Bu teknik, tanıtılan faktörlere bağlı olduğu kanıtlanan damar büyümesi ve adiposit farklılaşması dengesini daha da ileri götürmeye yardımcı oldu.

three-dimensional-culture-vascularized-thermogenic-adipose-tissue

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Burada, karın içi yağ dokusunda ısı üretimi için lipitleri tüketen ve obez farelerde enerji dağılımını artıran katabolik hücrelerin kapsüllenmesi için bir protokol sunuyoruz.

Yağ Dokusu Depolarında içine Nakli Enkapsülasyon termojenik Preadipositler

Bu umut verici vaskülarizasyon birimlerini temsil adipoz doku türevli mikrovasküler fragmanları izole etmek için bir protokol mevcut. Bunlar hızlı bir şekilde izole edilebilir, bu nedenle, doku mühendisliği farklı alanlarında tek aşamalı prevascularization için kullanılabilmektedir, nitro işleme gerektirmez ve yoktur.

Doku Mühendisliği vaskülarizasyon Birimleri olarak Kemirgen Yağ Dokusu kaynaklı Mikrovasküler Parçalarının İzolasyonu

Beyaz Yağ dokusundan (WAT) farmakolojik geliştirme ve metabolik çalışmalar engelleyen onun geçerli birincil kültür modelleri içinde önemli eksiklikleri vardır. Burada, bir yağ microphysiological sistem tarafından sandviç WAT levha stromal hücreler arasında üretmek için bir protokol mevcut. Bu yapıyı birincil WAT kültür için istikrarlı ve uyarlanabilir bir platform sağlar.

İnsan yağı için bir Microphysiologic Platform: beyaz yağ dokusu sandviç

Yüksek lipid içeriği nedeniyle yağ dokusu geleneksel histolojik yöntemlerle görselleştirmek için zor oldu. Adipo-temiz sağlam etiketleme ve yağ dokusu yüksek çözünürlüklü hacimsel floresan görüntüleme sağlayan tekniği temizleyerek bir dokudur. Burada, numune hazırlama, ön, boyama, takas ve montaj için görüntüleme yöntemleri açıklanmaktadır.

Adipo-Clear: Bir doku Yöntem yağ dokusu üç boyutlu görüntüleme için temizlenmesi

Yağ dokusu mimarisi ve hücresel bileşeni 3D görüntüleme için ideal bir yöntem olarak bütün Dağı immunostaining ve görselleştirme tekniği göstermek için çalışmanın odak noktasıdır.

Bütün Dağı boyama kullanarak 3D beyaz yağ doku yapısı görselleştirme

Burada, kapalı bir sistem cihazı kullanarak insan yağ dokusu enzimsiz mikro-parçalanma sıyoruz. Bu yeni yöntem, in vivo transplantasyon, in vitro kültür ve daha fazla hücre izolasyonu ve karakterizasyonu için uygun yağ dokusunun milimetre altı kümelerinin elde edilmesine olanak sağlar.

Hücre Fenotimi ve Sekretom Karakterizasyonu için İnsan Yağ Dokusu Mikro-parçalanma

Biz adipoz doku metabolik fenotip katkıda matris ve adiposit lerin rollerinin diseksiyon sağlayan bir 3D insan ekstrasellüler matriks-adiposit in vitro kültür sistemi açıklar.

Bir İnsan 3D Ekstrasellüler Matrix-Adiposit Kültür Modeli Matrix-Hücre Metabolik Crosstalk Çalışma için

Burada, hem fare hem de insan beyaz yağ dokusunun 3Boyutlu yapısını çözüme kavuşturmak için basit, ucuz ve hızlı bir temizleme yöntemi tanımlıyoruz.

Metiyatisilin Temizleme ve 3D Görüntüleme ile Yağ Dokusu Yapısının Araştırılması

Burada, perivasküler yağ dokusu fonksiyonunun ve vasküler hücrelerle ilişkisinin incelenmesine izin vererek, fare periaortik yağ dokusundan stromal vasküler fraksiyondan türetilen preadipositlerin izolasyonunu, kültürünü ve adipojenik indüksiyonunu açıklıyoruz.

Fare Periaortik Yağ Dokusundan Stromal Vasküler Fraksiyon Kaynaklı Preadipositlerin İzolasyonu, Kültürü ve Adipojenik İndüksiyonu

Burada, insan deri altı yağ dokusundan (hSATMVEC'ler) mikrovasküler endotel hücrelerinin izole edilmesi, kültürlenmesi ve fenotiplendirilmesi için bir protokol tanımlanmıştır. Ek olarak, deneysel bir hSATMVEC-adiposit çapraz konuşma modelini açıklıyoruz.

İnsan Subkutan Yağ Dokusunda Adipoz Endotel Hücresi/Adiposit Çapraz Konuşmasının İncelenmesi

Öğrenin, mikrovasküler fragmanlar kullanarak üç boyutlu vaskülarize termojenik yağ dokusu oluşturma yöntemini. Bu protokol, obezite ve metabolik hastalık araştırmalarında bej yağ taklitleri üretmek için basit bir hücre kaynağı sunar.

Mikrovasküler Fragmanlardan Vaskülarize Termojenik Yağ Dokusunun Üç Boyutlu Kültürü

Daha fazla video keşfet