Fare Floresan Anjiyografi Görüntülerinden Retina Damar Çapının Ölçülmesi
19 Mayıs 2023
Fare retinal damar sistemi, vasküler patern oluşumunun mekanizmalarını anlamada özellikle ilgi çekicidir. Bu protokol, optik diskten sabit bir mesafede floresan anjiyografi fundus görüntülerinden fare retina damarlarının çapını otomatik olarak ölçer.
Bu protokol, gen mutasyonları veya retina hastalığı nedeniyle anestezi uygulanmış farelerde retina damarlarının çapını otomatik olarak ölçmek için kolay ve güvenilir bir yöntem sağlar. Bu tekniğin temel avantajı, burada özel olarak yazılmış MATLAB programının pratik, kullanımı kolay, kullanışlı ve güvenilir olmasıdır. Retina damar çapı değişiklikleri genellikle RP ve diğer retinal vasküler durumlar gibi dejeneratif hastalıklarda ortaya çıkar.
Fare modelleri, tedavinin etkinliği ve retina damarları üzerindeki etkileri hakkında bilgi verir. Yöntem, gözdeki vasküler bozuklukların ilerlemesini takiben ölçülebilir klinik belirteçler olarak ve potansiyel tedavilerin izlenmesi için potansiyel olarak yararlı olabilir. Başlamak için, floresein çalışma solüsyonu içeren bir şırınga hazırlayın ve anestezi uygulanmış hayvana intra-peritoneal olarak uygulayın ve kornea yüzeyine bir damla% 2 metil selüloz jel uygulayın.
Ardından hayvanı görüntüleme sisteminin konumlandırma aşamasına yerleştirin. Retina görüntüleme fundus kamera merceğini, farenin korneasına doğrudan ve nazikçe dokunacak şekilde konumlandırın ve optik sinir başını görme alanının ortasına yerleştirmek için hizalamayı hafifçe ayarlayın. Ardından fundus kamerasındaki yeşil floresan kanalına geçin ve görüntüleri çekmek için retina damarlarına odaklanın.
İdeal zaman noktasını belirlemek ve floresein fundus görüntüsünü görselleştirmek için floresein enjeksiyonunu takiben istenen zaman noktalarında görüntüler yakalayın. İlk olarak, MATLAB programını açın. Ardından fundus çapını indirin ve kaydedin.
m kodu. Ardından, fundus görüntü analizi klasörünü açın ve fundus çapını sürükleyip bırakın. m kodunu analiz klasörüne ekleyin.
Bir FFA görüntüsünü görüntü analizi klasörüne sürükleyip bırakın. MATLAB programında, etkinleştirmek için kod dosyasına iki kez tıklayın. Çalıştır seçeneğini seçin.
Görüntüyü seçmek için bir açılır menü görünecektir. Görüntüyü seçin ve ekranda analiz parametreleri için bir açılır menü belirecektir. Açılır menüde analiz parametrelerini ayarlayın ve Tamam'a basın. Optik diskin merkezini seçin ve ardından optik diskin kenarını seçin.
Analiz arka planda gerçekleştirilecek ve analiz sonuçları ekranda görünecektir. Tablo, her gemi için ortalama, standart sapma ve standart hata değerlerini içerir. Tabloyu kaydedin.
Ve sonra şekli ortalama kalınlık seti ile kaydedin. Kaydedilen dosyaların bulunduğu analiz klasörünü açın ve ardından kaydedilen şekli açın. Kaydedilen tabloyu açın, değerleri kopyalayın ve bir Excel dosyasına yapıştırın.
Floresein enjeksiyonundan sonra, bir kontrol faresi ve bir MITFMI-VGA9 / mutant fareden görüntüler elde edildi, bunun için optik disk merkezinden damarlar üzerindeki uç noktalara kadar en kısa mesafe saat yönünde ölçüldü. Ortalama damar çapı, vahşi tip ve mutant fareler için damar sayısının bir fonksiyonu olarak elde edildi. Hatırlanması gereken en önemli şeyler, fundus kamerasının konumlandırılması ve optik diskin fundus görüntüsünde merkezlenmesidir.
Bu tekniğe ek olarak, yeni ilaçların araştırılması, gözdeki farklı damar durumlarının teşhis edilmesi ve retina damar sisteminin işleyişinin daha iyi anlaşılması için moleküler teknikler de uygulanabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Genel Bakış
Bu protokol, retinal hastalıkların anlaşılması için kritik önem taşıyan, anestezi altındaki farelerde retinal damar çapının otomatik olarak ölçülmesi için güvenilir bir yöntem sunmaktadır. Teknik, floresan anjiyografi fundus görüntülerini analiz etmek için özel bir MATLAB programı kullanmaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Sinirbilim
- Oftalmoloji
- Vasküler Biyoloji
Arka Plan
- Fare retinal vaskülaritesi, vasküler patern oluşumunun incelenmesi için önemlidir.
- Retinal damar çapındaki değişiklikler dejeneratif hastalıklarla ilişkilidir.
- Bu yöntem, vasküler bozuklukların izlenmesi için ölçülebilir bir klinik belirteç görevi görebilir.
- Fare modellerinden elde edilen veriler, tedavi etkinliği hakkında bilgi sağlayabilir.
Çalışmanın Amacı
- Gen mutasyonları veya retinal hastalıkları olan farelerde retinal damar çaplarını ölçmek için.
- Araştırmacılar için pratik ve güvenilir bir yöntem sağlamak için.
- Retinal vasküler durumların ilerlemesini izlemek için.
Kullanılan Yöntemler
- Anestezi uygulanmış farelere floresein çalışma çözeltisini intraperitonal olarak uygulayın.
- Korneal yüzeye %2'lik metil selüloz jel uygulayın.
- Görüntü analizi için özel bir MATLAB programı kullanın.
- Damar çapı ölçümü için floresan anjiyografi fundus görüntülerini analiz edin.
Ana Sonuçlar
- Protokol, retinal damar çaplarının doğru şekilde ölçülmesine olanak tanır.
- Kullanıcı dostudur ve araştırmacılar için uygundur.
- Retinal hastalıklarda tedavi etkilerinin takibinde potansiyel olarak faydalıdır.
- Gen mutasyonlarının retinal vaskülarite üzerindeki etkisine dair içgörüler sağlar.
Sonuçlar
- Bu yöntem, retinal vasküler değişikliklerin incelenmesi için değerli bir araçtır.
- Retinal hastalıkların ve tedavilerinin anlaşılmasını geliştirir.
- Gelecekteki uygulamalar, retinal bozuklukların klinik izlemini içerebilir.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama Uygunluğu
Fare modellerinde retinal damar çapının otomatik olarak ölçülmesi, genetik mutasyonlar ve retinal hastalıklarla ilişkili vasküler değişikliklerin kantitatif değerlendirmesine olanak tanır. Bu yetenek, hastalık ilerlemesini ve terapötik etkiyi değerlendirmek için standartlaştırılmış, tekrarlanabilir vasküler metrikler sağlayarak erken keşif ve translasyonel araştırmaları destekler. Otomatik görüntü analizinin preklinik iş akışlarına entegre edilmesi, öngörü güvenilirliğini artırır ve oftalmik ilaç geliştirmedeki riskle uyumlu portföy kararlarını bilgilendirir.
Biyofarma Ar-Ge'sinde Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- Genetiği değiştirilmiş fare modellerinde vasküler fenotiplerin objektif nicelendirilmesine olanak tanır.
- Retinal vasküler patolojiyle ilişkili hedeflerin fonksiyonel validasyonunu destekler.
- Gen mutasyonlarını ölçülebilir vasküler sonuçlarla ilişkilendirerek mekanistik risk azaltımını kolaylaştırır.
- Retinal hastalık mekanizmalarına yönelik hipotez odaklı çalışmalar için standardize edilmiş son noktalar sağlar.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Sayısal analizlerin standartlaştırılması için tekrarlanabilir, nicel damar çapı ölçümleri sağlar.
- Sonraki bileşik taramaları için doğrulanmış görüntüleme ve analiz iş akışlarını hazırlar.
- Birden fazla genetik arka plan ve müdahale genelinde ölçeklenebilirliğe ve platformun yeniden kullanımına olanak tanır.
- Retinal vaskülatürü hedefleyen aday terapötiklerin güvenilir şekilde değerlendirilmesini destekler.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Translasyonel süreklilik için preklinik vasküler metrikleri hastalıkla ilgili son noktalarla uyumlu hale getirir.
- Tedavi etkilerinin ve hastalık seyrinin in vivo izlenmesine olanak tanır.
- Kantitatif vasküler okumalar üzerinden risk ayarlı ilerleme kararlarını destekler.
- Preklinik çalışmalarda moleküler ve görüntüleme biyobelirteçlerinin entegrasyonunu kolaylaştırır.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu otomatik görüntü analiz yöntemi, genetik hedef doğrulamadan oftalmik araştırmalarda translasyonel biyobelirteç geliştirmeye bir köprü kurarak, erken keşiften preklinik sürece kadar olan aşamalara uyum sağlar.
- Keşif Biyolojisi: Genetik veya farmakolojik pertürbasyonlara yanıt olarak vasküler değişiklikleri nicelleştirerek hipotez testlerini ve yolak açıklığa kavuşturulmasını destekler.
- Tarama: Bileşik değerlendirmesi için analize hazır,le tekrarlanabilir damar çapı çıktıları sağlar.
- Analitik: Damar çapları için ortalama, standart sapma ve standart hata içeren kantitatif tablolar oluşturarak güçlü istatistiksel karşılaştırmalara olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Preklinik görüntüleme son noktalarını, retinal vasküler sağlık klinik belirteçleri ile uyumlu hale getirir.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: Çeşitli retinal hastalık modellerine uyarlanabilir, MATLAB tabanlı ve yeniden kullanılabilir bir analiz platformu sunar.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: Retinal hastalık modellerinde öngörüsel güveni artırır ve mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: Damar ölçümünü standartlaştırır ve otomatikleştirir; böylece tekrarlanabilirliği ve işlem hacmini artırır.
- Stratejik Değer: Bilgilendirilmiş devam/dur kararlarına ve oftalmik programların sermaye açısından verimli şekilde ilerletilmesine olanak tanır.
- Portföy Etkisi: Kantitatif vasküler son noktalar üzerinden hedeflerin ve terapötik adayların risk ayarlı önceliklendirmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Retinal görüntüleme ve MATLAB tabanlı görüntü analizi konusunda uzmanlık gerektirir.
- Ticari bir fundus kamerasına ve floresan görüntüleme altyapısına erişime bağlıdır.
- Görüntüleme protokollerinin ve analiz parametrelerinin ekipler arası standardizasyonunu gerektirir.
- Farklı fare suşları veya retinal hastalık modelleri için adaptasyon gerekebilir.
- Görüntü kalitesi ve optik disk merkezlemesi, güvenilir ölçüm çıktıları için kritiktir.
Biyofarma SSS
Chapters in this video
0:00
Introduction
0:55
In Vivo Imaging of Retinal Vasculature Using a Rodent Retinal Imaging System
1:48
Analysis of the Retinal Vessel's Diameter
3:07
Results: Analyzing Retinal Vessel Diameter and Vasculature Using Fluorescein Angiography
3:55
Conclusion
