Name: İnsan Yenidoğan Bağırsak Enteroidlerini ve Disbiyotik Mikrobiyomu İçeren Nekrotizan Enterokolitin Mikroakışkan Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-07-28T12:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Keşfedin mikroakışkan çip kullanarak nekrotizan enterokolit için insan yenidoğan bağırsak enteroidleri ve disbiyotik mikrobiyom içeren in vitro modeli. Bu yöntem NEC patogenezini anlamaya ve yeni tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu makale, Ulusal Sağlık Enstitüleri'nden R01DK118568 (MG), R01DK124614 (MG) ve R01HD105301 (MG), Chan Zuckerberg Girişimi Hibesi 2022-316749 (MG), Thrasher Araştırma Fonu Erken Kariyer Ödülü (LCF), Chapel Hill'deki North Carolina Üniversitesi'ne bağışçıların cömert desteğiyle UNC Çocuk Gelişimi Erken Kariyer Araştırmacısı Hibesi (LCF) tarafından desteklenmiştir. ve Chapel Hill'deki Kuzey Carolina Üniversitesi Pediatri Bölümü.

Mekanistik Çalışmalar ve İlaç Keşfi için Nekrotizan Enterokolit Modeli

<ol><li>Alsaied, A., Islam, N., Thalib, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+incidence+of+Necrotizing+Enterocolitis%3A+a+systematic+review+and+Meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Global incidence of Necrotizing Enterocolitis: a systematic review and Meta-analysis.</a> BMC Pediatrics. 20 (1), 344(2020).</li>
<li>Neu, J., Walker, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotizing+enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Necrotizing enterocolitis.</a> The New England Journal of Medicine. 364 (3), 255-264 (2011).</li>
<li>Frazer, L. C., Good, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intestinal+epithelium+in+early+life%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Intestinal epithelium in early life.</a> Mucosal Immunology. 15 (6), 1181-1187 (2022).</li>
<li>Good, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+human+milk+oligosaccharide+2%27-fucosyllactose+attenuates+the+severity+of+experimental+necrotising+enterocolitis+by+enhancing+mesenteric+perfusion+in+the+neonatal+intestine%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Nutrition%22%5BJournal%5D)">The human milk oligosaccharide 2'-fucosyllactose attenuates the severity of experimental necrotising enterocolitis by enhancing mesenteric perfusion in the neonatal intestine.</a> The British Journal of Nutrition. 116 (7), 1175-1187 (2016).</li>
<li>Mihi, B., Lanik, W. E., Gong, Q., Good, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mouse+Model+of+Necrotizing+Enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis.</a> Methods in Molecular Biology. 2321, 101-110 (2021).</li>
<li>Afrazi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4-mediated+endoplasmic+reticulum+stress+in+intestinal+crypts+induces+necrotizing+enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4-mediated endoplasmic reticulum stress in intestinal crypts induces necrotizing enterocolitis.</a> The Journal of Biological Chemistry. 289 (14), 9584-9599 (2014).</li>
<li>Neal, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4+is+expressed+on+intestinal+stem+cells+and+regulates+their+proliferation+and+apoptosis+via+the+p53+up-regulated+modulator+of+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4 is expressed on intestinal stem cells and regulates their proliferation and apoptosis via the p53 up-regulated modulator of apoptosis.</a> The Journal of Biological Chemistry. 287 (44), 37296-37308 (2012).</li>
<li>Sodhi, C., Richardson, W., Gribar, S., Hackam, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+development+of+animal+models+for+the+study+of+necrotizing+enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+models+%26+mechanisms%22%5BJournal%5D)">The development of animal models for the study of necrotizing enterocolitis.</a> Disease models & mechanisms. 1 (2-3), 94-98 (2008).</li>
<li>Ares, G. J., McElroy, S. J., Hunter, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+science+and+necessity+of+using+animal+models+in+the+study+of+necrotizing+enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+pediatric+surgery%22%5BJournal%5D)">The science and necessity of using animal models in the study of necrotizing enterocolitis.</a> Seminars in pediatric surgery. 27 (1), 29-33 (2018).</li>
<li>Lu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+gastrointestinal+and+liver+diseases.+Animal+models+of+necrotizing+enterocolitis%3A+pathophysiology%2C+translational+relevance%2C+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+physiology.+Gastrointestinal+and+liver+physiology%22%5BJournal%5D)">Animal models of gastrointestinal and liver diseases. Animal models of necrotizing enterocolitis: pathophysiology, translational relevance, and challenges.</a> American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology. 306 (11), G917-G928 (2014).</li>
<li>Nolan, L. S., Gong, Q., Hofmeister, H. N., Good, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+protocol+for+the+induction+of+experimental+necrotizing+enterocolitis+in+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protocol%22%5BJournal%5D)">A protocol for the induction of experimental necrotizing enterocolitis in neonatal mice.</a> STAR Protocol. 2 (4), 100951(2021).</li>
<li>Egan, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toll-like+receptor+4-mediated+lymphocyte+influx+induces+neonatal+necrotizing+enterocolitis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Toll-like receptor 4-mediated lymphocyte influx induces neonatal necrotizing enterocolitis.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (2), 495-508 (2016).</li>
<li>Stanford, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+direct+comparison+of+mouse+and+human+intestinal+development+using+epithelial+gene+expression+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatric+Research%22%5BJournal%5D)">A direct comparison of mouse and human intestinal development using epithelial gene expression patterns.</a> Pediatric Research. 88 (1), 66-76 (2020).</li>
<li>Noll, K. E., Ferris, M. T., Heise, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Collaborative+Cross%3A+A+Systems+Genetics+Resource+for+Studying+Host-Pathogen+Interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Host+Microbe%22%5BJournal%5D)">The Collaborative Cross: A Systems Genetics Resource for Studying Host-Pathogen Interactions.</a> Cell Host Microbe. 25 (4), 484-498 (2019).</li>
<li>Ericsson, A. C., Franklin, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+gut+microbiome+of+laboratory+mice%3A+considerations+and+best+practices+for+translational+research%5BTitle%5D)+AND+%22Mammalian+Genome%22%5BJournal%5D)">The gut microbiome of laboratory mice: considerations and best practices for translational research.</a> Mammalian Genome. 32 (4), 239-250 (2021).</li>
<li>De Fazio, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Necrotizing+Enterocolitis%3A+Overview+on+In+Vitro+Models%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Necrotizing Enterocolitis: Overview on In Vitro Models.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (13), 6761(2021).</li>
<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+Lgr5+stem+cells+build+crypt-villus+structures+in+vitro+without+a+mesenchymal+niche%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Single Lgr5 stem cells build crypt-villus structures in vitro without a mesenchymal niche.</a> Nature. 459 (7244), 262-265 (2009).</li>
<li>Foulke-Abel, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+enteroids+as+an+ex-vivo+model+of+host-pathogen+interactions+in+the+gastrointestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Human enteroids as an ex-vivo model of host-pathogen interactions in the gastrointestinal tract.</a> Experimental Biology and Medicine. 239 (9), 1124-1134 (2014).</li>
<li>Sato, T., Clevers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growing+self-organizing+mini-guts+from+a+single+intestinal+stem+cell%3A+mechanism+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Growing self-organizing mini-guts from a single intestinal stem cell: mechanism and applications.</a> Science. 340 (6137), 1190-1194 (2013).</li>
<li>Sato, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+expansion+of+epithelial+organoids+from+human+colon%2C+adenoma%2C+adenocarcinoma%2C+and+Barrett%27s+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Long-term expansion of epithelial organoids from human colon, adenoma, adenocarcinoma, and Barrett's epithelium.</a> Gastroenterology. 141 (5), 1762-1772 (2011).</li>
<li>Kasendra, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+primary+human+Small+Intestine-on-a-Chip+using+biopsy-derived+organoids%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Development of a primary human Small Intestine-on-a-Chip using biopsy-derived organoids.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2871(2018).</li>
<li>Middendorp, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adult+stem+cells+in+the+small+intestine+are+intrinsically+programmed+with+their+location-specific+function%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells%22%5BJournal%5D)">Adult stem cells in the small intestine are intrinsically programmed with their location-specific function.</a> Stem Cells. 32 (5), 1083-1091 (2014).</li>
<li>Sung, J. H., Kam, C., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+microfluidic+device+for+a+pharmacokinetic-pharmacodynamic+%28PK-PD%29+model+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A microfluidic device for a pharmacokinetic-pharmacodynamic (PK-PD) model on a chip.</a> Lab Chip. 10 (4), 446-455 (2010).</li>
<li>Sung, J. H., Shuler, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+micro+cell+culture+analog+%28microCCA%29+with+3-D+hydrogel+culture+of+multiple+cell+lines+to+assess+metabolism-dependent+cytotoxicity+of+anti-cancer+drugs%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">A micro cell culture analog (microCCA) with 3-D hydrogel culture of multiple cell lines to assess metabolism-dependent cytotoxicity of anti-cancer drugs.</a> Lab Chip. 9 (10), 1385-1394 (2009).</li>
<li>Huh, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstituting+organ-level+lung+functions+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Reconstituting organ-level lung functions on a chip.</a> Science. 328 (5986), 1662-1668 (2010).</li>
<li>Jang, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducing+human+and+cross-species+drug+toxicities+using+a+Liver-Chip%5BTitle%5D)+AND+%22Science+translational+medicine%22%5BJournal%5D)">Reproducing human and cross-species drug toxicities using a Liver-Chip.</a> Science translational medicine. 11 (517), eaax5516(2019).</li>
<li>Musah, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mature+induced-pluripotent-stem-cell-derived+human+podocytes+reconstitute+kidney+glomerular-capillary-wall+function+on+a+chip%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+biomedical+engineering%22%5BJournal%5D)">Mature induced-pluripotent-stem-cell-derived human podocytes reconstitute kidney glomerular-capillary-wall function on a chip.</a> Nature biomedical engineering. 1, 0069(2017).</li>
<li>Chou, D. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-chip+recapitulation+of+clinical+bone+marrow+toxicities+and+patient-specific+pathophysiology%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+biomedical+engineering%22%5BJournal%5D)">On-chip recapitulation of clinical bone marrow toxicities and patient-specific pathophysiology.</a> Nature biomedical engineering. 4 (4), 394-406 (2020).</li>
<li>Park, T. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-enhanced+Blood-Brain+Barrier+Chip+recapitulates+human+barrier+function+and+shuttling+of+drugs+and+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-enhanced Blood-Brain Barrier Chip recapitulates human barrier function and shuttling of drugs and antibodies.</a> Nature Communications. 10 (1), 2621(2019).</li>
<li>Agarwal, A., Goss, J. A., Cho, A., McCain, M. L., Parker, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+heart+on+a+chip+for+higher+throughput+pharmacological+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Chip%22%5BJournal%5D)">Microfluidic heart on a chip for higher throughput pharmacological studies.</a> Lab Chip. 13 (18), 3599-3608 (2013).</li>
<li>Jalili-Firoozinezhad, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+radiation+injury-induced+cell+death+and+countermeasure+drug+responses+in+a+human+Gut-on-a-Chip%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Modeling radiation injury-induced cell death and countermeasure drug responses in a human Gut-on-a-Chip.</a> Cell Death & Disease. 9 (2), 223(2018).</li>
<li>Benam, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+airway-on-a-chip+enables+analysis+of+human+lung+inflammation+and+drug+responses+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Small airway-on-a-chip enables analysis of human lung inflammation and drug responses in vitro.</a> Nature Methods. 13 (2), 151-157 (2016).</li>
<li>Osaki, T., Uzel, S. G. M., Kamm, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On-chip+3D+neuromuscular+model+for+drug+screening+and+precision+medicine+in+neuromuscular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">On-chip 3D neuromuscular model for drug screening and precision medicine in neuromuscular disease.</a> Nature Protocols. 15 (2), 421-449 (2020).</li>
<li>Chen, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-cell+Migration+Chip+for+Chemotaxis-based+Microfluidic+Selection+of+Heterogeneous+Cell+Populations%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Single-cell Migration Chip for Chemotaxis-based Microfluidic Selection of Heterogeneous Cell Populations.</a> Scientific Reports. 5, 9980(2015).</li>
<li>Xiang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gut-on-chip%3A+Recreating+human+intestine+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+tissue+engineering%22%5BJournal%5D)">Gut-on-chip: Recreating human intestine in vitro.</a> Journal of tissue engineering. 11, 2041731420965318(2020).</li>
<li>Lanik, W. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+device+facilitates+in+vitro+modeling+of+human+neonatal+necrotizing+enterocolitis-on-a-chip%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Microfluidic device facilitates in vitro modeling of human neonatal necrotizing enterocolitis-on-a-chip.</a> JCI Insight. 8 (8), e146496(2023).</li>
<li>Emulate. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Duodenum+Intestine-Chip+Protocol%22">Duodenum Intestine-Chip Protocol</a>. , https://emulatebio.wpenginepowered.com/wp-content/uploads/2022/10/EP203-Rev-A-Duodenum-Intestine-Chip-Protocol.pdf (2022).</li>
<li>Good, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lactobacillus+rhamnosus+HN001+decreases+the+severity+of+necrotizing+enterocolitis+in+neonatal+mice+and+preterm+piglets%3A+evidence+in+mice+for+a+role+of+TLR9+%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+physiology.+Gastrointestinal+and+liver+physiology%22%5BJournal%5D)">Lactobacillus rhamnosus HN001 decreases the severity of necrotizing enterocolitis in neonatal mice and preterm piglets: evidence in mice for a role of TLR9 .</a> American journal of physiology. Gastrointestinal and liver physiology. 306 (11), G1021-G1032 (2014).</li>
<li>JoVE Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+Dilutions+and+Plating%3A+Microbial+Enumeration%5BTitle%5D)+AND+%22JoVE%22%5BJournal%5D)">Serial Dilutions and Plating: Microbial Enumeration.</a> JoVE. , (2023).</li>
<li>VanDussen, K. L., Sonnek, N. M., Stappenbeck, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((L-WRN+conditioned+medium+for+gastrointestinal+epithelial+stem+cell+culture+shows+replicable+batch-to-batch+activity+levels+across+multiple+research+teams%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">L-WRN conditioned medium for gastrointestinal epithelial stem cell culture shows replicable batch-to-batch activity levels across multiple research teams.</a> Stem Cell Research. 37, 101430(2019).</li>
<li>Miyoshi, H., Stappenbeck, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+expansion+and+genetic+modification+of+gastrointestinal+stem+cells+in+spheroid+culture%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">In vitro expansion and genetic modification of gastrointestinal stem cells in spheroid culture.</a> Nature Protocols. 8 (12), 2471-2482 (2013).</li>
</ol>

Yazarlar bu makale ile ilgili herhangi bir çıkar çatışması beyan etmemektedir.

Bu çip üzerinde NEC sistemi, NEC'nin patofizyolojisini modellemek için kullanılabilecek güçlü ve yeni bir araçtır. Bu platform, sürekli luminal akış ve esneme ile bir ko-kültür sistemi dahil ederek önceki modellere göre in vivo bağırsak ortamına daha çok benzeyen karmaşık bir mikro ortam sağlar. Bu koşullar, olgun epitelyal alt tiplerden ve sıkı bağlantılardan oluşan oldukça polarize bir epitel ile kaplı 3D villus benzeri mimarinin gelişimini teşvik eder (Şekil 2)3...

Nekrotizan enterokolit (NEC), 1500 g'< doğanlarda %10'a varan insidansla erken doğmuş bebekleri etkiler1. NEC'in patofizyolojisi karmaşıktır ve bağırsak epitelinde hasar, bağırsak sıkı bağlantılarının bozulması, artmış bağırsak bariyeri geçirgenliği, immün düzensizlik ve epitel hücre ölümünü içerir 2,3. NEC'in patogenezinde rol oynayan mekanizmalar hakkındaki anlayışımız eksik kalmıştır ve onlarca yıllık araştırmalara rağmen hala etkili bir hedefe yönelik tedavi yoktur.
NEC araştırmalarını ilerletmenin önündeki önemli bir engel, insan bebeklerinden izole edilen birincil bağırsak dokusunun sınırlı mevcudiyeti ve küçük boyutudur. NEC'li bebeklerden rezeke edilen bağırsak dokusu genellikle nekrotiktir ve ciddi şekilde hasar görür, bu da hastalık başlangıcından önce gelen mekanizmalara yönelik çalışmaları zorlaştırır. Örneğin, NEC'li bebeklerin ince bağırsağı bağışıklık hücreleri ile doludur ve bağırsak kök hücre sayısında azalma, epitel hücre proliferasyonunda azalma ve epitel hücresi apoptozunda artış da gözlenir 4,5,6,7. Bu, bu örneklerden bağırsak epitel hücrelerinin kültürlenmesinde ve bu düşmanca enflamatuar ortamda parçalanabilen RNA ve proteinlerin izole edilmesinde zorluklara yol açar. Ek olarak, cerrahi NEC'li bebeklerde hastalık süreci zaten ilerlemiş olduğundan, hastalığı indükleyen faktörlere yönelik mekanik çalışmalar mümkün değildir. Bu sınırlamalar, NEC'nin mekanik çalışmaları için hayvan modellerine güvenilmesine yol açmıştır.
Fareler, sıçanlar, domuz yavruları, tavşanlar ve babunlar için NEC'nin hayvan modelleri oluşturulmuştur 5,8,9,11. Hayvan modellerinin güçlü bir gücü, NEC benzeri bağırsak hastalığının, disbiyotik bir mikrobiyom, tekrarlanan hipoksi atakları ve anne sütü beslemelerinin olmamasıdahil olmak üzere insanlarda NEC başlangıcı ile ilişkili faktörler tarafından indüklenmesidir 5,8,10,11. Ek olarak, deneysel NEC sırasında gözlenen inflamatuar yanıt ve patolojik değişiklikler paralel insan hastalığı 5,9,12. Bu modeller insan NEC'nin birçok özelliğini taklit ederken, hayvanlarda ve insanlarda NEC'nin patofizyolojisi arasında doğal farklılıklar vardır. Örneğin, NEC'in murin modeli, tam süreli doğan farelerde indüklenir ve bağırsak gelişimleri tamamlanmamış olsa da, NEC'in patofizyolojisi bu klinik bağlamda doğal olarak farklıdır. Doğumda murin bağırsak gen ekspresyonu, yaşayabilir bir insan fetüsüne benzer ve 14. güne kadar 22-24 haftalık bir preterm yenidoğanınkine yaklaşmaz (P14)13. Bu, murin NEC modelini karıştırır, çünkü bağırsak yaralanması genellikle P10'dan sonra farelerde indüklenemez. Ek olarak, kendi içinde yetiştirilmiş fare suşları, insan yenidoğanların15 immünolojik14 ve mikrobiyolojik çeşitliliğinden yoksundur, bu da başka bir kafa karıştırıcı faktör olarak hizmet eder. Bu nedenle, birincil insan örneklerinin NEC araştırmalarına daha fazla dahil edilmesi, bu alandaki çalışmaların klinik uygunluğunu artırmaktadır.
NEC mekanizmaları üzerine yapılan çalışmalar in vitro geleneksel olarak kolorektal adenokarsinom (Caco2) ve insan kolon adenokarsinomu (HT-29) hücreleri gibi yetişkin bağırsak kanseri hücrelerinden türetilen monotipik hücre dizilerini kullanmıştır16. Bu modeller, yetişkin kanser hücrelerinden büyümeleri, polarize olmayan mimarileri ve kültürde tekrarlanan geçişlerle ilgili fenotipik değişiklikler nedeniyle uygundur ancak fizyolojik önemi sınırlıdır. Bağırsak enteroidleri, bağırsak dokusunun kriptlerinden büyütülebildikleri, tüm bağırsak epitel alt tiplerine farklılaşabildikleri ve üç boyutlu (3D) villus benzeri bir yapıoluşturdukları için bu modelleri geliştirir 17,18,19,20. Son zamanlarda, bağırsak enteroidleri, çip üzerinde ince bir bağırsak modeli geliştirmek ve fizyolojik olarak daha ilgili bir in vitro model sistemi sağlamak için mikroakışkan teknolojisi ile birleştirilmiştir21.
İlk çip üzerinde organ mikroakışkan cihazları 2000'li yılların başında tanıtıldı22,23,24. İlk çip üzerinde organ modeli, çip üzerinde insan solunumu yapan akciğer25'ti. Bunu bağırsak 21, karaciğer26, böbrekler27, kemik iliği 28, kan-beyin bariyeri29 ve kalp30 gibi çok sayıda tek organ modeli izledi. Bu çip üzerinde organ modelleri, akut radyasyon sendromu,31 kronik obstrüktif akciğer hastalığı,32 ve nörodejeneratif hastalıklar 33 dahil olmak üzere akut, kronik ve nadir hastalıkları incelemek için kullanılmıştır. Bu çipler üzerindeki hücrelerin polarize doğası ve gözenekli bir zarla ayrılmış iki hücresel bölmenin varlığı, perfüzyon, kimyasal konsantrasyon gradyanları ve bağışıklık hücresi kemotaksisi gibi karmaşık fizyolojik süreçlerin modellenmesine izin verir34,35. Bu mikroakışkan sistemler, insan hastalıklarının patofizyolojisini ve mekanizmalarını incelemek için yeni bir araç sağlar.
Çip üzerinde ince bağırsak modeli, Kasendra ve ark. 2018 yılında, enteroidlere farklılaşmış ve mikroakışkanbir cihazda kültürlenmiş pediatrik (10-14 yaş) ince bağırsak biyopsi örneklerini kullanan. Vasküler endotel hücreleri, sürekli ortam akışı ve gerilme/gevşeme de bu modele dahil edildi. Bağırsak epitelyal alt tip farklılaşması, 3D villus benzeri eksenlerin oluşumu, mukus üretimi ve ince bağırsak gen ekspresyon paternlerini gözlemlediler21. Bu mikroakışkan model, yenidoğan bağırsak enteroidlerini, endotel hücrelerini ve NEC36'lı bir yenidoğandan mikrobiyomu içeren NEC-on-a-chip sisteminin geliştirilmesiyle yenidoğan hastalığına uygulandı. Çip üzerinde NEC, enflamatuar gen ekspresyonu, özel epitel hücrelerinin kaybı ve azalmış bağırsak bariyeri fonksiyonu36 dahil olmak üzere insan NEC'nin kritik özelliklerinin çoğunu özetler. Bu nedenle, bu model, mekanik çalışmalar ve ilaç keşfi de dahil olmak üzere NEC çalışmasında çok sayıda uygulamaya sahiptir. Bu makalede, NEC-on-a-chip modelinin performansı için ayrıntılı bir protokol sağlanmıştır.

<table><tbody><tr><td>[Leu15]-Gastrin I insan</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G9145</td><td></td></tr><tr><td>A 83-01</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SML0788</td><td></td></tr><tr><td>Advanced Dulbecco'nun Modifiye Eagle Medium/Ham'ın F-12</td><td>Gibco</td><td>12634010</td><td></td></tr><tr><td>B-27 Takviyesi, serum içermez (50x)</td><td>Gibco</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>Temel Biyo-kit</td><td>Öykünme</td><td>Yok</td><td></td></tr><tr><td>BioTek Synergy 2 Çok Modlu Mikroplaka Okuyucu</td><td>Agilent</td><td>&nbsp; 7131000</td><td></td></tr><tr><td>MARKA Metakrilat (PMMA) Küvetler, Yarı Mikro</td><td>BrandTech</td><td>759085D</td><td></td></tr><tr><td>Hücre Geri Kazanım</td><td>Solüsyonu Corning</td><td>354270</td><td></td></tr><tr><td>CFX Opus Gerçek Zamanlı PCR Sistemleri</td><td>Bio-Rad</td><td>12011319</td><td></td></tr><tr><td>Çip Beşiği Taklit</td><td></td><td>Yok</td><td></td></tr><tr><td>Chip-S1 Gerilebilir Çip Öykünmesi</td><td></td><td>Yok</td><td></td></tr><tr><td>CHIR99021</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SML1046</td><td></td></tr><tr><td>Clear TC ile işlenmiş Çoklu Kuyu Plakaları,&nbsp; 48 kuyu&nbsp;</td><td>Corning</td><td>3548</td><td></td></tr><tr><td>İnsan plasentasından Kollajen</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5533</td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz, Tip I, toz</td><td>Gibco</td><td>17018029</td><td></td></tr><tr><td>Kit&nbsp ile Komple İnsan Endotel Hücre Ortamı;</td><td>Hücre Biyolojikleri</td><td>H-1168</td><td></td></tr><tr><td>Konik Polipropilen Santrifüj Tüpleri, 15 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-539-12</td><td></td></tr><tr><td>Konik Polipropilen Santrifüj Tüpleri, 50mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-539-8</td><td></td></tr><tr><td>Kontes Hücre Sayma Odası Slaytları</td><td>Invitrojen ve nbsp;</td><td>C10283</td><td></td></tr><tr><td>Kontes II otomatik hücre sayacı</td><td>Invitrogen&nbsp;</td><td></td><td></td>AMQAX1000</tr><tr><td>DAPT</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5942</td><td></td></tr><tr><td>Dekstran, Cascade Blue, 3000 MW, Anyonik, Lizin Sabitlenebilir</td><td>Invitrogen</td><td>&nbsp; D7132</td><td>Geçirgenlik boyası&nbsp;</td></tr><tr><td>Dimetil sülfoksit (DMSO)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>D8418</td><td></td></tr><tr><td>Tek Kullanımlık PES Filtre Üniteleri, 0.2um aPES membran</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB12566504</td><td></td></tr><tr><td>DMEM/F-12</td><td>Gibco</td><td>11320033</td><td></td></tr><tr><td>Eşek serumu</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9663</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco & prime; s Modifiye Eagle & Prime; s Orta - yüksek glikoz</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D5796</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco & prime; s Fosfat Tamponlu Tuzlu Su (DPBS)</td> <td>Gibco</td><td>14190-136</td><td></td></tr><tr><td>EDTA, 0.5 M, &nbsp; pH 8.0</td><td>Corning</td><td>46-034-CI</td><td></td></tr><tr><td>ER-1 yüzey aktivasyon reaktifi</td><td>Taklit</td><td>ER-1</td><td>Çip Aktivasyon Reaktifi 1</td></tr><tr><td>ER-2 yüzey aktivasyon reaktifi&nbsp;</td><td></td><td>ER-2</td><td>Çip Aktivasyon Reaktifi 2</td></tr><tr><td>Fibronektin İnsan Proteini, Plazma</td><td>Gibco</td><td>33016015</td><td></td></tr><tr><td>Fisherbrand'ı Taklit Edin&nbsp; Şeffaf Kapaklı Petri Kapları, 100mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875713</td><td></td></tr><tr><td>Jelatin Bazlı Kaplama Solüsyonu&nbsp;</td><td>Hücre Biyolojikleri</td><td>6950</td><td></td></tr><tr><td>Genie Temp-Shaker 300</td><td>Scientific Industries, Inc.</td><td>SI-G300</td><td></td></tr><tr><td>Gentamisin&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15750060</td><td></td></tr><tr><td>HEPES, Sıvı 1M Çözelti (238.3 mg / mL)</td> <td>Corning</td><td>25-060-CI</td><td></td></tr><tr><td>Hoechst 33342, Trihidroklorür, Trihidrat ve nbsp;</td><td>Invitrogen</td><td>H3570</td><td></td></tr><tr><td>İnsan Kollajen Tip I</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CC050</td><td></td></tr><tr><td>İnsan Birincil İnce Bağırsak Mikrovasküler Endotel Hücreleri</td><td>Hücre Biyolojikleri</td><td>H-6054</td><td></td></tr><tr><td>Ters Mikroskop</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-000-013</td><td></td></tr><tr><td>Isotemp Genel Amaçlı Deluxe Su Banyoları</td><td>Fisher Scientific</td><td>FSGPD10</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamin&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td></td></tr><tr><td>Luria Et Suyu (LB) agar, Miller</td><td>Supelco</td><td>L3027</td><td></td></tr><tr><td>L-WRN Hücreleri&nbsp;</td><td>Amerikan Tipi Kültür Koleksiyonu</td><td>CRL-3276</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel Büyüme Faktörü Azaltılmış Bodrum Membran Matrisi, LDEV içermez&nbsp;</td><td>Corning</td><td>356231</td><td>Hücre Kültürü Matrisi</td></tr><tr><td>N-2 Takviyesi (100x)</td><td>Gibco</td><td>17502048</td><td></td></tr><tr><td>N-asetil-L-sistein</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>1009005</td><td></td></tr><tr><td>NAILSTAR UV LAMBASI</td><td>NailStar</td><td>NS-01-US</td><td></td></tr><tr><td>NanoDrop OneC&nbsp; Mikro Hacimli UV-Vis Spektrofotometre</td><td>Thermo Scientific</td><td>840-274200</td><td></td></tr><tr><td>Nikotinamid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>72340</td><td></td></tr><tr><td>Orb-HM1 Hub Modülü</td><td>Taklit</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehit</td><td>ThermoFisher</td><td>047392.9L</td><td></td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin ve nbsp;</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td></td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin (PBS)</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Lite Çoklu Pipet L8-200XLS+</td><td>Rainin</td><td>17013805</td><td></td></tr><tr><td>Pipet Uçları TR LTS 1000&micro; LS 768A/8</td><td>Rainin</td><td>17014966</td><td></td></tr><tr><td>Pod Taşınabilir Modül</td><td>Taklit</td><td>N / A</td><td></td></tr><tr><td>Premium Sınıf Fetal Sığır Serumu (FBS) (Isı Etkisizleştirilmiş)&nbsp;</td><td>Avantor Seradigm</td><td>1500-500</td><td></td></tr><tr><td>QuantiTect Ters Transkripsiyon Kiti&nbsp;</td><td>QIAGEN</td><td>205313</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinant Murin Epidermal Büyüme Faktörü (EGF)</td><td>PeproTech</td><td>315-09</td><td></td></tr><tr><td>SB 431542</td><td>Tocris</td><td>1614</td><td></td></tr><tr><td>Saplı Kare Biyotahlil Kabı, TC ile tedavi edilmemiş&nbsp;</td><td>Corning</td><td>431111</td><td></td></tr><tr><td>SSOAdvanced Üniversal SYBR&nbsp; Green Supermix</td><td>Bio-Rad</td><td>1725271</td><td></td></tr><tr><td>Steriflip-GV Steril Santrifüj Tüp Üst Filtre</td><td>Ünitesi Milipore</td><td>SE1M179M6</td><td></td></tr><tr><td>Steril Hücre Süzgeçleri, 70um</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-363-548</td><td></td></tr><tr><td>Steril Şırıngalar, 10mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-955-453</td><td></td></tr><tr><td>Düz, ince, keskin uçlu makas</td><td>Miltex&nbsp; Aletler</td><td>MH5-300</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Scientific Sorvall X4R Pro-MD Santrifüj</td><td>Thermo Scientific</td><td>75016052</td><td></td></tr><tr><td>Triton&nbsp; X-100&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td>Deterjan</td></tr><tr><td>TRİZOL REAKTİFİ&nbsp;</td><td>İnvitrojen</td><td>15596026</td><td>RNA ekstraksiyon reaktifi</td></tr><tr><td>Tripan Mavisi Çözeltisi, PBS'de% 0.4 (a/h), pH 7.5 &plusmn; 0.5</td><td>Corning</td><td>25-900-CI</td><td></td></tr><tr><td>TrypLE Express Enzim (1X), fenol kırmızısı yok&nbsp;</td><td>Gibco</td><td>12604013</td><td>Enzimatik Ayrışma Reaktifi</td></tr><tr><td>Tripsin-EDTA çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T4174</td><td></td></tr><tr><td>VIOS 160i CO2 İnkübatör, 165 L</td><td>Thermo Scientific</td><td>13-998-252</td><td></td></tr><tr><td>Y-27632</td><td>Tocris</td><td>1254</td><td></td></tr><tr><td>Zo&euml;-CM1 Kültür Modülü Taklit</td><td></td><td>Yok</td><td></td></tr></tbody></table>

İnsan yenidoğan bağırsak enteroidlerini ve disbiyotik mikrobiyomu İçeren nekrotizan enterokolitin mikroakışkan modeli

Microfluidic Model of Necrotizing Enterocolitis Incorporating Human Neonatal Intestinal Enteroids and a Dysbiotic Microbiome

Nekrotizan enterokolit (NEK), tam olarak anlaşılamamış, karmaşık patogenezi nedeniyle araştırılması zor olan ciddi ve potansiyel olarak ölümcül bir bağırsak hastalığıdır. NEC'in patofizyolojisi, bağırsak sıkı bağlantılarının bozulmasını, artmış bağırsak bariyeri geçirgenliğini, epitel hücre ölümünü, mikrobiyal disbiyozisis ve düzensiz inflamasyonu içerir. NEC'yi incelemek için kullanılan geleneksel araçlar arasında hayvan modelleri, hücre dizileri ve insan veya fare bağırsak organoidleri bulunur. Bu model sistemlerini kullanan çalışmalar, alanın hastalık patofizyolojisi anlayışını geliştirmiş olsa da, insan NEC'nin karmaşıklığını özetleme yetenekleri sınırlıdır. NEC-on-a-chip adı verilen mikroakışkan teknolojisini kullanan geliştirilmiş bir in vitro NEC modeli geliştirilmiştir. Çip üzerinde NEC modeli, preterm bir yenidoğandan türetilen bağırsak enteroidleri ile tohumlanmış, insan endotel hücreleri ve şiddetli NEC'li bir bebekten alınan mikrobiyom ile birlikte kültürlenmiş bir mikroakışkan cihazdan oluşur. Bu model, NEC'nin patofizyolojisine yönelik mekanik çalışmalar için değerli bir araçtır ve yenidoğan bağırsak hastalıkları için ilaç keşif testi için yeni bir kaynaktır. Bu yazıda, NEC-on-a-chip modelinin ayrıntılı bir açıklaması sağlanacaktır.

Enteroidler mikroakışkan cihaza ekildi (Şekil 1) ve yukarıda tarif edildiği gibi kültürlendi. Tohumlamadan önce hücre kültürü matris hidrojelindeki enteroidlerin büyümesi ve daha sonra cihazın tohumlanmasından sonra bağırsak epitel hücresi tek tabakasının genişlemesi, parlak alan mikroskobu ile izlendi (Şekil 2). Birleşen bir bağırsak epitel hücresi tek tabakası oluştu ve daha sonra olgun bir 3D villus benzeri yapıya dönüştü (Şekil 2</strong...

Bu protokol, hastalık patogenezine yönelik mekanik çalışmalar için kullanılabilen bir in vitro nekrotizan enterokolit (NEC) modelini açıklar. İnsan yenidoğan bağırsağından, endotel hücrelerinden ve şiddetli NEC'li bir yenidoğanın bağırsak mikrobiyomundan türetilen bağırsak enteroidleri ile tohumlanmış bir mikroakışkan çipe sahiptir.

İnsan Yenidoğan Bağırsak Enteroidlerini ve Disbiyotik Mikrobiyomu İçeren Nekrotizan Enterokolitin Mikroakışkan Modeli

Necrotizing enterocolitis (NEC) is a severe and potentially fatal intestinal disease that has been difficult to study due to its complex pathogenesis, ...

Bu alandaki araştırmalar zordur çünkü nekrotizan enterokolitin patofizyolojisi karmaşıktır ve bu karmaşıklık yaygın olarak kullanılan birçok in vitro modele yansıtılmamıştır. İnsan örneklerini kullanan çalışmalar genellikle küçük örnek hacimleri ve bağırsak cerrahisi sırasında elde edilen örneklerin nadirliği ile sınırlıdır. Amacımız preterm bebeklerde NEC gelişimine yol açan mekanizmaları belirlemek ve yeni tedavi stratejileri belirlemektir.NEC-on-a-Chip sistemi, yenidoğan bağırsağının fizyolojisini daha yakından yansıtarak önceki modellere göre gelişir. Bu modelde, hastadan elde edilen bağırsak organoidlerini, endotel hücrelerini ve şiddetli NEC'si olan bir yenidoğanın mikrobiyomunu mikroakışkan çip üzerine birleştiriyoruz.

microfluidic-model-necrotizing-enterocolitis-incorporating-human

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu video, lipopolisakkarit tedavisinin neden olduğu insan kaynaklı bir neonatal enteroid modelinde nekrotizan enterokolit hastalığının gelişimini göstermektedir. Bu model bağırsak patofizyolojisini incelemeye yardımcı olur.

İnsan Epitelyal Enteroid Modelinde Nekrotizan Enterokolit İndüksiyonu

Enteroids insan hastalık insan yeni bir model olarak ortaya çıkıyor. Protokol insan nekrotizan enterokolit yenidoğan dokusundan üretilen enteroids tedavisinde lipopolysaccharide (LPS) kullanarak bir enteroid modeli benzetimi açıklar. Toplanan enteroids benzer-e doğru o insan nekrotizan enterokolit görülen iltihabi yapılan değişiklikleri göstermektedir.

Bir roman insan epitel Enteroid nekrotizan enterokolit modeli

Bu protokol, apikal yüzeye erişime izin veren, ters polariteye sahip ince bağırsak enteroidlerini kullanan apikal-dışarı nekrotizan enterokolit (NEC) bir çanak içi modelini tanımlar. NEC ile ilişkili epitel bozulmasını tespit etmek için bir immünofloresan boyama protokolü ve NEC-in-a-dish protokolüne tabi tutulan apikal-out enteroidlerin yaşayabilirliğini belirlemek için bir yöntem sunuyoruz.

İn Vitro Nekrotizan Enterokolitin Apikal-Out Enteroid Modeli

Escherichia coli, doğum sırasında bakterileri yutan yenidoğanlarda sepsise neden olur. E. coli'nin enterik yoldan kan dolaşımına seyahat etme kabiliyetinde yer alan süreç tam olarak anlaşılamamıştır. Bu in vitro model, E. coli suşlarının bağırsak epitel hücrelerinden geçme yeteneğini değerlendirir.

Yenidoğan Escherichia coli Bakteriyemi İzolasyonlarının İntestinal Transsitozunun Değerlendirilmesi

Bu protokol, nekrotizan enterokolitin (NEC) yenidoğan fare modelini ve ardından yenidoğan murin ince bağırsağından lamina propria bağışıklık hücrelerinin izolasyonunu özetlemektedir.

İmmün Hücre Profili Oluşturma için Nekrotizan Enterokolit ve Lamina Propria İzolasyonunun Yenidoğan Fare Modeli

Büyük hayvan modellerinde neonatal asfiksi fizyoloji ve farmakoloji sınavında iyi translasyonel değerlere sahiptir. Yenidoğan domuz kullanarak, sistemik ve bölgesel hemodinami, biyokimyasal ve patolojik yollar ve korelasyon ile oksijen taşınması eğitim avantajlarına sahip neonatal asfiksi taklit etmek için bir deney protokolü geliştirmektir.

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Perinatal asfiksiyi takiben hipoksik-iskemik ensefalopati hayvan modelleri kullanılarak incelenebilir. Yenidoğan hipoksik-iskemik ensefalopatisinin bir domuz yavrusu modeli oluşturmak için gerekli prosedürleri gösteriyoruz.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

İnce bağırsak kriptlerinden insan enteroidlerini ve hem cerrahi dokudan hem de biyopsilerden toplanan kolon kriptlerinden kolonoidleri oluşturmak için bir yöntem tarif ediyoruz. Bu metodolojik makalede, insan enteroidlerinin ve kolonoidlerinin başarılı bir şekilde büyümesi ve sürdürülmesi için gerekli olan kültür modalitelerini sunuyoruz.

Tüm Doku ve Biyopsi İnsan Epitelyal Enteroids ve Colonoids kurulması

Neonatal domuzlarda efferent lenflerden büyük miktarlarda lipid metabolizması bileşenlerini toplamak için bağırsak lenf gövdesini kateterize etmek için cerrahi bir prosedür sunuyoruz.

Yenidoğan Domuzların Lenf Bağırsak Lenf Trunk ve Koleksiyonu Uzun Vadeli Kateterizasyon

Bu makalede, yenidoğan faresinde tekrarlanabilir omurilik kompresyon yaralanması (SCI) oluşturmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Model, spontan fonksiyonel iyileşmenin altında yatan adaptif plastisite mekanizmalarını incelemek için avantajlı bir platform sağlar.

Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Keşfedin mikroakışkan çip kullanarak nekrotizan enterokolit için insan yenidoğan bağırsak enteroidleri ve disbiyotik mikrobiyom içeren in vitro modeli. Bu yöntem NEC patogenezini anlamaya ve yeni tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

İnsan Yenidoğan Bağırsak Enteroidlerini ve Disbiyotik Mikrobiyomu İçeren Nekrotizan Enterokolitin Mikroakışkan Modeli

Daha fazla video keşfet