Name: Farelerde Koloproktit Kanser Modelinin Oluşturulması ve Çin Tıbbının Terapötik Etkisinin Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T12:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Keşfedin farelerde koloproktit kanser modeli oluşturma ve Liujunzi decoction ile Çin tıbbının koruyucu etkisini değerlendirme. Bu yöntem kolorektal kanser biyobelirteçlerini araştırmak için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma Jilin İl Bilim ve Teknoloji Departmanı (YDZJ202201ZYTS181) tarafından desteklenmiştir.

Hayvan prosedürü, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Etik Kurulu tarafından onaylanmıştır (Kayıt numarası: 2021214). Spesifik patojen içermeyen C57BL/6J fareler (8-10 hafta, ağırlık 18-22 g), erkek ve dişi, 22 °C ve %65 bağıl nemde bağımsız olarak havalandırılan kafeslere yerleştirildi. Fareler, suya ve diyete serbestçe erişebildikleri 7 günlük uyarlanabilir beslenmeden sonra deneye başladılar.
1. İlaç hazırlama
<ol><li>LJZD'nin Hazırlanması NOT: Kullanılan Çin tıbbı, Changchun Çin Tıbbı Üniversitesi Bağlı Hastanesinden satın alınmış ve gerçek Çin tıbbı olarak tanımlanmıştır (bakınız Tablo 1).<ol><li>Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) özel bir seramik tencereye koyun (Malzeme Tablosuna bakınız). 1000 mL damıtılmış su ekleyin ve oda sıcaklığında 1 saat bekletin (bkz. Şekil 1A).</li>
		<li>Toz 12 g Bir öğütücü ile ince toz haline getirin ve 300 mL damıtılmış suyu başka bir kapta oda sıcaklığında 1 saat bekletin.</li>
		<li>Yukarıdaki Çin tıbbını özel seramik kapta karıştırın. Karışımı kaynatın ve ardından sadece 300 mL kaynatma kalana kadar orta ateşte tutun. Filtreleme için tıbbi gazlı bez kullanın ve süzüntüyü oda sıcaklığında saklayın.</li>
		<li>1000 mL damıtılmış su ekleyin ve yukarıdaki kaynatma işlemini bir kez daha tekrarlayın. Tıbbi gazlı bez kullanarak tekrar süzün. Süzüntüyü birleştirin ve sadece 150 mL kalana kadar kaynatın.</li>
		<li>Konsantre sıvıyı 5 dakika boyunca 10.000 x g'da santrifüjleyin ve elde edilen süpernatanı orta ateşte 30 mL'ye konsantre edin. Son konsantreyi bir tabağa aktarın ve sadece çözünen madde toz olarak kalana kadar elektrikli bir kurutma fırını kullanarak kurutun.</li>
		<li>Yukarıdaki katıyı tartın ve farelerin günlük dozu olan 0.2 mL (114.16 mg / mL) başına 22.85 mg ilaç içeren bir çözelti elde etmek için steril damıtılmış suda çözün.</li>
	</ol></li>
	<li>5-amino salisilik asidin hazırlanması NOT: 5-amino salisilik asit (5-ASA; Malzeme Tablosuna bakınız) UC-CRC üzerinde iyi bir önleyici etkiye sahiptir ve bu çalışmada pozitif bir ilaç olarak kullanılmıştır23.<ol><li>1.82 mg / mL 5-ASA çözeltisi elde etmek için 64 mg 5-ASA tozunu 200 mL steril damıtılmış su içinde çözün. Tek bir fare için günlük dozaj 0.2 mL idi.</li>
	</ol></li>
	<li>AOM enjeksiyon çözeltisinin hazırlanması<ol><li>25 mg AOM tozuna 2,5 mL steril damıtılmış su ekleyin (Malzeme Tablosuna bakınız) ve 10 mg / mL AOM stok çözeltisi yapmak için vorteks karıştırıcı ile karıştırın (Malzeme Tablosuna bakınız), kullanana kadar -20 ° C'de saklayın.</li>
		<li>AOM stok çözeltisini steril damıtılmış su ile 10:1'de (1 mg/mL) seyrelterek AOM enjeksiyon çözeltisini hazırlayın.</li>
	</ol></li>
</ol>2. UC-CRC modelinin kurulması
NOT: Deney 4 gruba ayrıldı: kontrol, model, LJZD ve 5-ASA grubu, her grupta 10 fare. Kontrol grubu hariç diğer gruplar AOM ve DSS ile tedavi edildi.
<ol><li>AOM enjeksiyon çözeltisinin intraperitoneal enjeksiyonu NOT: 7 gün boyunca uyarlanabilir beslemeden sonra, farelere intraperitoneal enjeksiyon yoluyla AOM enjeksiyon çözeltisi (1 mg / mL) verildi (bkz. Şekil 1B).<ol><li>Fareyi karnı yukarı ve başı hafifçe aşağı gelecek şekilde tutun. Karın derisini sıkılaştırmak için sırt derisini kavrayın ve cildi 1 mL'lik bir şırınga ile orta karın çizgisinde her iki uyluğun kök çizgisinin kesişiminin yaklaşık 1 cm sağında delin (bkz.</li>
		<li>1 mL şırınga iğnesini karın orta hattına paralel olacak şekilde derinin altında 3-5 mm mesafeye itin ve iğneyi karın boşluğuna 0,3-0,5 mm 45°'de sokun.</li>
		<li>Uç karın kasından geçtikten sonra, operatör ani bir direnç kaybı hisseder. Ardından, sıvı sızıntısı olup olmadığını gözlemlemek için şırıngayı dışarı ve geriye doğru çekin. Değilse, AOM enjeksiyon solüsyonunu farelere 0.1 mL / 10 g'da yavaşça itin.</li>
	</ol></li>
	<li>% 2 DSS çözeltisinin döngüsel stimülasyonu NOT: AOM ile indüklenen her fareye 3, 6 ve 9. haftalarda 500 mL DSS çözeltisi verildi ve fareler bu süre zarfında serbestçe içti.<ol><li>10 g DSS'ye 500 mL steril damıtılmış su ekleyerek% 2 DSS çözeltisi hazırlayın (bkz. Bir vorteks karıştırıcı ile karıştırın ve kullanana kadar 4 °C'de saklayın.</li>
		<li>AOM ile indüklenen her fare, AOM indüksiyonundan sonra 3, 6 ve 9. haftalarda 7 gün boyunca 500 mL% 2 DSS solüsyonunu serbestçe içer.</li>
	</ol></li>
</ol>3. İlaç tedavisi
NOT: Yetişkin insanların günde 63 g LJZD'ye ihtiyacı vardır. Deneysel fare ve insan ilaç dozunun dönüşüm formülüne göre, fareler için eşdeğer deney dozu (mg / kg) = insan dozu (mg / kg) / vücut ağırlığı (60 kg) x 9.1, farelerin günlük dozu yaklaşık 9.6 g / kg idi.
<ol><li>LJZD ve 5-ASA grubunu, sırasıyla 7. ve 15. haftalarda gastrik gavaj ile 0.1 mL / 10 g hazırlanan LJZD ve 5-ASA solüsyonu ile tedavi edin.<ol><li>Farelerde intragastrik uygulama için aşağıdaki prosedürü uygulayın. Fareyi sol elinizde tutun ve sağ elinizde mide perfüzyon aparatını tutun. Şırınga iğnesini ağzına sokun ve farelerin farenksinin arka duvarından aşağı kaydırın. Fareler yutkunurken farenksi aşağı kaydırın ve ilerlemeye devam edin. Bir direnç hissi olduğunda ve şırınga farenkse itilebildiğinde, iğneyi dışarı çekin ve enjeksiyonu tamamlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kontrol ve model grubuna aynı miktarda salin uygulayın (bkz. Malzeme Tablosu).</li>
	<li>Her gruptaki fareleri, uygulama süresi boyunca aynı anda günde bir kez uygun ilaçla tedavi edin.</li>
</ol>4. UC-CRC modelinin değerlendirilmesi ve LJZD'nin etkinliği
<ol><li>Hastalık aktivite indeksi skoru NOT: Tablo 2'ye göre, farelerin kilo kaybı, dışkı viskozitesi ve dışkı kanaması birleştirilerek hastalık aktivite indeksi (DAI) skoru değerlendirildi.<ol><li>Adaptif beslenmenin başlangıcından ilaç tedavisinin sonuna kadar farelerin ağırlığını günlük olarak kaydedin.</li>
		<li>Her deney faresinin dışkı kıvamını dikkatlice gözlemleyin ve bağırsak hareketlerini üç koşuldan biri olarak kaydedin: normal, gevşek dışkı ve sulu ishal.</li>
		<li>Deney hayvanlarının dışkı kanamasını üç koşuldan biri olarak kaydedin: kanama yok, az kanama ve dışkıda görünür kan.</li>
	</ol></li>
	<li>Serumda IL-6 seviyesinin saptanması<ol><li>Fareleri 9 hafta boyunca LJZD veya 5-ASA ile tedavi edin. Sol elinizle farenin boyun derisini kavrayarak ve yanal dekübit pozisyonunu almak için deney masasına hafifçe bastırarak fareleri sabitleyin. Farelerin bıyıklarını makasla kesin. Kan kontaminasyonunu önlemek için farelerin bıyıklarını makasla dikkatlice kesin ( Malzeme Tablosuna bakın). NOT: Serbestçe hareket edemeyen farelerin uygun şekilde sabitlendiği kabul edildi. Bu olmazsa, fareler sabitlenmelidir.</li>
		<li>% 2 izofluran soluyarak fareyi uyuşturun. Göz küresinin etrafındaki cildi etanol ile sterilize edin (Malzeme Tablosuna bakınız). Göz küresini tıkalı ve çıkıntılı hale getirmek için yandaki göz derisine hafifçe bastırın.</li>
		<li>Göz küresini bir dirsek cımbızıyla sıkıştırın ve gözbebeklerini doğru ve hızlı bir şekilde çıkarın. Kanın santrifüj tüpüne damlamasına izin verin (bkz. Bu süreçte, kan alımını hızlandırmak için farenin kalbine dokunun.</li>
		<li>Toplanan kanı 30 dakika oda sıcaklığında tutun ve 10 dakika boyunca 3.500 x g'da santrifüj edin. Süpernatanı toplayın ve IL-6 içerik algılama kiti talimatlarına göre IL-6 seviyesini tespit edin (bkz. Malzeme Tablosu).</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektal dokuyu ayırma<ol><li>Kan örneklemesinden sonra farelere% 5 aşırı doz izofluran ve servikal çıkık soluyarak ötenazi yapın (bkz.</li>
		<li>Fareleri kriyojenik anatomik bir ortamda tutun. Fareleri sırtüstü pozisyonda hareketsiz hale getirin. Alt karın kıllarını makasla kesin ve etanol ile sterilize edin.</li>
		<li>İki uyluk kökü ile karın orta hattı arasındaki kesişme noktasını göz kapağı forseps ile sıkıştırın (bkz. Makasla yaklaşık 1-1,5 cm enine bir kesi kesin.</li>
		<li>Transvers insizyonun orta noktasından ksifoid sürece doğru karnın medyan çizgisi boyunca uzunlamasına bir kesi yapın.</li>
		<li>Kolorektumu çevreleyen dokudan ayırmak için peri-kolorektal dokuları anüs yönünde çıkarın. Kolorectum'a zarar vermemeye dikkat edin.</li>
		<li>Kolorectum'u tamamen ortaya çıkarmak için karın derisini yanlara doğru itin. Kolorektumu karın boşluğundan göz kapağı forseps ile çıkarın ve segmentleri anüsten çekuma kadar kesin (hariç); Toplam uzunluk yaklaşık 10 cm'dir. Elde edilen kolorektal dokuları 4 °C'de serum fizyolojik içinde saklayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Rektumun uzunluğunun ve ağırlığının değerlendirilmesi<ol><li>Kolorectumun içini yıkamak için salini 4 ° C'de 5 mL'lik bir iğne ile çıkarın ( Malzeme Tablosuna bakın). Ardından, dokunun nemini emmek için kolorektumu emici kağıda yerleştirin.</li>
		<li>Kolorektal dokuları tartın ve ardından uzunluklarını ölçmek için A4 kağıda yerleştirin.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorrektumdaki tümör sayısını ölçün<ol><li>Kolorektumu tamamen açmak için uzunlamasına kesin ve kolorrektumdaki tümörlerin sayısını ve boyutunu gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektumun patolojik analizi<ol><li>Kolorektum'u 24 saat boyunca% 4 paraformaldehit içinde sabitleyin. Sabit rektal dokuyu erimiş parafine gömün ve doku donduran bir mikrotom ile sürekli olarak 5 μm kalınlığında kesit alın.</li>
		<li>Hou ve ark.24 prosedürüne göre, ksilen içindeki bölümleri mumdan arındırın ve ardından seri etanol konsantrasyonları ile kurutun. Hematoksilen çözeltisi ile 5 dakika boyadıktan sonra, bölümleri saf suyla durulayın. Bundan sonra, 1 dakika boyunca% 0.5 eozin çözeltisi ile boyayın ( Malzeme Tablosuna bakınız).</li>
		<li>Gradyan dehidrasyon ve ksilen şeffaf tedavisini tekrar gerçekleştirin. Kesitleri kapatın ve Xie ve ark.25 tarafından açıklandığı gibi optik mikroskop altında gözlemleyin (Malzeme Tablosuna bakın) ve fotoğraflayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kolorektumun immünohistokimyasal analizi<ol><li>Bölümleri yukarıdaki yönteme göre mumdan arındırın ve kurutun. Gök ve ark.26 tarafından tarif edildiği gibi yüksek basınçlı termal onarım tekniği ile kesitlerdeki antijeni onarın.</li>
		<li>Bölümleri endojen peroksidaz blokerlerinde oda sıcaklığında 15 dakika bekletin. Bölümleri keçi serumu ile kapatın (Malzeme Tablosuna bakın).</li>
		<li>Bölümlere birincil antikor ZO-1 (1:1000), Oklüdin (1:1000) ve KI67 (1:500; Malzeme Tablosuna bakınız) ekleyin ve gece boyunca 4 ° C'de inkübe edin. Bölümleri PBS tamponu ile durulayın (Malzeme Tablosuna bakınız), genel amaçlı ikincil antikor (1:5000; Malzeme Tablosuna bakınız) ekleyin ve 37 °C'de 30 dakika inkübe edin.</li>
		<li>Renk geliştirme bölümlerine DAB çözümünü (Malzeme Tablosuna bakın) ekleyin. Bölümleri hematoksilen çözeltisi ile boyayın.</li>
		<li>Bölümleri tekrar kurutun, şeffaflaştırın ve kapatın. Optik mikroskop ile protein ekspresyonunu gözlemleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>

Liujunzi Kaynatma: UC-CRC'nin Önlenmesi İçin Etkili Bir Tedavi

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

KRK, her yıl yaklaşık 1.148.000 yeni vaka ve 576.000'den fazla ölümle dünya çapında en yaygın kanserlerden biridir. KRK, kalıtsal, sporadik ve UC-KRK olmak üzere farklı nedenlere göre üç tipe ayrılabilir31. ÜK gibi inflamatuar barsak hastalıkları olan hastalarda KRK insidansı, genel popülasyondan anlamlı olarak daha yüksektir. UC, tipik adenom-adenokarsinomyolu 6'dan farklı olan inflamatuar-kanser yolu yoluyla KRK gelişimini uyarır. Şu anda, UC-KRK'nin nedeni bilinmemektedi...

Kolorektal kanser (KRK), küresel kanser insidansının %10'unu ve toplam kansere bağlı ölümlerin %9,4'ünü oluşturan, dünyada en sık görülen üçüncü malignite ve ikinci en yaygın ölüm nedeni olan yaygın bir gastrointestinal malignitedir 1,2. Genetik faktörler, kronik inflamasyon, yüksek yağlı diyet, diyabet ve anormal bağırsak florası CRC 3,4 için risk faktörleridir. Bunlar arasında inflamatuar barsak hastalığı, özellikle ülseratif koloproktit (ÜK), CRC 5,6 için açık bir risk faktörüdür. UC ile ilişkili CRC (UC-CRC),CRC 7,8'in tipik adenom-adenokarsinom gelişim modelinden farklı olarak, kolorektumun kronik inflamasyonuna dayanan inflamasyon, atipik hiperplazi ve kanserin bir geçiş sürecidir. Genel popülasyonla karşılaştırıldığında, inflamatuar barsak hastalığı olan hastalarda KRK riski yaklaşık 10-40 kat daha yüksektir9.
Şu anda, cerrahi hala KRK için standart tedavidir ve tümörün konumuna ve evresine bağlı olarak radyasyon tedavisi, sistemik ilaç tedavisi veya her ikisinin bir kombinasyonu mümkündür10. Bu geleneksel tedavi yöntemleri büyük ilerleme kaydetmiş olsa da, KRK'nin yüksek heterojenliği ve nüks oranı nedeniyle prognoz kötüdür ve tedavi etkisi ideal değildir11,12. Bu nedenle, erken teşhis, erken tanı ve kapsamlı tedavi, KRK hastalarının sağkalım oranını iyileştirmenin anahtarıdır ve ÜK'nin KRK'ye dönüşümüne dikkat etmek özellikle önemlidir. Yıllar geçtikçe, geleneksel Çin tıbbı (TCM), sınırlı yan etkileri ve önemli etkinliği nedeniyle UC-CRC veya kronik gastrit tedavisinde büyük ilgi görmüştür. Diyalektik tedaviye dayanarak, çeşitli nesillerden ünlü Çin tıbbı uygulayıcıları, Huangqi Jianzhong kaynatma13, Sijunzi kaynatma14 ve Sishen hapı15 gibi çok sayıda klasik reçete oluşturmuştur.
Liujunzi kaynatma (LJZD), Yi Xue Zheng Zhuan'ın Ming Hanedanlığı'nda derlenen çalışmalarından kaynaklanmaktadır ve TCM16'da klasik bir reçetedir. Tablo 1'de gösterildiği gibi, LJZD, Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.) Kurt (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Narenciye reticulata Blanco (Chenpi) ve Pinellia ternata (Thunb.) Qi'yi yenileme ve dalağı güçlendirme, nemi kurutma ve balgamı çözme etkisine sahip olan Breit (Banxia). Modern klinik uygulamada, genellikle kronik gastrit, mide ülseri ve duodenum ülserlerini tedavi etmek için kullanılır. Modern farmakolojik araştırmalar, LJZD ve modifiye LJZD'nin UC ve sindirim sistemi kanserinin adjuvan tedavisinde yüksek uygulama değerine sahip olduğunu göstermiştir 17,18,19.
Şu anda, UC-CRC fare modellerini oluşturmanın birçok yolu vardır, ancak azoksimetan (AOM)/dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı fare modeli en yaygın kullanılan UC-CRC modelidir; klinik semptomlar, morfolojik ve patolojik gözlemler, modelin insan UC-CRC20,21'e çok benzediğini kanıtlamıştır. Temel prensip, önce kimyasal kanserojen AOM ile karsinogenezi indüklemek ve daha sonra bağırsak mukozal epitelinin sürekli hasarını ve onarımını simüle etmek için fareleri sürekli olarak DSS'nin enflamatuar stimülasyon ortamına maruz bırakmak ve böylece bir UC-CRC fare modelioluşturmaktır 22. Bu çalışmanın amacı, kısa dönemde AOM'nin intraperitoneal enjeksiyonu ve DSS'nin siklik stimülasyonu ile UC-KRK'nin fare modelini oluşturmak ve UC-KRK tedavisine bilimsel bir temel sağlamak amacıyla ilacın ve LJZD'nin moleküler mekanizmasının UC-KRK üzerindeki etkisini değerlendirmektir.

<table><tbody><tr><td>Azoksimetan</td><td>Sigma</td><td>A5486</td><td></td></tr><tr><td>5-amino salisilik asit</td><td>Kuihua İlaç Grubu Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>3819413</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6J fareler</td><td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td><td>NO 210726210100853716</td><td></td></tr><tr><td>Kapak kayması</td>: <td>Jiangsu Shitai Deneysel Equipment Co., Ltd</td><td>10212432C</td><td></td></tr><tr><td>DAB rengi geliştirme kiti</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>2005289</td><td></td></tr><tr><td>Susuzlaştırma makinesi&nbsp;</td><td>Wuhan Junjie Elektronik Co, Ltd</td><td>JJ-12J</td><td></td></tr><tr><td>Dekstran sülfat sodyum</td><td>Dalian Meilun Biyoteknoloji Co, Ltd</td><td>MB5535</td><td></td></tr><tr><td>Gömme makinesi</td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JB-P5</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksilen-eozin boya</td><td>Wuhan Yüz Derece Biyoteknoloji Co., Ltd</td><td>B1000</td><td></td></tr><tr><td>IL-6</td><td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td><td>MM-0163M2</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>KI67 birincil antikor</td><td>Google Biyoteknoloji A.Ş</td>. <td>GB121141</td><td></td></tr><tr><td>Nötr sakız</td><td>Wuhan Yüz Derece Biyoteknoloji Co, Ltd</td><td>10004160</td><td></td></tr><tr><td>Nesne slaytı</td><td>Jiangsu Shitai Deneysel Ekipman Co, Ltd</td><td>10212432A</td><td></td></tr><tr><td>Okkludin birincil antikor</td><td>Affnity</td><td>DF7504</td><td></td></tr><tr><td>Ortostatik optik mikroskop</td><td>Nikon</td><td>Nikon Eclipse CI</td><td></td></tr><tr><td>Patolojik mikrotom</td><td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td><td>RM2016</td><td></td></tr><tr><td>ZO-1 birincil antikor</td><td>Abcam</td><td>ab221547</td><td></td></tr></tbody></table>

farelerde koloproktit kanser modelinin oluşturulması ve Çin tıbbının terapötik etkisinin değerlendirilmesi

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

Kolorektal kanser (KRK), sindirim sisteminin yaygın bir malignitesidir ve dünya çapında en sık görülen üçüncü malignite ve maligniteye bağlı ölümlerin ikinci önde gelen nedeni haline gelmiştir. Ülseratif koloproktit (ÜK) prekanseröz bir lezyondur ve ÜK ile ilişkili KRK (ÜK-KRK) KRK'NIN EN SıK GÖRÜLEN ALT TIPIDIR. Bu nedenle, makul bir UC-CRC modeli, yeni ilaç geliştirmenin temel taşı ve garantisidir. Geleneksel Çin tıbbı (TCM), iyi etkinliği nedeniyle UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. TCM'nin klasik bir tonik reçetesi olan Liujunzi kaynatma (LJZD), UC-CRC tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu çalışmada, azometan ve dekstran sülfat sodyum birleştirilerek UC-KRK modeli oluşturulmuş ve LJZD uygulanmıştır. Veriler, LJZD'nin fare vücut ağırlığı, kolorektal uzunluk, patolojik ve inflamatuar faktörler, kolorektal bariyer fonksiyonu ve kanser belirteçlerini kullanarak UC-CRC'de kanser geçişini etkili bir şekilde inhibe edebileceğini doğruladı. Bu protokol, UC-CRC'nin önlenmesi ve tedavisinde TCM'nin etkinliğini değerlendirmek için bir sistem sağlar.

LJZD'nin kaynatma işlemi, Tablo 1'deki ilaçların bileşim oranına ve Şekil 1A'daki TCM'nin kaynatma yöntemine göre hazırlanmıştır. Şekil 1B'de belirtilen zaman noktasına göre, farelere 7. günde intraperitoneal olarak 1 mg/mL AOM enjekte edildi ve farelere3., 6. ve 9. haftalarda %2 DSS içeren içme suyuna serbest erişim sağlandı. UC-CRC fare modeli 15. haftada başarıyla kuruldu. Bu arada, farel...

Bu protokol, dekstran sülfat sodyum ile birlikte azometan tarafından indüklenen ülseratif koloproktit ile ilişkili kolorektal kanserin bir fare modelini sağlar. Model, kolorektal kanserin önlenmesi ve tedavisinde geleneksel Çin tıbbı bileşiklerinin etkinliğini değerlendirmek için kullanıldı.

Farelerde Koloproktit Kanser Modelinin Oluşturulması ve Çin Tıbbının Terapötik Etkisinin Değerlendirilmesi

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Bu çalışma, geleneksel Çin tıbbı ile koloproktit kanserinin önlenmesi ve tedavisi üzerineydi. Koloproktit kanseri için bir fare modeli oluşturmayı ve geleneksel Çin tıbbı göstergelerini değerlendirmeyi amaçlıyoruz. Çin tıbbı Liujunzi kaynağının koloproktit kanserinin önlenmesi için etkili bir tedavi olduğunu doğruladık.Gelecekte, kolon ve rektum kanseri için daha hassas biyobelirteçleri belirlemek ve terapötik hedefler için Liujunzi kaynatma taramasını taramak için çalışacağız.

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Çekum üzerine bir kanser hücre süspansiyonu çekal duvar subkutan tümörün bir parçasının veya transplantasyon içine enjeksiyon: İki teknikleri bu modeli kurmak için kullanılan olabilir. Bu model, kolorektal kanseri doğal bir ilerleme eğitim ve kolorektal kansere karşı yeni tedavi ajanları test için yararlıdır.

Kolorektal Kanser Ortotopik Fare Modeli

Biz hızla pro-inflamatuar ajan dekstran sülfat sodyum (DSS) üç kür takip ve sürekli insan kolit görülenler ile morfolojik ve moleküler benzerlikleri olan farelerde kolon tümörleri oluşturur genotoksik ajan azoxymethane (AOM) hangi yönetiminde bir protokol göstermek kanserle ilişkili.

Azoxymethane (AOM) ve Dekstran Sülfat Sodyum (DSS) ile Modelleme Kolit-İlişkili Kanser

Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut.

Bir Geçerliliği Endoskopik Puanlama Sisteminin Kullanılması Kolit ve Kolorektal Tümörlerin Şiddetini Değerlendirmek için Farelerde esnek Kolonoskopi

Farelerde kolon patolojilerinin tedavisi için terapötiklerin etkinliğinin rijit bir endoskop kullanılarak uzunlamasına izlenmesi için yöntemleri açıklıyoruz. Bu protokol, canlı farelerde tek bir tümörün terapötik yanıtının karakterizasyonu ve ayrıca potansiyel hastalık nüksünü izlemek için kolayca kullanılabilir.

Canlı Fareler Seri endoskopik Görüntüleme kullanma Bağırsak Patolojilerde Yeni Therapeutics Etkinliğinin Non-invaziv Değerlendirme

Farelerin çekumuna tümör hücreleri veya organoidler enjekte edilerek ortotopik kolorektal tümörlerin oluşumunu ve ardından bu modelden dolaşımdaki tümör hücrelerinin (CTC'lerin) izole edilmesini açıklıyoruz.

Kolorektal kanserli bir Ortotopik Fare Modelinde Dolaşan Tümör Hücrelerinin İzolasyonu

Sunulan protokol, inflamatuar barsak hastalığı ile ilişkili kolorektal kanserin indüksiyonu takip eden bir farede apandisin (kaekal yama) kolay bir cerrahi olarak çıkarılmasını açıklar. Bu murine apendektomi modeli insan gastrointestinal hastalığın patogenezinde apandisin biyolojik rolünün araştırılmasını sağlar.

Kaekal Patch Kesin Lokalizasyonu ile Kronik Kolit İlişkili Kolorektal Kanser Murine Apendektomi Modeli

Bu çalışma, bir murin modelinde ışıldayan kolorektal kanser hücrelerinin in vivo deri altı indüksiyonuna ve ardından bir görüntüleme sistemi kullanılarak lüminesans ölçümüne odaklanmaktadır. Prosedür, gerçek zamanlı izleme ve terapötik değerlendirme için tekrarlanabilir bir tümör büyüme modeli oluşturmayı amaçlamaktadır.

Antitümör Etkinliğini Değerlendirmek için Atimik Çıplak Farelerde İnsan Kolorektal Kanser Hücrelerinin Deri Altı Enjeksiyonu

Insan retinoblastom farelerde tümörlerin yaymak için bir yöntem açıklanmıştır. Tümör hücreleri bağışıklık eksikliği olan farelerde gözlerinin içine doğrudan enjekte edilir. İkincil tümörlerin başarıyla doğrudan insan tümörleri ve kültürlü tumorspheres hasat hücreler kullanılarak kurulmuştur.

Bağışıklık Eksik Fare Kuruluş ve İnsan Retinoblastom Tümörler yayılımı

Bu yöntem, fare modellerinde yeni ilaçların farmakokinetiğini değerlendirmek için, karotid arter yoluyla sabit bir ilaç çözeltisi sunmak amacı ile geliştirilmiştir.

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

Burada, bakteriyel protein HP-NAP'ın anti-tümör etkinliğini değerlendirmek için ortotopik mesane tümörünün sinjeneik bir fare modeli oluşturma yöntemi açıklanmaktadır.

Etkinliğinin Değerlendirilmesi<em&gt; H. pylori</emOrtotopik Fare Modelinde Mesane Kanseri Tedavisinde Terapötik Aracı Olarak&gt; Protein HP-NAP

Keşfedin farelerde koloproktit kanser modeli oluşturma ve Liujunzi decoction ile Çin tıbbının koruyucu etkisini değerlendirme. Bu yöntem kolorektal kanser biyobelirteçlerini araştırmak için kullanılır.

Farelerde Koloproktit Kanser Modelinin Oluşturulması ve Çin Tıbbının Terapötik Etkisinin Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet