26 Ocak 2024
Mide hastası kaynaklı organoidler araştırmalarda giderek artan bir kullanım alanı bulmaktadır, ancak standartlaştırılmış tohumlama yoğunluğuna sahip tek hücreli sindirimlerden insan mide organoidleri üretmek için resmi protokoller eksiktir. Bu protokol, üst endoskopi sırasında elde edilen biyopsi dokusundan gastrik organoidlerin güvenilir bir şekilde oluşturulması için ayrıntılı bir yöntem sunar.
Araştırmamız mide kanserinin kalıtsal nedenlerine odaklanmaktadır. Özellikle, CDH1 veya CTNNA1 genindeki hastalığa neden olan varyantlar nedeniyle kalıtsal diffüz mide kanseri ile ilgileniyoruz. Ayrıca BRCA1 ve BRCA2'nin mide kanseri riski ve karsinogenezdeki rolünü araştırıyoruz.
Organoidler çeşitli araştırma alanlarında giderek daha fazla kullanılmaktadır ve gastroenteroloji bir istisna değildir, bu nedenle bu organoidleri, özellikle de hasta kaynaklı mide organoidlerini üretmek için bu tekniklerin standardizasyonuna ihtiyaç duyulmaktadır. Protokolümüz, midenin hem antral hem de vücut bölgelerinin biyopsilerinden hasta kaynaklı mide organoidlerini güvenilir bir şekilde üretmek için adım adım bir yöntem sunar. Özellikle, farklı hastalardan üretilen organoidler arasında güvenilir karşılaştırmalar yapmak amacıyla hücrelerin standartlaştırılmış tohumlanmasına izin vermek için tek hücreli bir özet yaklaşımı kullanıyoruz.
Bulgularımız, midenin vücut bölgesinden hasta kaynaklı mide organoidleri ile karşılaştırıldığında, antral bölgeden gelenlerin aslında ilk tohumlamadan sonraki 20 gün boyunca daha fazla sayıda ve daha büyük boyutta büyüdüğünü göstermektedir. Bu bulgular, midenin farklı bölgelerinden elde edilen mide organoidlerini kullanmak isteyen araştırmacılar tarafından dikkate alınmalıdır.
Bu araştırma, CDH1 ve CTNNA1 genlerindeki varyantlara odaklanarak, mide kanserinin kalıtsal nedenlerini araştırmaktadır. Çalışma, üst endoskopi sırasında elde edilen biyopsi dokularından hasta türevi mide organoidlerinin üretimi için güvenilir bir protokol sunmakta ve midenin antral ve korpus bölgelerden elde edilen organoidler arasındaki büyüme hızlarındaki farklılıkları göstermektedir.
Standardized generation and quantification of patient-derived gastric organoids from single-cell digests addresses a critical need for reproducible, disease-relevant in vitro models in early discovery and translational research. This protocol enables reliable comparison of organoid growth from distinct gastric regions, supporting mechanistic de-risking and predictive confidence in target validation workflows. The approach enhances portfolio decision-making by providing robust, scalable systems for functional interrogation of gastric biology and pathology.
This protocol positions gastric PDOs as a foundational tool from early discovery through preclinical research, enabling hypothesis-driven studies and functional validation in disease-relevant systems.