Name: Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-07-12T13:10:00.000+00:00
Duration: 4 min 26 s
Description: Keşfedin ameliyat sonrası ileus murin modelini, bağırsak manipülasyonu kullanarak patofizyolojiyi ve immün yanıtları incelemek için. Bu yöntem yeni tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Bağırsak Manipülasyonu Yoluyla Postoperatif İleusun İncelenmesi için Murin Modeli

<ol><li>Chapman, S. J., Pericleous, A., Downey, C., Jayne, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Postoperative+ileus+following+major+colorectal+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Postoperative ileus following major colorectal surgery.</a> Br J Surg. 105 (7), 797-810 (2018).</li>
<li>Farro, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CCR2-dependent+monocyte-derived+macrophages+resolve+inflammation+and+restore+gut+motility+in+postoperative+ileus%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">CCR2-dependent monocyte-derived macrophages resolve inflammation and restore gut motility in postoperative ileus.</a> Gut. 66 (12), 2098-2109 (2017).</li>
<li>Wouters, M. M., Vicario, M., Santos, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mast+cells+in+functional+GI+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Gut%22%5BJournal%5D)">The role of mast cells in functional GI disorders.</a> Gut. 65 (1), 155-168 (2016).</li>
<li>Engel, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+helper+type+1+memory+cells+disseminate+postoperative+ileus+over+the+entire+intestinal+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">T helper type 1 memory cells disseminate postoperative ileus over the entire intestinal tract.</a> Nat Med. 16 (12), 1407-1413 (2010).</li>
<li>Schwartz, C., Voehringer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+murine+basophils+by+flow+cytometry+and+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Identification of murine basophils by flow cytometry and histology.</a> Methods Mol Biol. 2163, 367-375 (2020).</li>
<li>Funk, E. K., Weissbrod, P., Horgan, S., Orosco, R. K., Califano, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+experience+with+a+novel+single-port+platform+for+transoral+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Surg+Endosc%22%5BJournal%5D)">Preclinical experience with a novel single-port platform for transoral surgery.</a> Surg Endosc. 35 (8), 4857-4864 (2021).</li>
<li>Nemoto, S., Mailloux, A. W., Kroeger, J., Mulé, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OMIP-031%3A+Immunologic+checkpoint+expression+on+murine+effector+and+memory+T-cell+subsets%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">OMIP-031: Immunologic checkpoint expression on murine effector and memory T-cell subsets.</a> Cytometry A. 89 (5), 427-429 (2016).</li>
<li>Brandi, J., Wiethe, C., Riehn, M., Jacobs, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OMIP-93%3A+A+41-color+high+parameter+panel+to+characterize+various+co-inhibitory+molecules+and+their+ligands+in+the+lymphoid+and+myeloid+compartment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">OMIP-93: A 41-color high parameter panel to characterize various co-inhibitory molecules and their ligands in the lymphoid and myeloid compartment in mice.</a> Cytometry A. 103 (8), 624-630 (2023).</li>
<li>Swidsinski, A., Weber, J., Loening-Baucke, V., Hale, L. P., Lochs, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+organization+and+composition+of+the+mucosal+flora+in+patients+with+inflammatory+bowel+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Spatial organization and composition of the mucosal flora in patients with inflammatory bowel disease.</a> J Clin Microbiol. 43 (7), 3380-3389 (2005).</li>
<li>Bialkowska, A. B., Ghaleb, A. M., Nandan, M. O., Yang, V. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Swiss-rolling+technique+for+intestinal+tissue+preparation+for+immunohistochemical+and+immunofluorescent+analyses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Improved Swiss-rolling technique for intestinal tissue preparation for immunohistochemical and immunofluorescent analyses.</a> J Vis Exp. (113), e54161(2016).</li>
<li>van Bree, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+method+for+studying+postoperative+ileus+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Physiol+Pathophysiol+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Novel method for studying postoperative ileus in mice.</a> Int J Physiol Pathophysiol Pharmacol. 4 (4), 219-227 (2012).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>1 M HEPES</td><td>Thermo</td><td>15630080</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-fare I-A/I-E (MHC-II)Biolegend</td><td></td> <td>107614</td><td></td></tr><tr><td>APC anti-fare TCRb</td><td>Biolegend</td><td>109212</td><td></td></tr><tr><td>APC/Cy7 anti-fare CD4</td><td>Biolegend</td><td>100414</td><td></td></tr><tr><td>APC/Cy7 anti-fare Ly6G</td><td>Biolegend</td><td>127624</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-fare CD69</td><td>Biolegend</td><td>104545</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 421 anti-fare F4/80</td><td>Biolegend</td><td>123132</td><td></td></tr><tr><td>Brilliant Violet 785 anti-fare/insan CD44</td><td>Biolegend</td><td>103041</td><td></td></tr><tr><td>BUV395 anti-fare CD8a</td><td>BD</td><td>563786</td><td></td></tr><tr><td>BUV737 anti-fare CD3e</td><td>BD</td><td>612771</td><td></td></tr><tr><td>Kollajenaz IV</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C5138</td><td></td></tr><tr><td>Kültür Mikroskobu</td><td>CKX53</td><td>Sığır</td> pankreasından Olympus <td></td></tr><tr><td>Deoksiribonükleaz I (<güçlü>DNaz I</güçlü >)</td> <td>Sigma-Aldrich</td><td>DN25-5G</td><td></td></tr><tr><td>DL-Dithiothreitol çözeltisi</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>43816-10ML</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>EDS-100G</td><td></td></tr><tr><td>FITC anti-fare CD45</td><td>Biolegend</td><td></td><td></td>147709</tr><tr><td>FITC-dekstran (70 kWM)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>FD70-100MG</td><td>Gastrointestinal Transit Testi</td></tr><tr><td>HE boyama kiti</td><td>solarbio</td><td>G1120</td><td></td></tr><tr><td>PE anti-fare CD11b</td><td>Biolegend</td><td>101208</td><td></td></tr><tr><td>PE anti-fare PD-1</td><td>Biolegend</td><td>114118</td><td></td></tr><tr><td>PE / Cy7 anti-fare CD11c</td><td>Biolegend</td><td>117318</td><td></td></tr><tr><td>Percoll</td><td>GE (Eczacı)</td><td>17-0891-01</td><td></td></tr><tr><td>Senfoni A5 Akış sitometresi</td><td>BD-İmmün</td><td></td> <td>hücre tespiti ve sınıflandırması</td></tr><tr><td>Tribromoetanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402</td><td>Anestezi</td></tr><tr><td>Varioskan LUX</td><td>Thermo</td><td>N16699</td><td>Çok modlu mikroplaka okuyucu</td></tr><tr><td>Zombie Aqua Tamir Edilebilir Canlılık kiti</td><td>Biolegend</td><td>423102</td><td>Floresan Canlılık Boya&nbsp;</td></tr></tbody></table>

ameliyat sonrası İleus murin modeli

Postoperative Ileus Murine Model

Bu protokolde, POI, klinik cerrahinin etkisine benzer şekilde bağırsak manipülasyonu (IM) ile cerrahi olarak indüklendi. Sahte grupta, IM olmadan bir kesi yapıldı. POI fareleri, sahte kontrol fareleri ile birlikte POI ameliyatından 24 saat sonra sakrifiye edildi. Sindirim sisteminin kritik işlevi olan içerik geçiş işlevi, FITC-dekstran'in gavajı ile tespit edildi. İnce bağırsağın proksimal kısmında FITC yoğunluğu arttığı için POI modeli başarılı kabul edildi (Şekil 2B). Ortalama GC'ler, IM'nin transit disfonksiyonunu ölçmek ve operasyonun tutarlılığını göstermek için hesaplandı (Şekil 2C).
HE boyama, sindirim sisteminin farklı segmentlerinin morfolojisini gösterdi (Şekil 3). Duodenum ve ileumun submukoza ve düz kas tabakası POI indüksiyonundan 24 saat sonra şişti (Şekil 3A,B). Sahte farelerdekilerle karşılaştırıldığında, duodenumun HE boyaması, POI farelerinde artmış bağışıklık hücresi infiltrasyonunu ortaya çıkardı (Şekil 3A).
Çok renkli akış sitometrik analizi, bağışıklık hücrelerinin oranını, durumunu ve işlevini analiz etmek için merkezi yöntemdir. Bağırsak dokusu kollajenaz ve deoksiribonükleaz ile sindirildi ve akış sitometrisi için tek hücreli bir süspansiyona ayrıldı. Geçit stratejisi, LPL'ler arasındaki CD3 T hücrelerinin ve ilgili alt popülasyonların oranlarını belirlemek için kullanıldı (Şekil 4A). Aktivasyon ve adezyon markörü CD69 ve CD4 T hücrelerinin, CD8 T hücrelerinin ve gd T hücrelerinin ekspresyonu POI farelerinde yukarı regüle edilir (Şekil 4B)7. Benzer şekilde, CD44+ PD-1 + (aktivasyon, terminal farklılaşması ve tükenme belirteci) alt popülasyonunun oranı artan bir eğilim göstermiştir (Şekil 4C)7. Lenfositlere ek olarak, miyeloid hücre alt kümelerinin (nötrofiller, dendritik hücreler ve makrofajlar) oranları da IM cerrahisinden sonra artar (Şekil 4D)8.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66465/66465fig1v2.jpg"> 
Şekil 1: Postoperatif ileusun murin modeli. (A) Postoperatif ileusun murin modelinin şeması. (B) Anestezi ve tıraştan sonra fare fiksasyonu. (C) Kesi açığa çıkarıldı ve tıbbi steril bir gazlı bezle kapatıldı. (D) Bağırsak tüpleri, karın insizyonu ile karın boşluğundan dışarı sıkıştırıldı ve steril gazlı bez üzerine yerleştirilerek açığa çıkarıldı. (E) İnce bağırsağın tamamı nemlendirilmiş steril bir pamuklu çubuğa maruz bırakıldı. (F) Kas tabakası cerrahi dikişle kapatıldı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66465/66465fig1v2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66465/66465fig02v2.jpg"> 
Şekil 2: Sindirim sistemi fonksiyon değerlendirmesi için gastrointestinal geçiş testi. Ameliyattan 22.5 saat sonra, sahte veya POI fareleri FITC-dekstran solüsyonu ile gavaj edildi ve 90 dakika sonra sakrifiye edildi. (A) Sindirim sistemi 15 bölüme ayrıldı ve fizyolojik pozisyona göre numaralandırıldı. (B) Sahte ve POI farelerinin sindirim sistemlerinden her segmentin FITC yoğunluğu. (C) Uygulanan FITC-dekstranın geometrik merkezleri hesaplanmış ve keman grafikleri olarak gösterilmiştir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66465/66465fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66465/66465fig03.jpg"> 
Şekil 3: POI farelerinin ince bağırsağının temsili HE boyanması. Sahte ve POI farelerinden (A) duodenum ve (B) ileumun enine kesitlerinin HE boyanması. Ölçek çubukları: 100 μm veya 25 μm (iç kısmın yakınlaştırılmış görüntüsü). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66465/66465fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66465/66465fig04.jpg"> 
Şekil 4: POI farelerinden ince bağırsak bağışıklık hücrelerinin temsili akış sitometrik analizi. (A) Ameliyattan 24 saat sonra POI farelerinin ince bağırsak dokularından T hücresi popülasyonları için akış sitometrisi geçit stratejisi. (B) CD4 T hücrelerinde, CD8 T hücrelerinde ve sahte ve POI farelerinin ince bağırsağından alınan gd T hücrelerinde T hücresi aktif işaretleyici CD69 + oranları. (C) Sahte ve POI farelerinin ince bağırsaklarındaki CD4 T hücreleri, CD8 T hücreleri ve gd T hücreleri arasındaki CD44 + PD-1 + aktif belirteçlerin oranları. (D) CD45 + Aqua- sahte ve POI farelerinin ince bağırsaklarından alınan canlı bağışıklık hücreleri arasındaki nötrofillerin (Ly6G + CD11b + CD11b + ), dendritik hücrelerin (CD11c + MHC-II +) ve makrofajların (CD11b + F4 / 80+) oranları. Her paneldeki sayı, ilgili hücre türlerinin yüzdesini temsil eder. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66465/66465fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Most patients experience postoperative ileus (POI) after surgery, which is associated with increased morbidity, mortality, and hospitalization time. POI ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Postoperatif ileus (POI) artmış morbidite ve uzamış hastanede kalış yol abdominal cerrahi bir komplikasyonudur. Profilaktik veya terapötik stratejiler yoğunlaştırılmış araştırma yokluğu nedeniyle gereklidir. Bu nedenle İÇN patofizyolojisi araştırmak ve olası tedavi seçenekleri incelemek için bir standart ve uygulanabilir fare modeli kurulmuştur.

Bağırsak Manipülasyon bir Standart Model Analizleri: Kemirgenler Barsak Motilite ve Gut Duvar İnflamasyon İşlevsel Değerlendirilmesi

Bu videoda, bir fare modelinde bağırsak rezeksiyonu için ayrıntılı protokol açıklanmaktadır. Bu teknik, fare bağırsağında ileektominin neden olduğu safra emilim bozukluğu, aşırı birikim ve toksisite hakkında bilgi sağlar.

Murin İleal Rezeksiyon Modeli: Murin Modelinde İleektomi ile İndüklenen Safra Metabolizmasının İncelenmesi

ileokolik rezeksiyon birçok insan hastalığında yaygın olarak uygulanmaktadır; Bununla birlikte, bağırsak rezeksiyonunun cerrahi hastalıklar üzerindeki etkisi hakkında çok az şey bilinmektedir. Bu makale, farelerde prosedürün yüksek başarı ile yürütülmesi hakkında talimat vermekte ve hastalık modellerinde ileokolik rezeksiyonun etkilerini incelemek için bir araç sağlamaktadır.

İlköğretim Anastomoza sahip fare ileokolonik Bağırsak Rezeksiyon

Geri dönüşümsüz tek taraflı üreter tıkanıklığının (UUO) murin modeli, kopmuş üreterin mesaneye anastomozu ile üreter tıkanıklığının giderildiği geri dönüşümlü UUO modeli ile birlikte sunulmuştur. Bu modeller, böbrek iltihabı ve yara izinin yanı sıra doku yeniden şekillenmesinin incelenmesini sağlar.

Geri dönüşümsüz ve Tersinir Tek taraflı Üreterik Obstrüksiyon bir fare modeli

Burada tarlada bu tekniğin standardizasyonu teşvik etmek mortalite olmadan tekrarlanabilir yaralanma ile sonuçlanan farelerde bağırsak iskemi-reperfüzyon ayrıntılı prosedürü açıklar. Bağırsak iskemi-reperfüzyon hasarının Bu model yaralanma ve yenilenme hücresel ve moleküler mekanizmaları incelemek için kullanılabilir.

Bağırsak İskemi-reperfüzyon Hasarı Murin Modeli

İnce bağırsak bağlı safra asidi emiliminden ve hepatik safra asidi sentez inhibisyonu geribildirim sistemik homeostazı ve sağlık için önemli. Bu çalışmada, ileal rezeksiyon ileectomy kaynaklı safra malabsorbsiyonuna, overaccumulation ve toksisite fare bağırsak değerlendirmek için bir fare modeli açıklar.

Fare bağırsak Ileectomy kaynaklı safra Overaccumulation

Bir kısmi veya tam tıkanma Şiddetli karın ağrısı, bulantı, kusma ve dışkı geçiş engelleme neden olabilir bağırsak bağırsak engelleri vardır. Bağırsak kısmi obsructions farelerde oluşturmak için bu yordamı patolojik hücre büyümesi ve ölüm bağırsak temel mekanizmaları eğitim güvenilirdir.

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Fare distal kolostomi insan saptırma kolit, ağırlıklı olarak Lenfositik kolit dışkı akışından hariç iki nokta üst üste segmentinde için bir fare modeli sağlar.

Fare Distal kolostomi, C57BL/6 farelerde saptırma kolit roman modeli

Klinik olarak ilgili kolorektal kanser karaciğer metastazları (CRLM) tümör modeli ve karaciğer iskemi reperfüzyonunun (I/R) tümör büyümesi ve metastazdaki etkisini ayrıntılı olarak açıklıyoruz. Bu model daha iyi karaciğer metastatik büyüme cerrahi kaynaklı promosyon altında yatan mekanizmaları anlamak için yardımcı olabilir.

İskemi Reperfüzyon Hasarı Ayarında Metastatik Karaciğer Tümörlerinin Murine Modeli

Tek anastomoz duodeno-ileal bypass (SADI-S), önemli metabolik etkileri olan yeni ortaya çıkan bir bariatrik prosedürdür. Bu yazıda, farelerde SADI-S'nin güvenilir ve tekrarlanabilir bir modelini sunuyoruz.

Farelerde Sleeve Gastrektomi Modeli ile Tek Anastomoz Duodeno-İleal Bypass

Keşfedin ameliyat sonrası ileus murin modelini, bağırsak manipülasyonu kullanarak patofizyolojiyi ve immün yanıtları incelemek için. Bu yöntem yeni tedavi stratejileri geliştirmeye yardımcı olur.

Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli

Daha fazla video keşfet