7 Haziran 2024
Bu protokol, transmisyon elektron mikroskobu için retinal organoid numuneler için optimize edilmiş ve ayrıntılı bir hazırlık prosedürü sağlar. Olgun retinal organoidlerde sinapsların analizini içeren uygulamalar için uygundur.
Araştırmamız öncelikle matür retinal organoidlerde sinaptik üst yapıyı analiz etmeye odaklanmaktadır. Retinal organoid araştırmaları alanına büyük fayda sağlayabilecek, retinal organoidler için tekrarlanabilir ve basit bir transmisyon elektron mikroskobu veya TEM, numune hazırlama yöntemi geliştirmeyi amaçlıyoruz. Optik mikroskop gibi diğer tekniklerle karşılaştırıldığında, transmisyon elektron mikroskobu, retinal organoidlerdeki integral sinapsın ve hücre altı organellerinin üst yapısını nano ölçekte karakterize etme yeteneği sunar.
Protokolümüz, retinal organoidlerin transmisyon elektron mikroskobu numunesinin hazırlanması için optimize edilmiş koşullar sunarak basit ve kullanıcı dostu istatistikler sunar. Bulgularımız, hem konvansiyonel sinaps hem de şerit sinaps dahil olmak üzere retinal organoidler içindeki sinapsın ultrastrüktür morfolojisini açıkça göstermektedir. Bu, sağlam bir temel oluşturur ve retinal organoidlerin sonraki fonksiyonel araştırmaları için tekrarlanabilir bir yöntem sunar ve ilaç taraması gibi klinik uygulamalarının değerlendirilmesi ile birlikte.
Bu protokol, retina organoid örneklerinin iletim elektron mikroskobu (TEM) için hazırlanması için optimize edilmiş bir prosedürü sağlar. Çalışma, olgun retina organoidlerindeki sinaptik otostrüktürü analiz etmeye odaklanmakta ve nanoölçek seviyesinde ayrıntılı subsellüler analiz sağlayan, kullanıcı dostu bir yöntem sunmaktadır.
High-resolution ultrastructural analysis of retinal organoids enables mechanistic de-risking and target validation in early ophthalmic drug discovery. Transmission electron microscopy (TEM) sample preparation protocols for retinal organoids provide reproducible, quantitative insights into synaptic architecture, supporting predictive confidence in disease-relevant systems. This capability strengthens translational continuity from discovery biology to preclinical model evaluation in retinal research portfolios.
This TEM sample preparation protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling high-confidence morphological analysis of retinal organoids derived from iPSCs.