January 3rd, 2025
Burada, İzolektin B4'ün tek boyamasını kullanarak tüm farelerin akciğer dokusu için pulmoner mikrovasküler yoğunluğun tarafsız bir şekilde ölçülmesini sağlamak için basit ve ekonomik bir protokol açıklıyoruz.
Araştırmamız, izolektin B4 boyama ve ImageJ analizi kullanarak anatomik farklılıkları ve yaşa bağlı değişiklikleri göz önünde bulundurarak çeşitli fare akciğer lobüllerindeki pulmoner mikrovasküler yoğunluğu ölçmeyi amaçlamaktadır. Ele almaya çalıştığımız temel sorular, farklı akciğer lobüllerindeki mikrovasküler yoğunluğun doğru bir şekilde nasıl ölçüleceği ve yaşlanmayla birlikte lobüller arasında mikrovasküler yoğunlukta ne gibi değişiklikler meydana geldiğidir. Gelişmiş doku temizleme ve fiksasyon teknikleri, gelişmiş görüntüleme ve doğru miktar tayini için yazılım araçları dahil olmak üzere pulmoner mikrovasküler araştırmalardaki son gelişmeler.
Bu gelişmeler, yaşlanma ve astım ve COVID-19 gibi ilgili hastalıklardaki mikrovasküler değişiklikler hakkındaki anlayışımızı geliştirerek potansiyel tedaviler için içgörüler sunar. Başlıca zorluklar, lezyonların doğru bir şekilde konumlandırılması, akciğer dokularının uygun şekilde kesitlenmesi, fiksatifle ilişkili doku hasarının azaltılması ve akciğer endotel hücreleri için spesifik belirteçlerin olmamasıdır. Geleneksel yöntemler genellikle farklı akciğer lobları arasındaki şekil ve vaskülarizasyon içindeki varyasyonları gözden kaçırır.
Protokolümüz, akciğer loblarının kesitlerine ayrılması ve boyamadan önce izolektin kullanılarak mikrovasküler yoğunluğun ölçülmesi için kapsamlı bir yaklaşım sağlayarak boşluğu giderir. Gelişmiş mikrovasküler yoğunluk analizi için IB4 boyamanın ücretsiz yazılım ImageJ ile kombinasyonu, doğru ve kullanışlı sonuçlar sağlar. Pulmoner mikrovasküler lezyonların akciğerle ilgili hastalıkların ilerlemesine katıldığı hücresel ve moleküler mekanizmalar ve akciğer onarımını desteklemek ve fonksiyonel iyileşmeyi indüklemek için pulmoner mikrovasküler fonksiyonu kurtarmak için yeni stratejiler veya hedefler geliştirir.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu çalışma, fare akciğer lobülleri içindeki pulmoner mikrovasküler yoğunluğun nicelleştirilmesine odaklanmakta, anatomik farklılıkları ve yaşa bağlı değişiklikleri dikkate almaktadır. Isolectin B4 boyama ile birlikte ImageJ analizi kullanarak araştırma, akciğerlerin farklı loblarında mikrovasküler yoğunluk ölçümlerinin doğruluğunu artırmayı amaçlamaktadır.
Quantitative assessment of pulmonary microvascular density across distinct lung lobules addresses a critical gap in preclinical respiratory research, enabling more accurate modeling of microvascular dysfunction and remodeling. This protocol enhances predictive confidence in disease-relevant systems by accounting for anatomical and age-related heterogeneity, supporting translational continuity from discovery through preclinical validation. The approach is directly relevant for biopharma teams prioritizing mechanistic de-risking and target validation in pulmonary vascular research portfolios.
This protocol integrates into the discovery-to-preclinical continuum by enabling hypothesis-driven quantification of microvascular changes in murine lung lobules.