Name: Lobüller Boyunca Farelerde Pulmoner Mikrovasküler Yoğunluğun Ölçülmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-03T12:40:00.000+00:00
Duration: 10 min
Description: Öğrenin fare akciğer lobüllerinde pulmoner mikrovasküler yoğunluğu isolectin B4 boyama ve ImageJ analizi ile ölçme yöntemini. Bu protokol yaşlanmaya bağlı değişiklikleri ve hastalık araştırmalarını destekler.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Farelerde İzolektin B4 Boyaması ile Pulmoner Mikrovasküler Sistemin Değerlendirilmesi

<ol><li>Jia, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fgf-2+promotes+angiogenesis+through+a+srsf1%2Fsrsf3%2Fsrpk1-dependent+axis+that+controls+vegfr1+splicing+in+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Biol%22%5BJournal%5D)">Fgf-2 promotes angiogenesis through a srsf1/srsf3/srpk1-dependent axis that controls vegfr1 splicing in endothelial cells.</a> BMC Biol. 19 (1), 173(2021).</li>
<li>Schneider, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+aging+lung%3A+Physiology%2C+disease%2C+and+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The aging lung: Physiology, disease, and immunity.</a> Cell. 184 (8), 1990-2019 (2021).</li>
<li>Rafii, S., Butler, J. M., Ding, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiocrine+functions+of+organ-specific+endothelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Angiocrine functions of organ-specific endothelial cells.</a> Nature. 529 (7586), 316-325 (2016).</li>
<li>Lipskaia, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+telomerase+in+p21-positive+cells+counteracts+capillaries+rarefaction+in+aging+mice+lung%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">Induction of telomerase in p21-positive cells counteracts capillaries rarefaction in aging mice lung.</a> bioRxiv. , (2022).</li>
<li>Hoshino, M., Takahashi, M., Aoike, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+of+vascular+endothelial+growth+factor%2C+basic+fibroblast+growth+factor%2C+and+angiogenin+immunoreactivity+in+asthmatic+airways+and+its+relationship+to+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Expression of vascular endothelial growth factor, basic fibroblast growth factor, and angiogenin immunoreactivity in asthmatic airways and its relationship to angiogenesis.</a> J Allergy Clin Immunol. 107 (2), 295-301 (2001).</li>
<li>Ackermann, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+vascular+endothelialitis%2C+thrombosis%2C+and+angiogenesis+in+covid-19%5BTitle%5D)+AND+%22New+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Pulmonary vascular endothelialitis, thrombosis, and angiogenesis in covid-19.</a> New Engl J Med. 383 (2), 120-128 (2020).</li>
<li>Wertheim, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolating+pulmonary+microvascular+endothelial+cells+ex+vivo%3A+Implications+for+pulmonary+arterial+hypertension%2C+and+a+caution+on+the+use+of+commercial+biomaterials%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Isolating pulmonary microvascular endothelial cells ex vivo: Implications for pulmonary arterial hypertension, and a caution on the use of commercial biomaterials.</a> PLoS One. 14 (2), e0211909(2019).</li>
<li>Thomas, S. M., Bednarek, J., Janssen, W. J., Hume, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Air-inflation+of+murine+lungs+with+vascular+perfusion-fixation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Air-inflation of murine lungs with vascular perfusion-fixation.</a> J Vis Exp. (168), e62215(2021).</li>
<li>Ramasamy, S. K., Kusumbe, A. P., Adams, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+tissue+morphogenesis+by+endothelial+cell-derived+signals%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Regulation of tissue morphogenesis by endothelial cell-derived signals.</a> Trends Cell Biol. 25 (3), 148-157 (2015).</li>
<li>Amersfoort, J., Eelen, G., Carmeliet, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulation+by+endothelial+cells+-+partnering+up+with+the+immune+system%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">Immunomodulation by endothelial cells - partnering up with the immune system.</a> Nat Rev Immunol. 22 (9), 576-588 (2022).</li>
<li>Niethamer, T. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+role+of+pulmonary+endothelial+cell+heterogeneity+in+the+response+to+acute+lung+injury%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Defining the role of pulmonary endothelial cell heterogeneity in the response to acute lung injury.</a> eLife. 9, e53072(2020).</li>
<li>Corliss, B. A., Mathews, C., Doty, R., Rohde, G., Peirce, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+to+label%2C+image%2C+and+analyze+the+complex+structural+architectures+of+microvascular+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Methods to label, image, and analyze the complex structural architectures of microvascular networks.</a> Microcirculation. 26 (5), e12520(2019).</li>
<li>Phillips, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+evaluating+the+murine+pulmonary+vasculature+using+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">A method for evaluating the murine pulmonary vasculature using micro-computed tomography.</a> J Surg Res. 207, 115-122 (2017).</li>
<li>Chadwick, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vessel+network+extraction+and+analysis+of+mouse+pulmonary+vasculature+via+x-ray+micro-computed+tomographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Comput+Biol%22%5BJournal%5D)">Vessel network extraction and analysis of mouse pulmonary vasculature via x-ray micro-computed tomographic imaging.</a> PLoS Comput Biol. 17 (4), e1008930(2021).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>% 4 Paraformaldehit</td><td>Biosharp</td><td>BL539A</td><td>Doku Sabitleyici</td></tr><tr><td>4 ', 6-diamidino-2-fenilindol</td><td>MCE</td><td>HY-D0814</td><td>Nükleik Boyalar</td></tr><tr><td>Alexa-647 Flor Konjuge İzolektin B4</td><td>Termo</td><td>I32450</td><td>Bağlayıcı Mikro Damarlar</td></tr><tr><td>Anti-floresan Tablet Mühürleyen</td><td>Abcam</td><td>AB104135</td><td>Numune Fiksasyonu</td></tr><tr><td>Antijen Onarım Sıvısı</td><td>Biosharp</td><td>BL151A</td><td>Antijenik Bölgelerin Onarımı</td></tr><tr><td>Biyopsi Kaseti</td><td>ActivFlo</td><td>39LC-500-1</td><td>Doku Örneklerinin Sabitlenmesi ve Konumlandırılması</td></tr><tr><td>Sığır Serumu Albümin</td><td>Sigma</td><td>B2064-50G</td><td>Sızdırmazlık Solüsyonu</td></tr><tr><td>Soğuk Plaka</td><td>Leica</td><td>HistoCore Arcadia H&nbsp;</td><td>Dondurma Örnekleri</td></tr><tr><td>Sabit Sıcaklık Elektrikli Kurutma Fırını</td><td>Taisite</td><td>101-0AB</td><td>Yüksek Sıcaklık</td></tr><tr><td>Onarım Tek Kullanımlık Mikrotom Bıçağı</td><td>Leica</td><td>14035838383</td><td>Bölümleri Hazırlamak İçin Doku Örneklerini</td></tr><tr><td>Kesme Kalıpları</td><td>Shitai</td><td>26155166627</td><td>Sabitleme Doku Örnekleri</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Kelong</td><td>CAS 64-17-5</td><td>Doku Dehidrasyon</td></tr><tr><td>Çözeltisi Isıtmalı Parafin Gömme İstasyonu</td><td>Leica</td><td>EG1150</td> Parafin HistoCore Su <td>Banyosunda Tssue Örneklerinin Gömülmesi</td></tr><tr><td></td><td>Leica</td><td>HI1220</td><td>Doku Örneklerini Düzleştirin ve Sabitleyin</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji)&nbsp;</td><td>NIH</td><td>1.54f</td><td>Kantitatif Araç</td></tr><tr><td>İmmünohistokimya Kalemleri</td><td>Biosharp</td><td>BC004</td><td>Su Bloke Edici Ajan</td></tr><tr><td>Tıbbi Forseps</td><td>Şangay Tıbbi Ekipman</td><td>N/A</td><td>Doku örneklerini kavrama, manipüle etme veya taşıma</td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Nikon</td><td>Ts2</td><td>Görüntüleme Cihazı</td></tr><tr><td>Montaj Ortamı</td><td>Jiangyuan</td><td>Tatsız</td><td>Sabitleme ve Koruma Doku Bölümleri</td></tr><tr><td>Parafin Balmumu</td><td>SCHLEDEN</td><td>80200-0014</td><td>Doku Yapısının Sabitlenmesi</td></tr><tr><td>PBS</td><td>Beyotime</td><td>C0221A</td><td>Yıkama Tamponu</td></tr><tr><td>Pentobarbital Sodyum Pekin</td><td>Kimyasal Reaktif Şirketi</td><td>Q / H82-F158-2002</td><td>Anestezik</td></tr><tr><td>Döner Mikrotom</td><td>Biyobaz</td><td>Bk-2258</td><td>Dilimlerin Hazırlanması</td></tr><tr><td>Steril Makas</td><td>Şangay Tıbbi </td><td>Ekipman N/A</td><td>segmentleme Doku Örnekleri</td></tr><tr><td>Cerrahi Neşter Şangay</td><td>Tıbbi Ekipman</td><td>N/A</td><td>Kesme Doku Örnekleri</td></tr><tr><td>Triton&nbsp;</td><td>Solarbio</td><td>T8200</td><td>Geçirgenleştirme Solüsyonu</td></tr><tr><td>Yıkamasız Slayt</td><td>PLATINUM PRO</td><td>PRO-04</td><td>Ksilen Boyama için Sabitleme Örnekleri</td></tr><tr><td></td><td>SUM</td><td>XK13-011-00031</td><td>Doku Mum Giderme Solüsyonu</td></tr></tbody></table>

lobüller boyunca farelerde pulmoner mikrovasküler yoğunluğun Ölçülmesi

Quantifying Pulmonary Microvascular Density in Mice Across Lobules

Ana bronşlardaki lezyonları ve küçük hava yolu dallarını ayırt etmek için, bu iki tip hava yolundaki lezyonların sürekli yapısının gözlendiğinden emin olmak çok önemlidir. Bu, Şekil 1'de özetlenen kesme ve gömme prosedürlerini izleyerek elde edilebilir. Farelerde çeşitli yönlere yönlendirilmiş ve ağ benzeri bir yapıya sahip çok sayıda akciğer lobu göz önüne alındığında, diğer katı dokulara kıyasla çökmeye daha yatkındırlar. Hedef bölgedeki lezyonların net ve sezgisel bir şekilde gözlemlenmes...

Lobüller Boyunca Farelerde Pulmoner Mikrovasküler Yoğunluğun Ölçülmesi

The abnormal alternation of pulmonary angiogenesis is related to lung microvascular dysfunction and is deeply linked to vascular wall integrity, blood ...

quantifying-pulmonary-microvascular-density-in-mice-across-lobules

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Aynı anda sağ kalp fonksiyonu, akciğer iltihabı ve bağışıklık yanıtı araştırmak için bir özel ve hızlı bir protokol bir öğrenme aracı olarak tanımlanmaktadır. Video ve rakamlar büyük ölçekli çalışmalara küçük kullanılmak üzere uyarlanabilir bir organize ekip yaklaşımı, fizyoloji ve mikrodiseksiyon teknikleri anlatıyoruz.

Akciğer ve Fareler immün Doku Örneklerinde Hasat ile kombinasyon Sağ Ventrikül Sistolik Basınç Ölçümleri

Endotelyal endotel / glycocalyx yüzey tabakası ideal intravital mikroskobu kullanılarak incelenmiştir. Intravital mikroskop teknik gibi akciğer gibi hareketli bir organ zordur. Biz eş zamanlı aydınlık ve floresan mikroskop serbestçe-hareket eden endotel yüzey tabakasının kalınlığını belirlemede nasıl kullanılabileceğini...

Fare Pulmoner Endotelyal Yüzey Katman in vivo ölçümü olarak

Hipoksik pulmoner vazokonstriksiyon (HPV), alveolar hipoksi akciğer perfüzyonunun ventilasyonla eşleştiği önemli bir fizyolojik olgudur. HPV'ye katkıda bulunan başlıca vasküler segment, intra-acinar arterdir. Burada, 20-100 μm çapındaki murine pulmoner damarların HPV analizi için protokolümüzü açıklıyoruz.

Murine Hassas Kesim Akciğer Dilimleri Kullanılarak Pulmoner Arterlerin Hipoksik Pulmoner Vazokonstriksiyonunun Videomorfometrik Analizi

İzole edilmiş perfüze akciğer kan hazırlama akciğer yüzeyindeki mikro damar ağları görselleştirmek için bu mümkün kılar. Burada, gerçek zamanlı flüoresan görüntüleme kullanılarak izole edilmiş akciğerlerde bir mikro damarların geçirgenliğini ölçmek için bir yaklaşımı tarif eder.

İzole Kan-perfüze Sıçan Akciğer Hazırlık Tek Mikrodamar Geçirgenliği miktarının

Farelerde akciğer yayılma kapasitesini hızlı ve basit bir şekilde ölçmenin bir yolunu tarif ediyoruz ve bunun birden fazla yaygın akciğer patolojisindeki fenotip değişikliklerine yeterince duyarlı olduğunu gösteriyoruz.  Bu nedenle bu metrik, fare modellerine doğrudan öteleme ilgisi getirir, çünkü yayılma kapasitesi insanlarda da kolayca ölçülür.

Fenotiplendirme Fare Solunum Fonksiyon İn Vivo Akciğer Yayıcı Kapasite

Burada, farelerde akciğer basınç-hacim eğrisini basit ve güvenilir bir şekilde ölçmek için bir protokol sunuyoruz ve bu, iki yaygın akciğer patolojisi olan pulmoner fibroz ve amfizemde fenotipik parankimal değişiklikleri tespit etmek için yeterince duyarlı olduğunu gösteriyor. Bu metrik, gelişen patoloji ile akciğerin yapısal değişikliklerini ölçmek için bir araç sağlar.

Fare Akciğerler Basınç-hacim Eğrisi Ölçümü

Akciğer hastalıklarında ve yaralanmaya bağlı alveol rejenerasyonunda akciğer morfolojisi ve fizyolojisini değerlendirmek için iç akciğer yüzey alanı (ISA) kritik bir kriterdir. Burada hem akciğer pnömonektomisinde hem de protez implantasyon fare modellerinde ISA için önyargı önlemeyi en aza indirecek standart bir yöntem açıklanmaktadır.

Fare Pnömonektomi ve Protez İmplantasyonu ile İç Akciğer Yüzey Alanının Ölçümü için Standart Bir Yöntem

Farelerde deneysel ajanlar intratracheal (It) yönetimi genellikle distal akciğerlere asimetrik teslim sonuçlanır.  Bu raporda, her akciğeri operatif olmayan canlı fareler içinde cannulate için doğrudan intrabronchial (ıB) yaklaşımı açıklanmaktadır.  Bu yaklaşım, bir akciğer için seçici olarak ajanlar yönetmek için kullanılabilir ya da her iki akciğerde simetrik Ajan teslim geliştirmek için adapte olabilir.

Fare akciğer Içinde seçici Ajan biriktirme geliştirmek için doğrudan Intrabronchial yönetim

Fare karaciğerinde safra kanalı yoğunluğunun doğru ölçülmesini yapmak için oldukça basit ve hassas bir yöntem sunuyoruz. Bu yöntem, genetik ve çevresel değiştiricilerin etkilerini ve biliyer hastalıklarının fare modellerinde potansiyel tedavilerin etkinliğini belirlemede yardımcı olabilir.

Fare karaciğerinde safra kanalı yoğunluğu belirlenmesi

Bu tekniğin amacı, erken postnatal ve erişkin farelerin pulmoner arter ağlarının akciğer şişmesi yoluyla ex vivo görselleştirilmesi ve pulmoner arter yoluyla radyoopak polimer bazlı bileşiğin enjeksiyonudur. Döküm dokular için potansiyel uygulamalar da tartışılmıştır.

Mikro-BT Görüntüleme için Erişkin ve Erken Postnatal Fare Akciğerlerinin Vasküler Döküm

Öğrenin fare akciğer lobüllerinde pulmoner mikrovasküler yoğunluğu isolectin B4 boyama ve ImageJ analizi ile ölçme yöntemini. Bu protokol yaşlanmaya bağlı değişiklikleri ve hastalık araştırmalarını destekler.

Lobüller Boyunca Farelerde Pulmoner Mikrovasküler Yoğunluğun Ölçülmesi

Daha fazla video keşfet