Name: Alt Dipteran Sineği Bradysia (Sciara) coprophilanın Laboratuvar Bakımı: Yeni/Eski Ortaya Çıkan Bir Model Organizma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-04-19T14:50:00.000+00:00
Duration: 4 min 26 s
Description: Öğrenin Bradysia coprophila laboratuvar bakım protokollerini; genetik ve gelişim biyolojisi araştırmaları için bu model organizmanın üreme, beslenme ve bakım yöntemlerini keşfedin.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Önceki B. coprophila stok sahiplerine (Jacob E. Bliss, Paula Bonazinga, Anne W. Kerrebrock, Ingrid M. Mercer, Heidi S. Smith) ve araştırma personeline (özellikle Robert Baird, Michael S. Foulk, Donna Kubai, John M. Urban, Yutaka Yamamoto) hayvancılık protokollerinde ince ayar yaptıkları için özel teşekkürler. B. coprophila'nın bakımı ile ilgili ilk talimatlar Helen V. Crouse, Natalia Gabrusewycz-Garcia, Reba M. Goodman, Charles W. Metz ve Ellen Rasch tarafından sağlandı. Bradysia (Sciara) stok merkezini üstlendikleri için Yukiko Yamashita ve Anne W. Kerrebrock'a minnettarız. Figürlerin hazırlanmasına yardımcı oldukları için aşağıdaki kişilere çok teşekkür ederiz: Brian Wiegmann (Şekil 1), John M. Urban (Şekil 4 üst panel), Laura Ross (Şekil 4 alt panel), Yutaka Yamamoto (Şekil 5 sol panel), Leo Kadota (Şekil 7 ve Şekil 8). Ava Filiss ve Brown Üniversitesi Multidisipliner Laboratuvarı'na fotoğrafçılık ve film çekimi konusundaki yardımları için çok teşekkürler. Bu el yazması hakkındaki yorumları için Robert Baird'e teşekkürler. B. coprophila ile ilgili araştırma ve bakımımız, NIH GM121455'dan S.A.G.'ye en son destek de dahil olmak üzere NIH ve NSF tarafından desteklenmiştir. B. coprophila hakkında daha fazla ayrıntı, şu anda inşa edilmekte olan Bradysia (Sciara) Stok Merkezi web sitelerinde (https://sites.brown.edu/sciara/ ve https://sciara.wi.mit.edu) mevcuttur.

Bradysia coprophila Lab Protocols and Chromosomal Research

<ol><li>Lewin, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Earth+BioGenome+project%3A+Sequencing+life+for+the+future+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Earth BioGenome project: Sequencing life for the future of life.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 115 (17), 4325-4333 (2018).</li>
<li>Wiegmann, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Episodic+radiations+in+the+fly+tree+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Episodic radiations in the fly tree of life.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 108 (14), 5690-5695 (2011).</li>
<li>Yeates, D. K., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogeny+of+Diptera%5BTitle%5D)+AND+%22Manual+of+Afrotropical+Diptera.Suricata%22%5BJournal%5D)">Phylogeny of Diptera.</a> Manual of Afrotropical Diptera.Suricata. 3, 149-161 (2017).</li>
<li>Vilkamaa, P., Burdíková, N., Ševčík, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genus+Spinopygina+gen.+nov.+%28Diptera%2C+Sciaridae%29+from+Western+North+America%3A+Preliminary+molecular+phylogeny+and+description+of+seven+new+species%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">The genus Spinopygina gen. nov. (Diptera, Sciaridae) from Western North America: Preliminary molecular phylogeny and description of seven new species.</a> Insects. 14 (2), 173(2023).</li>
<li>Metz, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromosome+behavior%2C+inheritance+and+sex+determination+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">Chromosome behavior, inheritance and sex determination in Sciara.</a> Amer Naturalist. 72 (743), 485-520 (1938).</li>
<li>Gerbi, S. A. Unusual chromosome movements in Sciarid flies. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGerbi%2C+SA+%22Results+and+Problems+in+Cell+Differentiation.+Vol+13+Germ+Line+-+Soma+Differentiation%22">Results and Problems in Cell Differentiation. Vol 13 Germ Line - Soma Differentiation</a>. Hennig, N. 13, Springer-Verlag. Berlin, Heidelberg. 71-104 (1986).</li>
<li>Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-random+chromosome+segregation+and+chromosome+eliminations+in+the+fly+Bradysia+%28Sciara%29%5BTitle%5D)+AND+%2234%3BNon-Mendelian+Inheritance+and+Meiotic+Drive.%26%2334%3B%2C+Chromosome+Research.%28special+issue%29%22%5BJournal%5D)">Non-random chromosome segregation and chromosome eliminations in the fly Bradysia (Sciara).</a> 34;Non-Mendelian Inheritance and Meiotic Drive.&#34;, Chromosome Research.(special issue). Larracuente, A., Hanlon, S. 30, 273-288 (2022).</li>
<li>Steffan, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+generic+revision+of+the+family+Sciaridae+%28Diptera%29+of+America+North+of+Mexico%5BTitle%5D)+AND+%22University+of+California+Publications+in+Entomology%22%5BJournal%5D)">A generic revision of the family Sciaridae (Diptera) of America North of Mexico.</a> University of California Publications in Entomology. 44, 1-77 (1966).</li>
<li>Shin, S., Jung, S., Menzel, F., Heller, K., Lee, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaroidea%3A+Sciaridae%29+and+the+evolution+of+larval+habitats%5BTitle%5D)+AND+%22Molec+Phylogenetics+Evolution%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of black fungus gnats (Diptera: Sciaroidea: Sciaridae) and the evolution of larval habitats.</a> Molec Phylogenetics Evolution. 66 (3), 833-846 (2013).</li>
<li>Mohrig, W., Heller, K., Hippa, H., Vilkamaa, P., Menzel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Revision+of+the+black+fungus+gnats+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Studia+Dipterologica%22%5BJournal%5D)">Revision of the black fungus gnats (Diptera: Sciaridae) of North America.</a> Studia Dipterologica. 19 (1-2), 141-286 (2013).</li>
<li>Ševčík, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+phylogeny+of+the+megadiverse+insect+infraorder+Bibionomorpha+sensu+lato+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22PeerJ%22%5BJournal%5D)">Molecular phylogeny of the megadiverse insect infraorder Bibionomorpha sensu lato (Diptera).</a> PeerJ. 4, e2563(2016).</li>
<li>Menzel, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pseudolycoriella+hygida+%28Sauaia+and+Alves%29-An+overview+of+a+model+organism+in+genetics%2C+with+new+aspects+in+morphology+and+systematics%5BTitle%5D)+AND+%22Insects%22%5BJournal%5D)">Pseudolycoriella hygida (Sauaia and Alves)-An overview of a model organism in genetics, with new aspects in morphology and systematics.</a> Insects. 15 (2), 118(2024).</li>
<li>Meigen, J. W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMeigen%2C+JW+%22Klassifikazion+und+Beschreibung+der+europ%C3%A4ischen+zweifl%C3%BCgligen+Insekten+%28Diptera+Linn%29%22">Klassifikazion und Beschreibung der europäischen zweiflügligen Insekten (Diptera Linn)</a>. 1 (1), Karl Reichard. Braunschweig. (1804).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+fungus+gnats+of+North+America+part+I%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">The fungus gnats of North America part I.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 172, 209-276 (1909).</li>
<li>Johannsen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycetophilidae+of+North+America%5BTitle%5D)+AND+%22Maine+Agricultural+Experimental+Station+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Mycetophilidae of North America.</a> Maine Agricultural Experimental Station Bulletin. 200, 57-146 (1912).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradysia+%28Sciara%29+coprophila+larvae+up-regulate+DNA+repair+pathways+and+down-regulate+developmental+regulators+in+response+to+ionizing+radiation%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Bradysia (Sciara) coprophila larvae up-regulate DNA repair pathways and down-regulate developmental regulators in response to ionizing radiation.</a> Genetics. (3), (2024).</li>
<li>Hodson, C. N., Jaron, K. S., Gerbi, S., Ross, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene-rich+germline-restricted+chromosomes+in+black-winged+fungus+gnats+evolved+through+hybridization%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Gene-rich germline-restricted chromosomes in black-winged fungus gnats evolved through hybridization.</a> PLoS Biology. 20 (2), e3001559(2021).</li>
<li>Urban, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+contiguity+de+novo+genome+assembly+and+DNA+modification+analyses+for+the+fungus+fly%2C+Sciara+coprophila%2C+using+single-molecule+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">High contiguity de novo genome assembly and DNA modification analyses for the fungus fly, Sciara coprophila, using single-molecule sequencing.</a> BMC Genomics. 22, 643(2021).</li>
<li>Baird, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+evolution+of+a+maternally+acting+sex-determining+supergene+in+a+fly+with+single-sex+broods%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Evol%22%5BJournal%5D)">Recent evolution of a maternally acting sex-determining supergene in a fly with single-sex broods.</a> Mol Biol Evol. 40 (7), (2023).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Making+ends+meet%3A+targeted+integration+of+DNA+fragments+by+genome+editing%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Making ends meet: targeted integration of DNA fragments by genome editing.</a> Chromosoma. 127 (4), 405-420 (2018).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+transformation+for+genome+editing+of+an+emerging+model+organism%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Development of transformation for genome editing of an emerging model organism.</a> Genes. 13 (7), 1108-1124 (2022).</li>
<li>Metz, C. W., Smith, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Further+observation+on+the+nature+of+the+x-prime+%28X%27%29+chromosome+in+Sciara%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Further observation on the nature of the x-prime (X') chromosome in Sciara.</a> Proc Nat Acad Sci USA. 17 (4), 195-198 (1931).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X-ray+induced+sex-linked+recessive+lethals+and+visibles+in+Sciara+coprophila%5BTitle%5D)+AND+%22Amer+Naturalist%22%5BJournal%5D)">X-ray induced sex-linked recessive lethals and visibles in Sciara coprophila.</a> Amer Naturalist. 95 (880), 21-26 (1961).</li>
<li>Metz, C. W., Ullian, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+identification+of+the+sex+chromosomes+in+Sciara+%28Diptera%29%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Nat+Acad+Sci+USA%22%5BJournal%5D)">Genetic identification of the sex chromosomes in Sciara (Diptera).</a> Proc Nat Acad Sci USA. 15 (2), 82-85 (1929).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+I.+Centromere+localization%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). I. Centromere localization.</a> Chromosoma. 63, 39-55 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V., Gerbi, S. A., Liang, C. M., Magnus, L., Mercer, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+ribosomal+DNA+within+the+proximal+X+heterochromatin+of+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Localization of ribosomal DNA within the proximal X heterochromatin of Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae).</a> Chromosoma. 64 (4), 305-318 (1977).</li>
<li>Crouse, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((X+heterochromatin+subdivision+and+cytogenetic+analysis+in+Sciara+coprophila+%28Diptera%2C+Sciaridae%29.+II.+The+controlling+element%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">X heterochromatin subdivision and cytogenetic analysis in Sciara coprophila (Diptera, Sciaridae). II. The controlling element.</a> Chromosoma. 74, 219-239 (1979).</li>
<li>Mok, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintenance+of+the+DNA+puff+expanded+state+is+independent+of+active+replication+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Maintenance of the DNA puff expanded state is independent of active replication and transcription.</a> Chromosoma. 110 (3), 186-196 (2001).</li>
<li>Smith-Stocking, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+studies+on+selective+segregation+of+chromosomes+in+Sciara+coprophila+Lintner%5BTitle%5D)+AND+%22Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic studies on selective segregation of chromosomes in Sciara coprophila Lintner.</a> Genetics. 21 (4), 421-443 (1936).</li>
<li>Gabrusewycz-Garcia, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytological+and+autoradiographic+studies+in+Sciara+coprophila+salivary+gland+chromosomes%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Cytological and autoradiographic studies in Sciara coprophila salivary gland chromosomes.</a> Chromosoma. 15, 312-344 (1964).</li>
<li>Wu, N., Liang, C., DiBartolomeis, S. M., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+progression+of+DNA+puffs+in+Sciara+coprophila%3A+amplification+and+transcription%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Developmental progression of DNA puffs in Sciara coprophila: amplification and transcription.</a> Dev Biol. 160 (1), 73-84 (1993).</li>
<li>Yamamoto, Y., Gustafson, E. A., Foulk, M. S., Smith, H. S., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+and+evolution+of+a+DNA+replication+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Chromosoma%22%5BJournal%5D)">Anatomy and evolution of a DNA replication origin.</a> Chromosoma. 130 (2-3), 199-214 (2021).</li>
<li>Misof, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenomics+resolves+the+timing+and+pattern+of+insect+evolution%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Phylogenomics resolves the timing and pattern of insect evolution.</a> Science. 346 (6210), 763-767 (2014).</li>
<li>Bertone, M. A., Courtney, G. W., Wiegmann, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phylogenetics+and+temporal+diversification+of+the+earliest+true+flies+%28Insecta%3A+Diptera%29+based+on+multiple+nuclear+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Syst+Entomol%22%5BJournal%5D)">Phylogenetics and temporal diversification of the earliest true flies (Insecta: Diptera) based on multiple nuclear genes.</a> Syst Entomol. 33, 668-687 (2008).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Sullivan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incomplete+sister+chromatid+separation+is+the+mechanism+of+programmed+chromosome+elimination+during+early+Sciara+coprophila+embryogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Incomplete sister chromatid separation is the mechanism of programmed chromosome elimination during early Sciara coprophila embryogenesis.</a> Development. 122 (12), 3775-3784 (1996).</li>
<li>de Saint Phalle, B., Oldenbourg, R., Kubai, D., Salmon, E. D., Gerbi, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paternal+chromosome+elimination+and+X+non-disjunction+on+asymmetric+spindles+in+Sciara+male+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22BioRxiv%22%5BJournal%5D)">Paternal chromosome elimination and X non-disjunction on asymmetric spindles in Sciara male meiosis.</a> BioRxiv. , (2021).</li>
<li>Bath, J. D., Sponsler, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+alternative+method+for+the+culture+of+Sciara+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">An alternative method for the culture of Sciara larvae.</a> Science. 109 (2828), 255(1949).</li>
<li>Forer, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crane+fly+spermatocytes+and+spermatids%3A+A+system+for+studying+cytoskeletal+components%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Crane fly spermatocytes and spermatids: A system for studying cytoskeletal components.</a> Methods Cell Biol. 25, Pt B 227-252 (1982).</li>
<li>Gillespie, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+rearing+method+for+fungus+gnats+Corynoptera+sp.+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+with+notes+on+life+history%5BTitle%5D)+AND+%22J+Entomol+Soc+Br+Colum%22%5BJournal%5D)">A simple rearing method for fungus gnats Corynoptera sp. (Diptera: Sciaridae) with notes on life history.</a> J Entomol Soc Br Colum. 83, 45-48 (1986).</li>
<li>Gardiner, R. B., Jarvis, W. R., Shipp, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ingestion+of+Pythium+spp.+by+larvae+of+the+fungus+gnat+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Appl+Biol%22%5BJournal%5D)">Ingestion of Pythium spp. by larvae of the fungus gnat Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae).</a> Ann Appl Biol. 116, 205-212 (1990).</li>
<li>Hungerford, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sciara+maggots+injurious+to+potted+plants%5BTitle%5D)+AND+%22J+Econ+Entomol%22%5BJournal%5D)">Sciara maggots injurious to potted plants.</a> J Econ Entomol. 9 (6), 538-549 (1916).</li>
<li>Thomas, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+rearing+mushroom+insects+and+mites%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+News%22%5BJournal%5D)">A method for rearing mushroom insects and mites.</a> Entomol News. 40, 222-225 (1929).</li>
<li>Austin, M. D., Pitcher, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+laboratory+method+for+rearing+Sciara+and+phorid+flies%5BTitle%5D)+AND+%22Entomol+Mon+Mag%22%5BJournal%5D)">A laboratory method for rearing Sciara and phorid flies.</a> Entomol Mon Mag. 72, No. 860 12-15 (1936).</li>
<li>Butt, F. H. Culture of Sciara. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aButt%2C+FH+%22Culture+methods+for+invertebrate+animals%22">Culture methods for invertebrate animals</a>. Galtsoff, P. S., Lutz, F. E., Welch, P. S., Needham, J. G. , Comstock Publ. Co. Ithaca. 400-401 (1937).</li>
<li>Hudson, E. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+greenhouse+sciarid+fly+populations+using+Tetradonema+plicans+%28Nematoda%3A+Mermithoidea%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invert+Pathol%22%5BJournal%5D)">Regulation of greenhouse sciarid fly populations using Tetradonema plicans (Nematoda: Mermithoidea).</a> J Invert Pathol. 23 (1), 85-91 (1974).</li>
<li>Wilkinson, J. D., Daughterty, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+development+of+Bradysia+impatiens+%28Diptera%3A+Sciaridae%29+under+constant+and+variable+temperatures%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Entomol+Soc+Am%22%5BJournal%5D)">Comparative development of Bradysia impatiens (Diptera: Sciaridae) under constant and variable temperatures.</a> Ann Entomol Soc Am. 63 (4), 1079-1083 (1970).</li>
</ol>

Yazarın beyan edeceği herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

B. coprophila'nın yetiştirilmesi için burada sunulan protokoller, bu organizmayı benzersiz biyolojik özelliklerini araştırmak için deneyler için laboratuvarlarında yetiştirmek isteyen bilim adamları için faydalı olacaktır. B. coprophila29'u korumak için bir agar tabanına serpilen maya ve mantar tozu kullanılarak yapılan besleme yönteminin ilk açıklaması, Metz laboratuvarında 14 farklı Sciarid sineğitürünü 5 yetiştirmek için kullanıldı. Daha sonra, ısırgan otu ve/veya ıspanak tozu ilavesinin B. coprophila'nın canlılığını daha da arttırdığı gözlenmiştir (Gabrusewycz-Garcia, kişisel iletişim). Bu yöntemler, şu anda kültürde olan Bradysia impatiens ve Lycoriella ingenua dahil olmak üzere Sciaridae familyasındaki ilgili türlerin bakımı için başarılı olmuştur (Robert Baird, kişisel iletişim).
B . coprophila'yı yetiştirmek için diğer yöntemler (aşağıda açıklanan alternatif besleme yöntemleri gibi) denenmiştir, ancak burada açıklanan protokoller, en verimli yağ yetişkinlerini elde etmek ve küf büyümesini en aza indirmek için agarın yüzey alanı başına en uygun larva oranına sahip olacak şekilde optimize edilmiştir. Ölçeği büyütmek için, yukarıdaki protokol 2'de açıklandığı gibi cam şişelerde toplu çiftleşme yapılabilir. Alternatif olarak, birkaç (2-4) yetişkin dişi, Drosophila'yı yetiştirmek için kullanılana benzer bir şişeye iki kat daha fazla yetişkin erkekle birlikte yerleştirilebilir (tek kullanımlık 6 oz. = 177.4 mL kare tabanlı Drosophila polipropilen şişe). Her iki durumda da, araştırmacı, şişenin yalnızca tüm kadın üretici veya tüm erkek üretici anneleri içerdiğinden tamamen emin olmalıdır.
Pupa ve yetişkinler yemek yemediği için sadece larvaları besleyin. Larvalar pupaya dönüşmüşse şişeyi beslemeyin (bunun bir işareti, erken ortaya çıkan ilk yetişkin sineklerin ortaya çıkmasıdır). Yetişkinler kapandıktan sonra, şişeleri varsa daha soğuk bir inkübatöre (örneğin, 16 ° C) koyun, çünkü bu yetişkinlerin daha uzun yaşamasını sağlayacaktır. Haftada üç kez (örneğin, Pazartesi, Çarşamba, Cuma) besleyin, larvalar yaşlandıkça flakon başına verilen yiyecek miktarını artırın. Cömertçe besleyin ve yağlı verimli yetişkinlerle ödüllendirileceksiniz. Bununla birlikte, çok fazla beslerseniz, beyaz küf ortaya çıkar ve bu, bir şişeye bıraktığınız yiyecek miktarını azaltmanın bir işaretidir. Ayrıca, çok fazla beslerseniz, agarın üstünde kalın bir yiyecek pedi gelişecek ve yetişkinlerin ortaya çıkmasını zorlaştıracaktır (pedi bir forseps ile çıkarabilirsiniz, ancak larvaları ped ile çıkarmamaya dikkat edin - bunu hiç yapmak zorunda kalmamak en iyisidir). Az sayıda larva içeren şişeler ("az" olarak işaretlenmiş) daha az yiyeceğe ihtiyaç duyar. Çok az beslerseniz, larvalar yiyecek aramak için şişenin duvarlarına tırmanır. Yetersiz beslenen larvalar, daha az verimli olan küçük yetişkinlere neden olur.
Alternatif besleme yöntemleri Larvaları haftada 3 kez yerine larva döneminde sadece bir kez beslemek için çeşitli yöntemler denenmiştir. B. coprophila , Drosophila tarzı yiyeceklerde büyümez. John Urban (kişisel iletişim) B. coprophila yemeğini agar ile karıştırmayı denedi, ancak çok fazla küf büyüdü. İki küf inhibitörünün (tegosept ve propiyonik asit) kombinasyon halinde ve ayrı ayrı eklenmesinin, birkaç farklı konsantrasyonun denenmesinin, küfü inhibe eden seviyelerde B. coprophila için toksik olduğunu buldu. Agar, B. coprophila'nın asidik bir pH'da (propianik asitte olduğu gibi) hastalandığı için pH 6-7 (nötr) olmalıdır. Alternatif olarak, haftada üç kez beslenmeyi önlemek için, çiftleşmeden bir hafta sonra (yani, larvaların çıkmaya başlayacağı zaman) her şişede agarın üzerine bir parça olarak kalın bir maya macunu (nemlendirmek için biraz damıtılmış su ile karıştırılmış Kırmızı Yıldız aktif kuru maya) dağıtmak için iğnesiz bir spatula veya şırınga kullanmayı denedi.
Haftada üç kez beslenmeyi önlemenin bir başka yolu, her şişeye canlı bir mantar kültürü eklemektir. Bath ve Sponsler37 , Sabouraud besiyeri ile eğimli bir agar yüzeyinin, Chaetoconidia (en iyi) veya Baplosporangia veya Xllescheria cinslerinin bir mantar kültürü ile çizilmesi gerektiğini bildirdi. Mantar, B. coprophila'nın tanıtılmasından birkaç gün ila bir hafta önce büyütüldü. Bundan sonra beslenmeye gerek yoktu. Bu yöntemin bir çeşidi Ellen Rasch (kişisel iletişim) tarafından da kullanılmıştır. Elimizde bu yöntemle şişeler çok ıslaktı ve larvalar boğuldu, ancak canlı mantarlı şişelere göre larva sayısını optimize etmek için tekrar denenebilirdi.
Arthur Forer (kişisel iletişim), B. coprophila'yı turna sinekleriyle aynı şekilde yetiştirmede bazı başarılar elde etmiştir38. Bu yaklaşımla, pupalar nemli kartonpiyer üzerinde yetiştirildi. Daha sonra yetişkinler çiftleştirildi ve yumurtalar taze nemli kartonpiyer üzerine bırakıldı. Elde edilen larvalar petri kaplarında kartonpiyer üzerinde tutuldu ve haftada iki kez toz ısırgan otu yaprakları ile beslendi. Pupalar, döngüyü tekrarlamak için bir kafese konuldu.
Yukiko Yamashita (kişisel iletişim), B. coprophila'yı toprakta yetiştirmeyi başardı ve doğada bulundukları saksı bitkilerinde ve yüksek nemli seralarda bulundukları koşulları taklit etti. Bununla birlikte, nem seviyesi yükseldiğinde küf bir sorun haline gelebilir. Bununla birlikte, nemli toprak, nemli topraklı plastik kutularda Pseudolycoriella (daha önce Bradysia) hygida larvalarını yetiştirmek için başarıyla kullanılmıştır; ayrışmış Ilex paraguariensis yaprakları ile beslenirler, geç larva yaşamında %1.2 maya özütü, %1.4 mısır nişastası, %0.8 yulaf unu unu, %1.2 agar12 ile desteklenirler. Benzer şekilde, nemli toprak, Sciarid sineklerini yükseltmek için ezilmiş barbunya fasulyesi ile nemli turba yosunu ile değiştirilebilir39,40.
Bradysia'nın laboratuvar kültürlerini korumak için başka yöntemler de kullanılmıştır: (i) maya ve kurutulmuş kan gübresinin eklendiği otoklavlanmış patates41; (ii) kurutulmuş kanın eklenebileceğigübre 42,43,44 45; (iii) pamuklu pedli plastik kaplar ve öğütülmüş soya fasulyesi ile nemlendirilmiş kağıt havlular46.
Mites Akarlar Drosophila'dan B. coprophila'ya aktarılabilir. Bunu en aza indirmek için, B. coprophila'yı Drosophila stoklarına yakın olmayan ayrı bir kuluçka makinesinde veya odada tutmak en iyisidir. Ayrıca, Drosophila'yı kullanmadan önce günün erken saatlerinde herhangi bir B. coprophila bakım çalışması yapın. Akarlar ayrıca ev bitkilerinden B. coprophila'ya da aktarılabilir, bu nedenle bitkileri B. coprophila ile aynı odada tutmayın. Akarlar şişeleri istila ederse, B. coprophila'nın vücudunda sürünen küçük beyaz küresel organizmalar olarak görülebilirler. Drosophila'daki akarları yok etmek için çalışan kimyasal işlemler, kimyasallar B. coprophila'yı öldürdüğü için B. coprophila için kullanılamaz (B. coprophila ayrıca fenol gibi organik dumanlara karşı hassastır). B. coprophila akar stoklarından kurtulmanın tek tedavisi, embriyoları bir agar plakası üzerinde manuel olarak toplamak, her birini akarların yokluğu açısından incelemek ve daha sonra ince bir boya fırçası kullanarak taze agar şişelerine aktarmaktır. Pamuk dolgulu gazlı bezler ve selüloz asetat köpük flugları (Drosophila polipropilen şişeleri için kullanıldığı gibi), akarların şişelere girmesini önlemeye yardımcı olur.
Hayvancılık protokollerinin kullanışlılığı Burada açıklanan protokoller, büyüyen bilim adamları topluluğunun, benzersiz biyolojik özelliklerini incelemek için B. coprophila'yı yeni / eski ortaya çıkan bir model organizma olarak desteklemesini sağlayacaktır. Yeni laboratuvar grupları, Bradysia'nın (Sciara) benzersiz biyolojik özelliklerini korumak ve araştırmak için büyüyen topluluğa katılmaya teşvik edilir.

Biyolojik ilkelerin tam olarak anlaşılması, Hayat Ağacı'nı kapsayan birçok farklı organizmanın incelenmesini gerektirir. 19.yüzyılın sonlarına kadar geniş bir organizma yelpazesi tanımlanmış olsa da, 20.yüzyılın ortalarında deneysel çalışmalar bir düzineden az model organizma ile sınırlı hale geldi. Genomik çağın ortaya çıkması ve Hayat Ağacı1'deki tüm türlerin genomlarını dizileme hedefiyle, artık laboratuvar deneyleri için kullanılan organizma türlerini genişletebilecek ve çeşitliliklerinin avantajlarından yararlanabilecek bir konumdayız. Deneyler için ortaya çıkan model organizmaların bu şekilde genişlemesi, onları laboratuvarda tutabilmenin bir ön koşuluna sahiptir. Burada, ortaya çıkan böyle bir yeni/eski model organizmanın yetiştirilmesi için protokoller açıklanmaktadır.
Dünyadaki hayvan yaşamının çoğunluğu, Böcekler2'nin dört süper radyasyonu ile açıklanmaktadır. Böcekler içinde yaklaşık 158.000 Diptera türü (gerçek sinekler)3, Sciaridae (kara mantar sivrisinekleri) familyasında yaklaşık 3000 tür vardır4. Meyve sineği Drosophila, Dipteran sineklerinin en kapsamlı şekilde çalışılanıdır. Alt Dipteran sineği (Nematocera), Bradysia (daha önce Sciara olarak adlandırılıyordu) coprophila, 200 milyon yıl önce "yüksek Dipteran" sineği (Brachycera) olan Drosophila'dan ayrıldı. Bu nedenle, B. coprophila, D. melanogaster ile karşılaştırmalı çalışmalar için uygun bir taksonomik konumdadır (Şekil 1). Dahası, B. coprophila'nın kendi başlarına incelenmeye değer birçok benzersiz biyolojik özelliği vardır 5,6,7. Bu özelliklerin çoğu, bir organizmanın tüm hücrelerinin aynı DNA içeriğine sahip olduğu DNA sabitliği kuralına uymaz. B. coprophila'da, (i) baba genomu, erkek mayoz I'de monopolar bir iğ üzerinde elimine edilir; (ii) erkek mayoz II'de X dyad'ın ayrılmaması vardır; (iii) germ hattı sınırlı (L) kromozomlar soma dan elimine edilir; ve (iv) bireyin cinsiyetine bağlı olarak erken embriyoda bir veya iki X kromozomu elimine edilir. Anne homologlarını baba homologlarından ayırt etmek için kromozom baskısı ilk olarak B. coprophila'da keşfedilmiştir ve bu kromozom eliminasyon olaylarının çoğu için rol oynamaktadır. Kromozom eliminasyonuna ek olarak, larva tükürük bezi politen kromozomlarındaki DNA puff lokuslarında gelişimsel olarak düzenlenmiş, lokusa özgü DNA amplifikasyonu yoluyla DNA sabitliğinin başka bir atlaması meydana gelir. Bu benzersiz özelliklerin incelenmesi, B. coprophila'nın laboratuvar bakımını gerektirir; Bu tür çalışmaları kolaylaştırmak için yetiştiriciliğinin detayları burada sunulmuştur.
<img alt="Böcek filogenetik diyagramı, Diptera ve Hymenoptera ilişkisi, evrimsel taksonomi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig01v3.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 1"> Resim 1: Bradysia (Sciara) coprophila'nın filogenisi. Popüler model organizmalar mavi yazı tipiyle ve taksonomik sıraları kırmızı yazı tipiyle belirtilmiştir. Bradysia ve diğer Sciarid mantar sivrisinekleri ve sivrisinekler daha düşük dipteran sineklerdir (eski adıyla Nematocera), Drosophila türleri ise daha yüksek dipteran sineklerdir (alt takım: Brachysera). Şeklin sol tarafında yer alan bilgiler Misof ve ark.33'ten alınmıştır; Sağ taraftaki bilgiler Bertone ve ark.34 ve Wiegmann ve ark.2'den alınmıştır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Daha önce, Sciara cinsi herhangi bir ökaryot için en fazla sayıda (700) türe sahipti ve Steffan'ın bunları8'e bölmesine neden oldu. Daha sonra Shin, Sciaridae ailesinin Sciarinae alt familyasına (Sciara, Trichosia ve Leptosciarella dahil olmak üzere altı cinsle), alt aile Megalosphyinae'ye (Bradysia cinsi dahil) ve diğer üç gruba (Pseudolycoriella dahil) ayrılmasını önerdi9. Sciaridae'nin filogenisi, son yıllarda birkaç grup tarafından daha fazla incelenmiştir 9,10,11. Son birkaç on yılda, Sciaridae ailesindeki birçok organizmanın adı12 değişti. Bir asırdan fazla bir süredir devam eden literatürün çoğu, üzerinde çalıştığımız organizmaya Sciara coprophila olarak atıfta bulunsa da, mevcut taksonomik adı artık Bradysia coprophila'dır (syn. Bradysia tilicola ve diğer eşanlamlılar)10. Dünya çapında bulunurlar ve mantar ve diğer mantarları yedikleri için yaygın olarak mantar sivrisinekleri olarak bilinirler. İlk olarak 1804'te Avrupa'da Meigen13 ve daha sonra Kuzey Amerika'da Johannsen 14,15 tarafından tanımlandılar. B. coprophila, Cold Spring Harbor Laboratuvarı'nda toplanmış ve laboratuvar stokları Charles Metz tarafından 1900'lerin başında Columbia Üniversitesi'nde Thomas Hunt Morgan ile yüksek lisans öğrencisi iken kurulmuştur. Bu nedenle, mevcut stoklar bir asırlık akraba evliliğini yansıtıyor. Benzer şekilde, B. coprophila'nın biyolojisi, Helen Crouse (doktorasını Barbara McClintock ile yapan) tarafından onlarca yıllık sitogenetik çalışmalarla daha da aydınlatıldı.
1930'larda Bradysia (Sciara), genetik çalışmalar için model bir sistem olarak Drosophila melanogaster ile rekabet etti. Birçok benzersiz biyolojik özelliğine rağmen, B. coprophila, genetik çalışmalar için radyasyona bağlı fenotipik mutasyonlara ihtiyaç duyulduğundan ve B. coprophila'nın gama ışınlamasına D. melanogaster16'dan sadece biraz daha dirençli olmasına rağmen, ikincisinde elde edilmesi daha kolay olduğundan, popüler bir model organizma olarak D. melanogaster tarafından gölgede bırakıldı. Modern genomik çağında, bu artık bir endişe kaynağı değil. B. coprophila için genom dizisi 17,18,19 (Urban, Gerbi ve Spradling, veriler gösterilmemiştir) ve dönüşüm yöntemleri 20,21 (Yamamoto ve Gerbi, veriler gösterilmemiştir) yakın zamanda kullanıma sunulduğundan, araştırmaları için onu benimseyen büyüyen bilim adamları topluluğu tarafından görüldüğü gibi, onu yeni/eski ortaya çıkan bir model sistem olarak kullanmanın zamanı gelmiştir. Bu makale, laboratuvar bakımı için prosedürleri açıklamaktadır.
B. coprophila'nın bir Y kromozomu yoktur ve yavruların cinsiyeti anne tarafından belirlenir. Uzun parasentrik bir inversiyona sahip X' ("X-prime") kromozomuna sahip dişilerin sadece kızları olurken, standart (ters çevrilmemiş) X kromozomu için homozigot olan dişilerin sadece oğullarıolacaktır 5 (Şekil 2). X' kromozomu19 için dizi bilgisi mevcuttur, ancak X' kromozomunun yavruların dişi olacağını nasıl belirlediği konusunda moleküler mekanizma hala açıklığa kavuşturulmayı beklemektedir. Erkekler hiçbir zaman X' kromozomuna sahip değildir ve döllenmeden sonra dişiler X'X (X' için heterozigot) veya XX'dir. Yetişkin X'X dişileri, kanattaki fenotipik belirteçler ile XX dişilerden ayırt edilebilir (Şekil 3). X'X dişileri (sadece kızları olacak), X' üzerindeki baskın Dalgalı (W) kanat işaretçisi tarafından tanınabilir (HoLo2 stoğunda olduğu gibi)22. Alternatif olarak, XX dişiler (sadece oğulları olacak), 91S stoğu23'te olduğu gibi X üzerindeki çekinik minyon (p) kanat işaretleyicisi ile tanınabilir. Bu durumda, X'Xp dişileri tam uzunlukta (minyon değil) kanatlara sahip olacak ve sadece kızları olacaktır. Stok 6980, şişmiş (sw) damarlar24 için X kromozomu üzerinde resesif bir işaretleyici ve ayrıca X' üzerindeki baskın işaretleyici Wavy'yi taşır ve haçlar için seçim için iki işaretleyiciye izin verir. Wavy'nin ekspresyon derecesi değişebilir ve yiyeceklerin sınırlandığı veya sıcaklığın çok ısındığı aşırı kalabalık şişelerde daha zayıf görünebilir. Larvalar normal 21 °C yerine soğuk odada (4 °-8 ° C) tutulursa, Dalgalı kanat fenotipi son derece güçlüdür. Resesif minyon kanat markörü değişken olmamasına ve tanımlanması çok kolay olmasına rağmen, 91S stokları HoLo2 stoğuna göre daha az sağlıklı oldukları için daha az sıklıkla kullanılır. B. coprophila çiftleşme şemaları burada sunulmuştur (Şekil 2) ve HoLo2, 7298 ve W14 stokları (Ek Dosya 1), 91S stoku (Ek Dosya 1), 6980 stoku (Ek Dosya 1) ve translokasyon stokları (Ek Dosya 1) için ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Translokasyon stokları artık mevcut değil; ribozomal RNA genlerini 25,26,27 içeren X'in kısa kolundaki heterokromomerlerin (H1, H2 ve H3) karşılıklı translokasyonlarıydı.
<img alt="Genetik çaprazlar ile cinsiyet belirleme diyagramı; XX ve XY kombinasyonları; zigot oluşum süreci." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig02.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 2"> Şekil 2: B. coprophila için çiftleşme şeması. Bu organizmanın Y kromozomu yoktur (erkek soma'nın tek bir X'i vardır); Anneler yavrularının cinsiyetini belirler. XX annenin sadece oğlu var ve X'X dişisinin sadece kızı var. X' kromozomu, X kromozomu ile karşılaştırıldığında uzun bir parasentrik inversiyona sahiptir. X (veya X') kromozomunun baba veya anne soyu, bu şekilde sırasıyla mavi veya kırmızı ile gösterilir. Sperm, otozomlar için haploittir, ancak mayoz II'deki ayrılmama nedeniyle X kromozomunun iki kopyasına sahiptir. Erken embriyoların somatik soyu, sırasıyla dişi veya erkek olacaksa, baba tarafından türetilmiş X'in bir veya iki kopyasını ortadan kaldırır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Böcek morfolojisi çalışması, kanat ve gövde yapılarını gösteren mikroskop görüntüleri, analiz için AG olarak etiketlendi." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig03.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 3"> Şekil 3: B. coprophila'nın kanat fenotipleri. Ergin dişi sinekler çeşitli kanat fenotipleri ile gösterilmiştir: (A) düz kanat (XX), (B) Dalgalı kanat (X'WX), (C) larvaları soğuk room'da depoladıktan sonra buruşuk bir görünüme sahip olan aşırı Dalgalı kanat (X'WX) fenotipi, (D) körelmiş benzeri minyon kanat (XpXp), (E) vahşi tip (XX) ve şişmiş damarlara sahip düz kanat, (F) kanadın üst kenarında ve/veya her iki kanadın ucunun yakınında küçük kabarcıkların (siyah oklar) göründüğü şişmiş damarlı düz kanat (XswXsw), (G) bir veya her iki kanatta bir kabarcık (beyaz ok) meydana gelen aşırı şişlik örneği. Erkekler X' kromozomundan yoksundur ve bu nedenle asla Dalgalı kanatlara sahip olmayacaklardır, ancak sırasıyla 91S stoğunda veya 6980 stoğunda minyon veya şişmiş kanatları vardır. Ölçek çubuğu = 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
Stok bakımında amaç, haçların yarısının dişi üreten annelerden ve haçların yarısının erkek üreten annelerden geldiği çaprazlamaları gerçekleştirmek ve sonraki çaprazlamalar için bir sonraki nesilde eşit sayıda dişi ve erkek yetişkine sahip olmaktır. Bununla birlikte, bu aynı zamanda planlamayı da içerir, çünkü erkekler için yaşam döngüsü kadınlardan daha kısadır ve yetişkin erkekler yetişkin dişilerden bir hafta öncesine kadar ortaya çıkar. Doğa, cinsiyetler arasındaki bu eşzamansızlığa, erkek embriyoların aynı tarihte dişi larvalardan 1-2 gün sonra larva olarak ortaya çıkmasını sağlayarak uyum sağlar. Bununla birlikte, laboratuvar çaprazlamaları için erkek ve dişi yetişkinlerin aynı anda mevcut olmasını sağlamak için, dişi larvaların bulunduğu şişeleri 21 ° C yerine oda sıcaklığında bırakarak veya erkek larvaların bulunduğu şişeleri biraz daha düşük sıcaklıklarda (örneğin, 16 ° C) yerleştirerek dişi gelişimi biraz hızlandırılabilir. Daha kusursuz olan bir başka rota da pazartesi günü kadın üretici annelerle melez yapmak ve aynı haftanın cuma günü erkek üretici annelerle melez yapmaktır. Uyguladığımız en kolay yol, her hafta aynı gün kadın yapımcı ve erkek yapımcı annelerle melezleme yapmak ve ardışık her hafta o gün melezleme yapmaktır. Bu yaklaşımda, 1. haftada bir çaprazlamadan gelen yetişkin dişiler, 2. haftada bir çaprazlamadan çıkan yetişkin erkeklerle çiftleştirilebilir.
Dişi B. coprophila'nın yaşam döngüsü 21 °C'de yetiştirildiğinde 5 haftadır (Tablo 1). Yaşam döngülerinin uzunluğu, daha düşük sıcaklıklarda veya yetersiz beslendiklerinde biraz daha uzundur. Erkek B. coprophila'nın yaşam döngüsü, dişilerden 0.5-1 hafta önce pupa oldukları için ~ 4-4.5 haftadır. Her larva girişinin sonu, steroid hormonu ekdison seviyesindeki bir patlama ile tetiklenen kütikülün dökülmesi ile işaretlenir. Üç larva instarı olan D. melanogaster'in aksine, B. coprophila'nın dört larva instarı vardır.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td>Gelişim Aşaması</td>
			<td>Çiftleşmeden sonraki gün sayısı (dpm)</td>
			<td>Aşama uzunluğu (gün)</td>
		</tr><tr><td>Yumurta koydu</td>
			<td>1-2</td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Embriyo</td>
			<td>1-2 ila 7-8</td>
			<td>~7 gün</td>
		</tr><tr><td>Larva</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr><tr><td>Larva 1, 2 ve 3'ü içerir</td>
			<td>7-8 ila 16-19</td>
			<td>~10</td>
		</tr><tr><td>4. larva instar ön göz lekesi</td>
			<td>16-19 ila 21-24</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>4. Larva Instar Göz Lekesi Aşaması</td>
			<td>21-24 ila 25-28</td>
			<td>4</td>
		</tr><tr><td>Pupa</td>
			<td>25-28 ila 30-33</td>
			<td>5</td>
		</tr><tr><td>Yetişkin</td>
			<td colspan="2">Çiftleşirse 21 °C'de 1-2 gün, çiftleşmemişse 16 °C'de 2-3 hafta yaşar.</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: Dişi B. coprophila'nın 21 °C'deki yaşam döngüsü.
B. coprophila , 15 °C-25 °C aralığında herhangi bir yerde tutulabilir ve gelişme daha düşük sıcaklıklarda daha yavaş ilerler. Bu böcek nemli bir ortamı tercih eder (ev bitkilerinin veya mantar yataklarının toprağında bulunur), bu nedenle inkübatörde deiyonize su içeren bir beher tutarız. B. coprophila , oda sıcaklığında, gevşek oturan bir kapağı olan ve bir bardak su içeren metal bir ekmek kutusunda saklanabilir, ancak sıcak iklimlerde bir tehlike olan 37 °C'de 28 ısı şokuna girerler. Michael Ashburner ve diğerleri, stok tutma için gereken süreyi azaltmak için D. melanogaster'i soğukta saklamaya çalıştılar. Buna karşılık, B. coprophila'nın önemli bir avantajı, orta evre larvaları olan şişelerin, ayda sadece bir kez beslenmeye özen gösterilerek soğuk odada (4-8 ° C) açık bir rafta 3 aya kadar saklanabilmesidir. Soğukta pupa aşamasına kadar son derece yavaş gelişirler ve şişeler 21 °C'ye geri getirildiğinde verimli yetişkinler olarak ortaya çıkarlar. Muhtemelen, bu onların vahşi doğada kışlamalarını taklit eder. Bu soğuğa bağlı gelişimsel duraklama, orta evre B. coprophila larvaları16'nın gama ışınlamasından sonra görülenle karşılaştırılabilir, ancak normal gelişimsel ilerlemeleri için geri dönüşü olmayan noktayı geçen geç evre larvalarda gelişimsel duraklama görülmez.

<table><tbody><tr><td>Agar (bakteriyolojik)</td> <td>ABD Biyolojik</td><td>A0930</td><td>https://www.usbio.net; &nbsp;</td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff Ayak Pedalı</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-121</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff Hava Tabancası</td><td>Genesee Scientific</td><td>54-104</td><td></td></tr><tr><td>CO2 FlyStuff UltimaterFlypad</td><td>Genesee Scientific</td><td>59-172</td><td>https://www.geneseesci.com</td></tr><tr><td>Eter çeker ocak</td><td>Labconco&nbsp;</td><td>3955220</td><td>Laboratuvar tezgahının üstüne oturur</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Filtre değişimi&nbsp; kedi # 6961300</td></tr><tr><td>Gıda: Brewer' s Maya Tozu</td><td>Solgar</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>Amazon'dan veya sağlıklı gıda mağazasından edinin</td></tr><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>https://www.solgar.com;</td></tr><tr><td>Gıda: Isırgan Tozu&nbsp; (pestisit içermez)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>209460-51</td><td></td></tr><tr><td>Gıda: Shitake Mantarları (pestisit içermez)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>202127-5</td><td>https://www.starwest-botanicals.com;</td></tr><tr><td>Gıda: Ispanak Tozu (pestisit içermez)</td><td>Starwest Botanicals</td><td>209583-5</td><td></td></tr><tr><td>Gıda: Saman (pestisit içermez</td>) <td>Starwest Botanicals</td><td>209465-3</td><td></td></tr><tr><td>Kavanoz: şeffaf cam, polipropilen kapak</td><td>Fisher Scientific:</td><td>FB02911765</td><td>73 mm çap, 89 mm ht (240 ml) https://www.fishersci.com;</td></tr><tr><td>İğne Probu, ahşap saplı</td><td>US Geo Supply Inc</td><td>SKU: 4190</td><td>5.75 "uzun prob, paslanmaz çelik iğne https://usgeosupply.com; (970)-434-3708</td></tr><tr><td>Şişeler: cam, tercih edilen:</td><td>Wilmad LabGlass</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Wilmad-glass özel şişeler</td><td></td><td></td><td>28-33 mm iç çap, 33 mm dış çap, 9,5 cm ht Wilmad: https://www.SP-WilmadLabglass.com</td></tr><tr><td>Şişeler: cam (daha ucuz ve tamam)&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-339-26H</td><td>29 mm dış çap, 9,5 cm y &nbsp; https://www.fishersci.com; &nbsp;</td></tr><tr><td>Şişeler: cam (biraz dar) & nbsp;</td><td>Genesee Bilimsel&nbsp;</td><td>32-201</td><td>24,5 mm dış çap, 9,5 cm thttps://www.geneseesci.com</td></tr><tr><td>Şişeler: polipropilen ve nbsp;</td><td>Genesee Scientific</td><td>32-114</td><td>28,5 mm dış çap, 9,5 cm ht</td></tr><tr><td>Flakon Tıkaçları</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>emici olmayan pamuk rulosu</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-456881</td><td></td></tr><tr><td>tülbent</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-055053</td><td>https://www.fishersci.com;</td></tr></tbody></table>

alt dipteran sineği bradysia (sciara) coprophila'nın laboratuvar bakımı: yeni/eski ortaya Çıkan bir model organizma

Laboratory Maintenance of the Lower Dipteran Fly Bradysia (Sciara) coprophila: A New/Old Emerging Model Organism

Alt dipteran sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın laboratuvar stokları bir asırdan fazla bir süredir korunmaktadır. B. coprophila'nın laboratuvar bakımı için protokoller burada sunulmuştur. Bu protokoller, B. coprophila'yı inceleyen ve hızla artan sayıda laboratuvar için, (1) erkek mayoz I'de monopolar bir iğ; (2) erkek mayoz II'de X dyad'ın ayrılmaması; (3) anne homologlarını baba homologlarından ayırt etmek için kromozom baskısı; (4) germ hattı sınırlı (L) kromozomlar; (5) kromozom eliminasyonu (erkek mayoz I'de baba kromozomları; erken embriyolarda bir ila iki X kromozomu; Erken embriyolarda soma'dan L kromozomları); (6) anne tarafından cinsiyet belirleme (Y kromozomu yoktur); ve (7) larva tükürük bezi politen kromozomlarındaki DNA puff lokuslarında gelişimsel olarak düzenlenmiş DNA amplifikasyonu. 
Kromozom mekaniğinin bu birçok benzersiz özelliğini, B. coprophila genomunun dizilenmesi ve birleştirilmesindeki son gelişmeleri ve genomik mühendislik için dönüşüm metodolojisinin geliştirilmesini kullanarak keşfetmek artık mümkün. Araştırma için B. coprophila'yı kullanan büyüyen bilim topluluğu, sineklerin çiftleşmesi için burada açıklanan protokollerden (sadece oğulları veya sadece kızları olacak anneler için fenotipik belirteçler; biyokimyasal deneyler için toplu çiftleşmenin detayları), embriyo yumurtadan çıkmayı kontrol etmek, larvaları beslemek ve yetiştiriciliği hakkındaki diğer yorumlardan faydalanacaktır.

Burada açıklanan protokoller, B. coprophila'nın yetiştirilmesinde kanıtlanmış başarıya yol açmıştır. Çiftleşme için yakın zamanda kapatılmış şişman yetişkinler seçildiğinde (Şekil 4<img alt="Böcek cinsiyet belirleme karşılaştırması; XwX dişi, XX kadın, XO erkek; Genetik çalışma diyagramı." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig04.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 4"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig04large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Drosophila embriyogenezi, floresan mikroskobu, embriyonik sikluslar, hücre bölünmesi zamanlama tablosu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig05v2.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 5"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig05large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Böcek-mantar etkileşimi; mikroskopi görüntüsü; miselyum büyümesi; haşere çalışması; entomopatojenik mantarlar." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig06.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 6"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig06large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Larva gelişim evreleri, erken göz lekesi oluşumu, mikroskopi görüntüleri, biyolojik büyüme analizleri." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig07.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 7"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig07large.jpg" target="_blank"></a><img alt="Böcek metamorfoz evreleri; pupa gelişimi; görüntü serileri; larvadan yetişkin dönüşümüne." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66751/66751fig08.jpg" data-altupdatedat="1754922859000" data-alt="Figure 8"> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/66751fig08large.jpg" target="_blank"></a><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66751/Supplemental%20Materials.zip" target="_blank"></a>

Bu makale, alt dipteran sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın laboratuvar bakımını (çiftleşme ve besleme dahil) özetlemektedir.

Alt Dipteran Sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın Laboratuvar Bakımı: Yeni/Eski Ortaya Çıkan Bir Model Organizma

Laboratory stocks of the lower dipteran fly, Bradysia (Sciara) coprophila, have been maintained for over a century. Protocols for laboratory upkeep of B. ...

Sciara coprophila olarak da bilinen alt dipteran sineği Bradysia'yı, mayozda monopolar bir iğ ve x-dyad ayrılmaması, kromozom baskısı, germ hattına özgü kromozomlar, kromozom eliminasyonu, maternal cinsiyet tayini ve kirletici kromozom DNA ponplarında DNA amplifikasyonu gibi benzersiz biyolojik özelliklerini incelemek için koruyoruz. Laboratuvarımızda Yutaka Yamamoto, Bradysia coprophila'nın genomik dönüşümü için metodoloji geliştirdi. Dahası, bu organizmanın transkriptomu kullanılabilir hale getirildi ve genomu John Urban tarafından dizilendi ve birleştirildi.Bu buluşlar, Bradysia coprophila'nın eşsiz biyolojisinin keşfedilmesini sağlar. Bradysia coprophila'nın benzersiz özelliklerini ele almak için büyüyen bilim insanları topluluğuna katılmanızı öneririz. Sonuçlarınız, hücre ve gelişim biyolojisi için temel öneme sahip moleküler mekanizmaları aydınlatacaktır.Burada sunulan hayvancılık protokolleri, Bradysia coprophila'yı kendi laboratuvarınızda korumak için bir öğretici görevi görecektir.

laboratory-maintenance-lower-dipteran-fly-bradysia-sciara-coprophila

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Biz otomatik olarak ve doğru tespit saymak ve onların uçan sesi göre böcekler uçan sınıflandırmak ucuz, noninvazif sözde-akustik optik sensörler kullanan bir sistem önerdi.

Ucuz Sensörler ile Böcek Tespit ve Sınıflandırma Uçan

İstikrarlı sinekler (Stomoxys calcitrans) yetiştirme için bir yordam sunulur. Yordam diyet bileşenleri, malzeme ve ek malzemeler için mevcut yerel malzemeler kullanır.

Laboratuvar istikrarlı sinek ve diğer Muscoid Diptera yetiştirme

Bu makalede, Gryllus bimaculatus'un yenilebilir kriketinin laboratuvar kültürlerinin uzun süreli yetiştirilmesi için yoğunluk, yem mevcudiyeti, hidrasyon kaynağı ve çevresel kontroller gibi önemli faktörleri standartlaştırmak için temel yöntemler özetlenmektedir.

Gryllus bimaculatus'un Laboratuvar Kültürlerinin Sürdürülmesi, Böcek Tarımı ve Omurgasız Fizyolojisi için Çok Yönlü Bir Ortopteran Model

Vibrio cholerae: Bakteriyel Patogenez Eğitim Modeli Organizma - Röportaj

Medaka ve zebrafish omurgalı genomu fonksiyonları genetik diseksiyon için tamamlayıcı niteliktedir. Bu protokol, Medaka embriyolara başarılı mikroenjeksiyon, bir laboratuvarda Medaka ve zebrafish kullanarak embriyolojik ve genetik analiz için önemli bir tekniktir için kilit noktaları vurgulamaktadır.

Model Genetik Organizma olarak kullanmak için Medaka Embriyolar, Mikroenjeksiyon

Bu protokol zebrafish yetiştiriciliği için en uygun koşulları sağlamak için düzenli bakım ve bakım özetliyor. Video sistemi bakımı, düzenli barınma, beslenme, üreme ve zebrafish larvaların yetiştirme için protokol göstermektedir.

Bir Zebra balığı Düzenli Bakım ve Onarım (<em&gt; Br.rerio</em&gt;) Laboratuvar: An Introduction

Bu doğal sularda da uygulanabilir magnetotactic bakteriler (MTB) toplamak için bir yöntem göstermektedir. MTB izole ve bakteri doğal manyetizma yararlanır nispeten basit bir kurulumu kullanarak sediment örneklerinin zenginleştirilebilir. İzole MTB sonra ışık ve elektron mikroskobu kullanarak hem ayrıntılı olarak incelenebilir.

Doğal Çevre gelen Magnetotactic Bakteri meydana gelen toplanması, İzolasyon ve Zenginleştirme

Protein homeostazı, stres ve yaşlanma arasındaki ilişkiyi incelemek için, genetik olarak izlenebilir metazoan Caenorhabditis elegans'ı model sistem olarak kullanarak, protein disfonksiyonunu, hücredeki protein lokalizasyonunu ve organizma, hücresel ve protein seviyelerinde protein stabilitesini takip ederek protein katlanmasındaki değişiklikleri izledik.

Caenorhabditis elegans'ın Çok Hücreli Bir Organizmada Protein Homeostazını İncelemek için Model Sistem Olarak Kullanılması

Protein agregatlarının prion benzeri yayılımı, son zamanlarda birçok nörodejeneratif hastalıkta rol oynadığı ortaya çıkmıştır. Bu protokolün amacı, nematod C. elegans'ın protein yayılımını izlemek ve prion benzeri olayları araştırmak için bir model sistem olarak nasıl kullanılacağını açıklamaktır.

Metazoan Model Organizma kullanma Serim ve toksisitesi prion-benzeri Proteinler incelenmesi<em&gt; ° C. elegans</em

Bu el yazması, bir sinek popülasyonu kafesi kullanılarak bir Drosophila melanogaster popülasyonunun düzenli olarak kültürlenmesi için ayrıntılı bir protokol bildirmektedir.

Bir bakımı<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Nüfus Kafes

Öğrenin Bradysia coprophila laboratuvar bakım protokollerini; genetik ve gelişim biyolojisi araştırmaları için bu model organizmanın üreme, beslenme ve bakım yöntemlerini keşfedin.

Alt Dipteran Sineği Bradysia (Sciara) coprophila'nın Laboratuvar Bakımı: Yeni/Eski Ortaya Çıkan Bir Model Organizma

Daha fazla video keşfet