Hipotalamik Mikroglia'nın Manyetik Olarak Aktive Edilmiş Hücre Ayıklama ile Yeni Perfüze Edilmiş Yetişkin Fare Beyninden İzolasyonu

Manyetik olarak aktive edilmiş hücre sınıflandırması (MACS) kullanarak fare hipotalamusundan (veya eşdeğer küçük beyin yapılarından) mikroglial hücreleri nispeten kısa sürede izole etmek için bir protokol açıklıyoruz. MACS ile sıralanan hipotalamik mikroglia, ex vivo analiz için kullanılabilir ve in vitro testler yapmak üzere kaplanabilir.

Amacımız, mikroglia ve nöronlar arasındaki etkileşime vurgu yaparak beslenmenin beyin fonksiyonlarını nasıl etkilediğini keşfetmektir. Ve özellikle beslenme davranışının ve enerji dengesinin kontrolünde kilit bir yapı olan hipotalamusa odaklanıyoruz. Çoğu çalışma, özellikle mikroglial süreçleri hedeflemek için jenik fareleri kullanır ve daha sonra bu yaklaşımı histolojik veya metabolik gözlemlerle birleştirir, ancak tüm yapısal düzeyde, ancak yine de hücre düzeyinde çözünürlüğe ulaşmamız gerekecek.

Mikroglia'yı küçük beyin yapılarından izole etmek çok zordur ve protokolümüz değerli hücrelerin yüksek verimini ve saflığını sağlar, bu da diyetin mikroglial metabolizma ve fonksiyon üzerindeki etkisinin incelenmesine izin verir. Protokolümüz, hipotalamus gibi küçük yapılar için bile kısa sürede ve çok sayıda canlı hücre ile nispeten yüksek saflık ve verim elde etmemizi sağlar. Araştırmamız, mikroglia nöron iletişiminin metabolik koşullar geliştirme esnekliği veya savunmasızlığı üzerindeki rolünü araştırıyor ve bireylerin diyete yanıt verme biçiminde son derece çeşitli olduğunu biliyoruz.

Verilerimiz, mikroglia'nın bu çeşitlilikte rol oynayabileceğini gösteriyor.