Name: Antikora Bağımlı Hücre Aracılı Sitotoksisite Raportörü Biyotahlil Kullanılarak Kanser Hücrelerinde Antikora Bağımlı, Hücre Aracılı Sitotoksisitenin Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-09-13T14:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 21 s
Description: Öğrenin, ADCC biyoassay kiti kullanarak kanser hücrelerinde antikor bağımlı hücre aracılı sitotoksisiteyi nasıl değerlendirebilirsiniz. Bu hızlı yöntem, terapötik antikorların etkinliğini bir gün içinde doğru şekilde test etmenizi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Kanser İmmünoterapisi için Bir ADCC Biyo-Testinde Efektör Olarak Tiroid Kanseri Hücreleri

<ol><li>Zahavi, D., AlDeghaither, D., O'Connell, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity%3A+a+strategy+for+improving+antibody-based+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Antib+Ther%22%5BJournal%5D)">Enhancing antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity: a strategy for improving antibody-based immunotherapy.</a> Antib Ther. 1 (1), 7-12 (2018).</li>
<li>Fenis, A., Demaria, O., Gauthier, L., Vivier, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+immune+cell+engagers+for+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">New immune cell engagers for cancer immunotherapy.</a> Nat Rev Immunol. 24 (7), 471-486 (2024).</li>
<li>Pinto, S., Pahl, J., Schottelius, A., Carter, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reimagining+antibody-dependent+cellular+cytotoxicity+in+cancer%3A+the+potential+of+natural+killer+cell+engagers%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Immunol%22%5BJournal%5D)">Reimagining antibody-dependent cellular cytotoxicity in cancer: the potential of natural killer cell engagers.</a> Trends Immunol. 43 (11), 932-946 (2022).</li>
<li>Ochoa, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody-dependent+cell+cytotoxicity%3A+immunotherapy+strategies+enhancing+effector+NK+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Antibody-dependent cell cytotoxicity: immunotherapy strategies enhancing effector NK cells.</a> Immunol Cell Biol. 95 (4), 347-355 (2017).</li>
<li>Wang, W., Erbe, A. K., Hank, J. A., Morris, Z. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NK+cell-mediated+antibody-dependent+cellular+cytotoxicity+in+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Immunol%22%5BJournal%5D)">NK cell-mediated antibody-dependent cellular cytotoxicity in cancer immunotherapy.</a> Front Immunol. 6, 368(2015).</li>
<li>Chung, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+in+vitro+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity+activity+of+therapeutic+antibodies+-+impact+of+effector+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Characterization of in vitro antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity activity of therapeutic antibodies - impact of effector cells.</a> J Immunol Methods. 407, 63-75 (2014).</li>
<li>Shimasaki, N., Jain, A., Campana, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NK+cells+for+cancer+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">NK cells for cancer immunotherapy.</a> Nat Rev Drug Discov. 19 (3), 200-218 (2020).</li>
<li>Cheng, Z. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+robust+reporter-based+ADCC+assay+with+frozen%2C+thaw-and-use+cells+to+measure+Fc+effector+function+of+therapeutic+antibodies%5BTitle%5D)+AND+%22J+Immunol+Methods%22%5BJournal%5D)">Development of a robust reporter-based ADCC assay with frozen, thaw-and-use cells to measure Fc effector function of therapeutic antibodies.</a> J Immunol Methods. 414, 69-81 (2014).</li>
<li>Parekh, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+validation+of+an+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity-reporter+gene+assay%5BTitle%5D)+AND+%22MAbs%22%5BJournal%5D)">Development and validation of an antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity-reporter gene assay.</a> MAbs. 4 (3), 310-318 (2012).</li>
<li>Hogarth, P. M., Pietersz, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fc+receptor-targeted+therapies+for+the+treatment+of+inflammation%2C+cancer+and+beyond%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">Fc receptor-targeted therapies for the treatment of inflammation, cancer and beyond.</a> Nat Rev Drug Discov. 11 (4), 311-331 (2012).</li>
<li>Chung, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+evaluation+of+fucose+reducing+effects+in+a+humanized+antibody+on+Fcgamma+receptor+binding+and+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity+activities%5BTitle%5D)+AND+%22MAbs%22%5BJournal%5D)">Quantitative evaluation of fucose reducing effects in a humanized antibody on Fcgamma receptor binding and antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity activities.</a> MAbs. 4 (3), 326-340 (2012).</li>
<li>Promega. ADCC Reporter Bioassay Core Kit Technical Manual. , 
 <a target="_blank" href="https://www.promega.sg/-/media/files/resources/protocols/technical-manuals/101/adcc-reporter-bioassay-core-kit-protocol.pdf?rev=bec36264c0b6470591ded081377d207d&sc_lang=en">https://www.promega.sg/-/media/files/resources/protocols/technical-manuals/101/adcc-reporter-bioassay-core-kit-protocol.pdf?rev=bec36264c0b6470591ded081377d207d&sc_lang=en</a> (2023).</li>
<li>Miller, A. S., Tejada, M. L., Gazzano-Santoro, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+for+measuring+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Methods for measuring antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity in vitro.</a> Methods Mol Biol. 1134, 59-65 (2014).</li>
<li>Lo Nigro, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NK-mediated+antibody-dependent+cell-mediated+cytotoxicity+in+solid+tumors%3A+biological+evidence+and+clinical+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">NK-mediated antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity in solid tumors: biological evidence and clinical perspectives.</a> Ann Transl Med. 7 (5), 105(2019).</li>
<li>Gómez Román, V. R., Murray, J. C., Weiner, L. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aG%C3%B3mez+Rom%C3%A1n%2C+VR+%22Antibody+Fc%22">Antibody Fc</a>. Ackerman, M. E., Nimmerjahn, F. , Academic Press. 1-27 (2014).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>% 0.5 Tripsin-EDTA</td><td>Gibco</td><td>15400-054</td><td>% 0.05 Tripsin</td></tr><tr><td>1x Tris Tampon Salin (TBS)</td> yapmak için PBS'de 10x seyreltin <td>1. BASE</td><td>BUF-3030-1X1L</td><td>Batı lekelemede membran yıkama için</td></tr><tr><td>1.5 M Tris Tamponu, pH 8.8</td><td>SDS jel hazırlama için</td><td>1. BASE</td><td>BUF-1419-1L-pH8.8</td></tr><tr><td>2-Merkaptoetanol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M7522-100ML</td><td>Numune hazırlama için batı lekeleme</td></tr><tr><td>% 30 Akrilamid / Bis çözeltisi</td><td>Bio-Rad</td> <td># 1610158</td><td>SDS jel hazırlama için</td></tr><tr><td>4x Laemmli Tampon</td><td>Bio-Rad</td> <td># 1610747</td><td>Batı lekeleme numune hazırlanması için</td></tr><tr><td>Şeffaf düz tabanlı 96 kuyulu beyaz polistiren mikroplaka</td><td>Corning Incorporated</td><td>3610</td><td>ADCC tahlili için</td></tr><tr><td>ADCC Biyotahlil Efektör hücreleri (0.65 mL)</td> <td>Promega</td><td>G7011</td><td>ADCC muhabiri biyotahlil çekirdek kitine (Promega G7010), 1 x 1 flakon</td></tr><tr><td>ADCC muhabiri biyotahlil çekirdek kiti</td><td>Promega</td><td>G7010</td> içerir <td>Bu deneyde ADCC tahlili için ADCC biyotahlil kiti olarak belirtilmiştir</td></tr><tr><td>SDS jel hazırlama için</td><td>Amonyum Persülfat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A3678-25G</td></tr> <tr><td></td><td>Bevacizumab (İnsanlaştırılmış Anti VEGF-antikor)</td> <td>MVASI-ADCC</td> <td>tahlilinde</td></tr> <tr><td>negatif kontrol antikoru olarak kullanınBHT-101</td><td>Leibniz Enstitüsü DSMZ</td><td>ACC279</td><td>İnsan anaplastik papiller tiroid kanseri hücre hattı&nbsp;</td></tr><tr><td>Bio-Glo Luciferase Test Tamponu</td><td>Promega</td><td>G7941</td>, <td>ADCC muhabiri biyo-tahlil çekirdek kitinde (Promega G7010), 1 x 10 mL</td></tr><tr><td>Bio-Glo Luciferase Test Substratı (Liyofilize)</td> içerir <td>Promega</td><td>G7941</td>, <td>ADCC muhabiri biyo-tahlil çekirdek kitine (Promega G7010), 1 x 1 flakon</td></tr><tr><td>Hücre kazıyıcı</td><td>GenFollower</td><td>GD00235</td> içerir <td>Kültür şişesinden hücreyi çıkarmak için</td></tr><tr><td>Cetuximab (Kimerik anti-EGFR antikoru)</td><td>ERBITUX-ADCC</td><td></td> <td>tahlilinde terapötik antikor olarak kullanım</td></tr><tr><td>Kemilüminesan HRP substratı</td><td>Merck Millipore</td><td>WBKLS0500</td><td>Batı blotlamada protein tespiti için</td></tr><tr><td>Damıtılmış su</td><td>Gibco</td><td>15230-162</td><td>SDS jel hazırlama için</td></tr><tr><td>Fetal Sığır Serumu (FBS)</td><td>Gibco</td><td>10270-106</td><td>Kültür ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>iBright CL1500 görüntüleme sistemi</td><td>Thermo Scientific</td><td>2462621100038</td><td>Western blotting'de protein tespiti için</td></tr><tr><td>L-glutamin, 200 mM</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td>Kültür ortamı takviyesi</td></tr><tr><td>Düşük IgG Serumu</td><td>Promega</td><td>G7110</td><td>ADCC muhabiri biyotahlil çekirdek kitine (Promega G7010) dahildir, 1 x 4 mL</td></tr><tr><td>Megafuge 8R</td><td>Thermo Scientific</td><td>42876589</td><td>Santrifüj</td></tr><tr><td>Fare anti-EGFR monoklonal antikorları içerir</td><td>BD Biosciences</td><td>610016</td><td>Western blotting'de birincil antikor</td></tr><tr><td>Fare anti-VEGFR monoklonal antikorları</td><td>BD Biosciences</td><td>571194</td> Western blotting enzimatik olmayan hücre ayrışma <td>tamponunda birincil antikor</td></tr><tr><td></td><td>Sigma Aldrich</td><td>C5789-100ML</td><td>T75 şişesinden hücre toplama için</td></tr><tr><td>Penisilin-Streptomisin</td><td>PAN Biotech</td><td>P06-07100</td><td>Antibakteriyel kültür ortamı</td></tr><tr><td>Fosfat Tamponlu Salin (PBS), pH 7.2, Steril filtreli</td><td>1. BASE</td><td>CUS-2048-1x1L</td><td>Hücreler için yıkama solüsyonu olarak kullanın</td></tr><tr><td>Pierce BCA test kiti</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Protein konsantrasyonunu ölçmek için</td></tr><tr><td>Proteaz ve fosfataz inhibitörü</td><td>Thermo Scientific</td><td>A32959</td><td>Western blotting PVDF için numune hazırlamada protein sindirimi için</td></tr><tr><td> membran (Immobilin-P)</td> <td>Merck Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>Batı böceklenme</td></tr><tr><td>Tavşan anti-fare IgG, Fc & gama protein transferi için; HRP konjuge ikincil antikor</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>315-035-046</td><td>Batı blot</td></tr><tr><td>Roswell Park Memorial Institute (RPMI) ortamında</td> ikincil antikor <td>Oğlak Bilimsel</td><td>RPMI-XA</td><td>Hücre kültürü ortamı</td></tr><tr><td>RPMI-1640</td><td>Promega</td><td>G7080</td><td>ADCC muhabiri biyotahlil çekirdek kitine (Promega G7010) dahildir, 1 x 36 mL</td></tr><tr><td>Yağsız süt tozu</td><td>Merck Millipore</td><td>70166-500G</td><td>Batı lekelemede membran blokajı için</td></tr><tr><td>Sodyum Dodesil Sülfat</td><td>1. BASE</td><td>BIO-2050-500g</td><td>SDS jel hazırlama için</td></tr><tr><td>SW-1736</td><td>Cytion</td><td>300453</td><td>İnsan tiroid skuamöz hücreli kanser hücre hattı</td></tr><tr><td>T75 kültür şişeleri</td><td>SPL Yaşam Bilimleri</td><td>70075</td><td>Hücre kültürü şişesi</td></tr><tr><td>Tecan Çok Modlu Okuyucu modeli Spark 10M</td><td>Tecan</td><td>1607000294</td><td>için parlaklık ölçümü</td></tr><tr><td>SDS jel hazırlama için</td><td>TEMED</td><td>Bio-Rad</td><td>#1610801</td></tr><tr><td>Tween-20</td><td>Promega</td><td>H5151</td><td>Batı lekelemede membran yıkama için</td></tr><tr><td>Vi-cell XR hücre canlılık analizörü</td><td>Beckman Coulter</td><td>AL15072</td><td>Hücre sayacı</td></tr></tbody></table>

antikora bağımlı hücre aracılı sitotoksisite raportörü biyotahlil kullanılarak kanser hücrelerinde antikora bağımlı, hücre aracılı sitotoksisitenin değerlendirilmesi

Assessing Antibody-dependent, Cell-mediated Cytotoxicity in Cancer Cells using Antibody-Dependent Cell-Mediated Cytotoxicity Reporter Bioassay

Hedef BHT-101 ve SW-1736 hücrelerinde EGFR ve VEGFR ekspresyonu western blot kullanılarak tespit edildi. EGFR ekspresyonu hem BHT-101 hem de SW-1736 hücrelerinde tespit edildi, ancak VEGFR ekspresyonu tespit edilmedi (Şekil 3).
ADCC biyotahlil kitini kullanarak, hedef hücreler olarak EGFR pozitif hücre hatları, BHT-101 ve SW-1736 kullanarak anti-EGFR antikoru setuksimabın ADCC reaksiyonunu tespit ettik. Bir VEGF inaktivatörü olan bevacizumab, negatif kontrol antikoru olarak kullanıldı. Farklı konsantrasyonlarda antikorlar ve efektör hücreler hedef hücrelerle inkübe edildi. Lüminesans sinyali bir plaka okuyucu kullanılarak tespit edildi (Şekil 2). Cetuximab (anti-EGFR antikor) gruplarında daha yüksek bir ADCC aktivite indüksiyonu foldu bulundu, ancak her iki hücre hattı için Bevacizumab'da (VEGF antagonisti) ADCC aktivitesi görülmedi. Bu, her iki hücre hattı için EGFR hücre dışı membran antijenlerini hedef alan ADCC etkisini gösterdi. Bu yöntem kullanılarak, ADCC reaksiyonu, iki anaplastik tiroid kanseri hücre hattında (BHT101 ve SW1736) Cetuximab varlığında doğrulanmıştır (Şekil 4).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67077/67077fig01.jpg"> 
Şekil 1: ADCC biyo-tahlil kiti ile ADCC reaksiyonunu gösteren şematik bir diyagram. Terapötik antikordaki antijen bağlanma bölgeleri, hedef hücrelerdeki yüzey antijenlerine bağlanır. Bu bağlanma, antikorun Fc kısmının, NFAT-RE luc ile genetik olarak tasarlanmış ve efektör hücrelerde bir lüminesans sinyali üreten efektör hücrelerin FcƳRIIIa reseptörlerine bağlanmasına yol açar. Bu şekil, ADCC Reporter Bioassay Core kit kılavuzundan12 izni ile değiştirilmiştir. Kısaltmalar: ADCC = Antikora bağımlı hücre aracılı sitotoksisite; Fc = Parça kristalleşebilir bölge; NFAT = Aktive Edilmiş T Hücresinin Nükleer Faktörü; RE = Yanıt öğesi; luc = lusiferaz. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67077/67077fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67077/67077fig02.jpg"> 
Şekil 2: ADCC ko-kültür sisteminin 96 oyuklu plaka tasarımının lüminesans okuması ve deneysel diyagramı. Lüminesans sinyalleri bir lüminesans okuyucu tarafından okunur. Sıra A: 1st-9 inci kuyular ADCC Biyotahlil Tamponu içerir. Sıra B: 3rd-8. kuyular BHT101'in ADCC reaksiyon sistemini (hedef hücreler + antikor + efektör hücreler) içerir. 2. kuyu antikorsuzdur. 9. kuyu sadece ADCC Bioassay tamponu içerir. Satır C: 3rd-8. kuyular SW-1736'nın ADCC reaksiyon sistemini (hedef hücre + antikor + efektör hücreler) içerir. 2. kuyu antikorsuzdur. 9. kuyu sadece ADCC Bioassay tamponu içerir. Sıra D: 1st-9 uncu kuyularda Tahlil Tamponu bulunmaktadır. Kısaltmalar: ADCC = Antikora bağımlı hücre aracılı sitotoksisite; AB = ADCC Biyotahlil tamponu; VEGFR = vasküler epitelyal büyüme faktörü reseptörü; EGFR = Epidermal Büyüme Faktörü Reseptörü; mAb = monoklonal antikor. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67077/67077fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67077/67077fig03.jpg"> 
Şekil 3: BHT-101 ve SW-1736 tiroid karsinomunda western blot kullanılarak EGFR ve VEGFR ekspresyonunun saptanması. EGFR ekspresyonu, ancak VEGFR değil, her iki hücre hattında da tespit edildi. Yükleme kontrolü olarak B-aktin kullanıldı. Kısaltmalar: EGFR = epidermal büyüme faktörü reseptörü; VEGFR = vasküler epidermal büyüme faktörü. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67077/67077fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67077/67077fig04.jpg"> 
Şekil 4: ADCC aktivitesinin katlanma indüksiyonu. (A) Tiroid kanseri hücre hattı BHT-101, anti-EGFR antikoru Cetuximab'ın varlığında bir ADCC etkisi gösterir. (B) Tiroid kanseri hücre hattı SW-1736, anti-EGFR antikoru Cetuximab'ın varlığında bir ADCC etkisi sergiler. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67077/67077fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Antikora Bağımlı Hücre Aracılı Sitotoksisite Raportörü Biyotahlil Kullanılarak Kanser Hücrelerinde Antikora Bağımlı, Hücre Aracılı Sitotoksisitenin Değerlendirilmesi

The method for antibody-dependent, cell-mediated cytotoxicity (ADCC) represents an important tool to assess the efficacy of therapeutic antibodies in ...

assessing-antibody-dependent-cell-mediated-cytotoxicity-cancer-cells

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Hücre-aracılı lenfositotoksisite (KML) deneyleri, in vitro otoreaktif yanıtları ve hücre ölümü çalışma mekanizmaları test etmek için kullanılabilir. Ancak, canlı hücre floresan boyalar, tipi ve hücre ölümü gibi kullanılan yollar kinetiği konfokal mikroskopik görüntüleme teknikleri kullanılarak daha ayrıntılı olarak incelenebilir.

Sitotoksik T Lenfositler Beta Hücre Ölümü aracılığı ile değerlendirin yöntemleri

Krom salınım tahlili, sitotoksik T hücresi aktivitesini tespit etmek için ortak bir tahlil, bazı sınırlamalar vardır. Bu madde, antijen spesifik CD8 T hücreleri ve insan göğüs kanseri tümör hattı ile, SKBR3 kullanarak, bir empedans dayalı bir yaklaşım hücre öldürme saptama yeteneğine için incelenmiştir.

XCELLigence Sistemi Cr51 Yayın Assay Karşılaştırılması tarafından İnsan Her2neu Özgül CD8 T hücrelerinin Optimal Sitotoksik Aktivite Belirlenmesi

Bu video, T hücresi efektör fonksiyonlarının antikor aracılı aktivasyonunu ölçen bir testi göstermektedir. HA eksprese eden transfekte edilmiş memeli hücrelerine influenza virüsü hemaglutinin (HA) spesifik monoklonal antikorunun eklenmesi, HA ile immün komplekslerin oluşumuna neden olur. Fc reseptörlerini ve bir lusiferaz raportörünü eksprese eden tasarlanmış T hücreleri eklendikten sonra, T hücreleri antikor-HA kompleksleri tarafından aktive edilir ve bu aktivasyon, bir lusiferaz substratı...

FA aracılı efektör fonksiyonlarının aktivasyonunun HA antikorları tarafından ölçülmesi

Bu protokol, hassas, hücre bazlı bir sitotoksisite testini tanımlar. Artan sayıda efektör CD8 + T hücresinin varlığında canlı hedef CD4 + T hücrelerinin frekansındaki azalmayı numaralandırarak, bu test antijene özgü CD8 + T hücrelerinin sitolitik aktivitesinin doğrudan değerlendirilmesine izin verir.

Sitotoksik Aktiviteyi Ölçmek için Hücre Bazlı Akış Sitometrisi Testi

Tam kan sitotoksisite deneyi (WCA), flüoresans mikroskopisi ve otomatik görüntü işleme ile yüksek verimli hücre konumlandırma teknolojisini içeren tarafından geliştirilmiş bir sitotoksisite analizidir. Burada, bir anti-CD20 antikoru ile tedavi edilen lenfoma hücrelerinin enfekte hücre sitotoksisitesi analiz sağlamak için insan kanında gerçek zamanlı olarak analiz edilebilir açıklar.

İnsan Tüm Kan gerçek zamanlı sitotoksisite deneyleri

Sıvı ve katı tümör hücrelerini hedefleyen kimerik antijen reseptör T hücrelerinin gücünü değerlendirmek için kantitatif gerçek zamanlı in vitro sitoz ispat sistemini tanımlıyoruz. Bu protokol diğer bağışıklık etki hücreleri değerlendirmek için uzatılabilir, yanı sıra kombinasyon tedavileri.

Katı ve Hematolojik Kanser Hücrelerini Hedefleyen İmhimik Antijen Reseptör T Hücreleri Için Gerçek Zamanlı Potens Tsay

Bu protokol, terapötik bir anti-HER-2 antikoru varlığında doğal öldürücü hücre aracılı meme kanseri hücresi öldürmeyi modüle eden bileşikleri tanımlamak için otomatik, görüntü tabanlı yüksek verimli bir teknik sunar.

Antikor Bağımlı Hücresel Sitotoksisiteyi Modifiye Eden Bileşiklerin Tanımlanması için Yüksek İçerikli Tarama Testi

Sitokin salınım testi referans reaktiflerinin kullanılması, immünoterapötik monoklonal antikorların daha tekrarlanabilir ve standardize edilmiş in vitro güvenlik profillerine izin verir. Burada, bazı terapötik monoklonal antikorların güvenliğini tahmin etmek için sitokin salınım testlerinin bir referans reaktif paneliyle birlikte nasıl kullanılabileceğini açıklıyoruz.

Monoklonal Antikor Güvenliğinin Tahmini için Sitokin Salınım Testlerinin Sağlamlığını Doğrulamak için Referans Reaktiflerin Kullanılması

Burada, antitümör antikorların önemli bir kanser hücresi öldürme mekanizması olan ADCC mekanizmasını modüle eden bileşikleri tanımlamak için bir yöntem sunuyoruz. NK hücrelerinin sitotoksik etkisi, Trastuzumab varlığında meme kanseri hücre sferoidlerinde ölçülür. Görüntü analizi, sferoidlerdeki canlı ve ölü öldürücü ve hedef hücreleri tanımlar.

Bir Tümör Sferoid Modelinde Antikora Bağımlı Hücresel Sitotoksisitenin Ölçülmesi: İlaç Keşfi Uygulaması

Burada, tek hücre düzeyinde hücre öldürmeyi incelemek için bir T hücresini ve bir kanser hedef hücresini kapsülleyen çift emülsiyon damlacıkları oluşturmak için bir yöntem açıklıyoruz. Bu yöntem, büyük bir T hücresi popülasyonu içinde hem sitotoksik moleküllerin hem de hedef hücre apoptozunun ikili miktar tayinine izin verir.

Kimerik Antijen Reseptörü T hücrelerini Tek Hücre Düzeyinde Değerlendirmek için Damlacık Bazlı Sitotoksisite Testi

Öğrenin, ADCC biyoassay kiti kullanarak kanser hücrelerinde antikor bağımlı hücre aracılı sitotoksisiteyi nasıl değerlendirebilirsiniz. Bu hızlı yöntem, terapötik antikorların etkinliğini bir gün içinde doğru şekilde test etmenizi sağlar.

Antikora Bağımlı Hücre Aracılı Sitotoksisite Raportörü Biyotahlil Kullanılarak Kanser Hücrelerinde Antikora Bağımlı, Hücre Aracılı Sitotoksisitenin Değerlendirilmesi (Video) | JoVE Journal

Antikora Bağımlı Hücre Aracılı Sitotoksisite Raportörü Biyotahlil Kullanılarak Kanser Hücrelerinde Antikora Bağımlı, Hücre Aracılı Sitotoksisitenin Değerlendirilmesi

Daha fazla video keşfet