Dişi C57BL/6J Farelerde Psikiyatrik Bozukluklar için Çoklu Entegre Sosyal Stres Modeli

Bu araştırma, çok bütünleşik bir sosyal stres modeli kurarak kronik sosyal stresin dişi farelerde nasıl psikiyatrik semptomlara yol açtığını anlamayı amaçlamaktadır. Psikiyatrik bozukluklar için şu anda mevcut olan modellerin çoğu erkek hayvanlar kullanılarak oluşturulmuştur. Bu protokol, dişi farelerde bu bozuklukları incelemek için tasarlanmış yeni bir fare modeli sunar. Bu çalışma, dişi farelerde psikiyatrik bozuklukların altında yatan nörofizyolojik mekanizmaları araştırmamıza olanak tanıyan güvenilir bir hayvan modeli geliştirmiştir.

[Ekran Okuyucusu] Başlamak için, dişi denek farelerin ve kazanan adayların her bir kafesine 10 santimetre uzunluğunda, 26 milimetre iç çaplı bir akrilik tüp yerleştirin ve üç gün boyunca alışmalarına ve içinden geçmeyi öğrenmelerine izin verin. Fareleri tüp yarışması için eğitmek için, her farenin kuyruğunu nazikçe kavrayın ve masanın üzerine yerleştirin. Ardından, fareyi kuyruğundan tutun ve tüpün bir ucuna yerleştirin. Fare tüpe girdiğinde kuyruğu serbest bırakın ve gönüllü olarak geçmesine izin verin. Şimdi, fareyi tüpün diğer ucuna yerleştirin ve aynı işlemi tekrarlayın. Tüm işlemi bir kez daha tekrarladıktan sonra, fareyi ev kafesine geri koyun. Kazanan taraması için 30 santimetre uzunluğunda, 26 milimetre iç çaplı bir akrilik tüp hazırlayın ve tüpün üzerine görünür bir orta çizgi çizin. Her iki kazanan aday fareyi de kuyruklarından tutun ve tüpün zıt uçlarına yerleştirin. Orta noktaya girmelerine ve buluşmalarına izin verin, ardından aynı anda serbest bırakın ve zamanlayıcıyı başlatın. Kazananı, diğerini tüpten dışarı iten fare olarak belirleyin ve ona bir puan verin. Her iki fareyi de ev kafeslerine geri koyun. Fareleri toplam puanlarına göre sıralayın. CD1 saldırgan taraması için, bir C57 erkek fareyi üç dakika boyunca doğrudan bir CD1 erkeğinin ev kafesine yerleştirin. İlk saldırının gecikme süresini, saldırı sayısını ve üç dakikalık süre içinde saldırgan davranışların süresini saldırganlık göstergeleri olarak kaydedin ve tarama prosedürünü iki gün daha tekrarlayın. Sosyal rekabet başarısızlığı için, tüpün zıt uçlarına çoklu entegre bir sosyal stres veya MISS fare ve bir kazanan fare yerleştirin, böylece ileri doğru yürürler ve orta noktada buluşurlar. MISS fare, kazanan tarafından tüpün dışına itilecektir. İki farenin konumlarını değiştirin ve etkileşimi tekrarlayın. Ardından, hem MISS hem de kazanan fareleri ev kafeslerine geri koyun. Modifiye edilmiş dolaylı sosyal yenilgi stres modellemesi için, agresif etkileşimlerin dolaylı olarak gözlemlenmesine izin vermek için delikli bir akrilik örtünün altına hapsedilmiş bir CD1 saldırganının kafesine dişi bir MISS faresi yerleştirin. CD1 faresi tarafından 10 dakika boyunca fiziksel saldırıya uğramak için bir erkek C57 davetsiz misafir fareyi kafese sokun. 10 dakika sonra, erkek davetsiz misafiri çıkarın ve dişi MISS farenin CD1 faresine beş dakika daha duyusal maruz kalmasına izin verin. Beş dakika sonra, CD1 faresini yeni bir erkek C57 davetsiz misafir faresi ile değiştirin ve tüm prosedürü üç kez tekrarlayın. Ardından, MISS fareyi ev kafesine geri koyun. Ardından, kaçınılmaz aşırı kalabalık stresi modellemek için, yatak takımı içeren standart bir kafesin içine opak bir manşon yerleştirin. 12 ila 15 dişi fareyi, ya tüm MISS fareleri ya da diğer dişilerle karıştırılmış olarak günde 30 dakika boyunca manşonun içine sokun. Sosyal izolasyon için, 10 günlük modelleme süresinin geri kalanında sosyal rekabet başarısızlığı, dolaylı yenilgi stresi veya aşırı kalabalık stresi yaşamadıklarında MISS farelerini bireysel olarak barındırın. Su yerine tatlı bir çözelti tercihini ölçerek anhedoniyi değerlendiren sükroz tercih testi, MISS'e maruz kalan farelerde sükroz tercihinin naif kontrollere kıyasla önemli ölçüde daha düşük olduğunu gösterdi. Hem su hem de sükroz dahil olmak üzere sükroz tercih testindeki toplam sıvı alımı, MISS ve saf fareler arasında önemli ölçüde farklılık göstermedi, bu da azalan sakaroz tercihinin değişen sıvı tüketiminden kaynaklanmadığını gösterdi. Pasif hareketsizliği ölçerek davranışsal umutsuzluğu değerlendiren kuyruk süspansiyon testi, MISS'e maruz kalan farelerin saf farelere göre önemli ölçüde daha uzun hareketsizlik sürelerine sahip olduğunu ortaya koydu. Ek olarak, açık bir arenanın merkezinde geçirilen süreyi ölçerek kaygıyı değerlendirmek için kullanılan açık alan testi, MISS'e maruz kalan farelerin, saf farelere kıyasla merkezi bölgede önemli ölçüde daha az zaman geçirdiğini gösterdi. Açık kollardan kaçınma yoluyla kaygıyı ölçen yükseltilmiş artı labirent, MISS'e maruz kalan farelerin açık kollarda naif kontrollere göre önemli ölçüde daha az zaman harcadığını gösterdi.