İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücrelerden Vasküler Organoid Üretimi

Bu protokol, insan pluripotent kök hücrelerini kullanarak vasküler organoidler oluşturmak için bir yöntem sunar.

Bu çalışma, insan IPSC'lerinden homojen vasküler organoidlerin ölçeklenebilir üretimi için modifiye edilmiş bir yöntem sunmaktadır. Yaklaşım, yeni ROCK inhibitörleri ve mikro kuyu hapsi kullanarak, tekrarlanabilirliği artırır ve partiden partiye varyasyonları en aza indirir, bu da onu aşağı akış morfolojik analizi ve hastalık modelleme uygulamaları için uygun hale getirir. Tek hücreli dizileme teknolojileri, hücresel popülasyonlardaki genomik, epigenomik ve transkriptomik heterojenliği ve dinamikleri çözmek için organoid araştırmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.

Doku temizleme ve ışık tabakası mikroskobu gibi 3D görüntüleme teknolojileri, hücresel morfolojinin ve doku mimarisinin üç boyutlu bir bağlamda hızlı, yüksek çözünürlüklü görüntülenmesini kolaylaştırır. Verim ve standardizasyon, organoid araştırmalarında temel zorluklardır. Manuel taşıma emek yoğundur ve verimi sınırlayarak robotik otomasyonu umut verici bir çözüm haline getirir.

IPSC kalite kontrolü ve farklılaşma protokolü optimizasyonu dahil olmak üzere organoid kültürünün standardizasyonu, tekrarlanabilirliği önemli ölçüde artırabilir ve partiler ve hücre hatları arasındaki varyasyonları en aza indirebilir.