Name: Tümör Hipoksi Değerlendirmesi: Elektron Paramanyetik Rezonans ile İn Vivo 3D Oksijen Görüntüleme (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 7 s
Description: Öğrenin, elektron paramanyetik rezonans görüntüleme ile tümör hipoksisini canlı hayvanlarda nicel olarak değerlendirin. Bu yöntem, kanser tedavilerine yanıtı anlamak ve oksijen haritalaması yapmak için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>EPRI ve Ultrason Kullanılarak Tümör Oksijen Seviyelerinin Klinik Öncesi Görüntülenmesi

<table><tbody><tr><td>aqua pro enjeksiyon</td><td>Polpharma</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>1280610-ArbuzGUI&nbsp;</td><td>O2M</td> <td>Teknolojileri-github</td> <td>deposunda erişilebilir</td></tr><tr><td>disodyum fosfat</td><td>POCH S.A.</td><td></td><td></td>799280115-Dulbecco</tr> <tr><td>ve başbakan; s Modifiye Eagle & Prime; s Orta - yüksek glikoz</td><td>Merck Life Science</td><td>D5648</td><td>4500 mg / L glikoz ve L-glutamin</td></tr><tr><td>fetal sığır serumu&nbsp;</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>10500064-olta teli</td><td>Good Fish</td><td>A-55A-035</td><td>US konum işaretçisi - 0,35 mm</td></tr><tr><td>Geltrex</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td>A1413302</td><td>azaltılmış büyüme faktörü bazal membran matrisi</td></tr><tr><td>ibGUI</td><td>O2M Github</td><td></td> <td>deposunda erişilebilir</td></tr><tr><td>teknolojiler Polpharma Polpharma</td><td></td><td>multipe ürünler kullanıldı</td><td>9 mg/mL</td></tr><tr><td>insülin iğnesi 29 G&nbsp;</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>multipe ürünleri</td><td></td></tr> <tr><td>kullanıldı-Jiva 25</td><td>O2M</td><td></td> <td>Technologies-EPROI</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks-version</td><td></td> <td>R2021b</td></tr><tr><td>penisilin-streptomisin</td><td>Merck Life Science</td><td>P4333</td><td>ile 10.000 ünite penisilin ve 10.000 mg</td></tr><tr><td>potasyum klorür</td><td>POCH S.A.</td><td></td><td>739740114-potasyum</td></tr> <tr><td>dihidrojen fosfat</td><td>POCH SA</td><td></td><td>742020112-ProcessGUI</td></tr> <tr><td></td><td>O2M</td> <td>Teknolojileri-github</td> <td>deposunda erişilebilir</td></tr><tr><td>PTFE boru&nbsp;</td><td>Cole Palmer Instrument Co</td><td>06412-11-sodyum</td><td></td></tr> <tr><td>klorür</td><td>POCH SA</td><td></td><td></td></tr> 794121116-SpecMan4EPR <tr><td></td><td>FEMI</td> <td>Instruments-sürüm</td> <td>3.4 CS 64bit</td></tr><tr><td>Surflash IV Kateter</td><td>Terumo</td><td>SR * FF2419</td><td>boyut: 24G x &frac34; "</td></tr><tr><td>bant</td><td>3M&nbsp;</td><td>multipe ürünler</td><td>mikropore</td></tr><tr><td>Tripsin-EDTA&nbsp;</td><td>Gibco, Thermo Fisher Scientific</td><td></td> <td>25200072-Ultrasonografi</td></tr> <tr><td></td><td>Telemed-Anatomik</td><td></td> <td>US</td></tr><tr><td>jel</td><td>KONIX</td><td>NUG-0019-Vetfluran</td><td></td></tr> <tr><td></td><td>Virbac</td><td>137317</td><td>1000 mg / g</td></tr><tr><td>Vevo F2</td><td>FujiFilms, Visual Sonics-B-modu</td><td></td> <td>ve Doppler</td></tr><tr><td>vinil polisiloksan diş kili&nbsp;</td><td>3M ESPE</td><td>birden fazla ürün kullanıldı</td><td>-</td></tr></tbody></table>

tümör hipoksi değerlendirmesi: elektron paramanyetik rezonans ile İn vivo 3d oksijen görüntüleme 

Tumor Hypoxia Assessment: In Vivo 3D Oxygen Imaging Through Electron Paramagnetic Resonance

İntraskapular yağ yastığında büyüyen bir LN229 tümörünün ultrason görüntüsünden temsili bir kesit, vaskülatür ile birlikte Şekil 5'te gösterilmiştir. Tümör sınırının dışında bazı damar yapıları görülür. Beklenmedik bir şekilde, tümör damar hacmi yüzdesi azalmadı ve tümör büyümesi ile sabit kaldı.
Şekil 2'de belirtildiği gibi, adım 2, her iki görüntü modalitesi için tam olarak aynı konumu sağlamak için farenin tüm aksesuarlarla birlikt...

Tümör Hipoksi Değerlendirmesi: Elektron Paramanyetik Rezonans ile İn Vivo 3D Oksijen Görüntüleme 

The precise and real-time measurement of oxygen partial pressure (pO2) brings valuable information in many pathologies, including cancer. Low tumor pO2 ...

Tedaviye yanıt olarak tümör mikroçevresini ve hipoksinin tümör gelişimindeki rolünü araştırıyoruz. Hipoksi sadece kanserde değil, aynı zamanda kardiyak veya nörolojik bozukluklar gibi diğer birçok patolojide de çok önemlidir. Amacımız, farklı anti-kanser tedavileri ve çeşitli preklinik tümör modelleri bağlamında canlı hayvanların dokularındaki oksijen seviyelerini kantitatif olarak belirlemektir.APR'de sürekli dalga, nabız veya hızlı tarama dahil olmak üzere oksimetrede çeşitli teknikler uygulanır. Bununla birlikte, klinik öncesi nabız görüntüleyici JIVA-25, hassas ve yüksek uzamsal ve oksijen çözünürlüklü 3D tüm vücut oksijen haritalamasını sağlar. Görüntüler dakikalar içinde sorgulanır ve birkaç gün içinde elde edilebilir, bu da dokudaki fizyolojik değişikliklere, PO2'ye karşılık gelir ve ayrıca zamandaki değişiklikleri takip etmeyi sağlar.Elektron paramanyetik rezonans görüntülemenin en büyük zorluklarından biri anatomik referans eksikliğidir. Birçok laboratuvarda, temel anatomik özellikleri elde etmek için MRI veya BT kullanılır. Bununla birlikte, dezavantajı, hayvanın taşınmasının yüksek maliyeti ve gerekliliğidir.Bu sorunları çözmek için ultrasonun kullanımı kolay, taşınabilir ve uygun maliyetli modaliteler olarak kullanılmasını öneriyoruz. Sonuçlarımız, ultrason ve EPR görüntü füzyonunun fizibilitesini göstermektedir, bu da fonksiyonel ve atomik görüntüleri farklı zaman noktalarında karşılaştırma olasılığını ortaya çıkarmaktadır. Örneğin, EPR oksijen haritaları, kontrast madde olarak mikro kabarcıklar kullanılarak ABD doku anatomisi, vasküler ağ veya doku perfüzyonu ile kaydedilebilir.Bu teknoloji, tümörlerdeki hipoksi bölgelerini keşfetmemize ve radyoterapide doz boyamayı tasarlamamıza yardımcı olur. Ayrıca, oksijen mikro kabarcıkları gibi anti-hipoksi tedavilerinin etkinliğinin değerlendirilmesine de izin verir. Oksijen haritalaması, tedavinin erken evresinde tedavi etkinliği ve tedavi için uygun hasta sınıflandırması için bir belirteç olarak da kullanılabilir.Başlamak için, tümör aşılanmış anestezi uygulanmış fareyi hayvan yatağına sabitleyin. Hidrasyonu korumak için fareye deri altına bir mililitre fizyolojik salin uygulayın. Hayvanın kalp atış hızını ve sıcaklığını izlemek için bir solunum yastığı sensörü ve vinil polisiloksan diş kili kullanan bir yüzey termometresi kullanın.Spin probu uygulaması için politetrafloroetilen boruyu intraperitoneal olarak yerleştirin ve karın boşluğundan çıkmasını önlemek için kanülü vinil polisiloksan diş kili kullanarak sabitleyin. Daha sonra atılan spin probunu toplamak için bir idrar kateteri yerleştirin. Anatomik ultrason görüntüleme için, fareyi hayvan yatağının içinde döndürün ve vinil polisiloksan diş kili kullanarak konumunu sabitleyin.Elektron paramanyetik rezonans ölçümünden önce hayvanı 3D kontrollü bir masaya aktarın. Hayvanın güvenli olduğunu ve ısıtma platformuyla temas etmediğini onaylayın. Özellikle doğru kayıt için gerekli olan XZ veya sagital düzlemde dönmeyi önlemek için yatak tutucu konumunu üç boyutta sabitleyin.Ardından, bant üzerinde 0,35 milimetrelik bir olta teli kullanarak, rezonatörün başlangıcını işaretlemek için yatak tutucusuna bir konum işaretleyici yerleştirin. Y eksenine doğru hem eksenel hem de sagital yönlerde bir milimetrelik adımlarla B modu görüntülemeyi manuel olarak gerçekleştirin. Transdüser frekansına özgü parametreleri kullanarak tümör yapısını görüntüleyin.Anatomik ultrason görüntülemesinden sonra, hayvan yatağındaki hareketsiz fareyi derhal elektron paramanyetik rezonansına veya EPR görüntüleyiciye aktarın. Rezonatör içindeki dönüşleri en aza indirmek için hayvan yatağının konumunu dikkatlice koruyun. Hayvanın sıcaklığının sürekli izlenmesini sağlamak için sıcaklık probunu rezonatörün iç sıcaklığıyla hizalayarak yeniden bağlayın.EPR spektrometre yazılımında, frekansı 725 megahertz civarında ortalamak için rezonatörü ayar tekerleği ile ayarlayın. Mikrodalga gücünü optimize etmek için, 60 nanosaniyede bir tepe elde edilene kadar zayıflamayı 20 ila üç desibel arasında ayarlayın. Alayı, hayvan yatağına yerleştirilen referansların serbest indüksiyon bozunmasını manyetik alan içinde ortalayacak şekilde ayarlayın ve buna göre fazlandırın.Daha sonra önceden yerleştirilmiş kanül yoluyla intraperitoneal olarak 100 mikrolitre OXO 71 uygulayın, ardından 50 ila 100 mikrolitre salin solüsyonu ile yıkayın. T1 ve T2 gevşeme süreleri, referans görüntüleme için 3D elektron spin yankısı ve hayvanı görüntülemek için 4D inversiyon geri kazanım elektron spin ekosu dahil olmak üzere belirli parametrelerle ölçümler elde etmek için programlanmış bir Q dizisi kullanın. Görüntülemeden sonra, veri analizi yapın ve tümör maskesini farenin oksijen kısmi basınç haritası içinde görselleştirin ve her voksel için değerleri dışa aktarın.Ultrason kesiti, LN 229 tümörünün intraskapular yağ yastıkçığında büyüdüğünü ve tümör sınırının hem içinde hem de dışında vaskülatür olduğunu gösterdi. Tümör ultrason B-mod görüntüleri, tümör yüzeyini ve EPR-OI ile hizalama belirteçlerini gösteren anatomik bir referans sağladı. 3D oksijen kısmi basınç haritasının kesitsel görüntüleri, tümör içinde daha fazla hipoksik alan ve görüntünün altında oldukça hipoksik bir fiducial işaretleyici ile kayda değer oksijen seviyesi heterojenliği gösterdi.Farklı boyutlardaki tümörlerin görüntüleri, daha büyük tümörlerin daha fazla voksel içerdiğini, en küçük tümörün ise yetersiz spin prob konsantrasyonu nedeniyle optimal olmayan bir oksijen kısmi basınç haritası gösterdiğini gösterdi.

tumor-hypoxia-assessment-vivo-3d-oxygen-imaging-through-electron

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kanser Araştırmaları

Bu protokol, elektron spin rezonans mikroskobu ile canlı hücreler hemen ortamda oksijen konsantrasyonu mikron ölçekli üç boyutlu görüntüleme için bir yöntem açıklanır.

Elektron Spin Rezonans Oksijen Haritalama için Canlı Türlerinin Micro-görüntüleme

Hipoksi indüklenebilir faktör-1α aktivite Biyoparlaklık görüntüleme, bir meme kanseri beyin metastazı fare modeli intrakranial tümör hipoksi gelişimini izlemek için uygulanır.

Meme Kanseri Beyin metastaz tümör Hipoksi Dynamics in vivo Biyoparlaklık Görüntüleme Fare Modeli

Burada doğrudan fare kortekste microregional doku hipoksisi görselleştirmek için bir yöntem...

Endojen NADH Floresans iki-foton Imaging tarafından Fare Serebral Korteks olarak Microregional Hipoksi Algılama

Bu el yazması, tümör hipoksisinin metastaz üzerindeki etkilerinin doğrudan test edilmesine ve etki mekanizmalarının deşifre edilmesine izin veren bir hayvan modelinin geliştirilmesini açıklamaktadır. Burada açıklanan deneyler Ewing sarkomuna odaklansa da, benzer bir yaklaşım diğer tümör tiplerine de uygulanabilir.

Tümör metastaz üzerinde Hipoksi Test Etkisinin Vivo Modeli

Fizyolojik açıdan önemli tümör microenvironment meme kanserinin fare modellerinde parametrelerinde değerlendirilmesi için düşük-alan (L-band, 1.2 GHz) elektron paramagnetic rezonans çözünür nitroxyl ve trityl sonda kullanarak gösterilmiştir.

Vivo EPR pH, pO2, Redox durumu ve fosfat konsantrasyonları ve glutatyon tümör Microenvironment olarak değerlendirilmesi

Protokol, standart bir floresan mikroskobunda oksijenasyonlarının ve hücre ölümlerinin çok parametrik analizini kullanarak biyobaskı için yüksek verimli sferoid üretimini tanımlar. Bu yaklaşım, sferoidlerin yaşayabilirliğini kontrol etmek ve 3D doku, tümör mikroçevresi ve başarılı (mikro) doku biyofabrikasyonunun modellenmesinde önemli olan standardizasyonu gerçekleştirmek için uygulanabilir.

Çok Hücreli Sferoidlerin Uygun Fiyatlı Oksijen Mikroskobu Destekli Biyofabrikasyonu

Burada, hepatik arter ligasyonu olan ve olmayan ortopik hepatosellüler karsinom ksenogreftleri oluşturmak ve [18 F]Floromisonidazol ([18 F]FMISO) ve [18 F]Florodeoksiglukoz ([18F]FDG) kullanılarak tümör hipoksisinin non-invaziv pozitron emisyon tomografisi (PET) görüntülemesini gerçekleştirmek için bir protokol sunuyoruz.

Hepatosellüler Karsinomun Ortotopik Fare Modelinde Non-İnvaziv PET/MR Görüntüleme

Burada, kanser ve yara iyileşmesinin klinik öncesi modellerini değerlendirmek için Oksijen Duyarlı – Dinamik Kontrastlı Optoakustik Görüntüleme (OS-DCE OAI) uygulamak için bir protokol sunuyoruz. OS OAI, oksi ve deoksihemoglobini görüntüleyebilir, doku oksijenlenmesini haritalayabilir. DCE-OAI, dıştan bir kontrast ajanın farmakokinetiklerini görebilir, böylece damar perfüzyonu haritalanır.

OS-DCE OAI kullanılarak kanser ve yara iyileşmesinin pre-klinik modellerinde oksijenasyon ve damar perfüzyonun değerlendirilmesi

Bu iletişim kuralı insan akciğer tümörü dilimleri içinde fluorescently eşleşmiş antikorlar ile etiketli görüntü ikamet tümör infiltre CD8 T hücreleri bir yöntem açıklanır. Bu teknik CD8 T hücre göç confocal mikroskobu kullanarak gerçek zamanlı analiz izin verir.

Ex Vivo İnsan akciğer tümörü içinde ikamet CD8 T lenfositlerin görüntüleme Confocal mikroskobu kullanma dilim

Biz kanseri metastaz preklinik vivo içinde takibi için bir iletişim kuralı tanımlamak. Non-invaziv [18F] tetrafluoroborate-evde beslenen hayvan ve aerodinamik ex vivo onay floresan bir protein tarafından algılanan sodyum iyodür simporter birleştiren bir radyonüklid Floresans muhabir dayanmaktadır. Preklinik in vivo hücre tümör biyolojisi izleme için uygun bir yöntemdir.

Kemirgen tümör modelleri ilerlemesinde tümör izlemek için Imaging radyonüklid Floresans muhabir gen

Öğrenin, elektron paramanyetik rezonans görüntüleme ile tümör hipoksisini canlı hayvanlarda nicel olarak değerlendirin. Bu yöntem, kanser tedavilerine yanıtı anlamak ve oksijen haritalaması yapmak için kullanılır.

Tümör Hipoksi Değerlendirmesi: Elektron Paramanyetik Rezonans ile İn Vivo 3D Oksijen Görüntüleme

Daha fazla video keşfet