Name: Küçük hacimli bir odada yüksek çözünürlüklü respirometri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-25T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 8 s
Description: Öğrenin, 0,5 mL hacimli küçük oda kullanarak yüksek çözünürlüklü respirometri ile mitokondriyal fonksiyon analizini. Bu yöntem, sınırlı örnek hacimlerinde doğru oksijen tüketimi ölçümleri sağlar ve mitokondriyal hastalık teşhisi ile ilaç geliştirme çalışmalarına katkıda bulunur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

İnsan trombositleri üzerine yapılan çalışma için, sekiz gönüllü, İsveç Etik İnceleme Kurumu (Nr. 2013/181) tarafından onaylanan çalışmaya katılmak için yazılı bilgilendirilmiş onam verdi. Erkek yenidoğanlardan alınan iki insan derisi fibroblast hücre hattı ATCC'den satın alındı ve Çek Cumhuriyeti Sağlık Bakanlığı'nın etik onayına göre kullanıldı (proje: AZV MZ CR NU22-07-00474). Fareleri içeren prosedürler, Avusturya Hayvan Deneyleri Yasası'na ve Deneysel ve Diğer Bilimsel Amaçlarla Kullanılan Omurgalı Hayvanların Korunmasına İlişkin Avrupa Sözleşmesi'ne uygun olarak yürütülmüştür (Tierversuchsgesetz 2012; 2010/63/EU sayılı Direktif; BMWFM-66.011/0128-WF/V/3b/2016). Deney hayvanlarının sayısını en aza indirmek için 3R prensibi uygulandı.
1. Hacim kalibrasyonu
<ol>
	<li>Küçük hacimli odaları (sV) veya klasik hacimli odaları (cV) Oroboros'a monte edin (Şekil 1A,B; Tablo 1).</li>
	<li>Oroboros'u açın ve DatLab'a bağlanın.</li>
	<li>Odaları kurutun.</li>
	<li>SV'ye(0.50 mL etkili deneysel hacim artı 0.04 mL kılcal ölü hacim) 0.54 mL H2O veyacV'ye (2.00 mL etkili hacim artı 0.07 mL kılcal ölü hacim) 2.07 mL H 2 O pipetleyin. NOT: Cam silindirin üst kısmı ile polioksimetilen (POM) hazne tutucusu arasında sıvı kaybını önlemek için, pipet ucunu cam haznenin duvarına değecek kadar derine sokun.</li>
	<li>Karıştırıcıları açın .</li>
	<li>Hazneyi kapatmadan önce, kılcal damarlarını kuru tutarken tıpaların O-ringlerini nemlendirin. Hacim kalibrasyon halkalarını gevşetin ve tıpa kılcal damarını sıvı doldurana ve kılcal damarın üst ucundaki yuvada küçük bir damla görünene kadar tıpaları aşağı doğru itin (Tablo 1).</li>
	<li>Hacim kalibrasyon halkalarını, kalibre edilen hacim, durdurucuların ardışık yerleştirilmelerinde elde edilecek şekilde konumlarını sabitlemek için sıkın.</li>
</ol>
2. Oroboros genel ayarı
<ol>
	<li>DatLab yazılımını başlatın.</li>
	<li>Deney sıcaklığını (37 °C) ve karıştırma dönüş hızını Hazne sV'de 550 rpm'ye (9.2 Hz veya sn başına devir) veya cV Haznesinde 750 rpm'ye (12.5 Hz) ayarlayın. EnstrümantalO 2 arka plan testlerinde 80 sn (40 veri noktası) veya respirometri için 40 sn (20 veri noktası) üzerinde yumuşatma ile veri örnekleme aralığını 2 sn olarak ayarlayın. NOT: Manyetik karıştırma çubukları (poliviniliden diflorür [PVDF] ile kaplanmış AlNiCo; Tablo 1) haznedeki karıştırıcı seviyesinde 3.5 mT alan kuvvetine sahip darbeli dönen bir manyetik alan ile çalkalanır.</li>
	<li>MiR28'te veya sonraki deneylerde kullanılan aynı inkübasyon ortamında hava kalibrasyonu 05 gerçekleştirin.</li>
	<li>Deneylere başlamadan hemen önce ara sıra sıfır oksijen kalibrasyonu yapın, ancak asla hemen yapmayın.<ol>
		<li>O2-Sıfır Tozunu 50 mM fosfat tamponunda (pH 8.0)SV veya CV odaları için sırasıyla 2.5 mM veya 10 mM'lik bir konsantrasyona çözerek taze bir Na-ditiyonit stok çözeltisi hazırlayın.</li>
		<li>O2 konsantrasyonunda 0 μM14,28 ham sinyali R0 veya sıfır akımı [μA] elde etmek için fazla Na-ditiyonit titre edin.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Enstrümantal O2 arka plan testi
<ol>
	<li>Oda sV
	<ol>
		<li>Hava kalibrasyonundan sonra hazneyi kapatın. O2 konsantrasyonu hava doygunluğundan yaklaşık 150 μM'ye düşene kadar oksijen sinyalini yaklaşık 60 dakika izleyin. 'O2 eğim negatif' grafiğinde J°1 ila J°4 arasında dört işaret ayarlayın. NOT: Bir deneye başlamadan önce bu enstrümantal O2 arka plan testini her gün gerçekleştirin.</li>
		<li>İSTEĞE BAĞLI: Bir Hamilton şırınga ile, 100 μM'lik birO2 konsantrasyonuna ulaşmak için adım 2.4.1'e göre hazırlanan Na-ditiyoniti titre edin (Şekil 1C). NOT: Başka bir protokolde, Na-ditiyonit, titrasyon enjeksiyonlu mikro pompa (TIP2k; Ek Şekil 1 ve Ek Şekil 2), enstrümantal arka plan O2 akısını belirlemek için standart bir yöntemle karşılaştırma için28.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Oda cV
	<ol>
		<li>Hava kalibrasyonundan sonra, hazneyi kapatın, O2 eğiminin stabilizasyonunu bekleyin ve 'O1 eğimi neg.'28 grafiğine J°28 işaretini ayarlayın. Bir Hamilton şırınga ile, adım 2.4.1'e göre hazırlanan Na-ditiyoniti titre edin. Odanın V oksijen rejimine uymasıiçin 0,7 μL'lik adımlarla ve O2 konsantrasyonunu 150 μM'ye düşürün.</li>
		<li>O2 konsantrasyonunu 100 μM'ye düşürmek için başka bir Na-ditiyonit titrasyon adımı (yaklaşık 7 μL) ekleyin (Şekil 1D).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Enstrümantal O2 arka plan veri analizi<ol>
		<li>DatLab28'de enstrümantal O2 arka plan eğimini hesaplayın. Üst menüden Flux/Slope'u seçin.</li>
		<li>O2 arka plan düzeltme penceresini açın. O2 arka planının kaynağı olarak Aktif Dosya'yı seçin ve doğrusal regresyonun hesaplanması için kullanılacak J° işaretlerini seçin. O2 arka plan düzeltmesini uygulayın.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67442/67442fig1v2.jpg"> 
Şekil 1: Küçük hacimli (sV) ve klasik hacimli (cV) odalar ve enstrümantal O2 arka plan testi. (A) Oda sV. (B) Oda cV. (C) Eğim negatif ve J°1 işaretlerinin temsili izleri, sV (0,5 mL; yeşil) ve cV (2,0 mL; mavi). (D) Karşılık gelen oksijen konsantrasyonu ve R1 işaretleri. Üç manuel Na-ditiyonit titrasyonu (yaklaşık 0,7 μL, 10 mM stok; cV) ve sV ve cV odasında sırasıyla 2,5 mM ve 10 mM stokun son 7,0 μL titrasyonu. Titrasyonların neden olduğu ani yükselmeler ortadan kaldırıldı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67442/67442fig1v2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
4. Oroboros odalarına numune eklenmesi
NOT: Numune, odaya iki yöntemle eklenebilir: kısmi hacim replasmanı (bu çalışmada trombositler ve fibroblastlar) veya tam hacim replasmanı (bu çalışmada izole mitokondri).
<ol>
	<li>Kısmi hacim değişimi<ol>
		<li>Tam olarak yerleştirilmiş durdurucuyu çıkarın. MiR05'ten bir hacim V pipetleyin ve atın. Vçıkışı, trombositler için 60-70 μL ve fibroblastlar için 80-150 μL'dir ve stok hücre süspansiyonundaki hücre konsantrasyonlarına göre hesaplanır.</li>
		<li>Vçıkışına eşdeğer olarak, aynı hacimde VJ.i stok hücre süspansiyonunu (bilinen hücre konsantrasyonu ile) hazneye pipetleyin (Şekil 2).</li>
		<li>Etkili deney hacmi V'den (0.54 mL ve 2.07 mL) daha büyük olan gerçek hacim V'deki (0.5 mL ve 2.0 mL) deneysel hücre konsantrasyonunu hesaplayın. NOT: Stok hücre süspansiyonunun ve deneysel hücre konsantrasyonunun konsantrasyonları, küçük bir titrasyon hatasıyla uyumlu VJ.i = Vout hacimleri elde etmek için planlanmalıdır. Trombositlerle yapılan deneylerde, 0.05 mL'lik bir kılcal ölü hacme sahip Chamber sV için bir prototip durdurucu kullanıldı.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Komple hacim değişimi<ol>
		<li>Tüm ortamı odadan sifonlayın vesırasıyla SV veya CV odalarındaki deneysel numune konsantrasyonunda en az 0.54 mL veya 2.07 mL izole mitokondri stok çözeltisi ile değiştirin.</li>
		<li>Hazneyi kapatın ve fazla mitokondriyal stok çözeltisini durdurucu hazneden sifonlayın. NOT: Tam hacim değişimi, bir Hamilton şırınga ile durdurucu kılcal damar yoluyla kapalı odaya titre edilmesiyle oluşabilecek mitokondriyal konsantrasyondaki herhangi bir değişkenliği içermez. İkinci yöntem, konsantre stok süspansiyonlarında (örneğin, izole edilmiş mitokondri) hazırlanan küçük çaplı numunelere uygulanabilir; bununla birlikte, kırılgan hücreleri, Hamilton şırıngasının 51 mm uzunluğundaki iğnesine (0,41 mm iç çap) uygulanan kesme kuvvetleri tarafından plazma zarlarının potansiyel hasarına maruz bırakır. Bu, durdurucunun çıkarılması ve numunenin kısmi veya tam hacim değişimi ile hazneye pipetlenmesiyle önlenir. Üç tip mitokondriyal preparat incelenmiştir. Numune hazırlıkları Ek Dosya 1 1,26,29,30'da açıklanmıştır.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Canlı hücreler: insan trombositleri<ol>
		<li>Trombosit içeren kriyoviyalleri 37 °C'de bir su banyosuna yerleştirin ve içeriği çok az buz kalana kadar çözün.</li>
		<li>Kriyoviyalleri açın ve 1 mL önceden ısıtılmış ortamı (DPBS + 10 mM EGTA, 37 °C) yavaşça damlalar halinde ekleyin.</li>
		<li>Trombositleri nazikçe karıştırın ve toplam hacmi 10 mL önceden ısıtılmış ortam (DPBS + 10 mM EGTA, 37 °C) olan 50 mL'lik bir santrifüj tüpüne aktarın. Açılır bir rotor (hızlanma 6, fren 2) kullanarak oda sıcaklığında (RT) 1000 g'da 10 dakika santrifüjleyin.</li>
		<li>Trombositleri 0.25 mL DPBS + 10 mM EGTA (RT) içinde yeniden süspanse edin ve bunları 157 · arasında değişen bir başlangıç deneysel hücre konsantrasyonuna kısmi hacim replasmanı ile odalara ekleyin. 106 ila 210 · 106 x·mL-1 0.5 mL haznede ve 164 · 106 ila 220 · 106 x·mL-1 2.0 mL haznede (x temel ünitesi ile ilgili ayrıntılar için bkz.31). NOT: Bir Oroboros, sırasıyla A ve B konumlarında sV ve cV odası ile donatılmıştı ve sırasıyla B ve A konumlarında sV ve cV odası ile donatılmış başka bir Oroboros ile paralel olarak kullanılıyordu.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Geçirgen hücreler: insan fibroblastları<ol>
		<li>Hücreleri, 0.75 · 'lik bir nominal hücre konsantrasyonuna kısmi hacim değişimi ile Oroboros odalarına ekleyin Her iki oda tipinde 106 x·mL-1 ve gerçek konsantrasyonu hesaplayın (adım 4.1.3). NOT: Farklı Oroboros cihazları paralel olarak kullanıldı ve her biri sV veya cV odaları ile donatıldı.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>İzole mitokondri: fare kalbi<ol>
		<li>5985 μL mitokondriyal solunum ortamına (MiR05) 15 μL mitokondriyal süspansiyon ekleyin, bu da 0.013-0.026 mg∙mL-1 arasında değişen bir stok mitokondriyal protein konsantrasyonu ile sonuçlanır.</li>
		<li>Mitokondriyal süspansiyonu, tam hacim değişimi ile Oroboros odalarına ekleyin. NOT: Bir Oroboros, sırasıyla A ve B konumlarında sV ve cV odası ile donatılmıştı ve sırasıyla B ve A konumlarında sV ve cV odaları ile donatılmış başka bir Oroboros ile paralel olarak kullanılıyordu.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67442/67442fig02.jpg"> 
Şekil 2: Kısmi hacim değişimi ile hücre süspansiyonunun eklenmesi. (A) 0.5 mL Hazne sV ve (B) 2.0 mL Hazne cV'ye ilave. (1) Enstrümantal arka planO2 akı JO2 ° ölçümü için solunum ortamı V hacimleri ve dolu durdurucu kılcal Vstc ile kapalı oda. (2) Durdurucu çıkarıldı, Vstc hazneye boşaltıldı ve toplam hacim V'= V+Vstc ile sonuçlandı. (3) Ortamın kısmen kaldırılması Vçıkışı = -V J.i. Odada bir hacim V''= V'+Vçıkışı kalır. (4) Respirometrik stok hücre süspansiyonunun V J.i hacmine sahip alt numunenin hazneye pipetlenmesi, toplam hacim V# = V+Vstc seyreltilmiş hücre süspansiyonu ile sonuçlanır. (5) Deneysel bir hacim V'de hacme özgü O2 akısı JV, O2 ölçümü için doldurulmuş durdurucu kılcal (ölü hacim Vstc) kapalı oda. Bu rakam, HRR 2'deki Hücre sayımı ve normalizasyondaki Şekil41A'dan değiştirilmiştir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67442/67442fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
5. SUIT protokolleri
<ol>
	<li>Ek Tablo 1'de listelenen kimyasalların stok çözeltilerini Hamilton mikroşırıngaları ile odalara titre edin, titrasyon hacimlerini sV ve cV odalarında aynı deneysel konsantrasyonları elde edecek şekilde ayarlayın (Şekil 6, 8, 10'daki şekil açıklamalarına bakınız).</li>
	<li>SUIT-003_D018 32,33 protokolünü seçin (bu çalışmadaki trombositler için).</li>
	<li>SUIT-001_D004 4,15,34,35 ve SUIT-002_D007 4,15,35,36 protokollerini seçin (bu çalışmadaki fibroblastlar için).</li>
	<li>SUIT-002_D005 4,15,35,37 protokolünü seçin (bu çalışmada izole mitokondri için).</li>
</ol>
6. SUIT veri analizi
<ol>
	<li>DatLab'da, seçilen grafiklerin bölümlerini tanımlamak için işaretleri ayarlayın.</li>
	<li>Üst menüden Flux/Slope'u seçin. Akı/Eğim penceresini açın. SUIT protokolündeki her titrasyonda askıda kalan numunelerin seyreltilmesi için titrasyon hacmi düzeltmesini uygulayın.</li>
	<li>Üst menüden İşaretler'i seçin. Artık oksijen tüketiminin (rox) çıkarılmasıyla düzeltilen referans değer olarak düzeltilen işaretli veri noktalarının medyanını göstermek için İşaret istatistikleri'ni açın.</li>
	<li>Bir elektronik tablo kullanarak ters regresyon analizi25,28 ile sV ve cV odalarında elde edilen eşleştirilmiş sonuçlar arasındaki kesişme ve eğimi hesaplayın.</li>
	<li>SV ve cV odalarındaki rox durumundaki (minimum O2 akısı) solunum hızlarını, jamovi 2.3.1338 yazılımını kullanarak eşleştirilmiş bir Öğrenci t-testi ile karşılaştırın. NOT: Bir Oroboros cihazındaki iki oda işlevsel olarak bağımsız olduğundan (sıcaklık ve DatLab kayıt aralıkları hariç), her odadaki ölçümler, farklı cihazların kullanılmasına benzer şekilde ayrı ayrı düşünülebilir. Nihai sonuçlar, değişkenlikleri hakkında bilgi içeren birden fazla odanın medyanları veya ortalamaları olarak rapor edilebilir.</li>
</ol>

<meta charset="utf8"></head><body>Mitokondriyal Yüksek Çözünürlüklü Respirometri için Oda Hacimlerini Keşfetme

<ol><li>Zdrazilova, L., Hansikova, H., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparable+respiratory+activity+in+attached+and+suspended+human+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Comparable respiratory activity in attached and suspended human fibroblasts.</a> PLoS ONE. 17 (3), e0264496(2022).</li>
<li>Schöpf, B., et al. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32198407/">OXPHOS remodeling in high-grade prostate cancer involves mtDNA mutations and increased succinate oxidation.</a> Nat Commun. 11 (1), 1487(2020).</li>
<li>Meszaros, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+predictive+value+of+graft+viability+and+bioenergetics+testing+towards+the+outcome+in+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+International%22%5BJournal%5D)">The predictive value of graft viability and bioenergetics testing towards the outcome in liver transplantation.</a> Transplant International. 37, 12380(2024).</li>
<li>Doerrier, C., Garcia-Souza, L. F., Krumschnabel, G., Wohlfarter, Y., Mészáros, A. T., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+fluorespirometry+and+OXPHOS+protocols+for+human+cells%2C+permeabilized+fibers+from+small+biopsies+of+muscle%2C+and+isolated+mitochondria%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">High-resolution fluorespirometry and OXPHOS protocols for human cells, permeabilized fibers from small biopsies of muscle, and isolated mitochondria.</a> Methods Mol Biol. 1782, 31-70 (2018).</li>
<li>Gnaiger, E., Steinlechner-Maran, R., Méndez, G., Eberl, T., Margreiter, R. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8746845/">Control of mitochondrial and cellular respiration by oxygen.</a> J Bioenerg Biomembr. 27 (6), 583-596 (1995).</li>
<li>Gnaiger, E., Méndez, G., Hand, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+phosphorylation+efficiency+and+depression+of+uncoupled+respiration+in+mitochondria+under+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">High phosphorylation efficiency and depression of uncoupled respiration in mitochondria under hypoxia.</a> Proc Natl Acad Sci. 97 (20), 11080-11085 (2000).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14713113/">Oxygen Conformance of Cellular Respiration.</a> Hypoxia. Advances in Experimental Medicine and Biology. Roach, R. C., Wagner, P. D., Hackett, P. H. , Springer. Springer, Boston, MA. (2003).</li>
<li>Harrison, D. K., Fasching, M., Fontana-Ayoub, M., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytochrome+redox+states+and+respiratory+control+in+mouse+and+beef+heart+mitochondria+at+steady-state+levels+of+hypoxia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cytochrome redox states and respiratory control in mouse and beef heart mitochondria at steady-state levels of hypoxia.</a> J Appl Physiol. 119 (10), 1210-1218 (2015).</li>
<li>Pesta, D., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-resolution+respirometry%3A+OXPHOS+protocols+for+human+cells+and+permeabilized+fibers+from+small+biopsies+of+human+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">High-resolution respirometry: OXPHOS protocols for human cells and permeabilized fibers from small biopsies of human muscle.</a> Methods Mol Biol. 810, 25-58 (2012).</li>
<li>Komlódi, T., Cardoso, L. H. D., Doerrier, C., Moore, A. L., Rich, P. R., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://www.bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/komlodi_2021_q">Coupling and pathway control of coenzyme Q redox state and respiration in isolated mitochondria.</a> Bioenerg Commun. 2021.3, (2021).</li>
<li>Suomalainen, A., Nunnari, J. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38788685/">Mitochondria at the crossroads of health and disease.</a> Cell. 187 (11), 2601-2627 (2024).</li>
<li>Cardoso, L. H. D., et al. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/39424161/">Fatty acid β-oxidation in brain mitochondria: Insights from high-resolution respirometry in mouse, rat and Drosophila brain, ischemia and aging models.</a> Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 1871, 167544(2025).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11718759/">Bioenergetics at low oxygen: dependence of respiration and phosphorylation on oxygen and adenosine diphosphate supply.</a> Respir Physiol. 128 (3), 277-297 (2001).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://books.google.at/books?id=JMlo1CuofE4C&dq=Gnaiger+E+(2008)+Polarographic+oxygen+sensors,+the+oxygraph+and+high-resolution+respirometry+to+assess+mitochondrial+function.+In:+Mitochondrial+dysfunction+in+drug-induced+toxicity+(Dykens+JA,+Will+Y,+eds)+John+Wiley+%26+Sons,+Inc,+Hoboken,+NJ:327-52.&lr=&source=gbs_navlinks_s">Polarographic Oxygen Sensors, the Oxygraph and High-Resolution Respirometry to Assess Mitochondrial Function.</a> Mitochondrial dysfunction in drug-induced toxicity. Dykens, J. A., Will, Y. , John Wiley & Sons, Inc. Hoboken, NJ. 327-352 (2008).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/gnaiger_2020_mitopathways">Mitochondrial pathways and respiratory control. An Introduction to OXPHOS analysis.</a> Bioenerg Commun. 2020.2, (2020).</li>
<li>Diaz, E. C., Adams, S. H., Weber, J. L., Cotter, M., Børsheim, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevated+LDL-C%2C+high+blood+pressure%2C+and+low+peak+VO%E2%82%82+associate+with+platelet+mitochondria+function+in+children-The+Arkansas+Active+Kids+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Mol+Biosci%22%5BJournal%5D)">Elevated LDL-C, high blood pressure, and low peak VO₂ associate with platelet mitochondria function in children-The Arkansas Active Kids Study.</a> Front Mol Biosci. 10, 1136975(2023).</li>
<li>Ehinger, J. K., Morota, S., Hansson, M. J., Paul, G., Elmér, E. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25893255/">Mitochondrial dysfunction in blood cells from amyotrophic lateral sclerosis patients.</a> J Neurol. 262 (6), 1493-1503 (2015).</li>
<li>Heimler, S., et al. <a target="_blank" href="http://bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/heimler_2022">Platelet bioenergetics are associated with resting metabolic rate and exercise capacity in older adult women.</a> Bioenerg Commun. 2022.2, (2022).</li>
<li>Palacka, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+mitochondrial+bioenergetics+reprogramming+in+patients+with+urothelial+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Platelet mitochondrial bioenergetics reprogramming in patients with urothelial carcinoma.</a> Int J Mol Sci. 23 (1), 388(2021).</li>
<li>Fischer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+respiration+in+response+to+iron+deficiency+anemia%3A+Comparison+of+peripheral+blood+mononuclear+cells+and+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Metabolites%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial respiration in response to iron deficiency anemia: Comparison of peripheral blood mononuclear cells and liver.</a> Metabolites. 12 (3), 270(2022).</li>
<li>JedIicka, J., et al. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36647911/">Impact of aging on mitochondrial respiration in various organs.</a> Physiol Res. 71 (Suppl. 2), S227-S236 (2022).</li>
<li>Westerlund, E., et al. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38439844/">Correlation of mitochondrial respiration in platelets, peripheral blood mononuclear cells and muscle fibers.</a> Heliyon. 10 (5), e26745(2024).</li>
<li>Hütter, E., Renner, K., Pfister, G., Stöckl, P., Jansen-Dürr, P., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Senescence-associated+changes+in+respiration+and+oxidative+phosphorylation+in+primary+human+fibroblasts%5BTitle%5D)+AND+%22Biochem+J%22%5BJournal%5D)">Senescence-associated changes in respiration and oxidative phosphorylation in primary human fibroblasts.</a> Biochem J. 380 (3), 919-928 (2004).</li>
<li>Yépez, V. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((OCR-Stats%3A+Robust+estimation+and+statistical+testing+of+mitochondrial+respiration+activities+using+Seahorse+XF+Analyzer%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">OCR-Stats: Robust estimation and statistical testing of mitochondrial respiration activities using Seahorse XF Analyzer.</a> PLoS One. 13 (7), e0199938(2018).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/Gnaiger_2021_MitoFit_BCA">Bioenergetic cluster analysis - mitochondrial respiratory control in human fibroblasts.</a> MitoFit Preprints. 2021.8, (2021).</li>
<li>Palmer, J., Tandler, B., Hoppel, C. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/925018/">Biochemical properties of subsarcolemmal and interfibrillar mitochondria isolated from rat cardiac muscle.</a> J Biol Chem. 252, 8731-8739 (1977).</li>
<li>Lai, N. M., Kummitha, C., Rosca, M. G., Fujioka, H., Tandler, B., Hoppel, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+mitochondrial+subpopulations+from+skeletal+muscle%3A+Optimizing+recovery+and+preserving+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Physiol%22%5BJournal%5D)">Isolation of mitochondrial subpopulations from skeletal muscle: Optimizing recovery and preserving integrity.</a> Acta Physiol. 225 (2), e13182(2019).</li>
<li>Baglivo, E., Cardoso, L. H., Cecatto, C., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://www.bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/baglivo_2024">Statistical analysis of instrumental reproducibility as internal quality control in high-resolution respirometry.</a> Bioenerg Commun. 2022.8, (2022).</li>
<li>Mela, L., Seitz, S. <a target="_blank" href="https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/007668797955006X?via%3Dihub">Isolation of mitochondria with emphasis on heart mitochondria from small amounts of tissue.</a> Methods Enzymol. 55, 39-46 (1979).</li>
<li>Cardoso, L. H. D., Doerrier, C., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/cardoso_2021_mgg">Magnesium Green for fluorometric measurement of ATP production does not interfere with mitochondrial respiration.</a> Bioenerg Commun. 2021.1, (2021).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://doi.org/10.26124/becprep.2025-0004">The elementary unit — count and numbers in the International System of Units.</a> BEC preprints. , (2025).</li>
<li>Vernerova, A., et al. <a target="_blank" href="https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/34944675/">Mitochondrial respiration of platelets: Comparison of isolation methods.</a> Biomedicines. 9 (12), 1859(2021).</li>
<li>Oroboros Instruments SUIT-003 O2 ce-pce D018. , 
 <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-003_O2_ce-pce_D018">https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-003_O2_ce-pce_D018</a> (2024).</li>
<li>Oroboros Instruments SUIT-001 O2 ce-pce D004. , 
 <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-001_O2_ce-pce_D004">https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-001_O2_ce-pce_D004</a> (2024).</li>
<li>Timón-Gómez, A., et al. <a target="_blank" href="https://doi.org/10.1113/EP092792">Bioenergetic profiles and respiratory control in mitochondrial physiology: Precision analysis of oxidative phosphorylation.</a> Exp Physiol. , 1-33 (2025).</li>
<li>Oroboros Instruments SUIT-002 O2 ce-pce D007. , 
 <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-002_O2_ce-pce_D007">https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-002_O2_ce-pce_D007</a> (2024).</li>
<li>Oroboros Instruments SUIT-002 O2 mt D005. , 
 <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-002_O2_mt_D005">https://wiki.oroboros.at/index.php/SUIT-002_O2_mt_D005</a> (2024).</li>
<li>The Jamovi Project jamovi (Version 2.3.13). , 
 <a target="_blank" href="https://www.jamovi.org/">https://www.jamovi.org/</a> (2024).</li>
<li>Gnaiger, E. <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/images/3/3f/Gnaiger_1983_POS_preface.pdf">Preface: A biologist´s view.</a> Polarographic Oxygen Sensors. Aquatic and Physiological Applications. Gnaiger, E., Forstner, H. , Berlin, Heidelberg, New York. Springer. V-VII (1983).</li>
<li>Hütter, E., Renner, K., Jansen-Dürr, P., Gnaiger, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biphasic+oxygen+kinetics+of+cellular+respiration+and+linear+oxygen+dependence+of+antimycin+A+inhibited+oxygen+consumption%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Rep%22%5BJournal%5D)">Biphasic oxygen kinetics of cellular respiration and linear oxygen dependence of antimycin A inhibited oxygen consumption.</a> Mol Biol Rep. 29 (1/2), 83-87 (2002).</li>
<li>Oroboros Instruments Cell count and normalization in HRR. , 
 <a target="_blank" href="https://wiki.oroboros.at/index.php/Cell_count_and_normalization_in_HRR">https://wiki.oroboros.at/index.php/Cell_count_and_normalization_in_HRR</a> (2020).</li>
<li>Williams, O., Sergent, S. R. <a target="_blank" href="https://europepmc.org/article/nbk/nbk557800">Histology Platelets</a>. , StatPearls Pubs. Treasure Island, FL. (2022).</li>
<li>Donnelly, C., et al. <a target="_blank" href="https://www.bioenergetics-communications.org/index.php/bec/article/view/donnelly_2022">The ABC of hypoxia - what is the norm.</a> Bioenerg Commun. 2022.12.V2, (2022).</li>
<li>Aguirre, E., Rodríguez-Juárez, F., Bellelli, A., Gnaiger, E., Cadenas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+model+of+the+inhibition+of+respiration+by+endogenous+nitric+oxide+in+intact+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Kinetic model of the inhibition of respiration by endogenous nitric oxide in intact cells.</a> Biochim Biophys Acta. 1797 (5), 557-565 (2010).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Anaconda3</td><td>Anaconda Yazılım Dağıtım</td><td>https://www.anaconda.com/</td> <td>yazılım</td></tr><tr><td>ADP</td><td>Merck, Almanya</td><td>117105</td><td></td></tr><tr><td>Antibiyotikler-antimikotikler 100x</td><td>Biosera, Fransa</td><td>XC-A4110</td><td>DİKKAT H317 Alerjik cilt reaksiyonuna neden olabilir</td></tr><tr><td>Antimisin A</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>A8674</td><td>DİKKAT H300&nbsp; Yutulması halinde ölümcül, H400 kısa süreli (akut) su tehlikesi&nbsp;</td></tr><tr><td>Askorbat</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>A7631</td><td></td></tr><tr><td>ATP</td><td>Sigma-Aldrich, ABD&</td><td>nbsp; A 2383</td><td></td></tr><tr><td>BSA yağ asidi içermeyen</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>A 6003</td><td>sığır serum albümini</td></tr><tr><td>CaCO3</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>C 4830</td><td></td></tr><tr><td>CCCP</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>C2759</td><td>karbonil siyanür m-klorofenil hidrazon DİKKAT H301 + H311 + H331 Yutulduğunda, cilt ile temas ettiğinde veya solunduğunda toksiktir</td></tr><tr><td>Kontes Otomatik hücre sayacı&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific, ABD</td><td>AMQAX100</td><td></td></tr><tr><td>Sitokrom c</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>C7752</td><td></td></tr><tr><td>DatLab&nbsp;</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>Versiyon 7.4</td><td>Veri toplama ve analizi için yazılım</td></tr><tr><td>DatLab&nbsp;</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>Sürüm 8.1</td><td>Veri toplama ve analizi için yazılım</td></tr><tr><td>DC Protein Testi</td><td>Bio-Rad, ABD</td><td>5000112</td><td>Protein tahlil kiti; DİKKAT H314 Ciddi cilt yanıklarına ve göz hasarına neden olur</td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>D5628</td><td>DİKKAT H301 Yutulması halinde toksiktir</td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>D 0632</td><td>DİKKAT H318 Ciddi göz hasarına neden olur</td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Pan Biotech, Almanya</td><td>P04-05551</td><td>Dulbecco' s değiştirilmiş Kartal' s orta</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>D2650</td><td>dimetilsülfoksit</td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Lonza Bioscience, İsviçre</td><td>LONBE17-512F</td><td>Kalsiyum içermeyen Dulbecco' s fosfat tamponlu salin</td></tr><tr><td>EGTA</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>E 4378</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Thermo Fisher Scientific, ABD</td><td>A5256701</td><td>fetal sığır serumu</td></tr><tr><td>Glukoz</td><td>Sigma-Aldrich, ABD&</td><td>nbsp; G7528</td><td></td></tr><tr><td>Glutamat&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>G1626</td><td></td></tr><tr><td>Gliserofosfat</td><td>Santa Cruz Biyoteknoloji</td><td>sc-215789</td><td></td></tr><tr><td>Heraeus Multifuge 3s Büyük</td><td>Thermo Fisher Scientific, ABD</td><td>HM3S</td><td>santrifüj</td></tr><tr><td>Hettich Rotina 380R&nbsp;</td><td>Andreas Hettich GmbH & Co. KG, Almanya</td><td>1701</td><td>santrifüj</td></tr><tr><td>İmidazol</td><td>Honeywell Fluka, Avusturya</td><td>56750</td><td>DİKKAT H302 Yutulması halinde zararlıdır, H314 Ciddi cilt yanıklarına ve göz hasarına neden olur, H360D Doğmamış çocuğa zarar verebilir</td></tr><tr><td>jamovi&nbsp;</td><td>Jamovi projesi</td><td>Sürüm 2.3.13</td><td>yazılımı</td></tr><tr><td>K+-MES</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>M 8250</td><td></td></tr><tr><td>Leucosep tüpü ve nbsp;</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Avusturya</td><td>Z642843-300EA</td><td>polietilen bariyerli santrifüj tüpü</td></tr><tr><td>Malate&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>M1000</td><td>DİKKAT H319 Ciddi göz tahrişine neden olur.</td></tr><tr><td>Mannitol</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>M 4125</td><td></td></tr><tr><td>MgCl2&nbsp;</td><td>Scharlau, İspanya</td><td>MA 0036</td><td></td></tr><tr><td>MiR05-Kit</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>60101-01</td><td>mitokondriyal solunum ortamı</td></tr><tr><td>Mikser ve nbsp;</td><td>Swelab Instruments, İsveç</td><td>440S</td><td>sallanan masa</td></tr><tr><td>Mr. Frosty Dondurma Kabı</td><td>Thermo Fisher Scientific, ABD</td><td>5100-0001</td><td>dondurma kabı</td></tr><tr><td>Oroboros</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td></td><td>NextGen-O2k ve O2k, ' Oroboros'un</td></tr><tr><td>Oroboros Odası cV</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>23100-01</td><td>Klasik Hacim Odası</td></tr><tr><td>Oroboros Odası sV</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>33100-01</td><td>Küçük Hacimli Oda</td></tr><tr><td>Oroboros TIP2k-Modülü</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>11100-03</td><td>Titrasyon-Enjeksiyon mikro Pompası</td></tr><tr><td>O2-Zero Toz</td><td>Oroboros Instruments, Avusturya</td><td>26600-02</td><td>&nbsp; Na-ditiyonit DİKKAT H251 Kendiliğinden ısınma: alev alabilir, H302 Yutulması halinde zararlıdır, H319 Ciddi göz tahrişine neden olur</td></tr><tr><td>oktanoilkarnitin</td><td>Biotrend - APExBIO Teknolojisi, Almanya</td><td>B6371</td><td></td></tr><tr><td>Oligomisin</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>O4876</td><td></td></tr><tr><td>Fosfokreatin</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>P 7936</td><td></td></tr><tr><td>Pirüvat</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>P2256</td><td>DİKKAT H317 Alerjik cilt reaksiyonuna neden olabilir</td></tr><tr><td>Rotenone</td><td>Sigma-Aldrich, USA</td><td>R8875</td><td>DİKKAT H300 Yutulması halinde öldürücüdür</td></tr><tr><td>Cilt fibroblast hücre hatları&nbsp;</td><td>&nbsp; ATCC, ABD</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sodyum azid</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>S2002</td><td>DİKKAT H300 + H310 + H330 Yutulduğunda, cilt ile temas ettiğinde veya solunduğunda öldürücüdür</td></tr><tr><td>Subtilisin A</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>P 5380</td><td>DİKKAT H318 - Ciddi göz hasarına yol açar, H334 - Solunması halinde alerji veya astım semptomlarına veya solunum güçlüğüne neden olabilir</td></tr><tr><td>Süksinat</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>S2378</td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>S 7903</td><td></td></tr><tr><td>Swelab Alfa kan hücresi sayacı&nbsp;</td><td>Boule Diagnostics AB, İsveç</td><td>1420041</td><td></td></tr><tr><td>Taurin&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>T 0625</td><td></td></tr><tr><td>Tecan Sonsuz TM F200</td><td>Tecan, İsviçre</td><td></td><td>spektrofotometre</td></tr><tr><td>TMPD</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>T3134</td><td>N,N,N',N'-Tetrametil-p-fenilendiamin dihidroklorür DİKKAT H315 Cilt tahrişine neden olur, H319 Ciddi göz tahrişine neden olur</td></tr><tr><td>Tripsin</td><td>Sigma-Aldrich, ABD</td><td>T4799</td><td>DİKKAT H334 Solunması halinde alerji veya astım semptomlarına veya solunum güçlüğüne yol açabilir</td></tr><tr><td>Vacuette</td><td>Greiner Bio-One GmbH, Avusturya</td><td>15452520</td><td></td></tr></tbody></table>

küçük hacimli bir odada yüksek çözünürlüklü respirometri

High-Resolution Respirometry in a Small-Volume Chamber

Küçük hacimli bir odada yüksek çözünürlüklü respirometri

Investigating respiratory fluxes is decisive for understanding the complex interplay between metabolic processes. Studies of cells and tissues with ...

high-resolution-respirometry-in-a-small-volume-chamber

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Yüksek çözünürlüklü Solunum mitokondriyal oksijen tüketimini belirlemek için kullanılır. Bu mitokondriyal solunum zinciri kompleksleri '(I-IV) solunum hızları, maksimum mitokondriyal elektron transport sistem kapasitesi ve mitokondriyal dış membran bütünlüğü belirlemek için basit bir tekniktir.

Yüksek çözünürlüklü Solunum permeabilize ve bozulmamış Hücreleri Mitokondrial fonksiyonu değerlendirmek için

Burada, anestezi uygulanmış bir domuzdan kuadriseps kas örneği alınır ve mitokondri diferansiyel santrifüjleme ile izole edilir. Daha sonra, mitokondriyal solunum zinciri kompleksleri I, II ve IV'ün solunum hızları, yüksek çözünürlüklü respirometri kullanılarak belirlenir.

Yüksek çözünürlüklü Solunum Ölçümleri için Diferansiyel Santrifüj tarafından İskelet Kası Bozulmamış Mitokondri izolasyonu

Bu iletişim kuralı bozulmadan 832/13 beta yüksek çözünürlüklü basınçlırespirometri kullanarak hücreleri glikoz-aracılı değişiklikler doğal bileşikler huzurunda mitokondrial solunum etkisini ölçmek için hedeftir.

Doğal bileşikler varlığında olduğu gibi Beta hücrelerinin mitokondriyal işlev ölçmek için yüksek çözünürlüklü basınçlırespirometri

Bu iletişim kuralı calorespirometry, ısı dağılımı ve enerji metabolizmasını değerlendirmek için invaziv olmayan bir yaklaşım sağlar solunum yolu tarif etmek ve aynı anda ölçümü anlatılmaktadır. Bu teknik enerji kullanımı aerobik ve anaerobik yolları katkısı toplam hücresel enerji akışı izleyerek değerlendirmek için kullanılır.

Calorespirometry: Hücresel enerji metabolizması araştırmak için bir güçlü, invaziv olmayan bir yaklaşım

Bu protokol, bakteriyel solunum yolu hastalığının ilerlemesini invaziv olmayan bir şekilde izlemek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografi aparatının yapımını ve kullanımını sunar.

Solunum Melioidozu Sırasında Akciğer Fonksiyonunu Karakterize Etmek için Basitleştirilmiş Tüm Vücut Pletismografisi

Yüksek çözünürlüklü respirometreler kullanılarak oksidatif fosforilasyonun değerlendirilmesi, mitokondri ve hücresel enerji metabolizmasının fonksiyonel analizinin ayrılmaz bir parçası haline gelmiştir. Burada, oda ve mikroplaka tabanlı yüksek çözünürlüklü respirometreler kullanılarak hücresel enerji metabolizmasının analizi için protokoller sunuyoruz ve her cihazın temel faydalarını tartışıyoruz.

Oda ve Plaka Tabanlı Respirometreler Kullanarak Hücrelerdeki ve Dokulardaki Biyoenerjetik Değerleri Değerlendirmek için Yüksek Çözünürlüklü Respirometri

Bu protokol, mercan holobiontunun fizyolojik özelliklerini araştırmak için kullanılabilecek bir mikro-respirometri sisteminin kurulumunu ve çalıştırılmasını açıklar.

Yeni Bir Mikro-Respirometri Aracı Kullanılarak Mercan Holobiontunun Fizyolojik Karakterizasyonu

Sperm mitokondriyal fonksiyonunun yüksek çözünürlüklü respirometri ile analizi, kapalı bir oda sisteminde serbestçe hareket eden spermatozoanın oksijen tüketiminin ölçülmesine izin verir. Teknik, sperm mitokondriyal özellikleri ve bütünlüğü hakkında bilgi sağlayan insan spermatozoasında solunumu ölçmek için uygulanabilir.

İnsan Spermatozoasında Mitokondriyal Fonksiyonu Değerlendirmek için Yüksek Çözünürlüklü Respirometri

Burada, insan veya fare kasından taze geçirgen iskelet kası liflerinde mitokondriyal oksidatif fosforilasyonu ölçmek için kapsamlı bir yöntem açıklıyoruz. Bu yöntem, mevcut mitokondriyal ağları ve membran bütünlüğünü korurken mitokondriyal solunumun gerçek zamanlı olarak ölçülmesine ve yakıt tercihinin ve metabolik esnekliğin değerlendirilmesine olanak tanır.

İnsan ve Fare İskelet Kası Liflerinde Mitokondriyal Solunumun Yüksek Çözünürlüklü Respirometri ile Ölçülmesi

Bu video makalede, istikrarlı ve denetlenebilir geometrileri odorant degradelerin inşaat sağlayan yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Biz kısaca bu gradyanlar koku alma kusurları (tam ve kısmi anosmi) ekrana nasıl kullanılabileceğini göstermek ve daha ince kemotaksis davranış özelliklerini incelemek için.

Yüksek çözünürlüklü Ölçüm Drosophila Larva Koku-Driven Davranış

Öğrenin, 0,5 mL hacimli küçük oda kullanarak yüksek çözünürlüklü respirometri ile mitokondriyal fonksiyon analizini. Bu yöntem, sınırlı örnek hacimlerinde doğru oksijen tüketimi ölçümleri sağlar ve mitokondriyal hastalık teşhisi ile ilaç geliştirme çalışmalarına katkıda bulunur.

Küçük hacimli bir odada yüksek çözünürlüklü respirometri

Daha fazla video keşfet